人胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒说明书

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人胰岛素样生长因子1(IGF-1)定量检测试剂盒(ELISA)

人胰岛素样生长因子1(IGF-1)定量检测试剂盒(ELISA)

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。

人胰岛素样生长因子1(IGF-1)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】人胰岛素样生长因子1(IGF-1)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测人血清、血浆及相关液体样本中胰岛素样生长因子1(IGF-1)的含量。

【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。

将标准品、待测样本加入到预先包被人胰岛素样生长因子1(IGF-1)单克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。

依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人胰岛素样生长因子1(IGF-1)浓度呈正相关,450nm 波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中人胰岛素样生长因子1(IGF-1)含量。

【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7显色剂A液6mL2标准品0.3mL×6管8显色剂B液6mL320倍浓缩洗涤液25mL9终止液6mL4样本稀释液6mL10说明书1份5特殊稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品(1号→6号)浓度依次为:160、80、40、20、10、5μg/L.【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。

2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。

(完整版)人胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒说明书

(完整版)人胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒说明书

原液直接作为最高标准浓度,样品稀释液直接作为标准浓度
0 pg/mL ,临用前 15 分钟内配
制。
如配制 500 pg/mL 标准品:取 0.5ml 1,000 pg/mL 的上述标准品加入含有 0.5ml 样品稀释液 的 Eppendorf 管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液 : 1× 20ml/ 瓶。
的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的
OD 值代入方程式,计算出样品
浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 注意事项
1. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
2. 一次加样时间最好控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
3. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
4. 检测稀释液 A: 1×10ml/ 瓶。
5. 检测稀释液 B: 1× 10ml/ 瓶。
6. 检测溶液 A: 1× 120ul/ 瓶( 1: 100)临用前以 检测稀释液 A 1:100 稀释,稀释前根据预先
计算好的每次实验所需的总量配制(每孔
100ul),实际配制时应多配制 0.1-0.2ml 。如 1ul
检测溶液 A 加 99ul 检测稀释液 A 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液 B:1× 120ul/ 瓶( 1:100)临用前以 检测稀释液 B1:100 稀释。稀释方法同检测溶 液 A。
8. 底物溶液 : 1× 10ml/ 瓶。 9. 浓洗涤液 : 1× 30ml/ 瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释 10. 终止液 : 1×10ml/ 瓶( 2N H 2SO4)。 标本的采集及保存
25 倍。
1.细胞培养物上清:请离心后收集上清,并将标本保存于

人血管内皮细胞生长因子(VEGF)定量检测试剂盒(ELISA)

人血管内皮细胞生长因子(VEGF)定量检测试剂盒(ELISA)

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。

人血管内皮细胞生长因子(VEGF)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】人血管内皮细胞生长因子(VEGF)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测人子血清、血浆及相关液体样本中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的含量。

【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。

将标准品、待测样本加入到预先包被人血管内皮细胞生长因子(VEGF))多克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。

依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人血管内皮细胞生长因子(VEGF))浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中人血管内皮细胞生长因子(VEGF))含量。

【试剂盒组成】1 酶标包被板12孔×8条7 底物夜A6mL2 标准品:1600pg/ml0.6mL 8 底物夜B6mL3 20倍浓缩洗涤液20mL9 终止液6mL4 标准品稀释液6mL10 说明书1份5 样本稀释液6mL 11 封板膜1张6 酶标试剂6mL12 密封袋1个备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:1600、800、400、200、100、50pg/ml【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。

2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。

(完整版)人胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒说明书

(完整版)人胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒说明书

人胎盘生长因子(PlGF)酶联免疫分析试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂盒仅供研究使用预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆、尿液, 细胞培养物上清或其它相关液体中胎盘生长因子,PlGF含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中PlGF水平。

