血清白蛋白测定.

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血清白蛋白测定标准操作规程

血清白蛋白测定标准操作规程

血清白蛋白测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请:血清白蛋白测定(缩写ALB);组合项目申请:血生化中肝功能测定项目组合。

临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理2。

1标本采集2。

1.1常规静脉采血约2ml,不抗凝,置普通试管中。

或采用含分离胶的真空采血管。

2。

1。

2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2。

1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。

2。

1。

5下列标本为不合格标本2。

1。

5.1标本量不足:少于0.3ml的全血标本,或少于0。

1ml的血清或血浆。

2。

1。

5。

2对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2。

1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的.2。

1。

5。

4其他如标识涂改、标本试管破裂等.2。

2标本保存2.2。

1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清.2.2.2标本保存时间:室温(15~25℃)下可稳定一周,普通冰箱中(2~8℃)稳定一个月。

为避免标本中水分挥发使血清浓缩,对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

2.3标本采集的注意事项2.3。

1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。

2。

3.2不建议采集抗凝血标本,如果必须使用血浆,推荐的抗凝剂是肝素。

3 方法原理血清中的白蛋白与溴甲酚绿在PH=4.2的条件下结合生成绿色复合物,溶液由黄色变为绿色,其颜色深浅与白蛋白浓度成正比,通过在630nm处测定其吸光度可得出白蛋白的含量。

PH=4.2白蛋白 + 溴甲酚绿—-—-—-------———绿色复合物4 试剂及其他用品4.1试剂:溴甲酚绿法测定白蛋白试剂盒,由北京利德曼生化技术有限公司出品.4。

2试剂盒保存:保存于2~8℃,不开盖情况下至标签的失效期。

开盖后放于仪器的冰箱中至少稳定14天.开盖后避免污染。

变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用.4.3试剂盒准备:液态单试剂型,即开即用,无特殊准备4.4试剂盒主要成分:缓冲液(pH 4.2)50 mmol/L,溴甲酚绿0.25 mmol/L,其中含有稳定剂与保护剂<0.1%。

