遗传学实验PPT

（2）精巢形态：
将精巢取出放于 培养皿中，用蒸
馏水反复冲洗，
每次用时2-3min, 可见每条精细小 管的一端连于输 精管，另一端为
分散的盲端。
2.
取一个或两个精细小管放于载玻片，用刀片 在精细小管上横切2-3次。用吸水纸吸去多余 水份。
3.
滴加改良苯酚品红染色液，染色 10-15min 。 同时以小镊子轻轻挤压精细小管外壁，以使 精细胞流出利于观察。压片后观察。
遗传学实验
任课教师：郭志林
化学与生命科学学院
实验一 蝗虫减数分裂过程的观察


一、实验目的
1、学习蝗虫减数分裂标本的制作方法。 2、观察动物精子形成过程中的减数分裂过程，掌握染色 体动态变化特征。
蝗 虫 的 形 态 与 构 造
二、实验原理

高等生物的雌雄配子形成过程中，性腺细胞分化为精母细胞与卵母细胞。 经过减数分裂形成精细胞或卵细胞。 蝗虫精巢作为材料有以下便利： （1）蝗虫染色体数目较少，雄2n=23；雌2n=24，染色体较大，容易辩认； （2）在同一玻片上可观察到精子形成过程的减数分裂各个时期。
三、实验材料人体口腔上皮细胞或毛囊细胞

四、实验器具和药品
用具 药品
显微镜 NaCI
恒温水 浴锅 苯酚
载玻片 碱性品 红
盖玻片 山梨醇
无菌牙 签 盐酸 乙醇
五、实验过程


1、口腔黏膜细胞巴氏小体显示方法
（1）取材与固定：用水漱口，以无菌牙签刮取口腔
颊部黏膜（第一次的刮取物弃去），将刮取物均匀 涂于载玻片上，空气中干燥。 （2）染色与观察：用改良苯酚品红染液染色1015min，倾斜玻片，倒掉染色液，用吸水纸吸干，镜
二、实验原理

果蝇为双翅目昆虫，发育为完全变态。 生长迅速，繁殖能力强，子代数多，有利于遗传分析； 容易饲养，常温下容易生长、繁育； 突变性状多数为形态变异，便于观察。
三、实验材料与药品
用具 药品 解剖镜 玉米粉 显微镜 蔗糖 培养瓶 苯甲酸 麻醉瓶 琼脂 解剖器 具 酵母粉 载玻片 氯化钠 盖玻片 乙醚
• 再次离心 • 加裂解液
10000转／分离心 70%乙醇洗涤沉淀 离心15min
• 吹干后溶于TE
弃上清，洗沉淀
注意事项
收集前须注意漱口 尽量用新鲜材料 实验报告： 测定DNA的纯度OD


检。选择细胞轮廓清楚、染色清晰、核大、核质呈
均匀细网状的细胞100个，统计巴氏小体的频率，与 男性细胞对照观察。
2、发根毛囊细胞巴氏小体显色方法
取带有发根的头发，围绕发根部的一圈白色物体是 毛囊细胞团，放于载玻片上，滴加一滴浓盐酸和 95%乙醇1：1混和液。


10min后，使毛囊细胞得到充分软化。
果蝇三龄幼虫
二、实验原理
双翅目昆虫（摇纹、果蝇等）幼虫期的唾腺 细胞很大，其中的染色体称为唾腺染色体。 这种染色体比普通染色体大的多，宽约5um， 长约400um，相当于普通染色体的100-150 倍，又称巨大染色体。

果 蝇 唾 腺 染 色 体

多线染色体其特征：巨大；同源染色体配对； 各染色体的染色质区域多在着丝粒部分互相 靠拢形成染色中心；横纹有深浅、疏密的不 同，各自对应排列。利用横纹的特点，可对 染色体进行区分。

注意事项：染色时不可滴加过多染色液，防止材料
流失。

实验报告：绘制减数分裂各时期染色体特征图。
实验二 果蝇的野外采集、培养和生 活史观察

1.
一、实验目的
掌握野外采集和实验室饲养管理果蝇的方法，实验中果
蝇的处理方法与步骤。
2.
区别雌雄蝇和几种常见突变型的主要性状，了解果蝇生 活史各阶段的形态特点。
形和双球形。
注意事项

应刮取深层口腔黏膜细胞
实验报告

统计的X小体的频率如何？绘制所观察到的 巴氏小体位置与形态。
实验五

人类基因组DNA的提取
一、实验目的 1、掌握人基因组DNA提取的原理和方法。 2、从人口腔细胞中提取基因组DNA的方法。
二、实验原理

细胞裂解液裂解细胞膜 收集细胞 核 加入SDS破裂核膜 蛋白酶K 降解核蛋白 苯酚、氯仿抽提去除 蛋白质 无水乙醇沉淀DNA 洗涤，干燥，溶解于TE。

三、实验仪器与药品
仪器与用品
显微镜
眼科剪
眼科镊子
载玻片
盖玻片
药品与试剂
乙醇
冰醋酸
碱性品红
山梨醇
苯酚
蒸馏水
四、实验材料采集
采集雄蝗虫
卡诺固定液 固定
90%乙醇脱 水
保存于70% 酒精
70%乙醇脱 水
80%乙醇脱 水
五、实验过程
取出精 巢
横切精 细胞小 管
品红染 色
绘制染 色体图


