G试验影响因素解析
G值影响因素
烟煤粘结指数测定的影响因素为了探讨和分析烟煤粘结指数测定的影响因素，对专用无烟煤的质量、采样、制样、化验分析过程进行了大量的试验研究，结果表明专用无烟煤的质量、采样、制样、化验分析中的不规范操作、烘干时间和煤样粒度对粘结指数测定影响较大，为提高粘结指数分析准确率奠定了坚实基础。
粘结指数（用G表示）将一定质量的试验煤样和专用无烟煤在规定的条件下混合，快速加热成焦，所得焦块在一定规格的转鼓内进行强度检验，用规定的公式计算粘结指数，以表示试验煤样的粘结能力。
它是判别煤的粘结性、结焦性的一个关键性指标，可以预测煤的胶质体情况和焦炭的机械强度，了解各种煤在炼焦配煤中的作用，指导配煤，为生产提供科学依据。
所以是化验室煤焦分析的重要项目。
它的准确与否直接影响客户的结算和焦炭质量。
但是，粘结指数又是一个规范性很强的分析项目，涉及采样、制样与分析，操作环节多，步骤繁琐，影响因素较多。
通过多年的工作实践，对粘结指数测定中遇到的问题进行了大量的试验、研究和分析，寻找影响烟煤粘结指数的测定因素，与大家共同探讨。
1.专用无烟煤质量国标要求采用的无烟煤为宁夏汝箕沟煤矿的专用无烟煤,并且具有一定的技术要求,我公司购进的无烟煤虽是宁夏汝箕沟煤矿的专用无烟煤（可能有时不是真正厂家的），大多数符合技术要求，但有时粒度、灰分达不到要求（目前还未发现水分、挥发分不符合要求的），如某次进回来的A#、B#无烟煤质量如下：表1－1 专用无烟煤质量技术指标A#无烟煤的错误！链接无效。
、错误！链接无效。
、错误！链接无效。
均符合标准，而粒度不符合标准B#无烟煤Mad、Vdaf、粒度均符合要求,而错误！链接无效。
不符合要求．我们分别用合格无烟煤、A#和B#对同一分析煤样作G值对比，结果如表1-2、表1-3由上表可知，专用无烟煤的质量是否符合要求直接影响G值的测定结果和准确性，专用无烟煤粒度、灰分高于标准时，Ｇ值偏低，不能代表煤的真实值。
2.采样数理统计表明:在煤质鉴定的采、制、化三个环节中，采样造成的误差占总误差的80%，制样占16%，化验占4%，可见采取有代表性的煤样在煤质分析中具有重要意义，它对分析结果的准确与否起着决定性的作用。
影响内毒素G试验结果的常见因素
影响内毒素、G试验结果的一些常见因素
一、采血严格按照无菌要求采集，须用专门配套耗材，采血后及时送检。
二、黄疸、溶血、乳糜血会影响检测结果。
三、引起细菌内毒素假阳性原因是：使用某些抗生素类药物，如磺胺类、以细菌为原料加工成的药物。
四、引起G试验假阳性原因有：
1、应用纤维素膜进行血液透析患者；
2、某些纱布或其他医疗物品中含有葡聚糖；
3、某些品牌的静脉制剂（白蛋白、凝血因子、免疫球蛋白等）含有葡聚糖；
4、某些细菌败血病患者（尤其是链球菌败血症）；
5、抗肿瘤药物（如香菇多糖、裂殖菌多糖等）；
6、含有菌类食物。
五、隐球菌和接合菌不能检出。
六、内毒素检测的灵敏度大概为88%，特异性为90%；G试验的灵敏度为88%，特异性为85%。
七、一次检测结果不能成为确诊依据，须由临床医生根据检测结果并结合临床症状及其他检测结果综合分析。
八、G试验适用于深部真菌，浅部真菌在体内血液中含量并不增高。
九、尽管假阳性原因不清，需进行动态监测（1-3）-β-D葡聚糖的变化，可以降低假阳性的发生。
G试验和GM实验的区别及其临床意义
G试验和GM实验的区别及其临床意义在医学领域，为了准确诊断和治疗各种疾病，特别是与真菌感染相关的病症，临床医生常常会借助各种实验室检查手段。
其中，G 试验和 GM 实验是两种常见且重要的检测方法。
接下来，让我们详细了解一下它们的区别以及在临床上的重要意义。
首先，我们来看看 G 试验。
G 试验检测的是人体中（1,3）βD葡聚糖的含量。
（1,3）βD葡聚糖广泛存在于除接合菌和隐球菌外的真菌细胞壁中。
当人体感染真菌后，真菌细胞壁上的（1,3）βD葡聚糖会被释放进入血液及其他体液中。
通过特定的检测方法，可以检测到这种物质的含量变化。
G 试验的适用范围相对较广。
它可以用于多种真菌感染的诊断，如念珠菌感染、曲霉菌感染、毛霉菌感染等。
而且，不仅在明确的真菌感染病例中具有诊断价值，在疑似真菌感染的早期筛查中也能发挥作用。
然而，G 试验也存在一定的局限性。
某些因素可能会导致假阳性结果的出现。
例如，使用某些含有葡聚糖的血液制品，如白蛋白、免疫球蛋白等；又或者在患者进行血液透析、使用某些纤维素膜时，都可能使检测结果呈现假阳性。
另外，一些细菌感染，特别是革兰氏阴性菌感染，也可能干扰 G 试验的结果。
接下来，我们说一说 GM 实验。
GM 实验检测的是血清中的半乳甘露聚糖抗原。
半乳甘露聚糖是曲霉菌细胞壁的成分之一。
当人体感染曲霉菌后，曲霉菌生长过程中会释放半乳甘露聚糖进入血液，通过检测其含量，可以辅助诊断曲霉菌感染。
GM 实验对于曲霉菌感染的诊断具有较高的特异性，但敏感性相对较低。
这意味着它在确诊曲霉菌感染时较为准确，但可能会漏掉一些实际感染的病例。
