MS培养基配方

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ms培养基配方表

ms培养基配方表

ms培养基配方表ms培养基是一种常用的细胞培养基,用于无菌条件下培养哺乳动物细胞,特别是鼠胚胎成纤维细胞(Mouse Embryo Fibroblast,MEF)。

它是由多种有机和无机化合物组成的复杂混合物,可以提供细胞生长所需的必需氨基酸、糖类、维生素和微量元素等营养物质。

同时,它还包含有机缓冲剂和盐类,可以调节培养品的 pH 值和离子浓度,保持培养条件的稳定性。

下面介绍 ms培养基的配方表:MS培养基水相1. 将1L 去离子水(DI水)加入1mol/L NaCl 至5mL2. 加入HEPES缓冲液(1mol/L)27.7g,调节至pH7.2-7.43. 加入葡萄糖25.0g,混合直至葡萄糖完全溶解4. 加入 L-谷氨酸1.42g,细胞培养I 类和 II 类所需濃度5. 加入 L-苏氨酸0.07g,细胞培养所需濃度6. 加入 L-半胱氨酸0.16g7. 加入 L-赖氨酸0.07g8. 加入 L-缬氨酸0.07g9. 加入L-异亮氨酸0.07g10. 加入L-亮氨酸0.14g11. 加入L-丙氨酸0.14g12. 加入L-天冬氨酸0.15g13. 加入L-芸香氨基酸0.42g14. 加入 L-色氨酸0.03g15. 加入 L-酪氨酸0.03g16. 加入 L-精氨酸0.17g17. 加入 L-组氨酸0.03g18. 加入 L-甘氨酸0.10gMS培养基固相1. 加入 NaHCO3(7.5%)4mL,细胞培养所需濃度2. 加入 4-(2-羟乙基)吡啶盐酸盐(HEP)2g,细胞培养所需濃度;过度使用可导致凝块形成3. 加入 MgSO4(7H2O)0.94g,细胞培养所需濃度4. 加入 KH2PO4 0.17g,细胞培养所需濃度5. 加入 NaH2PO4(H2O,2. H2O)0.19g,细胞培养所需濃度6. 加入 Na2HPO4(7H2O)3.05g,细胞培养所需濃度7. 加入次黄嘌呤(NEAA)1mL,必需的非必需氨基酸,促进细胞生长8. 加入乳酸钠2.72g,利用减少氧淤积,促进细胞生长9.加入硫酸铜子(10-5M))1mL,为MEF的细胞类型提供最佳的增生所需注:以上配方根据MS原始文献略作调整,如果在实验中出现差异,请根据实际情况微调。

MS培养基母液配方

MS培养基母液配方

MS培养基母液配方1、大量元素母液(10倍,1 L)NH4NO316.5 g KH2PO4 1.7 g(单独溶解后混匀)KNO319 g CaCl2·2H2O 4.4 g(单独溶解后混匀)MgSO4·7H2O 3.7 g(单独溶解后混匀)2、微量元素母液(200倍,1 L)KI 0.166 g Na2MoO4·2H2O 0.05 gH3BO3 1.24 g CuSO4·5H2O 0.005 gMnSO4·4H2O 4.46 g CoCl2·6H2O 0.005 gZnSO4·7H2O 1.72 g3、铁盐母液(200倍,500 mL;定容后调pH至5.5,加热至90℃左右螯合15~30 min)EDTA二钠(Na2·EDTA·7H2O) 3.73 gFeSO4·7H2O 2.78 g4、有机母液①(200倍,500 mL)盐酸硫胺素(VB1)0.01 g烟酸0.05 g盐酸吡哆醇(VB6)0.05 g5、有机母液②(200倍,500 mL)肌醇10.0 g6、有机母液③(200倍,500 mL)甘氨酸0.2 g7、植物激素1)0.1mg/mL 的6-BA溶液:取25mg的6-BA,用少量1N的盐酸溶解,再加蒸馏水定容至250mL。

2)0.1mg/mL NAA:取25mg的NAA可溶于热水中或用少量95%乙醇或少量1N的NaOH溶解后,再加水定容至250mL。

3)2,4-D:2,4-二氯苯氧乙酸,相对分子量为221.0,用乙醇做助溶剂,cas号为94-75-7,分子式为,C8H6Cl2O30.2mg/mL 的2,4-D溶液:40mg 2,4-D,用少量95%乙醇溶解后,再用蒸馏水定容至200ml。

