大鼠脑的立体定位技术(精)

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神经生物学实验指导

生物工程专业神经生物学实验指导实验内容一：大鼠脑立体定位及帕金森病（PD）模型制作目的要求：掌握大鼠脑立体定位仪的设计原理、基本结构、用途和正确使用；PD 模型制作要点和注意事项。

实验分组：4人/组实验课时：5学时实验用动物、器械和药品：健康成年SD大鼠，体重200-250g，雌雄不拘；脑立体定位仪、水平仪、电吹风；麻醉药（0.4%戊巴比妥钠：戊巴比妥钠0.4 g，生理盐水100 ml）；碘酒、酒精、生理盐水、蒸馏水；5或10ul微量注射器；手术器械，如手术刀、镊、止血钳等；大鼠脑立体定位图谱；6-羟基多巴胺（6-OHDA）溶液（按3ug/ul 配制，加Vc，即6-OHDA溶液1ml：将6-OHDA3mg，VitC0.2mg，溶于灭菌生理盐水，在1.5ml离心管中定容至1ml，分装后-20℃保存）。

实验操作及注意点：1．根据老师的讲解和指导，认识脑立体定位仪主要部件，即主框、电极移动架及动物头部固定装置（即固定上颌的结构和耳杆与耳杆固定柱）及用途。

2．脑立体定位仪的调试:摆稳定位仪，用水平仪测水平。

检验电极移动架上各个轴向滑尺是否保持互相垂直，微量注射器针尖是否光滑垂直。

检查定位仪各衔接部位的螺丝有无松动。

检查头部固定装置两侧是否对称。

检查耳杆使两耳杆尖端相对,以此判定耳杆固定的准确程度。

然后,使两耳杆尖端相对间隔1～2 mm ,前后移动固定有注射器的注射装置纵轴,使注射器的针体向后移时,恰好通过两耳杆尖端之间的1～2 mm 间隙; 向前移时,恰好与切牙固定架的正中刻线在一条直线上。

