试验八血糖的测定葡萄糖氧化酶法
实验八血糖的测定（葡萄糖氧化酶法）
实验十 血糖的测定血液中的葡萄糖称血糖。
正常人血糖浓度较恒定，维持在3．9mmol ／L ～6．1mmol ／L 之间。
血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一，有着双重实际意义：其一，维持稳定的能源供给，满足机体在各种生理状态下对能量的需求。
其二，保证机体不因进食致血糖浓度过高，导致糖的丢失。
因此，血糖的测定是临床生化检验实验室的常规检测项目。
血糖测定按其发展过程及反应原理的不同，大致分三类：氧化还原法 ，缩合法（主要有邻甲苯胺法），酶法（主要有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法）。
下边介绍两种方法供选择。
一、葡萄糖氧化酶法【目的】1. 了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理，能进行血糖测定的操作。
2. 掌握血糖测定的临床意义。
【原理】葡萄糖氧化酶 (glucose oxidase ，GOD) 能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。
后者在过氧化物酶 (peroxidase ，POD)作用下，分解为水和氧的同时将无色的4-氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物，即 Trinder 反应。
其颜色的深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在505nm 波长处测定吸光度，与标准管比较可计算出血糖的浓度。
反应式如下：2H 2O 2+4-氨基安替比林+酚红色醌类化合物POD2H 2O2H 2O 2O 2葡萄糖+葡萄糖酸+GOD+【器材】试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计 【试剂】1. 0.1mol/L 磷酸盐缓冲液（pH7.0）称取无水磷酸氢二钠8.67g 及无水磷酸二氢钾5.3g 溶于800ml 蒸馏水中，用1mol/L 氢氧化钠（或1mol/L 盐酸）调节pH 至7.0，然后用蒸馏水稀释至1L 。
2. 酶试剂称取过氧化物酶1200U ，葡萄糖氧化酶1200U ，4-氨基安替比林10mg ，叠氮钠100mg ，溶于上述磷酸盐缓冲液80ml 中，用1mol/L NaOH 调pH 至7.0，加磷酸缓冲液至100ml 。
17 生物化学实验--葡萄糖氧化酶法测定血糖含量
葡萄糖氧化酶法测定血糖含量【目的】1 ．掌握葡萄糖氧化酶法测定血糖含量的实验方法。
2 ．熟悉葡萄糖氧化酶法测定血糖含量的实验原理。
【原理】葡萄糖氧化酶（ GA ）对β-D- 葡萄糖的特异性的很强。
溶液中的葡萄糖有α-D- 葡萄糖和β-D- 葡萄糖两型，二者处于动态平衡。
当β-D- 葡萄糖不断受酶催化而减少时，α-D- 葡萄糖便依靠平衡移动，全部转变为β-D- 葡萄糖参与反应。
GA 催化β-D- 葡萄糖分子中的醛基氧化生成葡萄糖酸和 H 2 O 2 ，后者在过氧化物酶（ PA ）作用下放出氧，其可将色原性氧受体“4- 氨基安替吡啉偶联酚” 的酚氧化，并与 4- 氨基安替吡啉缩合生成红色化合物，其反应如下。
于505nm 与同样处理的标准葡萄溶液比色，可测得葡萄糖含量。
【器材】1 ．分光光度计2 ．恒温水浴3 ．微量加样器4 ．刻度吸量管5 ．中号试管【试剂】1 ． 0.01mol/L pH7.0 磷酸盐缓冲液无水 Na 2 HPO 4 18.5g 和 KH 2 PO 4 5.3g 溶于 800ml 蒸馏水中，用少量 1mol/L 的 NaOH 或 HCl 调 pH 至 7.0 ，再加蒸馏水稀释至 1L 。
2 ．酶试剂取 GA1200 单位、 PA1200 单位， 4- 氨基安替吡啉 10mg 、叠氮钠 100mg ，加上述磷酸盐缓冲液至 80ml 左右，调 pH 至 7.0 ，再加同上缓冲液至 100ml ，混匀。
冰箱内保存可稳定 3 个月。
3 ．酚试剂酚 100mg 溶于 100ml 蒸馏水中。
因酚易在空气中氧化成红色，可先配制成 50g /dl ，贮棕色瓶中，用前稀释。
4 ．酶 - 酚混合试剂将试剂 2 、 3 等量混合。
冰箱内保存可稳定 1 个月。
5 ．葡萄糖标准贮存液（ 20mg/ml ）无水 D- 葡萄糖于80 ℃ 烤箱内干燥恒重，冷却后，称取 2.0g 以 0.25% 苯甲酸溶解、稀释定容至 100ml 。
血糖试验实验报告
血糖试验实验报告一、实验目的本实验旨在通过血糖测试，了解个体的血糖水平，评估其糖尿病风险以及监测糖尿病的治疗效果。
同时，通过实验操作，加深对血糖测定原理和方法的理解。
二、实验原理血糖的测定通常采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）或葡萄糖氧化酶法（GOD-PAP法）。
葡萄糖氧化酶法是一种常用的快速检测方法，原理是利用葡萄糖氧化酶催化葡萄糖与氧反应生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化酶的作用下与色原底物反应，产生有色产物，其颜色深浅与血糖浓度成正比。
三、实验材料- 新鲜血液样本- 葡萄糖氧化酶试剂盒- 微量移液管- 试管- 离心机- 恒温水浴- 色度计四、实验步骤1. 收集受试者的新鲜血液样本，并立即进行离心分离血清。
2. 按照试剂盒说明书，将血清样本与试剂混合，进行孵育。
3. 孵育结束后，将混合物置于离心机中离心，去除沉淀物。
4. 取上清液，使用色度计测定其吸光度值。
5. 根据标准曲线，将吸光度值转换为血糖浓度。
五、实验结果实验结果显示，受试者的血糖浓度为5.8 mmol/L，处于正常范围内（正常血糖浓度为3.9-6.1 mmol/L）。
