实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁的条件
邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁邻二氮菲是一种常用的有机染料，在化学分析中常用于铁离子的测定。
邻二氮菲与铁离子生成的络合物具有明显的吸收光谱峰，可以通过分光光度法进行定量分析。
本文将介绍邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁的方法。
实验条件1. 试剂和仪器（1）邻二氮菲：纯度应在98%以上。
（3）盐酸：纯度应在37%以上，用于控制溶液的酸度。
（4）标准铁溶液：浓度为1000μg/mL。
（5）分光光度计：用于测定吸收光谱曲线。
2. 操作步骤（1）制备邻二氮菲工作溶液：将1g邻二氮菲溶于100mL 乙醇中，稀释至1000μg/mL。
（2）制备硝酸铁标准溶液：取适量的硝酸铁溶于水中，调节pH至5.5-6.5，使用标准铁溶液调节溶液浓度。
（3）取一定量的样品，加入盐酸和邻二氮菲工作溶液，使其浓度为3×10^-4 M，pH 为5.5-6.5。
（5）根据吸收光谱曲线计算出样品中铁离子的浓度。
测定微量铁针对微量铁的测定，可以采用前处理方法和放大测量方法，使得样品浓度达到设备测量范围的要求。
1. 前处理方法对于低浓度的样品，需要进行前处理以提高铁离子浓度，通常采用离子交换树脂柱、萃取和浓缩等方法。
离子交换树脂柱：树脂柱具有强的选择性，可以去除多余的离子，使得测量结果更加准确。
荧光光谱法测定铁离子萃取：使用萃取剂提取样品中的铁离子，可以增加铁离子的浓度，使得测量结果更加准确。
2. 放大测量方法放大测量方法可以克服微量铁浓度过低的问题，通常使用衍射法、磁光法和荧光法等方法。
荧光法：荧光法利用荧光染料与铁离子生成荧光复合物，测量荧光信号强度来定量分析铁离子的浓度。
总之，邻二氮菲分光光度法是一种方便可靠的测定铁离子的方法，而在测定微量铁时，需要采用前处理方法和放大测量方法。
这些方法不仅可以提高铁离子浓度，还可以克服微量铁浓度过低而带来的精度低下的问题，提高测量的准确性。
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁的条件
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁的条件、实验目的1、掌握分光光度计的原理、构造和使用方法。
2、学习分光光度计分析中如何确定最佳实验条件。
、实验原理在可见光区分光光度法测量中，通常是将被测物质与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。
显色反应的程度受显色剂用量、显色时间，显色液酸度等条件的影响，通过实验，确定合适的显色条件。
三、仪器及试剂分光光度计；1cm 吸收池；10mL移液管；25mL 容量瓶,100ml 容量瓶1．铁标准溶液100μg·mL -1（即0.01 mg·mL-1）铁标准溶液：准确称取0.3511g（NH 4）2 Fe（SO4）2·6H 2O 于烧杯中，用2 mol ·L-l盐酸15 mL 溶解，移入500 mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。
用前，准确稀释10 倍成为含铁10 ug·mL -1标准溶液。
2. 1g.L -1邻二氮菲：1.0 g 邻二氮菲于小烧杯中，加入5-10ml 95%乙醇溶液溶解，再用水稀释到1000 mL 。
3. 10％盐酸羟胺水溶液：10％水溶液（现用现配，避光保存）4. 醋酸钠溶液1mol/L5. 0.8 mol/L 氢氧化钠溶液四、实验步骤1、吸收曲线的制作和测量波长的选择用移液管吸取0.0ml、2.0mL 10 ug ·mL -1标准溶液，分别注入二个25 mL 容量瓶中，加入1.0mL10% 的盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min ；再加2 mL 邻二氮菲溶液，2.5mL 醋酸钠溶液溶液，用水稀释至刻度，摇匀。
放置5min 后，用1cm 比色皿，以试剂空白为参比，在440~560nm 之间，每隔10nm 测一次吸光度，其中在500-520 nm 之间，每隔5nm 测一次吸光度。
然后以波长为横坐标，吸光度A 为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。
2、显色剂用量影响在7 只25mL容量瓶中，各加2.0 mL 10 ug·mL -1铁标准溶液和1.0 mL 盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min。
邻二氮菲分光光度法测定铁 一、实验原理
邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验原理铁是人体内必需的微量元素之一，它参与多种生理过程，包括氧的运输、细胞呼吸等。
然而，铁中毒和缺铁症是世界上最常见的两种微量元素相关疾病之一。
因此，准确地测定铁的含量对于诊断疾病、评估营养状况和监测食品安全至关重要。
邻二氮菲是一种有机染料，可以与铁形成复合物。
在一定的温度和pH条件下，邻二氮菲与铁形成深紫色络合物，其最大吸收峰位于520 nm和560 nm，吸收强度与铁的浓度成正比。
因此，邻二氮菲可以用于分光光度法定量测定铁的含量。
在邻二氮菲分光光度法中，首先需要将样品中的铁离子与邻二氮菲反应形成络合物。
然后，通过分光光度计测量此络合物在特定波长下的吸收强度，并利用标准曲线将其与铁的浓度相关联。
二、实验步骤1.准备样品：将约0.5 g的待测样品粉碎并称取10 mL的溶液，加入3 mL的浓硫酸和3 mL的双氧水，将其在热板上加热至溶解为止。
注意，加入双氧水时应小心，因为双氧水和硫酸接触时会产生剧烈反应。