1、取材： （1）精巢位置：选择雄蝗虫，剪掉翅膀，从蝗虫腹 部背面由上至下顺序剖开体长的一半，靠近胸节处 有橘黄色团状结构，为精巢。
三、实验材料

漱口水
四、实验器具和药品
用具 50mL 1.5mL 离心机 涡旋振 离心管 离心管 荡器
药品
裂解缓 蛋白酶 SDS 冲液 K
TE
无水乙 NaAc 醇
70%乙 醇
五、实验步骤
• 收集漱口水 • 离心15min
58℃消化2h
• 酚：氯仿抽提 • 14000转／分离 心
加NaAc、无水乙 醇，-20℃沉淀2h
二、实验原理
雌性个体的细胞有两条X染色体，雄性个体 细胞中仅有一条X染色体。两种个体在X染色 体数量上不相等，基因产物可能是不相等的。 Barr等人发现在雌猫体内，神经细胞核膜内 缘有一染色很深的小体，定名为巴氏小体或 X小体，而雄性个体细胞中没有。 在人类女性口腔上皮细胞中，也发现了类似 结构。

研究确认是失活的X染色体呈现异固缩状态， X小体是发育中随机失活的X染色体之一，X 小体一般为1—1.5um，呈三角形或卵圆形。 Lyon假说：两条X染色体只有一条在遗传上 有活性，另一条在遗传上无活性；X染色体 的失活是随机的；失活发生在发育早期，X 染色体一经失活，其后代细胞中该染色体均 处于失活状态。
体型较小、腹部末端 钝圆、腹部背面有 3 条 黑色条纹，腹部腹面 有 4 个腹片、第一附足 的跗节基部有黑色蟹 毛状性梳、外生殖器 的外观较复杂，，可 见到明显的生殖弧、 肛上板及阴茎等
原种和几种常见突变类型的观察
3、生活史观察
幼虫生活7-8天 后化蛹，从培 养基爬出附在 瓶壁上，形成 一个梭形的蛹， 颜色由淡黄转 为深褐色，将 要羽化 卵长约0.5mm， 为椭圆形，腹 面稍扁平，在 前面前端伸出 一对触丝
稍后有一对半 透明的唾腺， 每条唾腺前有 一个唾腺管向 前延伸，汇合 成一条导管通 向消化道
两次蜕皮到第 三龄期，体长 可达4-5mm， 肉眼可见一端 稍尖为头部， 有一黑点即口 器；

作业：果蝇生活史的各个阶段及特点是 什么？
实验三 果蝇唾腺染色体观察


一、实验目的
1、掌握分离果蝇三龄幼虫唾腺和压制唾腺染 色体玻片标本的方法。 2、了解果蝇唾腺染色体的特点。
培养瓶与装有野生果蝇的瓶子口对口放好，其中装有果蝇 的瓶放在下方，轻轻扣击上面的瓶培养子。
需要分别培养，可以将果蝇放入麻醉瓶（瓶盖上加有乙醚 棉的广口瓶）中，待麻醉后倒在一张白纸上观察选种。
2、区别雌雄果蝇和几种常见突变型的主要性状

成蝇雌雄性别的辨识
雌果蝇体型较大、 腹部椭圆形、末端 稍尖、腹部背面外 观有 5 条黑色条纹、 腹部腹面有 6 个腹片、 无性梳、外生殖器 的外观较简单；
五、实验过程
1、果蝇的野外采集和果蝇的实验室饲养 用培养瓶于水果摊附近收集发酵的水果如酸败的 葡萄、香蕉或苹果，引诱果蝇进入
配制玉米琼脂培养基

玉米琼脂培养基配方表
果蝇接种于装有配制好培养基的瓶中
培养瓶与装有野生果蝇的瓶子对接，口对口培养基瓶子倒 扣在上方，用手捂住下面瓶子，让果蝇飞入新培养瓶内。
多线染色体十字联会
三、实验材料

野生型果蝇和个体较大的果蝇突变品系。
四、实验器具和药品
用具 药品
显微镜 生理盐水
实体显微 镜 改良苯酚 品红染液
载玻片
盖玻片
解剖器具
五、实验过程

1、三龄幼虫的培养


将3-5对果蝇放入加有酵母菌的培养瓶中 培养幼虫。出现幼虫后，可适当添加酵母 液，三龄幼虫期适当加大酵母水溶液的浓 度为10%，滴加量为盖上培养基表面一层 为准。 同时，可低温培养（16-18度）以延长果 蝇的生活史周期，使幼虫充分生长。 选用行动迟缓、肥大，爬上瓶壁的三龄幼 虫作标本最佳。

注意事项 果蝇唾腺为单层细胞构成，制片中注意保湿； 染液不要过多，以免标本流失。 作业： 1、选择较好的标本做成永久玻片标本； 2、绘制染色体略图，注意绘制染色体末端 的5-10条带纹。 3、总结三龄幼虫取材注意事项。


实验四


人体细胞巴氏小体观察
一、实验目的
1、学习人类X染色体的检测方法。 2、认识雌性哺乳动物X染色体失活假说和剂 量补偿效应。
2、唾腺的剖取

（1）把载玻片置于双筒镜下，滴加一滴生 理盐水，取三龄幼虫放在其中，操作者左手 摄子夹住幼虫后端固定，右手拿解剖针按住 幼虫头部的黑色斑点处，用力向右拉，从头 部把身体拉开，唾腺随之而出，唾腺是一对 透明的棒状腺体，像一对长茄子，上面附白 色脂肪条。

（2）剥除脂肪，用吸水纸清除周围组织。 （3）滴加一滴改良苯酚品红，染色10-15分 （4）压片：盖上盖玻片，轻轻敲打有唾腺 的地方，使染色液分散。低倍镜下选取染色 体分散较好的细胞放于高倍镜下观察。