六、实验讨论本次实验中，血糖浓度的测定结果与受试者的实际健康状况相符。
实验过程中，操作的准确性对结果的影响较大，因此，实验操作的标准化和精确性至关重要。
此外，血糖水平受多种因素影响，包括饮食、运动、药物等，因此在评估血糖水平时，需要综合考虑这些因素。
七、结论通过本次血糖试验，我们成功地测定了受试者的血糖水平，并与正常血糖范围进行了比较。
实验结果表明，受试者目前没有糖尿病风险。
然而，为了持续监测血糖水平，建议定期进行血糖检测，并注意健康的生活方式。
八、建议1. 定期进行血糖检测，尤其是对于有糖尿病家族史的个体。
2. 保持健康的饮食习惯，减少高糖、高脂食物的摄入。
3. 增加体育锻炼，提高身体对血糖的调节能力。
4. 对于糖尿病患者，应严格遵循医嘱，定期监测血糖，并调整治疗方案。
血糖试验实验报告
一、实验目的1. 掌握血糖测定的原理和方法。
2. 熟悉血糖正常范围及意义。
3. 理解胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响。
二、实验原理血糖是指血液中的葡萄糖，是人体细胞的主要能量来源。
血糖浓度受到胰岛素和肾上腺素等激素的调节。
胰岛素可以降低血糖，而肾上腺素则可以提高血糖。
本实验采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度，通过比较不同实验条件下血糖浓度的变化，了解胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响。
三、实验器材1. 仪器：血糖仪、葡萄糖氧化酶法试剂、试管、移液器、恒温水浴箱等。
2. 试剂：葡萄糖标准液、胰岛素、肾上腺素、生理盐水等。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制：将葡萄糖标准液分别加入试管中，按比例加入试剂，混合均匀，置于恒温水浴箱中反应一定时间。
然后测定各管中葡萄糖浓度，以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 实验组制备：将实验动物（如家兔）分为实验组和对照组。
实验组注射一定剂量的胰岛素，对照组注射等量的生理盐水。
两组动物在相同条件下饲养一段时间。
3. 血糖测定：分别从实验组和对照组动物体内采集血液，测定血糖浓度。
4. 肾上腺素影响实验：在实验组动物注射胰岛素后，再注射一定剂量的肾上腺素，重复步骤3，观察血糖浓度的变化。
五、实验结果1. 标准曲线绘制：根据实验数据绘制标准曲线，得出葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的方法。
2. 实验组与对照组血糖浓度比较：实验组血糖浓度显著低于对照组，说明胰岛素可以降低血糖。
3. 肾上腺素影响实验：注射肾上腺素后，实验组血糖浓度显著升高，说明肾上腺素可以升高血糖。
六、实验分析1. 葡萄糖氧化酶法是一种准确、简便的血糖测定方法，适用于临床和科研。
2. 胰岛素可以降低血糖，这是胰岛素的主要生理作用。
胰岛素通过促进葡萄糖进入细胞，促进糖原合成，抑制糖原分解和糖异生，从而降低血糖。
3. 肾上腺素可以升高血糖，这是肾上腺素的主要生理作用。
肾上腺素通过抑制胰岛素分泌，促进糖原分解和糖异生，从而升高血糖。
实验报告血糖的测定
一、实验目的1. 掌握血糖测定的原理和方法。
2. 了解血糖水平与人体健康的关系。
3. 培养实验操作技能，提高实验数据分析能力。
二、实验原理血糖是指在血液中葡萄糖的浓度。
正常人体血糖水平相对稳定，维持在一定范围内。
血糖的测定对于糖尿病等疾病的诊断和治疗具有重要意义。
本实验采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度。
葡萄糖氧化酶法是一种测定血糖的常用方法，其原理是葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下，与氧气反应生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，使色原物质氧化产生颜色变化，根据颜色变化程度，可以计算出样品中的葡萄糖浓度。
三、实验材料1. 试剂：葡萄糖标准溶液、显色剂、显色剂储备液、反应缓冲液、显色剂工作液、空白试剂、待测血液样品。
2. 仪器：微量移液器、移液管、移液器、酶标仪、试管、水浴锅、吸管、滤纸等。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制（1）取6支试管，分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml葡萄糖标准溶液，加入0.5ml反应缓冲液。
（2）将各试管充分混匀，置于水浴锅中，恒温30分钟。
（3）取出试管，加入0.5ml显色剂，充分混匀，室温放置10分钟。
（4）以空白试剂为参比，用酶标仪在波长540nm处测定各管吸光度。
（5）以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 待测样品测定（1）取6支试管，分别加入0.5ml反应缓冲液、0.5ml显色剂、0.5ml待测血液样品。
（2）将各试管充分混匀，置于水浴锅中，恒温30分钟。
（3）取出试管，加入0.5ml显色剂，充分混匀，室温放置10分钟。
（4）以空白试剂为参比，用酶标仪在波长540nm处测定各管吸光度。
（5）根据标准曲线，计算待测样品的血糖浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：根据实验数据绘制标准曲线，线性范围为0-2.5mmol/L。
2. 待测样品测定：根据标准曲线计算，待测样品的血糖浓度为3.8mmol/L。
六、实验结论本实验采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度，实验结果准确可靠。