用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入PlGF抗原、生物素化的抗人PlGF抗体、HRP 标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的PlGF呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1.酶联板:一块(96孔)2.标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为1,000 pg/mL,做系列倍比稀释后,分别稀释成1,000 pg/mL,500 pg/mL ,250 pg/mL,125 pg/mL,62.5 pg/mL,31.25 pg/mL,15.6 pg/mL,其原液直接作为最高标准浓度,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/mL,临用前15分钟内配制。

如配制500 pg/mL标准品:取0.5ml 1,000 pg/mL的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3.样品稀释液:1×20ml/瓶。

4.检测稀释液A:1×10ml/瓶。

5.检测稀释液B:1×10ml/瓶。

6.检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100ul),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。

如1ul 检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。

人血管内皮生长因子 ELISA 试剂盒说明书

人血管内皮生长因子 ELISA 试剂盒说明书

产品说明书人血管内皮生长因子ELISA试剂盒(Human VEGF ELISA KIT)产品货号:H6139S, H6139M, H6139L产品规格:24T, 48T, 96T产品内容:注:终止液和显色剂具有腐蚀性,一旦接触到液体,请尽快用大量清水冲洗。

储存条件4℃避光保存,有效期见外包装。

开封后,保存温度详见说明书。

产品介绍Human VEGF ELISA Kit (Human Vascular Endothelial Cell Growth Factor Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ,即人血管内皮生长因子ELISA试剂盒,可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组VEGF浓度。

人VEGF是由两个相同亚基以二硫键交联组成的二聚体糖蛋白,基因定位于第6号染色体长臂,由8个外显子和7个内含子交替构成,约14 kb。

由于mRNA剪接方式不同,产生了单链分别含121,145,165,183,189和206个氨基酸的不同变异体。

VEGF 121分子量约为34-46 kDa,是可溶性分泌型蛋白质,以游离状态存在,不能与肝素结合;VEGF 165分子量为45 kDa,30-50%以可溶性形式分泌于细胞外基质,其余部分与细胞膜、基底膜或细胞外基质含有肝素的糖蛋白结合。

VEGF 145存在于胎盘细胞和女性生殖道肿瘤细胞。

VEGF 189及VEGF 206分泌后完全结合于细胞膜或基底膜含有肝素的糖蛋白上。

骨骼肌,心肌,肝细胞,成骨细胞,中性粒细胞,巨噬细胞,角质形成细胞,血小板,褐色脂肪组织,CD34+细胞,星形细胞,神经元和内皮细胞等多种细胞和组织均可产生VEGF。

血清和血浆样本均可检测到VEGF,由于血小板可释放VEGF,因此血清中VEGF含量较高。

VEGF是一种特异作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子,可增加血管通透性、促进血管形成、引起细胞外基质成分改变等。

人胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒操作步骤

人胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒操作步骤

人胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒操作步骤试剂盒本试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA).已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。

先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。

洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。

再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。

产生颜色。

颜色的深浅和样品中指标的浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制:试剂盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶标板1块板(96T)半块(48T)塑料膜板盖1块半块标准品1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)空白对比1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)标准品稀释缓冲液1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)生物素标记抗体1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)亲和链酶素HRP 1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)停止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)自备料子:1.蒸馏水。

