分析方法验证(国家食品药品监督管理局·高级研修班)
4.4分析方法的验证
药品质量标准分析方法验证
目的
证明采用的方法适用于相应检测要求
在建立药品质量标准时，分析方法需经验证后 方能最终确定；
在药品生产工艺变更、制剂的组分改变、原分 析方法进行修订时，质量标准分析方法也需进 行验证，验证过程也称为方法再验证，再验证 的内容可以全面验证或部分验证。
目视法：非仪器分析的方法采用目视法确定检测限。 即用已知浓度的被测物，试验出可能被检出的最低 浓度或最低量。
信噪比法：对能显示基线噪音的仪器分析方法，可 将已知低浓度的被测组分溶液与空白样品的测定结 果进行比较，按信噪比（S/N）确定可被检出的最 低浓度。一般信噪比为3：1（S/N=3）或2：1时 相应的浓度或注入仪器的量确定检测限；
常采用强制破坏试验， 考察药物与降解产物的分离度； 如方法不够专属， 应采用多个方法予以补充。
强制破坏试验
检测限（LOD）
是指试样中被测物能被检测出的最低浓度或量。 LOD是一种限度检查效能指标，它反应方法是
否具有灵敏的检测能力，即是否具备足够的灵 敏度。它无需准确定量。
检测限（LOD）的方法
线性
两个参数是否有线性关系需要通过试验来确定。 考察的方法是配制一系列不同浓度的测定组分溶 液（至少5份），分别测定其响应值，用最小二乘 法以响应值对浓度进行线性回归，即可计算出相 关系数r和a、b的值。相关系数r接近于1，说明线 性关系好。
线性
8.E+0 6
6.E+0 6
4.E+0 6
2.E+0 6
在建立分析方法时，应对以上条件进行试验，以 考察方法的耐用性；
方法验证示例——HPLC法检查阿 司匹林游离水杨酸
药品质量分析方法验证
5
制剂可用含已知量被测物质的各组分 混合物进行测定。如不能得到制剂的全部 组分，可向制剂中加入已知量的被测物质 进行测定，或与另一个已建立准确度的方 法比较结果。
6
杂质的定量分析可向原料药或制剂中 加入 已知量杂质，进行测定。 如果不能得到杂质，可用本法测定结果与另 一成熟的方法进行比较，如药典标准方法或 经过验证的方法。 如不能得到杂质的相对响应因子，则可比较 杂质的响应和原料药的响应以计算杂质的含量。
21
㈤ 定量限
1 定义
定量限(LOQ或QL)：是指样品中被 测物质能被定量测定的最低浓度或 量，且在所述的实验条件下测定的结 果具可接受的准确度和精密度。
杂质和降解产物的定量测定方法研究时，应确定定量限。
22
2 测定
(1)非仪器分析法：定量限通常是用含已知浓度被测物质的
样品进行分析，确定可以测定的被测物质的最低浓度，且 测定结果具可接受的准确度和精密度。
3
方法验证是一个持续的发展过程，在药物生产方法 变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订或药典规 定的常规方法用于新药，则质量标准分析方法需要再验 证。再验证应证明分析方法能保持其性能(如专属性)适 用于相应的检测要求。如采用的分析方法，为了满足系 统适应性的要求，需要调整其操作条件，则分析方法需 进行适当的再评价、修正和再验证。再验证的程度，取 决于变更的性质。
31
(1) 提供有关光谱、色谱图和其他适当的仪器记录。 简述对照晶制备和纯化方法。 (2) 提供有关光谱、色谱图和其他适当的仪器记录。 (3) 确定纯度的数据应用适当的方法，如TLC、GC、 HPLC，溶解度试验，热分析方法等获得这些数据。
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(4) 适当的化学信息，如结构式、分子式、分子量。 证明结构的信息应包括适当的方法，如元素分析、 IR、UV、NMR、MS和可采用的功能团分析。 详细解析这些数据以证明所述结构。 (5) 物理性状，包括色泽、物态。 (6) 适当的物理常数，如熔点范围、沸点范围、 折射率、离解常数(pK值)和比旋度。 (7) 详细说明用于标定对照品的分析方法。
分析方法验证法规要求详细分析分析方法
分析方法验证法规要求详细分析分析方法分析方法验证是确定一个分析方法是否满足特定需求的过程。
在化学、药品、食品、环境等领域中，分析方法验证的重要性不言而喻，因为准确和可靠的分析结果直接影响着产品质量和人们的生活安全。
为了确保验证结果的可靠性，法规和标准文件规定了分析方法验证的要求和程序。
本文将详细分析分析方法验证的法规要求。
一、法规和标准文件对分析方法验证的要求1. 药典要求药典是制药行业中最重要的规范性文献之一，药典中对分析方法验证的要求十分详细。
例如，美国药典USP将分析方法验证分为准确性、精密度、线性范围、检测限和定量限、精确度、特异性和系统性等方面进行验证，并对每个方面的验证步骤、接受标准等进行了详细阐述。
2. ISO/IEC标准ISO/IEC标准是国际上通用的质量管理体系标准，对分析方法验证也有相关要求。
例如，ISO/IEC 17025标准明确规定了分析方法验证的程序，包括验证步骤、标准品的选择、数据的处理等要求。
3. 食品安全标准食品安全是社会关注的焦点，食品安全标准对分析方法验证有一系列的要求。
例如，中国食品安全国家标准GB/T 5009.85-2003《食品中多氯联苯残留量的测定食品中多氯联苯残留量的测定》中规定了验证步骤、实验条件、合格标准等。
