肿瘤动物模型的构建
一种新型经颈动脉注射脑转移瘤动物模型的构建方法
一种新型经颈动脉注射脑转移瘤动物模型的
构建方法
新型经颈动脉注射脑转移瘤动物模型的构建方法
脑转移瘤是指恶性肿瘤细胞通过血液或淋巴系统进入脑部的现象。
为了研究脑转移瘤的发生机制以及开发治疗方法，构建适用的动物模型是必要的。
本文将介绍一种新型经颈动脉注射脑转移瘤动物模型的构建方法。
首先，选择合适的实验动物，常用的动物模型包括小鼠和大鼠。
根据研究需要和实验条件，选择体积适中、品系纯正的实验动物。
其次，准备合适的移植细胞。
可以使用已经建立的脑转移瘤细胞株，也可以通过原位肿瘤移植和分离培养的方法获取。
确保细胞的纯度和活性。
然后，准备手术器械和材料。
需要准备手术刀片、缝线、局麻剂等。
保证手术过程的安全和有效性。
接下来，进行手术操作。
首先，将实验动物固定在手术台上，消毒手术区域。
开颅手术后，暴露颅骨，定位动脉。
使用显微镜和微型注射器进行注射操作，将移植细胞悬液缓慢注入经颈动脉。
最后，观察动物的生理变化和行为表现。
监测肿瘤的生长情况，可以使用影像学技术如MRI对肿瘤进行定量分析。
还可以检测血液中的肿瘤标志物的变化，评估肿瘤转移的程度和效果。
总结起来，这种新型经颈动脉注射脑转移瘤动物模型的构建方法可以为研究脑转移瘤提供可靠的实验平台。
通过对动物模型的建立和实验操作，可以深入探索脑转移瘤的发生机制，为治疗和预防提供新的思路和策略。
如何进行小鼠肿瘤模型的建立及鉴定
如何进行小鼠肿瘤模型的建立及鉴定实验肿瘤学的需要导致肿瘤动物模型的产生,借以研究人类肿瘤的病因、发生、发展以及治疗和预防。
肿瘤动物模型可来自于动物的自发肿瘤、诱发肿瘤和移植性肿瘤。
一前两者由于对动物品系要求严格、实验周期较长或缺少实验一致性而较少使用。
移植性肿瘤动物模型具有特性明确、生长一致性好、实验周期短、瘤株分布广泛、可反复复制等优点,在肿瘤研究中占有重要地位。
可移植性肿瘤,是把动物或人的肿瘤移植到同系、同种或异种动物,经传代后,组织类型和生长特性已趋稳定,并能在受体动物中继续传代,又称为可移植性肿瘤细胞。
二可移植性肿瘤移植于同系或同种动物,称为同种移植,是国内外最常用的肿瘤动物模型复制方法之一。
同种移植的优点是,可供选择使用的细胞系或细胞株多,许多细胞系在世界范围分布广泛,并且这些细胞的生物学特性已经比较明确,一般都有明确的背景资料,使一群动物同时接种同样量的瘤细胞,生长速度一致、个体差异较小,成活率高,易于对照观察,这些都是便于科研成果相互比较和交流的有利因素三在接种过程中，应把握注射深度，否则易造成内脏损伤。
接种后三天即开始观察有无肿瘤形成。
本实验具有周期短、制作方便、成功率比较高、较好重复性和稳定性的明显优势，是一种较为理想的肿瘤实验动物模型，值得推广。
肝癌肿瘤模型建立：抗肿瘤药物及制剂的药效学评价，可通过建立小鼠荷瘤数据模型，探索肿瘤生长的本质及其发生发展的规律，探究其抗肿瘤效果。
方法：小鼠右腋下注射H22肿瘤细胞，注射部位发生癌变，小鼠肿瘤生长明显，切片结果证明实验成功，模型构建完成，使小鼠荷瘤，观察肿瘤生长，记录体重数据并建立动物模型。
1材料与方法1.1实验材料1.1.1动物及分组：取20只昆明鼠随机分成A组（10只），B组（5只），C组对照组（5只），编号饲养。
1.1.2试剂：无菌水，生理盐水，台酚蓝，2%冰醋酸，甲醛，乙醇，二甲苯，石蜡等。
1.1.3仪器：离心机，显微镜，计数板，电子称，超净工作台，温箱，切片机等。
乳腺癌动物模型构建
乳腺癌动物模型构建乳腺癌是一种常见的恶性肿瘤，临床表现为乳房肿块、乳房异常分泌物、乳房皮肤红肿等症状。
为了更好地研究乳腺癌的发病机制和寻找新的治疗方法，科学家们通过构建乳腺癌动物模型来模拟乳腺癌的发展过程。
本文将介绍乳腺癌动物模型的构建方法和研究价值。
一、乳腺癌动物模型的构建1. 细胞系移植模型细胞系移植模型是构建乳腺癌动物模型的常用方法之一。
研究人员可以选择已知的乳腺癌细胞系，将其移植到小鼠的乳腺组织中，观察肿瘤的生长和转移情况。
这种模型可以模拟乳腺癌的肿瘤生长、浸润和转移过程，为进一步研究乳腺癌的发病机制提供了可靠的平台。
2. 基因工程小鼠模型基因工程小鼠模型是通过基因突变或基因操纵技术，使小鼠表达人类乳腺癌相关基因，从而模拟乳腺癌的发展过程。