GM 实验也有其影响因素。
比如，使用某些抗真菌药物，如两性霉素B 等，可能会导致假阴性结果。
同时，某些食物，如牛奶、奶酪等，也可能影响检测结果。
那么，G 试验和 GM 实验到底有哪些区别呢？从检测的物质来看，G 试验检测的是（1,3）βD葡聚糖，而 GM 实验检测的是半乳甘露聚糖抗原。
G 试验常见问题分析和解决
G 试验常见问题分析和解决首都医科大学附属北京安贞医院左大鹏G 试验常见问题分析和解决。
这些问题是在使用、操作当中发现的。
或者是和临床沟通反应的问题，当然我们只是列出一些问题，可能还有一些问题我们没有涉及到。
希望大家在以后的工作当中发现，多和临床沟通，多和试剂的研发单位沟通，把 G 实验的问题更好的解决。
G 实验和 GM 实验都是新的技术，新技术需要在实践中不断地完善、优化、提高。
第一，为什麽同一份标本在实验室检测结果不一致？指在不同的实验，结果不一致。
这与检测系统有关。
目前 G 试验没有行业标准，只有企业标准。
而不同厂家设计生产的检测系统（包括试剂和仪器）的性能不同，这里涉及到不同厂家使用的标准品、试剂来源、前处理等，所以同一份标本在同的实验室，使用不同厂家的加成结果是不同的。
检测结果不具有可比性。
G 实验目前还不能作为不同医院间通用的指标。
我们医院的检测结果，只能说明这套系统的检测结果，不能说那套的。
第二， G 试验结果为阳性，提示病人有真菌感染，而真菌培养结果为阴性，如何解释？解答：这主要与培养法和非培养法检测的原理不同和对疾病诊断的时间窗不同有关。
真菌进入人体后，会在较短的时间内释放出 1 ， 3- β -D- 葡聚糖，因此，在感染早期就可能呈现阳性结果。
而培养则需要细菌在体内有一定的增殖过程，因此在感染的高峰期培养阳性率高。
所以有文献报告血浆 1 ， 3- β -D- 葡聚糖在侵袭性真菌感染症状出现前 5 天就可呈检出。
此外，从方法学上讲，内毒素和 1 ， 3- β -D- 葡聚糖检查多采用鲎试验方法，方法简便、快速，而培养则需要时间，细菌和真菌的体外生长需要一定的条件，如果条件（例如培养基、温度、时间等）掌握不好，则难于培养成功。
有文献报告，对侵袭性真菌感染的诊断，血浆 1 ， 3- β -D- 葡聚糖的诊断特异度和敏感度均高于培养，其 ROC 曲线表示的话， G 实验的 roc 曲线面积要大于培养方法。
G试验和GM试验检测的方法及临床意义
G试验和GM试验检测的方法及临床意义G试验和GM试验检测的方法及临床意义侵袭性真菌病即是以往所说的深部真菌病，是指致病性真菌侵犯皮下组织、粘膜、肌肉和内脏器官等所引起的真菌感染性疾病。
引起侵袭性真菌病的病原菌有270余种，常见病原菌有念珠菌（占70%-90% ）和曲霉菌（占10%-20%）。
常引起侵袭性真菌病的高危因素有严重粒细胞缺乏、免疫功能低下、移植、糖尿病、肾衰、血透、慢阻肺、实体器官移植、长期激素治疗以及入住ICU 等。
侵袭性真菌感染病早期诊断和治疗面临着巨大挑战，临床表现缺乏特征性，发病率高、死亡率高、漏诊率高且诊断困难，特异性诊断指标有限，继发性真菌感染常被基础疾病和治疗药物所掩盖。
和检验科相关的辅助诊断方法有培养法和非培养法。
血培养作用有限，阳性率较低（念珠菌感染患者血培养阳性率只有38%）。
相对而言，非培养技术就突显出其优越性。
真菌的检测的非培养技术常见的有G实验和GM试验。
此实验敏感性高，阳性检出率高，能早期快速诊断，为临床用药提供帮助。
G试验是检测1,3-β-D-葡聚糖的试验，采用的方法是动态显色法。
1,3-β-D-葡聚糖是真菌细胞壁的一种成分，广泛存在与各种真菌，只有当真菌进入体内被吞噬细胞吞噬，细胞壁被破坏,1,3-β-D-葡聚才能释放入血，定植情况该实验为阴性，所以G试验可区分定植和感染。
G试验可检测除隐球菌和接合菌外的多种真菌感染，对于念珠菌血症而言, G试验检测是首选检查方法。
G试验检测一般先于临床症状平均4天，平均早于发热5天，是早期检测的重要手段。
G试验检测值<70pg/ml定义为阴性，此时不建议抗真菌治疗，当检测值在70-95pg/ml 时定义为灰区，此为观察期，应连续监测，当检测值>95pg/ml定义为阳性, 建议结合临床症状诊断治疗。
GM试验是检测半乳甘露聚糖抗原的试验，采用的方法是酶免法。
半乳甘露聚糖（GM）是曲霉细胞壁的一种成分，GM从薄弱的菌丝顶端释放，曲霉菌感染的患者血液内存在GM。
G试验GM试验
G试验检测的特点
可检测除隐球菌和接合菌外的多种真菌感染 在浅部真菌感染中，1,3-β-D-葡聚糖未被释放出来， 故其在体液中的量不增高。因此可区分定植和感染。 对于念珠菌血症, G试验检测是首选检查方法[2] 。 检测快速，可在1小时得出检测结果。
革兰阴性菌 革兰阳性菌 真菌
患者数
年 份
Martin GS et al. N Engl J Med. 2003 Apr 17;348(16):1546-54.
