质谱的分类,原理及使用
生物质谱技术在微生物学中的应用
生物质谱技术在微生物学中的应用随着现代科技的不断进步，生物学的发展也越来越快速。
其中，生物质谱技术是一种被广泛应用于微生物学领域的高新技术。
它通过对样品中生物大分子如蛋白质、核酸、糖等进行分子解析，提供了微生物领域研究所需的高精度、高通量、高灵敏度、高信息的获得手段，因此在微生物学领域有着广泛的应用。
一、生物质谱技术的基本原理及分类生物质谱技术指用来检测生物样品分子量和结构的一系列物理和化学技术。
生物质谱学包括大量的方法和技术，例如质谱分析、质谱成像等。
质谱分析是基于质谱仪的原理，凭借质量分析仪对分子的质量进行分析，根据分子的质量和质子化程度可以推测分子结构及代谢通路。
质谱成像技术是在分子水平上，对含有多种组分的生物样品进行成像分析。
它利用质谱仪的成像功能，对生物样品进行离子成像，实现在细胞和组织水平上的高分辨率成像。
质谱成像技术不仅可以分析有机化合物、蛋白质和氨基酸等生物分子，还可以发现新的代谢途径、功能基团、化学生物标记物等，成为微生物代谢组学和生物学研究的有力工具。
二、生物质谱技术在微生物代谢组学中的应用微生物代谢组学是在代谢水平上对微生物的全面研究，它是利用各种生物技术单元或方法对微生物的代谢物进行鉴定、分析、识别，从而构建一个完整的微生物代谢物组，进而了解并研究微生物的代谢物谱的整体特点及代谢通路。
在微生物代谢组学领域，生物质谱技术的应用众多，以下列举几种：1.蛋白质谱分析：微生物体内的蛋白质是微生物代谢中最重要的功能性产物之一。
利用生物质谱技术对蛋白质进行分析，不仅可以鉴定新的蛋白质与蛋白复合物，还可以通过拟南芥前体文件夹的生物质谱分析，确定微生物蛋白的后转录修饰。
2. 代谢物质谱分析：微生物代谢产物是微生物代谢组学的重要研究内容，用生物质谱技术对微生物代谢产物进行分析，可以得到微生物的代谢通路和代谢产物谱，精准测定代谢产物的分子式和分子量，加深对微生物代谢的了解。
3. 生物膜成分分析：尤其在酵母细胞中，可以使用生物质谱技术对生物膜结构和成分进行研究，进一步了解细胞内物质运输和信号转导的过程。
质谱基本原理
质谱基本原理质谱法是将样品离子化，变为气态离子混合物，并按质荷比（m/z）分离的分析技术;质谱仪是实现上述分离分析技术,从而测定物质的质量与含量及其结构的仪器。
质谱分析法是一种快速,有效的分析方法,利用质谱仪可进行同位素分析,化合物分析,气体成分分析以及金属和非金属固体样品的超纯痕量分析。
在有机混合物的分析研究中证明了质谱分析法比化学分析法和光学分析法具有更加卓越的优越性，其中有机化合物质谱分析在质谱学中占最大的比重,全世界几乎有3/4仪器从事有机分析, 现在的有机质谱法，不仅可以进行小分子的分析，而且可以直接分析糖，核酸，蛋白质等生物大分子，在生物化学和生物医学上的研究成为当前的热点，生物质谱学的时代已经到来，当代研究有机化合物已经离不开质谱仪。
一.仪器概述1.基本结构质谱仪由以下几部分组成供电系统┏━━━━━┳━━━━━━╋━━━━━━━┳━━━━━━┓进样系统离子源质量分析器检测接收器数据系统┗━━━━━┻━━┳━━━┻━━━━━━━┛真空系统(1)进样系统:把分析样品导入离子源的装置,包括:直接进样,GC,LC及接口,加热进样,参考物进样等。
(2)离子源:使被分析样品的原子或分子离化为带电粒子(离子)的装置,并对离子进行加速使其进入分析器，根据离子化方式的不同,有机常用的有如下几种,其中EI,FAB最常用。
EI(Electron Impact Ionization):电子轰击电离——最经典常规的方式,其他均属软电离，EI 使用面广，峰重现性好，碎片离子多。
缺点：不适合极性大、热不稳定性化合物，且可测定分子量有限，一般≤1,000。
CI(Chemical Ionization):化学电离——核心是质子转移，与EI相比，在EI法中不易产生分子离子的化合物，在CI中易形成较高丰度的[M+H]+或[M-H]+等‘准’分子离子。
得到碎片少，谱图简单，但结构信息少一些。
与EI法同样，样品需要汽化，对难挥发性的化合物不太适合。
干货——基于代谢组研究的常见质谱仪分类和使用区别
干货——基于代谢组研究的常见质谱仪分类和使用区别质谱仪是一种用于分析样品中化合物的仪器。