MS培养基配方

MS培养基配方

MS 培养基配方1、配置MS母液母液配置:加热都是用温水浴加热,全部都要避光保存,用装乙醇的棕色瓶来保存在4度即可表2.1大量元素母液药品20x g/L 500ml(20 x)KNO338g 19gNH4NO333 g 16.5gMgSO4•7H2O7.4 g 3.7gCaCl2 6.644g 3.322gKH2PO4 3.4g 1.7g溶于200ml蒸馏水,定容至500ml 需要加热才能完全溶解CaCL2.2H2O 4.4g/L表2.2微量元素母液药品100x g/L 500ml(100x g/L)KIH3BO3MnSO4.4H2OZnSO4.7H2ONa2MoO4.2H2OGuSO4.5H2O CoCl2.6H2O 0.083g0.6222.3 g0.86 g0.025 g0.0025 g0.0025 g0.0415 g0.31 g1.115 g0.43 g0.0125 g0.00125 g0.00125 g溶于100ml蒸馏水,定容至500ml表2.3有机母液药品100x 1L500ml(100x)肌醇10g5g烟酸0.05g0.025gVB60.05g0.025gVB10.1g0.05g甘氨酸0.2g0.1g表2.4铁盐母液药品100x g/L500mlFeSO4•7H2O 2.78g 1.39gNa2-EDTA. 2H2O 3.73g 1.865g铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于100ml蒸馏水中,加热,(很重要)不断搅拌,溶解后,两液混合,加水定容至500ml,置于小口瓶中,贴上标签2、固体MS培养基材料•找到4种母液:大量元素,微量元素,有机微量元素,铁盐母液•蔗糖,琼脂锥形瓶MS培养基配方:母液都稀释至1xMS培养基配方(1L)母液体积或重量(1L) 200ml大量元素20x50mL 10ml铁盐100x 微量100x 10mL 2ml 10mL 2ml有机100x10mL 2ml 蔗糖15g(15g/L)3g琼脂8g(8g/L) 1.6gPH先调至 5.85-5.88,最终灭菌后pH接近5.81)。

MS培养基及配制注意事项

MS培养基及配制注意事项
1. 制备母液和营养培养基时,所用蒸馏水或无离子水必须符合标准 要求,化学药品必须是高纯度的(分析纯)。
2. 称量药物采用高灵敏度的天平,每种药品专用一药匙。 .生长调节剂母液配制:
为了操作方便,节约时间,生长调节剂也可如同配制母液一样,先配 成原液,这样配制培养基时只要稍加计算,按需要量取即可。
不同药品在配制时若不溶于水,可用少量不同的溶剂先溶解,萘乙酸 (NAA),吲哚乙酸(IAA),赤霉素(GA3),2,4-D等生长素和玉米 素(ZT)可先用少量95%酒精溶解,然后加水,如溶解不完全再加热。 激动素(KT)和6-苄基嘌呤(BA)可溶于少量1mol/L的盐酸中,叶酸 需用少量稀氨水溶解。 称取50mg生长调节物质,溶解后,在100ml的容量瓶中定容,配制的母 液每毫升则含有生长调节物质0.5mg,配制后一般要求在低温(0~4℃) 保存,配制培养基时如每升(1000ml)需添加的生长调节剂物质为 0.5mg时,则取1ml母液即可。
2.无菌操作可按以下步骤进行:
(1)在接种3天前用甲醛熏蒸接种室,并于接种前3小时打开其内紫外 线灯进行杀菌; (2)在接种前20分钟,打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯; (3)接种员先洗净双手,在缓冲间换好专用实验服,并换穿拖鞋等; (4)上工作台后,用酒精棉球搽拭双手,特别是指甲处。然后搽拭工 作台面; (5)先用酒精棉球搽拭接种工具,再将镊子和剪刀从头至尾过火一 遍,然后反复过火尖端处,对培养皿要过火烤干; (6)接种时,接种员双手不能离开工作台,不能说话、走动和咳嗽 等; 材料吸干后,一手拿镊子、一手拿剪刀或解剖刀,对材料进行适当的切 割。(如叶片切成0.5cm2的小块;茎切成含有一个节的小段。微茎尖要 剥成只含1-2片叶原基)在接种过程中要经常灼烧接种器械,防止交叉 污染。

MS培养基配制方法-new

MS培养基配制方法-new

MS 培养基一、大量元素母液1:大量A母液2:大量B母液3:Fe盐注:配制顺序如下1. 称取3.73 g Na2-EDTA•2H2O溶解于200 ml去离子水中,并置于70℃预热(A);2. 称取2.78 g FeSO4•7H2O溶解于200 ml去离子水中(B);3. 将B缓慢倒入A中混合,边倒边搅动,置于70 ℃水浴锅中螯合2 h;4. 冷却后定容至1 L。