这种模型可以精确控制乳腺癌发生的时间和位置，研究人员可以观察到乳腺癌的发展过程以及与基因突变相关的病理变化。
基因工程小鼠模型在研究乳腺癌的发病机制和筛选治疗靶点方面具有重要意义。
3. 化学诱导模型化学诱导模型是通过给小鼠注射化学物质，如致癌物质DMBA （7,12-二甲基苯[α]蒽）或NMU（N-甲基-N-亚硝基脲），诱导乳腺癌的发生。
这种模型可以模拟乳腺癌的致癌过程，研究人员可以观察到肿瘤的生长速度、转移能力以及对化疗药物的敏感性。
化学诱导模型的优势在于可以快速诱导肿瘤形成，是进行大规模筛选实验的理想模型。
二、乳腺癌动物模型的研究价值1. 研究乳腺癌的发病机制乳腺癌动物模型能够模拟乳腺癌的发展过程，帮助研究人员深入理解乳腺癌的发病机制。
通过观察肿瘤的生长、浸润和转移过程，研究人员可以揭示乳腺癌的发展规律，寻找新的治疗靶点。
2. 评估抗癌药物疗效乳腺癌动物模型是评估抗癌药物疗效的重要工具。
研究人员可以在动物模型中测试新的抗癌药物，观察肿瘤的生长速度、转移能力以及对药物的敏感性，从而评估药物的疗效。
3. 验证分子靶向治疗方法乳腺癌动物模型对于验证分子靶向治疗方法的有效性具有重要作用。
小鼠肿瘤模型的建立方法及评价手段
小鼠肿瘤模型的建立方法及评价手段动物模型的建立是进行医学科研工作的重要研究手段之一。
肿瘤是机体自身与外界施加因素之间对立平衡，外界因素的干扰逐渐被机体所转化和接纳，从而形成肿瘤。
因此，任何影响正常机体内外环境和施加因素的条件均可改变肿瘤形成的起始、进展和结局。
本文就几种肿瘤动物模型的建立过程，对不同模型特点和选择进行评价。
标签：肿瘤；动物模型；评价方法人类疾病的发展过程十分复杂，为深入探讨疾病的发生机制以人体作为实验对象存在很多的局限性，而且很多的实验方法在道义上也受到限制。
人类疾病动物模型是在医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟性表现的动物疾病材料。
借助于动物模型来间接研究一些疾病的发病全过程，从而更方便、更有效、更全面的认识人类疾病的发生发展规律，同时也避免了人体实验造成的伤害。
目前已展现出大量建立肿瘤动物模型的方法，本文做一综述。
1 小鼠肿瘤动物模型的类型及建立方法1.1 自发性小鼠肿瘤模型自发性肿瘤是指实验动物在自然情况下，未经任何有意识的人工处理而发生的肿瘤。
其发病特征和人类肿瘤很相似，所以对人类肿瘤的研究有很高的价值，而且，自发肿瘤的产生可提供前瞻性和回顾性研究。
若自发性肿瘤没有人为因素的干扰，则更接近于人体肿瘤的真实状态。
然而，与人类疾病完全相同的动物自发性疾病模型并不多，且样本数量有限，而且，在自然状态下，细胞癌变的概率较低，故很难得到条件满足、数量足够的动物模型，所以该法在研究中很少使用。
1.2 诱发性小鼠肿瘤模型人为地运用各种致癌因素作用于实验动物的特定组织或器官，从而产生相应肿瘤，这就是诱发性动物肿瘤模型。
给药途径和诱导剂的不同，导致最后生成的肿瘤的类型有差异，其成瘤率也不一样。
化学诱导的肿瘤属实验动物的原发肿瘤，其发病机制及肿瘤生长环境接近于人体原发肿瘤，建立方法相对简单，实验重复性好，因此目前运用较为广泛。
但该方法诱导周期仍较长，成瘤率与移植法相比也有一定差距[1-2]。
动物模型：裸鼠PC-9细胞肿瘤模型
动物模型：裸鼠PC-9细胞肿瘤模型一、嘉美实验裸鼠PC-9细胞肿瘤模型的构建方法采用腋窝皮下接种PC-9人肺癌细胞，建立PC-9人肺腺癌细胞裸鼠移植瘤模型并给与药物进行干预，观察药物对肿瘤的作用。
二、裸鼠PC-9细胞肿瘤模型的构建及后续实验操作1、25只BALB c裸鼠，适应性饲养一周后，调整制备好的PC-9人肺腺癌细胞单细胞悬液浓度，用1m 1l无菌注射器吸取细胞悬液，于每裸鼠右侧腋下皮下注射0.2mL细胞悬液(接种细丹包量约为1×x102/ml)，细胞悬液接种于裸鼠的右侧腋下7-10d后，观察成瘤情况，肿瘤仁本积大于100m3后，选取肿瘤大小相近的小鼠按肿瘤体积随机分为4组:(1)对照组，5只；(2)高剂量组，7只:(3)中剂量组，7 )顺铂组，6只。
当天高剂量组、中剂量组、顺铂组开始给药其中，高剂量组连续21天每天灌胃给药，顺铂组每三天腹腔注射给药，齐量5m/e次。