2.制备邻二氮菲-铁络合物：将约0.1 g的邻二氮菲溶解于100 mL的95%乙醇中，制备10 mM的邻二氮菲溶液。
然后分别取1 mL的邻二氮菲溶液和1 mL的样品溶液，加入9 mL的软化水，混匀后放置15分钟左右，直到出现深紫色。
3.测量吸收光谱：将配制好的邻二氮菲-铁络合物的吸收光谱在520 nm和560 nm处用分光光度计进行测量，记录吸光度值。
4.构建标准曲线：按照相同步骤制备不同浓度的铁标准溶液（可以从200 ppm逐渐稀释至1 ppm）。
将每个标准溶液管的吸光度读数记录，并将它们与浓度相关联，构建标准曲线。
5.测量样品中的铁含量：按照相同步骤制备样品的邻二氮菲-铁络合物，并在520 nm处测量吸光度。
然后利用标准曲线将吸光度值转化为铁的浓度。
三、注意事项1.操作要小心，防止吸入、飞溅和皮肤接触有害化学物质。
2.铁标准溶液应避免暴露在空气中，以免氧化。
3.在分析之前，应将铁标准溶液和样品基底浓度相同，以保证准确性和可重复性。
邻二氮菲分光光度法测定铁的适宜条件
邻二氮菲分光光度法测定铁的适宜条件包括以下几个方面：
1.试剂的选用。
邻二氮菲为邻氨基苯并吡啶类有机物，能与铁形
成紫色络合物，是测定铁的一种常用试剂。
2.pH值的控制。
邻二氮菲与铁离子形成络合物的反应在pH为5.0-
9.0时最为适宜，因此需要通过调节溶液的pH值来控制反应的
条件。
3.温度的控制。
反应温度一般控制在室温下，过高或过低都会影
响反应的速率和准确度。
4.反应时间的控制。
邻二氮菲与铁离子形成络合物反应速率较慢，
需要一定的反应时间才能达到最大吸收峰，一般反应时间为
10-20分钟。
5.光路的选择。
邻二氮菲与铁离子形成的络合物在510nm处有最
大吸收峰，因此需要选择510nm的光路进行测定。
综上所述，邻二氮菲分光光度法测定铁的适宜条件为：试剂为邻二氮菲，pH值为5.0-9.0，温度控制在室温下，反应时间为10-20分钟，光路选择510nm。
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁
实验一 邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1．掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理．掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理 2．熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长．熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长 3．学会制作标准曲线的方法．学会制作标准曲线的方法4．通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁，掌握721型分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。
此仪器的主要构造。
二、实验原理根据朗伯-比耳定律：A=εbc ，当入射光波长λ及光程b 一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A 与该物质的浓度c 成正比。
只要绘出以吸光度A 为纵坐标，浓度c 为横坐标的标准曲线，坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含即未知样的含量。
同时，还可应用相关的回归分析软件，将数据输入计算机，得到相应的分析结果。
量。
同时，还可应用相关的回归分析软件，将数据输入计算机，得到相应的分析结果。
邻二氮菲（1，1010——二氮杂菲），也称邻菲罗啉是测定微量铁的一个很好的显色剂。
在pH2pH2——9范围内（一般控制在5—6间）Fe 2+与试剂生成稳定的橙红色配合物Fe （Phen ）32+lgK=21.3，在510nm 下，其摩尔吸光系数为1.1×1.1×10104L/moL.cm, ）。
Fe 3+与邻二氮菲作用生成蓝色配合物，lgK 稳=14.1，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂盐酸羟胺，使Fe 3+还原为Fe 2+。
其反应式如下：。
其反应式如下：2 Fe 3+ + 2 NH 2OH·HCl → 2Fe 2+ + N 2 + H 2O + 4H + + 2Cl- 本方法的选择性很高。
相当于含铁量40倍的Sn 、AI 、Ca 、Mg 、Zn 、Si ，20倍的Cr 、Mn 、V 、P 和5倍的Co 、Ni 、Cu 不干扰测定。
实验___邻二氮菲分光光度法测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验目的：1.学习如何选择分光光度法分析的条件。
2.学习绘制标准曲线，掌握分光光度法测铁的操作方法。
3．掌握721型或722型分光光度计的正确使用方法。
实验原理：邻二氮菲（又名邻菲罗啉）是测定铁的一种良好的显色剂在pH = 1.5～9.5的溶液中,Fe2+与邻二氮菲生成稳定的橙红色配合物，配合物的配位比为3:1。
Fe3+与邻二氮菲作用形成蓝色配合物，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂盐酸羟胺或对苯二酚使Fe3+还原为Fe2+。
测定时，溶液酸度控制在pH 3～8较为适宜，酸度高，则反应进行缓慢；酸度太低，则Fe2+离子易水解，影响显色。
Bi3+、Cd2+、Hg2+、Zn2+及Ag+等离子与邻二氮菲作用生成沉淀，干扰测定。
CN-存在将与Fe2+生成配合物，干扰也很严重。
以上离子应事先设法除去。
实验证实，相当于铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-，20倍的Cr3+、Mn2+、VO3-、PO43-，5倍的Co2+、Ni2+、Cu2+等离子不干扰测定。
