病毒感染的检查方法与防治原则
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
制作用。
❖ （2）病毒蛋白酶抑制剂：通过抑制病毒 蛋白酶的活性，阻止病毒的复制.
常用药物有印地那韦、利多那韦等，对 HIV有一定抑制作用。
❖ （3）其它抗病毒药物：金刚烷胺或甲基 金刚烷胺用于甲型流感的治疗，甲酸磷 霉素用于疱疹病毒感染的治疗。
❖ 2．干扰素及干扰素诱生剂 : 干扰素具有广谱抗病毒作用，主要用
（二）供血清学检查的标本的采集原则
1、检测特异性抗体需要采取急性期与恢复 期双份血清，第一份尽可能在发病后立即 采取，第二份在发病后2～3周采取。 2、血清标本放4℃-20℃保存，试验前血 清标本以56℃30分钟处理去除非特异性物 质及补体。 3、无菌性脑炎患者也可取脑脊液检测特异 性lgM。
二、形态学检查
病毒在细胞内增殖的指标
正常细胞 病变细胞
干扰现象
概念：两种不同病毒或同种异型病毒、感染同一细胞 时，一种病毒抑制另一病毒增殖的现象。
病毒诱导宿主细胞产生干扰素:抑制被干扰病毒的 生物合成。
竞争干扰：一种病毒破坏宿主细胞的表面受体， 因而阻断另一病毒吸附。
改变宿主细胞的代谢途经：从而阻止第二种病毒 的mRNA的合成或其他生物合成过程。
第三节 病毒感染的治疗
❖ 1．抗病毒的化学制剂：目前抗病毒化学药物主要 有核苷类药物。
（1）核苷类药物：通过阻抑子代病毒基因的合成与 表达，抑制病毒复制 .
常用药物有: 用于DNA病毒感染:阿糖腺苷、碘尿苷、无环鸟苷
（阿昔洛韦）、丙氧鸟苷； 用于HIV感染:叠氮脱氧胸苷（AZT） 广谱抗病毒:3-氮唑核苷，对多种RNA或DNA病毒有抑
❖ （3）运输:冷藏速送。病毒离活体后在室温下很易 死亡，故采得检材应尽快送检。远距离运送，应将 检材放入装有冰块或干冰的空器内送检。病变组织 则应保存于50%的甘油缓冲盐水中。
❖ （4）处理：无菌操作；污染检材，加双抗生素或 氯仿处理。如鼻咽分泌液、粪便等应加入青霉素、 链霉素等，以免杂菌污染细胞或鸡胚，而影响病毒 分离。
IFN-α，副作用小，对某些病毒性疾病的防 治有较好的效果 。
❖ 3．中草药: 黄芪、大青叶、板兰根、贯众。
❖ 4．其他:单克隆抗体、治疗性疫苗、细胞因 子等免疫制剂。
第一节 病毒感染的检查方法
一、标本采集与送检：
（一）供病毒分离培养、检测核酸和抗原
1、采集的标本：通常采集血液、鼻咽分 泌液、咯痰、粪便、脑脊液、疱疹内容 物、活检组织或尸检组织等。
2、采集原则
❖ （1）时间:在发病初期（急性期）采取，较易检出 病毒，越迟阳性率越低。
❖ （2）类型:在感染部位采取。如呼吸道感染采取鼻 咽洗漱液或咯痰；
Microplate ELISA for HIV antibody: coloured wells indicate reactivity
五、特异性抗体的检测
❖ 病毒感染后通常诱发针对病毒一种或多种抗 原免疫应答，特异性抗体效价升高或lgM抗 体出现有辅助临床诊断的价值。
（一）补体结合试验（CF） （二）中和试验（NT） （三）血凝抑制试验 （HIA）
二、人工被动免疫
❖ 常用制剂有：
❖ ①抗病毒免疫血清:现有抗麻疹、
抗狂犬病、抗乙型脑炎免疫血清等，这些 免疫血清具有显著的预防作用；
②人免疫球蛋白制剂:包括人血清丙种球蛋 白、胎盘球蛋白