每两天测量荷瘤裸鼠体重和冲瘤体积。
于第22天停止给药病禁食2h，第再次测量肿瘤体积，计算相对肿瘤体积(RTV)，绘制肿瘤生长曲线，毛材当天称量最后一次体重和瘤重计算肿瘤指数完整剥离瘤块，其中一半瘤块组织于 10%福尔马林中固定，备用；另半肿瘤组织存放于液氮中冻存。
血样用109 mmol/L枸櫞酸钠19抗凝，分离血浆。
2、小鼠接种PC-9人肺腺癌细胞后 9天左右，可观察到裸鼠右侧腋下均现黄豆大小瘤块，于当天开始测量肿瘤体积并称重。
于接种第11天时，测量肿瘤生长指数和体重时发现，各组荷瘤裸鼠肿瘤体积均值达到100mm3，于当天开始分组给药在给药过程中发现，顺铂组荷瘤裸鼠的体重下阳夆明显，与对照组相比具有极显著性差异루(P<0.01)高剂量组荷瘤裸鼠的体重于d7、dI 3、d19天时有显著性差异(P~0.05)，其他各组体重与对照组相比均无明显差异。
顺铂组肿瘤体积于d13、d17、dl9、d21 d23时与对照组相比明显减小，并有显著性差 :(P<0.05)，在d15天时有极显著性差쿠(P<0.01)。
肿瘤动物模型的建立及应用
肿瘤动物模型的建立及应用肿瘤动物模型是一种在动物体内模拟人类肿瘤发展过程的实验模型，被广泛用于肿瘤的病理生理学、分子生物学、药理学等研究。
通过建立肿瘤动物模型，可以加深对肿瘤的发生、发展、转移和抑制机制的了解，同时也可以评估新药物及治疗策略的有效性。
下面将探讨肿瘤动物模型的建立及应用。
首先，肿瘤动物模型的建立是一个复杂而具有挑战性的过程。
一般来说，肿瘤动物模型的建立可以分为自发性肿瘤模型和人工诱导肿瘤模型两种类型。
自发性肿瘤模型主要是利用动物自身遗传倾向或环境诱导等因素，在动物体内自发产生肿瘤。
比如在家养动物中，很多小鼠和家兔由于遗传因素或者饮食、环境等长期暴露，会自发产生肿瘤。
这种模型更接近人类肿瘤的发展过程，但是其建立的可控性和可重现性较差，需要耗费大量的时间和经费。
人工诱导肿瘤模型则是通过外界的干预手段，比如化学药物、辐射等方式，直接在动物体内诱导肿瘤的产生。
这类模型具有较好的可控性和可重现性，可以更好地满足科研实验的需要。
常用的人工诱导肿瘤模型包括移植肿瘤模型、化学诱导模型、基因编辑模型等。
其次，肿瘤动物模型的应用范围非常广泛。
一方面，肿瘤动物模型可以用于研究肿瘤的发生机制和发展过程。
比如，利用肿瘤动物模型可以深入探究各种致癌物质或致癌基因对肿瘤发生的影响，分析肿瘤细胞的生物学特性和转移能力等。
通过模拟肿瘤的生长形态，可以更好地了解肿瘤细胞的生理活动和分子机制，为探寻肿瘤治疗策略提供理论依据。
另一方面，肿瘤动物模型还可以用于筛选和评估抗肿瘤药物。
通过向肿瘤动物模型中输入肿瘤细胞或移植肿瘤组织，可以评估新药物对肿瘤生长的抑制效果，了解药物的毒副作用、适应症等。
这种通过体内实验评估药物疗效和安全性的方法，大大提高了新药物研发的效率和成功率。
此外，肿瘤动物模型还被广泛用于研究肿瘤的诊断和预后指标、肿瘤免疫治疗、基因治疗等领域。
通过模拟肿瘤动物模型，可以更好地理解和验证这些新技术和新疗法在肿瘤治疗中的应用。
一个好的人类肿瘤原发动物模型制作思路
这几天仔细阅读了一篇今年7月CancerCell的文献，从里面学到了一个很有用的人类肺癌小鼠模型制作思路。
他们首先把人类的EGFR基因定点突变，改造后的基因插入到含有7个四环素调节的启动子和β-globin 的Poly（A）载体，然后制作转基因小鼠，通过PCR检测出他们的子代中含有目的基因的小鼠，这些小鼠再和另外一种已经做好的含有CCSP-rtTA的转基因小鼠杂交，F1代中就会有含有目的基因的转基因小鼠，在经过脱氧土霉素（Doxycycline）共给，小鼠就能长出肺癌来了。
我觉得这个动物模型有几个优点：
1. 能模拟人类原发性肺癌，是一个很好的原发疾病模型。
这样可以尽最大可能模拟一些人类疾病的发病过程，因此，在这种模型上的实验可信度和实用度都很高。
2. 特异性好，他们用的CCSP-rtTA只有在肺泡中有表达，（CCSP是Clara Cell Secretion Protein 的简写，这种蛋白只会在肺泡表达，CCSP-rtTA指的是用CCSP的启动子调控rtTA的表达），因此，也避免了其他转基因动物模型中的非特异作用问题。
