艾滋病梅毒和乙肝实验室检测
艾滋病梅毒丙肝检测及结果意义
样品
筛查试剂
HIV抗体筛查检测流程 初筛试验
阳性反应
阴性反应
原有试剂+另一不同原理 （或厂家）试剂或另外两种 不同原理（或厂家）试剂
复检试验
均阳性反应
一阴一阳
均阴性反应
确证试验
报告阴性
图1 HIV抗体筛查检测流程
初筛试验
1、HIV抗体检测分为筛查试验（包括初筛和复 检）和确证试验。
2、根据检测目的选用符合要求的筛查试剂对 样品进行初筛检测，对呈阴性反应的样品，可 出具HIV抗体阴性（-）报告；对呈阳性反应的 样品，需要进一步做复检试验和确证试验。
阴性
阳性
阴性 用另一种不同原理或不同厂 阳性 家生产的筛查试剂再次检测
报告HIV抗体检 测结果阴性
阴性 确证试验 阳性
报告HIV抗体检测结果阳性
不确定
提供咨询，继续随 访，4周后再次进
行确证试验
图4 艾滋病感染产妇所生儿童HIV抗体检测流程
艾滋病快速检测试验（RT）
• 是在ELISA基础上发展起来的一种检测技术， 它用胶体金或硒标记抗原、抗体后以层析方法 进行检测。
试验、放射免疫沉淀试验（RIPA）及免疫荧光试验 （IFA）等。
HIV抗体不确定（±）
结合流行病学资料，可以在4周后随访检测，如带 型没有进展或呈阴性反应，则报告阴性；如随访期间出 现阳性反应，则报告阳性；如随访期间带型有进展，但 不满足阳性标准，应继续随访到8周。如带型没有进展 或呈阴性反应则报告阴性；满足HIV抗体阳性诊断标准 则报告阳性，不满足阳性判断标准可视情况决定是否继 续随访。
艾滋病梅毒丙肝实验室检测及 影响结果因素分析
内容提要：
1.艾滋病检测程序、方法应用和注意事项。 2.梅毒检测程序、方法应用和注意事项。 3.丙肝检测程序、方法应用和注意事项。 4.影响实验室检测结果的因素分析
艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测技术教材
艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测技术岳阳市疾控中心白志永艾滋病抗体检测及样品保存、运送一、HIV抗体检测筛查方法酶联免疫吸附试验（ELISA）化学发光或免疫荧光试验快速检测（RT）（建议配备合格的快速检测试剂，灰区。
）二、筛查程序初筛和复检流程（图1）样品筛查试剂初筛试验阳性反应阴性反应原有试剂+另一不同原理（或厂家）试剂或另外两种不同原理（或厂家）试剂复检试验均阳性反应一阴一阳均阴性反应确证试验报告阴性图1 HIV抗体筛查检测流程三、筛查试验结果的报告（建议用修改后报告单附表3）（例）HIV抗体筛查试验用附表1、2进行报告，阴性反应报告为“HIV抗体阴性（-）”；阳性反应报告为“HIV抗体待复检”。
四、 HIV感染产妇所生儿童HIV抗体检测策略及流程1、适用范围HIV感染产妇所生婴幼儿；已满18个月的婴幼儿，其母亲HIV感染状态不详，儿童出现H IV相关临床表现，临床怀疑HIV感染的儿童。
2、检测程序图4 艾滋病感染产妇所生儿童HIV抗体检测流程五、样品的保存、运送1、样品的保存用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品，短期（1周）内进行检测的可存放于2～8℃，一周以上应存放于-20℃以下。
2、样品的运送（例）（1）应符合生物安全要求；(2)应采用三层容器对样品进行包装。
第一层容器：直接装样品，应防渗漏。
样品应置于带盖的试管内。
在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。
第二层容器：容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。
要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒处理。
第三层容器：容纳并保护第二层容器的运输用外层包装箱。
外面要贴上醒目的标签、联系方式，还应易于消毒。
(3) 用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件下运送。
质量控制一、艾滋病抗体检测的统计学室内质量控制1、试剂盒内部对照即试剂盒提供的阳性和阴性对照血清。
用于判断实验的有效性，不能作为室内质控品使用，内部对照结果无效，必须重新试验。
实验室艾滋、梅毒和乙肝相应项目的标准化操作程序
实验室艾滋、梅毒和乙肝相应项目的标准化操作程序实验室是进行各类病原微生物检测的重要场所，包括艾滋病、梅毒和乙肝等项目的标准化操作程序也是实验室工作的核心。
标准化操作程序的制定，旨在确保实验室工作的准确性、可靠性和连续性，最大程度地减少误差和风险。
下面将详细介绍实验室艾滋病、梅毒和乙肝项目的标准化操作程序。