少见真菌尸检检出率也有所上升
一项对三级肿瘤监护中心血液肿瘤患者的尸检结果显示
2.0%
尸 检 检 出 率 足放线菌 镰刀菌 1.4％ 0.9％ 0.4％
侵袭性曲霉病(Invasive Aspergillosis, IA
)
侵袭性曲霉病是一种严重的机会性感染性疾病。是指致病性曲霉 菌侵犯皮下组织、黏膜、肌肉和内脏器官等所引起的真菌感染性疾
病，危害性较大。
曲霉是条件致病菌，当机体免疫力下降时，如：粒细胞缺乏或HIV
感染，可侵犯肺、甚至全身各系统；呼吸系统曲霉病主要有三种，
传统诊断方法
培养
问题
血培养作用有限，某些播散性感染常常为假阳性 全身使用抗真菌治疗或其它原因易导致假阴性 非无菌部位标本阳性结果，难以判定是真菌定植或感染。 需侵入性手段获取标本 全身使用抗真菌治疗或其它原因易导致假阴性 其它某些真菌或细菌感染也有可能出现相似征象 在免疫正常宿主相关研究较少 目前方法尚未标准化，尚在研究阶段
以念珠菌最为常见
呼吸系统
常见病原体为 念珠菌和曲霉菌
侵袭性 真菌感染
其它部位
骨关节、心血管系统等 以念珠菌最为常见
血浆G试验结果判读-肾功能衰竭篇(曾军)
谢 谢
5
GM试验与G试验的比较
种属 念珠菌属 镰刀菌属 隐球菌属 曲霉菌属 青霉/拟青霉属 接合菌纲
6
G试验
GM试验
G试验影响因素多 严重脓毒症 G试验检测优势：无创、快速及直接
灵敏度和特异度：90%和100%
存在假阳性
G试验的影响因素
肾衰患者的G试验影响因素多 透析膜对G试验的影响
肝、肾功能对血浆(1-3)--D-glucan清除影响
Fungitec （FDA） Glucatell（日本）Wako turbidimetric(日) Maruha colorimetric(日)
折点要求 单位：pg/ml
60-80
Guinea J et al. Mycopathologia 2014;178:403
3
血清G试验
临床意义 敏感性 特异性 50-80% 85-99%
血浆1,3-β -D葡聚糖半衰期
血浆1,3-β -D葡聚糖的检测
检测血浆1,3-β-D葡聚糖对诊断深部侵袭性真菌 感染有帮助 敏感率 27-86.5%，特异率 75-93.8% 影响因素较多，存在假阳性 临床应用需要参考很大的影响因素
血浆G试验的假阳性
G试验的结果判读需要排除假阳性 人体免疫球蛋白输注：G因子反应物质 药物：含1,3-β-D葡聚糖如香菇多糖、crestin、裂褶 菌多糖、磺胺类等 外科手术纱布含葡聚糖 透析膜含有鲎阿米巴样细胞溶解物（LAL）反应物
透析患者1,3-β -D葡聚糖的变化
透析的不同生物膜对1,3-β-D葡聚糖水平的影响 CTA膜影响不大 CTA：1,3-β-D葡聚糖前后分别是：7.9 vs 9 pg/ml Cu膜：1,3-β-D葡聚糖前后分别是：9.4 vs 332pg/ml HD可降低1,3-β-D葡聚糖水平 PMMA膜对1,3-β-D葡聚糖水平影响不大
1,3-β-D-葡聚糖(BG)检测侵袭性真菌感染诊断中的影响因素分析
1,3-β-D葡聚糖(BG)在检测侵袭性真菌感染诊断中的影响因素分析近20年来，由于大剂量广谱抗生素、抗肿瘤药物的长期应用，器官移植及造血干细胞移植等治疗方法的完善，各种导管在体内的介人以及恶性肿瘤、艾滋病等免疫功能低下患者的不断增加，侵袭性真菌感染的发病率明显上升。
侵袭性真菌感染（IFI）临床常无特异性，而真菌实验室诊断方法中镜检、培养、血清学诊断、组织病理学检查和分子生物学方法的检出率较低，G试验检测时间短其为非侵人手段在临床上广受关注。
目的及意义:分清1,3-β-D-葡聚糖检测（G试验）干扰因素，提高准确性。
G试验是及激活试剂中鲎变形细胞裂解物中的凝固酶（G因子），形成凝固蛋白，根据反应物的浓度变化对1,3-β-D葡聚糖浓度进行定量检测。
G试验是念珠菌感染的首选检查方法，检测速度快。
G试验是新的真菌抗原检测方法、念珠菌感染首选检查方法，在深部真菌感染早期诊断有重要意义，检查结果作为方法学评价标准，弥补了传统病理学及培养的不足，提高IFI检测率，缩短检查时间，早期治疗赢得时间为临床合理用药提供帮助。
G试验标准值：＜10pg/ml为阴性，10pg/ml-20pg/ml是观察，＞20pg/ml 阳性。
一般两次及以上G试验阳性及临床特征，并排除干扰因素就可以确定真菌感染。
BG升高原因：1，3-β-D葡聚糖(（1，3）-β-D-glucan,BG)广泛存在于多种真菌细胞壁中，是真菌的特有多糖成分，包括念珠菌、曲霉菌、镰刀菌及卡氏肺孢子菌．占其干质量的50％以上，细菌、人和病毒都不含该成分,真菌菌丝生长的过程中、进入人体体液或深部组织后，经吞噬细胞的吞噬、消化等处理后，1，3-β-D葡聚糖可从细胞壁中释放出来，使血液和体液(如尿、脑脊液，腹水，胸水等)中1，3-β-D葡聚糖含量升高，故检测血液中的BG可以协助侵袭性真菌感染（IFI）的诊断，当真菌在体内含量减少时，机体免疫可迅速清除 1,3-β-D-葡聚糖。
