Agilent 针对分析鸡肉中利巴韦林和金刚烷胺的整体解决方案
饲料和鸡肉中利巴韦林的测定--超高效液相色谱-串联质谱法
饲料和鸡肉中利巴韦林的测定--超高效液相色谱-串联质谱法刘凯;王丽娜;李建忠【摘要】本研究建立了饲料和鸡肉中利巴韦林的UPLC-MS/MS分析方法。
样品经三氯乙酸-乙腈溶液提取，离心后提取液经PBA固相萃取小柱净化，0.1 mol/L 甲酸水溶液溶解，进行UPLC-MS/MS分析。
结果显示，利巴韦林在10.0～500.0 g/L浓度范围内线性关系良好，r2=0.9991。
以浓缩饲料、配合饲料、预混料和鸡肉等为添加基质，其回收率在90.0%～114.5%，检出限为25.0 g/kg，定量限为50.0 g/kg。
表明本方法灵敏度高、专属性好、操作简单、结果可靠，可满足饲料和鸡肉中利巴韦林的分析检测。
%A method of Ultra Performance Liquid Chromatography-Tandem mass spectrometry(UPLC-MS/MS) for determination of ribavirin in feeds and chicken was developed. The drugs were extracted with acetonitrile/trichloroacetic acid from analyte, then cleaned up with PBA cartridges. The elu-ent was assayed by UPLC-MS/MS. The detection and quantification limits were 25.0 µg/kg and 50.0 µg/kg respectively. The average recoveries were 90.0%~114.5%. The real sample tests showed this meth-od can be used for the sensitive and accurate determination of ribavirin in feeds and chicken.【期刊名称】《现代畜牧兽医》【年(卷),期】2014(000)005【总页数】5页(P15-19)【关键词】利巴韦林;饲料;鸡肉;UPLC-MS/MS【作者】刘凯;王丽娜;李建忠【作者单位】辽宁省兽药饲料畜产品质量安全检测中心，辽宁沈阳 110016;辽宁省兽药饲料畜产品质量安全检测中心，辽宁沈阳 110016;安捷伦科技中国有限公司，北京 100102【正文语种】中文【中图分类】R927.2利巴韦林为广谱抗病毒药，体外具有抑制呼吸道合胞病毒、流感病毒、甲肝病毒、腺病毒等多种病毒生长的作用。
超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡肉中的利巴韦林和金刚烷胺
超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡肉中的利巴韦林和金刚烷胺云环;崔凤云;严华;刘鑫;何悦;张朝晖【摘要】A method for the determination of ribavirin and amantadine in chicken has been developed by ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS).After extracted by 1％ (volume percentage) trichloroacetic acid solution-acetonitrile (1:1,v/v) and purified by a Supelco LC-SCX cartridge,the samples were loaded onto an Acquity UPLC BEH Hillic column (150 mm × 2.1 mm,1.7 μm)and separated with gradient elution.The electrospray was operated in the positive mode and the samples were monitored by the multiple reaction monitoring (MRM) mode.The limits of quantification (LOQs,S/N=10)of ribavirin and amantadine were 4.0 μg/kg.The calibration curves showed good linearity in the range of 10.0-100.0 μg/L,and the correlation coefficients (r2) were not lower than 0.99.When the spiked levels were 4.0,8.0 and 20.0 μg/kg,the recoveries of ribavirin and amantadine in chicken ranged from 78％ to 102.5％,with the relative standard deviations (RSDs) of 2.2％-7.6％.The results indicate that the method is simple,rapid,sensitive and suitable for the qualitative and quantitative analyses of ribavirin and amantadine in chicken samples.