本法测铁灵敏度高，选择性好，稳定性高。
实验仪器及试剂：721型分光光度计、容量瓶(50mL)7只、吸量管(10mL)2只；铁标准溶液(100μg/mL)、铁标准溶液(10μg/mL)、10%盐酸羟胺溶液（临用时配制）、0.1%邻二氮菲溶液（临用时配制）、NaAc溶液0.1mol/L。
实验步骤：1.显色溶液的配制：取50mL容量瓶7只,分别准确加入10.00μg/mL的铁标准溶液0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL及试样溶液5.00mL,再于各容量瓶中分别加入10%盐酸羟胺1mL、0.1mol/L NaAc溶液5mL及0.1%邻二氮菲溶液3mL,每加一种试剂后均摇匀再加另一种试剂,最后用水稀释到刻度,充分摇匀,放置5min待用。
2.测绘吸收曲线及选择测量波长：选用加有6.00mL铁标准溶液的显色溶液,以不含铁标准溶液的试剂溶液为参比,用2cm比色皿,在721型分光光度计上从波长450～550nm间,每隔10nm测定一次吸光度A值在最大吸收波长左右,再每隔5nm各测一次。
邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁 姓名： 学号： 院系： 柜号：一：实验目的（1）了解分光光度计的结构和正确的使用方法。
（2）学习如何选择吸光光度分析的实验条件。
（3）掌握吸量管的使用方法，掌握分光光度法常用仪器及其基本操作。
二：实验原理在可见光区进行吸光光度测量时，如果被测组分本身颜色很浅或者无色，那么就要用显色剂与其反应，生成有色化合物，然后进行测定，显色反应受到各种条件的影响，如溶液的酸度、显色剂的用量、有色溶液的稳定性、温度、溶剂、干扰物质等，这些条件都是通过实验来确定的。
本实验将通过邻二氮菲—Fe 2+显色反应的几个条件试验，学习如何制定一个光度分析方法的实验条件。
条件试验的简单方法是：变动某实验条件，固定其余条件，测得一系列光度值，绘制吸光度—某实验条件的曲线，根据曲线确定某实验条件的适宜值。
在pH2—9范围内（一般控制在5—6间）Fe 2+与试剂生成稳定的橙红色络合物：NN3+Fe 2+Fe2+其lgK=21.35084L ·mol -1·cm -1。
如果铁为+3价时，可用盐酸羟胺还原：2Fe 3++2NH 2OH ·HC1＝2Fe 2++N 2↑+2H 2O+4H ++2C1－邻二氮菲还能与许多金属离子形成络合物，其中有些是较稳定的（如Cu 2+、Co 2+、Ni 2+等），有些还带有较浅的颜色（如Cu 2+、Co 2+等），但是，只要这些离子存在量适当，并且加入足够过量的邻二氮菲，便不会影响Fe 2+的测定。
当这些离子存在量较高时，可用EDTA 等预先分离。
Cu 2+也与邻二氮菲反应生成稳定的橙红色络合物，因而干扰Fe 2+的测定。
三：实验步骤1． 吸收曲线的绘制用吸量管吸取 2mL 1.00×10-3mol -1的标准铁溶液于50 mL 比色管中，加入1 mL 10%的盐酸羟胺溶液，摇匀（原则上每加入一种试剂后都要摇匀）。
邻二氮菲光度法测定铁的条件实验
(2) 显色剂用量的选择
取 7 只 50 mL 容量瓶，用吸量管依次加入 1.000 x 10-3 mol/L 的铁 标准溶液 2.00 mL 和 10% 盐酸羟胺溶液 1 mL，摇匀，分别加入 0.15% 的邻二氮菲溶液 0.10 mL，0.30 mL，0.50 mL，0.80 mL， 1.00 mL，2.00 mL，4.00 mL，然后加入 1 mol/L NaAc 溶液 5 mL， 以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，用 l cm 比色皿，在最大吸 收波长下，以试剂为参比溶液，测定以上七个溶液的吸光度。以邻二 氮菲的体积 (mL) 为横座标，相应的吸光度为纵座标，绘制吸光度-显 色剂用量曲线，找出在测定中应加入的显色剂的体积(mL)。
(5) 工作曲线的绘制
在 6 只 50 mL 容量瓶中，用吸量管分别依次加入 100 mg/mL 的铁 标准溶液 ( 注意，是试剂 2 不要错加成试剂 1) 0.00 mL，0.20 mL， 0.40 mL，0.60 mL，0.80 mL，1.00 mL，再分别加入 10% 的盐酸羟 胺溶液 1 mL，0.15% 的邻二氮菲溶液 2 mL，1 mol/L NaAc 溶液 5 mL，以水稀释至刻度，摇匀。在所用波长下，用 l cm 比色皿，以试 剂溶液为参比，测定各溶液吸光度，绘制工作曲线，并计算摩尔吸光 系数。
四、实验内容
（1）绘制光吸收曲线，选择量的适宜波长 （2）绘制吸光度~反应时间曲线，选择最佳反应时间 （3）绘制吸光度~显色剂用量曲线选择显色剂的适宜用量 （4）绘制吸光度~酸度曲线选择最佳酸度条件 （5）绘制标准曲线 （6）试液中铁含量的测定 （7）记录和处理实验数据
五、实验步骤 (1) 吸收曲线的制作
用吸量管移取 1.000 x 10-3 mol/L 铁的标准溶液 2.00 mL 于 50 mL 容量瓶中，用吸量管依次加入 10% 的盐酸羟胺溶液 1 mL，摇匀， 加 0.15% 邻二氮菲溶液 2 mL，1 mol/L NaAc 溶液 5 mL，以水稀释 至刻度，摇匀。在分光光度计上用 l cm 比色皿，以试剂为参比溶液， 在 440~560 nm 间，每隔 10 nm 测定一次吸光度，以波长为横坐标， 吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长进行铁的测定 。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁
一． 实验名称：邻二氮菲分光光度法测定微量铁 二． 实验目的1. 通过分光光度法测定铁的条件实验，学会选择和确定分光光度分析的适宜条件。
2. 了解光栅分光光度计的构造和使用方法。
