人体寄生虫学部分解析

人体寄生虫学部分
第1部分医学蠕虫
（Medical helminthes）
第1单元线虫
(nematode)
实验一、似蚓蛔线虫（Ascaris lumbricoides）
(蛔虫roundworm)
一、目的要求
1．掌握蛔虫卵(受精卵、未受精卵及感染期蛔虫卵)的形态特征。

2．掌握常用的虫卵检查方法――粪便生理盐水直接涂片法。

3．熟悉蛔虫成虫的形态特点，并能区分雌虫和雄虫。

4．观察病理标本，以深入了解蛔虫对人体的致病作用。

二、实验内容
（一）标本观察（自学）
1.受精蛔虫卵（玻片标本）
从大小、形态、颜色、卵壳结构和内含物等五个方面仔细观察。

虫卵呈宽椭圆形，大小为45~75μm×35~50μm，卵壳厚，表面有一层凸凹不平的蛋白质膜，新鲜粪便排出的虫卵常被宿主胆汁染成棕黄色，内含有一个大而圆、未分裂的受精卵细胞，与卵壳之间形成半月形间隙，如粪便放置过久或者患者便秘，那么虫卵内的半月形间隙可消失。

图1－1。

2.未受精蛔虫卵（玻片标本）
虫卵呈长椭圆形或不规则形，大小为88~94μm×39~44μm，卵壳和蛋白质膜均较受精蛔虫卵薄，呈淡黄色，内含有许多大小不等的屈光颗粒。

图1－1。

3.感染期虫卵（玻片标本）
受精蛔虫卵在外界适宜条件下，经过一段时间卵壳内的卵细胞可发育成一条卷曲的幼虫。

4.脱蛋白膜受精卵（玻片标本）
蛔虫卵排出体外后，由于摩擦等外力等因素作用，有时蛋白质膜会完全或部分脱落，此时虫卵颜色变浅或无色透明，可见清晰的卵壳，仍较厚，常易与无色透明的钩虫卵相混淆，观察时应注意显微镜光线不要太强。

5. 蛔虫头端结构标本（玻片标本）
将蛔虫成虫切片后，卡红染色后呈粉红色。

低倍镜下观察，在虫体顶端口孔周围可见有3个“品”字形排列的唇瓣，背侧的一个较大，唇瓣的内缘有细齿。

图1－2 成虫
图1－1 蛔虫卵
（二）示教
1．雌雄成虫（大体标本）
肉眼观察，新鲜虫体呈淡红色，死后或经福尔马林固定保存后呈灰白色。

成虫为线状、长圆柱状，中间稍膨大，两端逐渐变细，体表有横纹和两条侧线，形似蚯蚓，雌虫大小为20~35um，尾部尖直，雄虫大小为15～31cm，后端向腹部卷曲，有时可见2根交合刺。