二、分析方法验证的程序分析方法验证的具体程序是根据实际情况和相关法规要求来确定的，但一般包括以下步骤：1. 确定验证目标首先需要明确验证目标，即验证方法的准确性、重复性、检测限等方面是否符合要求，同时要明确验证的产品和测试要求。
2. 实施验证试验根据验证目标，选择合适的样品、标准品和仪器设备，进行相应的试验。
试验过程中，要记录实验条件、操作步骤、结果数据等重要信息。
3. 数据处理和分析根据试验结果，进行数据处理和统计分析，以评估方法的准确性、重复性、特异性等性能指标。
常用的数据处理方法包括方差分析、回归分析等。
4. 结果评估和确认根据分析结果，评估方法是否符合要求。
药品分析方法验证
药品分析方法验证药品分析方法验证是确保药品分析方法的准确性、可靠性和合法性的一系列过程。
药品分析方法验证的目的是验证分析方法的适用性，并检查分析方法是否满足要求，以确保药品的质量和安全性。
药品分析方法验证的步骤通常包括下列几个方面：1. 目标和要求的确定：首先确定需要验证的分析方法的目标和要求，明确验证的目的是什么，要验证的参数是什么，例如准确度、精密度、线性范围、灵敏度等。
2. 文献调研：对已有的相关文献资料进行搜集和分析，了解和评估方法的基本原理、应用范围和验证方法，这有助于确定验证的方法和参考样品的选择。
3. 方法的选择：根据目标和要求，选择合适的验证方法。
验证方法可以根据药品特性和已有文献中的建议进行选择，例如高效液相色谱法、气相色谱法、紫外分光光度法等。
要注意方法的可操作性和可重复性。
4. 方法开发和优化：基于文献调研结果和实际的分析需求，对选择的方法进行开发和优化。
包括试剂的选择、仪器参数的优化、样品前处理方法的选择等。
5. 样品的准备和处理：根据方法要求，对参考样品进行准备和处理。
样品来源应该是可靠的，并按照一定的规范进行标识、保存和分装，以免造成样品的损坏或交叉污染。
6. 精密度和重复性的评价：通过重复测定参考样品，评价方法的精密度和重复性。
通常采用平行实验、中间实验、再现性实验等方法，计算相对标准偏差（RSD）来评价精密度。
7. 准确度的评价：通过与参考方法进行比较，评价方法的准确度。
可以利用外部标准品进行对照测试，计算准确度限界（recovery）来评价方法的准确度。
8. 线性范围和灵敏度的评价：通过测试不同浓度的标准品，评价方法的线性范围和灵敏度。
根据测试结果计算相关系数、回归方程等指标来评价方法的线性范围和灵敏度。
9. 选择合适的仪器和设备：根据分析方法的验证结果，选择适合的仪器和设备。
仪器和设备应符合标准规范，并经过校准和验证。
10. 编写验证报告：根据验证结果编写验证报告。
药品分析方法的验证和确认标准操作规程
目的：方法验证的目的是证明采用的方法适合相应检测要求；方法确认目的是为确认方法在本实验室条件下的适用性。
应用范围：适用于本公司产品的检验方法。
编订依据：《中国药典》2010年版二部附录194页。
内容：1 分析方法的验证及确认的适用范围及发起时机2 方法验证方法验证就是根据检验项目的要求，预先设置一定的验证内容和验证标准要求，并通过设计合理的实验来验证所采用的分析方法是否答合检验项目的要求。
建立质量标准时，应对分析方法中的各检验项目进行完整的验证；在药品生产工艺变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，可根据变更的内容决定对分析方法进行部分验证还是完整的验证；当原料药合成工艺发生变更时，可能引入新的杂质，杂质检查方法和含量测定方法的专属性就需要进行验证，以证明有关物质检查方法能够检测新引入的杂质，且新引入的杂质对主成分的含量测定应无干扰；当质量标准中某一项目分析方法发生部分改变时，如采用高效液相色谱法测定含量时，检测波长发生改变，则需要重新进行检测限、定量限、专属性、准确度、精密度、线内容的验证，证明修订后的分析方法的合理可靠；当变更达到一定程度时，则需要完整的验证。
如分析方法完全改奕，则应按新方法进行完整的验证。
2.1 方法验证的一般原则通常情况下，分析方法需进行方法验证。
对于仅需按照实验室日常测试操作步骤即可测定的检验项目不需要进行验证，如外观、崩解时限、密度、重量、pH值、灰分、装量等。
方法验证的内容应根据检验项目的要求，结合所采用分析方法的特点确定。
同一分析方法用于不同的检验项目会有不同的验证要求。
2.2 需要验证的检验项目检验项目是为控制药品的质量，保证药品安全有效而设定的测试项目。
根据检验项目的设定目的和验证内容的不同要求，一般需验证的检验项目分为四类：鉴别、杂质的限度检查、杂质的定量测定、含量测定包括原料药或制中有效成分的含量，制中其他成分的含量，溶出度与释放度等检查中的溶出量，以及含量均匀度。
药品质量标准分析方法验证课件
制定详细的实验操作规程和注意事项，确保实验过程规范、 准确、可靠。
实验环境的控制与安全防护
环境控制
确保实验室的环境条件符合分析方法 的要求，如温度、湿度、清洁度等， 并对其进行监测和记录。
安全防护
根据实验过程中可能产生的危险因素 ，制定相应的安全防护措施，包括个 人防护用品的配备、废弃物的处理等 方面的内容。
数据处理与分析
数据分析
对分析结果进行解释和讨论，以评估方法的可靠性和准 确性。
