体外受精和胚胎发育(上课用)
课件14:3.2 体外受精和早期胚胎培养
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2.胚胎早期培养的条件
条件
实现手段
①无菌无毒 灭菌 加抗生素 定期更换培养液
②营养: 发育培养液
无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸等+动物血清
③温度和pH 36.5±0.5℃ pH 7.2~7.4 合适的渗透压
④气体环境 95%空气(O2:用于细胞呼吸),5%CO2调节pH(CO2培养箱)
早期胚胎的培养
1.胚胎早期培养的目的 精子与卵子在体外受精后,应将受精卵移入发育培养液中继续培养, 以检查受精情况和受精卵的发育能力。 2.胚胎早期培养的条件
同动物细胞培养条件基本相同,只是营养物质有所不同。 发育培养液:无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸等+ 动物血清 (两盐、两素、两酸、一血清)
化学诱导法:将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中, 用化学药物诱导精子获能。常用于牛、羊等家畜。
体外受精
5.卵母细胞的采集和培养 方法一:输卵管采卵(冲取卵子) 利用促性腺激素促使雌性动物排出更多的卵子,从输卵管中冲取卵子。
适合实验动物(兔、鼠)以及家畜猪、羊等。
获得的卵子可以直接与获能精子在体外受精吗? 超数排卵
卵母细胞的采集 培养 成熟卵母细胞
精子的采集 获能处理
获能的精子
受精 受精卵
(1)卵母细胞的采集和培养 (2)精子的采集和获能 (3)受精
体外受精
4. 精子的采集和获能 (1)采集方法:假阴道法、手握法和电激法。 (2)精子的获能 培养法:将精子放入人工配制的获能液中使其获 能。常用于啮齿动物、家兔及猪等动物。
早期胚胎的培养 3.胚胎的去向 当胚胎发育到适宜的阶段时可进行受体移植或冷冻保存
胚胎冷冻保存的好处是使胚胎移植不受时 间和地点的限制,提高胚胎移植的效率。
生物:3.2《体外受精和早期胚胎发育》课件(新人教版选修3)
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1第一遍知道大概说了什么就行;
2第二遍知道哪块是重点;
3第三遍可以做出一些判断。
高效学习逻辑 思维
事实知识(know--what):知道是什么的知识, 主要叙述事实方面的知识; 原理知识(know--why):知道为什么的知识, 主 要是自然原理和规律方面的知识; 技能知识(know--how):知道怎么做的知识, 主要是对某些事物的技能和能力; 人力知识(know--who):知道是谁的知识, 主 要是谁知道以及谁知道如何做某些事的能力;
优秀同龄人的陪伴 让你的青春少走弯路
小案例—哪个是你
忙忙叨叨,起早贪黑, 上课认真,笔记认真, 小A 就是成绩不咋地……
好像天天在玩, 上课没事儿还调皮气老师, 笔记有时让人看不懂, 但一考试就挺好…… 小B
目 录/contents
1. 什么是学习力 2. 高效学习模型 3. 超级记忆法 4. 费曼学习法
TIP3:认知获取是学习的开始,而不是结束。
为啥总是听懂了, 但不会做,做不好?
高效学习模型-内外脑 模型
2
内脑- 思考内化
思维导图& 超级记忆法& 费曼学习法
1
外脑- 体系优化
知识体系& 笔记体系
内外脑高效学习模型
超级记忆法
超级记忆法-记忆 规律
记忆前
选择记忆的黄金时段
前摄抑制:可以理解为先进入大脑的信息抑制了后进 入大脑的信息
人教版七年级上册Unit4 Where‘s my backpack?