图1－2。

2．雌雄成虫内部结构解剖标本（大体标本）
观察体内生殖与消化器官。

肉眼观察可见，虫体体腔内除一条直的消化管外，其余均为生殖器官，细长如线，迂回盘曲，并且雌性生殖系统为双管型，由卵巢、输卵管、子宫、阴道和阴门等组成。

近端为子宫，两侧子宫会合为阴道，远端为卵巢游离在原体腔内。

因此，蛔虫的产卵量非常大，繁殖能力相当强。

雄性生殖器官为单管型：由睾丸、储精囊、输精管、射精管和交合刺等组成，游离端为睾丸。

3．蛔虫横切面染色标本（玻片标本）
观察下列结构：体壁：表皮为角皮层，其下为皮下层和纵肌层，皮下层伸入原体腔内并增厚，背腹及两侧分别形成四条纵索。

肠管：肠壁由单层柱状上皮细胞组成。

原体腔：即体壁和消化道之间的腔隙，腔内充满液体，内部器官，如生殖、消化器官浸浴其中。

4.蛔虫性机械性肠梗阻（病理标本）
可见较多蛔虫扭结成团，完全或部分阻塞肠道。

5. 胆道蛔虫症（病理标本）
肝门胆管内嵌塞有1条蛔虫。

6. 蛔虫性肠穿孔（病理标本）
可见蛔虫穿透患者肠壁。

7. 蛔虫钻入阑尾（病理标本）
可见蛔虫钻入阑尾。

（三）操作
1.粪便直接涂片法查虫卵（操作）
1）材料：生理盐水，载玻片，盖玻片，棉签棍或牙签，
2）方法：滴一滴生理盐水于洁净的载玻片，用棉签棍或牙签挑取绿豆大小的
粪便块，在生理盐水中涂抹均匀；涂片的厚度以透过涂片约可辨认书上的字迹为宜，加盖玻片。

一般在低倍镜下查到蛔虫卵，换用高倍镜观察。

应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。

虫卵都具有一定形状和大小；卵壳表面光滑整齐，具固有色泽；卵内含卵细胞。

3）注意：
①粪便量要适中。

粪便过多，则涂片太厚不利于观察；粪便太少，则涂片薄影
响检出率。

制好的涂片以透过水膜能隐约看到课本的字体为适宜。

②粪便中含有各种植物细胞，酵母菌、花粉、植物纤维和未完全消化的食物残
渣等，容易与虫卵混淆，必须注意鉴别。

③制好的涂片不能干燥，否则不易辨认虫卵。

2. 浓聚法
A 清水沉淀法(示教)
1）原理：原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底，有助于提高检出率。

2)材料：小烧杯，铜筛(或塑料纱网)，大试管
3）方法：取粪便约5～10克置小烧杯内，加水少许，用玻璃棒搅成糊状，并加水稀释。

倒入铜筛(或塑料纱网)内过滤，滤去粪渣，并把滤液倾入大试管内，加水至将满。

静置10～15分钟。

倾去上层液4／5，留粪渣，加水，静置5～10分钟，如此换水数次，直到上清液澄清为止，最后倾去上层液体，吸取沉渣镜下检查。

B离心沉淀法：(示教)
将上述滤去粗渣的粪液离心（1500～2000rpm/min）1～2分钟，倒去上液，注入清水，再离心沉淀，如此反复沉淀3～4次，直至上液澄清为止，最后倒去上液，取沉渣镜检。

3. 厚涂片透明法(改良加藤法)（示教）：
1）材料：定量板及刮棒；100目尼龙或金属筛网片(大小约4×4cm)；亲水玻璃纸条(约5.2×2.6cm)，浸泡于甘油孔雀绿液(3％孔雀绿1ml，甘油 50m1，水49ml)
中过夜后用；压板(厚玻璃或有机玻璃制品，大小为5×3cm，可连续使用)；载玻片及显微镜。

2）操作步骤
①滤取粪便：将筛网覆盖在送检标本上，自筛网上用刮棒刮取挤溢到网面上的粪
便。

②模板取样：将定量板放在载玻片上，使小边突紧贴玻片的一边，用一手的两指
压住定量板的一端，将刮棒上取得的粪便填满模孔，刮去多余部分，
然后自一端掀起定量板，再松开压住的两指把板取去，玻片上即留
下二个长条形粪样。

③盖纸压片：在粪条上覆盖含孔雀绿甘油液的玻璃纸条，展平后用压板加压，粪
样即在玻璃纸与载玻片间铺开成长椭圆形，小心取下压板(一指固定
压板外的玻璃纸的一端，另一手平拖移去压板，以免玻璃纸与压板同
时揭起)。

