肠道菌群粪便涂片

什么会使微生态失调呢？
抗生素应用
• 抗生素的发现，给人类的生活带来 了巨大的变化，许多危重病人从死亡线 上被抢救回来。然而，随着抗生素的广 泛使用，也给人类带来了新的问题， （除抗生素本身毒副作用外）就是普遍 存在的抗生素引起的肠道菌群失调。 • 其他因素引起的如激素、同位素、 放射线和免疫抑制剂的大量应用，也可 造成导致菌群失调。
肠道菌群中的主要厌氧菌
• 有芽孢杆菌一个种 G＋ 梭状芽孢杆菌属 产气荚膜梭菌 破伤风梭菌 艰难梭菌 肉毒梭菌 无芽孢杆菌 G＋ 双歧杆菌属 分叉杆菌 青春 长 婴儿双歧杆菌 丙酸杆菌属 痤疮丙酸杆菌 优杆菌属 迟缓优杆菌 乳杆菌属 嗜酸乳杆菌 保加利亚乳杆菌 放线菌属 衣氏放线菌 G- 拟杆菌属 脆弱拟杆菌 多形拟杆菌 梭杆菌属 核梭杆菌 坏死梭杆菌 普氏菌属 产黑色素普氏菌 卟啉单胞菌属 牙龈卟啉单胞菌
• 形象直观，直接了解粪便菌群的“像”， 熟练者对菌群失调有较高的准确性。
粪便直接涂片法的 优 缺 点
• 检验者必须有一定的经验，否则易判断 错误； • 主要是定性检查，要求对菌群失调进行 分度，初学者往往难以区分，致确定分 度较困难。
解决办法
• 按照图谱介绍方法，使操作标准化，以 图谱的菌群图片作对照，指导判断；
拟杆菌 有益，也有害
3.有害菌：如绿脓杆菌、葡萄球菌、
梭状芽孢杆菌
一、粪涂片法的临床意义
• 肠道菌群的种类
正常健康人的粪便其细菌总数约为1010个 /g左右，按细菌种的分类可达几百种，但临床 常见的主要菌种约数十种。 正常健康人的粪便中占绝大多数是专性厌 氧菌（简称厌氧菌）约占总数的99％，占少 数的是兼性厌氧菌、专性需氧菌及微需氧菌。
• 多看正常人的和菌群失调病人的粪便涂 片，经过一段时间就能掌握自如。 • 总之粪便涂片能快速诊断菌群失调，为 早期治疗提供线索。
三、显微镜油镜检查方法
1.观察涂片和染色情况
2.总览细菌总数 可通过“比例概数法”进行判断（见表
1）
3.观察革兰阳性、阴性杆菌 及球菌的比例改变（5级变化表2）
计数方法是：
抗生素应用
• 微生态失调的主要原因是抗生素的不合 理应用。 → • 强调促菌的积极作用。促菌是促进正常 有益菌、排斥、抑制、消灭有害菌，达 到微生态平衡。 • 抗菌则是杀灭致病菌的同时也杀灭了有 益菌，破坏了正常的微生态平衡。
1.有益菌: 或称共生菌，双歧菌、
乳杆菌、优杆菌等
2.中间菌：如肠球菌、大肠杆菌、
肠道菌群分析
的临床意义及分析方法 孙怡群
微生态学
• 微生态学是二十一世纪新生命科学分支 之一，这门新学科使医学从治疗医学和 预防医学迈向保健医学的新阶段。
• 微生态学，促进了医学革命。正如一个 国际学者所说：“没有任何生理指标， 可以脱离与正常微生物群的关连”。
近20年重大发现之一
• 人体内存在着一个微生态平衡与失调的 动态关系。
菌群失调的分度标准
• Ⅰ度菌群失调：是一类较轻的失调，诱 因去除后即可恢复正常，革兰阳性、阴 性菌比例轻度变化。
• Ⅱ度菌群失调：是一类中度的失调，呈 现为慢性病程，菌群比例明显改变。
Ⅰ度菌群失调
Ⅰ度菌群失调
Ⅰ度菌群失调
Ⅱ度菌群失调
Ⅱ度菌群失调
Ⅱ度菌群失调
Ⅱ度菌群失调
•
Ⅲ度菌群失调：是一类严重失调， 又称为菌群交替症或二重感染。原有的 肠道菌很少，而少见的细菌成为优势菌。 菌群中各种细菌比例发生非常明显变化。
粪涂片法的临床意义
• 正常微生物的平衡与失调要通过现代化 技术检测才能确定，如对正常微生物群 要进行定性、定量和定位检测，这些技 术比较复杂。 而此时一张大便涂片往往起到关键作用， 有时竟可以挽救病人的生命！
二、粪便直接涂片法的 优缺点
• 设备简单，仅需一台显微镜、载玻片和 革兰染液； • 操作方法简单； • 花费时间短（一般15min即可得出结果）
选定有代表性的视野部分区域作细菌分 类计数，缩小视野数200个以上的细菌 以求得其比例。对于初学者或为求得标 准值时可通过纸片分割视野的方法，五 个小孔上下左右中直径0.2－0.3cm进行 计数换算出百分率。这样比较客观。一 般计数1000个细菌换算出百分率以求得 各年龄组正常肠道菌群各类细菌的百分 率。 （评估见表3）
• 菌群失调的另一特殊表现 形式，发生定位转移
Ⅲ度菌群失调
Ⅲ度菌群失调
Ⅲ度菌群失调
五、粪便直接涂片报告方式1
粪便直接涂片报告方式 1
粪便直接涂片报告方式 1
粪便直接涂片报告方式 1
粪便直接涂片报告方式 2
粪便菌群定量分析菌落及菌体形态
Байду номын сангаас
粪便菌群定量分析菌落及菌体形态
粪便菌群定量分析菌落及菌体形态
粪便菌群定量分析菌落及菌体形态
粪便菌群定量分析菌落及菌体形态
粪便菌群定量分析菌落及菌体形态
健康青年之粪便涂片
健康壮年之粪便涂片
63岁正常女性粪便涂片
71岁男性老年人粪便涂片
76岁男性高血压脑病痴呆，卧床2年，营养良 好，饮食规律（属无明显异常改变的老年肠道菌群像）
四、菌群失调的分度标准
• 肠道菌群的数量与各种菌种的比例发生 较大幅度的变化，超出正常范围并由此 产生的一系列临床表现，称为：肠道菌 群失调症。根据菌群失调的严重程度可 分为三度。
• 医学任务就是如何认识平衡与失调的本 质。 • 保持微生态平衡、矫正微生态失调，达 到治病、防病和保健的目的。
正常微生物群
• 人的消化、吸收、营养、免疫都离不开 这些正常的生理性细菌，人体内的细菌 99%都是好菌，不但不会致病，而且会 引起人体产生免疫力。“坏菌”仅占少 数。如果正常菌减少，“坏菌”增多， 就会引起各种各样的疾病，这就是微生 态失调。
胎
便
12h婴儿便
母乳喂养1－2d后通常可行成一个典型的肠 菌群，开始以革兰阴性球/杆菌多见
2d婴儿大便
3d婴儿大便
5d 婴儿大便
5d婴儿大便，革兰阳性杆菌可见明显的分叉，革 兰阴性杆菌有浓染（似拟杆菌，也开始有少量的 革兰阴性球杆菌和革兰阳性球菌
3个月幼儿正常粪便涂片
6个半月母乳喂养幼儿正常粪便涂片