在代谢组研究中，质谱仪常用于分析和鉴定样品中的代谢产物，以揭示生物体内的代谢途径和调控机制。
根据工作原理和应用领域的不同，质谱仪可以分为多个类别。
本文将介绍质谱仪的几种常见分类以及它们在代谢组研究中的使用区别。
1.气相质谱仪（GC-MS）：气相质谱仪是最常见的质谱仪之一，广泛应用于代谢组研究中。
它的工作原理是将样品中的化合物通过气相色谱分离，并通过质谱仪进行鉴定和定量分析。
GC-MS在代谢组学研究中的主要优点是分离能力强，可以分析复杂样品中的低浓度化合物，特别适用于非极性和半极性化合物的分析。
然而，GC-MS对于极性化合物的分析能力较弱。
2.液相质谱仪（LC-MS）：液相质谱仪是另一种在代谢组学研究中常用的质谱仪。
与气相质谱仪相比，液相质谱仪的工作原理是将样品中的化合物通过液相色谱分离，并通过质谱仪进行鉴定和定量分析。
与GC-MS相比，LC-MS在极性和半极性化合物的分析能力更强，特别适用于多样品的高通量分析。
然而，液相质谱仪的相对分离能力较弱，无法分析非极性化合物。
3.高分辨质谱仪（HRMS）：高分辨质谱仪是一种分辨率较高的质谱仪，通常用于代谢组研究中复杂样品的定性和定量分析。
与传统的质谱仪相比，高分辨质谱仪的主要优点是可以提供较高的分辨率和质量精确性，从而可以更准确地鉴定和定量样品中的代谢产物。
然而，高分辨质谱仪通常更昂贵，并且运行和分析过程较为复杂。
4.串联质谱仪（MS/MS）：串联质谱仪是一种连接两个质谱仪的仪器，并通过多级质谱扫描进行鉴定和分析。
MS/MS在代谢组研究中的使用主要有两方面的优势。
首先，通过多级质谱扫描，可以提供更多的代谢信息，并帮助鉴定和区分样品中的化合物。
其次，MS/MS还可以用于定量分析，利用内标物对样品中的化合物进行定量。
总体而言，不同类型的质谱仪在代谢组研究中有不同的优势和适应范围。
质谱仪是怎么分类的 质谱仪工作原理
质谱仪是怎么分类的质谱仪工作原理质谱仪的分类方法很多，下面列举一些不同方法的分类：1、常用的是依照质量分析器的工作原理可分为：磁偏转（单/双）聚焦质谱、四极杆质谱、离子阱质谱（包括线性离子阱和轨道离子阱）、飞行时间质谱和傅里叶变换离子回旋共振质谱等五大类；除此之外，还有下面很多种分类方法：2、按质量分析器的工作模式可分为：静态质谱仪（磁偏转（单/双）聚焦质谱）和动态质谱仪（四极杆质谱、离子阱质谱、飞行时间质谱和傅里叶变换离子回旋共振质谱）两大类；3、按分析物质的化学成份性质可分为：无机质谱仪（元素分析）和有机质谱仪（有机分子分析及生物大分子分析）；也有人把生物质谱单独分出来；4、按离子源的电离方式可分为：电子轰击电离质谱仪、化学电离质谱仪、场/解析电离质谱仪、快原子轰击电离质谱仪、辉光/电弧/激光电离质谱仪、基质辅佑襄助激光解吸电离质谱仪、电喷雾电离质谱仪等。
5、按分析的应用领域可分为：试验室分析质谱仪、专用质谱仪、工业质谱仪、医疗质谱等；6、按辨别率高处与低处可分为：低辨别质谱仪、中辨别质谱仪和高辨别质谱仪。
7、按与其它分析仪器联用方式可分为：气相色谱—质谱联用仪（气质联用仪）、液相色谱—质谱联用仪（液质联用仪）、光谱—质谱联用仪、毛细管电泳质谱联用仪等；8、按多个质量分析器组合模式可分为：单级质谱仪和多级（串级）质谱仪；串级质谱仪又分时间串级（离子阱）质谱和空间串级质谱（三重四极杆质谱和四极杆—飞行时间质谱仪）；9、按仪器外观可分为：台式质谱仪和落地式质谱仪；小型质谱仪和大型质谱仪。
质谱仪中的离子源怎么清洗？1、降低接口温度、离子源温度、四极杆温度（以四极杆质谱仪为例），关闭质谱仪电源。
2、打开卸压阀，缓慢卸压到常压。
3、打开离子源舱门（此步骤开始可以佩带口罩以及不掉毛手套）。
4、使用专用工具依照拆卸步骤将离子源整体取出放置在的清洗台面。
5、使用专用工具将离子源各部件一一拆开，分类整齐放置在清洗台面，不需要抛光打磨的部件（如加热快、绝缘体等）分开放置。
质谱仪常见几种分类 质谱仪工作原理
质谱仪常见几种分类质谱仪工作原理质谱仪是如何构成的？典型的质谱仪，一般由样品导入系统、离子源、质量分析器和检测器构成，此外，还含有真空系统和掌控及数据处理系统等辅佑襄助设备。
1.有机质谱仪：由于应用特点不同又分为：（1）气相色谱—质谱联用仪在这类仪器中，由于质谱仪质谱仪工作原理不同，又有气相色谱—四极质谱仪、气相色谱—飞行时间质谱仪、气相色谱—离子阱质谱仪等。
