2-植物细胞核基因组
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十余种模式生物(如大肠杆菌、酿酒酵母、线 虫、果蝇、拟南芥、小立宛藓等)和水稻、人 类的全基因序列测定工作已基本完成。 基因组学(genomics)、结构基因组学 (structural genomics)、功能基因组学 (functional genomics)、蛋白质组 (proteome)和蛋白质组学(proteomics)
功能基因组学(functional genomics):以 基因功能鉴定为目标,又被称为后基因组 (postgenome)研究。
研究内容包括基因功能发现、基因表达分析及突变检测。基因的功能包 括:生物学功能,如作为蛋白质激酶对特异蛋白质进行磷酸化修饰;细 胞学功能,如参与细胞间和细胞内信号传递途径;发育上功能,如参与 形态建成等。采用的手段包括经典的减法杂交,差示筛选,cDNA代表差 异分析以及mRNA差异显示等,但这些技术不能对基因进行全面系统的 分析,新的技术应运而生,包括基因表达的系统分析(serial analysis of gene expression,SAGE),cDNA微阵列(cDNA microarray), DNA 芯片(DNA chip)和序列标志片段显示(sequence tagged fragments display,20th ICG德国柏林)技术、微流控芯片实验室等。
第一章 植物细胞核基因组
Genome (基因组): all DNA sequences in a cell
核基因组: 局限在核内的基因组 Gene (基因): a stretch of continuous DNA sequence encoding a protein or RNA
基因组计划:指的是以整个基因组为对象的研
Range of genome size in different phyla
各种生物细胞内DNA总量的比较
C值( C-value ):
通常是指一种生物单倍体基因组DNA的总量。
在真核生物中,C值一般是随生物进化而增加的, 高等生物的C值一般大于低等生物。
C-value is the quantity of DNA in the genome (per haploid set of chromosomes). C-value paradox (C值矛盾) refers to the lack of a correlation between genome size and genetic complexity
究。例如,水稻基因组计划的研究对象,就是总长为 4.3亿个核苷酸的全部12条染色体。由于研究对象涉 及生命体的全部遗传信息,因此也有人称这类研究为 全生物学研究(complete biology)。此项研究的工作 量特别庞大,体系极其复杂,并涉及多种学科,如分 子生物学、遗传学、计算机科学等。长期以来,人们 就知道基因组计划的重要性,但这类研究1990年初才 真正开始,那就是美国的人类基因组计划。因为相关 的科学技术到这一阶段才开始在总体上成熟,使科学 家能够着手进行基因组计划。
如果同一条染色体上的两个基因相对距离越长, 那么他们减数分裂发生重组的概率将越大,共同遗 传的概率也就越小。因此可以根据他们后代性状的 分离可以判断他们的交换率,也就可以判断他们在 遗传图谱上的相对距离。
遗传图谱可以对很多的遗传病进行分析.
物理图谱:
物理图谱是利用限制性内切酶将染色体切成片段,再 根据重叠序列确定片段间连接顺序,以及遗传标志之 间物理距离[碱基对(bp) 或千碱基(kb)或兆碱基 (Mb)]的图谱。
结构基因组学(structural genomics)是基因组 学的一个重要组成部分和研究领域,它是一门 通过基因作图、核苷酸序列分析确定基因组 成、基因定位的科学。染色体不能直接用来 测序,必须将基因组这一巨大的研究对象进行 分解,使之成为较易操作的小的结构区域,这个 过程就是基因作图;根据使用的标志和手段不 同 ,作图有4种类型,即构建生物体基因组高分 辨率的遗传图、物理图谱、序列图以及转录 图谱。
基因组计划基本上可分为三项内容:
构建基因组的遗传图; 构建基因组的物理图; 测定基因组的DNA全序列。
这三者之间都有一定的关联,各自研究的进程 和结果,又都可促进相关应用科学的发展。
遗传图谱:
定义:某一物种的染色体图谱(也就是我们所知的 连锁图谱),显示所知的基因和/或遗传标记的相对 位置,而不是在每条染色体上特殊的物理位置。
蛋白质组学(Proteomics)一词,源于 蛋白质(protein)与 基因组学 (genomics)两个词的组合,意指“一 种基因组所表达的全套蛋白质”,即包 括一种细胞乃至一种生物所表达的全部 蛋白质。
一、植物核基因组大小
1.核基因组大小的差异
研究方法: 孚尔根染色显微光密度测定法 DNA复性动力学 核体积测定 流式细胞计量术 不同植物的核基因组大小差异可达上千倍之多。 已知的最小植物基因组是拟南芥基因组,只有 125Mb;最大的基因组之一是百合科的贝母属的 Fritillaria assyriaca,其大小为100 000Mb。
结构基因组学(structural genomics) :是一门 研究生物中所有的蛋白质结构。主要利用实验 方式(X-射线晶体衍射、核磁共振质谱)或计算 方式(Homology Modeling)。和传统结构生物 学不同的是,利用结构基因组学方法测定蛋白 质结构时通常知道蛋白质的功用。这令科学家 创立了结构生物资讯学—利用三维结构来估计 蛋白质功用。结构基因组学重视快速、大量 (high throughput) 的蛋白质结构测定。
C值反常现象
(C-value paradox)
C值往往与种系进Fra Baidu bibliotek的复杂程度不一致, 某些低等生物却具有较大的C值。
2.复性动力学和基因组的不同序列组成
复性动力学-认识基因组DNA的复杂性
变性 复性 退火(anneal) C0t值:单链DNA浓度( C0)和反应培育时间( t)的乘积。 C0t1/2值:值越大,表明达到复性一半所需的时间越长,复性 反应越慢。