一、艾滋病检测项目的标准化操作程序：1.标本采集：按照规定的采样方法采集血液标本，包括静脉血和采血盒采集的血液。
2.样本处理：收到标本后，首先检查样本标签和申请单上的信息是否一致，然后进行样本分装和保存，确保样本的完整性和稳定性。
3.样本检测：使用艾滋病抗体检测试剂盒进行检测。
按照检测试剂的说明书，将样本和试剂按照比例混合并孵育一定时间，然后进行洗涤和显色。
4.结果判断：根据试剂盒的说明书，根据显色反应的强度和比色卡提供的判断标准，判断样本阴阳性。
5.结果记录和报告：将检测结果记录在检验记录中，并生成相应的实验报告，确保结果能够及时准确地传达给临床医生。
二、梅毒检测项目的标准化操作程序：1.标本采集：按照规定的采样方法采集血液标本，包括静脉血和采血盒采集的血液。
2.样本处理：收到标本后，首先检查样本标签和申请单上的信息是否一致，然后进行样本分装和保存，确保样本的完整性和稳定性。
3.样本检测：使用梅毒抗体检测试剂盒进行检测。
按照检测试剂的说明书，将样本和试剂按照比例混合并孵育一定时间，然后进行洗涤和显色。
4.结果判断：根据试剂盒的说明书，根据显色反应的强度和比色卡提供的判断标准，判断样本阴阳性。
5.结果记录和报告：将检测结果记录在检验记录中，并生成相应的实验报告，确保结果能够及时准确地传达给临床医生。
三、乙肝检测项目的标准化操作程序：1.标本采集：按照规定的采样方法采集血液标本，包括静脉血和采血盒采集的血液。
2.样本处理：收到标本后，首先检查样本标签和申请单上的信息是否一致，然后进行样本分装和保存，确保样本的完整性和稳定性。
消除艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播实验室管理和职业暴露测试题
消除艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播实验室管理和职业暴露测试题1.艾滋病筛查实验室检测人员应具备以下哪些条件( ) [单选题]A.获得省级以上培训证书(正确答案)B 从事血清血检测工作2年以上C其中中级职称人员一名D.本科以上学历2.以下那些机构不能设置艾滋病筛查实验室（） [单选题]A.县级人民医院B县级疾控中心C社区卫生服务中心(站)D医学科研教学单位(正确答案)3.艾滋快速检测结果阳性如何解释( ) [单选题]A.感染了艾滋病毒B.可能为假阳性C可能感染了艾滋病毒(正确答案)4.艾滋快速检测结果阴性如何解释 ( ) [单选题]A.未感染病毒B.为抗体检测窗口期，检测不出来(正确答案)C.试剂本身敏感性不够5.HIV实验室人员应该多久（）开展一次HIV抗体检测? [单选题]A. 1个月B 2个月C 6个月D 1年(正确答案)6.HBV感染的主要标志是（） [单选题]A、血中测出HBsAg(正确答案)B、血中测出抗-HBsC、血中测出HBcAbDD、血中测出HBeAg和抗-HBs7.急性乙型肝炎窗口期可检出的标志物是（） [单选题]A、HBsAgB、抗-HBsC、HBeAgD、抗-HBc(正确答案)8.有关先天梅毒的描述，下列哪种是错误的（） [单选题]A、也称胎传梅毒B、胎儿的病死率高C、表现有硬下疳(正确答案)D、在母体内通过血源途径而感染9.如果一个病人的RPR为阳性，而TPPA试验为阴性，说明此病人（） [单选题]A、梅毒已进行了有效治疗B、为梅毒血清学假阳性(正确答案)C、目前患有梅毒D、可确诊为神经梅毒10.哪种情况下梅毒感染孕产妇所生儿童在出生时不可以诊断为先天梅毒（） [单选题]A、暗视野显微镜检测到梅毒螺旋体B、TPPA试验阳性，RPR滴度高于母亲分娩前滴度4倍C、梅毒螺旋体IgM抗体检测阳性D、TPPA试验阳性，RPR试验阴性(正确答案)11.以下那一组检验结果可以判断孕产妇目前感染梅毒且具有传染性（） [单选题]A、RPR(-) TPPA(-)B、RPR(+) TPPA(-)C、RPR(+) TPPA(+)(正确答案)D、RPR(-) TPPA(+)12.某乙肝五项全阴的医务工作者在给一HBeAg阳性患者采血时，不小心刺破手指，下列哪项处理最为重要（） [单选题]A、立即酒精消毒B、接种乙肝疫苗C、肌注高效价乙肝免疫球蛋白D、肌注高效价乙肝免疫球蛋白,接种乙肝疫苗(正确答案)13.职业暴露的原因有（） [单选题]A 针刺B 切割C 直接接触D 以上都对(正确答案)14.艾滋病毒不可以通过下列哪种方式传播（） [单选题]A 共用针头或注射器C 日常生活接触(正确答案)D 母婴传播15.在诊疗、护理操作过程中，有可能发生艾滋病人的血液、体液飞溅到医务人员的面部时，医务人员以下哪种做法是错误的（） [单选题]A 戴手套B 戴具有防渗透性能的口罩C 戴防护眼镜D 不用戴手套(正确答案)16.为防针刺伤，错误的做法是（） [单选题]A 使用后的锐器直接放入耐刺、防渗漏的利器盒B 利用针头处理设备进行安全处置C 使用具有安全性能的注射器、输液器等医用锐器以防刺伤D 将针套套回针头，以防扎伤别人(正确答案)17.