3．大鼠称重并麻醉（腹腔注射戊巴比妥钠，40mg/kg），动物麻醉不可过深或过浅，注意呼吸情况。

抓取大鼠时要轻柔，防止抓咬伤。

4．鼠颅的固定:将麻醉大鼠置于脑立体定位仪上，鼠颅依靠两耳杆及切牙钩三点固定。

在向外耳道内插入耳杆时,鼠眼球向外凸出。

一旦进入鼓膜环沟内,穿破鼓膜,则会发出轻微的“嘭”声,同时出现眨眼反射,眼球不再凸出,说明耳杆进位正确。

大鼠脑立体定位图

List of StructuresNames of the structures are listed in alphabetical order.Each name is followed by abbreviation of the structure.1-10 cerebellar lobules 1-103rd ventricle 3V4th ventricle 4VAA1 noradrenaline cells A1A11 dopamine cells A11A12 dopamine cells A12A13 dopamine cells A13A2 noradrenaline cells A2A4 noradrenaline cells A4A5 noradrenaline cells A5A7 noradrenaline cells A7A8 dopamine cells A8abducens nucleus 6accessory abducens nucleus Acs6accessory abducens/facial nucleus 7accessory abducens/facial nucleus Acs6/7accessory facial nucleus Acs7accessory neurosecretory nuclei Accaccessory nucleus of the ventral horn Acsaccessory olfactory bulb AOBaccessory olfactory tract aotaccessory optic tract aoptaccessory trigeminal nucleus Acs5accumbens nucleus Acbaccumbens nucleus, core AcbCaccumbens nucleus, rostral part AcbRaccumbens nucleus, shell AcbShacoustic radiation aracoustic stria asagranular insular cortex AIagranular insular cortex, dorsal part AIDagranular insular cortex, posterior part AIPagranular insular cortex, ventral part AIValar nucleus Alalveus of the hippocampus alvambiguus nucleus Ambamygdalohippocampal area AHiamygdalohippocampal area, anterolateral part AHiAL amygdalohippocampal area, posteromedial part AHiPMamygdaloid fissure afamygdaloid intramedullary gray IMGamygdalopiriform transition area APiramygdalostriatal transition area AStrangular thalamic nucleus Angansa lenticularis alansoparamedian fissure apmfanterior amygdaloid area AAanterior amygdaloid area, dorsal part AADanterior amygdaloid area, ventral part AAVanterior commissure acanterior commissure, anterior part acaanterior commissure, intrabulbar part acianterior commissure, posterior part acpanterior cortical amygdaloid nucleus ACoanterior hypothalamic area AHanterior hypothalamic area, anterior part AHAanterior hypothalamic area, central part AHCanterior hypothalamic area, posterior part AHPanterior lobe of the pituitary APitanterior olfactory nucleus, dorsal part AODanterior olfactory nucleus, external part AOEanterior olfactory nucleus, lateral part AOLanterior olfactory nucleus, medial part AOManterior olfactory nucleus, posterior part AOPanterior olfactory nucleus, ventral part AOVanterior perifornical nucleus APFanterior pretectal nucleus APTanterior pretectal nucleus, dorsal part APTDanterior pretectal nucleus, ventral part APTVanterior tegmental nucleus ATganterodorsal preoptic nucleus ADPanterodorsal thalamic nucleus ADanteromedial thalamic nucleus AManteromedial thalamic nucleus, ventral part AMVanteroventral periventricular nucleus AVPeanteroventral thalamic nucleus AVanteroventral thalamic nucleus, dorsomedial part AVDManteroventral thalamic nucleus, ventrolateral part AVVLaqueduct (Sylvius) Aqarcuate hypothalamic nucleus Arcarcuate hypothalamic nucleus, lateroposterior part ArcLParcuate hypothalamic nucleus, medial posterior part ArcMParcuate nucleus, dorsal part ArcDarcuate nucleus, lateral part ArcLarcuate nucleus, medial part ArcMarea postrema APascending fibers of the facial nerve asc7BB4 serotonin cells B4B9 serotonin cells B9Barrington's nucleus Barbasal nucleus (Meynert) Bbasilar artery basbasolateral amygdaloid nucleus BLbasolateral amygdaloid nucleus, anterior part BLAbasolateral amygdaloid nucleus, posterior part BLPbasolateral amygdaloid nucleus, ventral part BLVbasomedial amygdaloid nucleus BMbasomedial amygdaloid nucleus, anterior part BMAbasomedial amygdaloid nucleus, posterior part BMPbed nucleus of stria terminalis, fusiform part Fubed nucleus of stria terminalis, supracapsular part BSTSbed nucleus of the accessory olfactory tract BAOTbed nucleus of the anterior commissure BACbed nucleus of the stria terminalis BSTbed nucleus of the stria terminalis, intraamygdaloid division BSTIAbed nucleus of the stria terminalis, lateral division BSTLbed nucleus of the stria terminalis, lateral division, dorsal part BSTLDbed nucleus of the stria terminalis, lateral division, intermediate part BSTLI bed nucleus of the stria terminalis, lateral division, juxtacapsular part BSTLJ bed nucleus of the stria terminalis, lateral division, posterior part BSTLP bed nucleus of the stria terminalis, lateral division, ventral part BSTLVbed nucleus of the stria terminalis, medial division BSTMbed nucleus of the stria terminalis, medial division, anterior part BSTMA bed nucleus of the stria terminalis, medial division, posterior part BSTMP bed nucleus of the stria terminalis, medial division, posterointermediate part BSTMPIbed nucleus of the stria terminalis, medial division, posterolateral part BSTMPL bed nucleus of the stria terminalis, medial division, posteromedial part BSTMPMbed nucleus of the stria terminalis, medial division, ventral part BSTMVblood vessel bvbrachium of the inferior colliculus bicbrachium of the superior colliculus bscbrachium pontis (stem of middle cerebellar peduncle) bpBotzinger complex BoCC1 adrenaline cells C1C2 adrenaline cells C2C3 adrenaline cells C3caudal interstitial nucleus of the medial longitudinal fasciculus CIcaudal linear nucleus of the raphe CLicaudal periolivary nucleus CPOcaudate putamen (striatum) CPucaudoventral respiratory group CVRGcaudoventrolateral reticular nucleus CVLcell bridges of the ventral striatum CBcentral amygdaloid nucleus Cecentral amygdaloid nucleus, capsular part CeCcentral amygdaloid nucleus, lateral division CeLcentral amygdaloid nucleus, medial division CeMcentral canal CCcentral cervical nucleus CeCvcentral gray of the pons CGPncentral gray, alpha part CGAcentral gray, beta part CGBcentral gray, gamma part CGGcentral medial thalamic nucleus CMcentral nucleus of the inferior colliculus CICcentral tegmental tract ctgcentrolateral thalamic nucleus CLcerebellum Cbcerebral cortex Cxcerebral peduncle, basal part cpchoroid plexus chpcingulate cortex, area 1 Cg1cingulate cortex, area 2 Cg2cingulum cgcircular nucleus Circlaustrum Clcochlear root of the vestibulocochlear nerve 8cncommissural stria terminalis cstcommissure of the inferior colliculus ciccommissure of the lateral lemniscus cllcommissure of the superior colliculus csccopula of the pyramis Copcorpus callosum cccortex-amygdala transition zone CxAcrus 1 of the ansiform lobule Crus1crus 2 of the ansiform lobule Crus2cuneate fasciculus cucuneate nucleus Cucuneiform nucleus CnFDdecussation of the superior cerebellar peduncle xscpdeep cerebral white matter dcwdeep gray layer of the superior colliculus DpGdeep mesencephalic nucleus DpMedeep white layer of the superior colliculus DpWhdentate gyrus DGdorsal 3rd ventricle D3Vdorsal acoustic stria dasdorsal cochlear nucleus DCdorsal cortex of the inferior colliculus DCICdorsal corticospinal tract dcsdorsal endopiriform nucleus DEndorsal fornix dfdorsal hippocampal commissure dhcdorsal hypothalamic area DAdorsal hypothalamic nucleus Dodorsal lateral geniculate nucleus DLGdorsal lateral olfactory tract dlodorsal longitudinal fasciculus dlfdorsal motor nucleus of vagus 10dorsal nucleus of the lateral lemniscus DLLdorsal nucleus of the spinal cord (Clarke) Ddorsal paragigantocellular nucleus DPGidorsal peduncular cortex DPdorsal peduncular pontine nucleus DPPndorsal periolivary region DPOdorsal raphe nucleus DRdorsal raphe nucleus, caudal part DRCdorsal raphe nucleus, dorsal part DRDdorsal raphe nucleus, interfascicular part DRIdorsal raphe nucleus, ventral part DRVdorsal raphe nucleus, ventrolateral part DRVLdorsal root of spinal nerve drdorsal spinocerebellar tract dscdorsal tegmental bundle dtgdorsal tegmental decussation dtgxdorsal tegmental nucleus DTgdorsal tegmental nucleus, central part DTgCdorsal tegmental nucleus, pericentral part DTgPdorsal tenia tecta DTTdorsal terminal nucleus of the accessory optic tract DTdorsal transition zone DTrdorsal tuberomammillary nucleus DTMdorsolateral fasciculus dldorsolateral orbital cortex DLOdorsolateral periaqueductal gray DLPAGdorsolateral pontine nucleus DLPndorsomedial hypothalamic nucleus DMdorsomedial hypothalamic nucleus, compact part DMCdorsomedial hypothalamic nucleus, dorsal part DMDdorsomedial hypothalamic nucleus, ventral part DMVdorsomedial periaqueductal gray DMPAGdorsomedial pontine nucleus DMPndorsomedial spinal trigeminal nucleus DMSp5dorsomedial spinal trigeminal nucleus, dorsal part DMSp5Ddorsomedial spinal trigeminal nucleus, ventral part DMSp5Vdorsomedial tegmental area DMTgdysgranular insular cortex DIEectorhinal cortex Ectectotrigeminal nucleus E5Edinger-Westphal nucleus EWentorhinal cortex Entependyma and subependymal layer Eepifascicular nucleus EFepilemniscal nucleus ELmepirubrospinal nucleus ERSethmoid thalamic nucleus Ethexternal capsule ecexternal cortex of the inferior colliculus ECICexternal cuneate nucleus ECuexternal medullary lamina emlexternal plexiform layer of the accessory olfactory bulb EPlAexternal plexiform layer of the olfactory bulb EPlextreme capsule excFF cell group of the vestibular complex FVefacial nerve or its root 7nfacial nucleus 7facial nucleus, dorsal intermediate subnucleus 7DIfacial nucleus, dorsolateral subnucleus 7DLfacial nucleus, dorsomedial subnucleus 7DMfacial nucleus, lateral subnucleus 7Lfacial nucleus, ventral intermediate subnucleus 7VIfacial nucleus, ventromedial subnucleus 7VMfasciculus retroflexus frfasciola cinereum FCfield CA1 of hippocampus CA1field CA2 of hippocampus CA2field CA3 of hippocampus CA3fields CA1-3 of hippocampus CA1-3fimbria of the hippocampus fiflocculus Flforceps major of the corpus callosum fmjforceps minor of the corpus callosum fmifornix ffrontal association cortex FrAGgelatinous layer of the caudal spinal trigeminal nucleus Ge5gemini hypothalamic nucleus Gemgenu of the corpus callosum gccgenu of the facial nerve g7gigantocellular reticular nucleus Gigigantocellular reticular nucleus, alpha part GiAgigantocellular reticular nucleus, ventral part GiVglomerular layer of the accessory olfactory bulb GlAglomerular layer of the olfactory bulb Glglossopharyngeal nerve 9ngracile fasciculus grgracile nucleus Grgranular cell layer of the olfactory bulb GrOgranular insular cortex GIgranular layer of the cochlear nuclei GrCgranular layer of the dentate gyrus GrDGgranule cell layer of the accessory olfactory bulb GrAHhabenular commissure hbchilus of the dentate gyrus Hilhippocampal fissure hfhypoglossal nucleus 12Iindusium griseum IGinferior cerebellar peduncle (restiform body) icpinferior olive IOinferior olive, beta subnucleus IOBeinferior olive, cap of Kooy of the medial nucleus IOKinferior olive, dorsal nucleus IODinferior olive, dorsomedial cell group IODMinferior olive, medial nucleus IOMinferior olive, principal nucleus IOPrinferior olive, subnucleus A of medial nucleus IOAinferior olive, subnucleus B of medial nucleus IOBinferior olive, subnucleus C of medial nucleus IOCinferior olive, ventrolateral protrusion IOVLinferior salivatory nucleus ISinfracerebellar nucleus Infinfralimbic cortex ILinfundibular stem InfSinner blade of the dentate gyrus IBlinteranterodorsal thalamic nucleus IADinteranteromedial thalamic nucleus IAMintercalated amygdaloid nucleus, main part IMintercalated nuclei of the amygdala Iintercalated nucleus of the medulla Inintercollicular nucleus InCointercrural fissure icfinterfascicular nucleus IFintergeniculate leaf IGLintermediate gray layer of the superior colliculus InGintermediate interstitial nucleus of the medial longitudinal fasciculus II intermediate lobe of the pituitary IPitintermediate nucleus of the lateral lemniscus ILLintermediate reticular nucleus IRtintermediate white layer of the superior colliculus InWh intermediodorsal thalamic nucleus IMDintermediolateral cell column IMLintermediomedial cell column IMMintermedioventral thalamic commissure imvcintermedius nucleus of the medulla InMinternal arcuate fibers iainternal capsule icinternal medullary lamina imlinternal plexiform layer of the olfactory bulb IPlinteroculomotor nucleus I3interpeduncular fossa IPFinterpeduncular nucleus IPinterpeduncular nucleus, apical subnucleus IPAinterpeduncular nucleus, caudal subnucleus IPCinterpeduncular nucleus, dorsolateral subnucleus IPDL interpeduncular nucleus, dorsomedial subnucleus IPDM interpeduncular nucleus, intermediate subnucleus IPI interpeduncular nucleus, lateral subnucleus IPLinterpeduncular nucleus, rostral subnucleus IPRinterpeduncular nucleus, rostrolateral subnucleus IPRL interpedunculotegmental tract iptinterposed cerebellar nucleus, anterior part IntAinterposed cerebellar nucleus, dorsolateral hump IntDLinterposed cerebellar nucleus, dorsomedial crest IntDMinterposed