唾液淀粉酶活性观察实验报告

2 唾液淀粉酶活性观察实验报告

一、实验目的

1.了解环境因素对酶活性的影响及酶的高效性；

2.掌握酶定性分析的方法和注意事项。

二、基本原理

1.酶是生物催化剂，具有极高的催化效率，其催化效率比一般催化剂高106~1013.在生物体内过氧化氢酶能催化H2O2分解成H2O和O2，铁粉地H2O2分解也有催化作用，但其效率远低于酶。

2.酶的活性受温度的影响。在一定的温度范围内，温度升高，酶的活性也会增大。当到了最大值后，此时温度为酶的最适温度，由于温度过高，酶开始失活，导致酶的效率降低，最后完全失活。

3.酶的活性受PH值的影响。酶在一定范围的PH值下才有活性，高于或低于最适PH，都会使酶的活性降低。

4.酶活性常受到某些物质的影响。有些物质能使酶的活性增加，称为激活剂，有些物质能使酶的活性降低，称为抵制剂。

5.碘液指示淀粉水解程度的不同色变化：

淀粉淀粉酶紫色糊精淀粉酶暗褐糊精淀粉酶红色糊精淀粉酶麦芽糖+少量葡萄糖

加碘后：蓝色紫红色暗褐色红棕色黄色

三、试剂与器材

0.5%淀粉溶液，碘液，PH＝3.8，6.8，8.0缓冲液，1%CuSO4溶液，0.9%NaCl 溶液，2%H2O2溶液，铁粉，生马铃薯糜，熟马铃薯糜，玻璃匀浆器，比色板，恒温水浴箱，三用水箱，制冰机。

四、操作步骤

1.唾液淀粉酶的制备

每人取一个干净的小烧杯，先用自来水漱口，将口腔内的食物残渣清除，干净。然后取蒸馏水约20ml含入口中，做咀嚼动作了3~4min，以分泌较多的唾液。将口腔中的蒸馏水吐入干净的小烧杯中，此即为稀释的唾液淀粉酶液。

2.酶的高效性及环境因素对酶活性的影响

①PH值对酶活力的影响：取3支试管，编号：

编号 1 2 3

PH＝3.8的缓冲溶

液

3 －－

PH＝6.8的缓冲溶

液

－ 3 －

PH＝8.0的缓冲溶

液

－－ 3

0.5%淀粉溶液 1 1 1

唾液淀粉酶液 1 1 1

将上述各管溶液混合后在37度水浴中保温5min

检查淀粉水解程

度每隔1min，从2号试管中取出溶液置于白瓷板上，用碘液检查淀粉水解程度，待溶液不再变色时，从水浴中取出所有

试管

向各管均加入碘液1~2滴，摇匀

观察，记录并解释现象

②温度对酶的影响：取3支试管，编号：

编号 1 2 3 唾液淀粉酶液0.5 0.5 0.5 PH＝6.8的缓冲溶

液

1 1 1 0.5%淀粉溶液ml 1 1 1

反应温度(度，

10min)

0 37 100

取出试管，并将在沸水浴中处理的试管用冷水冷却，然后向各管中滚圆碘液1~3

滴。摇匀后观察记录并解释各管的现象

③酶的激活剂和抵制剂对酶活性的影响

编号 1 2 3

0.9%NaCl溶液11 －－

1%CuSO4溶液－ 1 －蒸馏水－－ 1

0.5%淀粉溶液 1 1 1

唾液淀粉酶液 1 1 1

检查淀粉水解程

度上试管在37度水浴中保温，每1min从1号试管中取出1滴溶液置于白瓷板上，用碘液检查淀粉水解程度，待1号试管的溶液碘不变色时，从水浴中取出所有的试管

向各管加入碘液2滴，观察，记录并解释各管的现象

④酶的高效性

管号 1 2 3 4

2%H2O2溶液 3 3 3 3

生马铃薯糜少许－－－

熟马铃薯糜－少许－－铁粉－－少许－

观察并解释各管的现象

五、现象与讨论

1.PH值对酶活性影响：1号深蓝色，2号为淡黄色，3号为紫红色，有点偏蓝。因为PH＝3.8时，超出了淀粉酶有效PH范围，使得酶完全失活，淀粉没有被分解，淀粉遇到碘变蓝色，2号是因为PH＝6.8时，为淀粉酶分解的最适PH，淀粉被酶迅速分解生成麦芽糖和葡萄糖。而3号则是因为PH＝8.0超出了淀粉酶的适宜PH，活性受到或者是部分失活，使淀粉分解较慢，只是生成了紫色糊精。

2.温度对酶的影响：1号显紫红色，2号为淡黄色，3号为深蓝色。当温度娱乐0度时，由于间谍过低，蛋白质分子的热运动减慢，即酶分子的活性受到了抑制，使酶的活性降低了，淀粉分解减慢，生成紫红色的糊精；2号处于37度，接近

人体温度，酶的活化性能较高，淀粉被分解成麦芽糖和葡萄糖就越快，所以是淡黄色，而当温度为100度时，由于酶是蛋白质，遇到高温时会失活，所以淀粉没有被分解。

3.激活剂和抑制剂对酶的影响：3号作为对照实验组，显红棕色，1号显浅黄色，2号显深蓝色。因为在1号溶液中，NaCl对酶的活性在增加作用，激活了淀粉酶，淀粉酶迅速把淀粉分解成麦芽糖和葡萄糖，滴加碘液时，溶液显浅黄色，而对照组显示红棕色，表明淀粉被分解成了糊精，在1号中，溶液中的淀粉没有被分解遇碘变蓝，通过对比1和3号，2和3号，由颜色的变化，判断淀粉水解程度为1<3<2,说明了NaCl具有激活作用，CuSO4具有抑制作用。

4.酶的高效性：1号有大量气泡产生，反应信息论剧烈；2，4号有少量气泡产生，但不明显，3号有气泡产生。但不如1号剧烈，所以催化效率为1>3>2＝4,马铃薯中含有催化H2O2分解的过氧化氢酶。铁也可促进H2O2分解，但没有酶的催化那么剧烈，这充分说明了酶的高效性，同时，2，4号的分解，属于H2O2的自然分解。

六、思考题

1.做温度对酶活性的影响时，第三管取出来后为什么必须冷却？如不冷却，加碘后出现什么现象？为什么？

答：淀粉具有遇碘变蓝的性质。淀粉分子内的氢键形成螺旋状盘旋结构，与碘液形成淀粉－碘的络合物，而显示蓝色。当第三支试管不冷却时，淀粉内的氢键被破坏，螺旋松散，淀粉－碘的络合物被破坏，与碘不能形成蓝色。另外，碘易升华，常温下，温度大于65度时，碘以气体的形式存在。因此，80~100度时，碘与淀粉反应之前，已经升华到了空气中，更不可能与淀粉形成蓝色溶液。由此看来溶液必须冷却下来，否则碘升华了，看不到温度对酶活性的影响，从而影响实验判断。

2.做酶的实验必须控制哪些条件？为什么？