艾滋病病毒职业暴露级别分为三级，发生以下情形时，确定为三级暴露（）[单选题]A 暴露类型为暴露源沾染了有损伤的皮肤或者粘膜，暴露量大且暴露时间较长B 暴露类型为暴露源沾染了有损伤的皮肤或者粘膜，暴露量小且暴露时间较短C 暴露类型为暴露源刺伤或者割伤皮肤，但损伤程度较重，为深部伤口或者割伤物有明显可见的血液(正确答案)D 暴露类型为暴露源刺伤或者割伤皮肤，但损伤程度较轻，为表皮擦伤或者针刺伤18.预防性用药应当在发生艾滋病病毒职业暴露后多久应用最好（） [单选题]A 72小时内B 36小时内D 2小时内(正确答案)19.医务人员发生艾滋病病毒职业暴露后，以下做法正确的是:（）A 立即用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤(正确答案)B 用生理盐水冲洗粘膜(正确答案)C 进行伤口的局部挤压。
病患艾滋病、梅毒和乙肝检测服务流程
病患艾滋病、梅毒和乙肝检测服务流程
本文档旨在介绍病患艾滋病、梅毒和乙肝检测的服务流程。
以
下是详细的步骤：
1. 预约和登记
- 患者需要提前预约检测服务，可以通过电话、在线预约系统
或直接前往医院前台预约。
- 在预约时，患者需要提供个人身份信息和联系方式，并填写
相关的健康调查表。
2. 接待和咨询
- 患者到达医院后，会被工作人员接待并进行初步咨询。
- 工作人员会向患者介绍检测程序和注意事项，并解答患者可
能有的疑问。
3. 血液采样
- 针对艾滋病、梅毒和乙肝的检测，一般需要进行血液采样。
- 医院工作人员会引导患者前往指定的采样室，进行血液采集。
4. 检测和结果分析
- 采集到的血液样本将被送往医院实验室进行检测。
- 实验室技术人员会根据不同的检测方法进行相应的检测。
- 检测完成后，医务人员会对结果进行分析，并记录在病患档案中。
5. 结果通知和咨询
- 当检测结果可得时，医院会主动联系患者，并通知他们的检测结果。
- 医务人员会给予患者合适的咨询和建议，包括必要的治疗或进一步测试。
6. 隐私保护
- 医院会严格遵守患者的个人隐私权，并保证检测过程的机密性。
- 患者的个人信息和检测结果将严格保密，并仅限授权人员使用。
请注意：本文档仅提供一般性的服务流程，实际的流程可能因医院和地区而有所不同。
为了获得准确的服务信息，请与目标医院的相关部门联系。
艾梅乙
梅毒螺旋体抗原血清学试验方法
梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA） 梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA） 梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA） 化学发光免疫分析法（CLIA） 梅毒免疫层析法-梅毒快速检测（RT） 荧光螺旋体抗体吸附试验（FTA-ABS） 梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）
TPPA
原理：用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒与人 血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生 可见的凝集反应，具有较高的敏感性和 特异性。 是目前WHO公认的梅毒抗原血清学试验 的“金标准”，常用于新方法、新试剂 的参照标准。
TPPA操作步骤
TPPA结果判读
TPPA技术要点
每批次要求同时检测阳性对照（1:320阳 性）； 建议双人判读； 对于“±”（保留）的结果，建议根据 其他实验结果和病人临床症状综合判断； 定期人员比对
TPPA注意事项
服用了含有免疫球蛋白血液制剂的患者 样品中，由于可能因服用的制剂而呈假 阳性。 需考虑前带现象。
TP-ELISA/CLIA
用重组梅毒螺旋体抗原包被固相板条， 加上梅毒血清和单克 隆抗体酶标记物， 形成抗原抗体复合物与酶标记物结合， 用酶标仪或全自动化学发光仪判定实验 阳性反应。 可用于大样本血清检测，可自动化。 结果直观，原始记录便于保存。 可能存在非特异性反应引起的假阳性， 建议用TPPA复检。
乙肝病毒感染血清学标志物
乙肝表面抗原（HBsAg） 乙肝表面抗体（抗–HBs） 乙肝e抗原（HBeAg） 乙肝e抗体（抗–HBe） 乙肝核心抗体（抗–HBc） HBVDNA
艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测-20150602
注 意
• 严格按照试剂盒说明进行结果读取。 • 时间过短或过长都会影响判读结果 • 由于血红蛋白的存在，时间过长（如>20分钟） 则有色的血红蛋白也层析到检测线位置，影响判 读结果。
