水中总氮的测定(标准操作规程作业指导书)
04水质 总氮的测定 碱性过硫酸钾消解分光光度法
水质总氮检测标准操作规程碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法一、目的规范水中总氮的碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法标准操作规程。
二、适用范围1、适用于地表水、地下水、工业废水和生活污水中总氮的测定。
2、当样品量为10ml时，本方法的检出限为0.05mg∕L，测定范围为0.20-7.00mg∕L。
三、责任者实验室检验人员及负责人。
四、正文1、术语和定义总氮：指在规定的条件下，能测定的样品中溶解态氮及悬浮物中氮的总和，包括亚硝酸盐氮、硝酸盐氮、无机铵盐、溶解态氨及大部分有机含氮化合物中的氮。
2、方法原理在120～124℃下，碱性过硫酸钾溶液使样品中含氮化合物的氮转化为硝酸盐，采用紫外分光光度法于波长220nm和275nm处，分别测定吸光度A220和A275，按公式（1）计算校正吸光度A，总氮（以N 计）含量与校正吸光度 A 成正比。
A＝A220－2 A275 （1）3、仪器分析天平、紫外分光光度计、高压蒸汽灭菌器、25ml具塞磨口玻璃比色管、10mm石英比色皿、实验室常用玻璃仪器等。
4、试剂4.1、浓盐酸：ρ=1.19g/ml。
4.2、浓硫酸：ρ=1.84g/ml。
4.3、盐酸溶液：（1+9）。
将100ml浓盐酸沿烧杯壁慢慢加入到900ml蒸馏水中，搅拌均匀，冷却备用。
4.4、硫酸溶液：（1+35）。
将10ml浓硫酸沿烧杯壁慢慢加入到350ml蒸馏水中，搅拌均匀，冷却备用。
4.5、氢氧化钠溶液：ρ=200g/L称取20.0g氢氧化钠溶于少量水中，稀释至100ml。
注：氢氧化钠含氮量应小于0.0005%。
4.6、氢氧化钠溶液：ρ=20g/L量取ρ=200g/L氢氧化钠溶液10.0ml，用水稀释至100ml。
4.7、碱性过硫酸钾溶液称取40.0g过硫酸钾溶于600ml水中（可置于50℃水浴中加热至全部溶解）；另称取15.0g氢氧化钠溶于300ml水中。
待氢氧化钠溶液冷却至室温后，混合两种溶液定容至1000ml，存放于聚乙烯瓶中，可保存一周。
总氮的检测方法作业指导书
总氮的检测方法作业指导书1适用范围本标准适用于地表水、地下水、工业废水和生活污水中总氮的测定。
2方法原理在120～124℃下，碱性过硫酸钾溶液使样品中含氮化合物的氮转化为硝酸盐，采用紫外分光光度法于波长220nm和275nm处，分别测定吸光度A220和A275，按公式（1）计算校正吸光度A，总氮（以N计）含量与校正吸光度A成正比。
A＝A220－2A275（1）3干扰和消除1.3.1当碘离子含量相对于总氮含量的2.2倍以上，溴离子含量相对于总氮含量的3.4倍以上时，对测定产生干扰。
1.3.2水样中的六价铬离子和三价铁离子对测定产生干扰，可加入5%盐酸羟胺溶液1～2ml消除。
4试剂和材料除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为无氨水4.1无氨水每升水中加入0.10ml浓硫酸蒸馏，收集馏出液于具塞玻璃容器中。
也可使用新制备的去离子水。
4.2硝酸钾（KNO3）：基准试剂或优级纯。
在105～110℃下烘干2h，在干燥器中冷却至室温。
4.3盐酸溶液：1+9。
4.4硫酸溶液：1+35。
4.5氢氧化钠溶液：ρ（NaOH）=200g/L称取20.0g氢氧化钠溶于少量水中，稀释至100ml。
4.6氢氧化钠溶液：ρ（NaOH）=20g/L量取氢氧化钠溶液10.0ml，用水稀释至100ml。
4.7碱性过硫酸钾溶液称取40.0g过硫酸钾溶于600ml水中（可置于50℃水浴中加热至全部溶解）；另称取15.0g氢氧化钠溶于300ml水中。
待氢氧化钠溶液温度冷却至室温后，混合两种溶液定容至1000ml，存放于聚乙烯瓶中，可保存一周。
4.8硝酸钾标准贮备液：ρ（N）＝100mg/L称取0.7218g硝酸钾溶于适量水，移至1000ml容量瓶中，用水稀释至标线，混匀。
加入1～2ml三氯甲烷作为保护剂，在0～10℃暗处保存，可稳定6个月。
4.9硝酸钾标准使用液：ρ（N）＝10.0mg/L量取10.00ml硝酸钾标准贮备液至100ml容量瓶中，用水稀释至标线，混匀，临用现配。
水中总氮的测定实验报告
水中总氮的测定实验报告一、实验目的本实验旨在掌握测定水中总氮含量的方法，了解水中总氮的来源和其对环境的影响，并通过实验操作提高实验技能和数据处理能力。
二、实验原理水中总氮包括有机氮和无机氮（硝酸盐氮、亚硝酸盐氮和氨氮等）。
在碱性过硫酸钾消解的条件下，有机氮和无机氮化合物被转化为硝酸盐，然后通过紫外分光光度法测定硝酸盐的含量，从而计算出水中总氮的浓度。
三、实验仪器与试剂（一）仪器1、紫外可见分光光度计2、高压蒸汽灭菌器3、具塞比色管（25ml）4、移液管（1ml、2ml、5ml、10ml）5、容量瓶（50ml、100ml）（二）试剂1、无氨水：每升蒸馏水中加入 01ml 硫酸，在全玻璃蒸馏器中重蒸馏，弃去前 50ml 馏出液，收集后面的馏出液于具塞磨口的玻璃瓶中，密塞保存。
2、氢氧化钠溶液（20g/L）：称取 20g 氢氧化钠，溶于无氨水中，稀释至 1000ml。
3、盐酸溶液（1+9）：量取 10ml 盐酸，加入 90ml 无氨水中。
4、过硫酸钾溶液（40g/L）：称取 40g 过硫酸钾，溶于无氨水中，稀释至 1000ml。
5、硝酸钾标准贮备液（100mg/L）：准确称取07218g 经105-110℃烘干 2 小时的优级纯硝酸钾，溶于无氨水中，移至 1000ml 容量瓶中，定容。
此溶液每毫升含100μg 硝酸盐氮。
