HIV快速检测实验室
医院检验科—HIV实验室的特点及功能
HIV实验室的预警作用
HIV实验室的监测数据为政府和卫生部门制定 和执行防控策略提供依据，参与HIV疫苗的研 发和评估工作。
04
HIV实验室的安全管理
生物安全管理
01 生物安全管理的原则
HIV实验室的生物安全管理遵循预防为主、 控制优先的原则，确保实验室操作的安全 性和合规性。
02 生物安全管理的措施
HIV实验室的检测技术
HIV实验室综合运用多种检测技术和方法，如酶联免疫吸附试验（ELISA）、实 时荧光定量PCR等，确保检测结果的准确性和可靠性。
筛查与确认
HIV实验室的筛查工作
HIV实验室承担HIV的初筛工作，对疑 似感染者进行初步检测，以发现潜在 的HIV感染者。
HIV实验室的确认实验
对于筛查阳性的样本，HIV实验室 采用更为敏感和特异的方法进行确 认实验，如免疫印迹法（WB）， 以确保检测结果的准确性。
科研与教学
HIV实验室的科研任务
HIV实验室的科研人员致力于HIV相关的基础研究和应用研究， 探索新的检测技术和治疗方法。
HIV实验室的教学工作
HIV实验室作为教学基地，培养HIV检测领域的专业人才，提 高HIV防治工作的整体水平。
疫情监测与预警
HIV实验室的疫情监测
HIV实验室通过对HIV感染者的检测和监测，能 够及时发现疫情动态和趋势，为防控工作提供 数据支持。
01
HIV实验室的个人防护装备
HIV实验室为实验人员提供一次性手套、口罩、隔离服和防护眼镜等个人防护装备，以降低感染风 险。
HIV实验室的应急处理
HIV实验室备有紧急冲眼器、消毒药品和设备，以应对可能的意外情况，保障实验人员的安全。
02
设备配置先进
HIV检测筛查实验室的生物安全防护措施
HIV检测筛查实验室的生物安全防护措施HIV检测筛查实验室的是分三区的二级生物安全实验室，笔者通过对HIV检测筛查实验室的建造设计，查阅了较多的文献和标准规范，也通过与同仁的交流，感觉到相当多的实验室检验人员对生物安全防护方面的知识了解的比较少，许多操作习惯需要改进，生物安全意识需要进一步加强。
前段时间，写了篇这方面的文章，与有兴趣的同仁一起交流学习。
另外，HIV检测筛查实验室除了分三区之外，其余的要求与二级生物安全实验室的要求完全一致，因此文中提及的相关内容同样适用于所有的二级生物安全实验室。
HIV检测筛查实验室是进行三区划分的二级生物安全实验室，主要的检测样品是血液，包括全血、血清和血浆。
这些样品在检测前均是未知标本，都应该被视为具有潜在风险的标本。
对于HIV检测筛查实验室（以下简称实验室）而言，关注的重点不应仅仅局限于爱滋病病毒本身，同时也要考虑到血液标本作为未知标本可能含有的其它各种病原微生物，必须充分考虑其可能存在的各种潜在风险。
对于生物安全实验室而言，潜在的最大危害是感染性气溶胶引起的感染。
Pike等对3921例实验室相关感染统计分析结果发现，已知原因的实验室感染只占全部感染的18%，不明原因的实验室感染却高达82%。
对不明原因的实验室感染的研究表明，大多数可能是病原微生物形成的感染性气溶胶在空气中扩散，实验室内工作人员吸入了污染的空气感染发病的[1]。
因此，对于实验室而言，应将防止气溶胶的产生和防止已产生的气溶胶进一步扩散作为生物安全防护的重点工作。
本文对实验室中几个容易忽略的生物安全防护问题进行探讨。
1实验室三区划分需相互密闭隔离实验室只要进行相关操作，气溶胶的产生不可避免。
除了在实验过程中采用安全的操作技术减少操作过程中气溶胶的产生外，采用有效的隔离技术，防止气溶胶的扩散也相当重要。
因此，HIV检测筛查实验室要求把建筑区域分成污染区、半污染区和清洁区，来防止气溶胶由实验室向外界环境扩散。
HIV抗体快速检测的方法与步骤
标题：HIV抗体快速检测的方法与步骤1、目的采用胶体金免疫技术和层析原理，定性测定全血或血浆样本中的HIV1/2型抗体。
同时规范本实验室HIV抗体检测的方法与步骤，保证检测质量和实验工作有序进行。
2、适用范围适用于本中心艾滋病筛查中心实验室及艾滋病确证实验室。
3、职责3．1 检测人员须严格遵守本操作程序。
.3．2 实验室负责人负责监督检测人员履行相关职责。