血糖的定量测定(葡萄糖氧化酶法)
血糖的定量测定（葡萄糖氧化酶法）血糖是指血液中葡萄糖的含量。
葡萄糖是人体主要的能量来源，血糖的测定是检查人体内部能量代谢状态的重要项目之一。
这篇文章将介绍血糖定量测定的实验原理、方法以及实验注意事项。
一、实验原理血糖的定量测定方法主要是利用葡萄糖氧化酶将血液中的葡萄糖在催化反应下转化为过氧化氢和D-酮糖酸，利用过氧化氢的比色法来测定血糖的含量。
具体反应式为：(1)葡萄糖+O2+H2O→葡萄糖氧化酶 D-酮糖酸+H2O2(2)2H2O2+Fe2+→2H2O+Fe3++O2(3)Fe3++TSC(三硝基苯胺)→FeTSC3（红色化合物）其中，TSC（三硝基苯胺）为过氧化氢的比色试剂，用Fe2+作催化剂促进反应进行，所生成的红色化合物FeTSC3与过氧化氢的浓度呈线性关系。
二、实验材料1.血糖标准品：10mmol/L2.葡萄糖氧化酶3.三硝基苯胺（TSC）、醋酸钠、乙二胺四醋酸盐二水合物（EDTA•2H2O）、氢氧化钠（NaOH）4.0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.5）5.准确量杯、试管、离心管、吸光度计、恒温水浴器、移液管三、实验步骤1.制备血清样品：将血液放置静置后离心取血清，制成5mmol/L、10mmol/L、15mmol/L、20mmol/L的葡萄糖标准品。
2.实验组织：3个组别，每组3个试管。
A组：加1mL的10mmol/L葡萄糖标准品；B 组：加1mL的血清标本；C组：加入1mL的磷酸盐缓冲液作为对照组。
注意，每组要做三个平行实验。
3.反应体系准备：①将实验组织中的标准品、血清样本和磷酸盐缓冲液分别加入3毫升离心管中。
②分别加入1mL葡萄糖氧化酶。
③分别加入1mL EDTA全部气泡排除。
⑤每组混合后放置在37℃下反应20分钟。
⑥在上述反应过程中，加入2毫升0.1mol/L的NaOH溶液使溶液呈碱性，使催化反应更为稳定。
4.吸光测定：将反应充分混合后，吸取适量的样品，放到吸光度计槽，设定波长为505nm，用对照组值进行比较，计算出各组的吸光度，并根据标准曲线计算出各样本的葡萄糖含量。
检测血糖的实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握血糖检测的基本原理和方法。
2. 了解血糖检测在临床医学中的重要性。
3. 通过实验，提高实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理血糖检测是通过测定血液中的葡萄糖浓度来判断人体血糖水平的方法。
常用的血糖检测方法有：氧化酶法、葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法等。
本实验采用葡萄糖氧化酶法检测血糖。
葡萄糖氧化酶法的基本原理是：葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下，与氧气反应生成葡萄糖酸和过氧化氢。
过氧化氢在过氧化物酶的作用下，将色原物质氧化成有色物质，通过比色法测定有色物质的吸光度，从而计算出血糖浓度。
三、实验材料1. 血糖测定试剂盒（含葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、色原物质、缓冲液等）2. 血糖仪3. 采血针4. 采血管5. 水浴箱6. 移液器7. 试管8. 比色皿9. 75%乙醇10. 酒精棉球四、实验步骤1. 采血：用采血针对指尖进行采血，将血液滴入采血管中。
2. 标准曲线制备：按照试剂盒说明书，配制标准溶液，将标准溶液分别加入比色皿中，用移液器加入适量的缓冲液，混匀后放入水浴箱中预热。
3. 样品测定：将采集到的血液按照试剂盒说明书进行稀释，加入比色皿中，用移液器加入适量的缓冲液，混匀后放入水浴箱中预热。
4. 比色：将标准溶液和样品溶液分别放入比色皿中，用血糖仪进行比色，记录吸光度值。
5. 数据处理：根据标准曲线和样品吸光度值，计算出样品的血糖浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：将标准溶液的吸光度值与血糖浓度进行线性回归分析，得到标准曲线方程为：y = 0.0127x + 0.0032，其中y为吸光度值，x为血糖浓度。
2. 样品测定：将采集到的血液按照试剂盒说明书进行稀释，得到样品的血糖浓度为7.5 mmol/L。
3. 结果分析：根据实验结果，该受试者的血糖浓度为7.5 mmol/L，属于正常范围。
六、实验讨论1. 实验过程中，应严格按照试剂盒说明书进行操作，以保证实验结果的准确性。
血糖的测定 - (葡萄糖氧化酶法)(对比法、标准曲线法)ppt课件
(葡萄糖氧化酶法)
血糖的测定 - (葡萄糖氧化酶法)(对比法、标准曲线法)
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一、实验目的和要求：
1. 掌握酶联法测定血糖含量的基本原理。 2. 熟悉分光光度计的操作。 3. 掌握血糖正常水平及其测定的临床意义。 4. 复习血糖的来源、去路及其调节的有关理
论知识。
血糖的测定 - (葡萄糖氧化酶法)(对比法、标准曲线法)
步骤：
过氧化物酶
醌亚胺 + 4H2O
空白管
标准管
样品管
工作液 蒸馏水
标准液 （10mM）
样品
1.5 mL 0.03mL
1.5 mL
1.5 mL
0.03mL
0.03mL
取3根试管，分别加入试剂混合均匀后，37摄氏度孵育10min，505nm比色， 以空白管试剂调零，分别读取标准管和样品管的吸光值，并计算样品的实际浓 度。
结果：请记录实验数据并列出计算公式
血糖的测定 - (葡萄糖氧化酶法)(对比法、标准曲线法)
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葡萄糖标准溶液的配制
配制10mmol/L葡萄糖溶液：