6、硝酸钾标准使用液（10μg/ml）：吸取 1000ml 硝酸钾标准贮备液于 100ml 容量瓶中，用无氨水定容。
四、实验步骤（一）标准曲线的绘制1、分别吸取 000、050、100、200、300、500、700、800ml 硝酸钾标准使用液于 25ml 具塞比色管中，用无氨水稀释至 1000ml。
2、向各比色管中加入 5ml 碱性过硫酸钾溶液，塞紧磨口塞，用纱布和棉线扎紧管塞，以防弹出。
3、将比色管置于高压蒸汽灭菌器中，加热至 120-124℃，保持 30分钟后自然冷却至室温。
4、加入 1ml 盐酸溶液（1+9），用无氨水稀释至 25ml 标线，摇匀。
总氮的测定
总氮（TN ）的测定氮类可以引起水体中生物和微生物大量繁殖，消耗水中的溶解氧，使水体恶化，出现富营养化。
总氮是衡量水质的重要指标之一。
1、测定方法：(1)有机氮和无机氮（氨氮、硝酸盐氮和亚硝酸盐氮）加和得之。
(2)过硫酸钾氧化—紫外分光光度法。
2、水样保存在24小时内测定。
过硫酸钾—紫外分光光度法：1、原理水样在60℃以上的水溶液中按下式反应，生成氢离子和氧。
K 2S 2O 8+H 2O →2KHSO 4+1/2O 2KHSO 4→K++HSO 4-HSO 4-→H++SO 42-加入氢氧化钠用以中和氢离子，使过硫酸钾分解完全。
在120-124℃的碱性介质中，用过硫酸钾作氧化剂，不仅可将水中的氨氮和亚硝酸盐氮转化为硝酸盐，同时也将大部分有机氮转化为硝酸盐，而后用紫外分光光度计分别于波长220nm 和275nm 处测吸光度。
其摩尔吸光系数为1.47×1032752202A A A -=从而计算总氮的含量。
2、仪器：(1)紫外分光光度计、(2)压力蒸汽消毒器或家用压力锅(3)25ml 具塞磨口比色管试剂：(1)碱性过硫酸钾：称取40g过硫酸钾，15g氢氧化钠，溶于水中,稀释至1000ml。
贮于聚乙烯瓶中，保存一周。
(2)1+9盐酸(3)硝酸钾标准贮备液：称取0.7218g经105-110℃烘干4h硝酸钾溶于水中，移入1000ml容量瓶中，定容。
此溶液每毫升含100微克硝酸盐氮。
加入2ml三氯甲烷为保护剂,稳定6个月（？）。
(4)硝酸钾标准使用液：吸取10ml贮备液定容至100ml既得。
此溶液每毫升含10微克硝酸盐氮。
3、实验步骤：(1)校准曲线的绘制①分别吸取0、0.50、1.00、2.00、3.00、5.00、7.00、8.00ml硝酸钾标准使用液于25ml比色管中，稀释至10ml。
再取待测样取25ml（精确）。
②加入5ml碱性过硫酸钾溶液，塞紧磨口塞，用纱布扎住，以防塞子蹦出，将比色管放入蒸汽压力消毒器内或家用压力锅中，加热半小时，放气使压力指针回零，然后升温至120-124℃，开始计时，半小时后关闭。
总氮作业指导书
总氮作业指导书( 依据标准: GB11894---89 )1含义及有关质量或排放标准1.1 总氮含义总氮是水中有机氮和无机氮化合物(氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮)的总和。
大量生活污水或含氮工业污水排入水体，使水中有机氮和无机氮化合物含量增加，生物和微生物类的大量繁殖，消耗水中溶解氧，使水体质量恶化。
湖泊、水库中含一定量的氮、磷类物质时，造成浮游生物繁殖旺盛，出现富营养化状态。
因此，总氮是衡量水质的重要指标之一。
1.2 总氮(以N计)的地表水质量1、污水排放标准3-4单位：mg/L注：1-地表水环境质量标准（GB3838-2002）2-地表水和污水监测技术规（HJ/T91-2002）3-中华人民国污水综合排放标准（GB8978-1996）4-市污水综合排放标准(DB31/199-1997)2分析方法过硫酸钾氧化-紫外分光光度法(GB11894-89)2.1 主题容与适用围2.1.1主题容本标准规定了用碱性过硫酸钾在120－1240C消解、紫外光光度测定水中总氮的方法。
2.1.2适用围本标准适用于地面水、地下水的测定。
本法可测定水中亚硝酸盐氮、硝酸盐氮、无机铵盐、溶解态氨及大部分有机含氮化合物中氮的总和。
氮的最低检出浓度为0.050mg/L 定上限为4mg/L。
测定中干扰物主要是碘离子与溴离子,碘离子相对于总氮含量的2.2倍以上，溴离子相对于总氮含量的3.4倍以上有干扰。
某些有机物在本法规定的测定条件下不能完全转化为硝酸盐时对测定有影响。
2.2定义2.2.1可滤性总氮：指水中可溶性及含可滤性固体的含氮量。
2.2.2总氮：指可溶性及悬浮颗粒中的含氮量。
2.3原理在600C以上水溶液中，过硫酸钾可分解产生态以酸氢钾和原子态氧，硫酸氢钾在溶液中离解而产生氢离子，故在氢氧化钠的碱性介质中可促使分解过程趋于完全。
分解出的原子态氧在120~1240C条件，可使水样含氮化合物的氮元素转化为硝酸盐，并且在此过程中有机物同时被氧化分解。
水中总氮的测定标准操作规程作业指导书
水中总氮的测定标准操作规程作业指导书1. 引言水中总氮的测定是环境科学中常见且重要的分析方法之一。
本操作规程旨在规范水中总氮的测定步骤，确保测定结果的准确性和可靠性。
本指导书适用于实验室环境中进行水中总氮测定的操作人员。
2. 实验室设备和试剂2.1 实验室设备- 分析天平- 精密移液器- 电热板- 恒温槽- 离心机2.2 试剂- 高纯水- 高纯硝酸- 高纯硫酸- 氨水- 硝酸铵试剂- 高锰酸钾试剂3. 标准曲线的建立3.1 制备硝酸铵标准溶液按照一定比例将硝酸铵溶解于高纯水中，制备不同浓度的硝酸铵标准溶液。
3.2 测定溶液的吸光度将制备好的硝酸铵标准溶液分别置于光度计中，使用已设定好的测试波长，记录各标准溶液的吸光度值。
3.3 绘制标准曲线根据吸光度数据，绘制硝酸铵标准溶液的浓度和吸光度的关系曲线。
4. 样品处理4.1 样品采集与保存选择合适的采样容器采集样品，并确保容器表面洁净无污染。
将样品置于低温环境中保存，避免样品中的化学反应。
