内标法外标法区别
最新归一化法、外标法、内标法的区别
色谱定量方法一、归一化法由于组分的量与其峰面积成正比,如果样品中所有组分都能产生信号,得到相应的色谱峰,那么可以用如下归一化公式计算各组分的含量。
(7.34)若样品中各组分的校正因子相近,可将校正因子消去,直接用峰面积归一化进行计算。
中国药典用不加校正因子的面积归一化法测定药物中各杂质及杂质的总量限度。
(7.35)归一化法的优点是:简便、准确、定量结果与进样量重复性无关(在色谱柱不超载的范围内)、操作条件略有变化时对结果影响较小。
缺点是:必须所有组分在一个分析周期内都流出色谱柱,而且检测器对它们都产生信号。
不适于微量杂质的含量测定。
二、外标法用待测组分的纯品作对照物质,以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。
此法可分为工作曲线法及外标一点法等。
工作曲线法是用对照物质配制一系列浓度的对照品溶液确定工作曲线,求出斜率、截距。
在完全相同的条件下,准确进样与对照品溶液相同体积的样品溶液,根据待测组分的信号,从标准曲线上查出其浓度,或用回归方程计算,工作曲线法也可以用外标二点法代替。
通常截距应为零,若不等于零说明存在系统误差。
工作曲线的截距为零时,可用外标一点法(直接比较法)定量。
外标一点法是用一种浓度的对照品溶液对比测定样品溶液中i组分的含量。
将对照品溶液与样品溶液在相同条件下多次进样,测得峰面积的平均值,用下式计算样品中i组分的量:W=A(W)/(A)(7.36)式中W与A分别代表在样品溶液进样体积中所含i组分的重量及相应的峰面积。
(W)及(A)分别代表在对照品溶液进样体积中含纯品i组分的重量及相应峰面积。
外标法方法简便,不需用校正因子,不论样品中其他组分是否出峰,均可对待测组分定量。
但此法的准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。
此外,为了降低外标一点法的实验误差,应尽量使配制的对照品溶液的浓度与样品中组分的浓度相近。
三、内标法选择样品中不含有的纯物质作为对照物质加入待测样品溶液中,以待测组分和对照物质的响应信号对比,测定待测组分含量的方法称为内标法。
试简述内标法外标法和标准曲线法的区别与联系
试简述内标法外标法和标准曲线法的区别与联系内标法、外标法和标准曲线法都是常用的分析化学方法,用于定量分析样品中所含物质的浓度。
本文将分别介绍这三种方法,包括其基本原理、优缺点、适用范围和应用注意事项,并进一步比较它们之间的异同点,以帮助读者更好地理解这些方法。
一、内标法1.内标法可以消除不同样品之间的误差。
每个样品都添加相同浓度的内标物质,可以保证分析仪器响应的稳定性和可靠性,从而提高分析结果的精度和准确性。
2.内标法适用于分析系统不稳定、标准曲线多次测定误差较大或样品矩阵干扰较强等情况下。
通过引入内标物质,可以抵消这些误差和干扰因素,从而获得更准确的分析结果。
3.内标法在实际分析中应用较为广泛,包括食品、环境、药品等领域。
内标物质的选取应注意其在样品提取、分离、检测等过程中不会受到干扰和损失。
二、外标法1.外标法适用于分析系统稳定,且标准曲线经过多次测定和优化的情况。
外标法要求标准曲线的线性范围宽,以及样品矩阵中不含有干扰物质,否则会影响测定结果的准确性。
2.优点是操作简单,结果直观,且适用于多种分析仪器。
外标法需要预先制备标准溶液,因此需要时间和精力投入,并且标准溶液的制备和保存需注意一定的技巧。
3.外标法通常用于分析水样、血清等样品中的常规成分,例如微量元素、蛋白质等。
三、标准曲线法2.标准曲线法的优点是可以定量分析多种成分,并且适用于多种分析仪器。
标准曲线法需要对标准曲线进行建立、优化和验证,因此需要投入较多的时间和精力。
3.标准曲线法适用于定量分析各种样品中的成分或物质,包括食品、环境、药品、化妆品等。
标准曲线法的建立过程需要谨慎,尤其要注意质量控制和实验总体性能验证。
总结比较以上三种定量分析方法各有其特点,选用何种方法应根据实际情况而定。
实际应用中,常常选择标准曲线法和内标法相结合的模式,以提高定量分析结果的精度和准确性,并进一步检验和确保实验结果的正确性,如常用的加标法分析。
标准曲线法和外标法均应为线性关系,对于标准曲线法,通常需要至少5个或以上的标准浓度级别和与之相对应的响应信号结果,将数据进行回归拟合,从而建立标准曲线方程,并验证其可靠性和准确性。
仪器分析中的外标法与内标法,你搞清楚了吗?