血清白蛋白标准操作规程,1200字

血清白蛋白标准操作规程,1200字

血清白蛋白标准操作规程血清白蛋白是一种重要的血液蛋白,其浓度的检测对于评估肝功能和营养状况等方面具有重要意义。

以下是血清白蛋白标准操作规程的详细步骤和注意事项。

一、试剂和仪器准备1. 检测血清白蛋白的试剂包括:白蛋白测定试剂盒、标准品、去离子水等。

2. 仪器包括:分光光度计、细管离心机等。

二、标本的取样和处理1. 选取新鲜、无血液溶血和降脂等异常的血清样本作为检测对象。

2. 血样采集后,立即置于无菌离心管中,以4,000转/分钟离心10分钟,将血浆分离。

3. 将血浆分装在无菌离心管中,分别标注,冷藏保存。

三、试剂的使用及准备1. 将试剂盒中的白蛋白测定试剂平均摇匀,按每次检测的样本数量和所需要的试剂量计算,避免过量使用试剂。

2. 准备好所需标准品的稀释液,按照试剂盒说明书中建议的浓度稀释标准品。

四、试验操作步骤1. 均衡室温为20-25摄氏度。

2. 试剂和样本准备:a. 在试验前半小时,将试剂和样本从冰箱中取出,适应室温。

b. 将待测样本和标准品平均搅拌均匀,避免生成气泡。

3. 试剂预热:取足够的试剂和样本,在试剂的使用温度下预热15分钟。

4. 光度计的调整:a. 打开分光光度计,选择合适的检测波长,适用于试剂盒中所使用的测量波长。

b. 将白色比色杯放入试槽中,调零,使显示屏上的光吸收值为0。

5. 基线测定:a. 将预热的白色比色杯置于试槽中,按下基线的按钮,待显示屏上的光吸收值稳定后,即可进行下一步操作。

b. 注意每次操作前都要进行基线测定,确保测量结果的准确性。

6. 样本和标准品的检测:a. 在预热的白色比色杯中,加入1.0mL的试剂,再加入0.01mL的样本,立即搅拌均匀。

b. 取45秒后的吸光度值作为测量值。

c. 重复上述步骤,测量标准品的吸光度值,并根据标准曲线计算样本中的白蛋白浓度。

7. 结果的记录计算:a. 将吸光度值记录在结果表格中。

b. 根据标准曲线的结果,计算样本中的白蛋白浓度。

溴甲酚绿法测定血清白蛋白

溴甲酚绿法测定血清白蛋白

溴甲酚绿法测定血清白蛋白溴甲酚绿法是一种常用的测定血清白蛋白含量的方法,其原理是利用溴甲酚绿与白蛋白混合后的光度变化来测定血清白蛋白的含量。

下面将详细介绍溴甲酚绿法测定血清白蛋白的具体操作过程。

实验原理血清中的白蛋白可以与溴甲酚绿形成复合物,形成的复合物的光学密度与白蛋白的含量呈正相关。

测定方法如下:步骤一:准备溴甲酚绿溶液将溴甲酚绿加入缓冲液中,制备浓度为0.01mg/mL的溴甲酚绿溶液。

步骤二:制备标准工作液将0.01mg/mL的溴甲酚绿溶液和1%的牛血清白蛋白溶液以1:5的比例混合,制备出浓度为0.002mg/mL的标准工作液。

步骤三:制备比色管取6mm x 100mm的试管,标出标准液和待测液的填充线,分别用吸管将标准液和待测液分别加入比色管中。

步骤四:光度测定将加入标准液和待测液的比色管分别放入分光光度计中,设置波长为628nm,测定各试管的吸光度值(OD值)。

步骤五:计算白蛋白含量比较标准工作液和待测液的吸光度值,根据标准曲线计算出待测液中白蛋白的含量。

实验要点1、比色管的选择:使用6mm x 100mm的试管即可。

3、比色管中待测液的加入:待测液的加入应加到标记线上方。

4、比色管中标准液和待测液的混合:比色管中标准液和待测液的混合应该彻底,避免混合不均导致误差。

5、波长的设置:溴甲酚绿法测定血清白蛋白的波长一般定在628nm。

实验注意事项1、实验过程中要保持实验环境的清洁和卫生,保证实验的准确性。

2、所有实验仪器和试剂必须在实验前检查是否正常。

3、实验过程中要严格按照实验步骤进行,保证结果的准确性。

4、实验结束后要保持实验环境整洁,清洁仪器和试管。

总结溴甲酚绿法是一种简单、快速、准确的血清白蛋白含量测定方法。

通过以上步骤,我们可以很容易地进行血清白蛋白含量的测定。

在实验过程中,需要注意实验细节和准确性,保障实验结果的准确性。

实验六 血清白蛋白测定(精美课件)

实验六 血清白蛋白测定(精美课件)

甲胎蛋白
血浆蛋白质概述
血浆蛋白质的分类:
按分离方法分类 盐析法 :可将血浆蛋白质分为清蛋白和球蛋白两大类。
清蛋白
血浆蛋白质概述
清蛋白(Alb)是血浆中含量最多的蛋白质,约占血
浆蛋白总量的57%~68%。在pH7.4的环境中,每分子
可带200个以上的负电荷,可作为许多物质的运输载体。
Alb由肝细胞合成,合成速度受蛋白质摄入量及血
实验六 血清白蛋白测定
学习要求
1 掌握溴甲酚绿法测定血清白蛋白的基 本原理和方法
2 了解血清白蛋白的测定方法
3 掌握血清白蛋白的参考区间和临床意义
血浆蛋白质概述
血浆中几种主要的蛋白质:
前清蛋白
清蛋白
铜蓝蛋白
转铁蛋白
结合珠蛋白
α1-酸性糖蛋白 C-反应蛋白 癌胚抗原
蛋白质
α1-抗胰蛋白酶
α2 -巨球蛋白 纤维蛋白原
BCP结合法
优点 灵敏度高,与人及动物 与Alb以外的血浆蛋白质结合少, 标本中的Alb结合力差异 干扰小 不大
缺点
除了与Alb结合外,还可 灵敏度较低,与动物标本中的
与血清中其他多种蛋白 Alb结合力相当弱,质控血清多
质也可结合
采用动物血清制备,因此应用
ห้องสมุดไป่ตู้
受限
试剂与器材
试剂与标本 1、0.5 mol/L 琥铂酸缓冲贮存液(PH4.1) 2、BCG贮存液(10mmol/L)(溴甲酚绿、NaOH 溶液) 3、叠氮钠贮存液 4、BCG试剂 5、白蛋白标准液(40g/L) 主要器材 分光光度计
第二节 体液蛋白质检验
血清清蛋白测定:
测定Alb的方法中,目前实验室应用最广的是染料结合法 与Alb结合的染料有多种,其中溴甲酚绿(BCG)和溴甲酚

血清总蛋白和白蛋白测定实验方案

血清总蛋白和白蛋白测定实验方案

血清总蛋白和白蛋白测定实验方案实验方案:血清总蛋白和白蛋白测定实验引言:材料和试剂:1.血清样本2.0.9%生理盐水3.高纯度白蛋白标准品4.生物碱性溶液5.生物酸性溶液仪器设备:1.比色皿2.分光光度计3.吸光度计实验步骤:1.样本制备:a.收集血液样本,并离心10分钟以去除血细胞。