（2）液相色谱—质谱联用仪同样，有液相色谱—四器极质谱仪、液相色谱—离子阱质谱仪、液相色谱—飞行时间质谱仪，以及各种各样的液相色谱—质谱—质谱联用仪。
（3）其他有机质谱仪紧要有：基质辅佑襄助激光解吸飞行时间质谱仪、傅里叶变换质谱仪。
2．无机质谱仪：包括：火花源双聚焦质谱仪、感应耦合等离子体质谱仪、二次离子质谱仪等。
3．同位素养谱仪：包括：进行轻元素（H、C、S）同位素分析的小型低辨别率同位素养谱仪和进行重元素（U、Pu、Pb）同位素分析的具有较高辨别率的大型同位素养谱仪。
4．气体分析质谱仪：紧要有：呼气质谱仪、氦质谱检漏仪等。
除以上分类外，还可以从质谱仪所用的质量分析器的不同，将质谱仪分为双聚焦质谱仪、四极杆质谱仪、飞行时间质谱仪、离子阱质谱仪、傅里叶变换质谱仪等。
离子阱质谱仪安装的一些要求离子阱质谱仪目前广泛应用于食品安全、药物开发、环境监测、生命科学讨论和分析等领域。
环境要求：1、推举试验室温度为20－27C，温度变化3C/hr，相对湿度80％2、推举液质联用仪工作台，长3米，宽0.8米，承重点于200公斤。
建议离墙距离0.3米以上。
电源要求：1、单相交流220V，（+5%～—10%），50—60Hz，有单独的良好接地。
2、若电压不稳，需配置稳压电源，功率大于5千瓦。
3、准备3个合格的万用接线板，总数不小于12个扁平三角接线插座。
4、试验室可以配备停电保护开关（空气开关）。
气体要求：1、氦气一瓶，纯度99.999%，配好减压阀，并试漏2、氮气，纯度99.9%，用气量5～15L/min。
质谱的原理和仪器构造
单聚焦质量分析器 -- 使用扇形磁场。 双聚焦质量分析器 -- 使用扇形磁场及 扇形电场。 这二种质量分析器曾经是有机质谱的主 体，现仍在继续发挥重要作用。
工作原理：在离子源中形成的各种(正)离子都被加速电压加速，而获得动能：
d. 色谱进样系统
用于 GC-MS,HPLC-MS,CE-MS
2.电离和加热室 (离子源)
被分析物质在这里被电离，形成各种离子。不 同性质的样品需用不同的电离方式。为使生成 的离子到达质量分析器，在离子源的出口施加 一个高电压即加速电压，对离子进行加速。不 同的分析器有不同的加速电压。
离子源的种类很多，主要有电子轰击电离源 （ EI）,化学电离源（ CI）,场致电离源 （ FI）,场解吸电离源（ FD）,快原子轰击源 （FAB）,激光解吸电离源（ LD）,热喷雾电离 源（ TS）,电喷雾电离源（ ESI）,大气压化 学电离源（ APCI）,基质辅助激光解析电离源 （ MALDI）等。
为提高仪器的分辨率，质量分析器除了采用一 个扇形磁场外，还加上一个扇形电场，静电分 析器(electrostatic analyser,ESR),又称静 电场，形成了双聚焦质量分析器。
静电场的作用：一束有一定能量分布的离子束，
经静电场的偏转后，离子按能量的大小顺次排
列。因此静电场可看作是一个能量分析器。静
公式3所描述的是理想情况。事实上，离子在 加速前，其动能并非绝对为零，而是在某一较 小的动能值之内有一个分别。同一质量的离子， 由于初始动能略有差别，加速后的速度也略有 差别，因此它们经静磁场偏转后不能准确地聚
焦于一点，也就是说静磁场具有能量色散作用。
(完整版)质谱原理与应用
第二部分 质谱仪器与工作原理
2.1 质谱基本原理
质谱：称量离子质量的特殊天平。
第二部分 质谱仪器与工作原理
质谱分析法就是通过测定被测样品离子的质荷比来 获得物质分子量的一种分析方法。
第二部分 质谱仪器与工作原理
质谱分析法主要是通过对样品离子质荷比的分析而实现对样品进 行定性和定量的一种方法 电离装置把样品电离为离子 质量分析装置把不同质荷比的离子分开 经检测器检测之后可以得到样品的质谱图
15eV。
• 可提供丰富的结构信息。 • 有些化合物的分子离子不出现或很弱。
第二部分 质谱仪器与工作原理
2 化学电离源(Chemical Ionization CI)
高能电子束（100~240eV）轰击离子室内的反应气（甲烷等； 10~100Pa，样品的103~105倍），产生初级离子，再与试样分 子碰撞，产生准分子离子。
第二部分 质谱仪器与工作原理
2.3.3 离子源（Ion Source）