影响DSC和TG分析结果的主要因素
影响DSC分析结果的主要因素1. 样品量样品量少，样品的分辨率髙，但灵敏度下降，一般根据样品热效应大小调节样品量，一般3～5mg。
另一方面，样品量多少对所测转变温度也有影响。
随样品量的增加，峰起始温度基本不变，但峰顶温度增加，峰结束温度也提高，因此如同类样品要相互比较差异，最好采用相同的量。
2. 升温速率通常升温速率范围在5～20度/min。
一般来说，升温速率越快，灵敏度提高，分辨率下降。
灵敏度和分辨率是一对矛盾，人们一般选择较慢的升温速率以保持好的分辨率，而适当增加样品量来提高灵敏度。
一般，随着升温速率的增加，融化峰起始温度变化不大，而峰顶和峰结束温度提高，峰形变宽。
3. 气氛一般使用惰性气体，如氮气、氩气、氦气等，就不会产生氧化反应峰，同时又可以减少试样挥发物对监测器的腐蚀。
气流流速必须恒定（如10ml/min），否则会引起基线波动。
气体性质对测定有显著影响，要引起注意。
如氦气的热导率比氮气、氩气的热导率大约4倍，所以在做低温DSC用氦气作保护气时，冷却速度加快，测定时间缩短，但因为氦气热导率髙，使峰检测灵敏度降低，约是氮气的40％，因此在氦气中测定热量时，要先用标准物质重新标定核准。
在空气中测定时，要注意氧化作用的影响。
有时可以通过比较氮气和氧气中的DSC曲线，来解释一些氧化反应。
TG分析的主要影响因素一、仪器的影响1. 浮力的影响（1）热天平在热区中，其部件在升温过程中排开空气的重量在不断减小，即浮力在减小，也就是试样的表观增重。
（2）热天平试样周围气氛受热变轻会向上升，形成向上的热气流，作用在热天平上相当于减重，这叫对流影响。
2. 坩埚的影响热分析用的坩埚(或称试样杯、试样皿)材质，要求对试样、中间产物、最终产物和气氛都是惰性的，即不能有反应活性，也不能有催化活性。
坩埚的大小、重量和几何形状对热分析也有影响。
3. 挥发物再冷凝的影响试样热分析过程逸出的挥发物有可能在热天平其它部分再冷凝，这不但污染了仪器，而且还使测得的失重量偏低，待温度进一步上升后，这些冷凝物可能再次挥发产生假失重，使TG曲线变形，使测定不准，也不能重复。
G试验介绍、影响因素和用药指南
趋向性诊断，早期筛查真菌感染——临床医生的诊断帮手1-3-β-D葡聚糖本质及特点(1-3)-β-D葡聚糖特性G试验的特点耗时短，１小时左右；灵敏度高，特异性强，定量检测；对于念珠菌血症，Ｇ试验是首选；葡聚糖广泛存在于真菌细胞壁中。
研究表明，（1-3）-β-D葡聚糖是占真菌壁50%以上的成分。
血液葡萄糖检测可在拟诊早期为临床医生提供机体是否感染真菌的可靠信息，1,3-β-D葡聚糖可用于真菌感染的早期诊断。
对热极为稳定，高压１２１℃并不能使其灭活。
在念珠菌和曲霉菌细胞壁中含量较多，对Ｇ试验灵敏。
有效早期筛查，可检测多种致病真菌感染，如念珠菌，曲霉，肺孢子菌，镰刀菌，地霉，毛孢子菌等； 当真菌进入人体血液或深部组织中后，经吞噬细胞的吞噬、消化等处理后，（１－３）－β－Ｄ葡聚糖可从胞壁中释放出来，从而使血液及其它体液中含量增高。
当真菌在体内含量减少时，机体免疫系统可将其清除。
在浅部真菌感染中（痰液、皮肤、粘膜等属于浅部真菌感染的范畴），（１－３）－β－Ｄ葡聚糖未被释放出来，故其在体液中的量不增高。
［１］［２］［３］［４］［５］Ｇ试验检测的临床意义——抢先治疗G试验和GM试验的比较易感因素广谱抗生素治疗；骨髓和实体器官移植；长期激素治疗；AIDS等免疫缺陷症；抗肿瘤药物和免疫抑制剂治疗；插管等侵袭性治疗；基础类疾病：糖尿病、肝硬化等；是早期诊断IFI 无创检测手段之一；快速诊断：在1-2小时内为临床诊断侵袭性真菌感染症提供试验依据；指导用药：根据结果有针对性使用抗真菌类药物立即治疗；评价效果：应用抗真菌药物后，定期检测，评价药物的有效性；监护病程：监护侵袭性真菌感染易感人群的病发状态；［６］Ｇ试验检测结果判读１、趋向性诊断儿童阈值比成人偏高，建议用50pg/m l 为阈值趋向性诊断——G 试验阴、阳性意义早期有效抗真菌治疗可极大改善患者预后美国四大医疗中心做的关于IF I 的一项回顾性研究*IFI: Intensive Fungal Infection 侵袭性真菌感染对于IFI 的患者，如不及时治疗会造成很高的死亡率（如图），因此早期有效抗真菌治疗至关重要。
G试验
7.O. Albert, Eur J Clin Microbiol Infect Dis ,2011,30:1453– 1460.