仪器分析中的外标法与内标法,你搞清楚了吗?内标法或者外标法,那么它们的定量依据是什么,这两者之间有什么区别,什么时候应该选择哪⼀种⽅法。
⼩七就⼀⼀为你解答。
内标法与外标法的原理对⽐内标法是⾊谱分析中⼀种⽐较准确的定量⽅法,尤其在没有标准物对照时,此⽅法更显其优越性。
内标法是将⼀定重量的纯物质作为内标物(参见内标物条)加到⼀定量的被分析样品混合物中,然后对含有内标物的样品进⾏⾊谱分析,分别测定内标物和待测组分的峰⾯积(或峰⾼)及相对校正因⼦,按公式和⽅法即可求出被测组分在样品中的百分含量。
那么内标物如何选择?内标物的选择原则对于内标法定量分析来说,内标物的选择是及其重要的。
它必须满⾜如下的条件:1.内标物与被分析物质的物理化学性质要相似(如:沸点、极性、化学结构等);2.内标物应是该试样中不存在的纯物质;3.它必须完全溶于被测样品(或溶剂)中,且不与被测样品起化学反应;并与试样中各组分的⾊谱峰能完全分离;4.能加⼊内标物的量应接近于被测组分;5.⾊谱峰的位置应与被测组分的⾊谱峰的位置相近,或在⼏个被测组分⾊谱峰中间。
且⼜不共溢出,⽬的是为了避免仪器的不稳定性所造成的灵敏度的差异;6.选择合适的内标物加⼊量,使得内标物和被分析物质⼆者峰⾯积的匹配性⼤于75%,以免由于它们处在不同响应值区域⽽导致的灵敏度偏差。
外标法是仪器分析常⽤的⽅法之⼀,是⽐较法的⼀种。
与内标法相⽐,外标法不是把标准物质加⼊到被测样品中,⽽是在与被测样品相同的⾊谱条件下单独测定,把得到的⾊谱峰⾯积与被测组分的⾊谱峰⾯积进⾏⽐较求得被测组分的含量。
外标物与被测组分同为⼀种物质但要求它有⼀定的纯度,分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近,以利于定量分析的准确性。
内标法与外标法公式的对⽐想要看懂内标法的计算。
⾸先来分清两个概念,绝对校正因⼦和相对校正因⼦。
以⾊谱分析为例,绝对校正因⼦是单位峰⾯积所相当的物质量,fi’=mi/Ai。
⽽相对校正因⼦是某⼀组分与标准物质的绝对校正因⼦之⽐,f= fi′/ fs′=As•mi/Ai•ms。
归一化法、外标法、内标法的区别
色谱定量方法一、归一化法由于组分得量与其峰面积成正比,如果样品中所有组分都能产生信号,得到相应得色谱峰,那么可以用如下归一化公式计算各组分得含量。
(7、34)若样品中各组分得校正因子相近,可将校正因子消去,直接用峰面积归一化进行计算。
中国药典用不加校正因子得面积归一化法测定药物中各杂质及杂质得总量限度。
(7、35)归一化法得优点就是:简便、准确、定量结果与进样量重复性无关(在色谱柱不超载得范围内)、操作条件略有变化时对结果影响较小。
缺点就是:必须所有组分在一个分析周期内都流出色谱柱,而且检测器对它们都产生信号。
不适于微量杂质得含量测定.二、外标法用待测组分得纯品作对照物质,以对照物质与样品中待测组分得响应信号相比较进行定量得方法称为外标法。
此法可分为工作曲线法及外标一点法等。
工作曲线法就是用对照物质配制一系列浓度得对照品溶液确定工作曲线,求出斜率、截距。
在完全相同得条件下,准确进样与对照品溶液相同体积得样品溶液,根据待测组分得信号,从标准曲线上查出其浓度,或用回归方程计算,工作曲线法也可以用外标二点法代替.通常截距应为零,若不等于零说明存在系统误差。
工作曲线得截距为零时,可用外标一点法(直接比较法)定量. ﻫ外标一点法就是用一种浓度得对照品溶液对比测定样品溶液中i组分得含量。
将对照品溶液与样品溶液在相同条件下多次进样,测得峰面积得平均值,用下式计算样品中i组分得量:ﻫW=A(W)/(A)(7、36)ﻫ式中W 与A分别代表在样品溶液进样体积中所含i组分得重量及相应得峰面积。
(W)及(A)分别代表在对照品溶液进样体积中含纯品i组分得重量及相应峰面积。