4.2 样品预处理- 若样品中含有悬浮物，使用过滤器或沉淀方法将其去除。
- 对高浓度样品进行稀释，以确保测定结果在标准曲线内。
5. 水中总氮的测定步骤5.1 标准品测定将一定体积的硝酸铵标准溶液分别置于容量瓶中，配制出一系列浓度的标准品溶液。
5.2 样品测定将适量的样品与一定体积的高纯硫酸、高纯硝酸和氨水按一定比例混合，使其中的氨以铵离子形式稳定存在。
将混合溶液加热，直至溶液呈现醒目的黄色。
5.3 滴定测定取一定体积的试液加入高锰酸钾试剂中，观察试液颜色的变化，并记录消耗的高锰酸钾试剂体积。
6. 数据处理根据标准曲线和滴定测定结果，计算样品中总氮的浓度。
7. 质量控制7.1 空白实验每次进行测定之前，先进行空白实验，以检测实验过程中的背景测量误差。
7.2 平行实验为了保证测定结果的准确性，应进行平行实验，并对比实验结果的一致性。
7.3 校正方法在样品测定前后，使用已知浓度的硝酸铵溶液进行校正，以减少实验误差。
水处理工艺单元进水出水监测—总氮的测定
（2）校准曲线控制：
①校准曲线的相关系数r应大于等于0.999，否则应查明原因， 重新配置标准系列溶液、重新测定和重新绘制校准曲线。 ②每批样品应测定一个标准曲线中间点浓度的标准溶液，其 测定结果与标准曲线该点浓度的相对误差应小于等于10%； 否则需要重新绘制校准曲线。
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（3）平行双样控制：
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水中总氮测定方法
1.水中含氮化合物与总氮
（1）水中含氮化合物：包括水中存在的亚硝酸盐、硝酸盐、 无机铵盐、溶解态氨及大部分有机含氮化合物。
（2）总氮（指标）：实质上是指水中溶解态氮及悬浮物中 氮的含量总和。
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1. 水中含氮化合物与总氮
（3）总氮含量:是衡量水体水质的重要指标之一（地表水 环境质量标准GB 3838-2002），也是污水处理工艺运行的重要 控制参数（城镇污水厂污染物排放标准GB 18918-2002）。
A275，按下式计算校正吸光度A，总氮（以N计）含
量与校正吸光度A成正比。
A= A220-2A275
（1）
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过硫酸钾消解紫外分光光度法测 定总氮实验准备
1.仪器准备
（1）双波长紫外分光光度计； （2）10 mm石英比色皿； （3）耐高温带塞比色管； （4）医用高压灭菌锅。
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2.医用高压灭菌锅使用方法
①每批样品应至少测定10%的加标样品，样品数量少 于10时，应至少测定一个加标样品。
②加标回收率应在90%-110%范围。
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6.注意事项
（1）该方法适用于地表水总氮测定，检出限为0.05 ~4 mg/L。 （2）水样中的六价铬和三价铁离子对测定有干扰，可加入 5%盐酸羟胺溶液1~2 mL消除。 （3）碳酸盐和碳酸氢盐对测定有干扰，可加入一定量的盐酸 消除。
总氮实验操作规程细节要点
总氮测定细节注意事项一、总氮先期测定需要了解水样含量的步骤1、如果客户水样总氮不超过8mg/L,可以直接取5亳升，直接按照说明书的操作步骤测定例如：客户原水位15mg/L,处理后不超过8mg/L,可以直接操作（前提是要水样相对澄清，无悬浮物、泥土、渣滓等杂质，如果有这些可以静置一会，取中间悬清液）。
2、如果客户水样总氮超过8mg/L,需要先稀释后，再按步骤操作实验。
例如；客户原水总氮浓度比较高，为30mg/L,需要先稀释10倍,取10亳升定容在100亳升的容量瓶中。
然后测定稀释后的污水样，出来的结果乘稀释的倍数10,就是原水总氮浓度。
二、总氮测定碘、漠离子干扰的判定，出来的数据结果是错误的,不能进行测定如果客户水样中碘离子、浪离子含量髙干扰试测泄，碘离子相对于总氮含疑的2. 2倍以上，浪离子相对于总氮含量的3. 4倍以上有干扰，这些干扰若多的话，首先要稀释到干扰浓度以下，在进行操作实验。
例如：客户水样碘离子含量比较高，干扰测定，找几个稀释倍数点，测定结果中有线性关系开始的倍数点位，就合适，再测定。
三、客户未知的高浓度总氮，合理稀释的倍数大概判定。
稀释梯度倍数，同一个水样，稀释5倍、10倍、20倍、50倍、100倍或者以上倍数。
加入碱性过硫酸钾消解40分钟，最后加入稀盐酸试剂，测肚结果不超过5为宜，吸光度A值不大于1为合适。
该稀释的倍数合适。
注：以上是工作经验所得，如果总氮含量过高，需要再相应多加倍数稀释。
四、总氮水样稀释手法1、稀释2倍，取100亳升容量瓶，虽:取100毫升蒸餾水，倒入500亳升烧杯中，使用同一个容量瓶，污水样先淸洗2遍（因为挂壁的蒸馆水会稀释了水样，保证内壁是同一水样）量取100毫升，倒入同一个500亳升烧杯中。
混匀。
这样就是稀释了2倍。
2、稀释4倍，使用25亳升的胖度吸管，量取25毫升污水样，左容在100亳升的容疑瓶中，加蒸佛水到标线，混匀。
3、稀释5倍，使用20亳升的胖度吸管，量取20亳升污水样，左容在100亳升的容量瓶中，加蒸憾水到标线，混匀。
水质_总氮--作业指导书
8.4精密度控制：每批样品（≤20个）至少测定10%的平行双样，样品数量少于10个时，应至少测定一个平行双样，当样品含量≤1.00 mg/L时，平行双样测定结果的相对偏差应≤10%；当样品含量＞1.00 mg/L时，平行双样测定结果的相对偏差应≤5%。测定结果以平行双样的平均值报出。