4、操作程序4．1 HIV抗体快速检测步骤：4.1.1 实验前检测环境应符合要求（温度：湿度：），检查仪器设备是否运行正常。
4.1.2 开启实验室环境消毒设施和生物安全柜紫外线灯进行消毒（不少于30min）。
同时取样品与检测试剂放置室温下平衡30min。
4.1.3核对样品编号，填写于《HIV抗体快速检测实验室原始记录》，实验按填写顺序依次加样。
4.1.4 严格按照试剂操作说明书操作，并做好质量控制（见《质量控制程序》）。
4.1.5 将检毕样品分类放入血清库保存，关闭生物安全柜及其它设备，清理消毒实验室。
4.1.6 及时填写实验室各相关记录并发出报告。
4．2 检测方法：血清、血浆样本：4.2.1HIV快速抗体快速检测细则：4.2.1.1 按说明要求，采集静脉的血清、血浆或全血应在无菌条件下、并避免样品溶血。
4.2.1.2 将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。
4.2.1.3 将所需数量的测试试剂从包装盒中取出来平衡至室温，打开铝箔包装袋，平衡于台面。
4.2.1.4用微量加样器取60UL血清或血浆样本，或用试剂盒内所配塑料滴管吸取样本，垂直滴加两滴于试剂的加样处。
4.2.1.5加样后，阳性标本可在1-30分钟内检出。
经过试验确证，反应时间（从加样后计算起）超过30分钟将对实验结果的观察造成影响，因此，建议30分钟内最终观察并记录实验结果。
4.2.1.6 结果分析及判断标准：阴性：测试条/卡只在对照区位置出现一条紫红色条带。
阳性：测试条/卡在检测区和对照区位置各出现一条紫红色条带如果检测区的紫红色条带隐约可见，建议对该样本重复试验，并使用其他方法确认。
艾滋病检测筛查实验室基本标准
艾滋病检测筛查实验室基本标准（一）艾滋病筛查中心实验室及艾滋病筛查实验室。
1、人员条件至少由3名医技人员组成，其中具有中级卫生技术职称人员至少1名。
负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验，接受过省级以上艾滋病检测技术培训，并获得培训证书。
2、建筑条件：实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区，应符合二级生物安全实验室（BSL-2）要求。
3、仪器设备条件配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备，至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱（或温箱）、离心机、加样器（仪）、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。
（二）艾滋病检测点。
1、人员条件：至少由2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。
2、建筑条件：需有艾滋病检测区域或专用实验台，能开展简便、快速检测。
3、设备条件：需配备快速试验所必须的物品，包括普通冰箱、消毒与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。
艾滋病检测筛查实验室职能包括艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点。
艾滋病筛查中心实验室设在市（地）级疾病预防控制中心；艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点可设在疾病预防控制机构、医疗机构、采供血机构、计划生育技术服务机构等。
1、艾滋病筛查中心实验室职能。
（1）负责职责范围内艾滋病病毒抗体筛查试验，根据需要可开展其他艾滋病检测工作。
（2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送艾滋病检测确证实验室。
（3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报艾滋病检测确证实验室。
配合艾滋病检测确证实验室做好个案调查、登记等随访工作。