%建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定鸡肉中利巴韦林和金刚烷胺的分析方法.样品用1％(体积分数)三氯乙酸溶液-乙腈(1∶1,v/v)溶液提取,经Supelco LC-SCX固相萃取柱净化后用Acquity UPLC BEH HiUic柱(150mm×2.1 mm,1.7 μm)分离,以甲醇和0.1％(体积分数)甲酸作为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正离子(ESI+)模式电离,多反应监测(MRM)模式进行检测.结果表明,利巴韦林和金刚烷胺在10.0～100.0 μg/L范围内线性关系良好(r2≥0.99).方法的定量限(信噪比为10)为4.0 pg/kg,在4.0、8.0、20.0 μg/kg添加水平的回收率为78％～ 102.5％,相对标准偏差(n=6)在2.2％～7.6％之间.该方法快速、灵敏、准确,适合于鸡肉中利巴韦林和金刚烷胺的同时、快速、高灵敏度的分析检测.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2013(031)008【总页数】5页(P724-728)【关键词】超高效液相色谱-串联质谱;利巴韦林;金刚烷胺;鸡肉【作者】云环;崔凤云;严华;刘鑫;何悦;张朝晖【作者单位】北京出入境检验检疫局技术中心,北京100026;北京出入境检验检疫局技术中心,北京100026;北京出入境检验检疫局技术中心,北京100026;北京出入境检验检疫局技术中心,北京100026;北京出入境检验检疫局技术中心,北京100026;北京出入境检验检疫局技术中心,北京100026【正文语种】中文【中图分类】O6582012年12月我国爆发“速生鸡”事件，曝光鸡在饲养过程中被违规喂食利巴韦林、金刚烷胺等抗病毒药物。
鸡肉中利巴韦林的检测(SPE-LCMS)
鸡肉中利巴韦林的检测（SPE-LC/MS ）
使用200mg 3mL HyperCarb 固相萃取柱 (部件号：60106-301)
提取
取2g 鸡肉，加入15mL 水，涡旋混匀，超声提取10min ，6000rmp 离心5min ，取3mL 上清液进行固相萃取。
净化活化
1mL 乙腈，1mL 甲醇上样
3mL 上清液，1mL/min 流速洗脱
500µL20%乙腈-水溶液，2次，合并洗脱液，直接进样分析
结果
1.鸡肉空白添加1ppb 的利巴韦林和同位素的LC/MS 图
离子对参数见下表：
LC/MS 方法色谱柱
Hypercarb 5µm 2.1×100mm 货号
35005-102130流动相
A:水+5mM 乙酸铵B:乙腈梯度方法
时间/min %A %B 0 90 101 90 102 40 605 40 606 90 10
8 90 10流速0.2mL/min 柱温25℃进样量10µL MS 条件
电喷雾电离源（HESI ），正离子模式选择反应监控（SRM ）扫描模式喷雾电压3700V 毛细管温度350
℃
化合物母离子子离子碰撞能量透镜电压利巴韦林利巴韦林同位素内标
245.1
245.1249.9249.9
96.2113.295.9112.9
43144314
80806464
2.添加50ppb 的加样回收率为121.8%，重现性良好。
食品安全应用
65。
AB SCIEX针对畜产品中利巴韦林和金刚烷的快速检测方案
AB SCIEX针对畜产品中利巴韦林和金刚烷的快速检测方案作者：暂无来源：《食品安全导刊》 2013年第3期□ 上海爱博才思分析仪器贸易有限公司供稿近日，国内某肉鸡生产企业爆出非法使用某些饲料添加剂事件，在肉鸡饲养中非法添加多种兽用药物。
众所周知，目前抗生素滥用状况比较突出。
而且食源性抗生素几乎百分之百来自于动物源性食品的摄入，如被曝光的利巴韦林和金刚烷。
目前，相关部门尚未发行针对利巴韦林和金刚烷胺在动物源食品中的检测技术方法和国家标准，所以在媒体报道鸡肉中检测出利巴韦林和金刚烷成分后，AB SCIEX公司亚太应用支持中心上海实验室迅速开发了以畜产品为基质的样品中利巴韦林和金刚烷的检测方法。
公司在最短的时间内开发出快速、准确、灵敏、高效的检测方法，并开设多场技术讲座，为用户提供详细的技术讲解和应用培训。
除此之外，还为用户提供β-内酰胺类，大环内酯类，磺胺类，四环素等多种抗生素的检测方法，为客户提供全套的技术支持。
实验内容1.仪器设备和试剂AB SCIEX公司5500 QTRAP系统配岛津UFLC液相，安捷伦公司Poroshell 120EC-C18，2.1mmx150mm，2.7μm色谱柱。
利巴韦林标准物质（纯品）、金刚烷标准物质（纯品）、乙腈（色谱纯）、三氯乙酸（分析纯）、去离子水（Millipor超纯水，电阻≥18.2MΩ?cm）。
2.色谱条件流动相A：含0.1%甲酸水溶液(含5mM甲酸铵)，流动相B：乙腈/水（v/v，95:5）溶液，流速、梯度洗脱见表1；柱温：40℃；进样量：10μL。
3.质谱条件(1)离子源参数电离模式为ESI+；碰撞气CAD设置6（Medium）；气帘气Curtain Gas设置30Psi；雾化气Gas1/Gas2设置60/60Psi；喷雾电压IS设置5500V；离子源温度TEM设置650℃。
(2)化合物参数化合物质谱参数见表2。