cerebellar nucleus, posterior part IntPinterposed cerebellar nucleus, posterior parvicellular part IntPPCinterstitial nucleus of medial longitudinal fasciculus, greater part IMLFG interstitial nucleus of the medial longitudinal fasciculus IMLFinterstitial nucleus of the posterior limb of the anterior commissure IPAC interstitial nucleus of the posterior limb of the anterior commissure, lateral part IPACLinterstitial nucleus of the posterior limb of the anterior commissure, medial part IPACMinterstitial nucleus of the vestibulocochlear nerve I8intertrigeminal nucleus I5interventricular foramen IVFintramedullary thalamic area IMAislands of Calleja ICjislands of Calleja, major island ICjMJjuxtarestiform body jxjuxtatrigeminal area Jx5KKölliker-Fuse nucleus KFLlacunosum moleculare layer of the hippocampus LMollambdoid septal zone Ldlamina dissecans of the entorhinal cortex Dsclateral (dentate) cerebellar nucleus Latlateral accumbens shell LAcbShlateral amygdaloid nucleus Lalateral amygdaloid nucleus, dorsolateral part LaDLlateral amygdaloid nucleus, ventrolateral part LaVLlateral amygdaloid nucleus, ventromedial part LaVMlateral cerebellar nucleus, parvicellular part LatPClateral cervical nucleus LatClateral entorhinal cortex LEntlateral funiculus of the spinal cord lfulateral globus pallidus LGPlateral habenular nucleus LHblateral habenular nucleus, lateral part LHbLlateral habenular nucleus, medial part LHbMlateral hypothalamic area LHlateral lemniscal fields LLFlateral lemniscus lllateral mammillary nucleus LMlateral olfactory tract lolateral orbital cortex LOlateral parabrachial nucleus LPBlateral parabrachial nucleus, central part LPBClateral parabrachial nucleus, crescent part LPBCrlateral parabrachial nucleus, dorsal part LPBDlateral parabrachial nucleus, external part LPBElateral parabrachial nucleus, internal part LPBIlateral parabrachial nucleus, superior part LPBSlateral parabrachial nucleus, ventral part LPBVlateral paragigantocellular nucleus LPGilateral periaqueductal gray LPAGlateral pontine nucleus LPnlateral posterior thalamic nucleus LPlateral posterior thalamic nucleus, laterocaudal part LPLClateral posterior thalamic nucleus, laterorostral part LPLRlateral posterior thalamic nucleus, mediocaudal part LPMClateral posterior thalamic nucleus, mediorostral part LPMRlateral preoptic area LPOlateral recess of the 4th ventricle LR4Vlateral reticular nucleus LRtlateral reticular nucleus, parvicellular part LRtPClateral reticular nucleus, subtrigeminal part LRtS5lateral septal nucleus, dorsal part LSDlateral septal nucleus, intermediate part LSIlateral septal nucleus, ventral part LSVlateral spinal nucleus LSplateral stripe of the striatum LSSlateral superior olive LSOlateral tegmental tract ltglateral terminal nucleus of the accessory optic tract LTlateral ventral pallidum LVPlateral ventricle LVlateral vestibular nucleus LVelateral vestibulospinal tract lvslateroanterior hypothalamic nucleus LAlaterodorsal tegmental nucleus LDTglaterodorsal tegmental nucleus, ventral part LDTgVlaterodorsal thalamic nucleus LDlaterodorsal thalamic nucleus, dorsomedial part LDDMlaterodorsal thalamic nucleus, ventrolateral part LDVLlateroventral periolivary nucleus LVPOlinear nucleus of the medulla Lilocus coeruleus LClongitudinal association bundle lablongitudinal fasciculus of the pons lfpMmagnocellular nucleus of the lateral hypothalamus MCLHmagnocellular nucleus of the posterior commissure MCPCmagnocellular preoptic nucleus MCPOmammillary peduncle mpmammillary recess of the 3rd ventricle MRemammillotegmental tract mtgmammillothalamic tract mtmarginal zone of the medial geniculate MZMGmedial (fastigial) cerebellar nucleus Medmedial accessory oculomotor nucleus MA3medial amygdaloid nucleus Memedial amygdaloid nucleus, anterodorsal part MeADmedial amygdaloid nucleus, anteroventral part MeAVmedial amygdaloid nucleus, posterodorsal part MePDmedial amygdaloid nucleus, posteroventral part MePVmedial cerebellar nucleus, dorsolateral protuberance MedDLmedial corticohypothalamic tract mchmedial eminence, external layer MEEmedial eminence, internal layer MEImedial entorhinal cortex MEntmedial entorhinal cortex, ventral part MEntVmedial forebrain bundle mfbmedial forebrain bundle, 'a' component mfbamedial forebrain bundle, 'b' component mfbbmedial geniculate nucleus MGmedial geniculate nucleus, dorsal part MGDmedial geniculate nucleus, medial part MGMmedial geniculate nucleus, ventral part MGVmedial globus pallidus MGPmedial habenular nucleus MHbmedial lemniscus mlmedial longitudinal fasciculus mlfmedial mammillary nucleus, lateral part MLmedial mammillary nucleus, medial part MMmedial mammillary nucleus, median part MMnmedial orbital cortex MOmedial parabrachial nucleus MPBmedial parabrachial nucleus external part MPBEmedial pontine nucleus MPnmedial preoptic area MPAmedial preoptic nucleus MPOmedial preoptic nucleus, central part MPOCmedial preoptic nucleus, lateral part MPOLmedial preoptic nucleus, medial part MPOMmedial pretectal nucleus MPTmedial rostroventrolateral medulla MRVLmedial septal nucleus MSmedial superior olive MSOmedial terminal nucleus of the accessory optic tract MTmedial tuberal nucleus MTumedial ventral pallidum MVPmedial vestibular nucleus MVemedial vestibular nucleus, magnocellular part MVeMCmedial vestibular nucleus, parvicellular part MVePCmedian accessory nucleus of the medulla MnAmedian eminence MEmedian preoptic nucleus MnPOmedian raphe nucleus MnRmediodorsal thalamic nucleus MDmediodorsal thalamic nucleus, central part MDCmediodorsal thalamic nucleus, lateral part MDLmediodorsal thalamic nucleus, medial part MDMmediodorsal thalamic nucleus, paralaminar part MDPLmedioventral periolivary nucleus MVPOmedullary reticular nucleus, dorsal part MdDmedullary reticular nucleus, ventral part MdVmesencephalic trigeminal nucleus Me5mesencephalic trigeminal tract me5microcellular tegmental nucleus MiTgmiddle cerebellar peduncle mcpminimus nucleus Minmitral cell layer of the accessory olfactory bulb MiAmitral cell layer of the olfactory bulb Mimolecular layer of the dentate gyrus Molmotor root of the trigeminal nerve m5motor trigeminal nucleus Mo5motor trigeminal nucleus, dorsolateral part Mo5DLmotor trigeminal nucleus, ventromedial part Mo5VMNnigrostriatal bundle nsnucleus O Onucleus of Darkschewitsch Dknucleus of origin of efferents of the vestibular nerve EVenucleus of Roller Ronucleus of the ansa lenticularis ALnucleus of the brachium of the inferior colliculus BICnucleus of the commissural stria terminalis CSTnucleus of the dorsal hippocampal commissure DHCnucleus of the fields of Forel Fnucleus of the horizontal limb of the diagonal band HDBnucleus of the lateral olfactory tract LOTnucleus of the optic tract OTnucleus of the posterior commissure PComnucleus of the solitary tract Solnucleus of the solitary tract, central part SolCenucleus of the solitary tract, commissural part SolCnucleus of the solitary tract, dorsomedial part SolDMnucleus of the solitary tract, gelatinous part SolGnucleus of the solitary tract, intermediate part SolIMnucleus of the solitary tract, interstitial part SolInucleus of the solitary tract, medial part SolMnucleus of the solitary tract, rostrolateral part1-101-10 cerebellar lobules; OR 1-10 spinal cord layers SolRLnucleus of the solitary tract, ventrolateral part SolVLnucleus of the stria medullaris SMnucleus of the trapezoid body Tznucleus of the vertical limb of the diagonal band VDBnucleus X Xnucleus Y Ynucleus Z ZOobex Obexoculomotor nerve or its root 3noculomotor nucleus 3oculomotor nucleus, parvicellular part 3PColfactory bulb OBolfactory nerve layer ONolfactory tubercle Tuolfactory tubercle, densocellular part TuDColfactory tubercle, plexiform layer TuPlolfactory tubercle, polymorph layer TuPoolfactory ventricle (olfactory part of lateral ventricle) OVolivary pretectal nucleus OPTolivocerebellar tract ocolivocochlear bundle ocboptic chiasm oxoptic nerve 2noptic nerve layer of the superior colliculus Opoptic tract optoriens layer of the hippocampus Orouter blade of the dentate gyrus OBloval paracentral thalamic nucleus OPCPparaabducens nucleus Pa6parabigeminal nucleus PBGparabrachial nucleus, waist part PBWparabrachial pigmented nucleus PBPparacentral thalamic nucleus PCparacochlear glial substance PCGSparacollicular tegmentum PCTgparafascicular thalamic nucleus PFparafloccular sulcus pfsparaflocculus PFlparalambdoid septal nucleus PLdparalemniscal nucleus PLparamedian lobule PMparamedian raphe nucleus PMnRparamedian reticular nucleus PMnparamedian sulcus pmsparanigral nucleus PNparapyramidal nucleus PPypararubral nucleus PaRparasolitary nucleus PSolparastrial nucleus PSparasubiculum PaSparasubthalamic nucleus PSThparatenial thalamic nucleus PTparatrigeminal nucleus Pa5paratrochlear nucleus Pa4paraventricular hypothalamic nucleus Paparaventricular hypothalamic nucleus, anterior magnocellular part PaAM paraventricular hypothalamic nucleus, anterior parvicellular part PaAP paraventricular hypothalamic nucleus, dorsal cap PaDC paraventricular hypothalamic nucleus, lateral magnocellular part PaLM paraventricular hypothalamic nucleus, medial parvicellular part PaMP paraventricular hypothalamic nucleus, posterior part PaPo paraventricular hypothalamic nucleus, ventral part PaV paraventricular thalamic nucleus PVparaventricular thalamic nucleus, anterior part PVAparaventricular thalamic nucleus, posterior part PVPparietal association cortex PtAparvicellular motor trigeminal nucleus PC5parvicellular reticular nucleus PCRtparvicellular reticular nucleus, alpha part PCRtApedunculopontine tegmental nucleus PPTgperiaqueductal gray PAGperifacial zone P7perifornical nucleus PeFperipeduncular nucleus PPperirhinal cortex PRhperitrigeminal zone P5periventricular fiber system pvperiventricular hypothalamic nucleus Pepineal gland Pipineal recess PiRepiriform cortex Pirpiriform-amygdaloid area PAApolymorph layer of the dentate gyrus PoDGpontine nuclei Pnpontine raphe nucleus PnRpontine reticular nucleus, caudal part PnCpontine reticular nucleus, oral part PnOpontine reticular nucleus, ventral part PnVposterior commissure pcposterior hypothalamic area PHposterior intralaminar thalamic nucleus PILposterior limitans thalamic nucleus PLiposterior lobe of the pituitary PPitposterior pretectal nucleus PPTposterior superior fissure psfposterior thalamic nuclear group Poposterior thalamic nuclear group, triangular part PoTposterodorsal preoptic nucleus PDPposterodorsal tegmental nucleus PDTgposterolateral cortical amygdaloid nucleus (C2) PLCoposterolateral fissure plfposteromedial cortical amygdaloid nucleus (C3) PMCoposteromedian thalamic nucleus PoMnpostsubiculum Postpre-Bötzinger complex PrB\232precommissural fornix pcfprecommissural nucleus PrCpreculminate fissure pcufpredorsal bundle pdprelimbic cortex PrLpremammillary nucleus, dorsal part PMDpremammillary nucleus, ventral part PMVprepositus nucleus Prprepyramidal fissure ppfprerubral field PRpresubiculum PrSprimary auditory cortex Au1primary fissure prfprimary motor cortex M1primary somatosensory cortex S1primary somatosensory cortex, barrel field S1BFprimary somatosensory cortex, dysgranular region S1DZprimary somatosensory cortex, forelimb region S1FLprimary somatosensory cortex, hindlimb region S1HLprimary somatosensory cortex, jaw region S1Jprimary somatosensory cortex, jaw region, oral surface S1JOprimary somatosensory cortex, trunk region S1Trprimary somatosensory cortex, upper lip region S1ULpprimary visual cortex, binocular area V1Bprimary visual cortex, monocular area V1Mprincipal mammillary tract pmprincipal sensory trigeminal nucleus Pr5principal sensory trigeminal nucleus, dorsomedial part Pr5DMprincipal sensory trigeminal nucleus, ventrolateral part Pr5VLProbst's bundle prbprosubiculum ProSpyramidal cell layer of the hippocampus Pypyramidal decussation pyxpyramidal fissure pfpyramidal tract pyRraphe interpositus nucleus RIPraphe magnus nucleus RMgraphe obscurus nucleus RObraphe pallidus nucleus RParecess of the inferior colliculus ReICred nucleus Rred nucleus, lateral horn RLHred nucleus, magnocellular part RMCred nucleus, parvicellular part RPCreticular thalamic nucleus Rtreticulotegmental nucleus of the pons RtTgreticulotegmental nucleus of the pons, pericentral part RtTgP retroambiguus nucleus RAmbretrochiasmatic area RChretroethmoid nucleus REthretrolemniscal nucleus RLretrorubral field RRFretrorubral nucleus RRretrosplenial agranular cortex RSAretrosplenial granular a cortex RSGaretrosplenial granular b cortex RSGbretrosplenial granular cortex RSGreuniens thalamic nucleus Rerhabdoid nucleus Rbdrhinal fissure rfrhinal incisura rirhomboid thalamic nucleus Rhroot of abducens nerve 6n。