使用适当的统计方法对数据进行处理和分析，如回归分 析、方差分析、主成分分析等。
根据分析结果提出改进措施和建议，以提高方法的性能 和可靠性。
实验结果的评价与判定
实验结果评价 根据预先设定的标准或参考值，对实验结果进行评价和比较。
验证的目的和意义
确保分析方法的准确性和可靠性
01
通过验证，可以确定分析方法是否准确可靠，能否用于药品的
质量控制。
符合法规要求
02
药品质量标准分析方法验证是法规要求的一部分，通过验证可
以证明分析方法符合相关法规要求。
提高药品质量控制水平
03
通过验证，可以不断完善和优化分析方法，提高药品质量控制
水平。
药品质量标准分析方法 验证课件
CONTENTS
目录
• 药品质量标准分析方法验证概述 • 药品质量标准分析方法验证的准备工作 • 药品质量标准分析方法验证的具体实施 • 药品质量标准分析方法验证的常见问题与解
决方案 • 药品质量标准分析方法验证的案例分析
CHAPTER
01
药品质量标准分析方法验证概 述
案例二：气相色谱法验证案例
总结词
气相色谱法适用于易挥发、热稳定性好的物质的分析，具有高分离效能、高灵敏度、高 选择性等优点。
分析方法验证ppt课件
分析方法验证方案及可接受标准
准确度 方案（以化药制剂为例） 在规定范围内，取同一浓度（相当于100%浓度水平）的供试品 ，用至少6份样品的结果进行评价；或设计3种不同浓度（通常是80% 、100%和120%），对于要测定含量均匀度的项目，浓度通常是70%、 100%和130%），每种浓度分别制备3份供试品溶液进行测定，用9份 样品的测定结果进行评价。
病原体侵入机体，消弱机体防御机能 ，破坏 机体内 环境的 相对稳 定性， 且在一 定部位 生长繁 殖，引 起不同 程度的 病理生 理过程
2015年版药典四部指导原则相关要求
准确度 准确度系指采用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程 度，一般用回收率（%）表示。准确度应在规定的范围测定。 原料药采用对照品进行测定，或用本方法所得结果与已知准确 度的另一种方法测定的结果进行比较。制剂可在处方量空白辅料中 ，加入已知量被测物对照品进行测定。如不能得到制剂辅料的全部 组分，可向待测制剂中加入已知量被测物对照品进行测定。
precision is not needed （ 2 ） lack of specificity of one analytical procedure could be
compensated by other supporting analitical procedure(s) （3） may be needed in some cases
病原体侵入机体，消弱机体防御机能 ，破坏 机体内 环境的 相对稳 定性， 且在一 定部位 生长繁 殖，引 起不同 程度的 病理生 理过程
ICH指导原则相关要求 中国药典2015年版四部通则相关要求 分析方法验证方案及可接受标准
病原体侵入机体，消弱机体防御机能 ，破坏 机体内 环境的 相对稳 定性， 且在一 定部位 生长繁 殖，引 起不同 程度的 病理生 理过程
cfda指导原则 方法验证
cfda指导原则方法验证
CFDA指导原则是指中国食品药品监督管理局（China Food
and Drug Administration）发布的指导原则。
这些指导原则是
为了确保食品和药品的安全性、有效性和质量，以保护公众的健康。
方法验证是其中的一个重要内容。
方法验证是指验证分析方法的准确性、可靠性和适用性。
在食品和药品行业，分析方法的准确性和可靠性对于保证产品质量至关重要。
方法验证的目的是确认分析方法是否能够正确、可靠地分析样品，以及其适用范围和限制。
方法验证通常包括以下步骤：
1. 确定验证目标和要求：明确验证的目标和要求，例如准确性、精密度、线性范围、灵敏度等。
2. 确定验证方案：制定验证方案，包括验证样品的选择、实验方案、验证参数和限制等。
3. 进行实验：按照验证方案，进行实验操作，并记录实验数据。
4. 分析数据和评估结果：对实验数据进行分析，评估分析方法的准确性、可靠性和适用性。
5. 编写验证报告：根据实验结果，编写验证报告，描述验证过程、结果和结论。
通过方法验证，可以证明分析方法的准确性和可靠性，并确认它适用于特定的样品和研究对象。
这有助于保证食品和药品的质量和安全性，并为相关行业的监管和管理提供依据。
分析方法验证
分析方法验证一.方法验证概述1方法验证概念解析2各方指导原则3方法验证的常见困难4风险管理在分析方法中的应用5限度与定量验证的区别与适用情况6方法验证的前期准备7方法验证的方案和报告首先申明是方法验证:ICHQ2,分析方法的验证是为了证明该方法与预期的目的相一致。
中国药典，药品质量标准分析方法验证的目的是证明采用的方法适合于相应的检测要求。
USP1225,通过实验室研究确认方法的性能参数可以满足预期的检测要求。
什么是检测要求：结实（耐用性好）、准确、稳定是否需要验证？需要经过验证的：含量测定、有关物质、残留溶剂、基因毒杂质、其他特定杂质、鉴别（仪器）、溶出度、释放度、粒径（激光衍射法）、其他采用液相色谱及光谱法等检测项目。