④透明读片：约1～2小时粪膜透明后即可读片。

钩虫卵不宜透明过久。

图1－3 粪便沉淀及毛蚴孵化法
表1－1 蠕虫卵及包囊的比重
表1－2 各种蠕虫每条雌虫每日排卵数
（四）实验报告
绘受精和未受精虫卵形态图。

要求：用平行线标注层次结构名称。

铅笔描绘，以点和线构成轮廓图，线条要平滑，不涂阴影，不涂彩色，注意用铅笔描形态和大小的比例，绘出特征。

（郭俊杰）实验二、毛首鞭形线虫(Trichuris trichiura)
（鞭虫whipworm）
一、目的和要求
1. 掌握鞭虫卵的形态特征。

2. 熟悉鞭虫成虫的形态特征。

3. 了解鞭虫对人体的致病作用。

二、实验内容
（一）标本观察（自学）
1．虫卵（玻片标本）
先在低倍镜下观察，可见虫卵较小，50~54μm×22~23μm，纺锤形或腰鼓形，黄褐色，卵壳较厚，换高倍镜，可见卵壳两端各有一个透明的塞状突起—盖塞，从粪便排出的新鲜虫卵内含有一个受精卵细胞。

图1－4。

图1－4 鞭虫Array
（二）示教
1.鞭虫成虫标本（大体标本）
新鲜鞭虫呈肉红色，固定后为乳白色，外形似马鞭，前3/5细长，后2/5粗短。

雄虫较小，长30～45mm，尾部向腹面卷曲，雌虫较大，长35～50mm，尾端顿圆。

图1－4。

2．鞭虫寄生于肠壁（病理标本）
10％甲醛固定，瓶装标本。

可见成虫以其细长的头端钻入肠壁粘膜层，粗短的后部则游离于肠腔，由于成虫吸食宿主血液，故体内为黑褐色。

（三）实验报告
绘鞭虫卵形态图。

（郭俊杰）实验三、十二指肠钩口线虫（十二指肠钩虫）
(Ancylostoma duodenale)、
美洲板口线虫（美洲钩虫）
(Necator americanus)
一、目的和要求
1．掌握虫卵的形态特征。

2. 掌握钩虫卵的常用诊断方法——饱和盐水浮聚法。

2．熟悉两种钩虫形态的鉴别要点。

3．了解钩虫对人体的致病作用。

二、实验内容
（一）标本观察（自学）
1．钩虫卵（玻片标本）
十二指肠钩虫卵与美洲钩虫卵极为相似，不易区分。

先在低倍镜较暗光线下找到椭圆形、无色透明或淡黄色的虫卵，大小较蛔虫卵稍小，为36～40μm×56～76μm，换高倍镜观察，卵壳很薄，内含2~8个卵细胞或多细胞期，若患者便秘或粪便放置过久，虫卵细胞可继续分裂为多细胞期，有时可见桑椹期甚至含蚴卵。

卵壳与细胞间有明显的空隙。

图1－5。

图1－5 钩虫卵
2.丝状蚴（玻片标本）
由于两种钩虫对人体的致病作用及地理分布存在差异，因此，有必要对二者进行鉴别。

，两种钩虫的丝状蚴的鉴别要点见表1－3。

表1－3 寄生人体两种钩虫丝状蚴的鉴别
（二）示教
1．成虫（大体标本）
成虫体长约1cm左右，半透明，肉红色，死后呈灰白色。

细长圆柱形，虫体前端较细，顶端有一发达的口囊，由坚韧的角质构成。

前端向背侧仰屈，雄虫末端膨大形成交合伞，雌虫尾部尖细，十二指肠钩虫头部及尾部均向背面弯曲，呈“C”形；美洲钩虫头部向背部弯曲，尾部向腹面弯曲，呈“S”形。

十二指肠钩虫与美洲钩虫的形态鉴别要点见表1－4。

2．十二指肠钩虫口囊染色标本（玻片标本）
十二指肠钩虫顶端有一发达的口囊，由坚韧的角质构成。

因虫体前端向背面仰曲，口囊的上缘为腹面、下缘为背面。

十二指肠钩虫的口囊呈扁卵圆形，其腹侧缘有钩齿2对，外齿一般较内齿略大，背侧中央有一半圆形深凹，两侧微呈突起。

3. 美洲钩虫的口囊染色标本（示教）
美洲钩虫口囊呈椭圆形。

其腹侧缘有板齿1对，背侧缘则有1个呈圆锥状的尖齿。

表1－4 寄生人体两种钩虫成虫的鉴别
鉴别要点十二指肠钩虫美洲钩虫
4. 成虫咬附在肠壁上（病理标本）
钩虫寄生于犬小肠标本，可见肠粘膜表面的小溃疡和出血点。

（三）操作
1. 饱和盐水浮聚法查钩虫卵图1－6。

（1）材料：饱和盐水，载玻片，竹签，玻璃棒，盖玻片。

（2）方法：用竹签取黄豆粒大小的粪便置于浮聚瓶（高3.5cm，直径约2cm的圆形直筒瓶）中，加入少量饱和盐水调匀，再慢慢加入饱和盐水到液面略高于瓶口，但不溢出为止。