❖ ③特异性免疫球蛋白：从某种病毒感染者 的血清中提取、纯化后制备的免疫球蛋白 ，可紧急预防相应的病毒感染，如乙型肝 炎免疫球蛋白（HBIg）。
产生缺陷病毒:其基因不能正常复制，但能干扰感 染性病毒体的复制，这种缺陷病毒称为缺陷干扰 颗粒。
四、病毒成分（核酸及抗原）的直接检出
❖ （一）直接检出病毒核酸
1．核酸杂交 2．多聚酶链反应 3. 基因芯片技术
❖ （二）直接检测病毒抗原
1．免疫荧光（IF）技术 2．酶联免疫吸附试验（ELISA）
ELISA
❖ 电子显微镜（EM）:能观察病毒颗粒的形态和 大小。
❖ 光学显微镜:能观察病毒感染细胞内的病理变 化，如包涵体或多核巨细胞等。
例如，狂犬病病毒感染后可在脑神经细胞浆中检 出嗜酸性包涵体，称为内基小体，可辅助诊断狂 犬病。
wenku.baidu.com
三、病毒的分离培养
（一）病毒分离的一般程序是
检验标本→杀灭杂菌(青、链霉素)→接种
六、病毒感染的快速诊断
光镜-----包涵体 电镜
免疫荧光
ELISA
杂交
分子生物学技术 PCR
第二节 病毒感染的免疫预防
一、人工主动免疫
❖ 人工主动免疫制剂——病毒疫苗： （一）减毒活疫苗
是由从自然界或人工突变培育筛选出的致病性减弱 或丧失的病毒突变株制备而成的疫苗，如脊髓灰质炎 活疫苗。 （二）灭活疫苗 是利用某些理化因素处理活病毒，使其失去感染性后制 备而成。如乙型脑炎灭活疫苗。 （三）亚单位疫苗 是将病毒中有效的免疫原成分提取制备而成。 （四）基因工程疫苗 利用基因工程技术制备的病毒疫苗主要有：①基因工程 亚单位疫苗；②基因工程载体疫苗；③核酸疫苗。
易感的动物→出现病状 鸡胚→病变或死亡 细胞培养→细胞病变
→鉴定病毒种型(血清学方法)
（二）分离病毒的鉴定
1．病毒在细胞内增殖的指征 （1）细胞致病作用(Cytopathogenic effect,CPE):病
毒在细胞内增殖引起细胞退形性变，表现为细胞皱缩、 变圆、出现空泡、死亡和脱落。某些病毒产生特征性 CPE，普通光学倒置显微镜下可观察上述细胞病变， 结合临床表现可做出预测性诊断。 （2）红细胞吸附现象 （3）干扰现象 （概念、作用机理、意义） 2．病毒感染性的定量测定 ：
❖ （2）病毒蛋白酶抑制剂：通过抑制病毒 蛋白酶的活性，阻止病毒的复制.
常用药物有印地那韦、利多那韦等，对 HIV有一定抑制作用。
❖ （3）其它抗病毒药物：金刚烷胺或甲基 金刚烷胺用于甲型流感的治疗，甲酸磷 霉素用于疱疹病毒感染的治疗。
❖ 2．干扰素及干扰素诱生剂 : 干扰素具有广谱抗病毒作用，主要用
（二）供血清学检查的标本的采集原则
1、检测特异性抗体需要采取急性期与恢复 期双份血清，第一份尽可能在发病后立即 采取，第二份在发病后2～3周采取。 2、血清标本放4℃-20℃保存，试验前血 清标本以56℃30分钟处理去除非特异性物 质及补体。 3、无菌性脑炎患者也可取脑脊液检测特异 性lgM。
二、形态学检查
病毒在细胞内增殖的指标
正常细胞 病变细胞
干扰现象
概念：两种不同病毒或同种异型病毒、感染同一细胞 时，一种病毒抑制另一病毒增殖的现象。
病毒诱导宿主细胞产生干扰素:抑制被干扰病毒的 生物合成。
竞争干扰：一种病毒破坏宿主细胞的表面受体， 因而阻断另一病毒吸附。
改变宿主细胞的代谢途经：从而阻止第二种病毒 的mRNA的合成或其他生物合成过程。
第三节 病毒感染的治疗
❖ 1．抗病毒的化学制剂：目前抗病毒化学药物主要 有核苷类药物。
（1）核苷类药物：通过阻抑子代病毒基因的合成与 表达，抑制病毒复制 .