8.5准确度控制：每批样品（≤20个）至少测定一个有证标准样品或10%的基体加标样品，有证标准样品的测定值应在允许的范围内。
9.试剂清单：氢氧化钠（NaOH）：含氮量应小于0.0005%，优级纯。
过硫酸钾（K2S2O8）：含氮量应小于0.0005%，优级纯。
注：氢氧化钠和过硫酸钾应进行试剂验收，尤其是其空白吸光度应符合要求，否则需要进行提纯。
1.编制目的：为规范和指导水质中总氮浓度的检验。特制定本作业指导书。
2.适用范围：适用于地表水、地下水、工业废水和生活污水中总氮的测定。
3.检验依据：《水质总氮的测定碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法》HJ636-2012。
注1：实验中所用的玻璃器皿应用盐酸溶液（1+9）或硫酸溶液（1+35）浸泡，用自来水冲洗后再用无氨水冲洗数次，洗净后立即使用。高压蒸汽灭菌器应每周清洗。
4.4硝酸钾标准使用溶液（10.0mg/L）：用10ml无分度（胖度）移液管移取10.00ml的硝酸钾标准贮备溶液（100mg/L），转移至100ml容量瓶中，用水稀释至标线并混匀。临用现配。
5.校准曲线的绘制
5.1取6支25ml具塞比色管，用10.00ml刻度移液管分别量取0.00ml，0.20ml，0.50ml，1.00 ml，3.00和7.00ml硝酸钾标准使用液于25ml具塞磨口玻璃比色管中，其对应的总氮含量分别为0.00、2.00、5.00、10.0、30.0和70.0μg。加水稀释至10.00ml。
水中氨氮的测定(标准操作规程作业指导书)
1.适用范围本测定规程规定了测定水中氨氮的纳氏试剂分光光度法。
2.测试原理以游离态的氨或铵离子等形式存在的氨氮与纳氏试剂反应生成淡红棕色络合物，该络合物的吸光度与氨氮含量成正比，于波长420 nm处测量吸光度。
3.仪器设备3.1 可见分光光度计：配置20 mm比色皿。
3.2 凯氏定氮仪。
3.3 玻璃比色管：50 ml。
3.4 天平：精度0.01 g。
3.5 一般实验室常用仪器和设备，玻璃容器需符合国家A级标准。
4.试剂除非另有说明，分析时均用符合国家标准的分析纯试剂。
4.1 一级水，文中所说的水均指一级水。
4.2轻质氧化镁：不含碳酸盐，在500 ℃下加热氧化镁，以除去碳酸盐。
4.3纳氏试剂：称取16.0 g氢氧化钠，溶于50 ml水中，冷却至室温。
称取7.0 g碘化钾和10.0 g碘化汞，溶于水中，然后将此溶液在搅拌下，缓慢加入到上述50 ml氢氧化钠溶液中，用水稀释至100 ml，若有红棕色沉淀产生，需要过滤。
存于聚乙烯瓶，于暗处存放，有效期一年。
4.4 酒石酸钾钠溶液：ρ=500 g/L。
称取50.0 g酒石酸钾钠，溶于100 ml水中，加热煮沸以驱除氨，充分冷却后稀释至100 ml。
4.5 硫酸锌溶液：ρ=100 g/L。
称取10.0 g硫酸锌溶于水中，稀释至100 ml。
4.6 硫代硫酸钠溶液：ρ=3.5 g/L。
称取3.5 g硫代硫酸钠溶于水中，稀释至1000 ml。
4.7 氢氧化钠溶液：ρ=250 g/L。
称取25 g氢氧化钠溶于水中，稀释至100 ml。
4.8 氢氧化钠溶液：C=1 mol/L。
称取4 g氢氧化钠溶于水中，稀释至100 ml。
4.9 盐酸溶液：C=1 mol/L。
量取8.5 ml盐酸（ρ=1.18 g/ml）于适量水中，并稀释至100 ml。
4.10硼酸溶液：ρ=20 g/L。
称取20 g硼酸溶于水中，稀释至1000 ml。
4.11溴百里酚蓝指示剂：ρ=0.5 g/L。
总氮的测定实验作业指导书
总氮的测定1、方法依据水质总氮的测定碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法HJ636-20122、适用范围本标准规定了测定水中的碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法。
本标准适用于地表水、地下水、工业废水和生活污水中总氮的测定。
当样品量为10mL时，本方法的检出限为0.05mg/L，测定范围0.20~7.00mg/L。
3、测定原理3.1总氮的测定在120~124℃下，碱性过硫酸钾溶液使样品中含氮化合物的氮转化为硝酸盐，采用紫外分光光度法于波长220nm和275nm处，分别测定吸光度A220和A275，按公式（1）计算校正吸光度A，总氮（以N计）含量与校正吸光度A成正比。
A=A220-2A2754、干扰和消除当碘离子含量相对于总氮含量的2.2倍以上，溴离子含量相对于总氮含量的3.4倍以上时，对测定产生干扰。
水样中的六价铬离子和三价铁离子对测定产生干扰，可加入5%盐酸羟胺溶液1~2mL消除。
5、试剂除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为无氨水。
5.1硝酸钾标准贮备液：称取0.7218g硝酸钾溶于适量水，移至1000mL容量瓶中，用水稀释至标线，混匀，加入1~2mL三氯甲烷作为保护剂，在0~10℃暗处保存，可稳定6个月。
也可直接接购买市售有证标准溶液。
5.2硝酸钾标准使用液：p（N）=10.0mg/L量取10.00mL硝酸钾标准贮备液至100mL容量瓶中，用水稀释至标线，混匀，临用现配。
5.3碱性过硫酸钾溶液称取40.0g过硫酸钾溶于600mL水中（可置于50℃水域中加热至全部溶解）；另称取15.0g氢氧化钠溶于300mL水中。
待氢氧化钠溶液温度冷却至室温后，混合另种溶液定容至1000mL，存放于聚乙烯瓶中，可保存一周。
5.4盐酸溶液：1+96、仪器和设备6.1紫外分光光度计：具10mm石英比色皿。
6.2 高压蒸汽灭菌器：最高工作压力不低于1.1~1.4kg/cm2；最高工作温度不低于120~124℃。