电子电离 Electron Ionization, EI 化学离子 Chemical Ionization, CI 场电离，场解吸 Field Ionization FD, Field Desorption FD 快原子轰击 Fast Atom Bombardment, FAB 基质辅助激光解析电离 Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization, MALDI 电喷雾电离 Electrospray Ionization, ESI 大气压化学电离 Atmospheric Pressure Chemical Ionization, APCI
第一部分 质谱分析概述
质谱就是把化合物分子用一定方式裂解后生成的各种离子，按 其质量大小排列而成的图谱。
质谱 ppt课件
Electron Impact (EI) Ionization
Reflector
e-
M+.
Ions get kinetic energy
1mv2 2
zVET
V kV
Electron trap
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EI 源的特点：
电离效率高，灵敏度高； 应用最广，标准质谱图基本都是采用EI源得到的； 稳定、操作方便，电子流强度10~240 eV可精密控制； 结构简单，控温方便。
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II. 质 谱 仪
一、质谱的结构和工作原理 二、质谱联用技术 三、质谱性能指标
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一、质谱的结构和工作原理
质谱分析法主要是通过对样品的离子的质荷比的分析而 实现对样品进行定性和定量的一种方法。因此，质谱仪必须 有电离装置把样品电离为离子，有质量分析装置把不同质荷 比的离子分开，经检测器检测之后可以得到样品的质谱图， 不管是哪种类型的质谱仪，其基本组成是相同，包括离子源、 质量分析器、检测器和真空系统。
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1、离子源
离子源的作用是将欲分析样品电离，得到带有样品信息的离子。质 谱仪的离子源种类很多，主要有：
A. 电子轰击电离源(Electron Impact, EI) B. 化学电离源(Chemical Ionization, CI) C. 快原子轰击源(Fast Atomic bombardment, FAB) D. 场电离源(Field ionization Sources, FI) E. 电喷雾源(Electron spray Ionization, ESI) F. 大气压化学电离源(Atmospheric pressure chemical Ionization, APCI) G. 基 质 辅 助 激 光 解 吸 电 离 源 (Matrix Assisted Laser Description Ionization, MALDI)
质谱仪的分类
质谱仪的分类
质谱仪的分类
1、有机质谱仪
有机质谱仪基本工作原理：以电子轰击或其他的方式使被测物质离子化，形成各种质荷比（m/e）的离子，然后利用电磁学原理使离子按不同的质荷比分离并测量各种离子的强度，从而确定被测物质的分子量和结构。
有机质谱仪主要用于有机化合物的结构鉴定，它能提供化合物的分子量、元素组成以及官能团等结构信息。
分为四极杆质谱仪、离子阱质谱仪、飞行时间质谱仪和磁质谱仪等。
2、无机质谱仪
无机质谱仪与有机质谱仪工作原理不同的是物质离子化的方式不一样，无机质谱仪是以电感耦合高频放电（ICP）或其他的方式使被测物质离子化。
质谱的分类
质谱的分类质谱是一种仪器分析技术，广泛应用于化学、生物、环境科学等领域。
根据不同的质谱仪原理和应用范围，质谱可以分为多种类型。
本文将对质谱的分类进行详细介绍。
一、按质谱仪原理分类1. 电离质谱电离质谱是质谱技术的基础，它将样品中的分子或原子气化，并将其电离成为带正或负电的离子，通过加速器和质量分析器分离和检测离子的种类和数量。
电离质谱的种类非常多，包括电子轰击电离质谱、化学电离质谱、MALDI-TOF质谱等。