二、微量元素母液4:微量三、有机物质母液5:有机(不含肌醇)℃注:配固体培养基可在调pH后加适量Agar或Phytagel;肌醇也可加入有机母液。

四、抗生素和激素母液试剂名称配制方法母液浓度Amp(氨苄青霉素)双蒸水溶解,定容,过滤灭菌50 mg/ ml Km(卡那霉素)双蒸水溶解,定容,过滤灭菌50 mg/ ml Str(链霉素)双蒸水溶解,定容,过滤灭菌50 mg/ ml Cb(羧苄青霉素)双蒸水溶解,定容,过滤灭菌250 mg/ ml 6-BA (6-苄基嘌呤) 1M NaOH或盐酸溶解,双蒸水定容,高压灭菌 1 mg/ ml NAA(萘乙酸)1M NaOH溶解,双蒸水定容,高压灭菌 1 mg/ ml IAA 95% 乙醇溶解,双蒸水定容,过滤灭菌 1 mg/ ml五、乙酰丁香酮(Acetone-syringone, AS)称取196.2 mg AS用10 ml DMSO溶解,母液浓度100 mM,-20℃避光保存,工作浓度100 ~ 200 μM六、MS溶液的混合5种母液分别依次加入到800 ml蒸馏水中,混匀后加入肌醇、蔗糖和能高压灭菌的激素(6-BA和NAA),定溶至1000 ml,用1M NaOH调pH至5.8。