b.将离心后的血清转移到一个新的离心管中。

c.确保血清无凝块或颗粒,如有则进行过滤处理。

d.将血清储存在-20°C的冰箱中,以防止蛋白质降解。

2.样本稀释:a.取一定数量的血清样本(200µL),加入一个10倍稀释液(1800µL 的0.9%生理盐水),得到被稀释的样本。

b.将稀释液标记为“200μL:1800μL”,并将其储存在试管中。

3.标准曲线制备:a.准备一系列浓度递增的白蛋白标准品:0g/L、2g/L、4g/L、6g/L、8g/L。

b.取一定体积的每个标准品(200µL),分别加入一个10倍稀释液(1800µL的0.9%生理盐水),得到一系列被稀释的标准溶液。

c.根据标准曲线所需白蛋白的浓度,将其标记在曲线上。

4.吸光度测定:a.取一定体积的对照组、血清样本和标准溶液,并分别转移到比色皿中。

b. 使用分光光度计,将比色皿置于光路中并调整至指定波长,通常为546 nm。

c.对每个样本和标准溶液的吸光度进行测量,并记录下读数。

5.计算白蛋白含量:a.根据标准曲线上的吸光度读数,计算每个标准品的白蛋白浓度。

b.根据被稀释的样本的吸光度读数和标准曲线上的浓度,计算样本中的白蛋白含量。

6.计算总蛋白含量:a.根据白蛋白含量和总蛋白与白蛋白的比例,计算总蛋白的含量。

实验注意事项:1.在操作过程中,尽量避免血清样本接触空气,以免影响蛋白质含量。

2.实验中使用的试剂和仪器,应根据实验室的标准操作程序进行操作。

3.保持实验环境的清洁和无菌,以防止外源性污染。

4.对比色皿进行校准,以确保吸光度测量的准确性。

血清白蛋白测定的临床意义

血清白蛋白测定的临床意义

血清白蛋白测定的临床意义
血清白蛋白的临床意义是作为反映肝脏功能是否正常的重要指
标之一。

血清白蛋白是血浆中的蛋白质,主要由肝脏合成。

因此血清白蛋白的含量可以反映肝脏功能是否正常。

如果血清白蛋白含量降低,说明肝脏损害影响到了白蛋白的合成,如营养不良或者急性肝坏死、肝硬化等肝脏疾病。

血清白蛋白在人体的作用主要包括物质运输及解毒、维持血管内组织细胞的水分循环平衡以及给机体供给营养等。

在饮食上可以多吃一些富含蛋白质的食物,如鸡蛋、牛奶、豆类、核桃等,可以补充白蛋白。

血清白蛋白测定

血清白蛋白测定

【注意事项】
1、实验证明:BCG不但与白蛋白呈色,而且与血清 中多种蛋白结合呈色,其中以α球蛋白、转铁蛋白、 触球蛋白更为显著,其反应速度较白蛋白稍慢,但 实际上,血清与BCG混合即时“慢反应”已经发生, 同时也有实验证明“慢反应”持续1小时才完成。 故有人主张用定值参考血清作标准比较理想,并主 张读取一分钟吸光度计算结果。
2. 重复性试验的原理
在相同条件下(同方法、同试剂、同标准品、 同仪器、同实验室、同操作者),对同一 标本在一定时间内,进行m轮,每轮n次重 复测定,从而获得试验方法的批内精密度 数据
重复性试验根据一定时间间隔可分为:批内、 天内、天间三种重复性试验
2. 重复性试验的原理
批内:根据临床标本特点(正常、异常), 分别对低、中和高浓度在短时间内进行m轮, 每轮n次重复测定,分别求取三种浓度的精 密度数据
一、BCG法测定血液清蛋白试验 二、商品BCG试剂重复性能评价试验
一、BCG法测定血液清蛋白试验
1.血液清蛋白测定的临床意义 2.BCG法测定血液Alb的实验原理 3.实验材料 4.实验方法 5.实验结果 6.结果处理、分析(讨论)
1.血液清蛋白测定的临床意义
2.BCG法测定A
3、血清白蛋白浓度增高:常见于严重脱水所 致的血浆浓缩;
4、A/G 某些病人可同时出现白蛋白减少和 球蛋白升高的现象,严重者比值可<1。这种 情况称为A/G比值倒置。
5、文献报道还有极少见的因白蛋白合成障碍, 血清中几乎没有白蛋白的先天性白蛋白缺乏 症。
二、商品BCG试剂重复性能评价试验
1.重复性能评价试验的意义 2. 重复性试验的原理 3.实验材料 4.实验方法 5.实验结果 6. 结果处理、分析(讨论)
1.重复性能评价试验的意义

血清白蛋白ALB测定

血清白蛋白ALB测定

血清白蛋白ALB测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。

2 实验原理在pH值4.2时,白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物,在630nm处比色,颜色的深度与白蛋白浓度成正比。

pH4.2白蛋白+溴甲酚绿--------------绿色化合物3 标本采集3.1 病人准备:应禁食抽血.3.2 类型:血清3.3 标本存放:留取标本后请尽快分离血清。

在室温条件下(15~25℃)可以稳定一周,在冰箱保存的条件下(2~8℃)稳定一个月,-20℃保存至少可以稳定3个月。

3.4 标本运输:室温条件下运输3.5 标本拒收标准:细菌污染的不能做测定。

4 实验材料4.1 试剂:上海复星长征医学科学有限公司ALB试剂盒(沪食药监械(准)字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014)4.1.1 试剂组成溴甲酚绿 0.35mmol/L 丁二酸缓冲液 50 mmol/L4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于2~25℃,若无污染,可稳定至失效期。

试剂有效期为18个月。

4.1.4 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。

4.1.5 注意事项:避免试剂与皮肤及粘膜接触。

4.2 校准品:使用上海复星长征医学科学有限公司提供的ALB校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积等确认无误后方可进行测定。

6.3 项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。

实验十四血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)41

实验十四血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)41

实验十四血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)一、实验目的与要求1 了解血清白蛋白(albumin)在人体营养学上的意义及其生理学上的重要性。