3. 可以直接构建近交系杂交F1代模型，这是人类疾病动物模型制作中最提倡的动物载体。
杂交F1代可以最大程度的保持基因背景的稳定性
所以这个模型制作思路还是很有参考价值的，值得我们学习。
我们也可以在此基础上发挥一下，制作出其他肿瘤或者疾病的模型。
但是这种动物模型制作过程比较复杂，效率也不高。
这可能是它美中不足的地方了。
脑胶质瘤动物模型的建立步骤-概述说明以及解释
脑胶质瘤动物模型的建立步骤-概述说明以及解释1.引言1.1 概述脑胶质瘤是一种具有较高发病率和致死率的恶性肿瘤，常见于中枢神经系统中的胶质细胞。
其治疗难度大，预后差，目前尚无有效的治疗手段。
在研究脑胶质瘤的发病机制和寻找治疗方法方面，动物模型的建立是至关重要的。
本文将重点介绍建立脑胶质瘤动物模型的步骤，希望能为进一步的研究提供参考。
1 概述部分的内容1.2 文章结构本文主要分为三个部分，分别是引言、正文和结论。
在引言部分，将简要介绍脑胶质瘤以及建立动物模型的必要性和意义。
通过引出问题和目的，为接下来的内容做铺垫。
在正文部分，将详细介绍脑胶质瘤的特点，以及建立脑胶质瘤动物模型的必要性和方法。
通过解析脑胶质瘤的病理生理特征和研究现状，为建模提供理论基础。
同时，介绍具体的建模步骤和关键技术，为读者提供全面的了解。
在结论部分，对全文内容进行总结，并强调建立脑胶质瘤动物模型的重要性和意义。
展望未来研究的方向和发展趋势，为相关领域的研究提供参考。
1.3 目的建立脑胶质瘤动物模型的目的是为了更好地理解脑胶质瘤的发病机制、病理生理过程以及潜在的治疗方法。
通过模拟人类脑胶质瘤在动物体内的发展过程，可以深入研究脑胶质瘤的发生、发展和转移机制，有助于找到新的治疗策略。
同时，建立脑胶质瘤动物模型也为临床试验提供重要的参考依据，促进基础科研和临床实践的有效结合，推动脑胶质瘤治疗领域的持续发展。
因此，本文旨在探讨建立脑胶质瘤动物模型的步骤和意义，为相关领域的研究提供参考和借鉴。
2.正文2.1 脑胶质瘤的特点脑胶质瘤是一种常见的颅内恶性肿瘤，它主要起源于神经胶质细胞。
脑胶质瘤通常具有高度异质性和侵袭性，不仅对患者的生命造成威胁，而且还可能引起神经功能障碍。
在临床上，脑胶质瘤的治疗难度较大，复发率高，预后通常较差。
脑胶质瘤的特点主要包括以下几个方面：1. 组织异质性：脑胶质瘤组织通常由不同类型的细胞组成，如星形细胞、少突胶质细胞等，使其在形态上呈现出多样性。
常见肿瘤动物模型一览课件
三.移植性肿瘤动物模型及其研究方法
定义：模型是指将动物或人体肿瘤移植到同种或异种动物体内连续传代而形成移植性肿瘤动物的肿瘤实验动物选择：移植性肿瘤常用动物为小鼠、大鼠和地鼠肿瘤细胞的选择：筛选抗癌药物时，最好选用3类瘤株，及肉瘤、腹水型肿瘤和白血病株。在众多移植性肿瘤中，小鼠Lewis肺癌、小鼠黑色素瘤B16及小鼠白血病P388是目前最受重视和应用最广的。
免疫功能抑制的大鼠作为移植宿主
实验动物：体重120~160g的Wistar大鼠操作方法（例：人胃癌细胞株）：1.大鼠分笼饲养，皮下注射具有免疫抑制作用的阿糖胞苷200mg/kg体重，2d后用10Gy(1000rad)60Co全身照射，照射后的大鼠饲养于洁净环境中，每日紫外线灯照射1h，自由摄食饮水，饮水中加土霉素1mg/ml2.将人胃癌细胞株调至1×106个/ml细胞悬液，台酚蓝拒染法检测癌细胞存活率后，每只鼠皮下注射0.5ml(含5×105个细胞）细胞悬液3.接种后每日观察肿瘤生长情况，肿瘤生成后取瘤组织进行组织病理学检查结果：一般情况下，接种3~5d形成肿瘤，移植成功率可达85%，移植成功后可用以观察受试药的疗效
瘤块接种法
瘤细胞悬液接种法
每次接种的动物数量较多时可采用此法。具体方法是：无菌操作取出瘤块，将数个瘤块混合后剪成小块，放入玻璃匀浆器中，加无菌生理盐水向一个方向转动研磨后，经滤网过滤，加生理盐水稀释成1:3~1:4（肿瘤g：生理盐水ml）的瘤细胞悬液，用台盼兰染色法计数活细胞数，用1ml注射器注射到接种部位，每个接种点接种0.2ml(一般含1×106~1×107个细胞数）。通常接种到腋窝皮下，每只动物可选用多个接种点。
常见肿瘤动物模型一览
自发性肿瘤动物模型
01
诱发性肿瘤动物模型
02
肿瘤动物模型的构建——白血病篇