假阳性影响因素
3. 2细菌感染-革兰氏阴性菌
43个菌血症患者，16个BG阳性，分布如下。
菌血症
人数
BG阳性人数
假阳性率
革兰氏阴性杆菌
22
13
59.1%*
革兰氏阴性球菌
17
推荐级别
美国指南
传染病信息 2014 年 02 月 28 日第 27 卷第 1 期 Infect Dis Info, Vol. 27, No. 1, February 28, 2014
2013年美国《感染性疾病微生物学实验室 诊断应用指南》简介 —病原及标本处理部分
表6医疗相关和医院获得性肺炎及呼吸机相关性肺炎实验室诊断
肺真菌病诊断和治疗专家共识
中华医学会呼吸病 学分会感染 学组
中华结核和呼吸杂 志编辑委 员会
共识中声明，G试验(1，3-β-D葡聚糖)、GM试验阳性是肺部真菌病的 临床诊断中微生物学证据之一
G试验作为诊断标准已纳入肺部真菌感染患者诊断 标准与治疗原则中。
1.血液制品：
输注白蛋白、免疫球蛋白、凝血因子或血液制品；
假阳性影响因素
2. 1 药物-克拉维
酸
采取6个患者10份血清检测G试验水平，克拉维酸治疗组BG水平
1339-1798 pg/ml，头孢他啶治疗组BG水平17.7-26.5 pg/ml，健康
对照组BG水平8.0±13.8 pg/ml。
提示：克拉维酸显著提高血清BG水平。并且克拉维酸治疗前BG水 平为阴性，注射结束20min血清BG水平可升至800pg/ml以上水 平。
G试验假阳性因素
G试验假阳性因素：1、污染2、应用纤维素膜进行透析3、纱布以及其他医疗物品中含有葡聚糖；4、败血症患者（尤其是链球菌血症）；5、某些抗肿瘤药物（香菇多糖，裂殖菌多糖）；6、某些静脉制剂（白蛋白，免疫球蛋白，凝血因子）的使用；7、磺胺类药物；8、个人饮食（某些患者喜欢吃蘑菇类食物）。
G试验假阴性因素1、G试验不能检测隐球菌和接合菌；2、使用某些抗真菌药物（卡泊芬净：可非竞争性抑制1-3-β-D葡聚糖的合成）；3、标本放置时间过长。
解决策略：建议进行动态观测，同时可对用药疗效进行监控，帮助合理用药。
G M试验检测的是半乳甘露聚糖，主要适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。
曲霉菌特有的细胞壁多糖成分是β（1-5）呋喃半乳糖残基，菌丝生长时，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的抗原。
GM释放量与菌量成正比，可以反映感染程度。
连续检测GM可作为治疗疗效的监测。
在造血干细胞移植患者中的诊断敏感性高。
值得注意的是，以下情况可出现假阳性：（1）使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦；（2）新生儿和儿童；（3）血液透析；（4）自身免疫性肝炎等；（5）食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。
以下情况可出现假阴性：（1）释放入血循环中的曲霉GM（包括甘露聚糖）并不持续存在而是会很快清除；（2）以前使用了抗真菌药物；（3）病情不严重；（4）非粒细胞缺乏的患者。
儿童闭塞性细支气管炎发表时间：2009-05-16 发表者：苏苗赏(访问人次：3112)闭塞性细支气管炎(bronchiolitis obliterans,BO)是与小气道炎症性损伤相关的慢性气流阻塞综合征，在儿童中是一种相对少见而严重的慢性阻塞性肺病。
根据组织学特点将BO分为两大类型：（1）狭窄性细支气管炎，为不同程度的慢性炎症或纤维化的阻塞；（2）增生性细支气管炎，即管腔内纤维化。
感染后的BO通常为狭窄性细支气管炎。
一、病因BO的起病是由多种原因引起的小气道上皮的损伤,这些因素包括感染、异体骨髓移植、肺移植、吸入有毒气体、自身免疫性疾病和药物不良反应等。
临床检验G试验和GM试验定义、临床意义、检测结果影响因素区别总结
临床检验G试验和GM试验定义、临床意义、检测结果影响因素区别总结G 试验和GM 试验作为检测真菌抗原非培养技术，已经成为侵袭性真菌感染的诊断指标之一，这两种标志物受到较大关注，是国内外侵袭性真菌病诊断研究热点，并且得到广泛的临床应用。
定义G试验：又称1,3-β-D 葡聚糖试验，是检测真菌的细胞壁成分1,3-β-D 葡聚糖，人体的吞噬细胞吞噬真菌后，能持续释放该物质，使血液及体液中含量增高。
1,3-β-D 葡聚糖可特异性激活鲎变形细胞裂解物中的G 因子，活化的G 因子又可使凝固酶原转化为凝固酶，通过旁路途径激活鲎试验，从而产生凝集反应，故称G 试验。