不需要经过验证的：炽灼残渣、干燥失重、鉴别（化学法）、性状、水分、酸碱度、PH、其他理化检测。
注意事项：方法是否需要验证，应当基于风险评估的判断，惯例只是对于风险的一致认知，并不适用于所有情况。
注册用方法验证的一般要求代表性的样品：验证用到的样品应当能够代表上市批的质量，工艺一致，批量相当。
规范的过程：验证过程应当符合GMP或GMP类似要求方法确认与转移相关指导原则12015年版中国药典四部91012 •化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则P12254.ICHQ25.FDA 的Analytical procedures and method validation方法验证的常见困难：1已经验证的方法转移失败。
2已经验证的方法在日常检测过程中不适用。
3方法验证过程中发现方法不适用4某些验证项目需要多次验证才能获得满意的结果。
分析方法风险应对前置于方法开发阶段1在方法设计阶段应当预测全生命周期内可能存在的风险，如方法转移、可能的0OT/OOS.系统适用性试验失败原因、监管法规的变化、技术进步等。
2收集相关方的需求，包括QC实验室、合成部门、制剂部门等。
风险管理在方法验证中的应用2什么是风险？不确定性对目标的影响2什么是风险管理？在风险方面，指导和控制组织的协调活动3方法验证中应当结合分析方法的生命周期进行系统的风险评估，识别可能存在的风险，进行与等级相应的应对。
药品质量标准分析方法验证
药品质量标准分析方法验证一、目的：证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求。
二、用途（一）药品质量标准起草时，分析方法需经验证。
（二）药物生产方法变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，分析方法需经验证。
三、需验证的分析项目1.鉴别试验；2.杂质定量或限度检查；3.原料或制剂中有效成分含量测定；4.制剂中其它成分（降解产物、防腐剂等）的测定；5.溶出度、释放度等功能检查中的溶出量等的测试方法四、验证内容准确度、精密度（重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性（一） 线性（Linearity ）在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。
•方法：应在规定的范围内测定线性关系。
可用一贮备液经精密稀释，或分别精密称样，制备一系列不同浓度标准溶液的方法进行测定（n ≥5）。
以测得的响应信号作为被测物浓度的函数作图，观察是否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归。
•数据要求：应列出回归方程、相关系数和线性图UV 法：吸光度A 一般在0.2～0.8，浓度点n ＝5。
用浓度c 对A 作线性回归处理，得一直线方程，r 应达到0.9999(n ＝5)，方程的截距应近于零。
HPLC 法: 用精制品配制一系列标准溶液，浓度点n 应为5～7，用浓度c 对峰高h 或被测物的响应值(峰面积A)之比进行回归处理，建立回归方程，r 应大于0.999，截距应趋于零。
（二）准确度（accuracy ）准确度是指用该方法测定的结果与真实值接近的程度，用百分回收率表示。
测定回收率R （recovery ）的具体方法可采用“回收试验法”和“加样回收试验法”。
回收试验： 空白+已知量的对照品（或标准品）测定，测定值为M%100⨯-=加入量空白测定平均值回收率R 加样回收试验 ： 已准确测定药物含量P 的真实样品+已知量A 的对照品（或标准品）测定，测定值为M %100⨯-=AP M R 数据要求：可向制剂中加入已知量的被测物对照品进行测定规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备高、中、低三个不同浓度样品各测三次。
分析方法的验证ppt课件
1
内容：
一、介绍 二、分析方法验证 三、常见问题
2
一、介绍
方法分析：是为完成检验项目而设定和建立的测试方法，它 详细描述每一个分析试验所必须的步骤。 一般包括分析方法原理、仪器及仪器参数、试剂、供试品溶 液与对照品溶液等的制备、测定、计算公式及限度要求等。
3
一、介绍 分析方法确认或验证相关指南
通过实验室之间的检测来评价；
如果方法需要标准化如收载到药典中的 方法，则应考虑重现性。这些资料不是 申请上市文档的三部分。
协作标定 能力验证 药品标准的实验 复核
24
5）精密度
系统重复性：相同条件下，同一分析人员对同一样品溶液多 次测试结果的接近程度。 同一均匀标准样品溶液，连续重复测定六次，计算各组分响 应值与平均值之间的相对标准偏差。 方法重复性：相同条件下，同一分析人员对同一个均匀样品 ，多次取样测定所得结果的接近程度。 同一样品，至少称取六份，再测定每一份样品含量，计算每 一次测定的含量与平均含量间的相对标准偏差。
中其他成分（如防腐剂等）的含量，溶出度与释放度等检 查中的溶出量，以及含量均匀度。 化学药品/中药制剂中其他需控制成分(如残留物、添加剂 等）的测定
7
二、分析方法验证
5、分析方法验证的具体内容