2. 高能量离子撞击质谱高能量离子撞击质谱是将高能离子束照射到样品表面或统一粒子中，用来分析样品化合物的组成和结构。
该技术主要包括静电喷射（ESI）、电喷雾（API）和多重离子分解（MS/MS）。
3. 磁共振质谱磁共振质谱是一种基于核磁共振原理进行分析的质谱仪。
该技术主要应用于原子核、电子自旋共振谱、亚硫酸盐及氧化物等化合物的结构分析。
4. 时间飞行质谱时间飞行质谱是一种利用质谱仪对带电粒子进行测量的技术。
它将离子束激发成带电状态后通过匀强电场进行加速，然后通过不同速度的运动到达检测器，利用不同时间上的到达时间来进行质量分析。
5. 快速原子轰击质谱快速原子轰击质谱（FAB）是一种将阴离子和低能质子轰击到样品表面来进行质量分析的技术。
它主要应用于有机化合物、天然产物等的分析，具有灵敏度高、分析时间短等优点。
6. 等离子体质谱等离子体质谱（ICP-MS）是一种利用带电离子束进行分析的质谱技术。
该技术主要应用于分析地质、环境、食品等样品中的微量量级元素。
二、按应用范围分类1. 生物质谱生物质谱是指质谱技术在生物化学和生物医学领域中的应用。
它主要应用于蛋白质、糖类、核酸等生物分子的分析和结构确定。
2. 化学质谱化学质谱是指在化学研究和分析中使用的质谱技术。
它主要应用于有机化合物、天然产物等的结构鉴定和分析。
3. 环境质谱环境质谱是指质谱技术在环境科学中的应用。
它主要应用于大气、水体、土壤等环境样品中污染物的分析和检测。
质谱分析技术在分子生物学中的应用
质谱分析技术在分子生物学中的应用质谱分析技术是现代生物学领域中的重要工具之一。
它可以对生物大分子进行快速、准确、敏感的定量和定性分析，同时可以研究生物大分子的结构与功能。
在分子生物学和生物医学研究领域，质谱分析技术可以为科学家提供许多重要的信息和数据，帮助研究人员洞察更深层次的生物学机制。
本文将着重探讨质谱分析技术在分子生物学中的应用。
质谱分析技术的基本原理和分类质谱分析技术的基本原理是将物质进行分子离子化或碎片化后，利用加速器产生的电场或磁场来分离带电离子根据质荷比大小分别进行分析。
从而得到样品分子的质量信息和相应的结构或化学信息。
根据质谱分析的原理和方法，质谱分析技术可以分为四种类型，包括质谱仪、离子流动技术、毛细管电泳质谱技术和液质联用技术。
质谱仪是一种离子型质谱仪，常用于分子质谱学的分析。
它通过将样品分子离子化为分子离子、分子离子碎片，再根据其质荷比进行分析的方式，使质谱仪可以定量分析物质的组成和结构。
离子流动技术是一种离子迁移技术，它通过对离子在电场中的运动速度进行测量，实现对分子结构的精细分析。
毛细管电泳质谱技术则是将毛细管电泳与质谱技术相结合的一种新兴分析方法。
它能够为分析样品中各组分的质量和结构信息，提供高分辨率、高灵敏度以及对高分子物质的分析等优点。
而液质联用技术则是将液相色谱技术或气相色谱技术与质谱分析技术结合起来，以获得更多的化学和结构信息。
质谱分析技术在蛋白质组学中的应用近年来，随着分子生物学研究的发展，蛋白质组学成为了生物医学领域的一个新兴研究方向。
质谱分析技术作为一种高通量、准确、灵敏、高分辨力、高速度的分析手段，已被广泛应用于蛋白质组学领域的研究中。
它可以通过蛋白质组分析和蛋白质鉴定来探究生命中重要的蛋白质信息，以期挖掘出与其相关的生物学机制和生理功能。
质谱分析技术在蛋白质组分析中的应用范围很广，它可以对样品中的蛋白质进行定量、定性、定位或定结构的分析。
其中，质谱分析技术在蛋白质定量中的应用最为广泛，它能够在高通量的情况下，快速、准确地测定多种不同的蛋白质分子，了解其在不同生理状态下的数量变化。
【全文】质谱法-质谱仪的工作原理
分辨本领由下列因素决定：
➢离子通道半径r；
质 谱
➢加速器和收集器狭缝宽度； ➢离子源的性质。
法
分辨本领几乎决定了仪器的价格。分辨率
在500左右的质谱仪可以满足一般有机分析的要 求，价格相对较低。分辨率大于10000的高分辨 率仪器，其价格也在4倍以上。
三. 质谱仪的基本结构
质谱分析包括以下几个步骤：
量信息。
因此，可据分子电离所需能量不同可选择不同电离源。
电子轰击源(Electron Bomb Ionization，EI)
采用高速(高能)电子束冲击样品，从 而产生电子和分子离子M+，M+继续受到 电子轰击而引起化学键的断裂或分子重