2 掌握血清白蛋白的测定方法及721分光光度计或AT648半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。

二、实验原理在具有表面活性剂的酸性环境中,血清中的白蛋白和溴甲酚绿结合,形成绿色。

最高吸收峰628nm,颜色强度与样品中白蛋白浓度成正比。

三、实验仪器与试剂1 仪器(1) AT648半自动生化分析仪1台;(2)四孔恒温水浴锅1个;(3)振动摇床1台。

2 分组与仪器2人一组,每组仪器包括:(1)试管架1个;(2) 2ml试管10个;(3)可调微量加样器1个;(4) 1ml移液管1个;(5)吸耳球1个;(6)搪瓷盘1个;(7)微量加样滴头;(8)吸水纸。

3 本试剂盒内含2种试剂:(1)溴甲酚绿试剂100ml×3瓶;(2)白蛋白标准液1ml×1瓶(45.3g/L)。

四、实验步骤1 于一系列试管中,按下表加入各溶液:表141系列反应管中所加溶液的量空白管标准管测定管血清标本(μl)——5.00蛋白标准血清(μl)—5.00—蒸馏水(μl)5.00——溴甲酚绿试剂(ml)1.001.001.002 以上各管充分混匀,室温放置10min。

3 于721分光光度计/ AT648半自动生化分析仪上628nm处比色,以空白管校正吸光度为零,读取各管吸光度值A。

五、实验结果与分析A628nm测定A628nm标准×标准血清白蛋白浓度(g/L)=血清白蛋白(g/L)线性范围:在0~60g/L范围内线性良好。

六、实验报告参照《营养学》、《生物化学》原理分析。

七、注意事项1 试剂为空白对照;2 每组样品做2~3个平行实验;3 正常参考范围: 55~75g/L。

血清总蛋白及白蛋白测定

血清总蛋白及白蛋白测定

的含量。
紫外吸收法可测定0.1-0.5mg/ml的蛋白质溶液,此操作简便,测定 迅速,不消耗样品,低浓度盐类不干扰测定。因此,此法在蛋白质的
制备中广泛应用。 此法的缺点是:(1)对于测定那些与标准蛋白质
中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质,有一定的误差;(2)若 样品中含有嘌呤,嘧啶等吸收紫外线的物质,会出现较大的干扰。


问题:如何测定血清中蛋白质的总浓度?蛋白质的 浓度测定方法? 双缩脲法 酚试剂(Follin-酚)法测定蛋白质 紫外吸收法测定蛋白质 凯氏(Kjeldahl)微量定氮法 考马斯亮蓝G—250染色法 如何测定血清中某一种蛋白质的浓度? 分离后再测定

Folin-酚试剂法测定蛋白质含量是双缩脲法的发民,所用
的试剂是由两部分组成的。第一部分相当于双缩脲试剂, 第二部分为Folin-酚试剂(磷钨酸和磷钼酸混合液)。因此, 反应的程序也是分两步进行的。第一步相当于双缩脲反应, 在碱性条件下蛋白质中的肽键与Cu2+作用生成络合物;
第二步是基于Folin试剂(磷钼酸和磷钨酸试剂)在碱性条件
下极不稳定,易被酚类化合物还原生成钼蓝和钨蓝混合物 (呈蓝色反应)。由于蛋白质中含有带酚羟基的酪氨酸,故
Hale Waihona Puke 时,白/球比值变小,甚至倒置。
血清总蛋白增高: (1)血液浓缩,导致总蛋白浓度相对增高:严重腹泻、呕吐、 高热时急剧失水,血清总蛋白浓度可明显升高。休克时,由于 毛细血管通透性增加,血液中水分渗出血管。血液可发生浓缩, 慢性肾上腺皮质功能减退的患者,由于丢失钠的同时伴随水的 丢失,血浆也可出现浓缩现象。 (2)血浆蛋白质合成增加:主要见于球蛋白合成增加,多发 性骨髓瘤患者。 血清总蛋白降低: (1)血液稀释,导致总蛋白浓度相对降低:如静脉注射过多 低渗溶液或因各种原因引起的钠、水潴留。 (2)摄人不足和消耗增加:食物中长期缺乏蛋白质或慢性胃 肠道疾病所引起的消化吸收不良,因患消耗性疾病,如严重结 核病,甲状腺功能亢进,恶性肿瘤等,均可造成血清蛋白浓度 降低。 (3)蛋白质丢失:严重烧伤时大量血浆渗出,大量失血,肾 病综合征时大量蛋白尿,溃疡性结肠炎时肠道长期丢失一定量 的蛋白质,这些病理改变均可使血清总蛋白浓度降低。