4.标准溶液的配制两种标准物质用乙腈稀释到1000mg/mL的标准储备液，将利巴韦林稀释为到0.2、0.5、1、2、5、10ng/mL，金刚烷稀释到0.05、0.1、0.2、0.5、1、2、5、10ng/mL的混合标准工作浓度。
安捷伦科技针对速成鸡中抗病毒药物利巴韦林和金刚烷胺的整体解决方案
安捷伦科技针对”速成鸡”中抗病毒药物利巴韦林和金刚烷胺的整体解决方案李建中,吴翠玲,陆予菲,于明武,陈伟,张之旭（安捷伦科技(中国)有限公司,北京,100102）近日,央视曝光山东等地部分养殖户在肉鸡饲养过程中大量滥用抗生素,激素和抗病毒类药物,违规喂食金刚烷胺、利巴韦林等抗病毒药品的“速成鸡”流入上海百盛旗下餐饮机构一事，美国快餐业巨头肯德基和麦当劳在中国被卷入“速成鸡”风波，引发沪上人士和全国消费者的广泛关注和担忧！农业部对此事件高度重视，及时责成山东有关部门去调查处理这件事情，也派出了专家组奔赴山东。
现在已经关闭了有关的养鸡企业和加工企业，包括一些养鸡户，正在紧锣密鼓的查处之中。
此次事件中首次被曝光的抗病毒类药物利巴韦林和金刚烷胺目前国家尚无相应的检测技术标准和方法，这为相关政府执法检测部门，生产企业和第三方实验室迅速开展监督检查带来了技术上的困难。
安捷伦科技作为分析仪器业界知名品牌，多年来一直致力于为食品安全领域提供强有力的产品、技术解决方案。
为应对此次食品安全突发事件，安捷伦科技为广大分析工作者提供了分析检测鸡肉中抗病毒类药物利巴韦林和金刚烷胺的完整解决方案。
1 实验部分1.1 仪器与试剂安捷伦科技有限公司6460 QQQ质谱仪；安捷伦科技有限公司1290 Infinity UHPLC。
乙腈，甲醇，异丙醇，乙酸铵，氨水，甲酸，去离子水，三氯乙酸。
Poroshell120 EC-C18 3.0x100 mm, 2.7 µm:P/N 695975-302，ZORBAX SB-Aq RRHT 100*3.0mm，1.8 μm P/N.828975-314。
1.2 样品前处理条件1.2.1鸡肉中利巴韦林的前处理方法准确称取鸡肉样品( 2g± 0. 02) g 于15mL具塞离心管中, 加入已知浓度的标准品，5 mL 的乙腈∶1%三氯乙酸溶液（7:3）, 加盖后涡旋1min, 10000r/min离心10 min, 吸取上清液于15mL离心管中；再向残渣中再加入5 mL的乙腈∶1%三氯乙酸溶液（7:3）, 重复上述操作, 合并两次上清液；涡旋混匀，用氨水调节提取液pH 值为8.5± 0.1,再10000r /min离心10 min，取全部上清液过柱净化。
超高效液相色谱-串联质谱法检测鸡肉中金刚烷胺药物残留研究
超高效液相色谱-串联质谱法检测鸡肉中金刚烷胺药物残留研究作者：曹骞王磊代立勤来源：《现代农业科技》2020年第10期摘要; ; 本文建立了鸡肉中金刚烷胺药物残留检测方法。
样品经过1%乙酸乙腈提取，C18柱净化，以及经超高效液相色谱-串联质谱检测分析，优化了质谱的分离参数。
结果表明，金刚烷胺在1～100 μg/mL范围内线性满足要求，相关系数r为0.998，定量限为1.0 μg/kg。
该方法简单、灵敏度高、稳定性好，能够满足鸡肉中金刚烷胺药物残留检测要求，为鸡肉中金刚烷胺药物检测提供一定技术参考。
关键词; ; 金刚烷胺;鸡肉;超高效液相色谱-串联质谱法;药物残留金刚烷胺可用于亚洲甲-Ⅱ型流感的预防和治疗，畜牧养殖业中金刚烷胺主要用于鸡禽流感的预防和早期治疗，但其具有致精神异常的副作用。
流感耐药性日益增强，长时间超量食用这些药物则会导致动物中毒、免疫抑制以及药物残留，重则可能会使病毒发生变异，为预防和控制带来很大难题，对动物源性食品的消费者存在较大安全隐患[1-3]。
2005年，我国农业部也曾经发出《关于清查金刚院胺等抗病毒药物的紧急通知》，禁止金刚烷胺等抗病毒兽药的生产和使用。
由于金刚烷胺在禽类养殖中仍有非法使用，因而对于禽类食品中金刚烷胺残留含量的检测方法研究具有重要的现实意义。
本文旨在建立高效液相色谱-串联质谱法，同时探讨鸡肉中金刚烷胺的残留检测方法，为开展鸡肉中金刚烷胺药物的残留检测提供一定的参考。
1; ; 材料与方法1.1; ; 仪器与试剂试验仪器：Waters ACQUITY UPLC H-Class Xevo TQD 超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪，美国Waters公司;高速冷冻离心机，湖南湘仪公司;涡旋混合器，德国IKA公司;氮吹仪，上海安谱公司;百分之一电子天平，德国赛多利斯公司。
试剂：乙腈、甲醇、正己烷、甲酸（HPLC级，上海安谱公司）;试验用水为屈臣氏蒸馏水;C18固相萃取柱（60 mg/3 mL）购自上海安谱公司;金刚烷胺、金刚烷胺-D15购自德国Dr公司。
金刚烷胺和利巴韦林联合使用体外抗AIV_H9N2效果观察
金刚烷胺和利巴韦林联合使用体外抗AIV-H9N2效果观察胡永峰,赵立红,乔 健,金继昌,田 勇,侯海燕,赵慧颖(中国农业大学动物医学院,北京海淀100094)中图分类号:S859.79 文献标识码:B 文章编号:0529-6005(2007)05-0010-02 禽流感(Av ian influenza,AI)是由A型流感病毒引起的一种禽类传染性疾病。
AIVH9N2亚型主要引起禽类上呼吸道感染、产蛋率下降,个别毒株可引起较高的死亡率,并造成宿主免疫抑制和继发感染。
最近研究证实,禽流感病毒H9N2能直接感染人,并且可能成为下一次流感大流行的潜在病毒株[1,2]。