质排，瞬间产生多种离子。 谱法水能垂电直平子方方—向向冲：：击G灯3样丝-G品与4加—阳正速极离电间子极(7(0低V电电压压))—---较高
样品分子在承受电子轰击前，被一种反应气(通常是甲烷)稀
释，稀释比例约为103:1，因此样品分子与电子的碰撞几率极小
质，所生成的样品分子离子主要由反应气分子组成。
谱
CH4
e
CH
4
•
2e
CH4
CH
5
CH 3
•
法
C
•
CH4
C
2
H
5
H2
进小部入分电与离C源2H的5+分反子应R，-C生H成3大(M部-1分)+与离C子H：5+碰撞产生(M+1)+离子；
质解用于吸分源子：量固高态达或1液05态的样非品挥不发需性要或挥热发不而稳直定接性被样转品化。为包气括相场，解吸适 谱源、快原子轰击源、激光解吸源、离子喷雾源和热喷雾离子源 法等。
质谱技术的分类及应用
质谱技术的分类及应用质谱技术是细菌分类与鉴定的传统手段之一。
是目前正在兴起的技术，尤其在厌氧菌、分枝杆菌、奴卡菌和部分真菌的鉴定中有重要作用。
质谱法的原理、应用仪器及基本技术。
见本书第十八章。
一、质谱技术在微生物分类和鉴定中的应用（一）气相色谱技术气相色谱技术通过分析细菌的代谢产物，如挥发性酸和醇来鉴别细菌。
尤其细菌代谢产生的长链脂肪酸的不同是细菌分类的依据之一。
其技术关键如下：1.用标准化的方法和指定的培养基来培养被鉴定菌，这与细菌的代谢产物关系重大。
2.代谢产物的提取与分离技术的标准化。
如检测脂肪酸应先用氢氧化钠皂化，使之释放至水溶液中，经甲醇甲基化，使成为挥发性的脂肪酸甲酯，再用有机溶媒提取，经氢氧化钠洗净，才能检测。
检测非挥发性脂肪酸应先行甲酯化，再用氯仿提取。
3.测定时应制备一系列的标准液，由此取得测定数据。
4.细菌的鉴定需借助于计算机分析检测数据并与已知菌的脂肪酸数据相比较。
鉴定结果的可靠性决定于数据库的丰富程度。
5.鉴定菌与模式菌的数据相同才可确定菌种。
（二）液相色谱技术细菌的代谢产物中的脂肪酸碳链过长（超过30个碳）则不能用气相色谱技术，而应用液相色谱技术。
对鉴定分枝杆菌、奴卡菌等特别有用。
现以分枝杆菌为例提出其技术关键为，取菌体用氢氧化钠皂化，用盐酸酸化后与对-溴苯酰（pbromophenylacyl）反应，进样色谱柱。
色谱柱用C18作固定相，乙腈-氯仿为流动相进行检测。
仪器分析的数据经计算机处理，绘出图谱，与已知菌的数据和图谱比较而得出鉴定结果。
二、新型质谱技术的应用（一）SELDI-TOF-MS和电喷雾炙谱（ESI-MS）SELDI-TOF-MS是蛋白质组学分析的重要手段，分析微生物的氨基酸、肽和蛋白的组成可进行微生物的鉴定和分型。
（二）变性高压液相质谱（dHPLC）其特点是一种高通量筛查DNA序列的技术。
PCR扩增产物在变性和复性过程中因序列的差异形成同源双链和异源双链。
(完整版)质谱法的原理和应用
质谱法的原理和应用原理待测化合物分子吸收能量（在离子源的电离室中）后产生电离，生成分子离子，分子离子由于具有较高的能量，会进一步按化合物自身特有的碎裂规律分裂，生成一系列确定组成的碎片离子，将所有不同质量的离子和各离子的多少按质荷比记录下来，就得到一张质谱图。
由于在相同实验条件下每种化合物都有其确定的质谱图，因此将所得谱图与已知谱图对照，就可确定待测化合物用电场和磁场将运动的离子（带电荷的原子、分子或分子碎片）按它们的质荷比分离后进行检测的方法。
测出了离子的准确质量，就可以确定离子的化合物组成。
这是由于核素的准确质量是一多位小数，决不会有两个核素的质量是一样的，而且决不会有一种核素的质量恰好是另一核素质量的整数倍。
应用质谱中出现的离子有分子离子、同位素离子、碎片离子、重排离子、多电荷离子、亚稳离子、负离子和离子－分子相互作用产生的离子。
综合分析这些离子，可以获得化合物的分子量、化学结构、裂解规律和由单分子分解形成的某些离子间存在的某种相互关系等信息。
质谱法特别是它与色谱仪及计算机联用的方法，已广泛应用在有机化学、生化、药物代谢、临床、毒物学、农药测定、环境保护、石油化学、地球化学、食品化学、植物化学、宇宙化学和国防化学等领域。
近年的仪器都具有单离子和多离子检测的功能，提高了灵敏度及专一性，灵敏度可提高到10（克水平。