外标法方法简便,不需用校正因子,不论样品中其她组分就是否出峰,均可对待测组分定量。
但此法得准确性受进样重复性与实验条件稳定性得影响.此外,为了降低外标一点法得实验误差,应尽量使配制得对照品溶液得浓度与样品中组分得浓度相近。
三、内标法选择样品中不含有得纯物质作为对照物质加入待测样品溶液中,以待测组分与对照物质得响应信号对比,测定待测组分含量得方法称为内标法。
归一化法、外标法、内标法的区别
色谱定量方法之马矢奏春创作创作时间:二零二一年六月三十日一、归一化法由于组分的量与其峰面积成正比, 如果样品中所有组分都能发生信号, 获得相应的色谱峰, 那么可以用如下归一化公式计算各组分的含量.(7.34)若样品中各组分的校正因子相近, 可将校正因子消去, 直接用峰面积归一化进行计算.中国药典用不加校正因子的面积归一化法测定药物中各杂质及杂质的总量限度.(7.35)归一化法的优点是:简便、准确、定量结果与进样量重复性无关(在色谱柱不超载的范围内)、把持条件略有变动时对结果影响较小.缺点是:必需所有组分在一个分析周期内都流超卓谱柱, 而且检测器对它们都发生信号.不适于微量杂质的含量测定.二、外标法用待测组分的纯品作对比物质, 以对比物质和样品中待测组分的响应信号相比力进行定量的方法称为外标法.此法可分为工作曲线法及外标一点法等.工作曲线法是用对比物质配制一系列浓度的对比品溶液确定工作曲线, 求出斜率、截距.在完全相同的条件下, 准确进样与对比品溶液相同体积的样品溶液, 根据待测组分的信号, 从标准曲线上查出其浓度, 或用回归方程计算, 工作曲线法也可以用外标二点法取代.通常截距应为零, 若不即是零说明存在系统误差.工作曲线的截距为零时, 可用外标一点法(直接比力法)定量.外标一点法是用一种浓度的对比品溶液比较测定样品溶液中i组分的含量.将对比品溶液与样品溶液在相同条件下屡次进样, 测得峰面积的平均值, 用下式计算样品中i组分的量:W=A(W)/(A)(7.36) 式中W与A分别代表在样品溶液进样体积中所含i组分的重量及相应的峰面积.(W)及(A)分别代表在对比品溶液进样体积中含纯品i组分的重量及相应峰面积.外标法方法简便, 不需用校正因子, 不论样品中其他组分是否出峰, 均可看待测组分定量.但此法的准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响.另外, 为了降低外标一点法的实验误差, 应尽量使配制的对比品溶液的浓度与样品中组分的浓度相近.三、内标法选择样品中不含有的纯物质作为对比物质加入待测样品溶液中, 以待测组分和对比物质的响应信号比较, 测定待测组分含量的方法称为内标法.“内标”的由来是因为标准(对比)物质加入到样品中, 有别于外标法.该对比物质称为内标物.在一个分析周期内不是所有组分都能流超卓谱柱(如有难气化组分), 或检测器不能对每个组分都发生信号, 或只需测定混合物中某几个组分的含量时, 可采纳内标法.准确称量W克样品, 再准确称量W克内标物, 加入至样品中, 混匀, 进样.丈量待测组分i的峰面积A及内标物的峰面积A, 则i组分在W克样品中所含的重量W, 与内标物的重量W, 有下述关系:(7.37) 待测组分i在样品中的百分含量C%为:(7.38)对内标物的要求;①内标物是原样品中不含有的组分, 否则会使峰重叠而无法准确丈量内标物的峰面积;②内标物的保管时间应与待测组分相近, 但彼此能完全分离(R≥1.5);③内标物必需是纯度合乎要求的纯物质.内标法的优点是:①在进样量不超限(色谱柱不超载)的范围内, 定量结果与进样量的重复性无关.②只要被测组分及内标物出峰, 且分离度合乎要求, 就可定量, 与其他组分是否出峰无关.③很适用于测定药物中微量有效成份或杂质的含量.由于杂质(或微量组分)与主要成份含量相差悬殊, 无法用归一化法测定含量, 用内标法则很方便.加一个与杂质量相当的内标物.加年夜进样量突出杂质峰, 测定杂质峰与内标峰面积之比, 即可求出杂质含量.但样品配制比力麻烦和内标物不容易找寻是其缺点.。