超级记忆法-记忆 方法
TIP1:在使用场景记忆法时,我们可以多使用自己熟悉的场景(如日常自己的 卧 室、平时上课的教室等等),这样记忆起来更加轻松; TIP2:在场景中记忆时,可以适当采用一些顺序,比如上面例子中从上到下、 从 左到右、从远到近等顺序记忆会比杂乱无序乱记效果更好。
体外受精与早期胚胎培养上课课件
![体外受精与早期胚胎培养上课课件](https://img.taocdn.com/s3/m/f925b525a55177232f60ddccda38376baf1fe00a.png)
3.受精
将卵子和精子放入培养皿中,在人工控制的环境下完 成子发育成胚胎,在培养皿中进行早期胚胎培 养。
05
5.胚胎移植
将早期胚胎移植到母体子宫中,使其继续发育和生长 。
成功率与影响因素
成功率
随着技术的不断进步,体外受精 的成功率逐渐提高,但仍然受到 多种因素的影响。
06
结论
本课程的主要内容回顾
体外受精技术的基本原理
介绍了体外受精技术的起源、发展历程和基本原 理,包括人工控制受精、胚胎培养和移植等关键 步骤。
胚胎培养的最佳条件
详细介绍了如何优化培养环境,包括培养基、气 体交换、温度和渗透压等,以支持早期胚胎的正 常发育。
早期胚胎发育的分子机制
探讨了早期胚胎发育过程中基因表达、信号转导 和细胞命运决定的分子机制,以及这些机制如何 影响胚胎发育和生殖细胞的分化。
法律问题
80%
法律监管
各国对IVF和胚胎移植的法律监 管存在差异,导致跨国接受IVF 治疗的法律风险增加。
100%
代孕合法性
许多国家的法律对代孕持有不同 态度,引发了关于代孕合法性的 法律争议。
80%
胚胎权益保护
关于胚胎是否应享有法律权益, 以及如何保护胚胎权益,是IVF法 律问题的重要组成部分。
无法着床
移植后胚胎无法正常着床, 导致妊娠失败。
遗传性疾病发生
由于胚胎发育异常,遗传 性疾病发生的风险增加。
伦理与法律纠纷案例
胚胎处置权争议
关于胚胎的处置权引发家 庭或法律纠纷。
辅助生殖技术滥用
滥用体外受精技术,违反 伦理和法律规定的情况。
遗传资源保护
涉及人类遗传资源的保护 和利用,引发伦理和法律 问题。
体外受精和早期胚胎发育ppt课件
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B、应用该技术繁育后代的过程属于有性繁殖类型 C、试管动物技术是利用体细胞繁育后代的技术
D、试管动物技术培育动物过程全部在体外进行
ppt课件
13
2 、 哺乳动物体外受精的过程是 ①卵母细胞的采集 ②精子的采集
(B)
③卵母细胞的人工培养 ④精子的获能处理
⑤精子与成熟的卵子在受精溶液中共同培养
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课内小结
卵母细胞 的采集
方法一:用促性腺激素处理,使其超数排卵,从输卵 管中冲取卵子
方法二:从屠宰母畜卵巢中采集
方法三:直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞
体外受精
精子的获 取
假阴道法 手握法
电刺激法 受精: 获能的精子 +培养成熟的卵子
完成受精
早期胚胎培养
条件: 受精卵在发育培养液中培养
3.2体外受精和早期胚胎培养
ppt课件
1
目的:良种牛快速大量繁殖
ppt课件
2
一、试管动物技术
♂♀
概念:
通过人工操作使
卵子和精子在体外 条件下成熟和受精, 并通过培养发育为 早期胚胎后,再经 过移植产生后代的 技术
精子采集 卵子采集 精子获能 卵子体外培养
体外受精 早期体外胚胎培养
本地牛(子宫)
ppt课件
注意:卵子能直接与获能的精子在体外受精。
常用对象:实验动物如小鼠、兔,以及家畜猪、羊等
②刚屠宰母畜的卵巢中取卵或活体动物卵巢中取卵。
注意:要在体外经人工培养成熟后,才能与精子 结合完成受精。