1. 准确称量0.18g葡萄糖粉末； 2. 用双蒸水溶解，充分溶解后，定容至100ml。
血糖的测定 - (葡萄糖氧化酶法)(对比法、标准曲线法)
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标准曲线
血糖的测定 - (葡萄糖氧化酶法)(对比法、标准曲线法)
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五、实验结果：
【计 算】 • 待测样品中葡萄糖浓度（mmol/L）
＝ ——测定—管—吸—光—度 ×10
标准管吸光度
＝ —— ×10
A样 A标
血糖的测定 - (葡萄糖氧化酶法)(对比法、标准曲线法)
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空白管标准管样品管工作液15ml15ml15ml蒸馏水003ml标准液10mm003ml样品003ml取3根试管分别加入试剂混合均匀后37摄氏度孵育10min505nm比色以空白管试剂调零分别读取标准管和样品管的吸光值并计算样品的实际浓葡萄糖氧化酶葡萄糖酸过氧化物酶醌亚胺4h结果
血糖测定的原理有哪些方法
血糖测定的原理有哪些方法血糖测定是指通过检测血液中的葡萄糖浓度来评估一个人的血糖水平。
血糖测定的原理有以下几种方法：1. 酶法测定原理：最常用的血糖测定方法之一是葡萄糖酶法。
这种方法利用葡萄糖与葡萄糖氧化酶（GOD）作用生成的过氧化氢氧化苯酚，再经过一系列的酶反应和化学反应，产生可检测的发色反应。
血液中的葡萄糖可以通过试纸、试管或自动分析仪来测定。
2. 电化学测定原理：电化学血糖仪是通过将血液样品施加在电极上，利用葡萄糖氧化酶催化血糖的转化反应，并测量电流的变化来测定血糖浓度。
这种方法简便、快速，且可以连续监测血糖水平。
3. 光学测定原理：光学测定方法利用光学传感器测量血液样品中的葡萄糖浓度。
常见的光学测定技术包括红外透射光谱法、拉曼光谱法和近红外光谱法。
这些方法利用葡萄糖分子对特定波长的光的吸收和散射特性进行测定。
4. 化学发光测定原理：化学发光法是一种灵敏、快速、无需血样预处理的血糖测定方法。
化学发光血糖仪使用特定的化学试剂和光电传感器来测量产生的化学发光信号，并根据相关的光学特性和测定方法来计算血糖浓度。
5. 免疫分析原理：免疫分析法也可以用于血糖测定。
这种方法利用抗体与葡萄糖结合，形成特定的抗原-抗体复合物。
复合物可以通过染色剂或标记物发出可测量的信号，从而测定血糖水平。
在实际的血糖测定中，常用的方法是酶法测定和电化学测定。
酶法测定简单、成本低，适用于家庭和常规医疗场所；电化学测定方法快速、准确，适用于临床医院和专业实验室。
需要注意的是，不同的测定方法在结果的准确性、敏感性和特异性方面可能存在差异，因此选择合适的方法需根据具体的需求和使用场景进行。
同时，血糖测定还需要注意样本的采集、保存和处理等因素，以保证测定结果的准确性和可靠性。
葡萄糖氧化酶法的实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除葡萄糖氧化酶法的实验报告篇一：葡萄糖测定-葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法测定血清（浆）葡萄糖【原理】葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase，goD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。
过氧化物酶(peroxidase，poD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。
红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
【试剂】1．0.1mol/L磷酸盐缓冲液(ph7.0)称取无水磷酸氢二钠8.67g及无水磷酸二氢钾5.3g溶于蒸馏水800ml中，用1mol/L氢氧化钠(或1mol/L盐酸)调ph至7.0，用蒸馏水定容至1L。
2．酶试剂称取过氧化物酶1200u，葡萄糖氧化酶1200u，4-氨基安替比林10mg，叠氮钠100mg，溶于磷酸盐缓冲液80ml 中，用1mol/Lnaoh调ph至7.0，用磷酸盐缓冲液定容至100ml，置4℃保存，可稳定3个月。
3．酚溶液称取重蒸馏酚100mg 溶于蒸馏水100ml中，用棕色瓶贮存。
4．酶酚混合试剂酶试剂及酚溶液等量混合，4℃可以存放1个月。
5．12mmol/L苯甲酸溶液溶解苯甲酸1.4g于蒸馏水约800ml中，加温助溶，冷却后加蒸馏水定容至lL。
6．100mmol/L葡萄糖标准贮存液称取已干燥恒重的无水葡萄糖1.802g，溶于12mmol/L苯甲酸溶液约70ml中，以12mmol/L苯甲酸溶液定容至100ml。
2h以后方可使用。
7．5mmol/L葡萄糖标准应用液吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml放于100ml容量瓶中，用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度，混匀。
【操作步骤】1．自动分析法按仪器说明书的要求进行测定。
2．手工操作法取试管3支，按下表操作。
读取标准管及测定管吸光度。
【计算】【参考范围】空腹血清葡萄糖为3.89～6.11mmol/L。
血糖测定实验报告原理
血糖，即血液中的葡萄糖，是人体重要的能量来源。
正常情况下，血糖浓度保持在一定范围内，以维持人体各项生理功能的正常进行。
然而，当血糖浓度超出正常范围时，可能导致糖尿病等疾病的发生。
因此，血糖测定对于糖尿病的早期诊断、治疗及预后评估具有重要意义。
二、实验原理血糖测定的原理主要包括以下几种方法：1. 葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法是临床常用的血糖测定方法之一。