血清清蛋白测定方法

血清清蛋白测定方法

血清清蛋白测定方法血清清蛋白是人体内一种重要的蛋白质成分,对于人体健康具有重要的生理功能。

因此,测定血清清蛋白的含量对于临床诊断和治疗具有重要意义。

下面将介绍一种常用的血清清蛋白测定方法。

首先,准备工作。

在进行血清清蛋白测定之前,需要准备好实验所需的试剂和仪器设备。

试剂包括清蛋白测定试剂盒、标准品、去蛋白酶等。

仪器设备包括分光光度计、离心机等。

在准备工作中,需要严格按照实验操作规程进行操作,确保实验的准确性和可靠性。

其次,样品处理。

在进行血清清蛋白测定之前,需要对血清样品进行处理。

首先,将采集的血清样品放置在4摄氏度冰箱中离心,去除悬浮的细胞成分。

然后,取上清液进行测定。

在样品处理过程中,需要注意操作的轻柔和样品的保存条件,避免样品的变质和污染。

接下来,测定操作。

将处理好的血清样品和试剂按照试剂盒说明书中的操作步骤进行混合,并在设定的时间内进行反应。

然后,使用分光光度计对反应后的样品进行测定,记录吸光度数值。

根据标准曲线,计算出样品中清蛋白的含量。

在测定操作中,需要严格按照操作规程进行操作,避免操作失误和实验结果的误差。

最后,结果分析。

根据测定得到的样品清蛋白含量,可以进行结果的分析和比较。

通过对不同样品的清蛋白含量进行分析,可以了解样品的生理状态和疾病情况。

在结果分析中,需要对实验结果进行准确的解读,避免主管错误和误导性结论的产生。

综上所述,血清清蛋白测定是一项重要的实验操作,对于临床诊断和治疗具有重要意义。

在进行血清清蛋白测定时,需要严格按照实验操作规程进行操作,确保实验结果的准确性和可靠性。

希望本文介绍的血清清蛋白测定方法对您有所帮助。

白蛋白检测方法

白蛋白检测方法

白蛋白检测方法一、背景简介白蛋白(Albumin)是血液中最主要的蛋白质,占血液中蛋白质总量约 60-70%,主要由肝脏合成,用于维持血液循环及悬浮脂质,参与水溶性和油溶性物质的转运,和作为激活素,如激素和维生素辅助物质。

此外,白蛋白还参与病毒抗原的转移以及病毒抗体结合,在细胞外前列腺素合成反应中起调节作用。

由于白蛋白的重要性,其在血液中的含量可以用来衡量患者的健康情况和疾病的早期发现。

1.血清定量测定法:血清定量测定法是目前常用的检测白蛋白的方法之一。

这种方法采用改良型琼脂(Agarose)橡胶电泳法,在43℃温度下,就可达到白蛋白最佳分离的活性,使血清中的白蛋白分离出各种糖蛋白和其它血液蛋白,准确测定白蛋白含量。

此外,还可以利用反相高效液相色谱和免疫比浊的方法,检测细胞外的白蛋白含量。

2.尿液检测:尿液分析中,白蛋白可采用肝脏松来检测,该试剂可以检测尿液中的低浓度白蛋白。

此外,可采用紫外分光光度计,通过尿液中含有白蛋白的亚硝酸钠氮反应,来测定尿液中的白蛋白含量。

3.免疫分析技术:采用免疫分析法可以准确检测白蛋白含量,例如通过直接免疫吸附法(DIA)、反转阴性聚苯胺吸附-放射免疫分析(IRIA)和免疫化学法(ICA)。

另外还可以采用双抗体特异性抗原反应(SPR)、酶标法(EIA)和免疫钻取技术(IFCT)等高灵敏度的分析技术,快速测定血清中的白蛋白含量。

4、纳米生物传感技术:最近,科学家利用纳米技术来实现高灵敏度和快速的白蛋白检测。

例如采用纳米金粒子和金色葡萄球菌抗原作为特异性结合剂,可以快速灵敏地测定血清中的白蛋白含量。

总之,测定血清、尿液等体液中白蛋白含量的方法,有血清定量测定法、尿液检测、免疫分析技术和纳米生物传感技术等多种,其中最常用的是血清定量测定法,而近年来,采用纳米生物传感技术来检测白蛋白的方法也被广泛应用,得到了广泛的好评。

血清白蛋白测定

血清白蛋白测定

【临床意义】
3、血清白蛋白浓度增高:常见于严重脱水所 致的血浆浓缩;
4、A/G 某些病人可同时出现白蛋白减少和 球蛋白升高的现象,严重者比值可<1。这种 情况称为A/G比值倒置。
5、文献报道还有极少见的因白蛋白合成障碍, 血清中几乎没有白蛋白的先天性白蛋白缺乏 症。
二、商品BCG试剂重复性能评价试验
血液清蛋白测定
与 重复性实验
血液清蛋白测定与重复性实验
一、BCG法测定血液清蛋白试验 二、商品BCG试剂重复性能评价试验
一、BCG法测定血液清蛋白试验
1.血液清蛋白测定的临床意义 2.BCG法测定血液Alb的实验原理 3.实验材料 4.实验方法 5.实验结果 6.结果处理、分析(讨论)
1.血液清蛋白测定的临床意义
(2) 如果离群值是两个或两个以上都分布在同一侧,X1、 X2都是离群值,则首先检验最内侧的一个数据(X2),即 通过检验G2来决定X2是否应该舍弃。如果X2应该舍弃,X1 自然应该舍弃。如果X2不应舍弃,则再检验X1,但在检验 X1时,测定次数不应该做为少了一次。
(3) 如果离群值有两个或两个以上,而且又分布于均数两 侧,例如X1和Xn都同属于离群值,则分别检验X1和Xn,是 否应该舍弃。如果有一个数据决定舍去,那么在检验另一 个数据时,测定次数应该作为减少一次来处理,而且此时 应该选择的99%置信水平。
天内:对低、中和高浓度,分别在上午、中 午、下午、晚上,进行m轮,每轮n次重复 测定,分别求取三种浓度的精密度数据
天间:对低、中和高浓度,每天测定1次,连 续监测20天以上,分别求取三种浓度的精 密度数据
3.实验材料
试剂:商品试剂盒 器材:试管、加样枪、722分光光度计
4.实验方法