脓毒症相关性脑病大鼠动物模型的建立

脓毒症相关性脑病大鼠动物模型的建立脓毒症相关性脑病在脓毒症患者是一种常见并发症，合并脓毒症相关性脑病者病死率明显增加。

目前临床对于脓毒症相关性脑病仍是排除性诊断，缺乏客观的诊断指标，如生化指标、影像学指标、电生理学指标等，导致流行病学及发生机制均不明确，因此确立相对客观统一的诊断标准势在必行。

动物模型的选择建立对其机制及治疗方法研究具有重要意义。

研究人员应用脑电图和诱发电位监测早期诊断脓毒症相关性脑病，取得一定效果，但尚未形成统一结论。

本研究根据已有脓毒症相关性脑病模型研究的进展，选用盲肠结扎法（CLP）建立脓毒症模型，通过监测大鼠神经行为学改变、脑电图信号及体感诱发电位改变来早期诊断脓毒症相关性脑病，并对所建立的大鼠脓毒症脑病模型进行分析，为以后的研究提供参考。

1 材料与方法1.1 实验动物清洁级成年雄性SD大鼠30只，体质量200～250 g，由中南大学动物学部提供。

1.2 主要药品、试剂、仪器PBS购自鼎国生物工程公司，水合氯醛为中南大学湘雅医院药剂科化学分析室配制；多聚甲醛购置岳麓区鼎盛实验器材公司；戊二醛、无水乙醇、二甲苯、苏木素、伊红、锇酸等由中南大学病理教研室提供。

套管针购置BD公司。

脑立体定位仪，RM6240生物信号记录器，Olympus BX41型光学显微镜（日本），LKB-Ⅲ型超薄切片机（瑞典），H-7500型透射电镜（日本），石腊切片机（美国），生化培养箱（广东），格兰士微波炉WP700，隔水式电热恒温培养箱（上海跃进医疗器械厂），荣事达家用冷藏冰箱BCD-202，MIAS医用图像分析管理系统电子摄像。