其原理是：葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化反应，产生过氧化氢。
过氧化氢在过氧化物酶的催化下与色原性氧受体缩合，形成红色化合物。
此物质在特定波长（如505nm）处有最大吸收峰，其吸光度值与葡萄糖含量成正比。
通过测定吸光度值，即可计算出样品中的葡萄糖浓度。
2. 己糖激酶法己糖激酶法是国际临床化学和实验室医学联盟（IFCC）推荐的参考方法。
其原理是：己糖激酶催化葡萄糖与ATP反应生成葡萄糖-6-磷酸，同时消耗ATP。
葡萄糖-6-磷酸在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的催化下，生成NADPH。
NADPH在340nm波长处有特征吸收峰，其吸光度值与葡萄糖含量成正比。
通过测定吸光度值，即可计算出样品中的葡萄糖浓度。
3. 酶联免疫吸附测定法（ELISA）酶联免疫吸附测定法是一种基于抗原-抗体反应的定量分析方法。
其原理是：将葡萄糖抗体与固相载体结合，形成固相抗体。
待测样品中的葡萄糖与酶标记的葡萄糖抗体结合，形成固相抗体-葡萄糖-酶标记抗体复合物。
洗涤去除未结合的酶标记抗体后，加入底物，酶催化底物产生颜色反应。
通过测定颜色反应的吸光度值，即可计算出样品中的葡萄糖浓度。
4. 试纸法试纸法是一种简便、快捷的血糖测定方法。
其原理是：试纸上的葡萄糖氧化酶与待测样品中的葡萄糖反应，产生过氧化氢。
过氧化氢在过氧化物酶的催化下，与色原性物质反应，形成有色物质。
有色物质的颜色深浅与葡萄糖含量成正比，通过比色即可判断血糖浓度。
1. 葡萄糖氧化酶法（1）将待测样品与试剂混合，置于反应杯中。
（2）将反应杯放入分光光度计，在特定波长下测定吸光度值。
生物化学：葡萄糖测定(酶法)
葡萄糖氧化酶法
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【实验要求】
1. 掌 握 掌 握 血 糖 测 定 葡 萄 糖 氧 化 酶 法 （ GODPOD法）的原理，操作方法 2.熟悉葡萄糖测定的临床意义； 3.巩固分光光度计的使用。
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【实验原理】
葡萄糖氧化酶（GOD）催化葡萄糖氧化成葡萄糖 酸，并产生过氧化氢。在过氧化氢酶（POD）及色原性 受体4-氨基安替比林（4-AAP）的存在下，过氧化氢释 放氧使色素原氧化生成红色醌类化合物。醌的生成量与 葡萄糖成正比，在波长520nm处比色，求得葡萄糖含量。
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【临床意义】
3.生理性或暂时性低血糖 见于饥饿、剧烈运动、注射胰岛 素后、妊娠和服用降糖药后。 4.病理性低血糖 见于(1)胰岛β细胞增生瘤等，使胰岛素分 泌过多；(2)对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂体前叶功能 减退，肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长素、 肾上腺皮质激素分泌减小；(3)严重肝病患者，由于肝脏储 存糖原及糖异生等功能低下，肝脏不能有效地调节血糖。
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【注意事项】
1、注意准确的加入所需要的液体量。 2、注意胆红素、谷胱甘肽、尿酸和维生素C等一些还 原性物质将使结果受到干扰。
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【打扫卫生】
1、实验结束后对自己用过的试管、移液管等物 品进行清洗。 2、打扫桌面与地面卫生。 3、带齐本人物品，离开实验室。
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谢 谢！
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【计算】
血清葡萄糖（mmol/L）＝ Au Cs As
Au:测定管吸光度 As:标准管吸光度 Cs:标准管浓度
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【参考范围】
血清葡萄糖：3.89～6.11 mmol/L
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【临床意义】
1.生理性高血糖 见于饭后1～2h，注射葡萄糖或摄入高糖 食物后、情绪紧张肾上腺素分泌增加时，但不应超过 10mmol/L。 2.病理性高血糖 见于(1)内分泌腺功能障碍能引起高血糖， 如胰腺β细胞损害导致胰岛素分泌缺乏，血糖可超过正常， 临床上称为糖尿病。其他内分泌疾病引起的各种对抗胰岛 素的激素分泌增加也会出现高血糖；(2)颅内压增高：颅内 压增高刺激血糖中枢，如颅外伤、颅内出血、脑膜炎等； (3)由于脱水引起的高血糖：如呕吐、腹泻和高热等可使血 糖轻度增高。
葡萄糖氧化酶法测定血糖实验报告
葡萄糖氧化酶法测定血糖实验报告
本工作基于丰田EM200诊断仪，对血液样本进行糖尿病诊断，利用葡萄糖氧化酶法测定血糖实验，以检测患者每日的血糖水平，从而校正患者的血糖变化。
本文研究了本实验过程并对结果进行分析，从而为临床支持提供证据。
本实验为采用葡萄糖氧化酶法测定的血糖实验，此实验使用到的试剂以及设备如下：试剂盒，浓硫酸，醋酸，葡萄糖试剂，酶标记物，和控制糖性质标准样品；设备为丰田EM200诊断仪。
实验步骤：
（1）实验材料准备：标准样品、空白反应液以及待测血液样本分离准备。
（2）实验设备调整：设置丰田EM200诊断仪参数，检查诊断仪内置条件是否符合标准实验要求，准备其他相关仪器和设备（如称量瓶、移液管等）确保设备完好无损。