常用对象:大家畜或大型动物,如牛等
ppt课件
6
1、体外受精
⑵精子的采集和获能
人教版教学课件3.2体外受精和早期胚胎培养
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通过控制受精条件,如卵子成熟度、精子数量和质量、受精环境等,使卵子和 精子在最佳状态下完成受精,形成早期胚胎。
历史与发展
01
02
03
04
1978年,世界上第一个体外 受精宝宝诞生,标志着体外受
精技术的诞生。
1989年,胚胎冷冻技术的出 现,使得IVF技术更加完善。
1992年,卵子显微操作技术 问世,为治疗不孕不育症提供
父母责任与遗传干预
在体外受精过程中,父母有选择遗传物质配型的权利,但这种干预 是否合理、是否过度,引发伦理争议。
资源分配与弱势群体的权益
在有限的医疗资源下,如何公平分配这些资源,保障弱势群体的权 益,是伦理上的重要议题。
法律监管
立法现状
各国对于体外受精和早期胚胎培 养的法律规定各不相同,有些国 家制定了专门法律,有些国家则
没有。
监管机构与职责
各国设立了相应的监管机构,负责 对体外受精和早期胚胎培养进行监 管,确保其合法、安全、有效。
法律责任与处罚
违反相关法律规定的行为将受到法 律制裁,包括民事责任、刑事责任 等。
社会影响与争议
科技进步与社会接受度
性别平等与生殖健康
随着体外受精和早期胚胎培养技术的 发展,社会对其接受度逐渐提高,但 仍存在一定争议。
温度控制
保持恒定的温度是胚胎培养的 基本要求。
气体环境
适宜的氧气和二氧化碳浓度对 于胚胎的正常发育至关重要。
湿度控制
维持适宜的湿度环境,以防止 胚胎干燥。
光照条件
适当的照明有助于调节胚胎的 生物钟和发育节奏。
03
体外受精与胚胎培养的实际应用
人类生殖辅助技术
试管婴儿
通过体外受精技术,将精子和卵 子在实验室条件下结合,形成胚 胎后移植到母体子宫内,实现受 孕。
体外受精和早期胚胎发育概述ppt课件
![体外受精和早期胚胎发育概述ppt课件](https://img.taocdn.com/s3/m/05fa7f06e418964bcf84b9d528ea81c758f52e32.png)
1.卵母细胞的采集和培养
对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。 实验动物如小鼠、兔,以及家畜猪、羊等
卵细胞的采集: 最常用的方法是卵巢经过 超数处排理卵,具体
做法是给供体注射 促,性使腺一激头素母畜一次排 出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子,之后 从 中冲取输卵卵子管,直接与获能的精子在体外 受精。
B.组织培养
C.克隆技术
D.基因工程
(2)“试管婴儿”的形成用到下列哪些技术?①②③(填序号)
①体外培养 ②人工授精
③胚胎移植 ④核移植
8、下图是培育能产生凝血因子牛的过程示意图,回答相关问题:
(1)为能从良种母牛体内一次取得多枚卵子,可以采用 注射促性腺的激方素法。据报道,这种技术已经被滥用于人类生育中,
概 念:---试管动物技术
通过 人工操作使卵子和精子在 体外条件 下成熟和受精,并通过培 养发育成 早期胚胎 后,再经移植产 生后代的技术。
一、从试管牛说起
待解决的问题: 国产奶牛:年均产奶量3000公斤左右 国际良种奶牛:年均产奶量10000公斤左右 引进一头良种成年奶牛需要3万-5万元; 牛的生育率低,一头牛一胎只生一只,一生 只能生育四五次。 牛的生育率虽然很低,但是牛的卵母细胞 相当的多,其卵巢中卵母细胞数目要比一生 中排卵数多1000倍左右; 公牛产生的精子数目就更多了。
操作员先将带有超 声波探头和采卵针的采 卵器通过阴道插入子宫, 同时通过将卵巢贴在探 头上。根据B超屏幕所显 示的卵泡位置,利用采 卵针穿刺卵泡并同时抽 吸卵母细胞。