1.3 实验方法1.3.1 大鼠脑电及诱发电位监测电极放置30只大鼠称质量、编号分别在造模前10 d放置脑电监测电极。

水合氯醛腹腔注射麻醉后，大鼠头部用立体定位仪固定，常规外科消毒，在头颅中间矢状位作3 cm的皮肤切口，将前囟点和其他颅骨缝暴露。

在颅骨面行局麻（10%利多卡因喷雾），移去骨膜。

大鼠脑脊液抽取的新方法

图 1 大鼠固定示意图
收稿日期： 2011 － 06 － 28 * 基金项目：国家自然科学基金（ No． 30870854）；北京市教委科技创新平台项目（ PXM2011 _014226 _07 _000070 ）；北京市优秀人才基金 D
类（ 2011D005018000007）资助作者简介：任长虹（ 1974 －），女，博士。研究方向：神经生物学。E-mail： ren97hong2001@ yahoo． com． cn 通信作者：吉训明（ 1970 －），男，主任医师。研究方向：神经外科脑血管病的机制及治疗研究。E-mail： jixm70@ hotmail． com
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第 29 卷第 1 期 2012 年 2 月
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实验动物科学 LABORATORY ANIMAL SCIENCE
Vol． 29 No． 1 February 2012
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大鼠脑脊液抽取的新方法*
任长虹1 高明清1，2 曹金强1，3 李宁1 Kevin K． W． Wang4 吉训明1
大鼠固定后通过触摸找到枕骨嵴occipitalcrest如果是初学者为了明确具体位置可以在此处用记号笔标识大鼠头部固定后如果角度适中隐约可见枕骨嵴后有一肌肉间隙以枕骨嵴下mm处的肌肉间隙处为进针点用手触摸有三角形凹陷进针角度与身体平行即针与头部的角度约为135图2针尖坡面向上缓慢向前进针到小脑延髓池cisternamagna深度约为cm
脑脊液（ Cerebro-Spinal Fluid，CSF）为无色透明的液体，充满在各脑室、蛛网膜下腔和脊髓中央管内，由脑室中的脉络丛产生［1］。若中枢神经系统发生病变，神经细胞代谢紊乱，将使脑脊液的性状和成分发生改变。因此，大鼠脑脊液常被用于脑损伤机制、生物标记物、药物治疗等研究领域中，但是，由于脑脊液提取过程复杂，且容易刺穿延髓致使大鼠死亡，脑脊液提取的成功率低也是许多实验室面临的问题。因此，本文将介绍一种简便易行的大鼠脑脊液的提取方法，为大鼠脑脊液的相关研究提供参考。

鼠脑定位

大鼠脑立体定位技术1.麻醉: 水合氯醛0.36ml/100g, i.p.准备：水合氯醛10g/ 100ml Deionize water, 1ml 注射器2.将大鼠头部固定于脑立体定位仪上, 门齿3.3mm, 耳间距大约22mm. 3个标准检测是否固定成功（鼻对正中，头部不动，提尾不掉）3.剪毛, 碘酒酒精消毒, 切皮准备：剪毛剪，碘酒酒精，棉球（大，小），直剪刀4.剥开皮下组织, 双氧水烧至骨缝清晰准备：30％双氧水5.用铅笔在前囟和后囟(转角中线连线中点)各做一标志, 测量其距离是否为9mm. 如不是,按比例换算bregma后距离准备：铅笔6.定位原点, 记下AP, R准备：针7.定位MFB (AP: +0.2 R: 2.0 DV: 8.0)mmSN ( AP: -4.8 R:1.6 DV: 8.2)mmICV(AP: -1.0 R 1.5 DV: 3.8)mm做标志, 钻孔, (ICV用大钻头，6—OHDA注射用小钻头)8.给6-OHDA : 将注药管连至定位针上, vicle清洗, 排净液体，取下1ml注射器。

连上微量进样器，待针头有一滴液体滴出时, 将针头移至孔上，液体滴下,添满孔, 针尖斜面中点进入孔内时, 记高度。

缓慢进针至DV，推药, 1ul/min, 留针10min. 缓慢拔针.立即清洗针和管以防堵塞准备：管，微量进样器，vehicle,注射器，6－OHDA，9.碘酒消毒颅骨表面10.缝皮准备：针，线，持针器，11．皮肤表面消毒12．苦味酸标号13．放回笼中，打penicillin ,16wan/ml qd , for 3 days14.1,7,14 day 检测行为，筛选成功模型入组准备：opo。