1）专属性 2）线性 3）范围 4）准确性 5）精密度 6）检测限 7）定量限 8）耐用性 9）系统适用性
(完全辨别)，在此情况下，建议采用两种或两种以上的分 析方法以达到所需的辨别水平。
9
1）专属性
含量测定目的是得到样品中被分析物的含量或效价的准确 结果。
对于色谱法和其他分离方法来说，应当用具有代表性的色 谱图来证明专属性，并在图上适当地标出每一种成分。色谱 法的分离度应符合要求。
国家食品药品监督管理总局办公厅关于加强食品药品检验检测能力验证工作的通知
国家食品药品监督管理总局办公厅关于加强食品药品检验检测能力验证工作的通知文章属性•【制定机关】国家食品药品监督管理总局(已撤销)•【公布日期】2016.08.19•【文号】食药监办科〔2016〕127号•【施行日期】2016.08.19•【效力等级】部门规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】检验监管正文总局办公厅关于加强食品药品检验检测能力验证工作的通知食药监办科〔2016〕127号各省、自治区、直辖市食品药品监督管理局、新疆生产建设兵团食品药品监督管理局，中国食品药品检定研究院、各有关食品药品检验检测机构：能力验证是加强实验室质量管理以及评价和提高实验室技术能力的重要手段，能力验证的结果可作为承担相应检验检测任务的参考依据。
为进一步贯彻落实《食品药品监管总局关于加强食品药品检验检测体系建设的指导意见》，推动食品药品检验检测机构能力水平的全面提升，现就加强食品药品监管系统检验检测能力验证工作的有关事项通知如下：一、能力验证工作的组织食品药品监管总局（以下简称总局）负责食品药品检验检测能力验证工作的组织领导。
中国食品药品检定研究院（以下简称中检院）承担总局能力验证工作的组织实施。
相关省级食品药品检验机构根据需要配合中检院承担能力验证相关项目的具体实施工作。
各级食品药品监督管理部门负责组织、协调、指导所属检验检测机构参加总局组织的能力验证。
二、能力验证计划的制定和实施总局负责组织制定和发布能力验证计划，指导能力验证计划的实施。
每年的能力验证计划一般应于上一年度12月底前印发。
中检院根据总局能力验证计划，负责组织制定和实施能力验证工作方案，组织开展能力验证活动。
三、能力验证工作的要求（一）各级食品药品监督管理部门要鼓励所属检验检测机构积极参加总局组织的能力验证。
（二）中检院和相关承担单位要高度重视总局组织的能力验证工作，及时制定能力验证工作方案并组织实施；要配备足够的资源，保证科学、规范地完成总局能力验证计划，建立并保存能力验证工作档案和相关记录。
《GMP分析方法验证》课件
GMP分析方法验证是保证药品质量的重要步骤，要全面、系统、可靠。了解 GMP的实施标准，分析方法的验证步骤和常见问题，确保药品生产与检验的 合规性。
GMP是什么?
Goo d C linical Practice
严格实施临床试验的标准。
Goo d Manufacturing Practice
严格实施药品生产的标准。
Goo d L ab o rato ry Practice
严格实施药品检验的标准。
分析方法验证的定义
分析方法验证是通过确定分析方法的可靠性、准确性、稳定性，以及在特定 条件下的适用性，验证是否遵循GMP规定。
分析方法验证的步骤
1
准备验证样品和文档
2
收集并准备验证所需的样品和文档。
2 符合规定的检测设备
使用符合规定的检测设备进行验证。
4 全面有效的验证
验证应全面、系统、有效，符合GMP规 定。
分析方法验证的常见问题
样品的处理不当
样品处理不当可能导致验证结果不准确。
验证实验设计不合理
验证实验设计不合理可能导致验证结果不 可靠。
分析数据与预期结果不符
分析数据与预期结果不符可能说明验证过 程存在问题。
3
数据分析和评估结果
4
分析实验数据并评估验证结果。
5
确定验证目标和方法
明确验证的目标和所使用的方法。
进行验证实验
按照预定方法进行实验验证。
撰写验证报告
根据验ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ过程和结果撰写验证报告。
分析方法验证的要求
1 正确无误的操作指导书
操作指导书应准确详细，无歧义。
3 准确可靠的样品处理
《分析方法验证》PPT课件
2021/3/8
3
分析方法验证的法规要求
• 中国GMP(2010)对分析方法验证规定： – 符合下列情形之一的，应对检验方法进行验证： • 采用新的检验方法 • 检验方法需变更的 • 采用中国药典未收载的检验方法 • 法规规定的其他需要验证的检验方法 – 对不需要进行验证的检验方法，企业应进行方法 确认，以保证检验数据准确、可靠
2021/3/8
15
定量限 Quantitation Limit, LOQ
定量限是指样品中被测物能被定量测定的最低量，结 果应具有一定准确度和精密度要求
• 非仪器分析目视法： 用已知浓度的被测物，试验出 能被可靠地检测出的符合准确度和精密度要求的最 低浓度或量
• 信噪比法：一般以信噪比（S/N）为10∶1时相应的 浓度或注入仪器的量进行确定，也可用仪器所测空 白背景响应标准差（SD）的10倍为估计值，再经试 验确定方法的实际测定下限
• FDA cGMP [21 CFR 211.]
