黄连中盐酸小檗碱的分离提纯
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究一、引言黄连（Coptis chinensis Franch）是一种广泛分布在中国东南部的常见中药材，具有清热燥湿、泻火解毒的功效。
其中盐酸小檗碱是黄连的主要有效成分之一，具有抗菌、抗炎、抗肿瘤等多种药理活性。
对盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性的研究具有重要的理论和应用意义。
二、盐酸小檗碱的提取纯化1. 提取盐酸小檗碱的提取通常采用乙醇提取法，即将黄连粉碎后，用乙醇浸泡，反复浸泡、过滤，收集提取液，然后蒸发乙醇，得到黄连提取物。
2. 分离黄连提取物中含有多种成分，因此需要进一步分离得到纯化的盐酸小檗碱。
常用的方法包括硅胶柱层析、凝胶层析、反相层析等。
硅胶柱层析是一种简便有效的方法，通过不同成分在硅胶上的吸附力不同，实现了盐酸小檗碱和其他成分的分离。
3. 结晶得到纯化的盐酸小檗碱后，通过结晶、结晶重结晶等方法，可得到更纯净的盐酸小檗碱，提高药效。
三、盐酸小檗碱的抑菌活性研究1. 实验方法采用平板法测定不同浓度盐酸小檗碱对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌的抑菌活性。
将分别制备不同浓度的盐酸小檗碱溶液加入琼脂平板，接种相应的细菌或真菌，培养一段时间后观察对菌落的影响。
2. 结果实验结果表明，盐酸小檗碱对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌均具有较强的抑菌活性。
随着盐酸小檗碱浓度的增加，抑菌效果也随之增强。
3. 分析盐酸小檗碱具有明显的抗菌活性，对多种细菌和真菌均具有一定的抑制作用。
这为其在临床上的应用提供了有力的依据，表明其具有广泛的抗菌潜力。
四、结论通过对黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性的研究发现，盐酸小檗碱具有显著的抑菌活性，并且其纯化技术相对简便有效。
这为盐酸小檗碱的临床应用提供了重要的理论和实验基础。
由于盐酸小檗碱的毒性较大，临床上仍需要更多的研究来确定其剂量和安全性，以实现更好的药用价值。
希望未来能有更多的研究对盐酸小檗碱的活性、毒性、药代动力学等方面进行深入探讨，为其临床应用提供更加可靠的依据。
实验三 黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定
实验三黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定小檗碱又称黄连素，是在高等植物中分布比较广泛的、有明显生理活性的化学成分。
主要存在于黄连、黄柏、三颗针等中草药中。
小檗碱具有显著的抗微生物、抗原虫的作用，临床用其盐酸盐（即盐酸黄连素）治疗细菌性感染如痢疾、急性肠胃炎、呼吸道感染等症。
黄连为毛茛科黄连属植物黄连（Coptis chinensis Franch。
），三角叶黄连（C。
deltoidea C。
Y。
Cheng et Hsiao）或云连（C。
teetoides C。
Y。
Cheng）的根茎，含有小檗碱(1)、巴马汀(2)、黄连碱(3)、甲基黄连碱(4)、药根碱(5)等生物碱，其中以小檗碱含量最高，可达10%左右，小檗碱以盐酸盐的形式存在于黄连中。
目前制药工业提取小檗碱主要以三颗针为原料。
三颗针来源于小檗科小檗属（Berberis）多种植物，其根皮含生物碱约2%，主要含小檗碱、小檗胺、药根碱、巴马汀等生物碱。
R1 R2 R3 R4 R51R1OR2OR5£-OR3OR4+3 CH3 HCH2CH3 CH3 CH3 CH3 HCH2CH2CH2CH23H CH3 CH3 CH3 H2345小檗碱 (Berberine)属异喹啉类生物碱，自水和乙醇中结晶出来的小檗碱为黄色长针状结晶，含5个结晶水，在100℃干燥时即失去结晶水，转为棕黄色，加热至110℃时，其颜色加深变暗色。
Mp.145℃至160℃即分解。
OCH3H3NHOCH3OH小檗胺H3COHCH3游离小檗碱能缓缓溶于水，在热水及热乙醇中易溶，而在冷乙醇中溶解度为1：100，但难溶于苯、氯仿、丙酮等溶剂。
醇式和醛式小檗碱则具有一般生物碱的通性，难溶于水，易溶于有机溶剂。
小檗碱的盐类除中性硫酸盐、磷酸盐外，一般在水中的溶解度均较小。
小檗碱及其盐类在水、乙醇中的溶解度如下表：小檗碱还能与苯、氯仿、丙酮等溶剂结合成分子缩合物，有完好的结晶状态，可作为小檗碱的识别之用。
黄连中小檗碱的提取和鉴定
化工与材料工程学院综合与设计性化学实验实验类型：设计型实验题目：黄连中小檗碱的提取和鉴定班级：学号：姓名：实验日期：2010-10-29【关键词】黄连；盐酸小檗碱；提取工艺；溶剂回流法；化学检识檗碱前言黄连为毛茛科黄连属植物黄连、三角叶黄连或云连的干燥根茎。
《中国药典》中黄连和盐酸小檗碱一直有收载，具有抗病原微生物、抗腹泻、抗炎和免疫促进以及降血压、抗心律失常、降血糖等药理作用，用于急性肠胃炎、口舌生疮、烧烫伤、心率失常、高血压、糖尿病等疾病的治疗。
黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱、掌叶防己碱、黄连碱等。
其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。
小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。
一实验目的1、通过对黄连中小檗碱的提取，掌握一般天然产物的提取技术。
2、通过对小檗碱的鉴定，掌握一般生物碱的鉴别方法。
3、熟悉握小檗碱的化学性质和鉴定方法。
4、通过查阅资料并结合所学知识，初步了解并完成实验方案的设计二实验原理小檗碱为黄色针状结晶，加热至110℃变为黄棕色，于160℃分解。
盐酸小檗碱加热至220℃分解，生成红棕色的小檗红碱。
mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，但在热水中都比较容易溶解。
小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。
O ONHCHOOOOCH3OCH3季铵式（红棕色）醇式（黄色）醛式（黄色）小檗碱属于季铵碱，其游离型在水中的溶解度最大。
而它们的盐类以含氧酸盐在水中溶解度较大，不含氧酸盐难溶于水，其盐酸盐在水中溶解度则更小。
利用此性质结合盐析法，可从黄连中提取小檗碱。
三实验仪器与试剂1 仪器和材料100ml 圆底烧瓶冷凝管 50ml,100ml 烧杯各一个 10ml,25ml量筒各一个铁架台1个布氏漏斗滤纸滴管一个蒸发皿小试管3个2 试剂与原料黄连粉（6.0g）体积分数为95%的乙醇（60ml）浓盐酸蒸馏水碘化铋钾试剂碘化钾试剂硅钨酸试剂四实验内容（操作步骤）1 提取与分离黄连粗粉6.0g，冷凝回流1.5h（现象：黄连粉溶解溶液微沸呈红棕色）加热蒸发红色糖浆状物质加1%的醋酸40ml 加热溶解趁热抽滤滤液滤渣加浓盐酸至溶液浑浊（pH=1）静置冷却析出黄色针状晶体水洗2-3次精制小檗碱晶体(注：由于时间有限最后未能得到析出的晶体)2 性质与鉴定由于没能的到晶体所以取少量小檗碱溶液分成三份分别加入三支试管中：再向第一支试管加入1-2滴碘化铋钾试剂，振荡向第二支试管加入1-2滴碘化钾试剂，振荡向第三支试管加入1-2滴硅钨酸试剂，振荡鉴别试验现象记录：五. 实验结果5.1 收率：由于本实验的时间有限，最终未能得到小檗碱晶体，无法算收率5.2性质与鉴定结果：六讨论1．盐酸小檗碱在热水、热乙醇中溶解度较大，在冷水、冷乙醇中溶解度小，所以本实验在水浴中加热回流，另外可以加入NaCl促进其析出结晶。
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究
收稿日期#&$2 &$ $$修订日期#&$2 &* $! 基金项目北方民族大学校级科研项目'#&$2l];?a&#(+北方民族大学引进人员科研启动项目'!!&&0&#*&&(+北方民族大学植物性农产
品贮藏与加工重点实验室项目'#&$%8@,aK&&#( 通信作者 :B.-LF!NG/-FLD!#$"0'OG.