快速检测的优势特点
• • • • • • 取样品种：血清,血浆和全血 无须仪器,容易使用：1至2 步即可 快速：一般 15分钟 体积小,室温稳定,包装防潮,便携式 内置质控,每一人份一条,可批式或单个样品 临床质控,不单监测产品质量,其样本反应的质量 也受监控
免疫层析法的原理
免疫层析法的原理
片 连接物垫 捕捉条膜
成熟的膜片叠加技术和免疫层析法完美组合
免疫层析法
• 在硝酸纤维素膜上预置胶体金标记的 抗原，同时分 别在其下方的检测区包被抗原，对照区包被抗人 IgG。 • 样品加至样品孔后，样品中的抗体先与胶体金标记的 抗原结合形成复合物。由于层析作用，复合物沿硝酸 纤维素膜移动，到达检测区时则与包被于其上的抗原 形成双抗原夹心免疫复合物，显色出现肉眼可见的红 色条带；
孵育
• 孵育的时间要掌握好，严格按照说明书操作。 • 注意封板，避免蒸发。反应板不宜叠放，以保证 各板的温度都能迅速平衡 • 注意孵育中边缘效应
洗涤
• 洗涤在ELISA 过程中虽不是一个反应步骤，但 却决定着实验的成败。 • ELSIA 就是靠洗涤来达到分离游离和酶标记物 的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固 相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非 特异性地吸附于固相载体的干扰物质。 • 聚苯乙烯等材质对蛋白质的吸附是普遍性的，所 以在洗涤时应把这种非特异性的干扰物质洗涤下 来。
样品的采集、保存和运输
5 样品的接收 • 样品包裹必须在具有处理感染性材料能力的实验 室内、由经过培训的、穿戴防护衣、戴口罩、防 护眼镜的工作人员在生物安全柜中打开，用后的 包裹应及时进行消毒。 • 核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。 如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出，对样品 管和盛器消毒，同时报告实验室负责人和上一级 实验室技术人员。 • 检查样品的状况，记录有无严重溶血、微生物污 染、血脂过多以及黄疸等情况。如果污染过重或 者认为样品不能被接受，应将样品安全废弃。并 将样品情况立即通知送样人。 • 接收样品时应填写样品接收单。
艾梅、乙、检测服务流程图--
附件1（产科门诊、病房上墙）预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播服务流程图1. 预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播服务流程）附件2-I（检验科上墙）孕产妇艾滋病抗体检测及服务流程图2. 孕妇艾滋病抗体检测及服务流程附件2-II（检验科上墙）产时艾滋病抗体检测及服务流程说明：# 再次确认结果阴性报告“阴性”，结果阳性报告“阳性”，结果仍为“不确定”继续随访，4周后再次进行确认试验；仍为不确定结果，报告“阴性”。
必要时可进行HIV核酸检测作为辅助诊断。
图3产时艾滋病抗体检测及服务流程）（适用于孕期未接受HIV检测的产妇）附件3（检验科上墙）孕产妇梅毒检测及服务流程图4.孕产妇梅毒检测及服务流程艾滋病感染孕产妇及所生儿童抗艾滋病病毒用药方案预防艾滋病母婴传播抗病毒药物的应用可分为预防性抗病毒用药方案和治疗性抗病毒用药方案。
对于处于艾滋病临床I期或II期，免疫功能相对较好，CD4+T淋巴细胞计数>350/mm3的艾滋病感染孕产妇，建议采用预防性抗病毒用药方案；对处于艾滋病临床Ⅲ期或Ⅳ期，CD4+T淋巴细胞计数≤350/mm3的艾滋病感染孕产妇，建议采用治疗性抗病毒用药方案。
一、预防性应用抗病毒药物（一）孕产妇预防性应用抗病毒药物。
1.孕期和分娩时。
从妊娠14周或14周后发现艾滋病感染后尽早开始服用齐多夫定（AZT）300mg +拉米夫定（3TC）150mg +洛匹那韦/利托那韦（克力芝）（LPV/r）400/100mg，每天2次；或者AZT300mg+3TC150mg，每天2次，依非韦伦（EFV）600mg，每天1次，直至分娩结束。
2.分娩后。
若选择人工喂养，产妇可在分娩结束后停止抗病毒药物的应用；若选择母乳喂养，产妇持续应用抗病毒药物至停止母乳喂养后1周。
（二）婴儿应用抗病毒药物。
婴儿可以选择应用以下两种抗病毒药物方案中的任一种。
1.奈韦拉平（NVP）方案:新生儿出生体重≥2500g，服用NVP 15mg（即混悬液1.5ml），每天1次；出生体重＜2500g且≥2000g，服用NVP 10mg（即混悬液1.0ml），每天1次；出生体重＜2000g，服用NVP 2mg/kg（即混悬液0.2ml/kg），每天1次；至出生后4～6周。
艾滋与梅毒实验室检查
样品的编码和记录