– Test method, which are used for assessing compliance of pharmaceutical articles with established specifications, must meet proper standards of accuracy and reliability.
• USP<1225> Validation of Compendial Procedures • 中国药典附录XIX A 药品质量标准分析方法验证指
导原则
• European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare [PA/PH/OMCL (05) 47 DEF] Validation of Analytical Procedures – 2005/06
【分析方法验证的内容】分析方法的验证
【分析方法验证的内容】分析方法的验证分析方法的验证，就是对药品分析实验所采用的分析方法是否完全达到了预期目的，或证明由分析方法误差而导致试验结果判断错误的概率是否在允许范围之内，而进行的科学证明。
分析方法的验证以验证参数表示。
在制定药品质量标准时，可通过这些参数证明所建立的分析方法是否适当。
本文所述分析方法验证是指下述情况：药局方新收载品种质量标准的建立；药局方已收载品种质量标准的修订；根据药局方的通则建立替代方法。
1日本药局方收载分析方法所需资料1.1概要对分析方法作简要说明，包括所采用分析方法的必要性，特点与优点及有关验证的要点。
如系分析方法的修订，则需阐明新方法与原方法的区别以及新方法的优势。
1.2分析方法本项记载的有关分析方法的内容要足以能对分析方法进行评价，并且必要时可用复核试验进行评价。
分析方法主要记载内容包括：分析的步骤、标准品及样品的制备方法、试剂与试药的调配、注意事项、分析系统是否正常运转的检验证明方法(例如高效液相色谱法中的分离效率的研究)、分析结果的计算公式、测定次数等。
并且，如果使用了药局方以外的装置，还需详述有关内容；如果使用了新的标准品，则必须提供其物理、化学及生物学特征数据，并提供其质量标准。
1.3有关分析方法验证的资料本项应包括求导各验证参数的试验设计、试验数据、计算结果及检定结果等。
2验证参数(validationcharacterisitics)分析方法适当与否可通过验证参数进行评价，下面列举了最典型的分析方法验证参数的定义及其评价方法。
验证参数的有关术语及定义因分析方法的应用领域不同而不同，本文所使用的术语及定义仅限于日本药局方。
评价方法项下所述内容也仅为简要概述。
确定验证参数的方法很多，采用何种方法没有具体限制。
但是，验证参数的限值常因确定方法的不同而发生变化。
故此，确定验证参数的实验方法、实验数据、计算方法等应尽可能详细地记述。
本文分析方法验证中未包括验证参数适应性/牢固性(Robustness)的讨论，这是由于牢固性的研究主要在分析方法的开发设计阶段进行，其研究结果可以在方法的分析条件或注意事项中得到体现。
药品质量标准分析方法验证闻京伟
目录
• 药品质量标准分析方法验证概述 • 药品质量标准分析方法验证的实
验设计 • 药品质量标准分析方法验证的数
据处理和分析
目录
• 药品质量标准分析方法验证的结 果评价和报告
• 药品质量标准分析方法验证的案 例分析
01
药品质量标准分析方法验证 概述
验证的目的和意义
确保药品质量标准分析方法的准确性和可靠性
实验准备
根据实验目的和要求，准备所 需的药品、仪器、试剂和样品
等。
实验操作
按照预定的实验步骤进行实验 操作，记录实验数据和结果。
Байду номын сангаас
数据处理
对实验数据进行处理和分析， 评估分析方法的性能指标，如 准确度、精密度、线性范围等 。
结果报告
撰写实验报告，总结实验结果 和分析方法验证的结论，为药
品质量控制提供依据。
03
药品质量标准分析方法验证 的数据处理和分析
数据处理的流程和方法
数据收集
收集所有相关的实验数据，确保数据的完整 性和准确性。
数据转换
将数据转换为适合分析的格式或模型，如将 数据标准化或归一化。
数据清洗
对数据进行预处理，包括缺失值填充、异常 值处理等。
数据挖掘
运用统计分析、机器学习等方法对数据进行 深入分析。
进行验证实验
按照验证方案进行实验，收集相关数据，如准确度、精密度、线性范 围等。
数据处理和分析
对实验数据进行处理和分析，评估分析方法的性能指标是否符合药品 质量标准的要求。
撰写验证报告
根据实验结果和评估结论，撰写详细的验证报告，总结分析方法的优 缺点和适用范围。
02
分析方法验证[优质ppt]
![分析方法验证[优质ppt]](https://img.taocdn.com/s3/m/f4a2bf0b3968011ca30091c8.png)
7Hale Waihona Puke 准确度 Accuracy准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接 近的程度，用回收率%表示。 测定回收率R （recovery）的具体方法可采用“回收 试验法”和“加样回收试验法”。 数据要求：规定的范围内，至少用9次测定结果评价， 如制备高、中、低三个不同浓度样品各测三次。