2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3.振荡器及磁力搅拌器等。

样品收集、处置及保管方法:1、血清操作过程中躲避任何细胞刺激。

使用不含热原和内毒素的试管。

收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞快速当心地分别。

2、血浆EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。

1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、细胞上清液1000×g离心10分钟除颗粒和聚合物。

4、组织匀浆将组织加入适量生理盐水捣碎。

1000×g离心10分钟,取上清液5、保管假如样品不立刻使用,应将其分成小部分70 ℃保管,躲避反复冷冻。

尽可能的不要使用溶血或高血脂血。

假如血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。

不要在37℃或更高的温度加热解冻。

胎盘生长因子罗氏中文说明书

胎盘生长因子罗氏中文说明书

胎盘生长因子罗氏中文说明书1. 引言本文档旨在提供胎盘生长因子(Placental Growth Factor,简称PlGF)罗氏中文说明书。

PlGF是一种蛋白质因子,它在胎盘形成和生长过程中发挥重要作用。

本说明书将包含PlGF 的用途、剂量和使用方法等相关信息,供医务人员参考。

2. 产品描述2.1 产品名称胎盘生长因子(Placental Growth Factor)2.2 适应症PlGF主要用于以下适应症的治疗:•糖尿病相关的胎儿生长受限•妊娠期高血压•妊娠期并发症•早产威胁等2.3 规格本产品规格如下:•药物名称:胎盘生长因子•注射剂型:冻干粉•注射剂量:50mg/瓶•注射途径:静脉注射3. 使用方法3.1 配置药物按照以下步骤配置胎盘生长因子:1.取出一瓶胎盘生长因子冻干粉。

2.使用无菌注射用水冲洗瓶口,将冻干粉溶解。

3.轻轻旋转瓶子,直至溶解彻底。

4.检查溶液是否清澈无颗粒,如有异物应停止使用。

3.2 注射方法胎盘生长因子的注射方法如下:1.准备一支注射器,并连接一根无菌静脉输液管。

2.抽取已经溶解的胎盘生长因子溶液。

3.丢弃首次抽取的1ml液体,确保注射器内只有胎盘生长因子溶液。

4.清洁注射部位,然后将注射器插入静脉,并缓慢注射药物。

5.注射完毕后,拔出注射器,按压注射部位2-3秒以止血。

4. 注意事项在使用胎盘生长因子前,请注意以下事项:•本产品仅供医务人员使用,患者禁止自行使用。

•使用前应检查药品包装是否完好,如有破损应立即停止使用。

•不得使用过期的药品,严禁使用已变色或有异物的药品。

•使用前应详细阅读药品说明书,了解禁忌症和不良反应等相关内容。

•使用过程中如出现过敏反应或其他不适,请及时停止使用,并咨询医生。

5. 不良反应胎盘生长因子可能引起某些不良反应,包括但不限于以下情况:•过敏反应,如皮疹、荨麻疹、呼吸困难等。

•恶心、呕吐、胃痛等消化系统反应。

•头痛、头晕、乏力等神经系统反应。

(完整版)胎盘生长因子定量检测试剂盒(说明书)

(完整版)胎盘生长因子定量检测试剂盒(说明书)

胎盘生长因子定量检测试剂盒说明书(PLGF ELISA试剂盒:EIA4529 96T)1、简介PLGF酶免试剂盒可用于血清中人胎盘生长因子的定量检测.此试剂盒仅供体外诊断用。

血管生成和血管转化是胎盘正常发育过程中的重要步骤.血管生成和血管转化不正常是造成先兆性子痫妊娠和宫内胎儿生长迟缓的重要原因.胎盘生长因子是VEGF家族中一员,主要由胎盘分泌,它是一种有效的血管生成因子.PLGF相应的受体(可溶性的fms样酪氨酸激酶1)也具有促血管生成的性质。

2、实验原理PLGF ELISA试剂盒是一种固相的酶联免疫试剂盒,采用三明治夹心法的原理。

包被板的微孔中包被了能识别PLGF分子上独特抗原位点的单克隆抗体。

将含有一定量PLGF的病人样品加入到微孔中温育,之后洗板,洗板后加入对PLGF具有特异性的生物素标记多克隆抗体。

温育后洗板除去未结合的酶复合物.过氧化酶的结合量与样品中PLGF的浓度成正比。

加入底物液后,溶液所显示的颜色与样品中PLGF的浓度成正比。

3、试剂盒成分1)包被板,12*8(可拆),96孔,包被了抗PLGF抗体(单克隆)2)零标准品,1支,1ml,即用,0pg/ml,内含<0.35的proclin防腐剂。