活 体 采 集 的 牛 卵 母 细 胞
卵母细胞的成熟培养:CO2培养箱
CO2培养箱
2.精子的收集和获能
收集精子的 方法有:
受体牛
高三生物:3.2《体外受精和早期胚胎发育》教案(新人教版选修3)
![高三生物:3.2《体外受精和早期胚胎发育》教案(新人教版选修3)](https://img.taocdn.com/s3/m/c51f9c6a24c52cc58bd63186bceb19e8b8f6ec34.png)
第2节体外受精和早期胚胎发育[重难点]重点:1.体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义2.哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤难点:1.卵母细胞的采集和培养2.精子的采集和获能[知识精讲]教材梳理知识点一试管动物技术试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。
注意:1.试管动物技术的生殖方式是有性生殖。
但要特别注意题目是怎样问的,如果是问试管动物,那么是有性生殖,如果是问克隆过程中的胚胎移植,那么是无性生殖。
2.试管动物技术涉及到的生物技术有体外受精和胚胎移植技术。
知识点二体外受精哺乳动物的体外受精主要包括:卵母细胞的采集、精子的获能和受精。
1.卵母细胞的采集和培养卵母细胞采集的方法和操作的要领:方法〔1〕:对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊等卵母细胞采集时,可先用促性腺激素处理,使其排出更多的卵子,然后在适当的时间从输卵管冲取卵子,并使其直接与获能的精子在体外受精。
方法〔2〕:从刚屠宰的雌性动物体内摘取卵巢,再从卵巢中采集卵母细胞。
方法〔3〕:直接从活体动物的卵巢中采集卵母细胞,叫活体采卵。
需借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜,直接从活的动物卵巢中吸取卵母细胞。
后两种方法适用于大家畜和大动物。
采集的卵母细胞需在体外人工培养成熟后才能与获能的精子受精。
2. 精子的获能〔1〕采集精子的方法及要求:采集精子的方法主要有假阴道法、手握法和电刺激法。
假阴道法是用特制的假阴道,满足雄性动物交配时对压力、温度和润滑度的要求。
同时要配备有与供精动物相适应的台畜,训练动物爬跨台畜,借假阴道收集精液。
手握法是通过徒手或戴乳胶手套的手,直接把握雄性动物阴茎,施以适当压力和刺激即可引起射精,并可收集富含精子部分的精液。
电刺激法是采用特制的电极伸入动物的直肠直接刺激位于腰荐部的射精中枢引起射精,此方法只适用于野生或某些经济动物。
此外,对于啮齿类的实验动物可在处死后从附睾尾收集精液。
体外受精和早期胚胎发育课件
![体外受精和早期胚胎发育课件](https://img.taocdn.com/s3/m/82a1de153a3567ec102de2bd960590c69fc3d865.png)
通过高通量测序等技术,未来可能实现对胚胎染色体异常 的检测,提高胚胎的发育潜力和降低出生缺陷的风险。
胚胎表观遗传学研究
表观遗传学的研究不断深入,未来可能揭示更多关于胚胎 发育的奥秘,为体外受精和早期胚胎发育的研究提供新的 思路和方法。
社会接受度与伦理问题
社会观念的转变
随着社会的进步和人们知识水平 的提高,体外受精等辅助生殖技 术的接受度可能会逐渐提高,更 多的不孕不育患者将能够获得治 疗的机会。
02
总结词
技术进步带来更好的结果
03
详细描述
随着体外受精技术的不断改进和完善,成功率得到了显著提高。新的药
物和技术手段的应用,如基因诊断和胚胎筛选,使得医生能够更好地筛
选出健康的胚胎,从而提高成功率。
05
体外受精的未来展望
技术进步与新方法
胚胎培养技术的改进