（4）负责对职责范围内艾滋病检测筛查实验室的技术指导；协助艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点开展自愿咨询检测工作，给予技术支持和指导。
2、艾滋病筛查实验室职能。
（1）开展艾滋病病毒抗体的筛查试验，根据需要可开展其他艾滋病检测工作。
（2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。
(完整)HIV实验室SOP文件-新版
7。建立HIV筛查实验室专用的精密仪器和重要设备专责岗位制，其他人不得任意使用。严格按照仪器操作规程操作,不可擅自乱改设置。
8.凡是一物多人使用的，除共同负责外，应指定一人为该岗位责任制负责人，负责指导正确操纵,定期安全检查，经常维护保养，保持正常运转,该负责人有权制止任何违章操作和有害设备安全的行为。
三、标本管理制度
（一)、样品的采集和处理
艾滋病检测最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血。唾液或尿液有时也可作为测试样品。常用的血液样品的采集和处理方法如下：
1、血清样品采集和处理
（1）、用一次性注射器（或真空采血管)抽取一定量静脉血，室温下自然放置12h，待血液凝固、血块收缩后再用3000r/min离心15min，吸出血清备用。
2。HIV筛查实验室由有实践经验的技术人员负责。
3.牢固树立把质量放在第一位的思想，在工作中必须加强检查和复查制度，以保证血液质量及医疗安全。
4.交接工作必须认真负责，须核对实物和记录,对工作一般情况、存在问题和注意事项应进行具体交待，否则，发生问题由交班人负责。
5.职工临时因故离开工作岗位，必须将工作委托给能胜任该项工作的人员，否则,发生问题由原担任该项工作者负责.
二十一、检测数据季报方案和程序29
二十二、感染追踪处理方案30
二十三、保密程序制度31
二十四、质量管理制度32
二十五、室内质控分析管理制………………………………………………………33
二十六、外部质控血清的制备和保存………………………………………………34
二十七、仪器的使用维护……………………………………………………………35
HIV实验室检测技术
HIV实验室检测技术
30
操作方法
• 实验准备:试验开始前将试剂和样品放置在 室温(18~23℃), 按实验室SOP做好试剂准 备。
• 备好试剂盒、待检样品和外部对照质控血 清后,严格按试剂盒说明书以及质控和安全 防护要求进行筛查检测.
1/3/2021
HIV实验室检测技术
31
注意事项
• ELISA 是目前公认的抗-HIV 较佳的筛选方 法，但在实际工作中，ELISA抗-HIV的检测 受诸多因素影响。
艾滋病期：保持和发展AIDS早期症状，出现多种机 会性感染，神经细胞和功能损伤的表现，易发生 多种肿瘤
* AIDS的病程通常2年
1/3/2021
HIV实验室检测技术
2
关于检测抗-HIV的残余危险度
含义：在目前条件下，筛查后仍具感染性的机率 称为残余危险度。
影响因素： * 窗口期和检测时机的选择问题 * 实验室质控 * 个别人免疫功能低下，对HIV无反应 * 试剂质量和保存问题 * 是否在有效期内使用 * 试验操作错误：标本或结果登记的差错、仪器校准否、 错误的操作
第4代试剂
• 从理论上来讲，这种试剂是很完美的，但其 敏感度和特异度尚需通过大量的临床评估加 以确认。在初筛诊断试剂上还发展了特异的 HIV IgA，用作围产期儿童诊断，敏感度达 93.1%，特异度在1月龄以上的婴儿可达 100%。此外，在对抗HIV IgM的诊断也正在 积极研究，并取得了可喜的成绩，无形中可 缩短窗口期7—10天。
B
± ±或 ＋ 再次采样，做确证实验
C
±－
报告抗-HIV阴性
D
－ 不必复检 报告抗-HIV阴性
1/3/2021
HIV实验室检测技术
HIV实验室检测方法和步骤
HIV实验室检测方法和步骤1.目的：为HIV实验室各技术人员统一实验操作程序，保证实验质量，特制定本程序。
2.适用范围：适用于HIV实验室技术人员。
3.规范性引用文件：《全国艾滋病检测技术规范》（2004年版）。
