电泳仪概述
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度,常用μ来表示,是一个由许多因素(包括离子半
径、溶剂化作用、介电常数、溶剂粘度、离子形状 和净电荷、溶液pH、解离度和温度等)决定的。
一般来说,颗粒带净电荷量越大或其直径越小, 其形状越接近球形,在电场中的泳动速度就越快; 反之,则越慢。
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二、影响电泳的外界因素
9
(四)粒子的迁移率
血清蛋白的电泳图谱
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பைடு நூலகம்
二、影响电泳的外界因素
7
(三)溶液的离子强度 溶液的离子强度对带电粒子的泳动有影响,
溶液的离子强度越高,颗粒泳动速度越慢。反之则 越快。
离子强度太低,扩散现象严重,使分辨力明 显降低,从而影响泳动的速率。
离子强度太高,会降低颗粒的泳动速度。
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二、影响电泳的外界因素
8
(四)粒子的迁移率 迁移率为带电粒子在单位电场强度下的移动速
电泳仪概述
一、概述 电泳(electrophoresis)是指带电荷的溶质或粒
子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动 的现象。利用电泳现象将多组分样品分离、分析的 技术叫做电泳技术。可以实现电泳分离技术的仪器 称之为电泳仪。
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3
电泳原理
一、电泳的基本原理
物质分子在正常情况下一般不带电,但是在 一定的物理作用或化学反应条件下,某些物质分 子会成为带电的离子(或粒子),不同的物质, 由于其带电性质、颗粒形状和大小不同,
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11
二、影响电泳的外界因素
(六)吸附作用 即介质对样品的滞留作用。它导致了样品的
拖尾现象而降低了分辨率。纸的吸附作用最大,醋 酸纤维素膜的吸附作用较小或无。 (七)其他
焦耳热、溶液黏度、湿度、电压稳定度和支 持物筛孔均可影响电泳速度和质量。
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二、影响电泳的外界因素
(五)电渗作用 当支持物不是绝对惰性物质时,常常会有一些
离子基团如羧基、磺酸基、羟基等吸附溶液中的正 离子,使靠近支持物的溶液相对带电,在电场作用 下,此溶液层会向负极移动。反之,若支持物的离 子基团吸附溶液中的负离子,则溶液层会向正极移 动。这种在电场中溶液对于固体支持物的相对移动 现象称为电渗。
6
(二)溶液的pH值
溶液的pH值决定了带电质点的解离程度,也 决定了物质所带电荷的多少。当溶液的酸碱度处于某 一特定pH值时,它将带有相同数量的正、负电荷,致 使蛋白质分子在电场中不会移动,故此特定的pH值被 称为该蛋白质的等电点。
对蛋白质、氨基酸等两性电解质而言,溶液的pH 值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也 越快。反之,则越慢。
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5
二、影响电泳的外界因素
(一)电场强度 电场强度是在电场方向上单位长度的电势降落,
也叫电势梯度。带电粒子在电场中移动速率(也叫 泳速)与电场强度、带电粒子的净电荷和大小及形 状、支撑介质的特性、操作温度等有关。电场强度 越大,带电粒子受到的电场力愈大,泳动速度越快。 反之亦然。
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二、影响电泳的外界因素
因而在一定的电场
中它们的移动方向
和移动速率也不同,
因此可使它们分离。
电泳现象和电渗流现象。 返回目录
4
电泳原理
若将带净电荷Q的粒子放入电场,则该粒子所受到 的电荷引力为:
F引=E Q 在溶液中,运动粒子与溶液之间存在阻力F阻
F阻=6πrηV 当F引=F阻时 EQ= 6πrηV
V = EQ/6πrη 由上式可以看出,粒子的移动速度(泳动速度V)与电 场强度(E)和粒子所带电荷量(Q)成正比,而与粒子的半径 (r)及溶液的粘度(η)成反比。
径、溶剂化作用、介电常数、溶剂粘度、离子形状 和净电荷、溶液pH、解离度和温度等)决定的。
一般来说,颗粒带净电荷量越大或其直径越小, 其形状越接近球形,在电场中的泳动速度就越快; 反之,则越慢。
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二、影响电泳的外界因素
9
(四)粒子的迁移率
血清蛋白的电泳图谱
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(三)溶液的离子强度 溶液的离子强度对带电粒子的泳动有影响,
溶液的离子强度越高,颗粒泳动速度越慢。反之则 越快。
离子强度太低,扩散现象严重,使分辨力明 显降低,从而影响泳动的速率。
离子强度太高,会降低颗粒的泳动速度。
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(四)粒子的迁移率 迁移率为带电粒子在单位电场强度下的移动速
电泳仪概述
一、概述 电泳(electrophoresis)是指带电荷的溶质或粒
子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动 的现象。利用电泳现象将多组分样品分离、分析的 技术叫做电泳技术。可以实现电泳分离技术的仪器 称之为电泳仪。
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电泳原理
一、电泳的基本原理
物质分子在正常情况下一般不带电,但是在 一定的物理作用或化学反应条件下,某些物质分 子会成为带电的离子(或粒子),不同的物质, 由于其带电性质、颗粒形状和大小不同,
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二、影响电泳的外界因素
(六)吸附作用 即介质对样品的滞留作用。它导致了样品的
拖尾现象而降低了分辨率。纸的吸附作用最大,醋 酸纤维素膜的吸附作用较小或无。 (七)其他
焦耳热、溶液黏度、湿度、电压稳定度和支 持物筛孔均可影响电泳速度和质量。
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二、影响电泳的外界因素
(五)电渗作用 当支持物不是绝对惰性物质时,常常会有一些
离子基团如羧基、磺酸基、羟基等吸附溶液中的正 离子,使靠近支持物的溶液相对带电,在电场作用 下,此溶液层会向负极移动。反之,若支持物的离 子基团吸附溶液中的负离子,则溶液层会向正极移 动。这种在电场中溶液对于固体支持物的相对移动 现象称为电渗。
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(二)溶液的pH值
溶液的pH值决定了带电质点的解离程度,也 决定了物质所带电荷的多少。当溶液的酸碱度处于某 一特定pH值时,它将带有相同数量的正、负电荷,致 使蛋白质分子在电场中不会移动,故此特定的pH值被 称为该蛋白质的等电点。
对蛋白质、氨基酸等两性电解质而言,溶液的pH 值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也 越快。反之,则越慢。
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二、影响电泳的外界因素
(一)电场强度 电场强度是在电场方向上单位长度的电势降落,
也叫电势梯度。带电粒子在电场中移动速率(也叫 泳速)与电场强度、带电粒子的净电荷和大小及形 状、支撑介质的特性、操作温度等有关。电场强度 越大,带电粒子受到的电场力愈大,泳动速度越快。 反之亦然。
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二、影响电泳的外界因素
因而在一定的电场
中它们的移动方向
和移动速率也不同,
因此可使它们分离。
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电泳原理
若将带净电荷Q的粒子放入电场,则该粒子所受到 的电荷引力为:
F引=E Q 在溶液中,运动粒子与溶液之间存在阻力F阻
F阻=6πrηV 当F引=F阻时 EQ= 6πrηV
V = EQ/6πrη 由上式可以看出,粒子的移动速度(泳动速度V)与电 场强度(E)和粒子所带电荷量(Q)成正比,而与粒子的半径 (r)及溶液的粘度(η)成反比。