最后加Phytagel (Sigma)4.4g或Agar 10g。

灭菌完后,在培养基凝固前加入AS或抗生素及不能高压灭菌的激素(IAA)。

植物组织培养MS培养基配方

植物组织培养MS培养基配方

植物组织培养MS培养基配方MS培养基主要包括两部分:无机盐和有机物。

无机盐部分的配方如下:1.氮源:氮源通常由硝酸铵(NH4NO3)、硝酸钾(KNO3)和硫酸铵((NH4)2SO4)组成。

氮源的浓度通常为20-30mM。

2.磷酸盐:磷酸盐通常由二氢二钠磷酸盐(NaH2PO4)组成,浓度为10mM。

3.钠盐:MS培养基中含有钠盐,通常由硝酸钠(NaNO3)和硝酸钾(KNO3)组成。

钙盐的浓度为2.0mM,钾盐的浓度为1.0mM。

4.钠盐:MS培养基中含有钠盐,通常由硝酸钠(NaNO3)和硝酸钾(KNO3)组成。

钙盐的浓度为2.0mM,钾盐的浓度为1.0mM。

5.硫酸镁:硫酸镁(MgSO4)的浓度为1.0mM。

6.磷酸铵铁:磷酸铵铁(FeSO4·(NH4)2SO4)的浓度为27.8μM。

7.各种微量元素:包括锌、铜、锰、硼、钼、钴和镍等微量元素。

这些微量元素的浓度通常在微摩尔(μM)级别。

有机物部分的配方如下:1.蔗糖:蔗糖是植物培养基中最常用的碳源,浓度通常为30g/L。

2. 维生素:通常使用的维生素有二硝基地巴泼甲素(2,4-D)和吲哚-3-乙酸(IAA)。

它们的浓度通常在0.1-2.0 mg/L之间。

3. 激素:常用的激素包括植物生长素(BA)和乙烯利(2,4-D)。

它们的浓度通常在1.0-10.0 mg/L之间。

4.混合物:还可以加入一些有机物混合物,如胆固醇、烟酸和核酸酸等。

值得注意的是,这只是MS培养基的一个基本配方,根据具体的研究目的和植物种类的不同,还可以对该配方进行一些调整和优化。

总结起来,MS培养基是一种常用的植物组织培养基,主要用于植物生长和增殖。

其配方包括无机盐和有机物两部分,无机盐包括氮源、磷酸盐、钙盐、镁盐、磷酸铵铁和微量元素等;有机物包括蔗糖、维生素和激素等。

通过适当调整这些配方的浓度和比例,可以实现不同植物的生长和增殖需求。

ms培养基配方表

ms培养基配方表

ms培养基配方表MS(Murashige and Skoog)培养基是细胞培养中常用的基础培养基,其命名来源自培养基组合者Murashige和Skoog。

MS培养基呈现出广泛的适用性,可用于各种组织培养和植物组织培养的研究。

其配方主要采用无机盐和有机物的混合物,以下是MS培养基的详细配方表。

1. MS微量元素添加剂:ZnSO4.7H2O = 8.6 mg/LH3BO3 = 3.1 mg/LMnSO4.4H2O = 0.25 mg/LCuSO4.5H2O = 0.025 mg/LKI = 0.83 mg/LNa2MoO4.2H2O = 0.025 mg/LCoCl2.6H2O = 0.025 mg/LFeSO4.7H2O = 27.8 mg/L2. MS盐基:NH4NO3 = 1650 mg/LKNO3 = 1900 mg/LCaCl2.2H2O = 440 mg/LKH2PO4 = 170 mg/LMgSO4.7H2O = 370 mg/L3. MS综合维生素添加剂:Myo-inositol = 100 mg/LNicotinic acid = 50 mg/LPyridoxine.HCl = 10 mg/LThiamine.HCl = 10 mg/LGlycine = 2 mg/LL-Asparagine.H2O = 150 mg/L4. MS植物生长调节剂添加剂:2,4-Dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) = 0.5 ~ 5 mg/Lα-Naphthaleneacetic acid (NAA) = 0.5 ~ 5 mg/L6-Benzylaminopurine (BA) = 0.5 ~ 5 mg/LKinetin (Kin) = 0.5 ~ 5 mg/LGibberellic acid (GA3) = 0.1 ~ 10 mg/LAbscisic acid (ABA) = 0.1 ~ 10 mg/L以上是MS培养基的配方表,各种配方的配比可以根据实验需要适当调整。

MS培养基的配制步骤

MS培养基的配制步骤

MS培养基的配制步骤大量元素(母液Ⅰ) mg/LNH4NO3 33 000KNO3 38 000CaCl2·2H2O 8 800MgSO4·7H2O 7 400KH2PO4 3 400微量元素(母液Ⅱ)KI 166H3BO3 1 240MnSO4·4H2O 4 460ZnSO4·7H2O 1 720Na2MoO4·2H2O 50CuSO4·5H2O 5CoCl2·6H2O 5铁盐(母液Ⅲ)FeSO4·7H2O 5 560Na2-EDTA·2H2O 7 460有机成分(母液Ⅳ)ⅣA肌醇 20 000ⅣB烟酸 100盐酸吡哆醇(维生素B6) 100盐酸硫胺素(维生素B1) 100甘氨酸 400以上各种营养成分的用量,除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外,其余的均为200倍浓缩液。

上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。

其中,母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L。

母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5?5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。

各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。

MS培养基中还需要加入:2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、[烈宜醄NAA)、6-苄基嘌呤(6-BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0?1 mg/mL)。

其配制方法是:分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6-BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L 的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,最后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0?1 mg/mL 的母液。