4．相关器材设备：人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（双抗原夹心酶联免疫法）HIV（1+2）。
5 安全防护器材与措施：一次性乳胶手套、隔离衣、口罩、帽子，接收或取用试剂时应把试剂视作感染性材料对待。
首先穿好一次性隔离衣，戴好口罩、帽子，最后戴好乳胶手套后再接触试剂。
6 检测方法与步骤6.1双抗原夹心酶联免疫法6.1.1 试剂名称：人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒6.1.2试剂厂家：北京万泰生物试剂有限公司6.1.3原理及用途：采用基因工程抗原gp41和gp36包被酶联板，用基因工程HIV-1和HIV-2嵌合抗原ENV18标记辣根过氧化物酶，与其他试剂组成试剂盒，应用双抗原夹心法检测人血清或血浆中的人类免疫缺陷病毒抗体，用于献血员及高危人群中人类免疫缺陷病毒感染的筛查。
6.1.4 试剂盒组成（96人份）6.1.4.1. 预包被板条 12孔×8/8孔×126.1.4.2. HIV酶标记物12ml×1瓶6.1.4.3. 阴性对照1ml×1瓶6.1.4.4. 阳性对照1ml×1瓶6.1.4.5. 25倍浓缩洗液80ml×1瓶用去离子水或蒸馏水稀释6.1.4.6. 底物缓冲液8ml×1瓶6.1.4.7. 底物液8ml×1瓶6.1.4.8. 终止液7ml×1瓶6.1.4. 9. 封口袋1个6.1.4.10. 说明书1份6.1.5操作方法6.1.5.1. 加样：将预包被板条固定于板架上。
每次试验设阴性对照2孔、阳性对照2孔，分别加入阴、阳性对照100ul；设空白对照1孔，不加样品。
其余孔加入待测样品100ul。
6.1.5.2. 温育：置37℃温育60分钟。
HIV艾滋病快速筛查点实验操作注意事项-HIV快速筛查培训
实验室质量管理
艾滋病快速检测点应建立健全实验室质量保证和质量控
制体系，并有专人负责质量体系的正常运转。 – 检测流程的质量监督
艾滋病快速检测点必须参加实验室能力验证，能力验证
结果由组织者定期公开发布。 – 考核
朝阳区疾控中心
艾滋病快速检测点基本标准——人员条件
有两年以上血清学检测工作经验，具有较强的
艾滋病检测工作中涉及到艾滋病病毒毒种（株）和检测
样品的采集、保藏、携带、运输，必须符合卫生部的有 关规定。
艾滋病快速检测点必须执行《实验室生物安全通用要求》
（GB 19489-2019）的要求及卫生部的有关规定。
艾滋病快速检测点人员发生职业暴露后，应按照《医务
人员艾滋病病毒职业暴露防护工作指导原则（试行）》 及其它相关规定及时处理。
送艾滋病筛查中心实验室——朝阳区疾病预防 控制中心。
定期汇总艾滋病检测资料，并上报艾滋病筛查
中心实验室——朝阳区疾病预防控制中心。
开展艾滋病自愿咨询检测工作。
朝阳区疾控中心
艾滋病检测工作要求
艾滋病检测实验室应在规定的职能范围内开展检测工作，
遵守国家法律、法规和有关规范。检测技术及程序应符 合《全国艾滋病检测技术规范》(2009版)的要求。
艾滋病检测实验室技术人员需要经过相关的业务培训，
经考核合格者由相关机构发给培训证书，持证上岗。非 卫生专业技术人员不得从事艾滋病检测工作。
在岗持续培训：在工作中要根据需要接受复培训，筛查
实验室技术人员至少每2年1次。
朝阳区疾控中心
艾滋病检测工作要求
艾滋病检测实验室中使用国家规定需要强检的仪器设备，
实际操作能力和责任心的HIV抗体检测医技人 员。
医院HIV抗体快速检测实验室消毒与污物处理作业指导书
医院HIV抗体快速检测实验室消毒与污物处理作业指导
书
按照“生物安全管理条例”对污染物品、进行有效消毒处理。
一、血液标本应置于运输箱内，按照三层包装后运送，切勿污染盛器外部。
如果盛器被污染，要用消毒液消毒。
送检单位外面套清洁的塑料袋封口一并运送。
二、各种化学消毒剂均应贴有标签，放置于合适和位置，试验台上不放置不必要的物品。
实验室环境一旦污染，限在污染区外周围倒入消毒液，逐渐向中心消毒处理。
并做好记录。
三、实验室所有生物垃圾，包括用过的一次性手套和工作衣，置于黄色污物袋内，经焚烧或有效消毒处理后定点深埋。
污染的非一次性工作衣应先消毒后洗涤。
四、所有尖锐品、血样管和血液标本放置于不宜刺破的容器内（锐器盒，带盖塑料桶），限制在实验室内消毒后在指定地点焚烧处理。