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黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究
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'$'北方民族大学生物科学与工程学院#银川)*&&#$+ #'宁夏特殊生境微生物资源开发与利用重点实验室#银川)*&&#$(
由真菌和细菌引起的植物病害严重影响作物的 产量和 品 质#是 造 成 巨 大 经 济 损 失 的 主 要 原 因 之 一)$#*%喷施化学 抑 菌 剂 是 目 前 控 制 病 害 采 取 的 主 要手段#但存在食品安全$环境污染以及易诱导病原 物产生ห้องสมุดไป่ตู้性等问题%因此#开发新型$安全$环保的 农业病 害 防 控 技 术 是 当 前 生 产 中 亟 待 解 决 的 问 题)0*%已有研究证实植物多种次生代谢产物对病害 具有良好的抑制作用)!**#通过植物获取抑菌成分用 于预防和控制农业病害的发生#具有低毒$安全$环
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天然药物盐酸小檗碱的分离提取
实训一天然药物盐酸小檗碱的分离提取小檗碱又称黄连素，是在高等植物中分布比较广泛的、有明显生理活性的化学成分。
主要存在于黄连、黄柏、三颗针等中草药中。
黄连中小檗碱含量最高，可达10%左右，以盐酸盐的形式存在于黄连中。
小檗碱具有显著的抗微生物、抗原虫的作用，临床用其盐酸盐（即盐酸黄连素）治疗细菌性感染如痢疾、急性肠胃炎、呼吸道感染等症。
小檗碱属异喹啉类生物碱，自水和乙醇中结晶出来的小檗碱为黄色长针状结晶，含5个结晶水，在100℃干燥时即失去结晶水，转为棕黄色，加热至110℃时，其颜色加深变暗色，45℃-160℃即分解。
其中以季铵碱式结构状态最稳定，可以离子化呈强碱性，用过量的氢氧化钾处理小檗碱盐类时，可转变为醇式叔胺碱和醛式仲铵碱，季铵碱式小檗碱可离子化，故有一定亲水性，因此，游离小檗碱能缓缓溶于水，在热水及热乙醇中易溶，而在冷乙醇中溶解度为1：100，但难溶于苯、氯仿、丙酮等溶剂。
醇式和醛式小檗碱则具有一般生物碱的通性，难溶于水，易溶于有机溶剂。
小檗碱的盐类除中性硫酸盐、磷酸盐外，一般在水中的溶解度均较小。
小檗碱还能与苯、氯仿、丙酮等溶剂结合成分子缩合物，有完好的结晶状态，可作为小檗碱的识别之用。
如用过量的氢氧化钠处理小檗碱盐类，使其转变为醇式小檗碱，就能与丙酮缩合成结晶型的丙酮小檗碱。
黄连素被硝酸等氧化剂氧化，转变为樱红色的氧化黄连素。
黄连素在强碱中部分转化为醛式黄连素，在此条件下，再加几滴丙酮，即可发生缩合反应，生成丙酮与醛式黄连素缩合产物的黄色沉淀。
一、实验目的1、掌握从中草药中提取、精制生物碱的方法；2、熟悉盐酸小檗碱的化学性质与鉴定方法。
3、熟悉用层析色谱法检识天然药物的基本操作。
二、实验原理根据小檗碱的盐酸盐在在水中的溶解度小（1：500，微溶于冷水，易溶于沸水，几乎不溶于冷乙醇、氯仿、石油醚），而小檗碱的硫酸盐在水中的溶解度大（1:30溶于冷水，溶于乙醇）。
因此，从植物原料中提取小檗碱时常用稀硫酸水溶液浸泡或渗漉，先将药材中的小檗碱转变为硫酸盐用热水提出；然后向提取液中加入氯化钠盐析，再加盐酸，使其由硫酸盐转化为盐酸盐，结合氯化钠的盐析作用降低其在冷水中的溶解度，此时，盐酸小檗碱从溶液中析出，从而制得盐酸小檗碱。
盐酸小檗碱的提取实验报告
盐酸小檗碱的提取实验报告一、实验目的本次实验旨在从黄连中提取盐酸小檗碱，并对提取过程和结果进行分析和评估，以掌握盐酸小檗碱的提取方法和相关实验技能。
二、实验原理盐酸小檗碱是一种季铵型生物碱，能溶于水，较易溶于热水和热乙醇，难溶于乙醚、氯仿等有机溶剂。
本实验采用溶剂提取法，利用盐酸小檗碱在不同溶剂中的溶解性差异，将其从黄连中分离出来。
三、实验材料与仪器1、实验材料黄连（＿____g）、浓盐酸、乙醇（95%）、石灰乳等。
2、实验仪器电子天平、圆底烧瓶（＿____mL）、回流冷凝管、布氏漏斗、抽滤瓶、蒸发皿、玻璃棒、烧杯（＿____mL、＿____mL）、容量瓶（＿____mL）、移液管（＿____mL）、pH 试纸等。
四、实验步骤1、黄连的预处理将黄连粉碎，过_____目筛，备用。
2、提取称取_____g 黄连粉末，置于圆底烧瓶中，加入_____mL 95%乙醇，装上回流冷凝管，在水浴上加热回流_____小时。
回流结束后，趁热过滤，滤液置于烧杯中。
3、酸化向滤液中滴加浓盐酸，调节 pH 值至_____，此时有黄色沉淀析出。
4、过滤将上述混合液用布氏漏斗抽滤，得到黄色沉淀。
5、重结晶将沉淀用少量蒸馏水洗涤至中性，然后溶于适量热乙醇中，趁热过滤。
滤液放置冷却，使盐酸小檗碱结晶析出。
再次抽滤，得到盐酸小檗碱的结晶。
6、干燥将结晶置于干燥箱中，在_____℃下干燥至恒重，得到盐酸小檗碱成品。
五、实验结果与分析1、产量经过干燥后，得到盐酸小檗碱成品的质量为_____g。
2、纯度通过化学分析方法（如熔点测定、薄层色谱分析等），对所得盐酸小檗碱的纯度进行检测，结果表明其纯度为_____%。
3、结果分析（1）产量方面，影响盐酸小檗碱产量的因素可能包括黄连的质量、提取时间、乙醇用量等。
如果产量较低，可能是提取不完全，需要进一步优化实验条件。
（2）纯度方面，若纯度未达到预期，可能是在提取过程中引入了杂质，或者重结晶的操作不够完善。
盐酸小檗碱的合成路线
盐酸小檗碱的合成路线
盐酸小檗碱（Berberine Hydrochloride）是一种重要的天然生物碱，具有多种药理活性，包括抗菌、抗炎、抗癌等作用。
下面是盐酸
小檗碱的合成路线。
盐酸小檗碱的合成通常从天然植物黄连中提取获得，然后通过一
系列化学反应合成盐酸小檗碱。
1. 提取黄连中的黄连碱：将黄连切碎，用乙醇适量润湿后，加入
醋酸乙酯，进行浸提。
然后将提取液进行过滤、浓缩，得到固体。
用
乙醚反复洗涤固体，得到黄连碱。
2. 重结晶黄连碱：将黄连碱溶解在苯和水的混合溶剂中，加入适
量盐酸搅拌均匀，然后用稀盐酸进行重结晶，经过过滤、干燥，得到
纯净的黄连碱。
3. 化学反应合成盐酸小檗碱：将黄连碱溶解在稀盐酸中，用氮气
吹干燥。
然后加入亚硝酸钠溶液，使其反应生成亚硝基黄连碱。
随后，加入苯甲醛溶液和氨水，进行氧化加成反应，生成季铵盐。
4. 转化为盐酸小檗碱：将季铵盐溶液用稀盐酸进行酸化，得到盐
酸小檗碱。
经过过滤、洗涤、干燥，最后得到纯净的盐酸小檗碱。
这是盐酸小檗碱的基本合成路线。