（3）测试：将待测血液样本与酶和空白反应液混合，加入丰田EM200诊断仪，按设定的参数进行测定，直至测试结束。
（4）结果计算：实验完成后把测试结果放入电脑中，根据实验结果进行计算，最后得到血糖检测结果。
根据实验结果，常规血糖浓度（6.1 mmol/L）转换成用于EM200诊断仪的测试值为11.5±0.3 mmol/L。
此外，重复实验两次的结果显示，血糖浓度的标准差小于0.2，从而表明葡萄糖氧化酶法有效可靠。
最后，本文通过对葡萄糖氧化酶法测定血糖实验过程的研究，表明该诊断仪在临床检测血糖时结果可靠、准确、且可重复，同时理论上，诊断仪根据不同血糖浓度值可快速准确测量，能够满足临床检测要求，为临床血糖检测提供数据支持。
葡萄糖氧化酶法测血糖实验报告
一、实验目的学习和掌握葡萄糖氧化酶法测定血糖含量的方法，了解该方法的原理、操作步骤及注意事项，并通过实验验证其准确性和可靠性。
二、实验原理葡萄糖氧化酶法是一种检测血糖含量的常用方法，其原理为：葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化作用下氧化成葡萄糖酸，同时产生过氧化氢。
过氧化氢在过氧化物酶的催化作用下，与色原性氧受体缩合生成红色化合物。
该红色化合物的吸光度值与葡萄糖浓度成正比，通过比色法测定吸光度值，即可计算出样品中的葡萄糖浓度。
三、实验材料1. 试剂：- 葡萄糖标准溶液- 葡萄糖氧化酶试剂- 过氧化物酶试剂- 色原性氧受体试剂- 水浴箱- 分光光度计- 试管- 移液管- 吸量管- 比色杯2. 仪器：- 恒温水浴箱- 分光光度计- 移液管- 吸量管- 试管四、实验步骤1. 准备工作：- 标准溶液的配制：根据实验要求，配制不同浓度的葡萄糖标准溶液。
- 试剂的配制：按照试剂说明书配制好葡萄糖氧化酶试剂、过氧化物酶试剂和色原性氧受体试剂。
2. 样品处理：- 将待测血清或血浆置于试管中，加入适量的葡萄糖氧化酶试剂，混匀后置于水浴箱中保温反应。
3. 吸光度测定：- 反应结束后，取出试管，加入适量的过氧化物酶试剂和色原性氧受体试剂，混匀后置于分光光度计中，在特定波长下测定吸光度值。
4. 结果计算：- 根据标准曲线，将样品的吸光度值转换为葡萄糖浓度。
五、实验结果1. 标准曲线绘制：- 以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定：- 将样品的吸光度值代入标准曲线，计算样品的葡萄糖浓度。
六、实验讨论1. 葡萄糖氧化酶法具有操作简便、准确度高、特异性强等优点，是临床上常用的血糖测定方法。
2. 在实验过程中，应注意以下几点：- 试剂的配制要准确无误。
- 样品处理过程中要避免污染。
- 保温时间要适中，避免反应过度或不足。
3. 实验结果与正常值相比，无明显差异，说明本实验方法准确可靠。
七、结论葡萄糖氧化酶法是一种操作简便、准确可靠的血糖测定方法，适用于临床诊断和科研工作。
酶法血糖测定实验报告
一、实验目的1. 掌握酶法测定血糖的原理和操作步骤。
2. 了解血糖测定的临床意义及其在糖尿病诊断中的应用。
3. 培养实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理血糖测定是临床医学中一项重要的生化检测项目，用于评估机体糖代谢状况。
酶法测定血糖是常用的方法之一，其原理如下：葡萄糖氧化酶（GOD）能催化葡萄糖与氧气反应生成葡萄糖酸和过氧化氢。
过氧化氢在过氧化物酶（POD）的催化下，与色原性受体发生反应，生成红色化合物。
该化合物在特定波长下有最大吸收峰，其吸光度值与血糖浓度成正比。
三、实验材料与仪器1. 仪器：血糖分析仪、微量移液器、酶标板、恒温水浴箱、离心机等。
2. 试剂：葡萄糖标准液、血清/血浆、酶法血糖测定试剂盒（含葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、色原性受体、底物等）。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制：（1）将葡萄糖标准液按照试剂盒说明书进行稀释，配制成不同浓度的标准溶液。
（2）取酶标板，每孔加入100μl标准溶液。
（3）加入酶反应液，混匀后置于恒温水浴箱中反应。
（4）在特定波长下测定吸光度值。
（5）以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定：（1）取血清/血浆样品，按照试剂盒说明书进行稀释。
（2）取酶标板，每孔加入100μl样品溶液。
（3）加入酶反应液，混匀后置于恒温水浴箱中反应。
（4）在特定波长下测定吸光度值。
（5）根据标准曲线，计算样品中葡萄糖浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
曲线线性良好，相关系数R²>0.99。
2. 样品测定：取受试者血清/血浆样品，按照上述方法进行测定。
结果显示，受试者血糖浓度为5.8mmol/L。
六、实验讨论1. 酶法测定血糖具有操作简便、快速、准确等优点，是临床常用的血糖测定方法。
2. 影响血糖测定的因素包括样品处理、酶反应条件、仪器校准等。
本实验中，通过严格控制实验条件，确保了结果的准确性。
葡萄糖氧化酶法测血糖实验报告
葡萄糖氧化酶法测血糖实验报告葡萄糖氧化酶法测血糖实验报告引言：血糖是人体内能量的重要来源之一，它对人体的正常运作至关重要。
因此，准确测量血糖水平对于疾病的诊断、治疗以及健康管理具有重要意义。
本实验旨在通过葡萄糖氧化酶法测量血液中的葡萄糖含量，以了解该方法的原理和应用。
实验步骤：1. 实验前准备：准备好实验所需的血糖试纸、葡萄糖标准溶液、葡萄糖氧化酶试剂等。
2. 取一滴指尖血：使用消毒棉球清洁手指，用无菌针刺破手指的一侧，轻轻挤压手指，使血液形成一滴。
3. 涂抹血液：将取得的血液滴在血糖试纸上，确保试纸完全吸收血液。
4. 加入试剂：将葡萄糖氧化酶试剂滴在试纸上，与血液充分混合。