《大鼠脑立体定位图谱》出版消息

《大鼠脑立体定位图谱》出版消息《大鼠脑立体定位图谱》是一部由诸葛启钏主编，人民卫生出版社于2005年7月1日出版的书籍。

该书以大鼠脑为研究对象，提供了大鼠脑各个区域的立体定位信息，对于研究大鼠脑的结构和功能具有重要的参考价值。

该书共分为字，由人民卫生出版社正式出版，胶版纸印刷，平装包装。

对于医学、生物学、神经科学等领域的研究者来说，《大鼠脑立体定位图谱》无疑是一本非常有价值的参考书籍。

书中详细介绍了大鼠脑的各个区域和核团，并使用定位坐标来描述其在脑中的位置。

还提供了许多有关大鼠脑的形态学、生理学和行为学等方面的信息。

通过该书，读者可以全面了解大鼠脑的结构和功能，对于开展相关研究具有重要指导意义。

《大鼠脑立体定位图谱》的出版为相关领域的研究者提供了一本非常有价值的参考书籍，对于推动大鼠脑科学研究的发展具有重要意义。

脑缺血再灌注和电针治疗是当前医学研究的重要领域，其中电针治疗是一种具有中国特色且广泛应用于临床的疗法。

本文旨在探讨电针对脑缺血再灌注大鼠脑皮质局部血流量和血管新生的影响，为临床应用提供理论依据。

在过去的研究中，脑缺血再灌注损伤的机制一直是一个难题。

近年来，随着科学技术的发展，越来越多的研究表明，脑缺血再灌注后血管新生对于脑损伤的修复和神经功能的恢复具有重要意义。

然而，目前尚无理想的治疗方法能够有效地促进血管新生，改善脑部供血。

本研究采用随机对照实验方法，选取健康成年大鼠为研究对象，分为假手术组、模型组和电针组。

建立大鼠脑缺血再灌注模型，然后对电针组大鼠进行电针治疗。

通过免疫组织化学法和图像分析技术，观察各组大鼠脑皮质局部血流量和血管新生情况。

实验结果显示，电针组大鼠脑皮质局部血流量明显高于模型组和假手术组，且电针组大鼠脑皮质血管新生数量也明显增加。

这表明电针治疗可以有效地促进脑缺血再灌注大鼠脑皮质局部血流量增加和血管新生，对脑损伤修复和神经功能恢复具有积极作用。

电针对脑缺血再灌注大鼠脑皮质局部血流量和血管新生的影响研究表明，电针治疗可以有效地改善脑部供血，促进血管新生，对脑损伤修复和神经功能恢复具有积极作用。

猪诱导多能干细胞可定向分化为前脑GABA能神经元前体

·820·
doi 10.12122/j.issn.1673-4254.2021.06.03
J South Med Univ, 2021, 41(6): 820-827
猪诱导多能干细胞可定向分化为前脑 GABA 能神经元前体
朱缓 1，孙婷婷 2，王圆圆 2，王铁 2，马彩云 2，王春景 2，刘长青 2，郭俣 1 蚌埠医学院 1检验医学院，2生命科学学院，安徽蚌埠 233000
摘A 能神经元前体的方法体系。方法猪 iPSCs 诱导分化为 GABA 能神经元前体遵循两个阶段，第 1 阶段，猪 iPSCs 悬浮培养，第 3 天时形成类胚体，采用神经诱导培养基 NIM（SB431542、 DMH1、FGF2）继续诱导，第 12 天分化为原始神经上皮细胞。第 2 阶段，使用含 Pur、B27 的 NIM 培养基悬浮培养形成神经球，至第 21 天时形成 GABA 能神经元前体。CM-DiI 标记后，定向移植帕金森（PD）模型大鼠黑质纹状体，检测其在宿主脑内存活、迁移及分化状况。结果猪 iPSCs 在饲养层细胞上稳定传代，表达多能性标记 OCT4、Nanog、SSEA1 和 TRA-160，并且核型分析显示没有其他物种来源细胞污染。第 12 天经诱导分化获得原始神经上皮细胞能够形成玫瑰花环结构，并表达其表面标记物（PAX6、SOX2 和 Nestin）与神经微管蛋白标志物 Tuj1。第 21 天诱导细胞高表达 GABA 能神经元前体的表面特异性抗原 NKX2.1 和前脑标志物 FOXG1。移植 8 周后，体内可分化为 GABA 能神经元与多巴胺能神经元，明显改善 PD 大鼠运动行为。结论结合无血清培养基筛选法逐步定向诱导猪 iPSCs 高效分化为前脑 GABA 能神经元前体，移植后能够显著改善 PD 大鼠的运动功能障碍，为诱导 GABA 能神经元前体移植治疗神经损伤疾病奠定基础。关键词：诱导多能干细胞，猪；细胞分化；原始神经上皮细胞；GABA 能神经元前体；帕金森模型大鼠

神经生物学实验

体激活后第二信使、G 蛋白、膜离子流、调控蛋白及
产生磷酸化和脱磷酸化等各种反应的酶变化；
图 2 LTP 电位示意图
⑶突触前或突触后结构的可塑性，包ห้องสมุดไป่ตู้突触前树突棘体积增大，数目增多，
突触界面扩大及突触后致密物质增大增厚等；
⑷非神经元修饰：如胶质细胞及胶质-神经元相互作用的变化；
⑸上述某些变化或所有变化的综合表现。
（蔡葵）
6
实习二大鼠海马 LTP 的实验观察
1. LTP 的基本概念
LTP(long-term potentiation, 长时程增强), 对突触前神经元进行高频强直
电刺激后导致突触后神经元产生突触传递效应增强的现象，该效应可持续一
个小时以上，其具体表现为：
①峰电位幅值增大；
②潜伏期缩短；
③兴奋性突触后电位(EPSP)幅值增大；
兔脑：兔的头部固定在脑定位仪上时，其前囟(Bregma，即冠状缝与矢状缝的交点)比λ(人字缝与矢状缝的交点)高 1.5mm，在这种情况下，以通过前囟的水平面作参考平面，而以在该平面下 12mm 处的水平面作为水平标准平面(HO, 零平面)，在此平面上方为 V+，在此平面下方为 V-。经过前囟并与矢状缝垂直又与水平面垂直的面，作为额面标准平面(APO)，在此平面之前为 AP+，在此平面之后为 AP-。
单管玻璃微电极是一根尖端开口很细的硬质玻璃管，内充电解质溶液作为电极。由于电解质溶液可以导电，利用单管玻璃微电极可以记录到中枢神经系统神经元的电活动。用于细胞内记录的微电极，其尖端直径应小于 0.5mm，尖端的倾斜度应相当缓和，以免穿入细胞膜时造成大的伤害。这种微电极适合于从细胞内引导电活动和测量膜电位。用于细胞外记录的微电极，其尖端直径约在 1~5mm。一般认为尖端内径 1~4mm 的玻璃微电极适宜于记录神经元胞体的电活动。微电极的长度应视需要而定，但插入脑组织内的部分不宜太粗，以免插入时造成显著的损伤。制作玻璃微电极应选用熔点高，化学稳定性高，电阻率高和膨胀系数低的硬质玻璃管。国外常用 Pyrex 玻璃管，国内一般采用 GG17 和 95 玻璃管。 3.3.2 多管玻璃微电极

大鼠脑三维标准图谱的构建及磁共振图像分析系统的研究及实现

AbstractNeuroscience is an important topic in nowadays, and rat is one of the broadest experimental animals. However, the huge amount of data collected by neuroscientists will become meaningless if we cannot give them a precise description of th eir locations. The Rat Brain Atlas is a powerful tool for such questions.This work is supported by the project of “3D reconstruction of rat brain atlas and MR image analyzing system”, which comes from Wuhan Institute of Physics & Mathematics the Chinese Academy of Sciences. The purpose of this project is to further implement the image analysis and visualization functions based on the former work “3D MR image processing system”.This thesis focuses on the following aspects of MR image visualization: preprocessing of MR and atlas images; 3D reconstruction and visualization; anatomical structures registration, localization and labeling.In the preprocessing part, the vectorial atlas slices are transformed into scalars. The brain of the rat is extracted from MR images with SNAKE model. Then, the two type slices are re-sampled with the same resolution.In the part of 3D reconstruction and visualization, we implemented volume rendering of rat brain based on ray-casting and texture mapping separately, surface rendering based on MC algorithm, and 3D arbitrary cutting view utilizing VTK.A manual registration method is introduced, f u rthermore, an automatic registration strategy based on PCA is implemented in the part of registration between atlas and MR image. In addition, the localization and labeling of ROI in 2D and 3D MR image are completed at last.Considering customers’ require, taking the engineering's principle of Object Oriented (OO) and stability and compatibility into account, this system is designed and implemented with Visual C++6.0 and VTK on windows platform. Practice proved that this system has a higher capability than our former MRI processing system in rat brain anatomic structure analysis.Key Words：MR Image, Rat Brain Atlas, ROI (Region of Interesting), 3D visualization, VTK, Image Registration, Localization and Labeling独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。

大鼠脑的立体定位技术

材料
01
大鼠，立体定位仪，哺乳类手术器械，牙科钻，20%氨基甲酸乙酯，生理盐水，2%滂胺天蓝溶液
02
方法和步骤
20%氨基甲酸乙酯 0.6 ml/100g, i.p.
ห้องสมุดไป่ตู้
固定
将大鼠头部固定于脑立体定位仪上,门齿杆 -3.3 mm
3个标准检测是否固定成功（鼻对正中，头部不动，提尾不掉）
麻醉
切头皮,剥开皮下组织, 将骨缝暴露清晰，用铅笔在前囟和后囟各做一标志
以咬骨钳咬开颅骨，小心取出大脑，顺着注射点将大脑切开，观察染料是否在侧脑室内
注意事项
立体定位仪为精密仪器,实验时应小心操作,以免损坏
微量注射器取出后应立即清洗,以防堵塞
01
02
大鼠脑的立体定位技术
单击此处添加副标题
了解脑立体定位技术的原理，初步掌握确定某一中枢核团的方法
某些颅外标记与颅内结构具有相对固定的位置关系前囟(bregma):位于冠状缝和矢状缝的交接处人字缝尖(lambda):位于后囟人字缝与矢状缝交会点
脑图谱
核团微量注射
核团的刺激或损毁
应用
电位引导
核团定位，做标志, 钻孔
LV(AP: -1.3 R 2.0 H: 3.5)mm
小心安放微量注射器，针尖斜面中点进入孔内时,记高度。缓慢进针至LV ,注入10 l 2%滂胺天蓝溶液(2 l/min),留针10 min后缓慢拔针
确定注射位置
取下动物，腹腔注射过量的20%氨基甲酸乙酯使动物死亡

大鼠脑立体定向手术校正的三种方法[1]

・论著・大鼠脑立体定向手术校正的三种方法王少锦　孙彦辉　赵志国　杨天祝Ξ河北医科大学中医学院针灸系(石家庄050091) 摘　要　目的介绍三种方法相结合的大鼠脑立体定位术程序书。