GM试验：是检测曲霉菌细胞壁上的一种多聚糖抗原（即半乳甘露聚糖抗原，glactomannan，GM），半乳甘露聚糖是广泛存在于曲霉和青霉细胞壁的一种多糖，在曲霉菌侵袭组织早期，曲霉菌细胞壁外层的GM 可被释放入血，是最早释放的抗原，可以通过酶联免疫吸附试验法进行检测。
GM 试验主要适用于侵袭性曲霉引起的感染。
临床意义G试验方法具有快速、操作方法简单等特点，适用于隐球菌、接合菌（毛霉菌）以外的所有深部真菌感染的早期诊断，尤其是念珠菌和曲霉菌引起的感染；G 试验测得包括曲霉和念珠菌在内更多致病性真菌，具有较好敏感性和特异性，假阳性率较低，只能提示有无真菌侵袭性感染，并不能确定为何种真菌感染，这是此方法的缺陷。
GM试验主要针对于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。
可对血清、脑脊液、肺泡或支气管灌洗液进行检测。
在其他诊断方法阳性之前 6 至14d 即可检测到GM。
另一方面，GM释放量与菌量成正比，可以反映感染的严重程度，连续检测GM也可作为治疗疗效的监测；根据侵袭性肺真菌病诊断指南，其中G试验、GM 试验连续2次阳性为有意义检查结果。
检测结果影响因素▲ G 试验出现假阳性的因素：1.药物因素：①血液制品：静脉输注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或新鲜冰冻血浆；②β-内酰胺类抗生素，如青霉素、阿莫西林-克拉维酸钾、头孢曲松、哌拉西林/他唑巴坦和氟氯西林等；③抗肿瘤药物：抗肿瘤药物如香菇多糖、多糖Ｋ、裂褶多糖和西索菲兰等是Ｇ试验检测的假阳性因素之一。
G试验过去与现在
诊断阈值20ng/L（Fungitec-G试剂盒），敏感性84%，特异性91% 不能区分曲霉与念珠菌感染
吕沛华，赵蓓蕾， 等． 中华医院感染杂志，2007；17 (11)：1328-31 吕沛华，赵蓓蕾，等．中华结核和呼吸杂志，2007；30 (1)：31-34
G试验
④干燥管，在5d，4 度保 存送检;>5d， -70度保存送检;无菌杯或管，RT，
2h; 2-24h，4度保存送检
G试验已作为微生物学证据列入美国IFI的诊断指南。
相关指南
中国指南
中华结核和呼吸杂志 2007 年 11月第30卷第 11期 Chin J Tuberc Respir Dis，Novembert 2007 , Vol.30, No. 11
G试验
BDG检测原理
能特异性激活自鲎变形细胞溶解产物提取的G因子，因此 一般用G试验方法检测
常用的检测试剂盒有Fungitec-G和Glucatell
主要试剂G因子来自于不同种的鲎 诊断IFI的推荐阈值
• Fungitec-G：20ng/L • Glucatell：60ng/L
G试验
临床意义
➢ 血浆BDG检测是筛选IFI的有用方法
• 诊断IFI的敏感性、特异性约80%～90% • 浅表真菌感染或真菌定植：BDG极少释放入血液中
➢ 有效的抗真菌治疗能降低血浆BDG水平，连续检测有助 于判断病情变化和治疗反应
➢ 不能区分曲霉与酵母菌感染 ➢ 不能用于新生隐球菌感染和曲霉球的诊断
• 肺曲霉球：曲霉呈寄居状态而非侵袭性感染 • 新生隐球菌为α葡聚糖，且具有厚荚膜
G试验
——过去与现在
南京军区南京总医院呼吸与重症医学科 赵蓓蕾 2015年7月
G试验和GM试验检测的方法及临床意义
G试验和GM试验检测的方法及临床意义侵袭性真菌病即是以往所说的深部真菌病，是指致病性真菌侵犯皮下组织、粘膜、肌肉和内脏器官等所引起的真菌感染性疾病。
引起侵袭性真菌病的病原菌有270余种，常见病原菌有念珠菌（占70%-90% ）和曲霉菌（占 10%-20%）。
常引起侵袭性真菌病的高危因素有严重粒细胞缺乏、免疫功能低下、移植、糖尿病、肾衰、血透、慢阻肺、实体器官移植、长期激素治疗以及入住ICU 等。
侵袭性真菌感染病早期诊断和治疗面临着巨大挑战，临床表现缺乏特征性，发病率高、死亡率高、漏诊率高且诊断困难，特异性诊断指标有限，继发性真菌感染常被基础疾病和治疗药物所掩盖。
和检验科相关的辅助诊断方法有培养法和非培养法。
血培养作用有限，阳性率较低（念珠菌感染患者血培养阳性率只有38%）。
相对而言，非培养技术就突显出其优越性。
真菌的检测的非培养技术常见的有G实验和GM试验。
此实验敏感性高，阳性检出率高，能早期快速诊断，为临床用药提供帮助。
G试验是检测1,3-β-D-葡聚糖的试验，采用的方法是动态显色法。
1,3-β-D-葡聚糖是真菌细胞壁的一种成分，广泛存在与各种真菌，只有当真菌进入体内被吞噬细胞吞噬，细胞壁被破坏,1,3-β-D-葡聚才能释放入血，定植情况该实验为阴性，所以G试验可区分定植和感染。
