医学细胞生物学-实验1

镜台测微尺，简称台微尺，是一块特制的
载玻片。它的中央封着一把刻度标尺，一 段全长1mm，共划分成10个大格，每一个 大格又分成10个小格，共100个小格，每一 小格长0.01mm，即10μm。在标尺的外围 有一小黑环，利于找到标尺的位置。
要测量标本的长度，首先必须对目微尺在不同放大倍数的物镜下 进行标定。
高倍物镜观察：把物像中需要放大观察的部分移至 视野中央。将高倍物镜转入光路（一般具有正常功 能的显微镜，低倍物镜和高倍物镜基本齐焦，在用 低倍物镜观察清晰时，换高倍物镜应可以见到物像， 但物像不一定很清晰），微动调焦手轮进行调节。
根据需要调节光阑的大小，使光线符合要求（一般 将低倍物镜换成高倍物镜观察时，视野要稍变暗一 些，所以需要调节光线强弱）。
实 验一
显微镜的结构及细胞形态的观 察和大小测量
实验报告书写要求
正确的书写实验名称 实验目的 实验原理 实验用品（仪器、试剂及材料） 实验内容与方法 实验结果（作图、测量结果、计算等） 讨论 思考题
实验目的
一、掌握显微镜的构造及原理，熟练使用光 学显微镜。
二、了解显微镜使用的基本要求、注意事项 及一般维护方法。
三、学习生物绘图的基本要求及方法。 四、学习临时制片的操作方法。 五、了解显微测微尺的使用方法。
实验材料和仪器：显微镜、显微测微尺、镊子、 盖玻片、载玻片、牙签、革兰氏碘液、中性洋红 染液、人口腔上皮细胞、洋葱等。
实验内容： 1.观察显微镜的结构、练习使用显微镜 2.显微测微尺的使用 3.洋葱表皮临时制片及观察测量 4.人口腔上皮细胞临时制片及观察测量
观察完毕，应先将物镜镜头从通光孔处移开，并检 查物镜是否沾水沾油，检查处理完毕后即可装箱。
三、显微测微尺的用法 P14
显微测微尺由目镜测微尺和镜台测微尺组成
目镜测微尺
Fra Baidu bibliotek镜台测微尺
目镜测微尺，简称目微尺，是一块圆形的 玻璃片，直径约20-21mm。它的上面刻有 直线的标尺。使用目微尺时，先将目镜从 镜筒中抽出，旋去目镜，然后将目微尺放 在目镜内。注意让有刻度的一面朝下，再 将接目透镜旋上，把目镜插入镜筒简，即 可进行测量。
物镜（7）。物镜和目镜直 接参与显微镜的成像。
目镜：其作用是将由物镜放 大的倒立实像进一步放大。 目镜仅起放大物像的作用， 并不增加显微镜的分辨力。 一般目镜有数个，它的放大 倍数分别是5×，10×， 15×等。
物镜：它由1~5组透镜组成，其功能是聚集来自 标本的光线，使标本第一次放大成一个倒立的实 像。 a．放大倍数：从4×到100×，常用的低倍镜为 4×、 10×，高倍镜为40×，油镜头为100×。 b．工作距离：是指显微镜处于工作状态时，物 镜最下端到盖玻片上表面之间的距离。物镜的放 大倍数越大，它的工作距离越小。高倍镜的工作 距离为0.6毫米，而油镜头仅为0.2毫米，使用时 要倍加注意。 C．焦点深度：指视野中垂直范围内所能清晰观 察到的界限。在用不同倍数的物镜观察物体时， 所能看到垂直的清晰范围是不同的。物镜的倍数 越大，焦点深度越浅。 D．分辨率：是分辨被检物体细微结构的，也就 是判别两个物体点之间最小距离的本领。是衡量 显微镜质量优劣的主要根据。分辨率与镜口率 （又称数值孔径）关系很大，镜口率越大，分辨 能力越高，物镜的价值也越高。
12. 反光镜：安装在聚光器及光圈的 下方。它可向各方向转动，它的作 用是把光源射出的光线反射至聚光 器或通光孔。它分平、凹两面，凹 面镜有聚光作用，在光源微弱时使 用，如光源充足则用平面镜。