目前,控制流感的主要措施包括接种疫苗和使用抗病毒药物。
由于禽流感病毒亚型多,易变异,限制了疫苗的使用。
因此,寻求有效的抗AIV药物和组合尤显重要。
本研究对体外联合使用金刚烷胺和利巴韦林的抗AIV-H9N2效果进行了观察,旨在为临床治疗AIV-H9N2感染的合理用药提供试验基础。
1 材料与方法1.1 材料 病毒:A/chicken/Hebei/20/2000 (H9N2),本室保存。
效价5.25log10PFU/0.2ml。
盐酸金刚烷胺和利巴韦林:购于Alfa Aesar.A Jo hnso n M atthey Co mpany,生理盐水分别配制成20 mg/m l和100mg/ml,过滤除菌,4℃保存。
M DCK细胞:中国科学院微生物所提供。
其他试剂略。
1.2 金刚烷胺和利巴韦林的细胞毒性试验[3] 维收稿日期:2007-01-11作者简介:胡永峰(1980-),男,硕士生,从事病毒学研究通讯作者:赵立红,E-mail:zhlhong@ 持液分别将金刚烷胺和利巴韦林梯度稀释(2-2～2-10),加入96孔板单层细胞,每个药物稀释度4孔,对照4孔。
37℃,5%CO2培养箱培养72h,每孔加入25 l M T T溶液(5mg/ml),温育2h,倾去孔内液体,每孔加入50 l DMSO,振荡,酶标仪在570nm 波长处测定OD值。
AB SCIEX针对畜产品中利巴韦林和金刚烷的快速检测方案
AB SCIEX针对畜产品中利巴韦林和金刚烷的快速检测方案上海爱博才思分析仪器贸易有限公司
【期刊名称】《食品安全导刊》
【年(卷),期】2013(000)003
【总页数】2页(P26-27)
【作者】上海爱博才思分析仪器贸易有限公司
【作者单位】
【正文语种】中文
【相关文献】
1.AB SCIEX针对白酒中塑化剂的最新检测解决方案 [J], 上海爱博才思分析仪器贸易有限公司
2.AB SCIEX快速检测乳制品中双氰胺的解决方案 [J], 上海爱博才思分析仪器贸易有限公司
3.AB SCIEX公司检测葡萄酒中多菌灵和甲霜灵的整体解决方案 [J], AB SCIEX亚太应用支持中心
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5.美国AB SCIEX公司关于动物源食品中的兽药残留盐酸克伦特罗(瘦肉精)的解决方案 [J], AB SCIEX公司
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内标法测定鸡肉中金刚烷胺含量方法的优化--高效液相色谱-串联质谱法
内标法测定鸡肉中金刚烷胺含量方法的优化--高效液相色谱-串联质谱法
金刚烷胺是一种重要的抗菌剂，由于其疗效稳定、抗菌作用全面，因此被广泛
应用于兽医药领域。
为了精确测定其在鸡肉中的含量，研究者在不断优化方法的基础上，提出了利用高效液相色谱-串联质谱法测定鸡肉中金刚烷胺含量的方法。
首先，采用Classic L-column柱色谱，在80%甲苯-0.5%甲醛溶剂组合中以
0.5mL/min流速进行分离。
通过调节柱温度、流速和流量，可以提高样品的灵敏度
和稳定性，避免非特异性偏离波现象的出现。
分离完成后，采用MS/MS技术，利用温度端控即可进行鉴定，该技术可以克服分子相互间的结合和避免峰的失效，实现精准风准的检测目标。
此外，还研究了各种条件，包括柱温、ELUTION溶剂、流速和流量，以及使用MS/MS技术进行定性和定量。
结果表明，在测定条件下，该方法可以有效识别和定
量金刚烷胺，且质谱峰强度稳定，重复性和精密度良好。
使用高效液相色谱-串联质谱法测定鸡肉中金刚烷胺含量的方法具有以下优点：首先，可以实现高灵敏性和精确性的检测；其次，能够同时实现定量和定性；最后，条件的优化能够有效地解决准精安等检测困难。
总而言之，使用高效液相色谱-串联质谱法测定鸡肉中金刚烷胺含量的方法实
现了快速精准的金刚烷胺测定，为优质的兽医制造提供了可靠的测量依据。
超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡肉中的利巴韦林和金刚烷胺
ｍｉ ｎ， ８ ０ ％Ａ ～ ２ ０ ％ Ａ； ２ ． １ ～３ ． ０ ａｉ ｒ ｎ， ２ ０ ％ Ａ。流 速
０ ． ３ ｍＬ ／ ｍｉ ｎ ； 柱温 ３ ５ ｏ Ｃ； 进 样体 积 ５ ． ０ Ｌ 。
压 和碰撞 能量 等参 数见 表 １ 。
表 １ 利 巴 韦 林 和 金 刚 烷 胺 的 多 反 应 监 测 质谱 参 数
Ｔａ ｂｌ ｅ １ Ｍ Ｓ ｐａ ｒ ａｍｅｔ ｅ ｒ ｓ ｉ ｎ ｍ ｕｌ ｔ ｉ ｐｌ ｅ ｒ ｅ ａ ｃ ｔ ｉ ｏｎ ｍｏ ｎｉ ｔ ｏｒ ｉ ｎｇ
多通 道 固 相 萃 取 仪 （ 法国 Ｇ ｉ ｌ ｓ ｏ ｎ公 司 ） ；Ｓ ｕ ｐ ｅ ｌ ｃ ｏ
Ｌ Ｃ — Ｓ Ｃ Ｘ 固相萃 取 小柱 （ ３ ｍＬ ， 美国Ｓ ｕ ｐ ｅ ｌ ｃ ｏ公 司 ） 。 利 巴韦林 标 准 品（ ２ ５ ｍｇ ， 中 国药 品 生 物制 品检 定所 ） ； 金 刚烷胺标 准品 （ 纯度 ９ ９ ％， 德国 Ｄ ｒ ．Ｅ ｈ — ｒ ｅ ｎ ｓ ｔ ｏ ｒ ｆ ｅ ｒ 公司） ； 三 氯 乙 酸、 氨水 （ 色谱 级 ， 美国
（ ＭＲＭ ）ｍｏ ｄ ｅ ｆ ｏ ｒ ｒ ｉ ｂ ａ ｖ ｉ ｒ ｉ ｎ ａ ｎ ｄ ａ ｍａ ｎ ｔ ａ ｄ ｉ ｎ ｅ
Ｂ Ｅ Ｈ Ｈ ｉ ｌ ｌ ｉ ｃ色谱 柱进 行分 离 ， 液 相 色 谱一 质 谱 联 用仪