紫外分光光度法测定水中的总氮
紫外分光光度法测定水中的总氮污水中的总氮我们可以采用碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法，此方法的名字听起来很长，其实操作起来非常简单。
其原理是在120℃-124℃的碱性介质中，用过硫酸钾作氧化剂，可将水样中含氮化合物转化为硝酸盐，同时大部分有机物被氧化分解。
用紫外分光光度法用于波长220nm和275nm处分别测出吸光度。
然后通过这两个波长的吸光度求出校正吸光度（A=A220-2A275）。
通过工作曲线计算总氮的含量。
其测定范围为0.050mg/L-8mg/L。
检测所需仪器和试剂1.紫外分光光度计2.石英比色皿10mm3.压力蒸汽消毒器4.具塞玻璃磨口比色管5.碱性过硫酸钾溶液称取40g过硫酸钾，15g氢氧化钠于无氨纯水中，不溶时可加热溶解，稀释至1000mL，将此溶液放在聚乙烯瓶中，可储存1周。
6.盐酸溶液10%将10mL盐酸加入100mL无氨纯水中。
7.硝酸钾标准储备液100mg/L称取（0.7218±0.0007）g经（105-110）℃烘干2h的硝酸钾溶于无氨纯水中，定量转移至1000mL容量瓶中，加入2mL三氯甲烷，稀释至标线，可稳定6个月以上。
8.硝酸钾标准使用溶液10mg/L吸取10mL硝酸钾储备溶液于100mL容量瓶中，用无氨纯水稀释至刻度。
9.无氨纯水将蒸馏水通过强酸性阳离子交换树脂柱来制取，无氨纯水应贮存在带有磨口玻璃塞的玻璃瓶内，每升中加10g强酸性阳离子交换树脂以利保存。
检测时干扰及消除方法1.对于水质比较恶劣的污水，可以将采集的水样过滤后再测定，这样能避免水中生物产生的氮影响检测结果。
2.如果水样中含有六价铬离子以及三价铬离子时，我们可以加入5%盐酸羟胺溶液1mL-2mL消除其干扰。
3.碳酸盐及碳酸氢盐的干扰，可加入一定量的盐酸消除对检测结果的影响。
检测详细步骤1.取10mL试验样品于25mL比色管中，加入5mL碱性过硫酸钾，塞紧磨口塞，用纱布裹紧比色管塞后应系牢。
水质总氮操作注意事项作业指导书
⽔质总氮操作注意事项作业指导书⽔质总氮的测定基本操作流程按照HJ 636-2012 ⽔质总氮的测定碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法进⾏，本作业指导书仅对可能影响总氮测定的注意事项进⾏推荐指导。
1.玻璃器⽫的洗涤所使⽤的玻璃器⽫应先⽤（1+9）盐酸浸泡12h以上，再⽤超纯⽔冲洗3~6次才能使⽤，否则也会造成空⽩值偏⾼或平⾏性较差的情况。
（具体情况视各个实验室环境状况⽽定）。
2. 实验⽤⽔及试剂的质量检验若实验的空⽩值不够理想，则需要对实验⽤⽔及试剂进⾏检验，以选择出含氮量最低的⽔和试剂，获得理想的空⽩值。
(本实验室所使⽤⽔为超纯⽔，如没有超纯⽔机或担⼼滤柱效果建议⽤娃哈哈纯净⽔进⾏试验验证)；过硫酸钾为最主要影响因素，当过硫酸钾氮含量超标时会严重影响空⽩值，空⽩吸光度超过0.3要优先考虑过硫酸钾影响，可选择进⼝⾼纯度过硫酸钾或⾃⾏重结晶提纯药剂，具体⽅法详见《过硫酸钾提纯作业指导书》。
3. 实验室环境要求实验室应保证清洁及通风顺畅，做总氮试验时应与⽔质氨氮的测定、⼤⽓氨的测定等实验分开。
如实验室有条件可将整个实验在通风橱中进⾏。
紫外分光光度计房间应远离卫⽣间（厕所⼤⽓中氨含量很⾼），测量时应保持通风。
4.试剂的配制碱性过硫酸钾的配制过程⼗分重要，掌握不好，会影响消解效果，对测定结果产⽣⼀定的影响。
过硫酸钾的溶解速度⾮常慢，若要加快溶解，绝对不能随便加热，最好采⽤⽔浴加热法，且⽔浴温度⼀定要低于50℃，否则过硫酸钾会分解失效。
配制该溶液时，可分别称取过硫酸钾和氢氧化钠，两者分开配制，再混合定容，或者先配制氢氧化钠溶液，待其温度降到室温后再加⼊过硫酸钾溶解。
若两种药剂在⼀只烧杯中同时溶于⽔，氢氧化钠溶遇⽔放热使溶液温度过⾼引起局部过硫酸钾失效。
5.消解温度、压⼒的控制使⽤蒸⽓灭菌锅的实验室，消解时国标中要求达到规定温度压⼒后即开始计时，且温度为120℃-124℃，时间为30min。
⽽本实验室经过⼀系列试验验证，消解温度控制在121℃，时间为50min，（较国标有所延长）这样测定结果最为理想。
水中总氮的测定(标准操作规程作业指导书)
1. 适用范围本测定规程规定了碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法测定水中的总氮。
当样品量为10ml时，本方法的检出限为0.05mg/L,测定范围为0.20~7.00mg/L。
2. 测定原理在120—124C下，碱性过硫酸钾溶液使样品中含氮化合物的氮转化为硝酸盐，采用紫外分光光度法于波长220nm和275nm处，分别测定吸光度A220和A275，按下面公示计算校正吸光度A，总氮(以N计)含量与校正吸光度A成正比。
A=A 220-2A2753. 仪器设备3.1 紫外分光光度计: 配有10mm石英比色皿。
3.2 高压蒸汽灭菌器: 最高工作压力不低于 1.1~1.4kg/cm2,;最高工作温度不低于120~124C。
3.3 玻璃具塞比色管: 25ml。
3.4 分析天平：精度0.01g。
3.5 一般实验室常用仪器和设备。
4. 试剂除另有说明，分析时均使用符合国家标准的的分析纯试剂, 试验用水为蒸馏水。
4.1 蒸馏水。
4.2 碱性过硫酸钾溶液：称取10.0g过硫酸钾(进口试剂)溶于150ml水中(可置于50C水浴中加热至全部溶解)；另称取3.75g氢氧化钠溶于75m水中。
待氢氧化钠溶液温度冷却至室温后，混合两种溶液定容至250ml，存放于聚乙烯瓶中。
可保存一周。
4.3 (1+9)盐酸溶液：取100ml浓度为1.19g/ml的盐酸于900ml蒸馏水中混匀。