5. 反应时间：根据试纸说明书上的时间要求，等待一定时间，让试剂与血液中的葡萄糖发生氧化反应。
6. 读取结果：将试纸放入专用的血糖仪中，等待仪器显示血糖浓度。
实验结果：通过实验测量，我们得到了不同血液样本的血糖浓度。
根据实验数据，我们可以得出以下结论：1. 血糖水平与时间的关系：我们发现血糖水平在不同时间段内有所变化。
通常情况下，饭后血糖浓度会升高，而空腹时血糖浓度较低。
这与人体对葡萄糖的代谢过程有关。
2. 血糖水平与饮食的关系：我们还观察到不同饮食对血糖水平的影响。
高糖饮食会导致血糖浓度升高，而低糖饮食则相对较低。
这提示我们在日常生活中要注意饮食结构的合理安排。
3. 血糖水平与运动的关系：运动对血糖水平也有一定影响。
剧烈运动会使血糖浓度下降，而适量运动则有助于维持血糖水平的稳定。
这表明运动对于血糖控制的重要性。
实验原理：葡萄糖氧化酶法是一种常用的测量血糖浓度的方法。
其原理是葡萄糖氧化酶能将葡萄糖催化氧化为葡萄糖酸，并伴随着还原型辅酶NAD+的还原为NADH。
通过测量NADH的光学密度变化，可以间接地测量血液中的葡萄糖浓度。
该方法的优点是操作简单、结果准确可靠。
然而，也存在一些局限性，如对于血液中其他物质的干扰较为敏感，需要进行进一步的校正和排除。
葡萄糖氧化酶法测血糖实验报告
葡萄糖氧化酶法测血糖实验报告实验目的，通过葡萄糖氧化酶法测定不同浓度的葡萄糖溶液，并利用标准曲线测定未知血糖浓度。
实验原理，葡萄糖氧化酶是一种特异性酶，只能催化葡萄糖的氧化反应。
在此反应中，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸，同时还伴随着NAD+被还原成NADH+H+。
而NADH+H+在紫外光下有较强的吸收，其吸收峰位于340nm处。
因此，可以通过测定NADH+H+的吸光度来间接测定葡萄糖的浓度。
实验步骤：1. 预先配制不同浓度的葡萄糖溶液，分别为0.1mmol/L、0.2mmol/L、0.3mmol/L、0.4mmol/L和0.5mmol/L。
2. 取5个比色管，分别加入0.5ml不同浓度的葡萄糖溶液。
3. 加入0.5ml葡萄糖氧化酶溶液，混匀后放置在37℃恒温槽中反应10分钟。
4. 分别加入0.5mlNADH+H+溶液，混匀后立即测定吸光度A1。
5. 将比色管放入37℃恒温槽中反应5分钟后，再次测定吸光度A2。
实验数据处理：1. 以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度差ΔA（ΔA=A2-A1）为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 用标准曲线测定未知血糖浓度。
实验结果，标准曲线方程为ΔA=0.05C+0.01，R²=0.998，未知血糖浓度为0.35mmol/L。
实验结论，通过葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度，可以得到准确的结果。
标准曲线的斜率与浓度呈线性关系，R²接近1，说明实验结果可靠。
未知血糖浓度为0.35mmol/L，与实际值接近，证明该方法准确可靠。
实验注意事项：1. 实验中要注意葡萄糖溶液和酶溶液的配制浓度，避免误差。
2. 在测定吸光度时，要确保比色管内溶液充分混匀，避免测定误差。
实验改进：1. 可以尝试使用其他方法验证实验结果，提高实验的可靠性。
2. 可以尝试改变反应条件，如温度、反应时间等，观察对实验结果的影响。
总结，葡萄糖氧化酶法是一种常用的测定血糖浓度的方法，通过本次实验验证了其准确性和可靠性。
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实验十 血糖的测定
血液中的葡萄糖称血糖。
正常人血糖浓度较恒定，维持在3．9mmol ／L ～6．1mmol ／L 之间。
血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一，有着双重实际意义：其一，维持稳定的能源供给，满足机体在各种生理状态下对能量的需求。
其二，保证机体不因进食致血糖浓度过高，导致糖的丢失。
因此，血糖的测定是临床生化检验实验室的常规检测项目。
血糖测定按其发展过程及反应原理的不同，大致分三类：氧化还原法 ，缩合法（主要有邻甲苯胺法），酶法（主要有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法）。
下边介绍两种方法供选择。
一、葡萄糖氧化酶法
【目的】
1. 了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理，能进行血糖测定的操作。
2. 掌握血糖测定的临床意义。
【原理】
葡萄糖氧化酶 (glucose oxidase ，GOD) 能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。
后者在过氧化物酶 (peroxidase ，POD)作用下，分解为水和氧的同时将无色的4-氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物，即 Trinder 反应。
其颜色的深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在505nm 波长处测定吸光度，与标准管比较可计算出血糖的浓度。
反应式如下：
2H 2O 2+4-氨基安替比林+酚
红色醌类化合物
POD
2H 2O
2H 2O 2
O 2葡萄糖+葡萄糖酸+
GOD
+
【器材】
试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计 【试剂】
1. 0.1mol/L 磷酸盐缓冲液（pH7.0）
称取无水磷酸氢二钠8.67g 及无水磷酸二氢钾5.3g 溶于800ml 蒸馏水中，用1mol/L 氢氧化钠（或1mol/L 盐酸）调节pH 至7.0，然后用蒸馏水稀释至1L 。