肿瘤动物模型的构建——⽩⾎病篇导读⽩⾎病（Leukemia）是⼀种常见的恶性⾎液疾病，俗称⾎癌。
据统计，⽩⾎病是⼉童恶性肿瘤的头号原因，在⼉童及35岁以下成⼈中发病率位居第⼀[1]。
同时也是⼗⼤恶性肿瘤之⼀。
⽬前，⽩⾎病具体的发病原因⾄今尚未研究透彻，因此建⽴合适的⽩⾎病动物模型，对于⽩⾎病发病机制及药物研发具有重要意义。
本期为⼤家综述了⽩⾎病的基本情况及⼩⿏模型的分类、建⽴⽅法和应⽤。
第⼀章：⽩⾎病基本常识⽩⾎病是常见液体瘤⽩⾎病是常见的液体瘤，与结肠癌、肝癌等实体瘤不同的是，它是造⾎⼲细胞的异常分化和过度增殖导致，因此肿瘤细胞会遍布全⾝，会侵犯⾝体的每个脏器，造成全⾝衰竭。
造⾎⼲细胞是⾎液系统中的成体⼲细胞，具有长期⾃我更新和分化成各类成熟⾎细胞的能⼒。
如下图为造⾎⼲细胞可分类形成各种⾎细胞，如红细胞、⾎⼩板和⽩细胞：造⾎⼲细胞分化成各类⾎细胞（图⽚来⾃⽹站）⽩⾎病致病因素有哪些呢？现阶段认为⽩⾎病的发病因素：化学因素、电离辐射、药物、毒物、病毒、遗传因素等有关。
⽩⾎病主要分为四类根据⽩⾎病细胞的成熟程度和⾃然病程，⽩⾎病可分为急性和慢性两⼤类，临床上，⽩⾎病共分为四⼤类：急性髓系⽩⾎病（AML）、急性淋巴细胞⽩⾎病（ALL）、慢性髓系⽩⾎病（CML）和慢性淋巴细胞⽩⾎病（CLL）。
⼉童⽩⾎病90%以上是急性的，其中急性⽩⾎病中70%～80%是ALL。
第⼆章：实验研究所⽤⽩⾎病模型⾸先，来了解⼀下常⽤的细胞株⽩⾎病中常⽤的⼩⿏品系⽤于建⽴⽩⾎病⼩⿏模型的⼩⿏可分为近交系和突变系。
根据不同类型和⽬的选择不同的⼩⿏品系，具体如下图所⽰：最后说说常⽤的动物模型，主要分为三类：⼀、异种移植模型异种移植模型是最常⽤的淋巴瘤动物模型。
根据实验⽬的选择相应的⼩⿏品系和细胞株后，通常细胞的接种⽅式为⽪下注射、腹腔注射和尾静脉注射。
⽪下注射和腹腔注射操作简单，很快在接种部位形成肿瘤或腹腔内形成多发性肿瘤，适合筛选针对⽩⾎病的药物。
肿瘤动物模型建立实验
肿瘤动物模型建立实验标签：肿瘤动物模型肿瘤动物模型的建立可以：（1）评价抗肿瘤免疫治疗的疗效；（2）作为抗肿瘤药物筛选模型；（3）为肿瘤转移研究提供更好的研究平台；（4）为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。
实验方法诱发性肿瘤动物模型实验方法原理诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。
实验材料肿瘤细胞小鼠试剂、试剂盒无血清培养基质3%中性甲醇石腊仪器、耗材低温离心机血球计数器游标卡尺实验步骤一、肝癌1．二乙基亚硝胺（DEN）诱发大白鼠肝癌（1）取体重250 g左右的封闭群大白鼠，雌雄不拘；（2）按性别分笼饲养。
除给普通食物外，饲以致癌物，即用0.25%DEN水溶液灌胃，剂量为10 mg/kg，每周一次，其余5天用0.025%DEN水溶液放入水瓶中，任其自由饮用；（3）共约4个月可诱发成肝癌；（4）也可以单用0.005%掺入饮水中口吸服8个月诱发肝癌。
2．4-2甲基氨基氮苯（DBA）诱发大鼠肝癌（1）用含0.06%DBA的饲料喂养大鼠，饲料中维生素B2 不应超过1.5～2 mg/kg；（2）4～6月就有大量的肝癌诱发成功。
3．2-乙酰氨基酸（2AAF）诱发小鼠、狗、猫、鸡、兔肝癌（1）给成年大鼠含0.03% 2AAF标准饲料；（2）每日每平均2～3 mg 2AAF（也可将2AAF混于油中灌喂），3～4月后有80～90%动物产生肝肿瘤。
4．二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌：（1）用剂量为每日0.3～14 mg/kg体重，混于饲料或饮水中给予；（2）6～9个月后255/300大鼠发生了肝癌。
5．亚胺基偶氮甲苯（OAA T）诱发小鼠肝癌（1）用1%OAAF苯溶液（约0.1 ml含1 mg）涂在动物的两肩胛间皮肤上，隔日一次，每次2～3滴，一般涂100次。
（2）实验后7～8周即而出现第一个肝肿瘤，7个月以上可诱发小鼠肝肿瘤约55%。
（3）或用2.5 mg OAA T溶于葵瓜子油中，给C3H小鼠皮下注射4次，每日间隔10天，也可诱发成肝癌。
动物肿瘤造模实验方案