应制定样品编码的标准操作程序（SOP），规定样品编码的原则和方法，为样品制定唯一性编码（编 号），保证其唯一性。 采血前，先对装有样品的离心管或滤纸进行标记，核对后编码。要将标签贴在试管的侧面，最好使用预 先印制好的、专门用于冷冻储存的耐低温标签。 应使用专门的样品记录本或登记表记录样品，同时录入电脑保存。
菌种的分类根据其危险性决定(包括实验室感染的可能性，感染后发病的可能性，症状 轻重及愈后情况，有无致命危险及有效的防止实验室感染方法，用一般的微生物操作 方法能否防止实验室感染、我国有否此种菌种及曾否引起流行、人群免疫力等情况)。 依其危险程度的大小，我国的菌种分为四类。 致病性病原微生物可根据其易感程度分为四类，第一类、第二类病原微生物统称为高 致病性病原微生物。人类免疫缺陷病毒（HIV）属第二类病原微生物，是高致病性病 原微生物。 HIV抗体检测（包括筛查和确证实验）、抗原检测和相关的免疫学检测应在符合Ⅱ级 生物安全实验室（BSL-2）要求的艾滋病检测实验室中进行。 HIV分离培养、浓缩、中和试验、细胞培养及研究工作及其它需要应用活病毒的研究 工作，应在Ⅲ级生物安全实验室（BSL-3）中进行。 HIV核酸提取和检测均应在符合Ⅱ级生物安全实验室（BSL-2）要求的艾滋病检测实 验室中进行。 HIV病毒株应保存在符合Ⅲ级生物安全实验室（BSL-3）要求的艾滋病实验室；HIV阳 性样品，包括全血、血清、血桨和其他组织（液）、核酸提取物应保存在符合BSL-2 要求的艾滋病实验室。
HIV实验室生物安全防护
二类生物安全实验室
ห้องสมุดไป่ตู้
定义
生物安全实验室（biosafety
laboratory ），也称生物安全防护实验室 (biosafety containment for laboratories)，是通过防护屏障和管理措施，能够避免或控制被操作的有害生物因子危害，达到生物安 全要求的生物实验室和动物实验室
艾、梅、乙、检测服务流程图附件1--9
附件1（产科门诊、病房上墙）预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播服务流程图1. 预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播服务流程）附件2-I（检验科上墙）孕产妇艾滋病抗体检测及服务流程图2. 孕妇艾滋病抗体检测及服务流程附件2-II（检验科上墙）产时艾滋病抗体检测及服务流程说明：# 再次确认结果阴性报告“阴性”，结果阳性报告“阳性”，结果仍为“不确定”继续随访， 4周后再次进行确认试验；仍为不确定结果，报告“阴性”。
必要时可进行HIV核酸检测作为辅助诊断。
图3 产时艾滋病抗体检测及服务流程）（适用于孕期未接受HIV检测的产妇）附件3（检验科上墙）孕产妇梅毒检测及服务流程图4.孕产妇梅毒检测及服务流程艾滋病感染孕产妇及所生儿童抗艾滋病病毒用药方案预防艾滋病母婴传播抗病毒药物的应用可分为预防性抗病毒用药方案和治疗性抗病毒用药方案。
对于处于艾滋病临床I期或II期，免疫功能相对较好，CD4+T淋巴细胞计数>350/mm3的艾滋病感染孕产妇，建议采用预防性抗病毒用药方案；对处于艾滋病临床Ⅲ期或Ⅳ期，CD4+T淋巴细胞计数≤350/mm3的艾滋病感染孕产妇，建议采用治疗性抗病毒用药方案。
一、预防性应用抗病毒药物（一）孕产妇预防性应用抗病毒药物。
1.孕期和分娩时。
从妊娠14周或14周后发现艾滋病感染后尽早开始服用齐多夫定（AZT）300mg +拉米夫定（3TC）150mg +洛匹那韦/利托那韦（克力芝）（LPV/r）400/100mg，每天2次；或者AZT300mg+3TC150mg，每天2次，依非韦伦（EFV）600mg，每天1次，直至分娩结束。
2.分娩后。
若选择人工喂养，产妇可在分娩结束后停止抗病毒药物的应用；若选择母乳喂养，产妇持续应用抗病毒药物至停止母乳喂养后1周。
（二）婴儿应用抗病毒药物。
婴儿可以选择应用以下两种抗病毒药物方案中的任一种。
1.奈韦拉平（NVP）方案:新生儿出生体重≥2500g，服用NVP 15mg（即混悬液1.5ml），每天1次；出生体重＜2500g 且≥2000g，服用NVP 10mg（即混悬液1.0ml），每天1次；出生体重＜2000g，服用NVP 2mg/kg（即混悬液0.2ml/kg），每天1次；至出生后4～6周。
梅毒、 艾滋病、乙肝的实验室检测
三期梅毒
. 流行病学：多数有不安全性行为，或性伴感染史，或多性伴史；可有一期或二期梅毒史。病期在2年以上。
. 临床表现：晚期良性梅毒：结节性梅毒疹、马鞍鼻，梅毒性骨关节损坏，眼梅毒，神经梅毒及心血管梅毒。
. 实验室检查：
1、血清检查：
特异性抗体： 阳性
非特异性抗体： 阳性
.
有明确的不安全性行为史，而2年前无不安全性行为史。
.
有过符合一期或二期梅毒的临床表现，但当时未得到诊断和治疗者。
.