MS培养基配方列表

MS培养基配方列表

MS培养基配方列表MS培养基是一种经典的植物培养基,广泛应用于细胞、组织和器官培养研究中。

其配方很复杂,包含多种无机盐和有机物,下面就介绍一下MS培养基的配方列表。

1. 硝酸铵 (NH4NO3)硝酸铵作为氮源,在细胞的生长和分化过程中非常重要。

2. 磷酸一氢钾 (KH2PO4)磷酸一氢钾是植物生长的主要磷源。

3. 硫酸镁七水合物(MgSO4·7H2O)硫酸镁七水合物是植物生长中的必需元素,同样也是叶绿素合成的关键。

4. 硝酸钾 (KNO3)硝酸钾是一种重要的氮源,也是蛋白质合成的必需元素。

5. 硝酸钙 (Ca(NO3)2)硝酸钙是植物生长过程中不可或缺的钙源,在细胞分裂和细胞伸长过程中起着重要作用。

6. 硫酸铁 (FeSO4)硫酸铁是植物体内铁元素的重要来源,对叶绿素和细胞色素c等生物化学过程有着至关重要的作用。

7. 乙酸 (CH3COOH)乙酸可以被植物利用作为碳源,同时还可以促进细胞发育和生长。

8. 吲哚-3-乙酸 (IAA)吲哚-3-乙酸是一种重要的生长素,能够影响细胞分裂和扩散,促进细胞分化和器官发育。

9. 6-苄氨基嘌呤 (BA)6-苄氨基嘌呤是一种核酸类似物,可以促进细胞分裂和增殖,对重组DNA和RNA的生成和转录起着关键的作用。

10. 抗生素 (G418)抗生素G418能够抑制细胞生长和增殖,用于防止其它微生物的污染。

以上就是MS培养基的配方列表,每种成分的浓度和配比都需要根据具体的实验室需求进行调整。

在制备MS培养基过程中,需要严格控制pH值和温度,以确保培养基的有效性。

MS培养基是一种经典、可靠的植物培养基,使用得当可以为细胞、组织和器官培养研究提供强有力的支持。

MS培养基的配制步骤

MS培养基的配制步骤

MS培养基的配制步骤大量元素(母液Ⅰ) mg/LNH4NO3 33 000KNO3 38 000CaCl2·2H2O 8 800MgSO4·7H2O 7 400KH2PO4 3 400微量元素(母液Ⅱ)KI 166H3BO3 1 240MnSO4·4H2O 4 460ZnSO4·7H2O 1 720Na2MoO4·2H2O 50CuSO4·5H2O 5CoCl2·6H2O 5铁盐(母液Ⅲ)FeSO4·7H2O 5 560Na2-EDTA·2H2O 7 460有机成分(母液Ⅳ)ⅣA肌醇 20 000ⅣB烟酸 100盐酸吡哆醇(维生素B6) 100盐酸硫胺素(维生素B1) 100甘氨酸 400以上各种营养成分的用量,除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外,其余的均为200倍浓缩液。

上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。

其中,母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L。

母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5?5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。

各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。

MS培养基中还需要加入:2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、[烈宜醄NAA)、6-苄基嘌呤(6-BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0?1 mg/mL)。

其配制方法是:分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6-BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L 的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,最后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0?1 mg/mL 的母液。

MS培养基配方

MS培养基配方

MS培养基母液的配制:20×MS大量元素(1 L):38 g KNO3,33 g NH4NO3,8.8 g CaCl2·2H2O,7.4 g MgSO4·7H2O,3.4 g KH2PO4。

200×MS微量元素(1 L):0.166 g KI,1.24 g H3BO3,4.46 g MnSO4·4H2O,1.72 g ZnSO4·7H2O,0.05 g Na2MoO4·2H2O,0.005 g CuSO4·5H2O,0.005 g CoCl2·6H2O。

200×MS维生素和氨基酸(1 L):20 g肌醇,0.1 g烟酸,0.1 g盐酸吡哆醇(VB6),0.02 g盐酸硫胺素(thiamine hydrochloride, VB1),0.4 g甘氨酸。

200×MS铁盐(1 L):5.56 g FeSO4· 7H2O,7.46 g Na2EDTA· 2H2O,先溶于500 mL ddH2O,加热,调pH至5.5,定容至1 L。

注意:配制大量元素母液时,为避免产生沉淀,要用纯度高的重蒸馏水溶解,药品采用分析纯。

化学药品先以少量重蒸馏水充分溶解后然后混合,混合时需注意边搅拌边混合。

CaCl2·2H2O要在最后单独加入,在溶解CaCl2·2H2O 时,蒸馏水需加热沸腾,除去水中的CO2,以防沉淀。

配制铁盐母液时,FeSO4和Na2-EDTA 应分别加热溶解后混合,并置于磁力搅拌器上不断搅拌至溶液呈金黄色(约加热20-30 min),调pH值至5 .5,室温放置冷却后,再冷藏。

使用上述配好的母液,按照稀释倍数,配制基础MS培养液:1×MS大量元素,1×MS微量元素,1×MS维生素和氨基酸,1×MS铁盐,蔗糖30 g/L,定容后调节pH至5.8,高温高压灭菌。

ms培养基配方

ms培养基配方

ms培养基配方MS培养基是一种广泛用于植物细胞培养的抗生素添加的标准培养基,可以用于各种植物细胞生物学实验,是一种快速高效的植物细胞培养方法。

MS培养基(Murashige and Skoog,1962)主要由六种化学复配组成,包括氯化钾、磷酸钾、硝酸钾、谷氨酸、氯化钠和B5维生素混合液。

这六种补充物是培养细胞生长和发芽的重要成分,可以通过调整不同组分的比例来获得更高的营养价值,以满足不同植物的生长需求。

MS培养基的组成比例可以调整,以便满足不同植物的生长需求。

氯化钾是培养基中最重要的钾源,每克培养基含有0.5-2.0毫克氯化钾,磷酸钾作为钾的替代品,其含量为0.2-0.8毫克每克培养基。

硝酸钾是细胞生长所需的重要组分,每克培养基含有0.15-0.8毫克硝酸钾。

谷氨酸作为一种有机氮源,每克培养基含有0.1-0.4毫克谷氨酸;氯化钠可维持培养基的离子平衡,每克培养基含有0.1-0.5毫克氯化钠;B5维生素混合液通常为2-9%,用于维持正常细胞生长。