二、光学显微镜的使用
实验时要把显微镜放在实验台桌面上,镜座应距桌沿3～6cm 左右。
打开光源开关，调节光强到合适大小。 转动物镜转换器，使低倍(4X)镜头正对载物台上的通光孔。 将所要观察的玻片放在载物台上，使玻片中被观察的部分位
刮取口腔上皮细胞
临时装片的制 备及染色过程
2、洋葱鳞茎表皮细胞标本的制备及观察 取一载玻片，擦净放于桌上，再取一盖玻片．擦净放于载玻 片之一端。取洋红染液1—2滴于载玻片中央，用解剖镊在洋 葱鳞茎内侧撕下约为2—3mm2的表皮，越薄越好，平铺在染 液上面，盖上盖玻片，制成洋葱表皮临时玻片标本，在显微 镜下观察并绘图。测量所观察的细胞直径并计算细胞体积 （选作）。
测定时，取下台微尺，换上标本，记录被检标本占目微尺的 格数，然后乘以每小格代表的长度，即为标本的实际长度。 如果更换不同放大率的镜头，必须重新标定目微尺，这样才 能再次测量。
根据测量结果可计算各种细胞、细胞核的体积及核质比例。
四、细胞的基本形态观察
1、人口腔上皮细胞标本的制备与观察 取清洁牙签，用钝端在自己口腔内腮面轻刮少许粘液，并弃 掉。换只牙签，在原位稍用力刮取上皮细胞，均匀的涂在一 张干净的载玻片中央，然后用碘液染色5分钟，在显微镜下 观察并绘图。测量所观察的细胞直径并计算细胞体积（选 作）。
实验内容与方法
一、显微镜的结构及使用
显微镜的构造可分为保证成象 的光学系统，照明系统和用以 安装光学系统的机械部分。
1．机械部分：
镜筒： （2）
镜臂： （3）
调节器：大的为粗调节轮，小 的为细调节轮，旋转一周镜筒 升降0.1毫米。（4、5）
物镜转换器：（6）
载物台：（8）
镜柱和镜座：
2．光学部分： 光学部分包括目镜（1）、
3.照明部分
10.聚光器：安装在载物台下，一般由 2~3个凸透镜组成。它的功用是收 集从光源射来的平行光线，并汇集 成光束，以增强照明度，再经过被 检物体照射到物镜中去。利用齿轮 和齿条升降，能调节光线的强弱， 使物像明晰。
11.光圈：装在聚光器之下，由一片压 一片的铁片组成。调拔操纵杆可以 改变光圈的大小，调节光线的强弱。
临时装片的制 备及染色过程
取洋葱内表皮
思考题：P12
1.使用显微镜观察标本时，为什么必须按 低倍镜到高倍镜再到油镜的顺序进行？ 2.如果标本放反了，可用高倍镜或油镜找 到标本吗？为什么？
提示：实验结果要包括的内容
1.分别求出试用低倍物镜（4倍）（10倍）， 高倍物镜（40倍）时目镜测微尺每格代表 的长度。 2.分别绘制所观察细胞的结构图并注明基本 结构（要求见P4） 3.测量所观察的细胞直径并计算细胞体积。
于通光孔的正中央。 先用低倍镜观察（4X）。观察之前，先转动粗动调焦手轮，
使物镜逐渐接近玻片。需要注意，不能使物镜触及玻片，然 后，通过目镜观察，并转动粗调焦手轮，使物镜逐渐远离玻 片并看到物象。再转动细调焦手轮，直到看清物像。
如果物像偏离视野，可慢慢调节载物台移动手柄。
瞳距调节：左右推拉目镜，使两目镜距离与自己两眼距离相 等
标定方法是：将台微尺夹于载物台上，调焦直至看到台微尺刻度。 这时目微尺和台微尺同时显示在视野中，转动目镜，使目微尺标 尺直线与台微尺标尺直线尽量靠近平行，最终促使两线重合，再 移动台微尺，使两个微尺左边一端平齐，然后从左到右找出两个 微尺另一次重合的直线
分别计数重合线之间台微尺和目微尺各自包含的格数，根据公式 即可计算出目微尺每个小格的标度。