• USP<1225> Validation of Compendial Procedures • 中国药典附录XIX A 药品质量标准分析方法验证指
导原则 • European Directorate for the Quality of Medicines &
HealthCare [PA/PH/OMCL (05) 47 DEF] Validation of Analytical Procedures – 2005/06
• 2010版药典中分析方法验证指导原则(附录XIX A) 只规定了项目和基本方法而没有合格标准, ICH 和 USP 类似
4
ICH、USP、CP和EP中的方法验证
• ICH Q2(R1)：Validation of analytical Procedures: Text and Methodology -- 2005/11
• 制剂可用含己知量被测物的各组分混合物进行测定，即 采用在空白辅料中加入原料药对照品的方法；如不能得 到制剂的全部组分，可向制剂中加入已知量的被测物进 行测定，或与另一个已建立准确度的方法比较结果
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精密度 Precision
精密度是指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次 取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差（d）、 标准偏差(SD)、相对标准偏差(RSD)（变异系数，CV） 表示
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准确度 Accuracy
含量测定方法的准确度
• 原料药可用已知纯度的对照品或样品进行测定，或 用本法所得结果与已建立准确度的另一方法测定的 结果进行比较 • 制剂可用含己知量被测物的各组分混合物进行测定， 即采用在空白辅料中加入原料药对照品的方法；如 不能得到制剂的全部组分，可向制剂中加入已知量 的被测物进行测定，或与另一个已建立准确度的方 法比较结果
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线性 Linearity
线性是指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓 度直接呈正比关系的程度。也是证明被测物的浓度和检 测器(Detection)响应的线性关系. 必须制备不少于5种浓 度, 包括 50%, 100%, 150%, 线性在分析方法的范围内进行评价。 线性关系应以信号对被分析物的浓度或含量作图，根据 图形是否呈线性进行评价，再用最小二乘法处理数据求 得回归曲线的斜率（Slope）来表示。必要时可对响应 信号进行数学转换。 数据要求：至少需要五个浓度考察线形，需提供相关系 数、y截距（是检定的可能偏差）、回归斜率及方差等 参数，应列出回归方程数和线性图
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专属性 Specificity
• 鉴别反应---应能与可能共存的物质或结构相似化合 物区别，不含被分析的样品，以及结构相似或组分 中的有关化合物，均应呈负反应 • 含量测定和杂质测定---色谱法和其他方法，应附代 表性图谱，亦说明专属性。图中应标明各组份的位 置，色谱法中的分离度应符合要求 • 杂质可获得的情况下，对于含量测定，试样中可加 入杂质或辅料，考察测试结果是否受干扰；对于杂 质测定，也可向试样中加入一定量的杂质，考察杂 质间是否得到分离；反之则需用其他方法进行比较。 • 色谱峰纯度试验（二极管阵列，质谱）
n 1
相对标准偏差RSD：
SD RSD 100% x
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精密度 Precision
• 重复性(repeatability)：在相同条件下，由同一个分析 人员测定所得结果的精密度； • 系统重复性 将同一份供试品溶液重复测定六次， 计算相对标准偏差，即得。 • 分析重复性 由一位分析人员将同一均匀样品 重复称样制备供试品溶液六份，每份测定一次， 计算相对标准偏差，即得。 把被测物浓度当作100%，至少测6次进行评价
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范围 Range
范围是指达到一定精密度、准确度和线性的条件下，测 试方法适用的高、低限浓度或量的区间。范围应根据分 析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果和要求 确定。 • 原料药和制剂含量测定范围为80%-120%； • 制剂含量均匀度范围为70%-130%； • 杂质测定应为被测杂质报告值到限度的120%； • 溶出度应为测定范围的±20%，如规定了限度范围， 应为下限的-20%至上限的+20%，例如缓释片1h<20%, 7h>70%, 则验证范围定为0-90%。 • 范围不需另做测试. 按ICH定义写出结论: 通过对最低 和最高浓度的准确性,重复性和线性关系的验证及符 合规范的结果, 检测物的范围巳经核实.