此外,MS培养基作为植物细胞培养的标准培养基,也可以添加24种氨基酸和多种无机盐,以满足细胞生长和发芽的需求。

24种氨基酸中,非必需氨基酸比饱和氨基酸高出2倍左右,作为某些特殊植物细胞特殊需要的氨基酸,如甘氨酸和苏氨酸,可以根据细胞的特殊需求以不同的比例添加进去。

常用的无机盐包括硫酸钾、硫酸钠、氟化钠、氯化钠、酸钠、硫酸胺和亚硝酸钠等,细胞在此无机盐环境中才能正常发芽。

MS培养基是根据美国科学家Murashige和Skoog(1962)提出的植物培养技术来配制的,是一种标准化的植物细胞培养基配方,由营养物质如钾、磷、氮和铁等成分通过恰当的比例混合而成。

它具有组成比例可调、配方固定、细胞发芽率高、培养效率高、平衡缺乏及对细胞有利等特点,常用于植物细胞的培养实验,广泛用于植物细胞的生物学实验和栽培。

MS培养基的制备和使用步骤要求严格,首先,经过精制的培养基配方应由专家进行审核,确保其品质和效果,然后将所有组分称量、混合、离心、灭菌并过滤后,使其具有良好的稳定性。

MS培养基的配置

MS培养基的配置

MS培养基的配置一、母液的配制母液是欲配制培养基的浓缩液,一般配成比所需浓度高10—100倍。

优点:(1)保证各物质成分的准确性;(2)便于配置时快速移取;(3)便于低温保藏。

1、MS大量元素母液(50X)称10升量溶解在200 ml蒸馏水中。

配1升培养基取20 ml。

化学药品1升量10升量①NH4NO31650 mg/L 16.5g②KNO31900 mg/L 19.0g③CaCl2·2H2O440 mg/L 4.4g④MgSO4·7H2O370 mg/L 3.7g⑤KH2PO4170 mg/L 1.7g注:CaCl2·2H2O单独配置2、MS微量元素母液(100X)称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基母液10ml。

化学药品1升量10升量①MnSO4·4H2O(MnSO4·H2O)22.3 mg/L(21.4 mg/L)223mg②ZnSO4·7H2O8.6 mg/L 86mg③CoCl2·6H2O0.025mg/L 0.25mg④CuSO4·5H2O0.025 mg/L 0.25mg⑤Na2MoO4·2H2O0.25 mg/L 2.5mg⑥KI 0.83 mg/L 8.3 mg⑦H3BO36.2 mg/L 62 mg注:CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量(0.25 mgX10=2.5 mg)或100倍量(25 mg)称取后,定容于100ml水中,每次取10ml或1ml,即含0.25 mg的量。

3、MS铁盐母液(100X)称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基母液10ml。

化学药品1升量10升量Na2·EDTA37.3 mg/L 373 mgFeSO4·7H2O27.8 mg/L 278 mg注:配制时,两种成分分别溶解在少量蒸馏水中,其中EDTA盐较难完全溶解,可适当加热。

MS培养基及配制注意事项

MS培养基及配制注意事项

一、MS培养基母液的配制
母液 成 分
编种 号类
规定 量
浓缩 倍数
称取量 (mg)
母液 体积 (ml)
配制1 升培 养基 吸取 量定

大 KNO3
1900 10 19000
1 量 NH4NO3 元
1000
1650 10 16500
100
素 MgSO4·7H2O 370 10 3700
KH2PO4
170 10 1700
按要求浓缩100倍的数值称取,分别将各种化合物称量除铁盐 (FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O)作为一组单独配制外,其余化合物 可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后,定容在1000ml容量瓶中,置小 口瓶中保存,贴上标签。
3.铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水 中,加热,(很重要)不断搅拌,溶解后,两液混合,调PH至5.5加水 定容至1000ml,置于小口瓶中,贴上标签。 4.有机物母液配制,按母液要求浓缩50倍,除蔗糖按3%单独临时称量 外,其余分别称量后,溶解,定容在500ml容量瓶中,置于小口瓶中保 存,贴上标签。 5.母液最好在2~4℃的冰箱中贮存,特别是有机类物质,贮存时间不宜 过长,无机盐母液最好在一个月内用完,如发现有霉菌和沉淀产生,就 不能再使用。
(7)接种完毕后要清理干净工作台,可用紫外线灯灭菌30分钟,若连 续接种,每5天要大强度灭菌一次。
常用植物激素
类别
名 称
缩写词
分子量
使用浓度范 围
2,4-二氯苯氧 生 长 乙酸 素
α-萘乙酸
2,4-D NAA
221.0 186.2
0.001- 10mg/L