G试验可检测除隐球菌和接合菌外的多种真菌感染，对于念珠菌血症而言, G试验检测是首选检查方法。
G试验检测一般先于临床症状平均4天，平均早于发热5天，是早期检测的重要手段。
G试验检测值<70pg/ml定义为阴性，此时不建议抗真菌治疗，当检测值在70-95pg/ml 时定义为灰区，此为观察期，应连续监测，当检测值>95pg/ml定义为阳性, 建议结合临床症状诊断治疗。
GM试验是检测半乳甘露聚糖抗原的试验，采用的方法是酶免法。
半乳甘露聚糖（GM）是曲霉细胞壁的一种成分，GM从薄弱的菌丝顶端释放，曲霉菌感染的患者血液内存在GM。
G+GM
GM的敏感性>80%，特异性>90%，有较高的诊断准确性。
– 实体器官移植受者及非中性粒细胞减少症病人： GM的敏感性为25 - 55.6%。 – 儿科病人： 假阳性率较高，达12.7 - 44%。
（Pfeiffer CD. Clin Infect Dis 2006;42(10):1417–727）
mannoproteins b1,3 b1,6 PPL bil glucans ayer
b1,3 glucan synthase
chitin ergosterol
GM抗原检测方法
LOGO
检测GM的方法包括酶免法和乳胶凝集法
检测限
乳胶凝集试验 （Pastorex® ） 酶连免疫吸附试 验（Platelia® ）
LOGO
输注白蛋白或球蛋白
血液透析
输注抗肿瘤的多糖类药物 某些抗菌药物高浓度时：如多粘菌素E、头孢唑啉、厄他培南、 复方新诺明、氨苄西林/舒巴坦、头孢吡肟等 革兰阳性菌菌血症 外科手术后早期 标本溶血或脂血 对策: 动态监测葡聚糖的变化
总结
LOGO
G试验可以早期、快速诊断侵袭性真菌感染，可用于真 菌感染早期筛查
现有的血清学诊断方法
LOGO
（1-3）-β-D-葡聚糖检测（G试验）
半乳甘露聚糖（galactomannan) 抗原（GM试验)
隐球菌荚膜多糖抗原（乳胶凝集试验） 念珠菌抗原及抗体的检测：Cand-Tec、烯醇化酶、甘 露聚糖抗原等
LOGO
（1-3） - β- D-葡聚糖检测
G试验
–适用于念珠菌,曲霉,肺孢子菌,镰刀菌,地霉,组织胞
G试验侵袭性真菌病的辅助诊断方法
6/17/2023
23 目前二十三页\总数七十七页\编于十三点
内毒素是能够引起哺乳动物原反应的主 要热原物质。
革兰氏阴性细菌在新陈代谢过程不断地向 环境释放内毒素，污染药品和医疗器械。因此注 射药品和医疗器械都要求必须作细菌内毒素检查
（BET）。
6/17/2023
24 目前二十四页\总数七十七页\编于十三点
“生物探针”操作流程
数据可接入LIS系统等
50
目前五十页\总数七十七页\编于十三点
侵袭性真菌感染的临床检测方法对比
51
目前五十一页\总数七十七页\编于十三点
产品特点
灵敏度高 快速
特异性好
临床符合 率高
准确性高
检测方法严 谨
52
目前五十二页\总数七十七页\编于十三点
七、“生物探针”的临床比对
J厂家的 -G试剂、LPS试剂均无特异性
液（血浆或血清），会发现 葡聚糖含量明显 高于非感染者。因此， 葡聚糖可作为具有这 种细胞结构的真菌感染标识物。
6/17/2023
16
目前十六页\总数七十七页\编于十三点
三、鲎试验与G试验
1. 鲎（Hòu，后）试验
6/17/2023
17
目前十七页\总数七十七页\编于十三点
鲎是地球上最古老的海洋生物之一，已有 三亿多年的历史，人们称它为“活化石”。
“生物探针”操作流程
43
目前四十三页\总数七十七页\编于十三点
“生物探针”操作流程
44
目前四十四页\总数七十七页\编于十三点
“生物探针”操作流程
45
目前四十五页\总数七十七页\编于十三点
“生物探针”操作流程
46
目前四十六页\总数七十七页\编于十三点
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
经证实铜绿假单胞菌是继肺炎链球菌血症和粪产碱杆菌血症之后，可 以引起G试验假阳性的细菌血症。
铜绿假单胞菌可引起BG水平的升高，是G试验的假阳性影响因素。
5 . Mennink-Kersten MA. Infect Dis Clin North Am 2006, 20:711–727. 6. Monique A. CORRESPONDENCE, 2008,6:1930-1931.
提示：多粘菌素，厄他培南，头孢唑啉，复方磺胺甲恶唑，头 孢噻肟，头孢吡肟、氨苄西林/舒巴坦，可不同程度引起血浆BG水 平升高，顺序递减。
4 .Francisco M. ANTIMICROBIAL AGENTS AND CHEMOTHERAPY,2006,10:3450–3453.