性伴有明确的早期梅毒感染史。
晚期隐性梅毒：感染时间在2年以上。无法判断感染时间者亦视为晚期隐性梅毒。既往无明确的梅毒诊
断和治疗史。
临床表现：无任何梅毒性的临床表现。 1、血清检查：
特异性抗体： 阳性 非特异性抗体： 阳性 2、脑脊液检查：一般无明显异常（用于排除无症状神经梅毒）
• 因治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为 疗效观察、判愈、复发或再感染的指征。
二、梅毒螺旋体抗原血清学试验----- 特异性梅毒抗体
. 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA) . 梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA) . 梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA） . 化学发光免疫分析法（CLIA） . 梅免疫层析法-梅毒快速检测 (RT) . 荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS） . 梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）
• 所有HIV感染母亲所生儿童，在出生后6周或3个月未接受EID检测者，应进行 HIV抗体检测。检测时间： • 满12月龄 和 • 满18月龄（必要时，见HIV抗体检测流程）
• 出生后3个月EID检测结果为阴性的儿童也应接受HIV抗体检测
满18月龄HIV抗体检测阳性，可确认儿童HIV感染。
艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测技术
艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测技术岳阳市疾控中心白志永艾滋病抗体检测及样品保存、运送一、HIV抗体检测筛查方法酶联免疫吸附试验（ELISA）化学发光或免疫荧光试验快速检测（RT）（建议配备合格的快速检测试剂，灰区。
）二、筛查程序初筛和复检流程（图1）图1 HIV抗体筛查检测流程三、筛查试验结果的报告（建议用修改后报告单附表3）（例）HIV抗体筛查试验用附表1、2进行报告，阴性反应报告为“HIV抗体阴性（-）”；阳性反应报告为“HIV抗体待复检”。
四、 HIV感染产妇所生儿童HIV抗体检测策略及流程1、适用范围HIV感染产妇所生婴幼儿；已满18个月的婴幼儿，其母亲HIV感染状态不详，儿童出现H IV相关临床表现，临床怀疑HIV感染的儿童。
2、检测程序图4 艾滋病感染产妇所生儿童HIV抗体检测流程五、样品的保存、运送1、样品的保存用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品，短期（1周）内进行检测的可存放于2～8℃，一周以上应存放于-20℃以下。
2、样品的运送（例）（1）应符合生物安全要求；(2)应采用三层容器对样品进行包装。
第一层容器：直接装样品，应防渗漏。
样品应置于带盖的试管内。
在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。
第二层容器：容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。
要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒处理。
第三层容器：容纳并保护第二层容器的运输用外层包装箱。
外面要贴上醒目的标签、联系方式，还应易于消毒。
(3) 用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件下运送。
质量控制一、艾滋病抗体检测的统计学室内质量控制1、试剂盒内部对照即试剂盒提供的阳性和阴性对照血清。
用于判断实验的有效性，不能作为室内质控品使用，内部对照结果无效，必须重新试验。
2、室内质控品为非试剂盒组份的外部质控品，是为了监控检测的重复性而设置的，包括强阳性、弱阳性和阴性质控血清。
也可以只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒临界值（Cut-off）的2～3倍为宜。
浅谈艾滋病、梅毒及乙肝的检测
浅谈艾滋病、梅毒及乙肝的检测艾滋病、梅毒和乙肝是三种常见的性传播疾病。
艾滋病是一种由人类免疫缺陷病毒（HIV）引起的疾病。
HIV病毒会攻击人体免疫系统，导致免疫力下降，从而让人体无法抵御疾病和感染。
艾滋病可以通过血液、精液、阴道分泌物、乳汁等体液传播。
在性行为、母婴传播、注射毒品、输血等过程中，都有可能传播艾滋病。
目前艾滋病仍然是一种无法治愈的疾病，但是随着现代医学的进步，可以通过抗病毒药物控制病情，让患者维持相对健康的生活。
预防艾滋病的最好方法是使用安全套、避免分享注射器等物品，以及通过定期进行艾滋病检测，及时发现患病情况。
艾滋病病毒会攻击人体免疫系统，导致身体无法对抗其他疾病和感染。
因此，感染艾滋病病毒的人往往会经历各种健康问题，包括但不限于肺炎、结核病、淋巴瘤等。
为了尽早发现和治疗艾滋病，通常需要进行艾滋病的检测。
艾滋病的检测通常有两种方法：抗体检测和核酸检测。