ms培养基配方表

ms培养基配方表

ms培养基配方表MS培养基是一种用于植物细胞和组织培养的广泛使用的基础培养基。

该培养基所需的成分包括营养物质、维生素和激素等。

下面为大家介绍一份常用的MS培养基配方表。

营养盐成分:• NH4NO3 1650 mg/L• KNO3 1900 mg/L• CaCl2.2H2O 332 mg/L• MgSO4.7H2O 180 mg/L• KH2PO4 170 mg/L• FeSO4.7H2O 27.8 mg/L• MnSO4.H2O 22.3 mg/L• ZnSO4.7H2O 8.6 mg/L• CuSO4.5H2O 0.025 mg/L• Na2MoO4.2H2O 0.25 mg/L• Co(NO3)2.6H2O 0.025 mg/L维生素成分:• Myo-inositol 100 mg/L• Thiamine HCl 1.0 mg/L• Nicotinic acid 1.0 mg/L• Pyridoxine HCl 0.5 mg/L• Glycine 2.0 mg/L激素成分:• 2-苯氧基乙酸(2,4-D)0.5-2.0 mg/L•去落酸(IAA)0.1-1.0 mg/L•基础激素(KT)0.1-2.0 mg/L注意事项:1.培养基的pH应该保持在5.8-6.0之间,必要时可用盐酸或氢氧化钠调节。

2.将成分依次加入双倍蒸馏水,并搅拌至完全溶解。

3.将溶液通过微孔膜过滤器过滤,并分装入含有接种材料的试管或烧杯中。

4.加入激素前,将其他成分常温下恢复车齿期。

MS培养基是一种常用的基础培养基,为了得到高效的培养和增殖效果,还需要根据实际情况进行微调。

希望这份MS 培养基配方表能够对大家提供各种植物的组织和细胞培养带来一定的帮助。

MS培养基的配制步骤

MS培养基的配制步骤

MS培养基的配制步骤大量元素(母液Ⅰ) mg/LNH4NO3 33 000KNO3 38 000CaCl2·2H2O 8 800MgSO4·7H2O 7 400KH2PO4 3 400微量元素(母液Ⅱ)KI 166H3BO3 1 240MnSO4·4H2O 4 460ZnSO4·7H2O 1 720Na2MoO4·2H2O 50CuSO4·5H2O 5CoCl2·6H2O 5铁盐(母液Ⅲ)FeSO4·7H2O 5 560Na2-EDTA·2H2O 7 460有机成分(母液Ⅳ)ⅣA肌醇 20 000ⅣB烟酸 100盐酸吡哆醇(维生素B6) 100盐酸硫胺素(维生素B1) 100甘氨酸 400以上各种营养成分的用量,除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外,其余的均为200倍浓缩液。

上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。

其中,母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L。

母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5?5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。

各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。

MS培养基中还需要加入:2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、[烈宜醄NAA)、6-苄基嘌呤(6-BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0?1 mg/mL)。

其配制方法是:分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6-BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L 的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,最后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0?1 mg/mL 的母液。

MS培养基配方

MS培养基配方

实验八MS培养基的配制和灭菌一、实验目的:了解培养基的配制原理和方法,掌握其配制过程和分装方法。

二、实验材料:天平、牛角匙、量筒、烧杯、搅拌机、胶桶、组培瓶、6种母液、白沙糖、活性炭、卡拉胶。

三、方法步骤1、母液配制大量元素(母液Ⅰ) mg/L 100ml。

(2) 微量元素(母液Ⅱ) (3) 铁盐(母液Ⅲ) (4) 有机成分(母液Ⅳ) ⅣA 和ⅣB (5) 植物生长调节物质(2,4-D,NAA)以上各种营养成分的用量,除了母液Ⅰ为10倍浓缩液外,其余的均为100倍浓缩液。

其中,母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L。

母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5.5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。

各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。

MS培养基中还需要加入2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0.1 mg/mL)。

其配制方法是:分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,最后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0.1 mg/mL的母液。

2、培养基配制(1)配制培养液用量筒从各种母液中分别取出所需的用量:母液Ⅰ为100 ml,母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各10ml。

再取2,4-D 10ml、NAA 2ml,与各种母液一起放入烧杯中。

(2)称取54g卡拉胶;300g蔗糖;活性炭1g。

(3)在胶桶中加入规定量的各种母液,包括生长调节物质。

组织培养实验-MS培养基及配制注意事项

组织培养实验-MS培养基及配制注意事项

一、MS培养基母液的配制注意:1.除CaCl2·2H2O单独配制外,大量元素按照使用时高10倍的数值称取,将各种化合物称量后,分别用少量水在不同的容器内充分溶解,然后在500ml烧杯中按顺序加入各溶液,加适量蒸馏水,用玻璃棒搅拌促溶,倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度,置小口瓶中保存,贴上标签注明化合物名称(或编号),浓缩倍数,配制日期和配制者姓名,CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