血清白蛋白测定试剂说明书化学法

血清白蛋白测定试剂说明书化学法

血清白蛋白测定试剂说明书化学法## 1. 了解血清白蛋白测定试剂血清白蛋白测定试剂是临床医学中常用的一种化学试剂,用于测定血液中的白蛋白含量。

血清白蛋白是一种重要的蛋白质,它在人体内具有多种功能,包括维持血浆渗透压、运送营养物质和药物、参与免疫反应等。

检测血清白蛋白含量对于评估人体健康状态和诊断疾病非常重要。

## 2. 化学法测定血清白蛋白化学法是测定血清白蛋白含量的一种常用方法,它基于血清白蛋白与特定试剂之间的化学反应进行测定。

常见的化学法包括白蛋白-溴化绿法、白蛋白-溴酚蓝法等。

在这些方法中,试剂的选取和配比对于测定结果的准确性至关重要。

## 3. 试剂说明书化学法的具体步骤### 步骤一:准备样本和试剂需要准备好待测血清样本和白蛋白测定试剂盒中提供的相应试剂。

样本的选择和处理对于后续测定结果至关重要。

试剂的配制和存储也需要严格按照说明书的要求进行。

### 步骤二:进行反应将准备好的样本与试剂按照说明书要求的比例混合,并在特定条件下进行化学反应。

在反应过程中,要根据说明书中的时间要求和温度要求进行精确控制。

### 步骤三:测定光密度反应完成后,使用分光光度计或特定测定仪器测定反应体系的光密度。

根据试剂说明书提供的测定方法和标准曲线,计算出样本中白蛋白的含量。

### 步骤四:结果分析和记录根据测定结果进行数据分析,并按照说明书的要求进行结果的记录和报告。

在结果分析中需要注意对实验条件的准确描述以及可能存在的误差来源。

## 4. 个人观点和理解血清白蛋白测定试剂的化学法作为测定白蛋白含量的重要方法,具有操作简便、准确性高的特点。

然而,在实际操作中,需要严格遵循说明书中的操作步骤和注意事项,以确保测定结果的准确性和可靠性。

对于化学法测定中可能存在的干扰因素和误差源,也需要有一定的了解和应对措施。

血清白蛋白测定试剂的化学法虽然在临床中被广泛应用,但在实际操作中也需要科学严谨的态度和系统的实验训练。

## 总结通过本文的介绍,我们了解了血清白蛋白测定试剂的化学法测定原理和具体步骤。

实验 血清蛋白测定

实验   血清蛋白测定

实验血清蛋白测定
实验:血清蛋白测定
实验介绍
本次实验旨在通过测定血清中的总蛋白和白蛋白浓度,计算出
非白蛋白的含量,并探究人体健康状况与血清蛋白含量之间的关系。

实验步骤
1. 取得样本血液,并离心分离得到血清
2. 使用比色法测定血清总蛋白浓度,并记录结果
3. 使用免疫层析法测定血清白蛋白浓度,并记录结果
4. 计算非白蛋白含量,并记录结果
实验原理
- 比色法:利用生化试剂和光度计对血清中的蛋白质进行量化
测定。