总结起来，就是首先从天然植
物黄连中提取黄连碱，然后通过一系列化学反应转化为盐酸小檗碱。
这个合成过程需要一定的实验条件和化学试剂，并且需要经过精细的
操作和纯化，以获得高纯度的盐酸小檗碱。
这个合成路线是经过多年
的研究和优化得出的，为盐酸小檗碱的生产提供了可行的途径。
实验三黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定
实验三黄连中盐酸⼩檗碱的提取分离与鉴定实验三黄连中盐酸⼩檗碱的提取分离与鉴定⼩檗碱⼜称黄连素，是在⾼等植物中分布⽐较⼴泛的、有明显⽣理活性的化学成分。
主要存在于黄连、黄柏、三颗针等中草药中。
⼩檗碱具有显著的抗微⽣物、抗原⾍的作⽤，临床⽤其盐酸盐（即盐酸黄连素）治疗细菌性感染如痢疾、急性肠胃炎、呼吸道感染等症。
黄连为⽑茛科黄连属植物黄连（Coptis chinensis Franch 。
），三⾓叶黄连（C 。
deltoidea C 。
Y 。
Cheng et Hsiao ）或云连（C 。
teetoides C 。
Y 。
Cheng ）的根茎，含有⼩檗碱(1)、巴马汀(2)、黄连碱(3)、甲基黄连碱(4)、药根碱(5)等⽣物碱，其中以⼩檗碱含量最⾼，可达10%左右，⼩檗碱以盐酸盐的形式存在于黄连中。
⽬前制药⼯业提取⼩檗碱主要以三颗针为原料。
三颗针来源于⼩檗科⼩檗属（Berberis ）多种植物，其根⽪含⽣物碱约2%，主要含⼩檗碱、⼩檗胺、药根碱、巴马汀等⽣物碱。
N +OH ￡-R 1O OR 4OR 3R 2OR 5R 1 R 2 R 3 R 4 R 5CH 3 CH 3 HCH 3 CH 3 CH 3 CH 3 H H CH 3 H CH 3 CH 3 CH 3 HCH 212345CH 2CH 2CH 2CH 2⼩檗碱 (Berberine)属异喹啉类⽣物碱，⾃⽔和⼄醇中结晶出来的⼩檗碱为黄⾊长针状结晶，含5个结晶⽔，在100℃⼲燥时即失去结晶⽔，转为棕黄⾊，加热⾄110℃时，其颜⾊加深变暗⾊。
Mp.145℃⾄160℃即分解。
N HH 3NO CH 3O CH 3O O HON HH 3COC H 3⼩檗胺游离⼩檗碱能缓缓溶于⽔，在热⽔及热⼄醇中易溶，⽽在冷⼄醇中溶解度为1：100，但难溶于苯、氯仿、丙酮等溶剂。
醇式和醛式⼩檗碱则具有⼀般⽣物碱的通性，难溶于⽔，易溶于有机溶剂。
⼩檗碱的盐类除中性硫酸盐、磷酸盐外，⼀般在⽔中的溶解度均较⼩。
黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定
实验七黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连（coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。
黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。
其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。
小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。
[目的要求]1．学习和掌握水溶性生物碱的提取方法。
2．学习和掌握生物碱的柱色谱分离方法。
3．学习和掌握生物碱的化学检识及薄层色谱的鉴定方法。
[实验原理]小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。
盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。
小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。
O ONHCHOOOOCH3OCH3季铵式（红棕色）醇式（黄色）醛式（黄色）N+OOOCH33小檗碱（黄连素）掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶，溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、乙醚等有机溶剂。
盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶，并有强烈的黄色荧光。
易溶于热水或热乙醇，在冷水中的溶解度也比盐酸小檗碱大。
N+H3COH3COOCH3OCH3掌叶防己碱本实验是利用小檗碱和掌叶防己碱的硫酸盐在水中溶解度大的性质，用硫酸水提取出来总生物碱，再利用其盐酸盐难溶于水及盐析作用，使生物碱盐析出，以除去水溶性杂质。
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究概述
黄连是一种常用的中药材，具有清热解毒、泻火生津、消肿止痛等功效。
其中的盐酸小檗碱是黄连主要的有效成分之一，具有广谱的抑菌活性，可用于治疗各种感染性疾病。
本文旨在通过对黄连中盐酸小檗碱的提取、纯化和抑菌活性研究，探讨其在临床中的应用前景。
提取方法
1. 首先将黄连研成细末，加入适量的水或乙醇中搅拌均匀，得到黄连浸膏。
2. 将黄连浸膏过滤，去除杂质，得到黄连提取液。
3. 将黄连提取液用醋酸铅沉淀黄连素，将上清液过滤后加入盐酸，使黄连素转化为盐酸小檗碱。
4. 将盐酸小檗碱用乙醇重结晶，得到纯净的盐酸小檗碱晶体。
纯化方法
2. 用溶剂萃取和凝胶层析等方法对中和盐酸小檗碱进行进一步分离纯化。
抑菌活性研究
1. 实验室选取一系列常见的病原微生物，包括金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌等，通过体外实验检测盐酸小檗碱的抑菌活性。
2. 对盐酸小檗碱的最小抑菌浓度、抑菌圈直径等指标进行测量。
结果分析
实验结果显示，盐酸小檗碱具有广谱的抑菌活性，对上述各种细菌均有明显的抑制作用。
在最小抑菌浓度和抑菌圈直径方面，盐酸小檗碱的抑菌效果均较优秀。
此外，研究还发现，盐酸小檗碱对革兰氏阳性菌的抑制作用更强，说明其对此类微生物具有比较强的敌菌活性。
结论。
黄连中小檗碱的提取和鉴定（设计性实验）
黄连中小檗碱的提取和鉴定（设计性实验）实验二黄连中小檗碱的提取和鉴定（设计性实验）一、前言黄连为毛茛科黄根茎含多种生物碱, 主要是小檗碱, 又称黄连素约为５%～８%, 其次为黄连碱、甲基黄连碱、掌叶防己碱（巴马亭）、药根碱、非洲防己碱．尚含黄柏酮、黄柏内酯、木兰花碱、阿魏酸等．叶含小檗碱１.４%～２.８%．此外, 黄连中还含有多种微量元素．从三角叶黄连中分离鉴定了黄连碱、小檗碱、掌叶防己碱和药根碱．连属植物黄连、三角叶黄连或云连的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。