动物肿瘤造模实验方案
动物肿瘤造模实验是一种常用的动物实验方法，用于研究肿瘤的发生、生长、转移和治疗方案。
下面是一个可能的动物肿瘤造模实验方案：
1. 选择动物模型：常用的动物模型包括小鼠、大鼠和兔子等。
根据研究目的和肿瘤类型选择合适的动物模型。
2. 选择肿瘤细胞系：常用的肿瘤细胞包括人源性肿瘤细胞系和动物源性肿瘤细胞系。
根据研究目的和肿瘤类型选择合适的肿瘤细胞系。
3. 准备肿瘤细胞：将肿瘤细胞培养至合适浓度，并用生理盐水或其它合适的载体悬浮。
4. 动物模型建立：将肿瘤细胞注射到动物体内建立肿瘤模型。
常用的注射方式包括皮下、脾脏或其他器官内注射。
5. 观察肿瘤生长：观察肿瘤模型的生长情况，包括肿瘤体积、肿瘤质地、肿瘤血液供应等。
6. 取样分析：在不同时间点取样，对肿瘤模型进行分析，包括病理学检查、免疫组化分析、分子生物学检测等。
7. 肿瘤治疗试验：根据研究目的，对肿瘤模型进行治疗试验，可以采用化疗、放疗、免疫治疗或其它治疗方法。
8. 结果分析：根据实验结果进行数据分析和统计，并对实验结果进行解读和讨论。
需要注意的是，动物实验需要遵守伦理规范和相关法律法规，确保实验过程的合法性和道德性，并尽量减少对动物的伤害和痛苦。
在进行动物肿瘤造模实验时，应严格按照相关实验规范进行操作，并有专业实验人员进行监督和管理。
实验动物肿瘤模型的建立及应用概述PPT课件
实验动物研究起步:
早期
使用狗、马、羊等常规动物
1912-1922年 Slye培育出近交系小鼠
1946年
Reynier培养出可供实验用的
无菌动物
1958年
英国制定出实验动物标准
实验动物的研究在我国的发展
50年代中期 中国1号、津白1、 津白2等近交系小鼠
50-90年代 建立大量可移植性瘤 株,有近百余种人类癌细胞系被 建立
至今各省市科研单位已建立大量 裸鼠培育室,制定出医学实验动 物管理暂行条例
原因
1、研究人的一生至少需要半个世 纪,而一些动物(鼠、兔、鸡)等至 多十年就够了。
2、利用病人组织活检和尸检的分 析很难得到肿瘤发展全过程的资 料,而通过动物则易获得。
3、凡不能在人体内进行的实验程 序和干扰计划均可经动物肿瘤模 型实现。
46
8 9 (w)
基础饲料 AFB1腹腔注射 0.015%的AAF饲料
移植性肿瘤的建立及应用
1、同种可移植性肿瘤 2、异种可移植性肿瘤
腹水瘤的建立
将移植性实体瘤细胞注入同种受体动 物腹腔内,移植于受体动物腹壁内或其
它部位,待肿瘤生长后引起腹水。 将带瘤腹水给同种同系动物移植传代,
即可形成腹水瘤。
诱发性肿瘤模型的建立及应用 可移植性肿瘤的建立及应用
诱发性肿瘤模型 的建立及应用
诱发肿瘤的基本方法、途径
涂抹法 经口给药法 气管内直接注入法 穿线法 注射法
黄曲霉毒素诱发肝癌模型
基础知识:黄曲霉毒素为强至癌物,动物经口 摄入便可诱发大量肝癌。 在本实验利用大鼠进行腹腔注射法。
主要程序:
0
2
肿瘤动物模型常用建立方法
肿瘤动物模型常用建立方法肿瘤动物模型是用于研究和测试肿瘤发生、发展和治疗的工具。
建立适当的肿瘤动物模型对于揭示肿瘤的生物学特性和评估各种治疗方法的有效性至关重要。
以下是常用的肿瘤动物模型建立方法。
1. 移植瘤模型：这是最常见和简化的动物模型建立方法之一。
它涉及在动物体内或体外移植人类或动物来源的肿瘤细胞株。
这些细胞可以从肿瘤组织中分离得到，并在实验室中培养。
移植瘤模型的优点是易于建立和控制，但它不能反映肿瘤的整个发展过程。
2. 转基因模型：转基因动物模型是通过将特定的基因突变导入小鼠或其他动物体内来模拟肿瘤。
这些基因突变可以是人类肿瘤相关基因的突变，也可以是具有肿瘤形成潜能的其他基因的突变。
转基因模型可以提供更真实的肿瘤发展和治疗反应，但其建立过程相对复杂和耗时。
3. 化学诱发模型：这种方法通过给动物暴露于化学物质，如化学致癌物质或腺病毒，来诱发肿瘤的发生。
这些化学物质可以引起DNA损伤或基因突变，从而促进肿瘤的形成。
化学诱导模型可以提供与人类肿瘤相似的病理特征，但其应用范围受到化学物质的选择和剂量的限制。
4. 遗传模型：遗传模型使用特定品系的小鼠或其他动物，这些动物因其自身的遗传缺陷而具有高发生肿瘤的风险。
这些遗传模型可以是自然突变品系，也可以是通过基因工程技术引入的遗传缺陷。