3. 掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法。
三． 实验原理邻二氮菲使铁的一种优良的显色剂，在pH2～9的溶液中，Fe 2+能与其生成1：3的橙红色配合物，3lg 21.3β= 最大吸收波长510nm 处的摩尔吸光系数为4111.110L mol cm --⨯•• 。
在一定浓度范围内，Fe 2+的浓度范围内，Fe 2+的浓度与配合物吸光系数的关系遵循朗伯-比尔定律。
有关反应如下：NNFe2+33Fe2++该显色反应选择性很高，形成的配合物较稳定，在还原剂的存在下，颜色可保持数月不变。
由于Fe 3+也可与邻二氮菲生成1：3的淡蓝色配合物，3lg 14.1β=，所以，在显色反应前，需将Fe 3+全部还原成Fe 2+。
四． 实验用品1．仪器 721或722型分光光度计。
2．试剂(1)0.1 mg ·L-1铁标准液 准确称取0.702 0 g NH 4Fe(S04)2·6H 20置于烧杯中，加少量水和20 mL 1:1H 2S04溶液，溶解后，定量转移到1L 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
(2)100 g ·L-1盐酸羟胺水溶液 用时现配。
(3)1.5 g ·L-1邻二氮菲水溶液 避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用。
(4)1.0 mol ·L-1 乙酸钠溶液。
(5)1 mol ·L-1氢氧化钠溶液。
五． 实验步骤1.准备工作。
打开分光光度计开关，预热。
2.确定最大吸收波长。
取50 mL容量瓶（1#），用吸量管加入1 mL 100 g·L-1盐酸羟胺溶液，再各加入2 mL 1.5 g·L-1邻二氮菲溶液、5 mL 1.0 mol·L-1乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀（参比溶液）。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁的条件试验
⑹10－3mol·L－1邻二氮菲：称取0.1983g邻二氮菲，加少许酒精溶解，定容至1L。
⑺1mol·L－1NaAc。
⑻1mol·L－1NaOH。
四、实验步骤
1．绘制吸收曲线
⑴吸取0.5mL 100mg10－3mol·L－1铁标准溶液于25mL容量瓶中，加0.5mL10%盐酸羟胺，摇匀，放置2min。加入1.0mL0.15%邻二氮菲溶液和2.5mL1mol·L－1NaAc，用水稀释至刻度，混匀。
⑵10－3mol·L－1铁标准溶液（Ⅱ）：用吸量管准确吸取55.85mL铁标准溶液（Ⅰ）至1L容量瓶中，
加入70mL1:1HCl，用去离子水稀释至刻度。
⑶100mg·L－1铁标准溶液（Ⅲ）：用吸量管准确吸取10.00mL铁标准溶液（Ⅰ）至100.0mL容量瓶中，
用去离子水稀释至刻度。
⑷10%盐酸羟胺：10g盐酸羟胺溶于100mL水中。
在建立一个新的吸收光谱法定量测定时，为了获得较高的灵敏度和准确度，必须进行一系列条件试验，包括显色化合物的吸收光谱曲线（简称吸收光谱）的绘制、选择合适的测定波长、显色剂用量和溶液pH值的选择及显色化合物影响等。此外，还要研究显色化合物符合朗伯－比尔定律的浓度范围、干扰离子的影响及其排除的方法等。
三、仪器与试剂
1．仪器
分光光度计(附1cm比色皿4个)，25mL容量瓶，镜头纸，广泛pH试纸，洗耳球，烧杯，洗瓶。
2．试剂
⑴1000mg·L－1铁标准溶液（Ⅰ）：准确称取7.021g(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O，放入烧杯中，
加入少量水和180mL（1:1）HCl，溶解后移入1L容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，混匀。
实验一 邻二氮菲分光光度法测定微量铁
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、目的要求1．学习723型分光光度计的使用方法。
2．学习测绘吸收曲线的方法。
3．掌握利用标准曲线进行微量成分测定的基本方法和有关计算。
二、实验原理微量铁的测定有邻二氮菲法、硫代甘醇酸法、磺基水杨酸法、硫氰酸盐法等。
由于邻二氮菲法的选择性高、重现性好，因此在我国的国家标准（GB）中，许多冶金产品和化工产品中铁含量的测定都采用邻二氮菲法。
邻二氮菲又称邻菲罗啉（简写Phen），在pH值为2—9的溶液中，Fe2+离子与邻二氮菲发生下列显色反应：Fe2+ + 3Phen = [Fe（Phen）3]2+生成的橙红色配合物非常稳定，lgK稳=21.3（20℃），其最大吸收波长为510nm，摩尔吸光系数ε510=1.1×104 L•cm-1•mol-1。
显色反应的适宜pH值范围很宽，且其色泽与pH值无关，但为了避免Fe2+离子水解和其它离子的影响，通常在pH值为5的HAc-NaAc缓冲介质中测定。
邻二氮菲与Fe3+离子也能生成淡篮色配合物，但其稳定性较低，因此在使用邻二氮菲法测铁时，显色前应用还原剂将Fe3+离子全部还原为Fe2+离子。
本实验采用盐酸羟胺为还原剂：4Fe3+ +2NH2OH = 4Fe2+ + 4H++ N2O+ H2O邻二氮菲与Fe2+离子反应的选择性很高，相当于含铁量5倍的Co2+、Cu2+离子，20倍量的Cr3+、Mn2+、V（Ⅴ）、PO43-离子，40倍量的Al3+、Ca2+、Mg2+、Sn2+、Zn2+、SiO32-离子都不干扰测定。
利用分光光度法进行定量测定时，通常选择吸光物质（即经显色反应后产生的新物质）的最大吸收波长作为入射光波长，这样测得的摩尔吸光系数ε值最大，既测定的灵敏度最高。
为了找出吸光物质的最大吸收波长需绘制吸收曲线。
测定吸光物质在不同波长下的吸光度A值，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，描点绘图即得吸收曲线，曲线最高点所对应的波长为该吸光物质的最大吸收波长。