五、常用的消毒剂和消毒方法与病毒性肝炎消毒法相同。
（一）锐器盒或塑料消毒桶：5000mg/L次氯酸钠。
（二）生物安全柜、工作台面和仪器表面：使用75%乙醇。
（三）溢出物：5000mg/L次氯酸钠。
HIV初筛实验室工作制度及操作规范
HIV快速检测实验室操作规范及工作制度一、抽血标准操作规程1、适用范围需做血液检测的对象。
2 、试剂与材料碘酒、酒精棉、棉签、橡皮止血带、注射器（一次性采血器）、试管、止血棉。
3 、操作步骤3.1 核对被检者姓名并标价试管；3.2 请被检者入座，伸出手臂放在采血垫上；3.3 用橡皮止血带扎紧并请被检者握紧拳头；3.4 选择静脉，用碘酒棉在采血部位由里向外擦拭（直径约6cm 左右）消毒；3.5 用酒精棉脱碘；3.6 把一次性注射器（一次性采血器）打开，在采血部位穿刺静脉，抽取血液；3.7 放松橡皮止血带，拔出针头，同时请被检者用止血棉压迫止血。
二、酒精棉球的制备1. 试剂与材料无水乙醇（分析纯）、消毒蒸馏水若干、消毒量筒（1000ml）、消毒盛器2. 操作步骤2.1 把消毒棉放入消毒盛器中待用。
2.2 取165ml消毒蒸馏水到入消毒好的量筒中，再加入一瓶500ml 无水乙醇充分混匀。
2.3 把配好的75％酒精到入放有消毒棉的盛器中三、样品的采集和处理1 . 范围本章规定了用于艾滋病病毒（HIV）检测的血清、浆和全血样品的采集和处理方法，适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、CD4+/CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。
2 . 操作步骤2 .1 样品的采集和处理艾滋病检测最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血。
唾液或尿液有时也可作为测试样品。
常用的血液样品的采集和处理方法如下：2.1.1血清样品采集和处理2.1.1.1 用一次性注射器（或真空采血管）抽取一定量静脉血，室温下自然放置1~2小时，待血液凝固、血块收缩后再用3、000r/min离心15min，吸出血请备用。
2.1.1.2如用滤纸片采样，则手指或耳垂局部严格按常规进行消毒，在刺破皮肤，迅速把滤纸片沾上，切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。
采血后要待血样干燥后再包装送检。
2.1.2 抗凝血样品采集和处理2.1.2.1用加有抗凝剂的真空采血管（或一次性注射器抽去静脉血，转移至加有抗凝剂的试管），反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。
HIV感染的实验室检测(共36张PPT)
• （3）实验结果
• ①阴性对照（NC），HIV-1阳性对照（PC1），HIV-2阳性对照 （PC2）
NC 必须＜0.25方可用，排除NC≥0.25的值，计算NC平均 值。
NC界限范围：0.6倍NC均值＜NC＜1.4倍NC均值。
• 竞争法、捕获包被法等 4、严格遵守实验室标准操作规程（SOP）。
为了达到以上的某个目的的HIV 检测可能不适合其他目的，比如输血服务的检测不适合临床诊断HIV感染 （4）艾滋病唾液检测卡：在硝酸纤维膜上包被人工合成的HIVgp41/gp36蛋白抗原，可同时检测含在唾液中的HIV-1/HIV-2抗体，原理为酶 免疫间接法。 监测(为了知晓人群流行状况) Introduction to HIV Testing ⑥在2h内置于酶标仪读数，单波长450nm，或双波长450/630nm测OD值。 常用HIV抗体检测方法: 加受检标本，保温反应。 （1）明胶颗粒凝集试验（PA）：PA是HIV血清抗体检测的一种简便方法，是将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作用，混匀后 保温（一般为室温）。
ELISA的原理