此时在瓶口覆盖一载玻片，静置15分钟后，将载玻片提起并迅速翻转，注意防止玻片上液体滴落，盖上盖玻片，镜检。

此时如有虫卵则集中于玻片之水膜上，检查时光线不宜过强，发现虫卵后，换用高倍镜观察（图）。

饱和盐水配制：将食盐徐徐加入盛有沸水的容器内，不断搅动，直至食盐不再溶解为止。

2. 钩蚴培养法
根据虫卵在适宜条件下可在短时间内孵出幼虫的原理设计。

取干净的中试管（口径1cm，长10cm）一支，加入少许冷开水1～2ml，剪一“T”字型滤纸，其宽度比试管的直径略小，长度相当于从试管口至水面接触的距离。

取粪便0.2～0.4克，均匀地涂在滤纸的中段，置25～30℃培养。

培养过程中，每天要补充试
管内蒸发去的水份。

三天后用放大镜检查管底水中有无幼虫，如果阴性继续培养
至第五天。

图1－7。

观察时注意：幼虫虫体透明，在水中可作蛇形运动，检查时需仔细观察。

图1－6 饱和盐水浮聚法
图1－7 钩蚴培养法
（四）实验报告
绘钩虫虫卵图。

（郭俊杰）实验四、蠕形住肠线虫Enterobius vermicularis
(蛲虫pinworm)
一、目的和要求
1.掌握蛲虫卵的形态特征。

2.熟悉蛲虫成虫的形态特点。

3.了解蛲虫对人体的致病作用和实验室诊断方法。

二、实验内容
（一）标本观察（自学）
1．虫卵（玻片标本）
虫卵大小约为50～60×20～30µm，卵壳厚，无色透明，有两层壳质，蛋白质膜光滑。

普通显微镜下观察的卵壳两侧不对称，一侧较平，一侧稍凸，两端不等宽，虫卵的立体构型呈近似椭圆形的不等面三角体。

虫卵自虫体排出时，卵壳内细胞多已发育至蝌蚪期胚。

成熟虫卵，内含幼虫。

图1－8。

图1－8 蛲虫成虫与虫卵
（二）示教
1. 雌雄成虫（大体标本）
成虫细小，乳白色。

虫体角皮具有横纹，雌虫大小约为8～13×0.3～0.5mm，虫体中部膨大，尾端直而尖细，其尖细部分约为虫体长的1／3。

雄虫微小，大小约为2～5×0.1～0.2mm，体后端向腹面卷曲。

图1－8。

（三）操作
1. 生理盐水棉签拭子法（示教）
用生理盐水湿润棉签轻拭肛门周围或皱褶，把棉签放入盛有饱和盐水的西林瓶内荡洗，然后用浮聚法或沉淀法检查虫卵。

2.透明胶纸法查虫卵（示教）：
用长约6cm，宽约2cm的透明胶纸粘擦肛门周围的皮肤，取下胶纸，将有胶面平贴玻片上，镜检。

镜检时，在胶纸下加一滴生理盐水或二甲苯，可增加虫卵清晰度，便于检查出虫卵。

注意此法检查时间在清晨未解大便前，并且胶纸从肛周取下后再粘到载玻片上时应尽量贴平，不要出现皱褶或气泡，以免影响检查结果。

（四）实验报告
绘蛲虫卵图。

（郭俊杰）实验五、丝虫(filaria)
马来布鲁线虫（马来丝虫）(Brugia malayi)
班氏吴策线虫（班氏丝虫）(Wuchereria bancrofti)
一、目的和要求
1.掌握两种微丝蚴的基本结构。