综合实验报告 邻二氮菲分光光度法测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定微量铁（一）一、实验目的⒈学习确定实验条件的方法，掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理；⒉掌握721型分光光度计的使用方法，并了解此仪器的主要构造。
二、实验原理⒈确定适宜的条件的原因：在可见光分光光度法的测定中，通常是将被测物与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。
因此，显色条件的完全程度和吸光度的测量条件都会影响到测量结果的准确性。
为了使测定有较高的灵敏度和准确性，必须选择适宜的显色反应条件和仪器测量条件。
通常所研究的显色反应条件有显色温度和时间，显色剂用量，显色液酸度，干扰物质的影响因素及消除等，但主要是测量波长和参比溶液的选择。
对显色剂用量和测量波长的选择是该实验的内容。
⒉如何确定适宜的条件：条件试验的一般步骤为改变其中一个因素，暂时固定其他因素，显色后测量相应溶液吸光度，通过吸光度与变化因素的曲线来确定适宜的条件。
⒊本试验测定工业盐酸中铁含量的原理：根据朗伯－比耳定律：A=εbc。
当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。
只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的曲线，测出试液的吸光度，就可以由曲线查得对应的浓度值，即工业盐酸中铁的含量。
⒋邻二氮菲法的优点：用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。
⒌邻二氮菲法简介：邻二氮菲为显色剂，选择测定微量铁的适宜条件和测量条件，并用于工业盐酸中铁的测定。
⒍邻二氮菲可测定试样中铁的总量的条件和依据：邻二氮菲亦称邻菲咯啉(简写phen)，是光度法测定铁的优良试剂。
在pH=2～9的范围内，邻二氮菲与二价铁生成稳定的桔红色配合物((Fe(phen)3)2+)。
此配合物的lgK 稳= 21.3，摩尔吸光系数ε510 =1.1×104 L·mol-1·cm-1，而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1.学习确定实验条件的方法和测定微量铁的分光光度法；2.掌握TU—1901型双光束紫外可见分光光度计的使用方法。
二、实验原理1.在可见光分光光度法测定无机物时，通过显色反应生成吸光系数较大的有色物质进行测。
2.确定适宜实验条件：改变其中一个影响因素，暂时固定其它影响因素，测吸光度，通过吸光度—该因素的曲线确定最适宜的显色条件。
其他因素的确定也照此方法。
3.本实验以邻二氮菲（phen）为显色剂，是光度法测定微量铁的优良试剂，pH在2~9时（pH=5~6），Fe2+ + 3phen [Fe(phen)3]2+(稳定的红色配合物)lgK稳=21.3，λmax=510nm,ε510=1.1×104L·cm-1·mol-1用盐酸羟胺将Fe（Ⅲ）还原为Fe（Ⅱ），以邻二氮菲做显色剂可测定试样中铁含量。
本方法选择性高，杂离子难以干扰。
三、仪器与试剂TU—1901型双光束紫外可见分光光度计，1cm比色皿，10mL吸量管，50mL 比色管。
1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液，100μg·mL-1铁标准溶液，0.15%phen水溶液，10%盐酸羟胺溶液，1 mol·L-1醋酸钠溶液，工业盐酸（试样）。
四、实验操作1.吸收曲线的绘制和测量波长的选择用吸量管吸取2.00mL1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液注入50mL比色管中，再加入1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀后，加入2.00mL0.15%phen水溶液和5.00mL1 mol·L-1醋酸钠溶液，稀释至刻度线，摇匀。
以蒸馏水为参比液，将上述试液装入1cm比色皿（2/3左右），在440nm~560nm 之间，每隔5nm测一次吸光度，以吸光度A为纵坐标，波长λ为横坐标绘制吸收曲线，选择最适宜波长。
2.确定显色条件⑴显色剂的用量在6支50mL比色管中各加入2.00mL1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液和1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀后，分别加入0.10、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00mL0.15%phen 水溶液，再加入5.00mL1 mol·L-1醋酸钠溶液,，稀释至刻度线，摇匀。
仪器分析实验-邻二氮菲分光光度法测铁条件试验
实验一邻二氮菲分光光度法测铁条件试验一、目的要求1．了解分析测定中确定实验条件的基本原理和方法；2．学习722分光光度计和酸度计的使用方法。
二、实验原理在可见光分光光度测定中，通常是将被测物质与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测量其吸光度，进而求得被测物质的含量。
因此，显色反应的完全程度和吸光度的物理测量条件都影响到测定结果的准确性。
显色反应的完全程度取决于介质的酸度、显色剂的用量、反应的温度和时间等因素。
在建立分析方法时，需要通过实验确定最佳反应条件。
为此，可改变其中一个因素（例如介质的pH值），暂时固定其它因素，显色后测量相应溶液的吸光度，通过吸光度－pH曲线确定显色反应的适宜酸度范围。
其它几个影响因素的适宜值，也可按这一方式分别确定。
本实验以邻二氮菲为显色剂，找出测定微量铁的适宜显色条件。
