实验七 植物染色体标本的制备与观察
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实验七 植物染色体标本的制 备与观察
一、实验目的
1.学习植物染色体制片的基本原理和方法。 2.了解细胞周期过程中染色体的动态变化。
二、实验原理
常规压片染色体常不能完全散开,容易重叠、变形 、断裂，影响显带结果，核型分析较困难。 20世纪70年代以来，参照动物染色体标本制备技 术，对植物细胞去壁、低渗、火焰干燥方法，取 得了很好的结果。但操作繁琐，费用较贵。 分散良好的标本片用于染色体计数、组型分析、 显带、显微操作、原位杂交等分子细胞遗传学研 究领域。
解离：取出根尖放入1mol/L HCl（58-60 ℃解离 对比）解离14-15min，软化去除细胞壁及果胶物 质，使细胞易于分散。 染色：倒去热HCl后，用改良苯酚品红染色液染 色5～10min。 漂洗：吸去染色液，用漂洗液换洗2-3次，每次12分钟。
ห้องสมุดไป่ตู้
酶解：在载玻片上切取根尖着色深的部分，浸入 小酒杯内1-2第混合酶液中，室温下酶解40min左 右或在28 ℃温箱中酶解20min左右。
2．分裂时期及染色体形态观察
尽量寻找下列分裂期染色体图像。
前 期
中 期
后 期
末 期
3. 典型染色体标本进行显微照相
洋葱根尖细胞染色体
百合根尖细胞染色体 绿豆根尖细胞染色体
五、实验报告
实验目的 实验用品 实验原理 实验方法 思考题
六、思考题
简述前处理过程中加入秋水仙素的的作用，以 及酸解的时间和温度对染色体标本制片质量的 影响。 绘制1张分裂有丝分裂中期细胞染色体图像，简 要说明其染色体特征。
取材：将小麦放在25℃温箱中发芽，待根长到 1~2cm左右，窃取0.5cm长的根尖部分。
前处理：剪下根尖用0.1％秋水仙素溶液处理3～ 4h。也可将剪下的根尖放在0～3℃蒸馏水中，置 冰箱中24小时，使分裂的细胞尽可能集中于分裂 中期。
固定：用水洗净处理过的根尖，经Carnoy固定2～ 24小时。换入70%的酒精，使细胞的分裂活动处 于停滞状态。 制片：有多种方法——切片、压片、滴片等。
器具：恒温培养箱，显微镜
试剂：0.1％秋水仙素溶液，Carnoy固定液， 1mol/L HCL, 亚硫酸水溶液（漂洗液），纤维素酶 ，果胶酶，改良苯酚品红染色液（Carbor fuchsin ，）
材料：常用分生区组织，如根尖、茎尖和嫩叶做材 料。本次试验选用：小麦根尖。
四、实验方法
一） 根尖培养和预处理
洗涤：吸去酶液，加蒸馏水，用吸管换洗几次， 吸去残留的煤业后加入45%的醋酸。 压片：用吸管从醋酸中吸去材料，置于干净的载 玻片上，保留少许醋酸，盖上盖玻片，覆以吸水 纸，轻轻敲打盖片，使细胞和染色体分散。 镜检
四：实验观察结果
1．分裂细胞观察 低倍镜找分裂细胞区,高倍镜观察染色体形 态。估计染色体数目。
染色体组在细胞分裂中期的表型称为染色体组型 或称核型，包括染色体数目、形态、大小、着丝 点位置及副缢痕及随体的有无等特征。 染色体组型分析就是通过对染色体标本或其照片 进行测量、对比分析、配对、分组、排列，对组 内各染色体的形态进行测量、描述，从而阐明生 物染色体组成的过程。
三、实验材料
一、实验目的
1.学习植物染色体制片的基本原理和方法。 2.了解细胞周期过程中染色体的动态变化。
二、实验原理
常规压片染色体常不能完全散开,容易重叠、变形 、断裂，影响显带结果，核型分析较困难。 20世纪70年代以来，参照动物染色体标本制备技 术，对植物细胞去壁、低渗、火焰干燥方法，取 得了很好的结果。但操作繁琐，费用较贵。 分散良好的标本片用于染色体计数、组型分析、 显带、显微操作、原位杂交等分子细胞遗传学研 究领域。
解离：取出根尖放入1mol/L HCl（58-60 ℃解离 对比）解离14-15min，软化去除细胞壁及果胶物 质，使细胞易于分散。 染色：倒去热HCl后，用改良苯酚品红染色液染 色5～10min。 漂洗：吸去染色液，用漂洗液换洗2-3次，每次12分钟。
ห้องสมุดไป่ตู้
酶解：在载玻片上切取根尖着色深的部分，浸入 小酒杯内1-2第混合酶液中，室温下酶解40min左 右或在28 ℃温箱中酶解20min左右。
2．分裂时期及染色体形态观察
尽量寻找下列分裂期染色体图像。
前 期
中 期
后 期
末 期
3. 典型染色体标本进行显微照相
洋葱根尖细胞染色体
百合根尖细胞染色体 绿豆根尖细胞染色体
五、实验报告
实验目的 实验用品 实验原理 实验方法 思考题
六、思考题
简述前处理过程中加入秋水仙素的的作用，以 及酸解的时间和温度对染色体标本制片质量的 影响。 绘制1张分裂有丝分裂中期细胞染色体图像，简 要说明其染色体特征。
取材：将小麦放在25℃温箱中发芽，待根长到 1~2cm左右，窃取0.5cm长的根尖部分。
前处理：剪下根尖用0.1％秋水仙素溶液处理3～ 4h。也可将剪下的根尖放在0～3℃蒸馏水中，置 冰箱中24小时，使分裂的细胞尽可能集中于分裂 中期。
固定：用水洗净处理过的根尖，经Carnoy固定2～ 24小时。换入70%的酒精，使细胞的分裂活动处 于停滞状态。 制片：有多种方法——切片、压片、滴片等。
器具：恒温培养箱，显微镜
试剂：0.1％秋水仙素溶液，Carnoy固定液， 1mol/L HCL, 亚硫酸水溶液（漂洗液），纤维素酶 ，果胶酶，改良苯酚品红染色液（Carbor fuchsin ，）
材料：常用分生区组织，如根尖、茎尖和嫩叶做材 料。本次试验选用：小麦根尖。
四、实验方法
一） 根尖培养和预处理
洗涤：吸去酶液，加蒸馏水，用吸管换洗几次， 吸去残留的煤业后加入45%的醋酸。 压片：用吸管从醋酸中吸去材料，置于干净的载 玻片上，保留少许醋酸，盖上盖玻片，覆以吸水 纸，轻轻敲打盖片，使细胞和染色体分散。 镜检
四：实验观察结果
1．分裂细胞观察 低倍镜找分裂细胞区,高倍镜观察染色体形 态。估计染色体数目。
染色体组在细胞分裂中期的表型称为染色体组型 或称核型，包括染色体数目、形态、大小、着丝 点位置及副缢痕及随体的有无等特征。 染色体组型分析就是通过对染色体标本或其照片 进行测量、对比分析、配对、分组、排列，对组 内各染色体的形态进行测量、描述，从而阐明生 物染色体组成的过程。
三、实验材料