2.熟悉丝虫病的病原学诊断方法。

3.了解丝虫生活史和流行病学特点。

二、实验内容
（一）标本观察（自学）
1.班氏丝虫微丝蚴染色标本（玻片标本）
先在低倍镜下找到虫体，虫体呈细长线状，（注意虫体外形、姿态、鞘膜、
头间隙的长宽比例、体核等）头端钝圆，尾端尖细，外被有鞘膜。

体内有很多圆形或椭圆形的体核，头端无核区为头间隙，其长宽比约为1：1，在虫体前端1／5处的无核区为神经环，尾逐渐变细，近尾端腹侧有肛孔。

尾端无尾核。

图1－9，表1－5。

2.马来丝虫微丝蚴染色标本（玻片标本）
与班氏丝虫微丝蚴相比，马来丝虫微丝蚴较短粗，弯曲不自然，头间隙较长，其长宽比约为：2：1，体核常堆积在一起，大小不规则。

尾端有2个膨大处，其内各有1个尾核。

图1－9，表1－5。

3.微丝蚴未染色标本（玻片标本）
微丝蚴细长弯曲或卷曲，反光性强，头端钝圆，尾端尖细，观察时光线不
要太强。

表1－5 班氏与马来微丝蚴形态鉴别
图1－9 丝虫微丝蚴
（二）示教
1. 马来丝虫成虫标本（大体标本）
肉眼观察，虫体呈乳白色，细长如丝线。

雌虫长约8cm，雄虫长约4cm，雄虫尾端向腹面卷曲2～3圈。

2. 丝虫中间宿主
致倦库蚊（大体示教）
中华按蚊（大体示教）
（三）操作（示教）
1.厚血膜检查法
1）材料：载玻片，盖玻片，推片，75％酒精，采血针，
2）方法：在晚间10～12点取血。

用75％酒精消毒采血针和受检者耳垂，以左手拇指和食指捏着耳垂上方、右手持针，迅速刺人耳垂约3毫米，轻轻挤压，弃去第一滴血，取出血液三大滴（相当于60mm3），置载玻片两侧中、外1／3处，用另一载玻片的一角将血液从内向外作螺旋状推开，做成两个二分钱硬币大小的血膜，将玻片平放，待自然干透后，用铅笔在两个血膜的边缘写上编号，收藏在玻片盒内，检查时将玻片放入清水中片刻，脱去血红蛋白，待血膜呈乳白色时，将其取出，反扣待干，甲醇固定、染色，镜检。

3）染液配制：
甲液：取品蓝2.5g溶于150ml蒸馏水中，加热促溶。

另取高锰酸钾1.5g溶于蒸馏水中。

将二液混合，煮沸20min，冷却后过虑，补足煮沸时蒸发的水分，备用。

乙液：取1mol/L盐酸4ml，伊红0.25g，加95％乙醇96ml，使伊红充分溶解，过滤后备用。

4）染色方法：
将已溶血、固定的厚血膜放入乙液中染色10秒钟，取出后流水冲洗，再放入甲液中染10秒钟，水洗，待干后镜检。

或趁有水时加盖片，在低倍镜下做初步检查，如发现微丝蚴，待干后再做进一步检查。

2.新鲜血滴检查法
1）材料：载玻片，盖玻片，推片，75％酒精，采血针
2）方法：取末梢血二大滴（最好加入1/100，000肝素一滴）置载玻片中央，加上盖玻片后，在低倍镜下检查。

微丝蚴在血液中扭动，推挤周围红细胞。

3.血液微丝蚴浓集法
1）材料：3.8％枸橼酸钠溶液，离心管，蒸馏水，
2）方法：取静脉血1ml，置于盛有0.1ml 3.8％枸橼酸钠溶液的离心管内，摇匀，加入蒸馏水9ml，使之溶血，以3000转／分钟的速度离心2分钟，倾去上清液取沉渣镜检。