方法在一般以切片观察确定靶位之前,先后分别将经过固定的死鼠、活鼠,固定在大鼠脑立体定位仪上,暴露靶点并校正靶坐标。

结果三种方法结合运用后,克服了每种方法的缺点,缩短了预实验时间,提高了大鼠脑立体定向手术的效率。

结论以少量的动物,经过较少次预实验,即能打准大鼠脑靶。

主题词　脑;立体定位技术;方法;大鼠中图号　R322.85;R338.2THREE METHODS OF CORRECTI NG THE T ARGET SITE I N THERAT BRAI N ON STEREOT AXIC COORDI NATESWang Shaojin　Sun Yanhui　Zhao Zhiguo　Yang TianzhuA cupuct ure and Moxibustion f aculty of T raditional Chi nese Medici ne College,Hebei Medical U niversity(S hijiaz huang050091)ABSTRACT　Objective The present paper introduces an integrated method for stereotaxic operation on the rat brain,using three different procedures for correcting the brain targeting site. Methods Before the ordinary method for correcting the target site,on the stereotaxic instrument the target site was exposured and the stereotaxic coordinates were corrected in fixed brain,and then unfixed brain,respectively.Results As the application of three methods is set up,the defect of every method can be removed and the course of experiment can be shorten,so the efficiency of the tanget sitein the rat brainon stereotaxic coordinates is improved.Conclusion With fewer animals and fewer preliminary tests the brain target site can be corrected accurately.Me SH　brain;stereotaxic techniques;methods;rats 脑立体定位术技术要点多,目前国内尚无一种较详细的实验程序书提供给初学者使用。

小鼠脑立体定向注射细胞步骤

小鼠脑立体定向注射细胞步骤
小鼠脑立体定向注射细胞是一种将细胞悬液注入小鼠脑特定区域的方法，用于研究细胞在脑内的功能和行为。

下面是小鼠脑立体定向注射细胞的一般步骤：
1. 麻醉小鼠：使用适当的麻醉药物使小鼠进入麻醉状态，例如地西泮等。

2. 固定小鼠头部：将小鼠的头部固定在稳定的位置上，例如使用头架。

3. 打开头骨：通过小鼠头顶处的切口和钻孔将头骨暴露出来。

4. 确定注射位置：使用显微镜或立体定向仪来确定注射位置，通常是根据已知的脑解剖学结构和坐标进行确定。

5. 钻孔：使用细钻在确定的注射位置上钻孔，直径通常为0.5-1mm。

6. 注射细胞悬液：使用微量注射泵或注射器将细胞悬液缓慢注射至目标区域，注射速度通常为0.1-0.5μL/min。

7. 拔针和关闭钻孔：注射完成后，缓慢拔出注射针，并使用适当的材料关闭钻孔。

8. 缝合伤口：使用缝合线或伤口闭合剂缝合切口。

9. 观察恢复：将小鼠转移到恢复的环境中，观察其恢复情况。

10. 后续处理：根据实验需求，可以进行进一步的行为测试、组织切片等后续处理。

需要注意的是，小鼠脑立体定向注射细胞是一项复杂的技术操作，需要经过专业的培训和实践才能够熟练进行。

同时，实施过程中需要遵守实验动物伦理规范，确保动物的福利和实验的科学性。

大脑立体定位实验报告

一、实验目的1. 理解大脑立体定位技术的原理和操作步骤。

2. 掌握使用脑立体定位仪进行大脑皮层下结构定位的方法。

3. 学习如何通过立体定位技术进行神经解剖和神经生理研究。

二、实验原理大脑立体定位技术是一种精确的神经解剖和神经生理研究方法，它通过三维坐标系统来确定大脑皮层下结构的位置。

这种方法结合了脑部解剖学、影像学技术和立体定位仪，能够在非侵入性的条件下对大脑进行精确的定位。

三、实验材料1. 脑立体定位仪2. 大鼠脑部解剖模型3. 影像学数据（如MRI或CT）4. 计算机软件（用于数据处理和分析）四、实验方法1. 准备工作：- 将大鼠脑部解剖模型放置在脑立体定位仪的载物台上。

- 调整立体定位仪，使其X、Y、Z轴与大脑的解剖坐标轴对齐。

2. 图像导入：- 将大鼠脑部影像学数据导入计算机软件。

- 在软件中调整图像，使其与脑立体定位仪上的解剖模型对齐。

3. 定位：- 根据影像学数据和解剖模型，确定目标结构的坐标。

- 使用脑立体定位仪的微调功能，将手术针或电极精确地定位到目标结构。

4. 验证：- 通过显微镜观察手术针或电极的位置，确认其是否准确到达目标结构。

- 进行必要的生理或生化实验，验证定位的准确性。

五、实验结果本实验成功地将大鼠大脑皮层下结构（如纹状体、海马体等）进行了精确的立体定位。

通过脑立体定位仪和影像学数据，我们能够清晰地看到目标结构的形态和位置，并通过手术针或电极进行精确的操作。

六、讨论1. 大脑立体定位技术的优势：- 精确性：立体定位技术能够将大脑结构的位置精确到微米级别。

- 非侵入性：通过影像学数据和立体定位仪，可以在非侵入性的条件下进行操作。

- 应用广泛：立体定位技术可以应用于神经解剖、神经生理、神经药理和神经外科等领域。

2. 实验结果分析：- 本实验中，我们成功地将大鼠大脑皮层下结构进行了精确的定位，为后续的神经科学研究提供了重要的基础。

- 通过实验结果的验证，我们证明了大脑立体定位技术的可靠性和有效性。

大脑切片图

切片方法如下图，在切片之前首先要用刀片对SD 大鼠脑进行粗切，可平分为5段，粗切之后进行切纹状体，海马，黑质的精细切分。

1：纹状体和黑质的切法：切除小脑和嗅球（保险起见用刀片切除1，和6的位置）；然后从3处切开（即大约整体的2/5处），1~3区为黑质，3~6区为纹状体，黑质和纹状体都是以3处处的剖开面为底面用胶水固定在切片机小圆板底座上。

2：海马的切法：切除小脑和嗅球（保险起见用刀片切除1，和6的位置），保险起见海马保留2~4之间的区段（用刀片切在2和4的位置）处的剖开面为底面用胶水固定在切片机小圆板底座上。

具体切片方案如下根据大鼠脑立体定位图谱(第三版)在PD 模型中，所需部位主要为鼠大脑的纹状体、黑质以及海马部位:⑴纹状体区:前囟1.70mm至-0.4mm,共2.10mm,由前往后平均分为以下四个区间(每区段0.5mm):+1.70mm---+1.20mm,+1.20mm---+0.70mm,+0.70 mm ---+0.20mm，+0.20mm--- -0.40mm，+1.70mm---+1.20mm,+1.70mm---+1.20mm, +1.20mm---+0.70mm, +0.70 mm ---+0.20mm，+0.20mm--- -0.40mm，可分为四个小瓶来装片，于10ml 的棕色玻璃瓶中( 内盛6ml的0.01mM PBS,pH7.4配制的5%多聚甲醛溶液),每个区段长度为0.50mm，理论上可切30μm的脑片16张，实际保留时至少保证12张脑片。

并从前到后标明区段1(+1.70mm-+1.20mm),区段2(+1.20mm-+0.70mm),区段3(+0.70mm-+0.2mm),区段4(+0.2mm-- -0.4mm).⑵黑质区:前囟-4.52mm至-6.04mm,共1.52mm,理论上一共可切56张30μm的脑片。

进入脑区-4.16mm后,先连续切100μm的脑片共3片,接着切30μm的脑片共2张,均不保存，理论上此时已到-4.52mm的脑区位置。

大鼠脑部解剖图谱

Bibliographic Elements
– Authors (use et al. after 6 authors, if there areplete names should not be written. “et al” must be in italics)
• Websites or web pages /Homepage/Web site
– [Internet]. New York: Association of Cancer Online Resources, Inc.; c2000-01 [updated 2002 May 16; cited 2002 Jul 9]. Available from: /.
1. et al written after 4 authors it should have been written after 6 or more authors 2. Full stop after the end of the article title 3. 2006, 118 :882-887 this should have been written as 2006;118:882-7. 4. Correct ref would be Haggstrom AN, Drolet BA, Baselga E, Chamlin SL, Garzon MC, Horii KA, et al. Study of infantile hemangiomas: Clinical characteristics predicting complications and treatment. Pediatrics 2006;118:882-7.
Authors of the chapter

目的实验从脑病理组织切片、黑质部...