3)标准品1-5,5支,1ml,即用,浓度:25;50;125;500;1000pg/ml,内含<0.35的proclin 防腐剂。

4)质控品,2支,1ml,即用,质控品的浓度值及可允许范围请见试剂瓶标签或质控单。

内含<0.35的proclin防腐剂。

5)检测缓冲液,1支,30ml,即用,内含<0。

35的proclin防腐剂.6)酶联物,1支,14ml,即用,生物素标记的羊抗人PLGF抗体,内含<0。

35的proclin防腐剂。

7)酶复合物,1支,14ml,即用,内含链酶素辣根过氧酶复合物,内含0.01%的methylisothiazolone和0.02% bromonitrodioxane防腐剂。

Human β-NGF ELISA Kit 说明书

Human β-NGF ELISA Kit 说明书

Humanβ-NGF ELISA Kit检测试剂盒(酶联免疫吸附法)Catalog NumberEK1141-48EK1141-96定量检测血清、血浆和细胞培养上清中的人β神经生长因子(β-NGF)浓度。

本产品仅用于科学研究,非诊断试剂,不能用于临床诊断。

一、产品介绍1.背景介绍神经生长因子(NGF)是一种神经肽,主要参与调节某些靶神经元的生长、增殖和存活。

当表达时,NGF最初是以7S、分子量为130kDa的复合物存在,这个复合物由α-NGF、β-NGF和γ-NGF(2:1:2比例)三个蛋白组成。

“神经生长因子”通常指的是2.5S、分子量为26kDa的β亚基蛋白。

β亚基是7S NGF复合物中唯一一个有生物活性的成分(如作为信号分子)。

NGF在先天性和获得性免疫中都起着重要作用。

研究表明NGF通过血浆在机体中循环,对整体的稳态维持很重要。

NGF可促进髓鞘的修复,亦可参与多种精神疾病,如老年痴呆症、抑郁症、精神分裂症、自闭症、雷特综合征、神经性厌食症,神经性贪食症。

NGF信号失调与阿尔茨海默病有关。

同样,NGF在许多心血管疾病中发挥作用,如冠状动脉粥样硬化、肥胖、2型糖尿病、代谢综合征。

NGF也可促进伤口愈合。

2.检测原理本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。

特异性抗人β-NGF抗体预包被在高亲和力的酶标板上。

酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的β-NGF与固相抗体和检测抗体结合。

洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。

洗涤后,加入显色底物TMB,避光显色。

颜色反应的深浅与样本中β-NGF的浓度成正比。

加入终止液终止反应,在450nm波长(参考波长570-630nm)测定吸光度值。

3.试剂盒检测的局限1)请在本试剂盒标示的有效期内使用。

2)试剂盒的试剂不能与其他批号的试剂或其他来源的试剂混合使用。

3)任何标准品稀释、操作人员、移液技术、洗涤技术、孵育温度、试剂盒保存时间的改变,都将影响结合反应。

人肿瘤特异生长因子肿瘤相关因子(TSGF)Elisa试剂盒说明书

人肿瘤特异生长因子肿瘤相关因子(TSGF)Elisa试剂盒说明书

人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:96T3 IU/ml -100 IU/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)水平。

用纯化的人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF),再与HRP标记的肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)浓度。

标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

人转化生长因子β1(TGF-β1)elisa检测试剂盒使用说明书

人转化生长因子β1(TGF-β1)elisa检测试剂盒使用说明书

人转化生长因子β1(TGF-β1)elisa检测试剂盒使用说明书人转化生长因子β1(TGFβ1)elisa检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。

往预先包被转化生长因子β1(TGFβ1)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻di洗涤。

用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的转化生长因子β1(TGFβ1)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 高精度加样器及枪头:0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在28℃,使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。