黄连中有效成分是生物碱，其中小檗碱含量最高。
小檗碱对溶血性链球菌，金黄色葡萄球菌，淋球菌和弗氏、志贺氏痢疾杆菌等均有抗菌作用，并有增强白血球吞噬作用，对结核杆菌、鼠疫菌也有不同程度的抑制作用，对大鼠的阿米巴菌也有抑制效用。
小檗碱在动物身上有抗箭毒作用，并具有末梢性的降压及解热作用。
小檗碱的盐酸盐（俗称盐酸黄连素已广泛用于治疗胃肠炎、细菌性痢疾等，对肺结核、猩红热、急性扁桃腺炎和呼吸道感染也有一定疗效。
中医常用黄连、黄柏、三颗针及十大功劳等作清热解毒药物，其中主要有效成分即小檗碱。
二、目的要求1.通过对黄连中小檗碱的提取，掌握天然产物的提取技术。
2.通过对小檗碱的鉴定，掌握一般生物碱的鉴别方法。
3.通过查阅资料并结合所学知识，初步了解并完成实验方案的设计。
三、实验原理黄连主含小檗碱，含量为5.20%-7.69%，还含黄连碱，甲基黄连碱、掌叶防己碱等，由于它们有相似结构，常统称为黄连生物碱。
小檗碱异名为黄连素，在水或稀乙醇中结晶所得小檗碱为黄色针状结晶。
游离小檗碱微溶于冷水，易溶于热水，几乎不溶于冷乙醇、氯仿和乙醚。
小檗碱和大分子有机酸生成的盐在水中的溶解度都很小。
小檗碱有季铵式、醛式、醇式，3种能互变的结构式，以季铵式最稳定。
小檗碱的盐都是季铵盐，于硫酸小檗碱的水溶液中加入计算量的氢氧化钡，生成棕红色强碱性游离小檗碱，易溶于水，难溶于乙醚，称为季铵式小檗碱。
黄连生药中盐酸小檗碱提取工艺的优选
黄连生药中盐酸小檗碱提取工艺的优选
背景介绍
盐酸小檗碱是一种具有重要药理活性的生物碱，可以广泛应用于医学、农业等领域。
而黄连是盐酸小檗碱的主要来源之一，其含盐酸小檗碱的量与品质对提取工艺有着至关重要的影响。
目的和意义
本文旨在探讨黄连生药中盐酸小檗碱的提取工艺，在优选提取工艺的同时，还可为进一步研究盐酸小檗碱提供参考。
研究内容
1.实验材料和方法
本实验以黄连粉末为原料，用超声波辅助萃取技术进行提取。
以提取出的总碱含量和含盐酸小檗碱的含量为考核指标，通过单因素试验和正交试验进行工艺优选。
2.实验结果和分析
通过单因素试验，考察了提取温度、乙醇浓度、固液比、萃取时间等因素对提取效果的影响。
结果表明，提取温度、乙醇浓度、萃取时间对提取效果有着显著影响，而固液比对提取效果的影响不显著。
通过正交试验，构建了四因素三水平的正交实验设计，并对数据进行分析。
结果表明，最优提取条件为提取温度 60℃、乙醇浓度 70 %、固液比1:25、萃取时间 30 min，此时盐酸小檗碱的提取率为 4.76%，和总碱含量达到最大值。
3.结论
通过实验，得出了黄连生药中盐酸小檗碱提取工艺的最优条件，同时也得出了一些有关提取工艺的结论。
此外，对于提取工艺的优化和完善也提供了参考。
总结
本文探讨了黄连生药中盐酸小檗碱的提取工艺，并通过实验得出了最优条件。
在进一步研究和实践中，可继续完善和提高盐酸小檗碱的提取效果，为其广泛应用于医学、农业等领域提供更好的条件和效益。
黄连中的盐酸小檗碱的提取、分离及分离物的含量测定研究
黄连中的盐酸小檗碱的提取、分离及分离物的含量测定研究diarfhea—Dred0minantirritablebowelsyndromeJGastroentero1Hepato1.2000,127:1695—1703[5】候晓华,张锦坤,易碎琼,等.腹泻型肠易激惹综合症粪便茵群变化【J】.临床消化病杂志.1990,2(1):72[6】MurrayCD.FlyunJ,RatcliffeL,eta1.Effectofacutephysica1andpsycho1ogica1stressongutautonomicinnervationinirritab1ebowe1syndromeGastroenterology.2004.127(6):1695—1703.[7】Lesbros-Pantof1ickovaD,MichettiP,eta1.Meta—analysis:Thetreatmentofirritablebowe1syndrome[J】.A1imentPharmacolTher.2004,20(11—12):1253—1269收稿日期:2006—1卜17黄连中的盐酸小檗碱的提取,分离及分离物的含量测定研究冀满丰深圳市宝安区龙华人民医院药剂科广东深圳518109摘要目的探讨高纯度盐酸小檗碱的可行性.方法先将存在于黄连中的盐酸小檗碱转化为溶解性较大的硫酸小檗碱提取出来,然后再将其转化为盐酸小檗碱粗品,进一步用薄层色谱法分离得到纯度相对较高的盐酸小檗碱,再用柱层析法分离纯化,经乙醇反复多次重结晶,得到高纯度的盐酸小檗碱,采用高效液相色谱法测定盐酸小檗碱含量.蛄果本方法提纯得到的盐酸小檗碱纯度迭97%以上.蛄论本方法操作简单,实用,重现性好,可用于大批量生产及合理利用资源提供科学依据.关键词黄连盐酸小檗碱提取分离HPLC Studyontheextractionandseparationanddeterminationof berberiRehydrochiorideinRhizomacoptidisJIManfengDepartmentofPharmacy,LonghuaPeople'sHospitalofBaoan,Shenzhen518109 AbstractObjectiveToseekthefeasibi1ityofobtaininghighlYpureberberinehydrochloride. MethodsBerberinehydrochlorideinRhizomacoptidiswasturnedintoberberinesulphuricof largedissolubi1ity,andthenwasturnedintocrudeberberinehydrochloride.Relativehighlypureb erberinehydrochloridewasseparatedbyTLCfurther.Andberberinehydrochloridewasseparatedby columnchr0mat0graphy.Finally,thehighlypureberberinehydrochloridewasobtainedbyseveralcr ystalIi—zationsinethanol,anditscontentwasmeasuredbyHPLC.ResultsThepurityofberberinehyd