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗 体复合物与液体中的其他物质分开。再 加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应 而结合在固相载体上。此时固相上的酶 量与标本中受检物质的量呈一定的比例 。
ELISA的原理
加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有 色产物，产物的量与标本中受检物质的量 直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性 或定量分析。由于酶的催化效率很高，间 接地放大了免疫反应的结果，使测定方法 达到很高的敏感度。
ELISA
酶联免疫吸附试验 + ve
HIV
包被了HIV 抗
原的检测板
患者的抗体
hiv感染实验室检测
特异性好、快速、简捷。
定量NASBA技术：
是由一对引物引导的，连续均一的体外特异核苷酸序列的 等温扩增的酶促反应过程。 优点：操作十分简单，只需将制备好的模板直接加到反应体
系中，恒温41℃培育1.5～2小时，即可将模板扩增109倍。 NASBA 反 应 体 系 包 括 AMV 反 转 录 酶 、 RNA 酶 H 、
through, FT)
免疫层析 （Immunochromatograpy, lateral
flow, IF)
快速检测试剂的应用
目前在国内批准注册的国外进口试剂有：Determine HIV1/2（ABBOTT，雅培）、Instant CHEK-HIV1+2 （EY）、麦美华、中新科炬
一般10-30min内出结果。 2003年国内已有产品被SFDA批准。有金豪、万泰、
②仅需少量标本或标本中仅含少量病毒也能检测；
③在病毒感染的急性期抗体尚未出现之前，病毒感染的诊断主 要依靠NAT，适用于早期诊断；
④可对病毒进行定量检测，有助于疗效监测； ⑤可对病毒基因进行基因分型，比血清分型更有价值； ⑥通过对病毒耐药基因的检测，可预测或发现病毒的耐药性；
⑦可用于先天性或围产期获得性病毒感染的诊断；
预约检测后咨询时间。
危险因素评估
1.性行为：具体的性活动方式、性伴数量、性活动频度、 使用安全套的情况和性伴感染的可能性。特别要注意某 些高危行为，如多性伴关系，无保护性交或肛交，性病 史。 2.吸毒行为：吸毒方式、注射器具消毒、共用注射器等。
3.其他接触血液的行为： 输血或血制品史，有无采供血（浆）史、器官移植史或 者被血液污染器具刺伤、纹身、穿耳等等；
艾滋病检测筛查实验室基本标准
文档根源为 :从网络采集整理.word 版本可编写 .支持.艾滋病检测筛查实验室基本标准（一）艾滋病筛查中心实验室及艾滋病筛查实验室。
1、人员条件起码由 3 名医技人员构成，此中拥有中级卫生技术职称人员起码 1 名。
负责筛查试验的技术人员需拥有 2 年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验，接受过省级以上艾滋病检测技术培训，并获取培训证书。
2、建筑条件：实验室或检测地区应分为洁净区、半污染区和污染区，应符合二级生物安全实验室（BSL-2）要求。
3、仪器设备条件装备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备，起码包含酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱（或温箱）、离心计、加样器（仪）、消毒与污物办理设备、实验室恒温设备、安全防备用品和生物安全柜。
（二）艾滋病检测点。
1、人员条件：起码由 2 名经过艾滋病检测技术培训并获取培训证书的专业人员构成。
2、建筑条件：需有艾滋病检测地区或专用实验台，能展开简易、迅速检测。
3、设备条件：需装备迅速试验所一定的物件，包含一般冰箱、消毒与污物办理设备、一次性耗费品、安全防备用品。
艾滋病检测筛查实验室职能包含艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点。
艾滋病筛查中心实验室设在市（地）级疾病预防控制中心；艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点可设在疾病预防控制机构、医疗机构、采供血机构、计划生育技术服务机构等。