实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。

严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成名称 96孔配置 48孔配置备注微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条无标准品 0.3mL*6管 0.3mL*6管无样本稀释液 6mL 3mL 无检测抗体HRP 10mL 5mL 无20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释底物A 6mL 3mL 无底物B 6mL 3mL 无终止液 6mL 3mL 无封板膜 2张 2张无说明书 1份 1份无自封袋 1个 1个无注:标准品(S0S5)浓度依次为:0、3、6、12、24、48 ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

人成纤维细胞生长因子23ELISA试剂盒说明书

人成纤维细胞生长因子23ELISA试剂盒说明书

人成纤维细胞生长因子23 (FGF-23)酶联免疫分析试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅侠研究使用目的:本试剂盒用干測定人血清,血浆员相关液体样本中成纤细细胞生长因子23 ( FGF-23 )的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测左标本中人成纤维细胞生长因子23 (FGF-23)水平。

用纯化的人成纤维细胞生长因子23 (FGF-23)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入成纤维细胞生长因子23 (FGF-23),再与HRP标记的FGF-23抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的成纤维细胞生长因子23 (FGF-23)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测徒吸光度(0D值),通过标准曲线计算样品中人成纤维细胞生长因子23 (FGF-23)浓度。

样本处理及要求:1.血淸:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2OOO-3OOO转/分)。

仔细收集上淸,保存过程中如岀现沉淀,应再次离心。

2•血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心 20分钟左右(2OOO-3OOO转/分)。

仔细收集上淸,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上淸,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上淸:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。

离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。

仔细收集上淸。

检测细胞内的成份时,用PBS (>稀释细胞悬液,细胞浓度达到 100万/ml左右。

通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上淸。

保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

可溶性人胎盘生长因子ELISA检测试剂盒的建立及性能分析

可溶性人胎盘生长因子ELISA检测试剂盒的建立及性能分析

评价 , 并 与 市售 进 口同类 产 品进 行 比较 。结 果 : 捕获抗体的最适包被 量为 4 0 0 n g / we l l , 包 被 条件 为 4 。 C孵 育 1 6 ~2 0 h , 检测抗体的最适工作浓度为 l  ̄ g / ml , 样 品 最 适 反 应 条件 为 3 7 ℃孵 育 2 h , 适 合 的封 闭 液 及 样 品 稀 释 液 组 合 为 3 B S A-
Co r r e s po n di n g aut h o r:Em ai l: hi l da xi a o z h a n gl i u @1 6 3 . c o m
_
Ab s t r a c t Ob j e c t i v e :To d e v e l o p a n EL I S A k i t f o r d e t e c t i n g s o l u b l e p l a c e n t a l g r o wt h f a c t o r( s P LGF)i n h u ma n s e r u m
张 晟 高 小平 陆 华。 刘 小章
1 . 四川 大 学 华 西 基 础 医学 与 法 医学 院 ( 6 1 0 0 4 1 ) ; 2 . 四川 省 人 E l 和 计 划 生 育 科 学 研 究 所

要 目 的 : 研 发 人 血 清及 尿 液 可 溶 性 胎 盘 生 长 因 子 ( s P L G F ) 的E L I S A 检 测 试 剂 盒 并 进 行 性 能 测 试 。方 法 : 以 抗
定、 可靠 , 具 有 比进 口试 剂 盒 检 测 范 围 更 广 、 价 格 更 低 的优 势 , 可用 于 临床 检 测 血 液 及 尿 液 中的 内源 性 s P L G F水 平 。

人重组人表皮生长因子(rh-EGF)说明书

人重组人表皮生长因子(rh-EGF)说明书

品中的重组人表皮生长因子(rh-EGF)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD
值),通过标准曲线计算样品中人重组人表皮生长因子(rh-EGF)浓度。 试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液
20ml×1 瓶
7 终止液
6ml×1 瓶
2 酶标试剂
6ml×1 瓶
8 标准品(2400ng/L) 0.5ml×1 瓶
300 ng/L
3 号标准品
150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
150 ng/L
2 号标准品
150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
75 ng/L
1 号标准品
150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
3 酶标包被板
12 孔×8 条
9 标准品稀释液
1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液
6ml×1 瓶
10 说明书
1份
5 显色剂 A 液
6ml×1 瓶
11 封板膜
2张
6 显色剂 B 液
6ml×1/瓶
12 密封袋
1个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
大于标准品孔第一孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计 算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6 个月