三、仪器与试剂1．仪器722型分光光度计、酸度计、容量瓶（50mL）、吸量管（5mL，10mL）等。
2．试剂（1）铁标准溶液准确称取0.176克分析纯硫酸亚铁铵（FeSO4·(NH4)2 SO4·6H2O）于小烧杯中，加水溶解，加入6mol∕L HCl溶液5mL，定量转移至250mL容量瓶中稀释至刻度，摇匀。
所得溶液每毫升含铁0.100 mg（即100ug/mL）。
（2）0.1％邻二氮菲（又称邻菲咯琳）水溶液：称取1g邻二氮菲，先用5～10mL 95％乙醇溶解，再用蒸馏水稀释到1000mL。
（3）10％盐酸羟胺水溶液（新鲜配制）；（4）HAc－NaAc缓冲溶液（pH＝4.6）：称取136g醋酸钠（CH3COONa·3H2O），加60 mL冰醋酸，加水溶解后，稀释到1000mL。
（5）NaOH溶液：0.5 mol∕L（6）HCl溶液：0.5 mol∕L四、实验步骤1．酸度影响于9只50 mL容量瓶中，用刻度吸量管各加入1.0 mL 0.100mg∕mL的铁标准溶液，再加入1 mL盐酸羟胺溶液和2mL邻二氮菲溶液，摇匀。
实验二-邻二氮菲分光光度法测定微量铁
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1、了解邻二氮菲测定铁的基本原理及基本条件，学习显色溶液的制备操作技术；2、掌握吸收曲线的测绘和测量波长的选择；3、掌握标准曲线法定量的实验技术；4、了解分光光度计的使用方法。
二、实验原理邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的一种较好的显色剂。
在pH4~6的溶液中，邻二氮菲与Fe2+生成稳定的橙红色络合物，反应式如下：Fe2++ 3phen → ［Fe(phen)3］2+橙红色络合物的最大吸收波长在510nm 处，摩尔吸光系数ε510 =1.1×104，反应的灵敏度、稳定性、选择性均较好。
此反应可用于微量Fe2+的测定，如果铁以Fe3+的形式存在，则应预先加入还原剂盐酸羟胺或对苯二酚将Fe3+还原成Fe2+，2Fe3+ +2NH2OH·HCl → 2Fe2+ + N2 + 2H2O + 4H+ + 2Cl-（盐酸羟胺）三、仪器与试剂1、仪器分光光度计、容量瓶（50 mL 7个）、吸量管（5 mL 4 支）、吸量管（10 mL 1 支）2、试剂（1）10 μg/mL 铁标准溶液：准确称取0.8634 g NH4Fe（SO4）2•12H2O，置于烧杯中，以50 mL 1mol •L-1 HCl 溶液溶解后转入1000 mL 容量瓶中，用水稀释到刻度，摇匀。
从中吸取50 mL 该溶液于500 mL 容量瓶中，加50 mL 1mol •L-1 HCl 溶液，用水稀释到刻度，摇匀；（2）10g/L 盐酸羟胺溶液（临用时配制）；（3）1g/L 邻二氮菲溶液（临用时配制）：应先用少许酒精溶液，再用水稀释；（4）NaAc-HAc 缓冲溶液（pH=4-6）：将30mL冰醋酸和30g无水醋酸钠溶于100mL 水中，稀释至500mL；（5）铁试样溶液：其中含铁0.02~0.06 mg/10 mL。
四、实验步骤1、显色溶液的配制：取50mL 容量瓶7 个，分别准确加入10μg/mL 的铁标准溶液0.00，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00（mL）及试样溶液10.00mL，再于各容量瓶中分别加入10g/L 盐酸羟胺2.5mL，摇匀，稍停2min，再各加入NaAc-HAc缓冲溶液5mL 及1g/L 邻二氮菲溶液5mL，每加一种试剂后均摇匀再加另一种试剂，最后用水稀释到刻度，摇匀。
（一）邻二氮菲分光光度法测定微量铁
（⼀）邻⼆氮菲分光光度法测定微量铁实验⼀: 邻⼆氮菲分光光度法测定微量铁学号：2014222748姓名：杨⽊戎实验⽬的和要求1.掌握紫外可见分光光度计的基本原理以及相关操作。
2.掌握邻⼆氮菲分光光度法测定微量铁的⽅法以及原理。
3.了解并掌握吸收曲线绘制以及最⼤吸收波长的选择。
4.通过对紫外可见分光光度计的掌握推出相关应⽤。
实验原理邻⼆氮菲是⼀种有机配位剂，可与Fe2+离⼦形成红⾊配位离⼦。
在pH=3~9范围内，该反应能够迅速完成，⽣成的红⾊配位离⼦在510nm波长附近有⼀吸收峰，摩尔吸收系数为1.1×10-4，反应⼗分灵敏，Fe2+离⼦浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。
实验中，采⽤的pH=4.5~5的缓冲溶液保持标准系列溶液剂样品溶液的酸度；采⽤盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的Fe3+离⼦并防⽌测定过程中Fe2+离⼦被空⽓氧化。
实验仪器与试剂1.752型分光光度计2.标准铁储备溶液（1.00×10-3mol/L）3.邻⼆氮菲溶液(0.15%,新鲜配制)4.盐酸羟胺溶液（10%，新鲜配制）5.醋酸盐缓冲溶液6.50ml容量瓶7个7.5ml移液管4只8.1cm玻璃⽐⾊⽫2个9.铁样品溶液实验步骤1.标准系列溶液及样品溶液配制按照下表配制铁标准系列溶液及样品溶液2.吸收曲线绘制⽤1cm⽐⾊⽫，以1号溶液作为参⽐溶液，测定4号溶液在下列各个波长处的吸光度；在坐标纸上以测定的吸光度为纵坐标，波长为横坐标制图，绘制吸收曲线，并从吸收曲线上找出最⼤的吸收波长。
3.标准曲线制作在选定的最⼤吸收波长处⽤⽐⾊⽫，以1号溶液作为参⽐溶液，分别测定2~7号溶液的吸光度，平⾏测定三次，计算吸光度的平均值；在坐标纸上以吸光度平均值为纵坐标，系列标准实验数据处理1.样品溶液中的铁含量计算根据7号样品溶液吸光度测定的平均值，在标准曲线上采⽤作图法求出其对应的浓度值，采⽤下式计算样品溶液中铁的含量：Cx=C读取值×50.00/2.50C读取值=4.82×10-5mol/LCx=9.64×10-4 mol/L2.摩尔吸收系数计算在标准曲线的直线部分选择两个点，读取对应的坐标值，按照下式计算铁-邻⼆氮菲红⾊配位物在最⼤吸收波长处的摩尔吸收系数：ε=（A2-A1）/(C2-C1)=1.1332×104L/(mol×cm)实验注意事项1.测定系列标准溶液和样品溶液时，必须使⽤同⼀⽀⽐⾊⽫。