色谱分析中归一化法、外标法、内标法的区别
色谱分析中面积归一化法、外标法、内标法适用范围及优缺点简介在色谱分析中,即我们常用的高效液相色谱分析(HPLC)和气相色谱分析(GC)分析中,进行分析时,通常采用三种方法:面积归一化法、外标法、内标法。
这三种方法的适用范围及各自的优缺点是什么呢?在这里简单做一介绍。
1、归一化法。
即在一定分析条件下,样品经过直接溶解,过滤等操作以后,直接进分析仪器检测,得到色谱图。
通常用于粗略检查样品中的各出峰成分含量,用于定性和粗略的定量。
优点:与进样量准确度无关、与仪器和分析条件有关。
缺点:a.在此条件之下,所有有效组分必须出峰,且所有组分必须在一个分析周期内流出色谱峰;b.定量计算必须先知道各成分的校正因子,校正因子的求出较麻烦。
2、易挥发性的油脂类化合物和混合性气体、液体,可用GC归一化法进行定量检测。
例如食用油里面各成分的含量测定。
2、外标法。
用待测组分的纯品作为对照物质,以对照物质和样品中待测组分的响应信号(即峰面积大小)相比较进行定量的方法。
优点:简便;只关注待测成分出峰,不需要所有成分出峰。
缺点:a.必须有被测组分的纯品作为标准对照物;b.此方法准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。
3、内标法。
选择样品中不含有的纯物质作为内标物加入待测样品中,以待测组分和内标物的响应信号(即峰面积大小)对比,对待测组分定量的方法。
优点:a.是一种比较准确的定量方法;b.定量结果与进样量重复性无关(在色谱柱不超载范围内);c.只需要内标物与被测物出峰,达到一定的分离度即可;d.常用于样品的G C定量检测以及微量成分含量检测;缺点:配置较麻烦;内标物需要跟待测组分在同样条件下出峰,且分离度较好,所以选择合适的内标物比较困难。
内标法和外标法的异同
内标法和外标法的异同
内标法和外标法都是色谱分析中的一种定量分析方法,它们的主要区别如下:
- 内标法是将一种已知浓度的标准物质加入到待测样品中,然后通过比较标准物质和待测物质的峰面积或峰高来计算待测物质的浓度。
内标法的优点是准确度高,缺点是操作较为繁琐,需要额外的标准物质。
- 外标法是将待测样品与一种已知浓度的标准物质进行对比,通过比较两者的峰面积或峰高来计算待测物质的浓度。
外标法的优点是操作简单,不需要额外的标准物质,缺点是准确度相对较低。
在实际应用中,选择内标法还是外标法取决于待测物质的性质、样品的前处理方法、色谱柱的性能等因素。
一般来说,对于较为复杂的样品,内标法更为准确,而对于简单的样品,外标法更为方便。
外标法和内标法
外标法和内标法
外标法和内标法是两种重要的读写技术。
外标法是指通过标记(标示)来识别文件内容的技术。
它通常使用一些特定的标志来确定文件的特性,比如字符集大小,文件编码,数据表对齐,数据类型,字段长度等。
外标法在文件分析、文件分割和其他程序中非常有用。
内标法是指在文件中直接使用标示符来标记文件内容的技术。
它通常使用一些特定的符号,比如字符,字符列表,字符串,数字,数字等来帮助识别信息。
此外,内标法还可以使用转义字符,如反斜杠,分号等,用于指定文件的特殊含义。
与外标法相比,内标法更加灵活,能够提供更丰富的信息。
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色谱分析中归一化法、外标法、内标法的区别,十六变卦法
色谱分析中面积归一化法、外标法、内标法适用范围及优缺点简介在色谱分析中,即我们常用的高效液相色谱分析(HPLC)和气相色谱分析(GC)分析中,进行分析时,通常采用三种方法:面积归一化法、外标法、内标法。