2.微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取,分别将各种化合物称量除铁盐(FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O)作为一组单独配制外,其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后,定容在1000ml容量瓶中,置小口瓶中保存,贴上标签。

3.铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中,加热,(很重要)不断搅拌,溶解后,两液混合,调PH至5.5加水定容至1000ml,置于小口瓶中,贴上标签。

4.有机物母液配制,按母液要求浓缩50倍,除蔗糖按3%单独临时称量外,其余分别称量后,溶解,定容在500ml容量瓶中,置于小口瓶中保存,贴上标签。

5.母液最好在2~4℃的冰箱中贮存,特别是有机类物质,贮存时间不宜过长,无机盐母液最好在一个月内用完,如发现有霉菌和沉淀产生,就不能再使用。

A.制备母液和营养培养基时,所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求,化学药品必须是高纯度的(分析纯)。

B.称量药物采用高灵敏度的天平,每种药品专用一药匙。

二、培养基配制和灭菌一.养培养基配制程序(一).母液吸取量的计算配制培养基的升数母液吸取量= 母液体积(CC)×——————————母液浓缩倍数(二)各种母液按顺序编号排列A.大量元素;B.CaCl2.2H2O;C.微量元素;D.铁盐;E.有机物;F.生长素萘乙酸(NAA):配制0.5mg/ml的NAA称取50mg , NAA用少量95% 酒精溶解后加蒸馏水定容至1000ml;G..细胞分裂素、激动素(KT)配制0.5mg/ml的KT 称50mgKT 用少量1N HCL溶解后,加蒸馏水定容至100ml。

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实验八MS培养基的配制和灭菌
一、实验目的:
了解培养基的配制原理和方法,掌握其配制过程和分装方法。

二、实验材料:
天平、牛角匙、量筒、烧杯、搅拌机、胶桶、组培瓶、6种母液、白沙糖、活性炭、卡拉胶。

三、方法步骤
1、母液配制
大量元素(母液Ⅰ) mg/L 100ml。

(2) 微量元素(母液Ⅱ) (3) 铁盐(母液Ⅲ) (4) 有机成分(母液Ⅳ) ⅣA 和ⅣB (5) 植物生长调节物质(2,4-D,NAA)以上各种营养成分的用量,除了母液Ⅰ为10倍浓缩液外,其余的均为100倍浓缩液。

其中,母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L。

母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5.5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。

各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。

MS培养基中还需要加入2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0.1 mg/mL)。

其配制方法是:分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,最后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0.1 mg/mL的母液。

2、培养基配制
(1)配制培养液用量筒从各种母液中分别取出所需的用量:母液Ⅰ为100 ml,母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各10ml。

再取2,4-D 10ml、NAA 2ml,与各种母液一起放入烧杯中。

(2)称取54g卡拉胶;300g蔗糖;活性炭1g。

(3)在胶桶中加入规定量的各种母液,包括生长调节物质。

(4)加水定容至1升,开搅拌机,搅匀混合液。

定容至10升,搅匀。

(5)向母液混合物加入白沙糖,继续搅拌;然后停一下搅拌机再加卡拉胶,开搅拌机混匀;
接着再停搅拌机加活性炭,开搅拌机搅匀。

(6)调pH 用滴管吸取物质的量浓度为1 mol/L的NaOH溶液,逐滴滴入溶化的培养基中,边滴边搅拌,并随时用精密的pH试纸(5.4~7.0)测培养基的pH,一直到培养基的pH为5.8为止(培养基的pH必须严格控制在5.8)
(7)将培养基分装到所选用的培养容器中,约30ml/瓶。

(8)盖住瓶口
(9)灭菌。

待需要灭菌的物品码放完毕,盖上锅盖。

在98 kPa、121.3 ℃下,灭菌20 min。

灭菌后取出锥形瓶,让其中的培养基自然冷却凝固。

最好放置1 d后再使用。

四、分析
1.MS母液分得更加细,一般实验室只分大量元素、微量元素、铁盐、有机成分四大类。

这里将大量元素中钙离子与硫酸根离子分开配,避免产生不溶物,将硼酸也单独列出来。

另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累。

2. 在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分。

例如能用卡拉胶就不用琼脂。

3.用搅拌机比较方便。

但要人工不好,分配溶液缺乏量化。

4.加入活性炭可使培养基变黑,有利于离体生根,还可以降低分泌物的毒害作用。

附:MS培养基配方:。

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