干细胞技术的融合
随着生物技术的不断发展,体外受精 技术也在不断进步,未来可能会出现 更先进的胚胎培养技术和方法,提高 胚胎的发育率和成功率。
06
胚胎质量
胚胎质量是决定体外受精成功率的另一个关键 因素。优质胚胎更容易着床和发育成健康的胎 儿。
伦理与法律问题
伦理问题
体外受精技术涉及到伦理问题,如胚胎的权益、代孕、胚胎基因编辑等。这些 伦理问题需要制定相应的伦理准则和法规进行规范。
法律问题
体外受精技术也涉及到法律问题,如隐私权、继承权、胚胎所有权等。各国和 地区的法律对体外受精技术的规定和监管存在差异,需要进行跨国合作和协调 。
体外受精和早期胚胎发育ppt 课件
目
CONTENCT
录
• 体外受精简介 • 早期胚胎发育过程 • 影响因素与挑战 • 体外受精的成功案例 • 体外受精的未来展望
体外受精和早期胚胎发育课件
![体外受精和早期胚胎发育课件](https://img.taocdn.com/s3/m/dfdb2a74effdc8d376eeaeaad1f34693dbef106e.png)
1 胚胎编辑技术
基因编辑技术如CRISPR的出现将进一步推 动辅助生殖技术的发展。
2 人工智能
人工智能有望在优化诊断和预测胚胎发育的 过程中发挥重要作用。
可能的风险和限制
体外受精并不是对所有人都适用,且存在一些风险和限制: • 对女性的身体和心理产生影响 • 高昂的费用 • 结果并不总是成功
结语
在胚胎移植前对遗传疾病进行筛查,提高健康胚胎 移植的几率。
体外受精的临床应用与效果
不孕症治疗
体外受精常用于治疗不孕症,帮助不孕夫妇实现生育愿望。
成功率与并发症
体外受精的成功率在不同情况下有所不同,而一些并发症也需考虑。
伦理和社会问题的思考
伦理争议
体外受精引发了诸多伦理和道德辩论,涉及人类生 殖权、胚胎和遗传问题等。
体外受精和早期胚胎发育 ppt课件
人类辅助生殖的背景知识 - 体外受精的定义和原理 - 早期胚胎发育的过程和关键阶段
体外受精的技术与方法
细胞质内单精子注射 (ICSI)
通过将单个精子注入卵细胞中,增加受精成功率。
体外受精 (IVF)
将卵子和精子在体外受精,随后将发育良好的胚胎 移植至子宫。
胚胎植入前遗传学检测 (PGT)
体外受精和早期胚胎发育技术为不孕夫妇提供了新的生育机会,同时也引发 了许多伦理和社会争议。
社会问题
体外受精如何影响社会结构、家庭关系以及教育观 念是值得思考的话题。
层流培养技术及胚胎筛查
1
层流培养ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ术
提供更稳定的培养环境,增加胚胎发育的成功率。
2
基因筛查技术
通过遗传学检测,筛查胚胎是否有遗传疾病或染色体异常。
3
单碱基多态性 (SNP)
体外受精和早期胚胎发育课件
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巩固练习
4、不同动物胚胎移植的时间不同,但一般
D 不会在下列哪个时期移植( )
A、卵裂期
B、桑椹胚期
C、囊胚期
D、原肠胚期
5、“试管婴儿”技术是通过将不孕夫妇的精子和卵细胞取出在
试管中完成受精,并在试管中培养受精卵使其发育到桑椹胚或囊
23
3.受精
(1)环境
获能溶液或 专用的受精溶液
(2)要求
精子和卵子一般要放在 培养液小滴内共同培养 一段时间才能完成受精
3.受精
卵巢
卵母 细胞
新鲜或 解冻精
液
分离精子和精浆 培养法
卵母
精液
细胞
离心
培养 MⅡ期
卵母细胞
处精理子 获能 处理
获能精子
化学诱导法
获能液/专用受精溶液
体外受精 受精卵培养
因输卵管阻塞而不能生育。
医生从梅.布朗(时年31岁) 体内提取卵子,再取她丈夫(时 年38岁)的精液,经处理在体外 使卵子受精,受精卵分裂形成16 细胞胚后重新植入梅.布朗的子宫 内。9个多月后就生下了路易丝.