遗传模型可以提供对特定肿瘤类型和易感因素的研究，但其适用范围受到特定品系的限制。
以上是常见的肿瘤动物模型建立方法。
根据具体研究目的和研究条件的不同，选择合适的肿瘤动物模型对于取得可靠的研究结果至关重要。
不同模型的优劣势需要综合考虑，并根据研究的需要进行合理选择。
小鼠肿瘤模型的建立方法及评价手段
小鼠肿瘤模型的建立方法及评价手段小鼠肿瘤模型的建立方法及评价手段癌症是当今世界范围内的一种重大疾病，而且其影响范围越来越广泛，与此同时，由于癌症的病发机制尚不完全明确，因此对于防治癌症的研究和探索主要依靠动物模型研究。
小鼠肿瘤模型是目前研究肿瘤发病机制和癌症治疗的重要手段，在注射人类肿瘤细胞后，小鼠可呈现人体肿瘤组织细胞移植的特性。
相对于人体肿瘤实验和传统的肿瘤细胞培养，小鼠肿瘤模型的优异之处在于能够创造肿瘤微环境，仿真人体肿瘤的生长和转移过程，以提高癌症的治疗效果。
本文将详细介绍小鼠肿瘤模型的建立方法以及常见的评价手段。
一、小鼠肿瘤模型的建立方法1.1 人体肿瘤细胞移植模型人体肿瘤细胞移植模型以人类肿瘤细胞在裸鼠或小鼠体内移植后的肿瘤实体为基础，分为无血液供应的固体肿瘤模型和有血液供应的血液源性肿瘤模型两种。
在移植人类肿瘤细胞时，要确保细胞的活力和数量，同时条件控制的严谨性也是建立模型成功的关键。
以草甸欧豆荚腺癌细胞(A549)为例，在室温下用胰蛋白酶消化并在热水浴中加温25分钟，离心后取上清液，将细胞恢复在人工营养的体外环境中培养至稳定生长。
然后注射生长正常的A549细胞到裸鼠的皮下尽处，便成为一个人体肿瘤细胞移植模型。
1.2 化学诱导肿瘤模型化学诱导肿瘤模型是通过注射某些化学物质来诱导荷尔蒙依赖性肿瘤，可以有效地模拟荷尔蒙依赖性肿瘤的发病原因及其恶化过程。
在采用二甲基亚硝胺(DMN)诱导大鼠膀胱癌时，过程如下：将DMN溶于苏木精中，经过研磨混合后注射大鼠，每次剂量控制在4-25mg/kg，2个月后检查其膀胱肿瘤的形成情况。
化学物质注射后，不同的化学物质会引起不同部位的肿瘤，如DMN会引起膀胱癌。
1.3 基因敲除技术建立小鼠肿瘤模型目前最为先进的小鼠肿瘤模型是通过基因敲除技术构建。
通过选择与癌症相关的基因，并在小鼠体内干扰其功能，从而让小鼠形成癌症。
其中胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)是一种与人类肿瘤密切相关的基因，在建立小鼠肿瘤模型时被广泛用于其基因干扰的研究。
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肿瘤动物模型的构建
第一类是皮下移植瘤
顾名思义，这种模型的建立是将肿瘤细胞或肿瘤组织直接种植在小鼠的皮下。
种植的点也有讲究，一般选择血运淋巴回流丰富的腹股沟和腋窝。
可根据实验设计选择移植点，统一移植点的位置，除了遵守实验统一的条件外，待肿瘤成熟后收集肿瘤时留下照片证据也显得美观。
裸鼠（Balb/c 鼠，无毛发，T 淋巴细胞缺陷）是比较常见和常用的实验用鼠，尤其是在皮下移植瘤肿瘤模型的建立中起到重要作用。
裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的优点。
当然，这种肿瘤模型也有缺陷，即不能很准确的模拟正常人体肿瘤发生发展的过程。
肿瘤细胞移植时的简要步骤：
首先准备好要移植的肿瘤细胞（细胞量根据不同肿瘤略有不同，我们所用的前列腺癌细胞系每个移植点一般选择1x106左右；肿瘤细胞可与基质胶1:1 混匀后用 1 ml 注射器吸取，基质胶能够给肿瘤细胞提供营养环境，有助于肿瘤细胞生长）。
戴无菌手套后，将小鼠用左手大拇指和食指捏住颈部皮肤，然后将鼠尾用左手无名指和小指固定于左手大鱼际。
将腋窝或腹股沟用75% 酒精消毒 3 次。
右手持吸有肿瘤细胞和基质胶混合液的注射器，在腹股沟或腋窝的位置，45 度斜角进针，注意不要突破腹膜，将针头保持于皮下位置。
然后近水平位置将针头几乎完全插入皮下，将混有基质胶的肿瘤细胞注射入皮下（肿瘤细胞量约1x106），快速退针，左手食指轻压针孔约1 min 后将小鼠放回饲养笼中，注意将小鼠侧放于垫料上，防止其不适呕吐时呕吐物误入呼吸道引起窒息。
2～3 h 后观察小鼠是否苏醒。