抗体检测是通过检测血液中是否存在艾滋病病毒的抗体来确定是否感染了艾滋病病毒。
核酸检测是通过检测艾滋病病毒的DNA或RNA来确定感染情况。
需要注意的是，艾滋病病毒有一个潜伏期，在这个期间内，检测结果可能会是阴性，但实际上已经感染了病毒。
因此，如果你担心自己感染了艾滋病病毒，最好定期检测，并且采取预防措施，如使用安全套等。
此外，如果确诊患有艾滋病，可以通过药物治疗来控制病情。
现在有很多种药物可以有效地抑制病毒复制，使病情得到控制。
同时，也要注意生活方式的改变，如保持健康的饮食、规律的作息、避免过度劳累等，以提高身体免疫力，预防并发症的发生。
艾滋病检测通常是通过抽血血检来进行的。
目前艾滋病的主要检测手段有以下几种：RNA（核酸检测）：理论上2周可以查出抗体；化学发光：4周可以查出抗体；四代ELISA（酶联法）：基本4周可以查出抗体。
梅毒则是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病。
其传播方式主要是通过性行为传播，也可通过接触患者的皮肤破损处、母婴传播和血液传播等方式传染。
配偶性伴艾滋、梅毒和乙肝咨询检测制度
配偶/性伴艾滋、梅毒和乙肝咨询检测制度1. 检测服务原则艾梅乙性伴侣检测服务遵循以下原则：自愿性：所有性伴侣的检测均基于自愿原则，确保个人权利与隐私得到充分尊重。
保密性：所有检测结果及相关个人信息严格保密，未经个人同意不得泄露。
科学性：采用先进的检测技术与方法，确保检测结果的准确性和可靠性。
全面性：检测服务覆盖艾滋病（HIV）、梅毒、乙型肝炎（乙肝）三大主要性传播疾病。
及时性：一旦发现阳性结果，立即提供专业的咨询、治疗和随访服务。
2. 服务对象范围所有有性行为的成年人均可自愿参与艾梅乙性伴侣检测服务。
特别关注孕产妇的配偶/性伴侣，以及有高危行为史或疑似感染症状的人群。
单阳家庭（即夫妻双方中有一方感染）中的未感染方，应作为重点检测对象。
3. 检测项目与内容艾滋病检测HIV抗体筛查：采用高敏感性的筛查试剂进行HIV抗体检测。
确认试验：对疑似阳性结果进行进一步确认试验，确保诊断准确性。
梅毒检测梅毒螺旋体抗原血清学试验：如TPPA、ELISA等，检测特异性抗体。
非梅毒螺旋体抗原血清学试验：如RPR或TRUST等，检测反应素，用于评估病情活动性。
乙肝检测乙肝表面抗原（HBsAg）：检测是否存在乙肝病毒感染。
乙肝表面抗体（HBsAb）：评估疫苗接种效果或自然感染后恢复状态。
肝功能检测：对于乙肝表面抗原阳性者，进一步检测肝功能指标。
4. 检测流程咨询与登记：性伴侣在知情同意的基础上，填写个人信息并进行初步咨询。
样本采集：由专业医护人员采集血液样本，确保过程安全、无痛。
实验室检测：将样本送至专业实验室进行检测，确保检测结果的准确性。
结果告知：检测结果出来后，通过电话、短信或面对面方式告知检测者，并解释结果意义。
后续处理：对于阳性结果者，提供进一步的咨询、治疗和随访服务；对于阴性结果者，提供健康教育建议。
5. 咨询服务专业咨询：由具备资质的专业人员提供一对一咨询服务，解答检测者疑问。
心理支持：为阳性结果者提供必要的心理支持和情绪安抚，帮助其面对疾病。
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感染，也不能用于判断疗效
* 一期梅毒治疗病人中，15%-25%可在2-3年后转为血清学阴性
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妊娠期梅毒检测
所有孕产妇应进行梅毒筛查检测： – 孕期尽早（如果可能，在孕早期时）以及 – 如果在分娩前/临产时没有筛查检测结果，在分娩时检测
梅毒螺旋体抗原血清学试验（检测特异性梅毒螺旋 体抗体）
• TPPA（梅毒螺旋体颗粒凝集试验） • ELISA（酶联免疫吸附试验） • POC（快速检测、一站式检测）
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梅毒诊断检测
梅毒早期诊断的依据之一是病原学检测，即在组 织或分泌物中检测到苍白螺旋体： – 暗视野显微镜 – 镀银染色镜检
8
非梅毒螺旋体抗原血清学试验
婴儿需要接受预防性治疗还是规范的抗梅毒治疗 应根据：
* 由中国疾病预防控制中心性病中心国家参比实验室提供
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非梅毒螺旋体抗原血清学试验
抗体滴度通常与疾病活动度有关。
• 治疗后（可能几个月）非梅毒螺旋体抗原血清学 试验通常转变为不反应
• 如果用同一种实验，相同试验滴度4倍变化（如 从1:16下降到1:4或从1:8上升到1:32）为临床显著 变化
• 有些病人，抗体滴度可始终处于较低水平，有时 可持续终生（血清固定）
艾滋病梅毒和乙肝实验室检测
综合产前检查服务+ 检测
孕产妇参加产前 检查服务
检测前信息
取血样
全血细胞计 数和其它检
测
HIV 检测
梅毒检测 HBV 检测
2
梅毒的实验室检测
3
梅毒筛查检测
筛查检测
– 用于诊断产检、临产及分娩的孕产妇是否感染 梅毒：梅毒血清学检测
– 筛查检测应
• 具有较高的灵敏度和特异度 • 操作简单、容易获得、便宜 • 尽可能在“当日”获得结果
4
筛查检测何时使用何种检测？
检测方法 检测时间