布朗。
著名妇产科专家张丽珠 教授与中国首例试管婴
儿
1988年3月10日我国首例试管婴儿诞 6
知识回顾
受精卵
受
精子的发生 精
过
减数分裂
程
卵子的发生
精子获能 准备阶段
2细胞
卵子成熟 穿越放射冠
4细胞
8细胞
穿越透明带 早
受精阶段
期
进入卵细胞膜
胚 胎
桑椹胚
发
育
雌雄原核形成
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精原细胞
精 子 发 生 的 过 程
有丝分裂
第一阶段
多个精原细胞
染色体复制
初级精母细胞
MⅠ
第二阶段
次级精母细胞
MⅡ
精子细胞
第三阶段
变形
精子
线粒体鞘
精子细胞
精子细胞变形小结 1、细 胞 核 —— 精子头的主要部分
2、高尔基体—— 头部的顶体
3、中 心 体 —— 精子的尾
4、线 粒 体 —— 线粒体鞘膜(尾的基部) 5、细胞内其他物质—— 原生质滴
4、受精的意义
• 维持每种生物前后代体细胞中染 色体数目的恒定 ; • 对于生物的遗传和变异十分重要。
五、胚胎发育
哺乳动物的胚胎发育是受精卵发育成幼体 的过程,包括桑葚胚、囊胚、原肠胚、胚 层分化、和胚体形成等主要阶段。 胚卵期 胚胎期
胎儿期
早期胚胎发育的几个阶段小结 受精卵 最初发育在输卵管进行有丝分裂
经过种种障碍的精子终于与卵子相遇
精子试图进入卵子 瞬间
精 子 试 图 进 入 卵 子 瞬 间
此时, 精子的头已经钻进去了, 我们还可以看 到它的中部和尾部,它就像一个不断旋转的钻头, 在尾巴拍打的驱动下,努力进入卵子。
受精后8天。胚牙完成"着陆",微微嵌入子宫 内膜。此时它分裂发育为几百个细胞。
新闻 湛江产天价牛肉 千元一斤有钱还难买
日本神户牛肉(雪花牛肉)
这就是和牛 (又称日本神户 牛),是当今世 界公认的品质最 优秀的良种肉牛, 国内市场每公斤 能售出2000多元 人民币的天价。
如何将这种优质的牛进行快速、大量的繁殖呢?
专题3
胚胎工程
胚胎工程
胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行
的多种显微操作和处理技术,如胚胎移植、体
孕 四 周
受精后6星期,人形已隐约可见。这时,胚胎的 心跳每分钟140—150下.是母亲心跳的两倍。
人类胚胎第8周时在子宫内的照片
此时胎儿已长到20周,他移动手臂,把手指放在唇 边,这可以促进它对吮吸的反应。
外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。
经过处理后获得的胚胎,还需要移植到雌性动
物体内生产后代,以满足人类的各种需求。
•操作对象:早期胚胎和配子
•技术手段:胚胎移植、体外受精、
胚胎分割、胚胎干细胞培养等 •理论基础:哺乳动物受精和早期胚胎 发育的规律
一、精子的发生
精原细胞形成成 熟精子的过程 (1)场所: 睾丸内的曲细精管中 (2)时期: 初情期 生殖机能衰退
(球状,最后脱落)
二、卵子的发生
(1)发生部位: 卵巢、输卵管 (2)发生时间: 从胚胎时期性别分化以后(胎儿 时期的储备)到出生后暂停;
从性成熟(初情期)开始,到生 殖机能衰退。
( 3)
胎儿时期完成
卵原细胞
有丝分裂
卵 子 发 生 过 程
多个卵原细胞
染色体复制
初级卵母细胞 初级卵母细胞
MⅠ
马,犬
受精前的 准备阶段
准备阶段1:精子获能
准备阶段2:卵子的准备
3、过程
受精阶段
精子穿越放射冠和透明带
精子进入卵黄膜 雌雄原核形成 受精卵的形成
小结受精阶段: 精子穿越放射冠 顶体反应 精子穿越透明带 透明带反应 (第一道) 精子穿越卵黄膜 卵黄膜封闭作用 (第二道) 原核形成 雄原核形成和雌原核形成 配子结合 雌雄原核融合形成合子(受精卵)数量不断增加,但 胚胎总体积并不增加,或略有减少。 由具有全能性细胞构成,细胞数在32个左右, 排列紧密,形似桑椹 内细胞团:发育成胎儿各组织 滋养层细胞:发育成胎膜和胎盘 滋养层 外胚层 中胚层 内胚层 原肠腔
囊胚(内含囊胚腔)
原肠胚(内含原肠腔) 胎儿形成
次级卵母细胞
初情期后
+第一极体
排卵
猪,牛,羊,
MⅡ
中期 受精
合子
+第二极体
充满活力的精子
卵子的结构
精子奋力游向卵子
精子试图进入卵子 瞬间
此时, 精子的头已经钻进去了, 我们还可以看到它的中部 和尾部,它就像一个不断旋转的钻头,在尾巴拍打的驱动 下,努力进入卵子。
四、受精
1、概念:指精子和卵子结合形成合子(即受精卵)的过程。 2、场所:受精是在输卵管内完成的。