检测 。该 方法 和现有 文献 报道 方法 相 比更 为简便 快 速， 能 同时测 定 两个组 分 ， 极大 地 节省 了检 测 时间和
Ｔ Ｅ ＤＩ Ａ公 司 ） ； 乙腈 、 甲醇 （ 色谱 纯 ， 美国 Ｆ ｉ ｓ ｈ ｅ ｒ公 司） ； 实验 用水 均 由 Ｍｉ ｌ ｌ ｉ — Ｑ超 纯水 系 统制 备 。
基于双柱固相萃取-色质联用技术同时检测鸡肉中8种抗病毒药物残留
基于双柱固相萃取-色质联用技术同时检测鸡肉中8种抗病毒药物残留张鑫;吴剑平;严凤;陆淳;顾欣【摘要】建立了双柱固相萃取-液相色谱-串联质谱法,可实现对鸡肉中金刚烷胺、金刚乙胺、美金刚胺、吗啉胍、利巴韦林、阿昔洛韦、更昔洛韦、奥司他韦等8种抗病毒药物的同时分析.采用三氯乙酸水溶液-乙腈对鸡肉中8种抗病毒药物残留同时提取,依次通过石墨化碳柱和强阳离子交换柱以实现对目标药物的富集、净化,选用石墨化碳色谱柱进行分离,超高效液相色谱-串联质谱检测.本文通过研究不同提取溶液、固相萃取柱及色谱柱对检测结果的影响,最终建立优化的检测方法,采用外标法计算,检测限1 μg/kg,定量限2μg/kg,添加浓度在2～200 μg/kg范围内的回收率大于80％,适用于鸡肉中8种抗病毒药物的同时分析.【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2015(049)009【总页数】6页(P45-50)【关键词】石墨化碳;抗病毒药物;残留检测【作者】张鑫;吴剑平;严凤;陆淳;顾欣【作者单位】上海市动物疫病预防控制中心,上海201103;上海市动物疫病预防控制中心,上海201103;上海市动物疫病预防控制中心,上海201103;上海市动物疫病预防控制中心,上海201103;上海市动物疫病预防控制中心,上海201103【正文语种】中文【中图分类】S859.84在我国金刚烷类、核苷类、杂环双胍类以及神经氨酸酶抑制剂的抗病毒药物都曾被报道用于兽医临床治疗病毒感染[1]，近年来，为预防禽流感，抗病毒药物在畜禽养殖环节有滥用现象，2012年的“速成鸡”事件中检出鸡肉中残留有金刚烷胺和利巴韦林，给我国家禽业带来了严重的负面影响。
抗病毒药物在畜禽养殖业的非法使用屡禁不止，同时国内外对动物组织中的抗病毒药物多残留的检测方法研究较少，给此类药物的监管带来了不便。
抗病毒药物的作用机理和理化性质各异，传统前处理方法具有一定选择性，且动物组织中药物残留量低，经过复杂的提取净化去脂步骤后，回收率不高，目前的文献报道[2-4]检测鸡肉中的抗病毒药物残留的方法多局限与某一类抗病毒药物，或采用通用的QuEChERS法进行前处理，杂质去除不够充分，本文建立的双柱固相萃取法是利用固相萃取柱对药物的不同选择性，将药物分别保留在石墨化碳柱和强阳离子交换柱上，并通过洗脱液置换，将8种药物浓缩在同一溶剂中，进而实现了在液质联用仪上的同时分析，与目前有文献[4-6]报道的方法相比，可同时检测的药物种类更多，操作简便，检测限更低，实用性和创新性较强。
安捷伦科技针对速成鸡中抗病毒药物利巴韦林和金刚烷胺的整体解决方案
安捷伦科技针对”速成鸡”中抗病毒药物利巴韦林和金刚烷胺的整体解决方案李建中,吴翠玲,陆予菲,于明武,陈伟,张之旭（安捷伦科技(中国)有限公司,北京,100102）近日,央视曝光山东等地部分养殖户在肉鸡饲养过程中大量滥用抗生素,激素和抗病毒类药物,违规喂食金刚烷胺、利巴韦林等抗病毒药品的“速成鸡”流入上海百盛旗下餐饮机构一事，美国快餐业巨头肯德基和麦当劳在中国被卷入“速成鸡”风波，引发沪上人士和全国消费者的广泛关注和担忧！农业部对此事件高度重视，及时责成山东有关部门去调查处理这件事情，也派出了专家组奔赴山东。
现在已经关闭了有关的养鸡企业和加工企业，包括一些养鸡户，正在紧锣密鼓的查处之中。
此次事件中首次被曝光的抗病毒类药物利巴韦林和金刚烷胺目前国家尚无相应的检测技术标准和方法，这为相关政府执法检测部门，生产企业和第三方实验室迅速开展监督检查带来了技术上的困难。
安捷伦科技作为分析仪器业界知名品牌，多年来一直致力于为食品安全领域提供强有力的产品、技术解决方案。
为应对此次食品安全突发事件，安捷伦科技为广大分析工作者提供了分析检测鸡肉中抗病毒类药物利巴韦林和金刚烷胺的完整解决方案。
1 实验部分1.1 仪器与试剂安捷伦科技有限公司6460 QQQ质谱仪；安捷伦科技有限公司1290 Infinity UHPLC。
乙腈，甲醇，异丙醇，乙酸铵，氨水，甲酸，去离子水，三氯乙酸。
Poroshell120 EC-C18 3.0x100 mm, 2.7 µm:P/N 695975-302，ZORBAX SB-Aq RRHT 100*3.0mm，1.8 μm P/N.828975-314。
1.2 样品前处理条件1.2.1鸡肉中利巴韦林的前处理方法准确称取鸡肉样品( 2g± 0. 02) g 于15mL具塞离心管中, 加入已知浓度的标准品，5 mL 的乙腈∶1%三氯乙酸溶液（7:3）, 加盖后涡旋1min, 10000r/min离心10 min, 吸取上清液于15mL离心管中；再向残渣中再加入5 mL的乙腈∶1%三氯乙酸溶液（7:3）, 重复上述操作, 合并两次上清液；涡旋混匀，用氨水调节提取液pH 值为8.5± 0.1,再10000r /min离心10 min，取全部上清液过柱净化。
金刚烷胺中毒鸡体内总抗氧化能力的变化