人生长因子(HGH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书

人生长因子(HGH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书

人生长因子(HGH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中生长因子(HGH)的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人生长因子(HGH)水平。

用纯化的人生长因子(HGH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入生长因子(HGH),再与HRP 标记的生长因子(HGH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品的生长因子(HGH)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人生长因子(HGH)浓度。

试剂盒组成:试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置保存说明书 1 份 1 份封板膜 2 片(48) 2 片(96)密封袋 1 个 1 个酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存标准品:45ng/L 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存显色剂A 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存显色剂B 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存终止液 3ml×1 瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20 倍)×1 瓶(20ml×30 倍)×1 瓶 2-8℃保存样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20 分钟,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。

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人胎盘生长因子(PlGF)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
厦门慧嘉生物科技有限公司
本试剂盒仅供研究使用
预期应用
ELISA法定量测定人血清、血浆、尿液, 细胞培养物上清或其它相关液体中胎盘生长因子,PlGF含量。

实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中PlGF水平。

用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入PlGF抗原、生物素化的抗人PlGF抗体、HRP 标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的PlGF呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制
1.酶联板:一块(96孔)
2.标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,
然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为1,000 pg/mL,做系列倍比稀释后,分别稀释成1,000 pg/mL,500 pg/mL ,250 pg/mL,125 pg/mL,62.5 pg/mL,31.25 pg/mL,15.6 pg/mL,其原液直接作为最高标准浓度,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/mL,临用前15分钟内配制。

如配制500 pg/mL标准品:取0.5ml 1,000 pg/mL的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3.样品稀释液:1×20ml/瓶。

4.检测稀释液A:1×10ml/瓶。

5.检测稀释液B:1×10ml/瓶。

6.检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先
计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100ul),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。

如1ul 检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。

7.检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100稀释。

稀释方法同检测溶
液A。

8.底物溶液:1×10ml/瓶。

9.浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10.终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

标本的采集及保存
1.细胞培养物上清:请离心后收集上清,并将标本保存于-20℃,且应避免反复冻融。

2.血清:标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

3.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

4.尿液:请收集清晨第一次尿液(中段尿),或24小时尿液,2000 x g离心15分钟后收集上清,并将标本保存于-20℃,且应避免反复冻融。

注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

操作步骤
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。

每次检测都应该做标准曲线。

如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。

1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。

空白孔加样品稀释液100ul,余孔分别加标准
品或待测样品100ul,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。

为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.弃去液体,甩干,不用洗涤。

每孔加检测溶液A工作液100ul(取1ul检测溶液A加99ul
检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。

3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干。

4.每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液)100ul,37℃,60分钟。

5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干。

6.依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有
明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.依序每孔加终止溶液50ul,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

终止液的加入顺序应尽量与底
物液的加入顺序相同。

为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

在加终止液后15分钟以内进行
检测。

注:
1.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2NH2SO4。

测量时先用此孔调OD值至零。

2.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。

3. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。

标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B
工作液请依据所需的量配置使用。

请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。

4. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。

洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

特异性
本试剂盒可同时检测重组或天然的人PlGF,且与其它相关蛋白无交叉反应。

计算
以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

注意事项
1.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。

2.一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

3.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。

4.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。

5.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。

6.底物请避光保存。

检测范围:1.67 ng/ml-40 ng/ml
灵敏度:0.7 ng/ml
说明
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。

2.有效期:6个月
3.浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。

4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。

5.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。

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