用质谱计作多离子检测，可用于定性分析，例如，在药理生物学研究中能以药物及其代谢产物在气相色谱图上的保留时间和相应质量碎片图为基础，确定药物和代谢产物的存在；也可用于定量分析，用被检化合物的稳定性同位素异构物作为内标，以取得更准确的结果。
在无机化学和核化学方面，许多挥发性低的物质可采用高频火花源由质谱法测定。
该电离方式需要一根纯样品电极。
如果待测样品呈粉末状，可和镍粉混合压成电极。
此法对合金、矿物、原子能和半导体等工艺中高纯物质的分析尤其有价值，有可能检测出含量为亿分之一的杂质。
利用存在寿命较长的放射性同位素的衰变来确定物体存在的时间, 在考古学和地理学上极有意义。
质谱法及其联用技术
CH5 + + M
CH4 + MH+
特点：
❖属于软电离，得到一系列准分子离子（M+1） +， （M-1）+， （M+2）+等等； ❖CI源的的碎片离子峰少，图谱简单，易于解释； ❖不适于难挥发成分的分析。
（3）电喷雾源(electronspray ionization ESI)
结构：喷嘴，雾化气，干燥气 原理：喷雾 蒸发 电压
– 准分子离子峰
• 碎片离子峰
– 重排离子峰 – 亚稳离子峰
分子离子峰
• M ＋e→ M+＋2e • M+称为分子离子或母离子(parrent ion）
，相应的质谱峰称为分子离子峰。 • 准分子离子峰
– [M+H]+,[M-1等等]
同位素离子峰
• 由于同位素的存在，可以看到比分子离子
峰大一个质量单位的峰；有时还可以观察
1、 真空系统 离子源的真空度应达到10-3-10-5 Pa， 质量分析器应达到10-6 Pa。 真空装置： 机械真空泵 扩散泵 分子涡轮泵
2、样品引入系统 气体——直接导入或用气相色谱进样 液体——加热汽化或雾化进样 固体——用直接进样探头
直接探针进样
▪对于蒸汽压低的样品进行衍生化后进样
例如：葡萄糖变成三甲基硅醚的衍生物
3、 离子源(ion source)
电子电离源(electron ionization EI) 化学电离源(chemical ionization CI) 快原子轰击(fast atom bombardment FAB) 电喷雾源(electronspray ionization ESI) 大气压化学电离（atmospheric pressure chemical ionization APCI) 基质辅助激光解吸电离（matrix assisted laser Desorption ionization MALDI)
质谱仪知识点归纳总结
质谱仪知识点归纳总结质谱仪是一种用来分析化学物质成分和结构的仪器，通过将样品中的分子转化为离子，并测量这些离子的质量和丰度来实现分析。
质谱仪在化学、生物、环境、医学等领域都有着重要的应用，可以用来识别未知物质、测定物质组成、研究化学反应机制等。
1. 质谱仪的工作原理质谱仪的工作原理主要包括样品的离子化、离子的分离、离子的检测和分析。
首先，样品被转化为离子，可以通过电离源、化学反应或激光蒸发等方法实现。
然后，离子被加速并注入到质谱仪的分析系统中，经过电场或磁场的作用，不同质荷比的离子会受到不同的受力，达到分离的目的。
最后，分离后的离子被检测器检测，得到质谱图像，进而进行分析和识别。
2. 质谱仪的分类根据不同的工作原理和应用，质谱仪可以分为多种类型，包括质子传递质谱仪（PTMS）、质子化学计量质谱仪（PCIMS）、液质谱仪（LC-MS）、气质谱仪（GC-MS）等。
每种类型的质谱仪都有其独特的特点和应用领域，可以根据需要选择合适的仪器。
3. 质谱仪的主要部件和性能指标质谱仪的主要部件包括电离源、质谱分析器、检测器等。
其中，电离源用于将样品转化为离子，质谱分析器用于分离离子，检测器用于检测离子。
质谱仪的性能指标包括分辨率、灵敏度、质谱范围、质量准确度等，这些指标直接影响到质谱仪的分析能力和应用范围。
4. 质谱仪的应用质谱仪在化学、生物、环境、医学等领域都有着重要的应用。
例如，可以用来识别未知物质、测定物质组成、研究化学反应机制、监测环境污染物等。
在医学领域，质谱仪可以用来诊断疾病、分析药物代谢、研究生物标志物等。
5. 质谱仪的发展趋势随着科学技术的不断发展，质谱仪也在不断创新和改进。
未来，质谱仪的发展趋势主要包括提高分辨率和质量准确度、扩大质谱范围、提高灵敏度、简化操作和减小体积等。
同时，新的技术和方法的引入也将推动质谱仪的发展，如生物质谱学、电喷雾质谱、串联质谱等。