常用药物有: 用于DNA病毒感染:阿糖腺苷、碘尿苷、无环鸟苷
（阿昔洛韦）、丙氧鸟苷； 用于HIV感染:叠氮脱氧胸苷（AZT） 广谱抗病毒:3-氮唑核苷，对多种RNA或DNA病毒有抑
❖ （3）运输:冷藏速送。病毒离活体后在室温下很易 死亡，故采得检材应尽快送检。远距离运送，应将 检材放入装有冰块或干冰的空器内送检。病变组织 则应保存于50%的甘油缓冲盐水中。
❖ （4）处理：无菌操作；污染检材，加双抗生素或 氯仿处理。如鼻咽分泌液、粪便等应加入青霉素、 链霉素等，以免杂菌污染细胞或鸡胚，而影响病毒 分离。
IFN-α，副作用小，对某些病毒性疾病的防 治有较好的效果 。
❖ 3．中草药: 黄芪、大青叶、板兰根、贯众。
❖ 4．其他:单克隆抗体、治疗性疫苗、细胞因 子等免疫制剂。
第一节 病毒感染的检查方法
一、标本采集与送检：
（一）供病毒分离培养、检测核酸和抗原
1、采集的标本：通常采集血液、鼻咽分 泌液、咯痰、粪便、脑脊液、疱疹内容 物、活检组织或尸检组织等。
2、采集原则
❖ （1）时间:在发病初期（急性期）采取，较易检出 病毒，越迟阳性率越低。
❖ （2）类型:在感染部位采取。如呼吸道感染采取鼻 咽洗漱液或咯痰；
Microplate ELISA for HIV antibody: coloured wells indicate reactivity
五、特异性抗体的检测
❖ 病毒感染后通常诱发针对病毒一种或多种抗 原免疫应答，特异性抗体效价升高或lgM抗 体出现有辅助临床诊断的价值。
（一）补体结合试验（CF） （二）中和试验（NT） （三）血凝抑制试验 （HIA）
二、人工被动免疫
❖ 常用制剂有：
❖ ①抗病毒免疫血清:现有抗麻疹、
抗狂犬病、抗乙型脑炎免疫血清等，这些 免疫血清具有显著的预防作用；
②人免疫球蛋白制剂:包括人血清丙种球蛋 白、胎盘球蛋白
❖ ③特异性免疫球蛋白：从某种病毒感染者 的血清中提取、纯化后制备的免疫球蛋白 ，可紧急预防相应的病毒感染，如乙型肝 炎免疫球蛋白（HBIg）。
产生缺陷病毒:其基因不能正常复制，但能干扰感 染性病毒体的复制，这种缺陷病毒称为缺陷干扰 颗粒。
四、病毒成分（核酸及抗原）的直接检出
❖ （一）直接检出病毒核酸
1．核酸杂交 2．多聚酶链反应 3. 基因芯片技术
❖ （二）直接检测病毒抗原
1．免疫荧光（IF）技术 2．酶联免疫吸附试验（ELISA）
ELISA
❖ 电子显微镜（EM）:能观察病毒颗粒的形态和 大小。
❖ 光学显微镜:能观察病毒感染细胞内的病理变 化，如包涵体或多核巨细胞等。
例如，狂犬病病毒感染后可在脑神经细胞浆中检 出嗜酸性包涵体，称为内基小体，可辅助诊断狂 犬病。
wenku.baidu.com
三、病毒的分离培养
（一）病毒分离的一般程序是
检验标本→杀灭杂菌(青、链霉素)→接种
六、病毒感染的快速诊断
光镜-----包涵体 电镜
免疫荧光
ELISA
杂交
分子生物学技术 PCR
第二节 病毒感染的免疫预防
一、人工主动免疫
❖ 人工主动免疫制剂——病毒疫苗： （一）减毒活疫苗
是由从自然界或人工突变培育筛选出的致病性减弱 或丧失的病毒突变株制备而成的疫苗，如脊髓灰质炎 活疫苗。 （二）灭活疫苗 是利用某些理化因素处理活病毒，使其失去感染性后制 备而成。如乙型脑炎灭活疫苗。 （三）亚单位疫苗 是将病毒中有效的免疫原成分提取制备而成。 （四）基因工程疫苗 利用基因工程技术制备的病毒疫苗主要有：①基因工程 亚单位疫苗；②基因工程载体疫苗；③核酸疫苗。
易感的动物→出现病状 鸡胚→病变或死亡 细胞培养→细胞病变
→鉴定病毒种型(血清学方法)
（二）分离病毒的鉴定
1．病毒在细胞内增殖的指征 （1）细胞致病作用(Cytopathogenic effect,CPE):病
毒在细胞内增殖引起细胞退形性变，表现为细胞皱缩、 变圆、出现空泡、死亡和脱落。某些病毒产生特征性 CPE，普通光学倒置显微镜下可观察上述细胞病变， 结合临床表现可做出预测性诊断。 （2）红细胞吸附现象 （3）干扰现象 （概念、作用机理、意义） 2．病毒感染性的定量测定 ：