梅毒
• 非梅毒螺旋体抗原血清学试验（RPR或 TRUST检测）
• 梅毒螺旋体抗原血清学试验（TPPA、 ELISA或梅毒快速检测）
• 第一次产检（孕早期） • 或下一次产检时 • 如有必要，孕晚期再次检测 • 此前无检测结果，则在分娩时检测
5
梅毒血清学试验基本实验室设备
✓ 一期梅毒：1年后抗体滴度转阴 ✓ 二期梅毒：2年后抗体滴度转阴
晚期梅毒：
✓ 治疗后抗体滴度缓慢下降 ✓ 50%的病人2年后抗体滴度仍为阳性
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梅毒螺旋体抗原血清学试验
梅毒螺旋体抗原血清学试验 ✓ 检测梅毒螺旋体抗原特异性抗体 ✓ 可用于确认非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性 结果，排除其假阳性 ✓ 阳性结果可持续存在，即使治疗后仍可为阳性。*
非梅毒螺旋体抗原血清学试验：
✓ 快速、简便、便宜 ✓ 敏感性和特异性较高 ✓ 硬下疳后1-2周变为阳性 ✓ 可用于
– 筛查样本 – 评估对治疗的反应 – 鉴别复燃还是再次感染
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确保非梅毒螺旋体抗原血清学试验 质量的关键点
1. 按照标准操作程序（SOPs）进行操作 2. 推荐使用评价特性较好的试剂* 3. 按照统一的标准报告结果 4. 开展实验室质控（QC）和参加室间能力验证（PT）
梅毒螺旋体感染可产生非特异性抗体（非梅毒螺
旋体抗体） 非梅毒螺旋体抗体
• 又称之为反应素，是抗心磷脂等抗原的抗体
• 随菌体和宿主细胞的类脂质抗原量升高
除梅毒外，其他医学情况会造成非梅毒螺旋体 抗原血清学试验假阳性结果，包括结核、疟疾、 妊娠和风湿关节炎、狼疮及硬皮病等自体免疫 学疾病
9
非梅
清学试验阳性
非梅毒螺旋体抗原 血清学试验阴性
报告： 梅毒螺旋体抗 原血清学试验
阴性
治疗后，随访监测非 梅毒螺旋体抗原血清
学试验
阳性 反应
每3个月进行非梅毒螺旋体 抗原血清学试验
如果需要进行治疗
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HIV感染病人的梅毒血清学试验
一些HIV感染病人，其梅毒血清学试验结果不典型， 包括
检方法
RPR/TRUST
检测样本类型 血清 血浆 全血
必要设备
√
√
水平旋转仪
TPPA
√
√
震荡仪
ELISA
√
√
酶标仪、洗板机
POCT检测
√
√
√ 无需特殊设备
6
梅毒诊断检测
血清学试验检测梅毒感染相关抗体 非梅毒螺旋体抗原血清学试验（检测非特异性抗体）
• RPR（快速血浆反应素环状卡片试验） • TRUST（甲苯胺红不加热血清试验） • VDRL（性病研究实验室试验）
筛查检测可应用以下任何一类方法： – 非梅毒螺旋体抗原血清学试验（滴度）或 – 梅毒螺旋体抗原血清学试验
所有筛查检测结果阳性的孕产妇都应用另外一类检测方法进 行复检确认是否为现症梅毒
所有产妇及所生婴儿出院前，产妇梅毒检测结果都应记录在 病历中，以确保需要时给予治疗
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孕产妇梅毒检测流程
孕产妇
或
非梅毒螺旋体抗原血清学
梅毒螺旋体抗原血清学试
试验
验
阴性反应
阳性反应
阳性反应
阴性反应
梅毒螺旋体抗原血清学试 验
阴性反应 阳性反应
非梅毒螺旋体抗原血清学 试验
阳性反应 阴性反应
报告： 非梅毒螺旋体抗原
血清学试验阴性
报告： 非梅毒螺旋体抗原
血清学试验阳性
梅毒螺旋体抗原血 清学试验阴性
报告： 两种检测均阳性
临床参考意义
+
-
RPR假阳性 – 考虑其他医学状况*
+
+ 现症梅毒
-
+
既往感染
或
极早期梅毒
-
-
排除梅毒感染
由于免疫缺陷，也可发生于艾滋病晚期
*包括结核、疟疾、风湿性关节炎或妊娠。
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暴露婴儿的梅毒检测
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梅毒暴露婴儿先天梅毒检测
母体非梅毒螺旋体和梅毒螺旋体IgG抗体可通过 胎盘，所以应谨慎地对婴儿梅毒血清学试验结果 进行解释
注意：病人血清学监测应在同一个实验室使用同一种检 测方法（RPR、TRUST）进行连续多次检测；RPR 和TRUST方法均有效，但检测的滴度结果不能直 接进行比较
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治疗后非梅毒螺旋体抗原血清学试验 抗体滴度变化的临床意义
一期梅毒和二期梅毒：
✓ 成功治疗，抗体滴度应
• 3个月后下降2倍 • 6个月后下降4倍
• 滴度超常高或超常低 • 滴度不断变动
如果临床表现提示早期梅毒，而血清学试验结果与 此不一致，考虑
• 病灶活检 或 • 暗视野显微镜检查
注意：对于大多数HIV感染病人而言，梅毒血清学试验是诊断梅毒感染、 随访观察疗效准确、可靠的检测方法
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梅毒血清学检测结果的解释
非梅毒螺 梅毒螺旋 旋体试验 体试验