这三种方法的适用范围及各自的优缺点是什么呢?在这里简单做一介绍。
1、归一化法。
即在一定分析条件下,样品经过直接溶解,过滤等操作以后,直接进分析仪器检测,得到色谱图。
通常用于粗略检查样品中的各出峰成分含量,用于定性和粗略的定量。
优点:与进样量准确度无关、与仪器和分析条件有关。
缺点:a.在此条件之下,所有有效组分必须出峰,且所有组分必须在一个分析周期内流出色谱峰;b.定量计算必须先知道各成分的校正因子,校正因子的求出较麻烦。
2、易挥发性的油脂类化合物和混合性气体、液体,可用GC归一化法进行定量检测。
例如食用油里面各成分的含量测定。
2、外标法。
用待测组分的纯品作为对照物质,以对照物质和样品中待测组分的响应信号(即峰面积大小)相比较进行定量的方法。
优点:简便;只关注待测成分出峰,不需要所有成分出峰。
缺点:a.必须有被测组分的纯品作为标准对照物;b.此方法准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。
3、内标法。
选择样品中不含有的纯物质作为内标物加入待测样品中,以待测组分和内标物的响应信号(即峰面积大小)对比,对待测组分定量的方法。
优点:a.是一种比较准确的定量方法;b.定量结果与进样量重复性无关(在色谱柱不超载范围内);c.只需要内标物与被测物出峰,达到一定的分离度即可;d.常用于样品的GC定量检测以及微量成分含量检测;缺点:配置较麻烦;内标物需要跟待测组分在同样条件下出峰,且分离度较好,所以选择合适的内标物比较困难。
十六变卦法十六变卦由先天八卦与后天洛书配合而成八宫次序,而每一宫又按照十二消息往返变化,是最为完备的阴阳卦气流变方法。
其前后左右一共交荡了四回,符合天四变、地四变,人四变、鬼四变的四四十六变卦规则,实是理论至宝,然而明白此理者少之又少,实为遗憾。
色谱分析中归一化法、外标法、内标法的区别
色谱分析中面积归一化法、外标法、内标法适用范围及优缺点简介(一)在色谱分析中,即我们常用的高效液相色谱分析(HPLC)和气相色谱分析(GC)分析中,进行分析时,通常采用三种方法:面积归一化法、外标法、内标法。
这三种方法的适用范围及各自的优缺点是什么呢?在这里简单做一介绍。
1、归一化法。
即在一定分析条件下,样品经过直接溶解,过滤等操作以后,直接进分析仪器检测,得到色谱图。
通常用于粗略检查样品中的各出峰成分含量,用于定性和粗略的定量。
优点:与进样量准确度无关、与仪器和分析条件有关。
缺点:a.在此条件之下,所有有效组分必须出峰,且所有组分必须在一个分析周期内流出色谱峰;b.定量计算必须先知道各成分的校正因子,校正因子的求出较麻烦。
2、易挥发性的油脂类化合物和混合性气体、液体,可用GC 归一化法进行定量检测。
例如食用油里面各成分的含量测定。
2、外标法。
用待测组分的纯品作为对照物质,以对照物质和样品中待测组分的响应信号(即峰面积大小)相比较进行定量的方法。
优点:简便;只关注待测成分出峰,不需要所有成分出峰。
缺点:a.必须有被测组分的纯品作为对照物;b.此方法准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。
3、内标法。
选择样品中不含有的纯物质作为内标物加入待测样品中,以待测组分和内标物的响应信号(即峰面积大小)对比,对待测组分定量的方法。
优点:a.是一种比较准确的定量方法;b.定量结果与进样量重复性无关(在色谱柱不超载范围内);c.只需要内标物与被测物出峰,达到一定的分离度即可;d.常用于样品的GC定量检测以及微量成分含量检测;缺点:配置较麻烦;内标物需要跟待测组分在同样条件下出峰,且分离度较好,所以选择合适的内标物比较困难。
归一化法、外标法、内标法的区别文件.doc