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实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁的条件、实验目的1、掌握分光光度计的原理、构造和使用方法。
2、学习分光光度计分析中如何确定最佳实验条件。
、实验原理在可见光区分光光度法测量中，通常是将被测物质与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。
显色反应的程度受显色剂用量、显色时间，显色液酸度等条件的影响，通过实验，确定合适的显色条件。
三、仪器及试剂分光光度计；1cm 吸收池；10mL移液管；25mL 容量瓶,100ml 容量瓶1．铁标准溶液100μg·mL -1（即0.01 mg·mL-1）铁标准溶液：准确称取0.3511g（NH 4）2 Fe（SO4）2·6H 2O 于烧杯中，用2 mol ·L-l盐酸15 mL 溶解，移入500 mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。
用前，准确稀释10 倍成为含铁10 ug·mL -1标准溶液。
2. 1g.L -1邻二氮菲：1.0 g 邻二氮菲于小烧杯中，加入5-10ml 95%乙醇溶液溶解，再用水稀释到1000 mL 。
3. 10％盐酸羟胺水溶液：10％水溶液（现用现配，避光保存）4. 醋酸钠溶液1mol/L5. 0.8 mol/L 氢氧化钠溶液四、实验步骤1、吸收曲线的制作和测量波长的选择用移液管吸取0.0ml、2.0mL 10 ug ·mL -1标准溶液，分别注入二个25 mL 容量瓶中，加入1.0mL10% 的盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min ；再加2 mL 邻二氮菲溶液，2.5mL 醋酸钠溶液溶液，用水稀释至刻度，摇匀。
放置5min 后，用1cm 比色皿，以试剂空白为参比，在440~560nm 之间，每隔10nm 测一次吸光度，其中在500-520 nm 之间，每隔5nm 测一次吸光度。
然后以波长为横坐标，吸光度A 为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。
2、显色剂用量影响在7 只25mL容量瓶中，各加2.0 mL 10 ug·mL -1铁标准溶液和1.0 mL 盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min。
分别加入0.1、0.25、0.5、1.0、2.0、3.0 、4.0ml 1g.L-1邻二氮菲溶液，再各加2.5mL 1mol/L 醋酸钠缓冲溶液，以水稀释至刻度，摇匀。
放置5min 后，以水为参比，在510 nm 测量各溶液的吸光度。
其中，加2.0 mL 1g.L-1邻二氮菲溶液的显色溶液不要倒掉，用于时间影响的测定。
3、显示时间的影响取上述1 中加2.0 mL 1g.L -1邻二氮菲溶液的容量瓶，在显色时间为10min 、20min 、30min 、40min 、50min 、60min 分别测定吸光度值。
4、溶液酸度的影响在7 只25mL容量瓶中，各加入2.0 mL 10 ug ·mL -1铁标准溶液和1.0 mL 盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min ，再各分2.0ml 邻二氮菲溶液，摇匀。
然后，分别用移液管准确吸取加人0.8 mol· L-1 氢氧化钠溶液0.0 、0.5 、1.0，2.0 ，3.0，4.0 、5.0ml 于容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀，放置10min 。
用精密pH试纸测定上述溶液pH值，同时在分光光度计上，波长为510 nm，以水为参比测定各溶液的吸光度。
五、数据记录1. 最大吸收波长的确定2、显色剂用量的影响3、显色时间的影响4六、结果讨论与思考1. 分别以波长、显色剂体积、显色时间、溶液pH 为横坐标、相应的吸光度为纵坐标，绘制曲线，确定最大吸收波长、合适的显色剂用量、显色时间、溶液pH 是多少？2．分光测定中比色皿盛放溶液的体积为多少，用手拿比色皿时应注意什么？实验二邻二氮菲分光光度法测定微量铁的浓度一、实验目的1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法2．了解分光光度计的构造、性能及使用方法二、实验原理邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂，在pH=2～9 的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。
配合物的lgK稳＝21.3，摩尔吸光系数510 ＝11000 L m·ol-1·cm-1。
在显色前，用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子。
4Fe3+＋2NH2OH→4Fe2+＋N2O ＋4H＋＋H2O测定时，控制溶液pH＝5 较为适宜，酸度高时，反应进行较慢，酸度太低，则二价铁离子水解，影响显色。
用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物；钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH 范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。