总的来说，质谱仪作为一种重要的分析仪器，在化学、生物、环境、医学等领域都有着广泛的应用。
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第一包：液相色谱-质谱-质谱联用仪
技术指标明细：
1. 仪器应用范围及要求
1.1. 应用范围：用于农残、食品等小分子定量分析等。
1.2. 仪器要求：超高压二元液相-三重四级杆串接质谱联用仪。
1.2.1. 为保证仪器性能和仪器兼容性，最好要求超高压二元液相色谱仪和三重四
级杆串接质谱仪的生产厂商为同一生产厂商。
*1.2.2. 为保证仪器质量和品牌可信度，要求生产厂商所提供的同型号的超高压二元液相-三重四级杆串接质谱联用仪在中国有较大的用户群。
2. 工作条件
2.1. 电力要求：220-240V，单相
2.2. 工作温度：15-30 o C
2.3. 相对湿度：<80%
3. 液相色谱-质谱-质谱联用仪指标
3.1. 液相色谱仪部分
3.1.1. 超高压二元泵指标
*3.1.1.1. 超高压二元泵系统。
3.1.1.2. 流速精密度：<0.07%RSD
3.1.1.3. 流速范围：0.001-2.0 mL/min, 0.001ml/min步进
*3.1.1.4. 操作压力：不低于600 Bar
3.1.2. 在线真空脱气机
3.1.2.1. 四通路以上在线真空膜过滤技术
3.1.3. 自动进样器指标
3.1.3.1. 进样范围：0.1-40 μL增量为0.1 μL。
3.1.3.2. 进样精度：< 0.3% RSD
3.1.3.3. 样品容量：可放置多孔板和2-mL样品瓶
*3.1.3.4. 样品残留：<0.005%（DAD检测）
3.1.
4. 柱温箱
*3.1.4.1. 控温范围：室温下10-70℃
3.1.5. 二极管阵列检测器（DAD）
3.1.5.1. 光源：氘灯和钨灯
3.1.5.2. 二极管个数：512或1024
*3.1.5.3. 最快采样速率：80HZ
3.1.5.
4. 波长精度：1 nm
*3.1.5.5. 基线噪音：±1⨯10-5 at 600±20 nm（1 mL/min甲醇）
3.1.5.6. 基线漂移：1⨯10-3 AU/h at 254nm （1 mL/min甲醇）
3.2. 质谱仪部分
3.2.1. 质量数范围(m/z)：30-1500 m/z
3.2.2. 分辨率: 单位质量分辨率≤0.7。
*3.2.3. 灵敏度: 分辨率≤0.7时，ESI正离子：1 pg 利血平（Reserpine），考察m/z 609>195, S/N>300:1（峰峰比）。
*3.2.4. 扫描速度: >3000 amu/sec
3.2.5. 定量分析功能，动态范围：> 2×106
3.2.6. 离子源和进样方式
3.2.6.1. 离子源接口适用于100%有机相到100%水相，耐用一定浓度的缓冲液。
3.2.6.2. ESI与APCI独立源，离子源切换方便、快速，无需放空质谱真空系统，清洗、维护方便。
*3.2.7. 检测器: 电子倍增器设计。
3.2.8. 工作站软件，5年内免费升级。
3.2.9. 单点控制所有的液相部分和质谱部分。
可以实现数据采集，数据分析，液
相和质谱同步控制，在线监测，反馈显示和序列采集。
3.3．售后服务：
3.3.1. 中标厂商应具有正规注册的办事处、维修站及零备件保税库。
在中国境内
应有专门负责的经验丰富的维修工程师和在中国境内应有专门的技术应用支持工程师（必要时应列出所有工程师的名单及联系电话供招标方核实），在国内设有应用开发实验室。
保修期后，厂商应保证长期供应零备件和正常的售后服务；仪器制造商在国内的技术服务中心（包括维修中心）或消耗品代理商应当提供所有的服务,包括备用零配件及消耗品。
3.3.2. 安装验收期间，在用户所在地对用户进行仪器的基本操作和日常维护的现
场培训，内容包括仪器原理，使用方法和维护方法等。
3.3.3. 维修响应时间：供货方应在24小时内对用户的要求作出响应，并确定负
责维修的工程师名单及服务时间，一般问题应在48小时内解决。
3.3.
4. 仪器在安装、调试通过后必须有不少于3年的免费保修期，并保证终身保
修。
3.3.5. 最好能提供达到常用的农残液质国标要求的检测方法。
3.3.6．免费国内培训3人。