4.4 (200g/L)氢氧化钠溶液：称取20.0g氢氧化钠溶于少量水中，用水稀释至100ml。
4.5 (20g/L)氢氧化钠溶液：取200g/L氢氧化钠溶液10.0 ml，用水稀释至100ml。
4.6 浓硫酸：p( H2SO4) =1.84g/ml4.7 （1+35）硫酸溶液：取浓硫酸25ml慢慢边搅拌边倒入875ml水中。
4.8总氮标准溶液：10卩g/m J5. 样品制备取适量样品用20g/L氢氧化钠或（1+35）硫酸溶液调节pH值至5~9,待测。
6. 分析测定6.1校准曲线的绘制:取标准曲线各浓度点0.00、0.20、0.50、1.00、3.00、7.00ml的标准溶液于6支25ml玻璃具塞比色管中，加水稀释至10.00ml，再加入5.00ml碱性过硫酸钾溶液，塞紧管塞，用砂布和线绳扎紧管塞，以防弹出。
总氮检测作业指导书
总氮检测作业指导书1. 目的食品中总氮含量的检测2. 范围适用于本公司原辅料、中间品、成品中总氮的检测3. 职责品质部实验室负责总氮的检测4. 内容4.1实验试剂除非另有规定，本方法中所使用的试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。
硫酸铜（CuSO 4·5H 2O ）硫酸钾（K 2SO 4）浓硫酸 （H2SO4密度为1.84g/ml ）硼酸溶液（30g/L ）：称取硼酸3g ，用水溶解，并定容至100mL 。
混合催化剂：a ）将硫酸钾、硫酸铜按97:3的比例混合硫酸标准滴定溶液【c(1/2H2SO4)=1.000mol/L 】，按GB/T601配制与标定溴甲酚绿混合指示液：将溴甲酚绿乙醇溶液（1g/L ）和甲基红乙醇溶液（1g/L ）按10:4混合甲基红指示剂（C15H***）溴甲酚绿指示剂（****）亚甲基蓝指示剂（****）氢氧化钠95%乙醇（***）4.2实验仪器消化炉、自动凯氏定氮仪、天平。
4.3实验步骤4.3.1消化：称取固体试样0.125g （相当于含氮30mg-40mg ），小心转移到已干燥的凯氏烧瓶中，加入混合催化剂，再缓缓加入浓硫酸10mL ，摇匀，于消化炉上消化。
4.3.2蒸馏：待消化液冷却后，缓缓加入水100mL ，摇匀。
连接凯氏烧杯与蒸馏装置，馏出管的尖端插入盛有25mL 硼酸溶液和4滴溴甲酚绿混合指示液的锥形烧杯中，轻轻摇匀，使内容物混匀，然后加热蒸馏。
待馏出液达到180mL 时，停止蒸馏。
4.3.3滴定：用硫酸标准滴定溶液滴定馏出液，颜色由绿色消失转变为灰红色即为终点。
记录消耗硫酸标准滴定溶液的体积。
按上述操作同时进行空白试验。
4.3.2 结果计算：X1=)41(0140.0)21(X M c V V -⨯⨯⨯-×100X1-------试样中总氮的含量，单位为克每百克（g/100g）;V1-------试液消耗硫酸标准滴定液的体积，单位为毫升（mL）V2-------试剂空白消耗硫酸标准滴定液的体积，单位为毫升（mL）X4-------试样的水分，单位为%c---------硫酸标准滴定溶液浓度，单位为摩尔每升（mol/L）M--------试样的质量，单位为克（g）0.0140---1.0mL硫酸【c(1/2H2SO4)=1.000mol/L】标准滴定溶液相当的氮的质量，单位为克（g）注：总氮含量≥1%时，计算结果保留三位有效数字；总氮含量＜1%时，结果保留两位有效数字。
总氮的测定
前言为贯彻《中华人民共和国环境保护法》和《中华人民共和国水污染防治法》，保护环境，保障人体健康，规范水中总氮的测定方法，制定本标准。
本标准规定了测定地表水、地下水、工业废水和生活污水中总氮的碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法。
本标准是对《水质总氮的测定碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法》（GB11894-89）的修订。
本标准首次发布于1989年，原标准起草单位为上海市环境监测中心，本次为第一次修订。
修订的主要内容如下：-扩大了标准的适用范围；-增加了氢氧化钠和过硫酸钾的含氮量要求及含氮量测定方法；-增加了质量保证和质量控制条款；-增加了注意事项条款。
自本标准实施之日起，原国家环境保护局1989年12月25日批准、发布的国家环境保护标准《水质总氮的测定碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法》（GB11894-89）废止。
本标准附录A为资料性附录。
本标准由环境保护部科技标准司组织制订。
本标准主要起草单位：大连市环境监测中心。
本标准验证单位：天津市环境监测中心、辽宁省环境监测实验中心、沈阳市环境监测中心站、鞍山市环境监测中心站、锦州市环境监测中心站和营口市环境监测中心站。
本标准环境保护部2012年2月29日批准。
本标准自2012年6月1日起实施。
本标准由环境保护部解释。
1 适用范围本标准规定了测定水中总氮的碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法。
本标准适用于地表水、地下水、工业废水和生活污水中总氮的测定。
当样品量为10ml时，本方法的检出限为0.05mg／L，测定范围为0.20～7.00mg／L。
2 规范性引用文件本标准内容引用了下列文件或其中的条款。
凡是不注明日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。
HJ/T 91地表水和污水监测技术规范HJ/T 164地下水环境监测技术规范3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。