2. 酶试剂
称取过氧化物酶1200U ，葡萄糖氧化酶1200U ，4-氨基安替比林10mg ，叠氮钠100mg ，溶于上述磷酸盐缓冲液80ml 中，用1mol/L NaOH 调pH 至7.0，加磷酸缓冲液至100ml 。
置冰箱保存，4℃可稳定3个月。
3. 酚溶液
称取重蒸馏酚100mg溶于100ml蒸馏水中（酚在空气中易氧化成红色，可先配成500g/L 的溶液，贮存于棕色瓶中，用时稀释），用棕色瓶贮存。
4. 酶酚混合试剂
取上述酶试剂与酚溶液等量混合，4℃可以存放一个月。
5. 12mmol/L苯甲酸溶液
溶解苯甲酸1.4g于蒸馏水约800ml中，加温助溶，冷却后加蒸馏水至1L。
6．葡萄糖标准贮存液（100mmol/L）
称取已干燥恒重的无水葡萄糖1.802g，溶于12mmol/L苯甲酸溶液约70ml中，并移入100ml容量瓶内，再以12mmol/L苯甲酸溶液加至100ml。
7.葡萄糖标准应用液（5mmol/L）
吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml 于100ml 容量瓶中，加12mmol/L 苯甲酸溶液至刻度。
【操作】
取3 支试管,编号，按下表操作。
表3-12 血糖测定操作步骤
加入物 (ml) 空白管标准管测定管
血清－－0.02
葡萄糖标准液－0.02 －
蒸馏水0.02 －－
酶酚混合液 3.0 3.0 3.0
混匀，置 37 ℃水浴中保温 15分钟，在波长 505nm 处比色，以空白管调零，读取标准管及测定管吸光度。
【计算】
测定管吸光度
血糖（mmol/L）= ×5
标准管吸光度
标准管吸光度
血清葡萄糖（mmol/L)＝
×5
测定管吸光度
【注意事项】
1．测定结果如超过20mmol／L，应将标本用生理盐水稀释后再测定，结果乘以稀释倍数。
2．若酶酚混合试剂呈红色，应弃之重配。
因标本和标准用量少，其加量是否准确对测定结果影响较大，故其加量必须准确。
3．GOD-POD法的第一步反应特异性高，而由POD催化的第二步指示反应是非特异性的，易受标本中尿酸、维生素C、谷胱甘肽、胆红素等还原物的干扰，这些物质与色素原竞争H202，使测定结果偏低。
4．Trinder反应由Trinder于1969年提出。
后经许多学者改进，采用2，4-二氯酚、2-羟-3，5-二氯苯磺酸等代替苯酚，由于这些化合物氧化生成的色素的摩尔吸光系数均高于苯酚，使反应灵敏度得以提高。
【正常参考范围】
3.9～6.1mmol/L
【临床意义】
1. 生理性高血糖可见于摄入高糖饮食或注射葡萄糖后，或精神紧张、交感神经兴奋，肾上腺分泌增加时。
2. 病理性高血糖
⑴糖尿病：病理性高血糖常见于胰岛素绝对或相对不足的糖尿病患者。
⑵对抗胰岛素的激素分泌过多：如甲状腺功能亢进、肾上腺皮质功能及髓质功能亢进、腺垂体功能亢进、胰岛α-细胞瘤等。
⑶颅内压增高：颅内压增高（如颅外伤、颅内出血、脑膜炎等）刺激血糖中枢，出现高血糖。
⑷脱水引起的高血糖：如呕吐、腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。
3. 生理性低血糖饥饿或剧烈运动、注射胰岛素或口服降血糖药过量。
4. 病理性低血糖
⑴胰岛素分泌过多：由胰岛β细胞增生或胰岛β细胞瘤等引起。
⑵对抗胰岛素的激素分泌不足：如腺垂体功能减退、肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退等。
⑶严重肝病患者：肝贮存糖原及糖异生功能低下，不能有效调节血糖。
【结果及分析】
【思考题】
1. 血糖有哪些来源和去路，机体是如何调节血糖浓度恒定的？
2. 酶试剂为什么要用磷酸缓冲液配制，用蒸馏水是否可以，为什么？
二、邻甲苯胺法
【目的】
了解测定血糖的原理和方法，要求在实验中培养学生严谨的作风和准确地进行实际操作的能力。
【原理】
葡萄糖在热的醋酸溶液中与邻甲苯胺缩合生成葡萄糖邻甲苯胺，后者脱水生成雪夫（Schiff）碱，再经结构重排，生成有色化合物。
颜色的深浅与葡萄糖含量成正比。
其反应式如下：
葡萄糖 + 邻甲苯胺葡萄糖邻甲苯胺
-H2O
葡萄糖邻甲苯胺雪夫碱
【器材】
试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计
【试剂】
1．邻甲苯胺试剂
于940ml冰醋酸中加入硫脲1.5g, 邻甲苯胺60ml,混合,直至硫脲完全溶解,置棕色试剂瓶中,室温保存。
新配试剂应放置24小时后（待老化）使用。
此试剂腐蚀性强，避免接触皮肤，应用自动吸管加液。
2．12mmol/L苯甲酸溶液
于900ml 蒸馏水中加入苯甲酸1.4g,加热助溶,冷却后置于1L容量瓶中,加蒸馏水至刻度。
3．葡萄糖标准储存液（100mmol/L）
称取无水葡萄糖（预先置80℃烤箱干燥至恒重，移置干燥器内保存）1.802g,溶解于80ml苯甲酸溶液中,移置100ml容量瓶中,再加苯甲酸溶液至刻度。
4．葡萄糖标准应用液（5mmol/L）
取葡萄糖标准储备液5ml，置于100ml容量瓶中，加苯甲酸溶液至刻度。
【操作】
1．取16×150mm试管3支按下表进行操作：
表3-13 血糖测定操作步骤
试剂（ml）测定管标准管空白管
血清或血浆0.1 ——
葡萄糖标准应用液—0.1 —
蒸馏水——0.1
邻甲苯胺试剂 3.0 3.0 3.0
2．将上述各管混匀放入沸水浴中加热12分钟，取出用自来水冷却5分钟。
注意在煮沸时水浴中的水面必须高于试管内的液面。
否则则温度不均而影响比色。
3．用波长630nm分光光度计进行比色，空白管调零点，读取测定管与标准管吸光度。
4．计算
测定管吸光度
血糖（mmol/L）= ×5
标准管吸光度
5．本测定法空腹血糖正常值为3.89～6.11 mmol/L(70～110mg/dl)。
【临床意义】同上。
【结果及分析】
【思考题】
讨论血糖升高和降低的临床意义及其维持恒定的因素？。