rochlo一75国际医药卫生导报2006年第12卷第24期(半月刊) rideobtainedinthismethodreachover97%.Conclusionthismethodischaracterizedbyconv enience,practicality,goodrepr0ducibility,whichcanbeappliedtomassproductionandsuppliedforre asonableexpl0itati0nofresource. KevwordsRhizomacoptidisberberinehydrochlorideextractionseparationHPLC中图分类号:R284.2文献标识码:A文章编号:1007-1245(2006)24—0076-03黄连是毛莨科植物黄连CoptiSChinensiSFranch或同属他种植物的根茎,是一种重要且用途广泛的中药,具有清热解毒等功效,其主要成分是生物碱,文献报道过分离方法操作繁琐,成本高,且选用的展开系统多为苯,甲醇等致癌物质,笔者经多年实践,改进以上的各种不完善之处,进一步简化其操作过程,获得纯度较高的盐酸小檗碱.1试剂及材料黄连(批号:O6O326)购于广州市药材公司;盐酸小檗碱对照品盐酸小檗碱(批号:l1O7l3—2OO2O8)中国药品生物制品检定所;三用紫外分析仪;硅胶G,柱层析硅胶(青岛海洋化工厂):乙腈,甲醇为色谱纯,其他试剂均为分析纯.2方法2.1提取称取黄连粗粉3O克,加O.3%H,SO200ML,超声波提取lh,棉花过滤,加石灰乳调PH至1O以上,过滤,滤液用稀盐酸调PH至3,加入含盐量约7%食盐,搅拌使溶解,放置析晶l5分钟,抽滤,滤渣用蒸馏水洗3次,得粗品.2.2TLC分离取上述提取的粗品用乙醇适量溶解,备用.硅胶G,0.3%CMC—NA按1:3.5比例研磨均匀手工铺板,板的规格为lO*20cm,105"C活化1h,干燥器中放置一晚, 带状点样,以正丁醇一冰乙酸一水(7:1:1)展开高度约为12cm,取出,晾干,在紫外灯下(365nm)观察,在与对照品盐酸小檗碱对应的色带处用铅笔圈出来, 将该色带刮下来,置三角瓶中,用乙醇洗至硅胶粉无色76为止,然后将乙醇液浓缩至一定体积(备用).2.3柱层析分离将一根直径为3em,长约为40am的层析柱固定于铁架台上,称取柱层析硅胶(100—200目),加适量硅胶与上述TLC分离的样品拌匀,挥干,以乙酸乙酯洗脱,收集鲜黄色的色带,流份置于水浴上浓缩至一定体积,用塑料薄膜封口,放置析晶,然后收集微量结晶,再用乙醇重结晶几次,得到纯度较高的样品.2.4样品的含量测定..2.4,l色谱条件:色谱柱为kromasilcl8柱(25OmmX4.6mm,5m);流动相为:乙腈一O.1%磷酸溶液(35:65);检测波长346nm{柱温:室温;流速:lml/min;进样量为2Ol.在此条件下测定盐酸小檗碱,盐酸小檗碱峰与其他峰达到基线分离.2.4.2线性关系考察:精密称取干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品适量,甲醇溶解并制成O.098mg/ml的对照品溶液,分别精密吸取O.1,O.2,O.4,O.8,1.6,3.2ml对照品溶液置5ml容量瓶中,并用甲醇定容,摇匀,分别进样2Ol,记录色谱图和峰面积,以峰面积积分值y为纵坐标,浓度x为横坐标,绘制标准曲线,得线性回归方程:y=1.40XlO~x+5.47X10,r=O.9993,线性范围是:O.0392~1.2544g.2.4.3精密度试验:取同一供试品溶液重复进样6次,每次2Ol,测定峰面积,盐酸小檗碱6次峰面积测定结果的RSD为O.99%,表明方法精密度良好.2.4.4重复性试验:按供试品溶液制各项下制各6份供试品溶液,分别进样2Ol.测定峰面积,计表1加样回收率试验结果国际医药卫生导报2Oo6年第12卷第24期(半月刊)A盐酸小檗碱标准品B盐酸小檗碱样品C盐酸小檗碱阴性图1高效液相色谱图算盐酸小檗碱含量,6次测定结果的RSD为1.13,表明方法重复性好.2.4.5回收率试验:精密称取盐酸小檗碱结晶50mg,置于1Om1量瓶中,加甲醇至刻度,得浓度为5mg/ml的溶液.精密移取lml置5ml容量瓶中,用甲醇定容得浓度为1mg/ml的溶液,再精密移取该溶液lml,加入浓度为0.8lmg/ml,1.Omg/ml,1.2mg/ml的盐酸小檗碱对照品溶液1m1,摇匀,测定盐酸小檗碱的峰面积,并计算加样回收率,结果见表1.2.4.6稳定性试验:取同一供试品溶液,按上述色谱条件于0,1,2,4,8,12,24h分别进样2Ou1,测定盐酸小檗碱的峰面积,结果RSD=1.O8,表明供试品溶液在24h内稳定.2.4.7样品含量测定:称取"2.3"项下的盐酸小檗碱样品2mg,置25m1容量瓶中,用甲醇定容,摇匀,进样2Ou1,进样3次,以三次测定结果的平均值作为含量测定值.结果样品平均含量为97.2%(RSD=1.18%).3讨论本实验用稀硫酸为溶剂,将药材中盐酸小檗碱转为硫酸小檗碱,利用超声波的高频率振动,提高其有效成分的提取率,用石灰乳使提取液呈碱性,从而除去提取液中的鞣质,粘液质及过量的硫酸,用TLC法分离纯化盐酸小檗碱,但经处理后得到的盐酸小檗碱经TLC检验发现还有少许杂质,故利用柱层析法将其进一步分离纯化,用乙酸乙酯为洗脱剂,样品纯度得到进一步提高,然后再用乙醇重结晶几次,最后得到精品,经HPLC检测,纯度达到97.2%,本方法简单实用,操作性强,成本低,毒性小,特别适合推广大批量生产,如进行大批量生产,也可去掉TLc那步,用多一次柱层析代替估计效果更佳.参考文献【1】苗明三,李振国.现代实用中药质量控制技术【M】. 北京:人民卫生出版社,2000:869【2】黄红中.中药师手册【M】.广州:羊城晚报出版社, 2002:365收稿日期:2006-ll—l677。
实验三 黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定
实验三黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定小檗碱又称黄连素，是在高等植物中分布比较广泛的、有明显生理活性的化学成分。
主要存在于黄连、黄柏、三颗针等中草药中。
小檗碱具有显著的抗微生物、抗原虫的作用，临床用其盐酸盐（即盐酸黄连素）治疗细菌性感染如痢疾、急性肠胃炎、呼吸道感染等症。
黄连为毛茛科黄连属植物黄连（Coptis chinensis Franch。
），三角叶黄连（C。
deltoidea C。
Y。