总氮 total nitrogen （TN）指在本标准规定的条件下，能测定的样品中溶解态氮及悬浮物中氮的总和，包括亚硝酸盐氮、硝酸盐氮、无机铵盐、溶解态氨及大部分有机含氮化合物中的氮。
水质总氮的测定方法 国标
水质总氮的测定方法介绍水质总氮是评估水体污染程度的重要指标之一，准确测定水中总氮的含量对于环境保护和水资源管理至关重要。
本文将介绍国家标准下的水质总氮测定方法，包括各个步骤和相关的实验技术。
标准概述国家标准《水质监测分析方法》（GB 11893）中详细规定了水质总氮的测定方法，该标准依据氮的测定原理和实验技术，确保测定结果的准确性和可靠性。
下面将详细介绍水质总氮的测定方法。
准备工作试剂和设备准备1.水样采集瓶：用于采集水样的无菌玻璃瓶。
2.水样保存剂：用于保持水样中总氮的稳定。
3.水样传递器：用于将水样从采集瓶中转移到实验室中。
4.水样过滤器：用于去除水样中的颗粒物。
5.去离子水：用于稀释试剂和洗涤设备。
6.试剂：包括硫酸钾、硫酸汞、碱性碘化钾等。
7.仪器设备：包括天平、移液器、离心机、显微镜等。
样品处理1.水样采集：按照标准要求，在采集点采集水样，避免污染和氧化。
2.水样储存：将采集的水样倒入水样采集瓶中，并添加适量的水样保存剂，封闭瓶盖。
3.水样过滤：将储存的水样通过水样过滤器，去除其中的颗粒物。
测定步骤总氮提取1.取一定体积的含有水样的采样瓶，使用吸滤纸试纸将水样吸干，得到水样固体残渣。
2.将固体残渣加入提取瓶中，加入适量的硫酸钾和硫酸，并进行摇匀。
3.将提取瓶放入水浴中进行加热，加热40分钟，使水样中的总氮转化为氨态氮。
4.冷却，并加入适量的碱性碘化钾溶液进行反应，使氨态氮被捕捉成无色化合物。
总氮测定1.将反应后的溶液过滤，去除残渣。
2.将过滤后的溶液取一部分，加入硫酸汞溶液，使溶液中的硫酸钾完全与硫酸汞发生反应。
3.加入适量的硫酸助溶剂，并将溶液转移到契氏小瓶中。
4.使用紫外可见分光光度计，选择合适的波长范围，对溶液测定吸光度，得到吸光度数值。
5.根据硫酸钾的标准曲线，计算出溶液中的硫酸钾含量。
6.根据硫酸钾与总氮的对应关系，计算出水样中的总氮含量。
结果处理与分析数据分析根据测定结果，我们可以得出水样中总氮的浓度。
总氮的操作规程
普罗达克森（莆田）污水处理有限公司标准操作规程标题总氮的操作规程（过硫酸盐消解法）编码版本页码第1页共1页起草人起草日期年月日审核人审核日期年月日批准人批准日期年月日颁发部门化验部生效日期年月日分发部门化验室、中控室目的：建立一个检测水质中总氮的含量范围：检测水质中的含氮量责任：化验员、1.内容：1.1试剂及其配置总氮过硫酸盐试剂粉：仪器配套TA试剂A粉剂：仪器配套TA试剂B粉剂：仪器配套1.2 仪器：仪器：CR3200加热消解器哈希DR/2010分光光度计2.操作步骤：2.1打开消解器，加热到105℃。
将总氮过硫酸盐试剂粉加入到两支总氮氢氧化物试剂瓶中，再分别加入 2ml的去离子水和样品。
2.1.1盖上瓶盖，大力摇晃约30秒，将瓶放在消解器上加热30分钟后，冷却至室温。
2.1.2选择分光光度计的波长为410nm，程序号为350。
往消解后的预制试样瓶中加入TA试剂A粉剂，盖上瓶盖，摇晃15秒钟，按下TIME ENTER，开始3分钟的反应计时。
2.1.3计时器鸣响后，打开瓶盖往试样瓶中加入TA试剂B粉剂，盖上瓶盖，摇晃15秒钟，按下TIME ENTER，开始2分钟的反应计时。
2.1.4 计时器鸣响后，打开两只TN试剂C瓶，取2ml消解过的样品加入到其中一瓶中，取2ml消解过的空白试样加到另外一瓶中。
2.1.5 盖上瓶盖，反转十次使之混合。
反转动作要缓慢振动，试剂瓶将会变暖。
按下TIME ENTER，开始5分钟的反应计时。
计时器鸣响后，将空白试样放入样品适配器中，盖紧遮光盖。
按ZERO，屏幕显示：0.00mg/l N。
将预制试样瓶放入样品适配器中，盖上遮光盖。
按READ，屏幕显示总氮含量的读数。
紫外分光光度法测定水中的总氮
紫外分光光度法测定水中的总氮1.方法原理在60℃以上水溶液中, 过硫酸钾可分解产生硫酸氢钾和原子态氧, 硫酸氢钾在溶液中离解而产生氢离子, 故在氢氧化钠的碱性介质中可促使分解过程趋于完全。
分解出的原子态氧在120 ℃ ~ 124 ℃条件下, 可使水样中含氮化物的氮元素转化为硝酸盐。
并且在此过程中有机物同时被氧化分解。
利用紫外分光光度法于波长220nm和275nm处, 分别测出吸光度A220及A275, 按照公式求出吸光度A:A=A220-A275, 按A的值查校准曲线并计算总氮含量。
2.仪器设备紫外分光光度计TU-19003.主要试剂( 1) 0.100mg/mL硝酸钾标准贮备液: 称取017218g硝酸钾(经105℃ ~110℃烘3h)溶于水中, 移至1000mL容量瓶中用水稀释至标线。
( 2) 0.010mg/mL硝酸钾标准使用液: 将贮备液用水稀释10倍而得。
使用时配制。
( 3)无氨水。
( 4)碱性过硫酸钾溶液: 称取4g过硫酸钾, 另称取115g氢氧化钠,溶于水中, 稀释至100mL, 溶液存放在聚乙烯瓶内。
( 5)盐酸溶液1+9。
4.水样的测定( 1)用25mL比色管取样品10mL, 用氢氧化钠溶液调节pH在5~ 9。
( 2)加入5mL碱性过硫酸钾溶液, 塞紧磨口塞用布及绳等方法扎紧瓶塞, 以防弹出。
( 3)将比色管置于压力锅中, 加热,时温度达120℃ ~124℃后开始计时, 保持此温度加热30min。
( 4)冷却、开阀放气,移去外盖, 取出比色管并冷至室温。
( 5)加1+9盐酸溶液1mL, 用无氨水稀释至25mL标线,混匀。
( 6)移取部分溶液至1cm石英比色皿在紫外分光光度计上,用无氨水(预处理分析步骤同上)加1+ 9盐酸溶液作参比,测定水样在220nm及275nm波长处的吸光度。