如果是利用肿瘤组织（人体肿瘤标本或小鼠移植瘤传代）建立裸鼠皮下移植瘤模型，则需要首先将肿瘤组织用无菌PBS（或1640 培养基）洗涤 3 次，然后在无菌平皿上切成或用无菌剪刀剪成<1 mm3 体积的小块（种植前可裹基质胶）备用。
将小鼠用水合氯醛麻醉后平卧于解剖板上，四肢用胶带固定，将腋窝或腹股沟用75% 酒精消毒3 次，然后用眼科剪剪开约0.5 cm 小口，小镊子将皮下筋膜与皮肤分开，然后将肿瘤组织放入贴近腹股沟或腋窝的深部，每个位置放置2～3 块肿瘤组织，注意不同组间统一放置肿瘤组织块数以保持一致。
然后缝合皮肤，消毒后将小鼠侧卧位放置于饲养笼的垫料上。
2～3 h 后观察小鼠是否苏醒。
影响皮下移植瘤肿瘤形成因素：
1. 移植肿瘤细胞的生长状态：肿瘤细胞应选取传代后汇合度达60%～80% 为最理想状态，此时细胞生长进入对数期，生长速度最快，状态最为理想，易于形成移植瘤。
2.肿瘤细胞收集后种植到小鼠皮下不宜时间过长，应尽快种植到小鼠体内，我们一般在
2 h 内完成。
3. 裹有基质胶的肿瘤细胞种植比单纯的肿瘤细胞种植更易成瘤。
基质胶为肿瘤细胞在接受宿主营养之前提供充足营养环境，起到桥梁的作用。
4. 肿瘤组织移植种植时，应将肿瘤组织切成1 mm3 的小块，过小或过大均不利于肿瘤形成，组织块过大时不利于肿瘤组织中的肿瘤细胞接触新的环境生长，组织块过小时则肿瘤细胞过少，大部分在切块时破坏，均不利于肿瘤形成。
另外从肿瘤组织离体到种植到小鼠皮下不宜时间过长，我们一般在 4 h 内完成移植种
植。
第二类是肾被膜下移植瘤模型
肾被膜下血运较为丰富，比较适合那些对肿瘤营养环境要求苛刻的肿瘤细胞。
用于肾被膜下移植瘤的小鼠主要是NOD-SCID 鼠（SCID 鼠与非肥胖糖尿病鼠（nonobese diabetic,NOD）杂交而来，T 和B 淋巴细胞、抗原呈递细胞、循环组分及部分NK 细胞缺陷），这种小鼠表型为白色毛发小鼠，对于饲养条件较为苛刻，需要无菌的SPF 级饲养环境。
不易成瘤的肿瘤组织一般选择肿瘤肾被膜下种植移植瘤模型。
建立模型时，同样首先需要将肿瘤组织用无菌PBS（或1640 培养基）洗涤3 次，然后在无菌平皿上切成或用无菌剪刀剪成<1 mm3 体积的小块（种植前可裹基质胶）。
将小鼠用水合氯醛麻醉后俯卧于解剖板上，四肢用胶带固定，在肋脊角靠下的位置剪去约1.5 cm 直径的皮肤毛发以备皮。
75% 酒精消毒3 次，用眼科剪将皮肤剪开约0.5 cm 小口，依次分离皮肤、皮下、侧腹膜。
找到肾脏位置，小心仔细将肾脏提至皮肤切口出，用小尖镊子戳开肾被膜一小口，仔细将小块肿瘤组织送入肾被膜下，一般2～3 块。
然后将肾脏送回腹腔，依次缝合腹膜、皮下组织和皮肤。
消毒后将小鼠放回饲养笼内。
2～3 h 后观察是否苏醒。
影响肾被膜下移植瘤肿瘤形成因素：
1. 肿瘤组织处理是否恰当，除和皮下移植瘤相同处理外，应注意多裹些基质胶在肿瘤组织小块上，在塞进肾被膜下时应尽量注意尽量保持肾被膜完整。
我们曾单纯将肿瘤组织种植到肾被膜下，成瘤率较低，而裹有基质胶的肿瘤组织较易成瘤。
2. 注意手术时及时找到出血点并及时止血，侧腹膜解剖时损伤，误伤肾脏、肾脏血管等，如不及时处理，很容易引起出血过多导致失血性休克。
尤其是阴性出血不易察觉，在第二天查看小鼠情况时发现小鼠已死亡等。
3. 手术器械需灭菌消毒，操作台需要无菌环境，避免因感染引起术后小鼠死亡。
第三类是原位移植瘤模型
为了更好的模拟肿瘤的生长情况选择发生肿瘤的器官为移植点。
常用的小鼠仍为NOD-SCID 鼠。
采取开放手术打开暴露相应的发生肿瘤的对应的小鼠器官，将肿瘤组织或肿瘤细胞种植到器官内。
此方式因不易操作，且小鼠手术后死亡率较高，一般不常选用。
小鼠实验分组一般5 只以上为一组，分别设置实验组和对照组。
术前将小鼠于动物房饲养一周适应环境，术前术后称量记录体重。
小鼠移植瘤一般2 w 左右即可形成，可用游标卡尺记录瘤体长短径，每周3 次记录。
一般待瘤体体积为1 cmx1 cm 时处死小鼠，收集肿瘤接着在小鼠身上传代处理或进行其他实验验证。
小鼠实验肿瘤动物模型构建关键要细心，尤其是肿瘤细胞选择，肿瘤组织块处理上要仔细认真，这是影响模型成功建立的关键，还有移植手术时更要耐心细致，不要还没有建立就已经失败。