1、艾滋病筛查中心实验室职能。
（1）负责职责范围内艾滋病病毒抗体筛查试验，依据需要可展开其余艾滋病检测工作。
（2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反响的样品送艾滋病检测确证明验室。
（3）按期汇总艾滋病检测资料，并上报艾滋病检测确证明验室。
配合艾滋病检测确证明验室做好个案检查、登记等随访工作。
（4）负责对职责范围内艾滋病检测筛查实验室的技术指导；辅助艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点展开自发咨询检测工作，赐予技术支持和指导。
2、艾滋病筛查实验室职能。
（1）展开艾滋病病毒抗体的筛查试验，依据需要可展开其余艾滋病检测工作。
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HIV初筛实验室操作规范
（一）
一、抽血标准操作规程
1、适用范围
需做血液检测的对象。
2 、试剂与材料
碘酒、酒精棉、棉签、橡皮止血带、注射器（一次性采血器）、试管、止血棉。
3 、操作步骤
3.1 核对被检者姓名并标价试管；
3.2 请被检者入座，伸出手臂放在采血垫上；
3.3 用橡皮止血带扎紧并请被检者握紧拳头；
3.4 选择静脉，用碘酒棉在采血部位由里向外擦拭（直径约6cm左右）消毒；
3.5 用酒精棉脱碘；
3.6 把一次性注射器（一次性采血器）打开，在采血部位穿刺静脉，抽取血液；
3.7 放松橡皮止血带，拔出针头，同时请被检者用止血棉压迫止血。
二、酒精棉球的制备
1. 试剂与材料
无水乙醇（分析纯）、消毒蒸馏水若干、消毒量筒（1000ml）、消毒盛器
2. 操作步骤
2.1 把消毒棉放入消毒盛器中待用。
2.2 取165ml消毒蒸馏水到入消毒好的量筒中，再加入一瓶500ml无水乙醇充分混匀。
2.3 把配好的75％酒精到入放有消毒棉的盛器中
三、样品的采集和处理
1 . 范围
本章规定了用于艾滋病病毒（HIV）检测的血清、浆和全血样品的采集和处理方法，适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、CD4+/CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。
2 . 操作步骤
2 .1 样品的采集和处理
艾滋病检测最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血。
唾液或尿液有时也可作为测试样品。
常用的血液样品的采集和处理方法如下：
2.1.1血清样品采集和处理
2.1.1.1 用一次性注射器（或真空采血管）抽取一定量静脉血，室温下自然放置1~2小时，待血液凝固、血块收缩后再用3、000r/min离心15min，吸出血请备用。
2.1.1.2如用滤纸片采样，则手指或耳垂局部严格按常规进行消毒，在刺破皮肤，迅速把滤纸片沾上，切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。
采血后要待血样干燥后再包装送检。
2.1.2 抗凝血样品采集和处理
2.1.2.1用加有抗凝剂的真空采血管（或一次性注射器抽去静脉血，转移至加有抗凝剂的试管），反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。
2.1.2.2应根据实验要求选用适当的抗凝剂，如CD4+/CD8+T淋巴细胞测定可选用
K3EDTA或肝素或柠檬酸钠，HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用K3EDTA或枸橼酸钠。
2.1.2.3用于核酸定性检测时，采集的抗凝全血应在4~8h内分离PBMC和血浆，否则应在24~48h内分离血浆和血细胞。
(病毒载量测定不同方法对样品的要求见第四章4.1中表2；CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品采集要求见第五章4.1。
)
2.1.3 采集样品注意事项
2.1.