- 免疫层析法:利用免疫学原理选择性地分离出目标蛋白质,
通过测量蛋白与抗体复合物的浓度来计算目标蛋白质浓度。

- 计算公式:非白蛋白含量=总蛋白浓度−白蛋白浓度。

实验结果分析
通过实验,我们可以得到每个样本的总蛋白质含量、白蛋白含量和非白蛋白含量。

根据实验结果,我们可以探讨人体健康状况与血清蛋白含量之间的关系,并且该方法可以用于临床诊断中,如肝功能不全、肾病综合征等。

结论
本次实验成功地测定了血清蛋白质浓度,并计算出非白蛋白的含量,同时探究了人体健康状况与血清蛋白含量之间的关系。

该方法可以用于临床诊断中,具有重要的临床应用价值。

血清白蛋白测定方法

血清白蛋白测定方法

血清白蛋白测定方法
白蛋白在血液里挺重要的,就像咱们身体里的“小助手”。

想知道白蛋白有多少,就得测一测。

有个简单的方法,就是看颜色。

用专门的试剂跟血液混一混,如果颜色变深了,那就说明白蛋白多了。

这种方法挺直观的,就是得靠眼睛估摸,可能不太准。

还有种方法更高级点,就是用抗体去找白蛋白。

抗体就像个“猎人”,专门找白蛋白这个“猎物”。

找到了就做个标记,然后数数有多少个标记,就知道白蛋白有多少了。

这种方法比较准,但得在实验室里弄。

还有一种方法是看白蛋白在电场里怎么跑。

给血液通个电,白蛋白就会跟着电流跑。

跑得快还是慢,就能看出白蛋白有多少。

这个方法就像看比赛,看哪个跑得快,就知道谁赢了。

不管哪种方法,都是为了知道白蛋白多不多,是不是在正常范围内。

这样医生就知道咱们的身体情况了,该怎么调理就心里有数了。

白蛋白测定实验报告

白蛋白测定实验报告

一、实验目的1. 掌握白蛋白测定原理和方法。

2. 了解白蛋白在临床医学中的重要性。

3. 熟悉白蛋白测定实验操作步骤。

二、实验原理白蛋白(Albumin)是血清中含量最高的蛋白质,占血清总蛋白的50%以上。

白蛋白具有维持血浆胶体渗透压、运输多种物质、调节pH值等功能。

本实验采用溴甲酚绿法测定血清白蛋白含量。

溴甲酚绿法:在酸性条件下,溴甲酚绿与白蛋白结合形成蓝绿色复合物,复合物的颜色深浅与白蛋白含量成正比。

通过比色法测定吸光度,计算白蛋白含量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料- 血清标本- 标准白蛋白溶液- 溴甲酚绿试剂- 醋酸缓冲液- 0.4%氢氧化钠溶液- 吸管- 移液器- 50ml容量瓶- 10ml量筒- 721型分光光度计2. 仪器- 电子天平- 磁力搅拌器- 移液器四、实验步骤1. 标准曲线绘制- 将标准白蛋白溶液用醋酸缓冲液稀释成不同浓度(例如:0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.3mg/ml、0.4mg/ml、0.5mg/ml)。

- 每个浓度取1ml,加入溴甲酚绿试剂1ml,混匀。

- 60℃水浴15分钟,取出冷却至室温。

- 在540nm波长下,测定吸光度。

- 以吸光度为纵坐标,白蛋白浓度为横坐标,绘制标准曲线。

2. 血清白蛋白测定- 将血清标本用醋酸缓冲液稀释成适宜浓度。

- 每个样品取1ml,加入溴甲酚绿试剂1ml,混匀。

- 60℃水浴15分钟,取出冷却至室温。

- 在540nm波长下,测定吸光度。

- 根据标准曲线,计算样品中白蛋白含量。

五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制- 标准曲线呈线性关系,相关系数R²大于0.99。

2. 血清白蛋白测定- 样品中白蛋白含量为X mg/ml。

六、讨论与心得1. 白蛋白测定在临床医学中具有重要意义,可用于评估患者营养状况、肝功能、肾功能等。

2. 溴甲酚绿法操作简便,结果准确可靠,是临床常用的白蛋白测定方法。

3. 在实验过程中,应注意以下事项:- 标准曲线绘制时,需严格控制温度和时间。

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【操作】

取试管三支,标明测定、标准和空白管,按表 操作。
加入物 / ml 工作试剂 标准液 样品 生理盐水 0.02 0.02 测定管 4.0 标准管 4.0 0.02 空白管 4.0
充分混匀,置室温10min,用630nm波长比色,以空白管调零, 读取各管吸光度。
【计算】
血清清蛋白(g/L)= A测/A标〓清蛋白标准 液浓度g/L 清蛋白标准液浓度g/L=40g/L 同时测定血清清蛋白与总蛋白,以总蛋白浓度 减去清蛋白浓度,即得球蛋白(G)浓度,并 计算清蛋白与球蛋白比值(A/G比值)。
血清总蛋白测定(双缩脲法) 血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)
实验一、血清总蛋白测定

实验目的 ⒈掌握双缩脲法测定总蛋白的原理及注意事项。 ⒉熟练测定操作步骤。 ⒊了解TP测定的主要临床意义。
实验原理



蛋白质分子中的肽键在碱性条件下能与铜离子作 用生成紫红色的络合物,产生的颜色强度在一定 范围内与蛋白质的含量成正比,与同样处理的蛋 白标准液比较,经计算或查标准曲线即可求出血 清蛋白质含量。 蛋白质分子中的肽键在碱性条件下能与铜离子作 用生成紫红色的络合物与两分子尿素缩合后生成 的双缩脲在碱性溶液中与铜离子作用形成的紫色 物质的反应相似,故称之为双缩脲反应。 双缩脲结构: H2N—OC—NH—CO—NH2试剂:




