酶的特性—底物专一性
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试剂
2%蔗糖溶液
1%淀粉溶液(含0.3%氯化钠)
本乃狄(Benedict)试剂:
溶解85g柠檬酸钠和50gNa2CO3•2H2O于400mL蒸馏水中; 另溶8.5g CuSO4•5H2O于50mL热水中。将硫酸铜溶液缓缓倾 入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中,边加边搅匀,如有沉淀可过 滤除去,此试剂可长期保存。
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蔗糖酶溶液(mL)
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1%淀粉溶液(mL)
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2%蔗糖溶液(mL)
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蒸馏水(mL)
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摇匀置 37 度水浴保温 15min
Benedict 试剂(mL)
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沸水浴煮沸 2-3min
记录观察结果
思考题
• 1.观察酶专一性试验为什么要设计这3组实验?每 组各有什么意义?
• 2.请写出淀粉类型,结构和蔗糖的结构式?
• 本实验以唾液淀粉酶(内含淀粉酶及少量麦芽糖酶)和蔗 糖酶对淀粉及蔗糖的催化作用,观察酶的专一性。
仪器设备
试管1.5×15cm 试管架 烧杯100mL,200mL 量筒100mL,10mL 玻璃漏斗 竹试管夹 水浴锅
测试材料
唾液淀粉酶溶液 先用蒸馏水漱口,再含10mL左右蒸馏水,轻轻漱动, 约2分钟后吐出收集在烧杯中,即得清澈的唾液淀粉酶原 液,根据酶活高低稀释50-100倍,即为唾液淀粉酶溶液。
2 淀粉酶的专一性
取3 支试管,按下表操作
操作项目
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唾液淀粉酶溶液(mL)
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1%淀粉溶液(mL)
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2%蔗糖溶液(mL)
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蒸馏水(mL)
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摇匀置 37 度水浴保温 15min
Benedict 试剂(mL)
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沸水浴煮沸 2-3min
记录观察结果
3 蔗糖酶的专一性 取3支试管,按下表操作
操作项目
酶的特性—底物专一性
2013-6-4
实验目的
• 了解酶的专一性 • 学会排除干扰因素,设计酶学实验
实验原理
• 酶的专一性是指一种酶只能对一种底物或一类底物(此类 底物在结构上通常具有相同的化学键)起催化作用,对其 他底物无催化反应。如淀粉酶只能催化淀粉水解,对蔗糖 的水解并无催化作用。淀粉水解产物为葡萄糖,蔗糖水解 产物为果糖及葡萄糖,这两种己糖的半缩醛基可与 Benedict试剂反应,生成氧化亚铜的砖红色沉淀。
蔗糖酶溶液:取1g干酵母放入研钵中,加入少量石英砂和水 研磨,加50mL蒸馏水,静置片刻,过滤即得。
实验步骤
• 1、检查试剂
• 取3支试管,按下表操作
操作项目
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1%淀粉溶液(mL)
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2%蔗糖溶液(mL)
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蒸馏水(mL)
3
Benedict 试剂(mL)
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沸水浴煮沸 2-3min
记录观察结果
• 操作项目0121%淀粉溶液(mL) 3 2%蔗糖溶液(mL) 3蒸馏水 (mL)3 Benedict试剂(mL)222沸水浴煮沸2-3min记录观察结果