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专属性 Specificity
专属性指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存 在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反 映该方法在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力， 是指该法用于复杂样品分析时是否受到相互干扰程度的 度量 通常是通过分析含有加了杂质、降解产物、有关化学物 质或安慰剂成分的样品，将所获分析结果与未加前述成 分之样品的测试结果进行比较，两组测试结果之差即专 属性
• 中国GMP(2010)、中国药典非常关注验证的过程, 分析 方法验证不完善是常见的问题。
– 药品质量标准中分析方法必须验证 – 药物生产工艺变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订 时，则质量标准分析方法必须进行验证。
• EU GMP Volume 4
– Analytical method shall be validated, all testing operations described in the marketing authorisation should be carried out according to the approved method.
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分析方法验证的要求
• 目的：证明所用的分析方法适合于相应的检测要 求 • 需验证的分析项目
– 鉴别试验 – 杂质定量或限度检查，原料或制剂中有效成分含量测定 – 制剂中其它成分（降解产物、防腐剂）的测定 – 溶出度、释放度等功能检查中的溶出量等的测试方法
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分析方法验证
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内容
分析方法验证的法规要求 ICH、USP、ChP和EP中的方法验证 分析方法验证的要求 分析方法验证步骤 分析方法验证成功的前提 分析方法验证注意要点 含量分析方法验证接受标准 方法确认和方法传送
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分析方法验证的法规要求
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专属性 Specificity
根据方法规定，同条件下测定普通空白样、特殊 条件空白样（如设定：普通空白样在60℃条件下放置 两周）、对照品、标准样品、可能的杂质、降解产物 等，对照测定结果，良好的专属性应表现为其它各种 组分均不干扰被测物的测定。如在液相色谱图谱中， 普通空白样、特殊条件空白样、有关物质、内标、被 测物对照品均应得到良好分离，如方法同时用于有关 物质限度测定，则要求各有关物质峰和可能存在的空 白干扰峰均应完全分离，互不干扰。
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ICH、USP、CP和EP中的方法验证
• ICH Q2(R1)：Validation of analytical Procedures: Text and Methodology -- 2005/11 ICH Q2A： Text on Validation of Analytical Procedure (Parent Guideline) -- 1994/10 ICH Q2B: Validation of Analytical Procedures: Methodology (Developed to complement the Parent guideline) -- 1996/11 • USP<1225> Validation of Compendial Procedures • European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare [PA/PH/OMCL (05) 47 DEF] Validation of Analytical Procedures – 2005/06
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精密度 Precision
• 中间精密度(Intermediate Precision)：同一实验室，不 同时间由不同分析人员用不同设备所得结果的精密度 (三人三机)：在同一实验室，由三位分析人员在不同 时间，使用不同设备将同一均匀样品分别重复称样制 备供试品溶液六份，每份测定一次，计算平均值及相 对标准偏差，即得。 • 重现性(reproducibility)：不同实验室，不同分析人员 测定结果的精密度：在不同实验室，由两位检验员将 同一均匀样品分别重复称样制备供试品溶液六份，每 份测定一次，分别计算平均值及相对标准偏差，即得。 （此项考察仅用于方法传送，具体限度要求详见每一 份传送草案。） • 数据要求：需报告SD，RSD和置信区间。
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分析方法验证的法规要求
• 中国GMP(2010)对分析方法验证规定：
– 符合下列情形之一的，应对检验方法进行验证： • 采用新的检验方法 • 检验方法需变更的 • 采用中国药典未收载的检验方法 • 法规规定的其他需要验证的检验方法 – 对不需要进行验证的检验方法，企业应进行方法确认 ，以保证检验数据准确、可靠 • 2010版药典中分析方法验证指导原则(附录XIX A)只规定 了项目和基本方法而没有合格标准, ICH 和USP 类似
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耐用性 Robustness
耐用性又称粗放度，是指测定条件稍有变动时，结果不 受影响的承受程度，为常规检验提供依据。是衡量实验 室和工作人员之间在正常情况下实验结果重现性的尺度; 如果方法易受到分析条件的影响，或要求苛刻，应注明。 典型的变动包括： • 分析溶液的稳定性
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检测限 Detection Limit, LOD
检测限是指试样在确定的实验条件下，被测物能被检测 出的最低浓度或含量。它是限度检验效能指标，无需定 量测定，只要指出高于或低于该规定浓度即可。
• 非仪器分析目视法： 用已知浓度的被测物，试验出能被可靠 地检测出的最低浓度或量 • 信噪比法: 用于能显示基线噪音的分析方法（仪器分析方法）， 是把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比 较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比 3∶1或2∶1时的相应浓度或注入仪器的量确定检测限 • 标准差法： ①测定背景10次以上，求出标准差σb； ②将σb乘以三倍； ③在工作曲线上求出3σb相对应的浓度Xb；即为检出限； ④将求得的对应浓度值加上空白值（空白值为0则不加）即得 检出限。
分析方法验证的要求
• 验证内容： –准确度 –精密度（重复性、中间精密度和重现性） –专属性 –检测限 –定量限 –线性 –范围 –耐用性
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准确度和精密度
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准确度 Accuracy
准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接 近的程度，用回收率%表示。 测定回收率R （recovery）的具体方法可采用“回收 试验法”和“加样回收试验法”。 数据要求：规定的范围内，至少用9次测定结果评价， 如制备高、中、低三个不同浓度样品各测三次。