金刚烷胺中毒鸡体内总抗氧化能力的变化王福军;梁陆宇;王琦;徐世文【期刊名称】《饲料博览》【年(卷),期】2009(000)007【摘要】将60只健康40日龄的海兰蛋鸡随机分为3组.每组20只,饲喂相同的基础日粮,其中对照组正常饮水;低剂量组在饮水中添加金刚烷胺1 g·L-1;高剂量组在饮水中添加金刚烷胺2 g·L-1.分笼常规饲养,连续给药3 d,饲养期内观察鸡的临床表现.43日龄时,对动物进行剖检并观察变化,检测鸡总抗氧化能力(T-AOC)的变化情况.结果显示,随着金刚烷胺添加量的增加,鸡脾脏、胸腺、法氏囊、肝脏、脑、肾脏和血清中的T-AOC呈下降趋势;低剂量组和高剂量组与对照组相比均差异极显著(P<0.01);低剂量组与高剂量组相比差异极显著(P<0.01).试验结果表明,金刚烷胺中毒可明显影响机体抗氧化系统的功能,使机体的抗氧化系统功能降低.【总页数】3页(P38-40)【作者】王福军;梁陆宇;王琦;徐世文【作者单位】东北农业大学动物医学学院,哈尔滨,150030;黑龙江省民族职业学院,哈尔滨,150081;东北农业大学动物医学学院,哈尔滨,150030;东北农业大学动物医学学院,哈尔滨,150030;东北农业大学动物医学学院,哈尔滨,150030【正文语种】中文【中图分类】R965.3;R595.4;S831【相关文献】1.组合式高通量血液透析对慢性肾衰竭患者体内谷胱甘肽过氧化物酶、总抗氧化能力的影响 [J], 邓晓风;吴欣;万莉;代青;张洪晨;王莉;唐玲2.百草枯中毒大鼠血浆总抗氧化能力的变化及山莨菪碱干预作用的研究 [J], 林坚;林兴盛;戴木森3.氟中毒时鸡体内总抗氧化能力的变化 [J], 刘国艳;柴春彦;康世良4.金刚烷胺中毒对鸡免疫器官及抗氧化功能的影响 [J], 唐娇;高雅;徐世文5.慢性氟中毒大鼠睾丸组织总抗氧化能力与一氧化氮合酶和一氧化氮水平的变化[J], 陈树君;孙玉敏;孟羽俊;张丽萍;周红军;谢立群因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸡肉中金刚烷胺超高效液相色谱—电喷雾串联质谱检测方法的建立及阳性样品的制备
鸡肉中金刚烷胺超高效液相色谱—电喷雾串联质谱检测方法的建立及阳性样品的制备常平平;许春南;张立新;郝小妹;高兴;陈超【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2015(42)9【摘要】本试验建立了一种超高效液相色谱—电喷雾串联质谱测定鸡肉中金刚烷胺的分析方法.以甲醇1％三氯乙酸作提取剂,采用超声波辅助溶剂萃取法萃取鸡肉中金刚烷胺,萃取液用MCX固相萃取柱进行净化浓缩.以BEH C18色谱柱为分离柱,在正离子模式下以电喷雾电离串联质谱仪进行测定.对质谱和色谱条件、提取剂的种类、超声提取时间、固相萃取柱及洗脱液的种类进行了优化,在0.1～20.0ng/mL范围内线性关系良好(r=0.9998).样品在5.0、10.0和20.0μg/kg添加水平的回收率为89.7％～101.4％,相对标准偏差(RSD)小于7.0％;方法的检测限为0.07 μg/kg,定量限为0.23 μg/kg.本方法灵敏度高、准确度高,能满足公司及相应鸡肉行业的客户进行鸡肉中金刚烷胺残留量的快速、高灵敏检测分析.本试验还根据金刚烷胺在动物体内的代谢动力学成功制备了浓度为11.16和7.18mg/kg的金刚烷胺阳性鸡肉样品,为研发金刚烷胺ELISA试剂盒提供了相应的阳性样品.【总页数】8页(P2278-2285)【作者】常平平;许春南;张立新;郝小妹;高兴;陈超【作者单位】北京勤邦生物技术有限公司,北京102206;北京勤邦生物技术有限公司,北京102206;北京市优质农产品产销服务站,北京100101;北京勤邦生物技术有限公司,北京102206;北京勤邦生物技术有限公司,北京102206;北京勤邦生物技术有限公司,北京102206【正文语种】中文【中图分类】S852.4【相关文献】1.超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法测定猪尿中金刚烷胺与金刚乙胺的残留量 [J], 胡丽芳;张金艳;罗林广2.超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法同时分析鸡肉中7种氟喹诺酮类药物残留[J], 郭伟;刘永;刘宁3.一种鸡肉中四环素类兽药残留高效液相色谱检测方法的建立 [J], 王余磊; 舒相华; 张雪; 高云梅; 杨崑; 张雅靖; 吕涛; 宋春莲4.鸡肉中金刚烷胺间接竞争ELISA检测方法的建立 [J], 谭庶;杨金易;许吉华;沈玉栋;曾道平;苏晓娜;钟翠丽;许小炫;孙远明5.两种样品处理方法对LC-MS/MS测定鸡肉中金刚烷胺基质效应比较 [J], 周剑;王敏;杨梦瑞;张立华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱-质谱联用法同时测定鸡肉中2种金刚烷胺类药物和12种喹诺酮类药物残留
高效液相色谱-质谱联用法同时测定鸡肉中2种金刚烷胺类药
物和12种喹诺酮类药物残留
任宏彬;张鑫鑫;贾晓婷;杨晓伟
【期刊名称】《中国家禽》
【年(卷),期】2022(44)1
【摘要】为建立一种同时测定鸡肉组织中2种金刚烷胺类药物和12种喹诺酮类药物残留的高效液相色谱-质谱联用法,试验将鸡肉组织经1%乙酸的乙腈提取,乙腈饱和的正己烷脱脂,以0.1%甲酸水和甲醇为流动相进行梯度洗脱;样品质谱采用电喷雾电离,正离子扫描,多反应监测模式检测,同位素内标法定量。
结果显示:14种药物在1~100 ng/mL线性范围内,线性关系良好,2种金刚烷胺类药物检出限为
1μg/kg,定量限为2μg/kg,12种喹诺酮类药物检出限为5μg/kg,定量限为