5.标准曲线的绘制( 1)向6支25mL比色管中依次加0.010mg/mL硝酸钾标准溶液0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00、10.00mL, 加无氨水稀释至10.00mL。
淡水总氮测定方法
九龙江课题实验测定方法TN测定1 方法原理过硫酸钾氧化-紫外分光光度法，检出范围：0.05-4mg/L2 仪器试剂仪器：紫外分光光度计家用压力锅，电炉(2KW)25mL具塞玻璃磨口比色管试剂：碱性过硫酸钾溶液（4%）：称取8g过硫酸钾（K2S2O8），1.5 g氢氧化钠，溶于200mL水中，溶液存放于聚乙烯瓶中，一周内使用。
盐酸（1:9）KNO3标准贮备液，C N=100mg/L(以N计)：KNO3在105-110℃烘箱中干燥3h，冷却后称取0.7218g，溶于1000mL，加入2mL三氯甲烷为保护剂，至少可稳定6个月。
KNO3标准使用液，C N=10mg/L：将贮备液稀释10倍而得。
3 步骤3.1 校准曲线的绘制（1）分别吸取0、1、3、5、7、8mLKNO3标准使用液于25mL比色管中，加水稀释至10mL标线。
（2）加入5mL碱性过硫酸钾溶液，盖塞。
（3）放入家用压力锅，顶阀吹气时开始计时，加热30分钟。
（4）取出并降至室温。
（5）加盐酸（1:9）1mL，定容至25mL。
混匀静置。
（6）取上清液在紫外分光光度计测定。
设置波长为：220nm、275 nm。
3.2 样品测定（1）分样。
摇匀取10mL放入比色管。
（2）同3.1中的（2）-（6）操作。
注：水样中含有六价铬离子及三价铁离子时，可加入5%盐酸羟胺溶液1-2mL以消降对测定的影响结果计算：校正吸光度：A=A220-2A275。
总氮（mg/L）=m/V注：校准曲线溶质系列：0、10、30、50、70、80，样品浓度值等于含氮量除以水样体积得到。
2013/4/21。
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1 ．适用范围 本测定规程规定了碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法测定水中的总
氮。
当样品量为10ml 时，本方法的检出限为0.05mg/L ,测定范围为0.20~7.00mg/L 。
2．测定原理
在120—124C 下，碱性过硫酸钾溶液使样品中含氮化合物的氮转化为硝酸 盐，
采用紫外分光光度法于波长 220nm 和 275nm 处，分别测定吸光度 A 220 和
A 275，按下面公示计算校正吸光度 A ，总氮(以N 计)含量与校正吸光度 A 成
正比。
A=A 220-2A 275
3．仪器设备
于 120~124C 。
氧化钠溶液温度冷却至室温后，混合两种溶液定容至250ml ，存放于聚乙烯瓶中。
可保存一周。
4.3 (1+9)盐酸溶液：取100ml 浓度为1.19g/ml 的盐酸于900ml 蒸馏水中混匀。
4.4 (200g/L)氢氧化钠溶液：称取 20.0g 氢氧化钠溶于少量水中，用水稀释至 100ml 。
4.5 (20g/L)氢氧化钠溶液：取200g/L 氢氧化钠溶液10.0 ml ，用水稀释至
100ml 。
4.6 浓硫酸：p( H 2SO 4) =1.84g/ml
4.7 (1+35)硫酸溶液：取浓硫酸25ml 慢慢边搅拌边倒入875ml 水中。
3.1 紫外分光光度计： 3.2 高压蒸汽灭菌器： 配有
10mm 石英比色皿。
最高工作压力不低于
1 . 1 ~ 1 .4kg/cm 2,
；最高工作温度不低 3.3 玻璃具塞比色管： 25ml 。
3.4 分析天平：精度 0.01g 。
3.5 一般实验室常用仪器和设备。
4．试剂
除另有说明， 分析时均使用符合国家标准的的分析纯试剂， 试验用水为蒸馏
水。
4.1 蒸馏水。
4.2 碱性过硫酸钾溶液：称取10.0g 过硫酸钾(进口试剂)溶于
150ml 水中(可 置于 50°C 水浴中加热至全部溶解)；另称取3.75g 氢氧化钠溶于 75m 水中。
待氢
4.8总氮标准溶液：10 1 g/m。
5．样品制备
取适量样品用20g/L 氢氧化钠或（1+35）硫酸溶液调节pH 值至5~9，待测。
6．分析测定6.1 校准曲线的绘制：
取标准曲线各浓度点0.00、0.20、0.50、1.00、3.00、7.00ml 的标准溶液于6
支25ml 玻璃具塞比色管中，加水稀释至10.00ml ，再加入5.00ml 碱性过硫酸钾溶液，塞紧管塞，用砂布和线绳扎紧管塞，以防弹出。
将比色管置于高压蒸汽灭菌锅中，加热至顶压阀吹气，关阀，继续加热至120C开始计时，保持温度在120-124C之间50min。
自然冷却开阀放气，取出比色管冷却至室温，按住管塞
将比色管中的液体颠倒混匀2－3 次。
每个试管分别加入1.0 m（l 1+9）盐酸溶液，
加水稀释至25ml 标线，盖塞混匀。
使用10mm 石英比色皿，在紫外分光光度计上，以水作参比，分别于波长220nm和275nm处测定吸光度。
以总氮（以N计）含量（11 g为横坐标，对应的A r值为纵坐标，绘制校准曲线。
A b=A b220-2A b275
A s=A s220-2A s275
Ar=A s-A b
式中：A b-零浓度（空白）溶液的校正吸光度;
A b220-零浓度（空白）溶液于波长220nm处的吸光度;
A b275-零浓度（空白）溶液于波长275nm处的吸光度;
A s-标准溶液的校正吸光度；
A s220-标准溶液于波长220nm处的吸光度;
A s275-标准溶液于波长275nm处的吸光度；
A r-标准溶液校正吸光度与零浓度（空白）溶液校正吸光度的差。
6.2 样品的测定：
量取10.00ml 试样至25ml 比色管中，按照6.1步骤进行测定。
注：试样中的含氮量超过70ig时，可减少取样量并加水稀释至10 ml。
6.3空白试验：。