Cheng et Hsiao）或云连（C。
teetoides C。
Y。
Cheng）的根茎，含有小檗碱(1)、巴马汀(2)、黄连碱(3)、甲基黄连碱(4)、药根碱(5)等生物碱，其中以小檗碱含量最高，可达10%左右，小檗碱以盐酸盐的形式存在于黄连中。
目前制药工业提取小檗碱主要以三颗针为原料。
三颗针来源于小檗科小檗属（Berberis）多种植物，其根皮含生物碱约2%，主要含小檗碱、小檗胺、药根碱、巴马汀等生物碱。
R1 R2 R3 R4 R51R1OR2OR5£-OR3OR4+3 CH3 HCH2CH3 CH3 CH3 CH3 HCH2CH2CH2CH23H CH3 CH3 CH3 H2345小檗碱 (Berberine)属异喹啉类生物碱，自水和乙醇中结晶出来的小檗碱为黄色长针状结晶，含5个结晶水，在100℃干燥时即失去结晶水，转为棕黄色，加热至110℃时，其颜色加深变暗色。
Mp.145℃至160℃即分解。
OCH3H3NHOCH3OH小檗胺H3COHCH3游离小檗碱能缓缓溶于水，在热水及热乙醇中易溶，而在冷乙醇中溶解度为1：100，但难溶于苯、氯仿、丙酮等溶剂。
醇式和醛式小檗碱则具有一般生物碱的通性，难溶于水，易溶于有机溶剂。
小檗碱的盐类除中性硫酸盐、磷酸盐外，一般在水中的溶解度均较小。
小檗碱及其盐类在水、乙醇中的溶解度如下表：小檗碱还能与苯、氯仿、丙酮等溶剂结合成分子缩合物，有完好的结晶状态，可作为小檗碱的识别之用。
黄连中盐酸小檗碱的分离提纯
黄连中盐酸小檗碱的分离提纯黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连（coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。
黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。
其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。
小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。
[目的要求]1．学习和掌握水溶性生物碱的提取方法。
2．学习和掌握生物碱的柱色谱分离方法。
3．通过查阅资料并结合所学知识，初步了解并完成实验方案的设计。
[实验原理]小檗碱是一种季铵碱，为黄色针状结晶，Mp.145℃(乙醚),游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂。
其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。
冷水溶解度分别为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。
利用这些特性提取盐酸小檗碱常用的方法有酸水法、石灰乳法、醇提法、超声提取法等。
从生产成本、方法可操作性、盐酸小檗碱的提取率和制备的精度考虑，我们采用传统的酸水浸渍法。
【仪器和试剂】1.仪器与材料：分析天平，1500mL平底烧瓶，酒精灯，石棉网，烧杯若干，铁架台1个，漏斗1个，滤纸若干，胶头滴管若干，玻璃棒，抽滤设备如真空泵、抽滤瓶、布氏漏斗托(密封圈)、真空管(橡胶管)、滤纸、布氏漏斗，氧化铝柱层析器材等。
2. 试剂与原料：黄连粉50g，0.5% H2SO4溶液，浓盐酸，蒸馏水，固体工业食盐等。
【实验过程】1、精制盐酸小檗碱a、精密称取黄连粉50g于1500ml平底烧瓶，用0.5% H2SO4溶液1000 ml浸泡24h，虹吸上清液；b、药渣再用 0.5% H2SO4溶液 1000 ml浸泡12h，虹吸上清液，同法共收集浸提液4000ml；c、全部上清液中加入石灰乳调 pH 8～9，过滤，除去沉淀；d、滤液中加浓盐酸调结pH 1～2，入10%( W/V )固体工业食盐，搅拌溶解，冷藏过夜；e、取沉淀，少量冷水冲洗，加热水溶解，趁热过滤，滤液加浓盐酸调结pH 1～2，用 10% ( W/V )固体工业食盐处理工艺，冷藏过夜；f、取沉淀，用少量蒸溜水洗至 PH 为5，在60℃以下真空干燥，再重结晶，即得盐酸小檗碱精品。
黄连中小檗碱的提取
黄连中小檗碱的提取、精制、鉴定及含量测定黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连（coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。
黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。
其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。
小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。
一、目的要求1、从黄连中提取小檗碱的原理和方法，以及小檗碱精制方法。
2、学习渗漉法提取天然产物的方法。
3、熟悉握小檗碱的化学性质和鉴定方法。
二、实验原理小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。
盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。
小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。
季铵式（红棕色）醇式（黄色）醛式（黄色）小檗碱（黄连素）掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶，溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、乙醚等有机溶剂。
盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶，并有强烈的黄色荧光。
易溶于热水或热乙醇，在冷水中的溶解度也比盐酸小檗碱大。
掌叶防己碱本实验是利用小檗碱属于季铵碱，其游离型在水中的溶解度最大。
而它们的盐类以含氧酸盐在水中溶解度较大，不含氧酸盐难溶于水，其盐酸盐在水中溶解度则更小。
利用此性质结合盐析法，可从黄连中提取小檗碱。
再利用两种生物碱极性不同，采用柱色谱分离。
21实验三黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定
1.分别指出装渗漉筒及湿法铺板应注意哪些问题？
2.分别指出渗漉法及酸溶碱沉法应注意哪些问题?