摘要目的：实验从脑病理组织切片、黑质部位凋亡细胞的形态和数量以及钙离子含量的变化方面来探讨疏筋解毒方对6—羟基多巴胺（6—hydroxydopaminne,6—OHDA）所致帕金森病（Parkinson’s disease，PD）大鼠模型的防治作用，从而揭示疏筋解毒方保护多巴胺（dopamine，DA）能神经元以及对PD治疗作用的可能机制，为中药治疗PD提供一定的实验依据和临床参考。

方法：实验选取Sprague-Dawley（SD）雌雄各半的大鼠，随机分为六组：假手术组、模型组、左旋多巴（L-dopamine,LD）组（LD组）、疏筋解毒方小剂量组（SJS组）、疏筋解毒方中剂量组（SJM组）和疏筋解毒方大剂量组（SJL组）。

采用偏侧黑质纹状体6—OHDA立体定位注射术建立PD大鼠模型，分别进行了PD大鼠行为学观察；应用HE染色法在普通光学显微镜下观察了脑病理组织切片；应用黑质致密部DNA末端标记法检测了凋亡细胞的形态及数量；应用甲基百里香酚蓝比色法检测了黑质纹状体组织钙结合蛋白的含量。

实验结果：1 疏筋解毒方对PD大鼠黑质组织形态的影响HE染色结果：与其它组相比，SJM组大鼠中脑黑质神经细胞较丰富，排列较密集，形态及体积基本接近正常。

2 疏筋解毒方对PD大鼠中脑黑质神经元凋亡的影响TUNEL染色结果：关于凋亡细胞数目，各治疗组与模型组比较均有显著性差异，P＜0.01；而中药组与西药组比较也有显著性差异，P＜0.01；且SJM组与其它组比较均有显著性差异，P＜0.01。

关于阳性目标面密度比较，SJS组范围最大，除假手术组外LD组范围最小。

关于阳性目标数密度比较，除模型组外LD组值最大，除假手术组外SJM组值最小。

3 疏筋解毒方对PD大鼠黑质纹状体钙结合蛋白含量的影响甲基百里香酚蓝比色法结果：LD组与模型组无差别；SJS组和SJL组与模型组比较有显著性差别，P＜0．01，但与假手术组比较也有差别，P＜0．05；而SJM组与模型组有差别，P＜0．05，与假手术组无差别。

大鼠立体定向图谱解_部分1

de Groot大鼠脑立体定向图谱参考文献： de Groot J. The rat hypothlamus in stereotaxic coordinates.J Comp Neurol 1959, 113:389-400使用说明（一）图谱使用范围本图谱使用范围主要是下丘脑及其周围结构，也涉及到视前区和中脑上部。

选用体重200-300g英格兰大白鼠的脑，制成冰冻连续切片，片厚50um。

在冠状平面，自前而后每隔0.4mm 取一切片，共14张。

在矢状平面，中线左侧0.2和1.1mm处各取一切片。

全部共16幅平面图。

（二）规定以下各种坐标平面对大鼠下丘脑各结构进行定位1.水平零平面（H0）令动物上门齿后缘根部高于两侧颅骨外耳孔中心连线(耳间线)5mm。

此时通过上门齿后缘根部所作的水平面（即与定向器框架水平面平行的面)为H0，低于H0者为负值，高于H0者为正值。

这样通过耳间线的水平面就比H0平面低5mm，为H-5。

按此规定，H0平面正好通过脑的前连合与后连合。

2.冠状零平面（A0）通过耳间线并与H0平面相垂直的冠状平面为A0。

在A0以前的各冠状平面均以正数表示如A2.8即表示A0以前2.8mm的冠状平面。

本图谱所选平面自A2.8到A8.0止。

3.矢状零平面（L0）通过前囟并与H0 A0两平面均垂直相交的平面称L0。

前囟是两侧颅骨、顶骨在正中线的汇合点。

前囟位置一般在A0前5.9mm（A5.7-A6.1），H0以上6.3mm(H+6.1-H+6.6)左右。

这样，L0就恰好通过矢状缝，而把脑分为左、右对称的两半。

本图谱所用L0.2、L1.1两平面分别表示L0外侧0.2mm及1.1mm处的矢状平面。

根据上述各坐标平面，可由图谱查出下丘脑某一结构的坐标读数，并定出其具体空间位置。

（三）图谱的表示方法图谱中核团和脑区的轮廓用虚线表示，纤维束的轮廓用实线表示。

各结构的名称用西文缩写。

Konig及Klippel 大鼠脑立体定向图谱参考文献： Konig JFR, et al. The rat brain: a stereotaxic atlas of the forebrain and lower parts of the brain stem. Williams & Wilkins, Baltimore,1963使用说明本图谱所用的鼠为体重150克雌性大白鼠(Wistar BR46)（一）图谱的制作1. 照片图的制作鼠脑先放在8%的福尔马林中固定一周，用白明胶包埋，并用冰冻法切成25um的连续切片，用苏丹黑B染色。

4大鼠脑立体定位

4大鼠脑立体定位局部药物毁损大鼠双侧下丘脑对其摄食量的影响1.1 任务和目的掌握和熟悉摄食中枢控制的原理学习脑立体定位的方法观察双侧毁损大鼠的下丘脑所引起的摄食行为和体重变化糖原小肠（充盈状态）甘油三酯合成代谢机体能量的平衡分解代谢糖原甘油三酯小肠（排空状态）肥胖消瘦1.2 原理—能量平衡的中枢控制下丘脑调节哺乳动物的摄食行为和体脂引自Central nervous system control of food intake. Nature. 2000;404(6778):661-71.损毁双侧下丘脑外侧区会导致动物的厌食，即严重的食欲降低。

相反，双侧损毁下丘脑腹内区会导致引起动物的食欲增加过度肥胖。

下丘脑外侧区曾一度被认为是“饥饿中枢”，它与“饱中枢”下丘脑腹内侧区相互拮抗的作用。

因此,损毁任何一个脑区都会使系统失去平衡。

饥饿中枢饱中枢1.3 实验技术—脑立体定位术20世纪初英国学者Horsley和Clarke设计了第一架立体定位仪；广泛应用于神经解剖、神经生理、神经药理、实验神经学以及实验神经病理学；利用脑立体定位技术，可以在非直视暴露并对中枢神经系统损伤小的情况下，对皮层下某些神经结构进行定向的刺激、破坏、药物注射、引导电位等研究。

1.3 实验技术—立体定位仪的设计原理利用颅骨表面的某些标志，如前囟（Bregma）、人字缝尖（lamda）、矢状缝、外耳道等部位，与脑表面以及脑深部某些结构的相对恒定的关系，借以从外部确定这些颅内结构的空间位置；利用三个假想的相互垂直的平面作为一组立体坐标，利用此立体空间直角坐标，以mm为单位来确定动物脑内某一结构的位置；1.3 实验技术—脑立体定位仪1.3 实验技术—脑立体定位图谱George Paxinos, Charles Watson. The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates. 6th edition, 2008, AcademicPress1. Paxinos, G. and Watson C. The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates, 6th ed.2008. Academic Press.2.王太一，韩子玉. 实验动物解剖图谱2000.用一坚固、准确而两侧对称的耳杆，将动物的头非常牢固地固定起来（不允许有0.1mm的移动）；用一组准确性很高、三个互成直角的滑动尺构成电极移动架，滑尺的刻读要求读出0.1 mm，在电极移动架上装有电极夹，电极装上后可以沿三个平面做前后、左右、上下移动，并可按照一定的平面转动一定的角度；手术：对照组（3只）：麻醉，暴露头骨后，颅骨钻洞，插针，缝合好，不进行毁损操作；实验组：每组两只大鼠，分别用于：下丘脑外侧区(LH)和下丘脑的腹内侧(VMH)；实验参数：参照The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates, 6th ed. Figure 54.LH: 前囟后2.52 mm; 中缝侧移2 mm; 头骨下9 mm；VMH：前囟后2.52 mm; 中缝侧移0.5 mm; 头骨下9.5 mm；门牙杆incisor bar比耳间连线低3.3 mm；前囟点和矢状缝尖几乎在同一水平高度。