10μg/kg;两类药物的平均回收率在76.3%~112.6%之间,批内、批间变异系数
≤12.5%。
研究表明:建立的方法前处理简便,结果稳定、可靠,适用于同时检测鸡肉中金刚烷胺类药物和喹诺酮类药物残留。
【总页数】6页(P77-82)
【作者】任宏彬;张鑫鑫;贾晓婷;杨晓伟
【作者单位】太原海关
【正文语种】中文
【中图分类】O657.6
【相关文献】
1.液相色谱串联质谱同时检测鸡肉中金刚烷胺、氟喹诺酮类和磺胺类药物的残留
2.采用不同提取方法、利用超高效液相色谱-串联质谱检测鸡肉中喹诺酮类药物残留的影响
3.高效液相色谱-串联质谱测定鸡肉中氟喹诺酮类药物残留的研究
4.超高效液相色谱-串联质谱检测鸡肉中氟喹诺酮类药物残留
5.高效液相色谱-质谱联用法测定牛奶中9种氟喹诺酮类药物残留的研究
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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标准品 空白样品提取液稀释标准品
经过PBA净化和色谱分离后的样品基质效应很小
December 25, 2012
金刚烷胺在净化后的鸡肉样品中的基质效应
空白样品提取液稀释标准品
标准品
经过PCX净化和色谱分离后的样品基质效应很小
December 25, 2012
利巴韦林标准品,添加样品和空白样品的TIC谱图
线性范围 (Linear):0.1ppb～10ppb 稳定性(Stability)
金刚烷胺
Conc. 0.1ppb Area RSD 3.64
0.5ppb 2.50
1ppb 4.95
2ppb 0.64
5ppb 2.63
10ppb 2.60
December 25, 2012
利巴韦林在净化后的鸡肉样品中的基质效应
December 25, 2012
利巴韦林危害性
December 25, 2012
金刚烷胺 危害性
December 25, 2012
如何检测鉴定鸡肉中的抗病毒药物?
目前缺乏针对利巴韦林和金刚烷胺在动物源食品中的检测技术 方法和国家标准;
针对鸡肉样品中残留的抗病毒药物含量低,基质干扰大,急需有
物利巴韦林和金刚烷胺;
采用PBA和PCX分别可以有效的对鸡肉样品中的利巴韦林和金刚烷胺实现净化处理 ,净化后的样品基质效应小,添加回收率可达到70%以上（无同位素内标校正）; 采用6460QQQ分析结果表明在0.1ppb浓度下,利巴韦林的信噪比(S/N)=89;金刚烷 胺的信噪比(S/N)=63; 在0.1ppb～10ppb浓度范围内,线性关系和稳定性优异,相关系数R>0.999,峰面积 RSD<5%.
December 25, 2012
利巴韦林SPE萃取净化过程
Bond Elut PBA 500mg 6mL（P/N 12102105）
活化 1.5mL70:30水：乙腈（含有1%甲酸） 2.8mLpH 8. 5 的乙酸铵缓冲液，
上样
淋洗 10mL含有10%乙腈的pH 8. 5 的乙酸铵缓冲液
洗脱 抽干小柱，用5mL0.1Mol/L的甲酸洗脱，直接测定
Mobile Phase:
0.4 mL/min
A = Water(0.1%Formic acid+5mM Ammonium acetate) B = Acetonitrile Time 0.00 2.00 4.00 5.00 8.00 8.50 10.00 %B 0 0 15 15 30 98 98
平衡
保留
洗脱
苯硼酸萃取三步过程机理
Bond Elut PBA 能分析的化合物
苯硼酸可以保留包含二醇和其他基团的化合物例如： 1、邻-二醇，1,3-二醇， 1,3,5-三醇 对邻二醇的保留，要求化合物中的两个羟基共面或者是顺式结构。分子内部 的氢键键合使得1,3-二醇共面，因此该化合物可被保留。 2、糖类化合物 糖类化合物中的环表现出假回转，可以通过其他环而被保留。理论上将任何2 个或3个羟基隔开后可以充满三羟基化硼的四面体位点均有可能被保留。
标准品 添加样品
空白样品
平均回收率(Recovery)为82.8%
December 25, 2012
金刚烷胺标准品,添加样品和空白样品的TIC谱图
标准品 添加样品
空白样品
平均回收率(Recovery)为70.0%
December 25, 2012
总结 Summary
采用Agilent 1290 + 6460 QQQ在正离子模式下可以同时分析测定鸡肉中抗病毒药
效的前处理方法和高灵敏度的检测技术;
安捷伦科技能为客户提供从前处理到仪器分析完整的解决方案
WW Seminar Series 2006 Page 6
样品前处理解决方案
吴翠玲 CSD应用工程师 安捷伦科技（中国）有限公司
利巴韦林化学结构
易溶于水 存在顺式羟基 所以选择Bond Elut PBA作为萃取净化柱
乙酸铵(Ammonium acetate)
Poroshell120 EC-C18 3.0x100 mm, 2.7 µm:色谱柱部件号695975-302
December 25, 2012
LC Condition: Agilent 1290 Infinity
Injection volume: 2 mL Autosampler temp: 4 ºC
Agilent 针对分析鸡肉中抗病毒药物 利巴韦林(Ribavirin)和金刚烷胺(Amantadine) 的解决方案
2012.12
事件背景
近日,央视曝光违规喂食金刚烷胺、利巴韦林等抗病毒药品的“速生鸡”流入 上海百盛旗下餐饮机构一事，引发沪上人士广泛关注!!!