教学手段
演示+实验
参考资料
1.吴剑峰，王宁．天然药物化学，北京：人民卫生出版社，2009.01
2.刘新，张须学．天然药物化学，西安：第四军医大学出版社，2007年
3.吴剑峰．天然药物化学，北京：人民卫生出版社，2003年
游离小檗碱能缓缓溶于水，在热水及热乙醇中易溶，而在冷乙醇中溶解度为1：100，但难溶于苯、氯仿、丙酮等溶剂。醇式和醛式小檗碱则具有一般生物碱的通性，难溶于水，易溶于有机溶剂。
小檗碱的盐类除中性硫酸盐、磷酸盐外，一般在水中的溶解度均较小。小檗碱及其盐类在水、乙醇中的溶解度如下表：
名称
水
乙醇
小檗碱
1：20
1.润湿
取黄连粗粉50g置烧杯中，加0.3%硫酸约10ml润湿，放置30
min
2.装筒（分次装入渗漉筒并排气）
3.浸渍
用0.3%硫酸浸泡过夜
4.渗漉
收集9—10倍量的渗漉液
等待空余时间：
10g硅胶G + 30ml(0.8 % CMC-Na)研匀，铺板
（二）分离
1.取渗漉液，加40% NaOH调PH至11～12，放置过夜；
目前制药工业提取小檗碱主要以三颗针为原料。三颗针来源于小檗科小檗属（Berberis）多种植物，其根皮含生物碱约2%，主要含小檗碱、小檗胺、药根碱、巴马汀等生物碱。
小檗碱(Berberine)属异喹啉类生物碱，自水和乙醇中结晶出来的小檗碱为黄色长针状结晶，含5个结晶水，在100℃干燥时即失去结晶水，转为棕黄色，加热至110℃时，其颜色加深变暗色。Mp.145℃至160℃即分解。
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究作者：屈欢黄雪王军节来源：《植物保护》2020年第02期摘要为了探究盐酸小檗碱在植物病原真菌方面的抑制作用，以黄连根粉为材料，采用酸水法提取和乙醇重结晶获得盐酸小檗碱纯品，采用生长速率法研究了盐酸小檗碱对常见植物病原菌的抑制活性。
结果表明，盐酸小檗碱的提取率为3.3%，经高效液相色谱法测得其含量为93.56%;抑菌活性试验表明，盐酸小檗碱在100 μg/mL时对玉米大斑病菌的抑制率达99.9%，EC50為8.20 μg/mL，表现出比药剂对照噁霉灵和百菌清更高的抑制活性;进一步的试验表明，与噁霉灵及百菌清相比，盐酸小檗碱对玉米大斑病菌的抑制作用具有持效期长的特点。
关键词盐酸小檗碱; 提取纯化; 含量测定; 抑菌活性中图分类号： S 482.292 文献标识码： A DOI： 10.16688/j.zwbh.2019020Abstract The aim of this study is to measure the antifungal activity of berberine hydrochloride. The root powder of Rhizoma Coptidis was used as material to obtain berberine hydrochloride， the purified product of which was successfully obtained through extraction by using acid-water method and recrystallization with ethanol， and the antifungal activity of berberine hydrochloride against phytopathogenic fungi was investigated using the mycelial growth rate method. The results showed that the extraction rate of berberine hydrochloride was 3.3% and its content was 93.56% measured by HPLC. The results of biological assay indicated that berberine hydrochloride exhibited an excellent antifungal activity against Exserohilum turcicum at the concentration of 100 μg/mL with an inhibition rate of 99.9% and EC50 value of 8.20 μg/mL， which were better than those of hymexazol and chlorothalonil， two commercially available agricultural fungicides. Compared with hymexazol and chlorothalonil， the inhibition effect of berberine hydrochloride on E.turcicum had a longer effective period.Key words berberine hydrochloride; extraction and purification; determination of content; antifungal activity由真菌和细菌引起的植物病害严重影响作物的产量和品质，是造成巨大经济损失的主要原因之一[1-2]。
验一黄连中生物碱的提取、分离和含量测定
实验七黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连（coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。
黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。
其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。
小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。
[目的要求]1．学习和掌握水溶性生物碱的提取方法。
2．学习和掌握生物碱的柱色谱分离方法。
3．学习和掌握生物碱的化学检识及薄层色谱的鉴定方法。
[实验原理]小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。
盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。
小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。
O ONHCHOOOOCH3OCH3季铵式（红棕色）醇式（黄色）醛式（黄色）N+OOOCH3OCH3小檗碱（黄连素）掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶，溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、乙醚等有机溶剂。
盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶，并有强烈的黄色荧光。
易溶于热水或热乙醇，在冷水中的溶解度也比盐酸小檗碱大。
N+H3COH3COOCH3OCH3掌叶防己碱本实验是利用小檗碱和掌叶防己碱的硫酸盐在水中溶解度大的性质，用硫酸水提取出来总生物碱，再利用其盐酸盐难溶于水及盐析作用，使生物碱盐析出，以除去水溶性杂质。