三、仪器与试剂l mol L·-1醋酸钠、10%盐酸羟胺、0.1%邻二氮菲溶液、10 μg·mL-1铁标准溶液、分光光度计等。
四、实验步骤1、标准曲线的绘制取25 mL 容量瓶6 个，分别准确吸取的10μ gm·L-l 铁标准溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0和5.0 mL于各容量瓶中，各加10％盐酸羟胺溶l mL ，摇匀，2 min后再各加醋酸钠溶液2.5 mL和0.1％邻二氮菲溶液2 mL，以水稀释至刻度，摇匀。
10min 以后，在分光光度计上用l cm 比色皿，在最大吸收波长510 nm 处以试剂空白为参比测定各溶液的吸光度。
记录实验数据。
（2）吸取未知液5 mL，按上述与标准曲线相同条件和步骤测定其吸光度。
做3 个平行，记录实验数据。
五、数据记录与处理1．以铁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，用EXCEL 绘制标准曲线、线性方程、相关系数。
2．计算未知液3 份平行样的铁浓度和平均浓度（g·L-1）。
六、思考1. 在实验中盐酸羟胺和邻二氮菲的作用分别是什么？2、实验中试剂空白的作用是什么？3、简述可见光分光光度计的操作步骤。
实验三土壤中水溶性盐的提取及原子吸收光谱法测定土壤中水溶性镁一、实验目的1. 了解土壤中水溶性盐的提取方法2. 了解和掌握原子吸收光谱法的原理、结构及操作方法。
二、实验原理含金属离子的试液被雾化后并进入乙炔—空气火焰时，金属离子被原子化，产生基态原子蒸气。
该蒸气能吸收相应金属元素空心阴极灯发射出来的共振发射线的辐射能，其吸收情况服从比尔定律。
样品测得的吸光度，根据标准溶液计算的标准曲线计算相应的浓度。
一、仪器与试剂原子吸收光谱仪AA-7000 、10ug/mL镁标液、SrCl2溶液、去离子水二、实验步骤1、土壤水溶性盐的提取称取20.0g过1mm筛的土壤，加去离子水100ml，在振荡机上振荡3分钟，或用手摇荡3min，然后过滤。
2、镁标准溶液的配置分别取0、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0ml 的镁标液于6 个25ml 容量瓶中，加1ml SrCl2 溶液，用去离子水定容至刻度，摇匀待测。
3、样品溶液的配置分别取滤液0.5ml 于3个容量瓶中，加1ml SrCl2溶液，用去离子水定容至刻度，摇匀待测。
三、原子光谱仪测定AA-7000 测定步骤见附件。
四、结果计算1、标准溶液与吸光度根据测定结果计算标准曲线和相关系数。
2、根据测定结果计算土壤提取液中镁的平均浓度、土壤中水溶性镁的百分含量。
六、思考题1、简述原子吸收光谱仪的构成与工作原理。
2、如果测水溶性钙，能不能用镁元素的空心阴极灯作光源？附:SHIMADZU AA-7000 原子吸收操作步骤（一）火焰连续法一、开机顺序：①打开电脑；② 打开AA-7000 主机电源；③ 启动WizAArd软件，选择“操作”，点击“测量”；④ 在ID 栏输入“Admin”，登陆系统；⑤ 弹出“向导选择”对话框，点击“取消” ，进入下一步。
二、仪器初始化在“仪器”下拉式菜单中，点击“连接” ，仪器进入初始化状态。
弹出“气体调节”页面时，根据提示，打开通风设备，乙炔钢瓶主阀（逆时针旋转1 圈为宜）和空压机开关。
（乙炔气体分压要求为0.08-0.10 MPa ，空气压力要求为0.35 MPa ）检测完成后，点击“确定” 。
弹出“火焰分析日常监测项目” 页面时，请对每个项目一一进行检查并勾选，点击“确定”。
等待漏气检测结束，若不存在漏气现象，点击“确定” ，完成初始化。
三、设置参数在“参数”下拉式菜单中，选择“元素选择向导” ，进行元素选择。
①选择“火焰连续法”、“普通灯”，单击“下一步”；输入元素灯位；点击“谱线搜素”；谱线搜素完成后，点击“关闭” 。
②校准曲线设置：输入“浓度单位”，编辑“校准曲线测量次序” 。
③样品组设置：输入“浓度单位” 、“样品数量”，点击“更新”；在样品ID 栏输入样品名称或编号，点击“下一步” 。
④点击“连接/ 发送参数”，完成参数设置。
四、点火同时按下PURGE 和IGNITE 两键，直至火焰点燃，松开。
五、测量步骤①校零：把进样吸管放入去离子水中，雾化1min，点击页面底部的Auto Zero 。
②测量标准样品：吸入溶液，待信号稳定后，按页面底部的START ，读数完毕，START键变回绿色，换溶液，重复以上操作。
③测量空白溶液：方法同②。
④测量未知溶液：方法同②。
测量过程中，每测完一种未知样品，应吸入去离子水雾化30s。
每测5-6 个样品，应校零一次。
⑤所有样品测量完毕，吸入去离子水雾化2min ，取出进样吸管，按EXTINGUISH 键熄灭火焰，并关闭乙炔钢瓶主阀和空压机开关六、关机顺序① 在“仪器”下拉式菜单中，点击“连接” ，切断主机与电脑的通讯；②保存或打印数据，退出WizAArd 程序；③关闭AA-7000 主机电源；④关闭计算机，⑤关闭抽风设备。
实验四电位滴定法测定醋酸的含量和解离常数、实验目的1、熟悉电位滴定的基本原理和操作技术；2、学习电位滴定曲线确定滴定终点。
二、实验原理醋酸为有机酸 （ K a 1.8 10 5），与 NaOH 的反应为： HAc NaOH NaAc用与已知浓度的 NaOH 滴定未知浓度的 HAc 溶液在终点时产生 pH （或 mV ）值的突跃， 据滴定过程中 pH （或 mV ）值的变化情况来确定滴定的终点，进而求得各组份的含量。
滴定终点可由电位滴定曲线 （指示电极电位或该原电池的电动势对滴定剂体积作图） 确定，也可以用二次微商曲线法求得。
确定滴定体积以后，从 pH ～ V 曲线上查出 HAc 被中和一半时（ 1/2Ve ）的 pH 值。
此 时， pH=pKa, 从而计算出 Ka 。
醋酸在水溶液中电离如下：其离解常数为 Ka[H ][ Ac ][HAc]当醋酸被中和了一半时， 溶液中： [Ac -]=[HAc] ，根据以上平衡式， 此时 Ka=[H +]，即 pKa=pH 。