3.1采集样品原则上应按临床采血技术规范操作（试剂盒有特殊要求）。
2.1.
3.2采集样品时应注意安全，建议采用真空采血管及蝶形针具，以避免直接接触血液；直接接触HIV感染者/艾滋病（AIDS）病人血液/体液的操作，应带双层手套。
2.2 样品的保存
2.2.1 用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20度以下，短期（1周）内进行检测的样品可存放于2-8度。
2.2.2用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20以下，进行病毒RNA检测的样品如需保存3个月以上应置于-80度。
2.2.3 用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期保存，样品采集时间超过48h则不可检测。
2.3 样品的运送
2.3.1 实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。
2.3.2应采用WHO提出的三级包装系统
2.3.2.1 第一层容器：装样品，要求防渗漏。
样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。
在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。
随样品应附有送检单，送检单应与样品分开放置。
2.3.2.2 第二层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。
将试管装入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理。
2.3.2.3 第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒。
在第三层容器外面要贴标签（数量，收、发件人）。
2.3.3 血清和血浆样品应在2~8度条件下由专人运送。
用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品应在室温下18~23度运送。
每一包装的体积以不超过50ml为宜。
2.3.4 运送感染性材料必须有记录。
2.3.5 如分离血浆仍有困难，可直接将抗凝血-20度以下冻存，采用冰壶冷藏运输，避免冻融。
2.3.6 特殊情况下如需对个别样品进行复测，可以用特快专递形式投寄，但必须按三级包装系统将盛样品的试管包扎好，避免使用玻璃容器，以保证不会破碎和溢漏。
2.4 样品的接收
2.4.1 含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的、穿戴防护衣的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。
2.4.2 核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。
如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出，对样品管和盛器消毒，同时报告有关领导和专家。
2.4.3 检查样品的状况，记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。
如果污染过重或者认为样品不能被接受，则应将样品安全废弃。
并要将样品情况立即通知送样人。
2.4.4 打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。
样品处理时若内容物有可能溅出，则应在生物安全柜中戴手套进行。
同时应戴口罩、防护眼镜，以防皮肤或粘膜污染。
2.4.5 因特殊临床治疗导致自发荧光的样品不可用于荧光方法测试。
2.4.6 接受样品时应填写样品接受单。
四、电热恒温水浴箱操作规程
1. 概述：
本电热恒温水浴箱主要用于科研单位、医疗单位及化验所检查化验病理血清等用。
2. 技术性能：
工作环境：常温常压条件下正常工作。
技术指标：温度调节范围：37℃~65℃
温度波动： ±1℃
温度均匀性： ± 1℃
3. 使用方法：
3.1使用是必须加入温水，可缩短加热时间和节约用电。
3.2打开电源开关，电源指示灯亮表示电源接通。
3.3旋转恒温控制器旋钮，加热指示灯亮表示电源接通，当温度表上的温度达到所需使用的温度时，将恒温控制器的旋钮调整在恒温指示灯忽亮忽熄点，待数分钟后即能自动恒温控制。
3.4恒温控制器的刻度，仅可作温度对照指示，并非温度指示刻度。
4. 点检程序：
4.1 为保证水浴箱温度的准确性必须每日使用温度计测量水浴箱内水温，并做好日温度记录。
4.2每半年由设备科检测校正一次，且附有原始记录。
5. 注意事项：
5.1箱外壳必须有效接地。
5.2在未加水前，切勿开电源，以防止电热管内的电热丝烧坏。
5.3非必要时，请勿拆开右册盖板，以利安全。
文县妇幼保健站。