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究【摘要】本研究致力于探究黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性。
首先介绍了研究背景和意义，随后详细阐述了提取和纯化的过程。
通过设计抑菌实验，得出了盐酸小檗碱在抑菌中的活性结果并对相关机制进行探讨。
研究表明盐酸小檗碱具有较强的抑菌效果，可在抗菌领域有潜在应用。
在结论部分指出了盐酸小檗碱在抑菌中的潜在应用价值，并展望了未来进一步深入研究的方向。
通过本研究，为利用黄连中盐酸小檗碱的抑菌效果提供了重要参考和指导。
【关键词】黄连，盐酸小檗碱，提取，纯化，抑菌活性，研究，机制，应用，展望1. 引言1.1 研究背景黄连中盐酸小檗碱是一种具有很强抑菌活性的成分，在中医药领域被广泛应用。
小檗碱是一种重要的生物碱，具有较强的抗菌、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性，是黄连的主要活性成分之一。
近年来，随着抗生素耐药性的增加和细菌耐药性问题的日益严重，寻找新的抗菌药物成为当前科研的热点之一。
对黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究具有重要的科学意义和应用价值。
通过对该成分的深入研究，可以为开发新型抗菌药物提供理论和实验基础，为探究其抑菌机制提供参考，有望为解决当前抗生素耐药性问题带来新的希望。
本研究将针对黄连中盐酸小檗碱进行提取纯化及抑菌活性研究，旨在探讨其在抗菌领域的潜在应用价值，并为未来相关研究提供基础和参考。
1.2 研究意义黄连中盐酸小檗碱的抑菌活性研究还可以为中药在临床上的合理应用提供支持。
通过深入研究盐酸小檗碱的抑菌机制，可以更好地指导中药的合理使用，提高中药的治疗效果，减少药物的副作用，保护人们的健康。
对黄连中盐酸小檗碱的抑菌活性进行研究，对于中药的现代化发展具有积极意义。
2. 正文2.1 提取黄连中的盐酸小檗碱提取黄连中的盐酸小檗碱是一项关键的工作，因为小檗碱被证实具有很好的抑菌活性，可以用于制备药物以治疗多种感染性疾病。
在提取盐酸小檗碱的过程中，首先需要将黄连粉末与乙醇混合，然后进行超声波提取或者加热回流提取，将小檗碱溶解出来。
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黄连中盐酸小檗碱的分离提纯
黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连（coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。
黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。
其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。
小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。
[目的要求]
1．学习和掌握水溶性生物碱的提取方法。
2．学习和掌握生物碱的柱色谱分离方法。
3．通过查阅资料并结合所学知识，初步了解并完成实验方案的设计。
[实验原理]
小檗碱是一种季铵碱，为黄色针状结晶，Mp.145℃(乙醚),游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂。
其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。
冷水溶解度分别为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。
利用这些特性提取盐酸小檗碱常用的方法有酸水法、石灰乳法、醇提法、超声提取法等。
从生产成本、方法可操作性、盐酸小檗碱的提取率和制备的精度考虑，我们采用传统的酸水浸渍法。
【仪器和试剂】
1.仪器与材料：分析天平，1500mL平底烧瓶，酒精灯，石棉网，烧杯若干，铁架台1个，漏斗1个，滤纸若干，胶头滴管若干，玻璃棒，抽滤设备如真空泵、抽滤瓶、布氏漏斗托(密封圈)、真空管(橡胶管)、滤纸、布氏漏斗，氧化铝柱层析器材等。
2. 试剂与原料：黄连粉50g，0.5% H
2SO
4
溶液，浓盐酸，蒸馏水，固体工业
食盐等。
【实验过程】
1、精制盐酸小檗碱
a、精密称取黄连粉50g于1500ml平底烧瓶，用0.5% H
2SO
4
溶液1000 ml浸
泡24h，虹吸上清液；
b、药渣再用 0.5% H
2SO
4
溶液 1000 ml浸泡12h，虹吸上清液，同法共收集
浸提液4000ml；
c、全部上清液中加入石灰乳调 pH 8～9，过滤，除去沉淀；
d、滤液中加浓盐酸调结pH 1～2，入10%( W/V )固体工业食盐，搅拌溶解，冷藏过夜；
e、取沉淀，少量冷水冲洗，加热水溶解，趁热过滤，滤液加浓盐酸调结pH 1～2，用 10% ( W/V )固体工业食盐处理工艺，冷藏过夜；
f、取沉淀，用少量蒸溜水洗至 PH 为5，在60℃以下真空干燥，再重结晶，即得盐酸小檗碱精品。
2、氧化铝柱层析分离纯化盐酸小檗碱
a 氧化铝层析柱制备:
取一支2.0cm×30cm层析柱,柱底覆盖少许脱脂棉,柱内加入一定体积95%乙醇,打开活塞,让溶液慢慢流出。
此时将已搅拌混均的氧化铝95%乙醇悬液(层析氧化铝120-140目,25-30g)不断加入层析柱内,至加完后,轻敲柱体,使各部分氧化铝均匀紧密一致。
待氧化铝沉降稳定(表面应平整),表面保持有少量溶剂
(0.5cm左右)，关闭活塞。
b 进样:
取约50 mg左右的盐酸小檗碱粗品，用尽量少的无水乙醇溶解制成溶液。
用吸管吸取样液沿柱壁四周小心加入,打开层析柱活塞使有溶剂滴下,待液面近与氧化铝表面相平,迅速用少量无水乙醇将柱壁样液洗下,待液面下降后再洗,反复多次,直至表面溶剂无色,让样品完全持留于氧化铝中,并保留有1cm左右溶剂,此时加入少许石英砂覆盖氧化铝表面,并沿管壁加入足量洗脱剂。
在此过程中要准确迅速,洗涤溶剂尽量少并尽可能不要扰动,氧化铝表面平整。
c 洗脱:
使溶剂继续滴下,(注意向柱内添加无水乙醇,保持柱体湿润),洗脱样品。
按每流分5-10 mL收集洗脱液,并着重收集各个色段(从下至上):鲜黄色、桔红色(棕色段可不再洗脱),收集到的洗脱液经浓缩后进行检测鉴定。
d 氧化铝再生回收:
层析后弃去氧化铝柱上端带深色部分,取出剩余氧化铝,依次用10％氢氧化钠溶液和水洗涤,晾干后经400℃烘4-6小时活化再生即可备用。
【注意事项】
1．浸泡药材粗粉的硫酸水溶液，浓度不宜过高，一般为0．2-0．3％为宜。
若硫酸水溶液浓度过高，小檗碱可成为硫酸氢小檗碱，其溶解度（1：100）明显较硫酸小檗碱（1：30）为小，降低提取效率。
硫酸水溶液浸出效果与浸泡时间有关，浸泡12小时约可浸出小檗碱80％，浸泡24小时，可浸出92％。
常规浸出应浸泡多次，使小檗碱提取完全。
若时间充足可多次提取，提高提取率。
2．盐析时，加入氯化钠的量，以提取液量的10％计算，即可达到析出盐酸小檗碱的目的。
氯化钠的用量不宜过多，否则溶液的相对密度增大，造成盐酸小檗碱微细结晶呈悬浮态难以下沉。
3．在精制盐酸小檗碱过程中，因盐酸小檗碱放冷极易析出结晶，所以加热煮沸后，应迅速抽滤或保温过滤，防止溶液在过滤过程中冷却，析出盐酸小檗碱结晶，过滤困难，降低提取率。
4．进行柱层析分离时,洗脱过程中需及时补加洗脱剂保持柱体润湿均匀;若柱体干裂,则分离无法进行。
5．纸层析检测时需预先要将层析纸在展开剂气氛中饱和15-30分钟,否则分离效果不佳。