【参考范围】 清蛋白:35~55g/L 球蛋白:20~29g/L A/G:1.5~2.5/1 【临床意义】 1.血清清蛋白 (1)增高 常见于严重脱水所致的血浆浓缩。 (2)降低 临床上较常见,与总蛋白降低的原因大致相同。急 性降低常见于大量出血或严重烧伤;慢性降低见于肾病蛋白尿、 肝功受损、肠道肿瘤与结核、慢性出血、营养不良和消耗性疾 病等。清蛋白如低于20g/L,患者可出现水肿。 2.血清球蛋白 (1)增高 严重脱水、炎症、免疫系统疾病和肿瘤。 (2)降低 血液稀释、严重营养不良、胃肠道疾病等。肾上腺 皮质激素和其它免疫抑制剂有抑制免疫功能的作用,会导致球 蛋白合成减少。球蛋白浓度如低于10g/L时,可怀疑为无γ球蛋 白血症。 3.清蛋白与球蛋白比值(A/G) 临床上常用A/G值衡量肝病的 严重程度,当A/G值小于l时,称比值倒臵,为慢性肝炎或肝硬化 的特征之一。
临床意义:

清总蛋白生理性波动:长久卧床者比直立活动者约低3~5g/L;新 生儿比成人低5~8g/L;60岁以上的老人约比青壮年低2g/L。 清总蛋白增高:
◦ ◦
血液浓缩:腹泻、呕吐等。 合成增加:如多发性骨髓瘤等。

清总蛋白降低: ①血液稀释:过多注射低渗溶液,各种原因引起的水钠潴留。 ②摄入量不足和消耗增加:营养不良、慢性肠胃炎、严重结核病等。 ③合成障碍:肝脏疾病。 ④蛋白质丢失:严重烧伤时大量血浆渗出,肾综合症等。
试剂
双缩脲试剂:称取硫酸铜(CuSO4· 5H2O)3.0g,溶 于500mL新鲜制备的蒸馏水或刚煮沸冷却的去 离子水中,加酒石酸钾纳 (NaKC4H4O6· 4H2O)9.0g,碘化钾5.0g,待完全 溶解后,加入6mol/L Na2OH 100ml,最后加蒸 馏水至1000mL。 240mmol/L NaOH溶液 蛋白质标准液:市售。
结果报告: 被检者: TP__________g/L[60~80g/L] ___年__月__日 检查者:____
注意事项:




1、由于各种血清蛋白质的分子量不同,故其浓度不宜用mol/L表示。 2、双缩脲反应并非蛋白质的颜色反应。凡分子内含有两个或两个 以上氨基甲酰基(-CONH2),不论是直接相连还是通过一个 氮或碳原子间接连接,均可呈双缩脲反应。如缩二脲,草酰二胺2, 丙二酰胺等 3、双缩脲试剂中酒石酸钾钠的作用是络合铜离子,以维持铜离子 在碱性溶液中的溶解性;碘化钾能防止两价铜离子还原. 4、高脂,黄疸及溶血标本应作清空白对照来校正误差。含脂类极 多的血清,加入双缩脲试剂后会出现混浊,可用乙醚3ml抽提后再 进行比色. 5、血清TP>100g/L时,需作稀释处理,结果乘上稀释倍数.
实验二、血清白蛋白测定
【实验要求】 掌握BCG法测定血清Alb的实验原理与方法; 学习微量加样器的使用方法;能熟练使用分光 光度计。 熟悉实验方法学评价 了解血清白蛋白测定的临床意义

【实验原理】 在pH4.2的缓冲液中,清蛋白作为一种阳离子 与阴离子染料溴甲酚绿(bromocresol green, BCG)结合形成蓝绿色复合物,在波长630nm 处有吸收峰,颜色深浅与清蛋白含量成正比, 与同样处理的清蛋白标准液比较,可求得血清 清蛋白含量。

实验操作
加 入 物(mL) 待测血清 蛋白标准液 蒸馏水 双缩脲试剂
U(测) 0.1 -
S(标) 0.1
B(空) 0.1
4.0
4.0
4.0
混匀,置37℃水浴6分钟,以”B”管校”0”, λ=546nm比色,读取A值计算。
实验结果及报告
计算及结果报告: 血清总蛋白(TP)=A测/A标〓C标( C标=70g/L)




【方法评价】 1.高胆红素血症和溶血标本对本法不产生干扰。严重高脂血症可使结 果偏高,应采用标本空白校正。若标本混浊,可做标本空白(血清 0.02ml,加琥珀酸缓冲液4ml),用测定管吸光度减去标本空白管吸 光度后再计算结果。 2. BCG系一种pH指示剂,它受酸、碱影响较大,所用器材必须清洁, 无酸、碱污染。 3.BCG试剂的pH必须严格控制在pH4.15〒0.05,pH升高可使染料空白 增高,与清蛋白结合率下降。所以,控制反应液的pH是本法测定的关 键。 4.BCG与蛋白质结合的特异性较低。它不仅与清蛋白结合呈色,还与 血清中其它蛋白质呈色,其中以α1球蛋白、运铁蛋白(属β球蛋白)、 触珠蛋白(属α2球蛋白)最为明显, BCG与不同蛋白质的反应速率不 同,与清蛋白可立即发生反应(快反应),与其它蛋白质反应较慢 (慢反应)。实验证明,血清与BCG试剂一经混合,“慢反应”即可 发生,约持续1h才完成。 5. Brij-35是一种非离子去垢剂,它可增强BCG-清蛋白复合物的溶解度, 消除BCG同清蛋白反应时可能产生的沉淀,它的浓度高于或低于所指 定的浓度时,均导致敏感度降低和直线性丧失,对测定结果有较大影
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