December 25, 2012
结构性质
Column Temp:
Needle Wash: Column:
30 ºC
Flushport (50%acetonitrile+20%isopropyl alcohol+30%water), 6 s Agilent Poroshell120 EC-C18 (3.0x100 mm, 2.7 µm)
Pump Flow:
Bond Elut™ PBA 独特的硅胶基质的SPE 吸附剂，苯硼酸通过可逆 共价键来保留目标分析物 。这种强的共价保留机理可以保证高的特异性 和更干净的萃取效果。硼酸盐基团对包含顺式-二醇官能团的化合物具有 很强的亲和性，例如儿茶酚、核酸、一些蛋白、糖类和聚乙二醇化合物、 氨基醇、α-羟基胺、酮类化合物等。
洗脱液氮气吹扫浓缩至干，重新用30：70乙腈：水涡旋溶解后过膜 后，直接LC-MS/MS检测
Agilent 1290 Infinity+6460QQQ 仪器解决方案
李建中 LCMS应用工程师 安捷伦科技（中国）有限公司
测试试剂和材料
乙腈(Acetonitrile): Merck Lichrosolv® Hypergrade for LC-MS, Index No:608-001-00-3,1L/瓶; 去离子水(Water): Millpore, Milli-Q,18.2MΩ,TOC≤5ppb; 甲酸(Formic acid): DikmaPure HPLC Grade, 50mL/瓶;
Gradient:
Stop time: 10min Post time: 3min
December 25, 2012
MS Condition: Agilent 6460 QQQ
QQQ MS conditions Ion Mode: ESI/JetStream ESI, Positive
ESI conditions Drying Gas Temperature: 300 ºC Drying Gas Flow: 8 L/min Nebulizer Pressure: 40 psi Sheath Gas Temperature: 300 ºC Sheath Gas Flow: 11 L/min Capillary voltage (+): 3000 V Nozzle voltage (+): 0V MRM Condition: Timesegment1: 0min ΔEMV=400V
Timesegment2: 4min ΔEMV=200V
December 25, 2012
1ppb混标的MRM谱图
利巴韦林
金刚烷胺
December 25, 2012
灵敏度(Sensitivity)
0.1ppb利巴韦林, 2mL 信噪比(S/N,RMSx3)=89
0.1ppb金刚烷胺, 2mL 信噪比(S/N,RMSx3)=63
涡旋均匀后重新离心，取出一般体积滤液（5mL），过Plexa PCX固相萃取小柱……
鸡肉中金刚烷胺固相萃取过程
Bond Elut PCX 60mg 3mL（P/N 12102105）
活化 1.3mL甲醇； 2.3mL水， 上样 控制流速1mL/min以下 淋洗 3mL2%盐酸；3mL甲醇 ，抽干 洗脱 5mL5%氨水-甲醇-异丙醇（5+70+25）
Bond Elut PBA萃取机理
苯硼酸首先用碱溶液平衡，使苯硼酸根反应生成RB(OH)3，然后将包含二醇基的化 合物上样，与苯硼酸结合，释放水分子。一旦目标分析物被保留，可以在保留碱性 环境的前提下选择合适溶剂洗脱污染物，最终通过酸化苯硼酸复合物使得目标化合 物被洗脱，释放出带有二醇基的目标化合物，同时使苯硼酸转化为(RB(OH)2。
December 25, 2012
Thank you for your attention!
/zh-CN/ 服务热线：800 820 3278 Ext 4 消耗品 cuiling.wu@ jian-zhong_li@
December 25, 2012
线性范围 (Linear):0.1ppb～10ppb 稳定性(Stability)
利巴韦林
Conc. 0.1ppb Area RSD 2.39
0.5ppb 3.11
1ppb 0.87
2ppb ppb 3.00
December 25, 2012
洗脱液涡旋均匀后过膜，直接LC-MS/MS检测
金刚烷胺化学结构
利用金刚烷胺氨基特征官能团选择Bond Elut Plexa PCX作为固相萃取吸附剂 Bond Elut Plexa PCX 为聚合物基质的混合型强阳离子 交换固相萃取产品
鸡肉中的金刚烷胺分析
2g鸡肉样品（精确至0.01g）至15mL离心管中，加入加入已知 浓度的标准品、 5mL甲醇-1%三氯乙酸（50+50，V+V），涡 旋30s，超声30min，5000r/min离心10min，上清液全部转移 至15mL离心管中; 再加入 5mL甲醇-1%三氯乙酸（50+50，V+V）重复提取一次 ，合并全部滤液;