4.鞘膜积液检查
主要检查班氏微丝蚴。

阴囊皮肤经碘酒精消毒后，用注射器抽取鞘膜积液作直接涂片检查，也可加适量生理盐水稀释离心，取沉渣镜检。

5.马来丝虫幼虫在中间宿主体内发育过程的实验观察
1) 从实验室建立的保虫宿主—长爪沙鼠的腹腔内穿刺吸出含有微丝蚴的腹腔液。

2) 取抗凝血（人或动物血）5～10ml，离心后去血浆，用生理盐水洗涤红细胞2～
3次。

3) 将含有微丝蚴的腹腔液加入5～10ml红细胞生理盐水混液中，用玻棒轻轻搅匀。

4) 用完整的胎盘膜一块做成囊袋，吸取红细胞与微丝蚴混合液置胎盘膜囊袋中，牢固结扎袋口。

5) 将囊袋置于饲有雌性中华按蚊的蚊笼内，在25～30℃条件下，让雌蚊吸食。

6) 大多数雌蚊吸饱后，取出囊袋，改用10％葡萄糖湿棉球，继续饲养。

7) 4～6小时后，取部分饱食后的雌蚊麻醉致死，解剖，取出蚊胃并挑破胃壁挤出血液，加一滴生理盐水稀释，找微丝蚴，观察微丝蚴的脱鞘情况。

8) 于第3天，取部分蚊解剖胸肌，查找粗短的形似腊肠的幼虫。

9) 2～3周后取出余下的蚊解剖，在喙和体腔内找虫体细长、运动活泼的感染期幼虫。

（四）实验报告
绘图两种微丝蚴形态图。

（郭俊杰）
六、旋毛形线虫(Trichinella spiralis)
（旋毛虫）
一、目的和要求
1.掌握幼虫囊包的形态特点和病原学诊断方法。

2.通过动物实验了解生活史和致病作用。

二、实验内容
（一）标本观察（自学）
6～7条的。

图1－10。

1.幼虫囊包染色标本（示教）
幼虫囊包于宿主的横纹肌肉，呈梭
形，其纵轴与肌纤维平行，大小约为
0.25～0.5×0.21～0.42mm。

一个囊包内
通常含1～2条卷曲的幼虫，个别也有
图1－10 幼虫囊包
（二）示教
1. 成虫（大体标本）
成虫微小，线状，虫体后端稍粗。

雄虫大小约为1.4～1.6×0.04～0.05mm;雌虫约为3～4×0.06mm。

（三）操作（示教）
1. 旋毛虫动物感染
感染方法：
1）喂食法：取感染6周的阳性小白鼠，处死取一小块肌肉压片检查，并计
算囊包数。

将含有约30个囊包的肌肉喂给小白鼠。

正常饲养。

2）腹腔注入法：用绞肉机将含旋毛虫幼虫的肌肉绞碎，置于含有1.0％胃蛋白酶
的三角烧瓶中，一般每1g肌肉加入1.0％胃蛋白酶60ml，放37～40℃温箱中，经10～18h （在消化过程中经常摇动）。

将肌肉消化后，将上层液倒掉，然后加入37～40℃温水于沉淀物中，反复清洗或经离心沉淀收集幼虫，用生理盐水洗涤幼虫2～3次，取100～200条幼虫，注入小鼠或大鼠腹腔内。

解剖观察：
1) 将已感染旋毛虫幼虫囊包6周的小白鼠处死解剖。

2) 取小白鼠小肠，剪开并用清水洗涤、轻刮，在洗涤液的沉渣中找成虫。

3) 取膈肌、颊肌、腿部肌肉等，压片找幼虫囊包。

2. 旋毛虫幼虫囊包浓集法
将被检肌肉剁成小块，用研钵磨成匀浆，倒入烧杯内，加适量胃蛋白酶消
化液，37℃温箱内消化16～20小时，倾去上清液，加入生理盐水，过滤除去粗渣，沉淀后收集幼虫。

（四）实验报告
绘旋毛虫幼虫囊包形态图。

（郭俊杰）-- 2。