一、假阳性影响因素
100.0 0.0 75.0 (IQR 0.0–261.3) (IQR 0.0–400.3) (IQR 0.0–341.3)
0.0 0.0 0.0 0.0 (IQR 0.0–140.0) (IQR 0.0–140.4) (IQR 0.0–140.0) (IQR 0.0–140.0)
IQR：四分位距
结论：白蛋白剂量超过30g，治疗后两天依旧明显提高血清BG的水平； 提示白蛋白为G试验的干扰因素，干扰时间不少于两天（ P<0.05 ）。 对确诊念珠菌血症患者最佳诊断阈值为95.9 pg/mL。
有2/3的患者在其他方法诊断侵袭性曲霉病前6～14d 即可检测到GM抗原 。
• • •
快速诊断：2-3h可出报告 定量检测：病程监测，药效评价 联合检测：提高阳性预测值和特异度。
5 Clin Microbiol，2005，43(1):299—305 4 6 Munoz P, Guinea J, Bouza E. Clinical Microbiology and Infection, 2006, 12(s7): 24-39. 7 Singh N，Paterson DL. Clin Microbiol Rev.2005．18：44-69．
3d
2h 2h
较高
较高 高
高
低 高
低
低 低
*
* **
血清学检测 (G/GM试验)
简单
2h
低
高
一般
***
亟需早期、快速检测手段：G试验、GM试验、内毒素试验
3
IFI现状
G试验（北京金山川）和GM试验（天津喜诺）优势：
•
早期诊断：
比临床症状平均早5-8天； 比高分辨CT扫描平均早7.2天；
比开始经验性抗真菌治疗平均早12.5天；
G试验影响因素分析
北京金山川 陈丽清
• • • •
IFI现状 假阳性因素 假阴性因素 影响因素的判别
IFI现状
检测项目 涂片培养检测 可操作性 简单 检测周期 >5d 检测成本 低 敏感性 低 <30% 特异性 一般 综合性评价 **
组织病理学检测
影像学检测 分子生物学检测 (PCR技术)
复杂
简单 一般
采取6个患者10份血清检测G试验水平，克拉维酸治疗组BG水平 1339-1798 pg/ml，头孢他啶治疗组BG水平17.7-26.5 pg/ml，健康对照组 BG水平8.0±13.8 pg/ml。
提示：克拉维酸显著提高血清BG水平。并且克拉维酸治疗前BG水 平为阴性，注射结束20min血清BG水平可升至800pg/ml以上水平。
1. Lo Cascio.EJCMID,2015,2:34-41.
一、假阳性影响因素
该文献还表明注射白蛋白患 者G试验诊断阈值在203.7 pg/mL 水平上，G试验表现出良好的诊 断灵敏性和特异性。
注射白蛋白患者G试验： 1. >30g； 2. 203pg； 3. 2 or 7 days 。
一、假阳性影响因素
特性利益转化
特点 ①比临床症状平均早5-8天； ①节省医疗资源，降低药占 ③比开始经验性抗真菌治疗平均 比； ②治愈率提高，为医生赢得 早期 早12.5天； 良好声誉； ④有2/3的患者在其他方法诊断侵 ③降低死亡率，减少医患纠 纷。 袭性曲霉病前6～14d 即可检测到 GM抗原 。 快速 2-3h内出结果 制定早期治疗方案，预后好。 ②比高分辨CT扫描平均早7.2天； 对于临床的帮助 对于患者的利益
①减少医疗成本； ②减少病人疗程； ③减少病人痛苦。
定量
①评价疗效； G试验检测能给出具体的参考值 ②指导用药； 而非定性 ③提高治愈率。
5
一、假阳性影响因素
1.血液制品：
输注白蛋白和免疫球蛋白；
2.药物：
阿莫西林/克拉维酸；哌拉西林/他唑巴坦；抗菌素；抗肿瘤药物；
3.细菌血症：
粪产碱杆菌、链球菌、铜绿假单胞菌；
3. Monique A.S.H, N Engl J Med, 2006,11:354-362.
一、假阳性影响因素
2. 2 药物-多种抗菌素
药物 多粘菌素 厄他培南 头孢唑啉 复方磺胺甲恶唑 头孢噻肟 头孢吡肟
氨苄西林钠/舒巴坦钠
BG水平(pg/ml)
RVC 4,348 3,472 2,054 1,187 560 425 519 DIC 627 166 67 <32 153 106 <4 MPC <4 <32 <4 <8 <8 <8 <8
4.污染： 操作，纱布，透析。
一、假阳性影响因素
1.1 输注白蛋白
267个ICU患者，给予不同剂量和时间的白蛋白、唑类抗真菌药、免疫球蛋白 IgG、输注红细胞、浓缩的血小板，冰冻的血浆，同时进行G试验检测，分析上述 因素与BG水平的关系。 注射量 注射白蛋白组 BG水平 对照组BG水平 10g 87.5 (IQR 0.0–523) 20g 30g >30g
一、假阳性影响因素
3. 2细菌感染-革兰氏阴性菌
43个菌血症患者，16个BG阳性，分布如下。
菌血症 人数 BG阳性人数 假阳性率
革兰氏阴性杆菌
1.2 输注免疫球蛋白
文献表明静脉输入IgG 10g可使血浆G浓度升到达 300 pg/ml以上，足以误诊为侵袭性真菌感染（IFI）。
结论：免疫球蛋白可引起BG水平的大幅升高。
2. Ogawa, M, Int. J. Hematol, 2004, 80:97–98.
一、假阳性影响因素
2. 1 药物-克拉维酸