色谱定量方法一、归一化法由于组分的量与其峰面积成正比,如果样品中所有组分都能产生信号,得到相应的色谱峰,那么可以用如下归一化公式计算各组分的含量。
(7.34)若样品中各组分的校正因子相近,可将校正因子消去,直接用峰面积归一化进行计算。
中国药典用不加校正因子的面积归一化法测定药物中各杂质及杂质的总量限度。
(7.35)归一化法的优点是:简便、准确、定量结果与进样量重复性无关(在色谱柱不超载的范围内)、操作条件略有变化时对结果影响较小。
缺点是:必须所有组分在一个分析周期内都流出色谱柱,而且检测器对它们都产生信号。
不适于微量杂质的含量测定。
二、外标法用待测组分的纯品作对照物质,以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。
此法可分为工作曲线法及外标一点法等。
工作曲线法是用对照物质配制一系列浓度的对照品溶液确定工作曲线,求出斜率、截距。
在完全相同的条件下,准确进样与对照品溶液相同体积的样品溶液,根据待测组分的信号,从标准曲线上查出其浓度,或用回归方程计算,工作曲线法也可以用外标二点法代替。
通常截距应为零,若不等于零说明存在系统误差。
工作曲线的截距为零时,可用外标一点法(直接比较法)定量。
外标一点法是用一种浓度的对照品溶液对比测定样品溶液中i 组分的含量。
将对照品溶液与样品溶液在相同条件下多次进样,测得峰面积的平均值,用下式计算样品中i 组分的量:W =A (W ) /(A ) (7.36)式中W 与 A 分别代表在样品溶液进样体积中所含i 组分的重量及相应的峰面积。
(W ) 及(A ) 分别代表在对照品溶液进样体积中含纯品i 组分的重量及相应峰面积。
外标法方法简便,不需用校正因子,不论样品中其他组分是否出峰,均可对待测组分定量。
但此法的准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。
此外,为了降低外标一点法的实验误差,应尽量使配制的对照品溶液的浓度与样品中组分的浓度相近。
三、内标法选择样品中不含有的纯物质作为对照物质加入待测样品溶液中,以待测组分和对照物质的响应信号对比,测定待测组分含量的方法称为内标法。
外标法和内标法
外标法和内标法
外标法和内标法是两种不同的标准化方法,用于分析和测量样品中的化合物。
这两种方法在分析化学中非常常见,它们都有自己的优点和缺点,因此在选择使用哪种方法时需要考虑实际情况。
外标法是一种常见的标准化方法,它使用已知浓度的标准溶液来测量未知样品中的化合物浓度。
这种方法的优点是简单易行,适用于大多数化合物。
但是,外标法的缺点是需要准确制备标准溶液,这可能会导致误差。
此外,外标法还需要进行多次测量,以确保结果的准确性。
内标法是另一种标准化方法,它使用已知浓度的内标化合物来测量未知样品中的化合物浓度。
内标化合物是与待测化合物具有相似物理和化学性质的化合物。
内标法的优点是可以减少误差,因为内标化合物与待测化合物的性质非常相似。
此外,内标法只需要进行一次测量,因此可以节省时间和成本。
然而,内标法也有一些缺点。
首先,需要选择合适的内标化合物,这可能需要进行一些试验和优化。
其次,内标法可能不适用于某些化合物,因为找不到与待测化合物相似的内标化合物。
在选择使用外标法还是内标法时,需要考虑实际情况。
如果样品中的化合物已知,且可以准确制备标准溶液,则外标法可能是更好的选择。
如果样品中的化合物未知,或者需要减少误差,则内标法可
能是更好的选择。
外标法和内标法都是常见的标准化方法,它们都有自己的优点和缺点。
在选择使用哪种方法时,需要考虑实际情况,并根据需要进行优化和改进。
归一化法、外标法、内标法的区别
色谱定量方法一、归一化法由于组分的量与其峰面积成正比,如果样品中所有组分都能产生信号,得到相应的色谱峰,那么可以用如下归一化公式计算各组分的含量。
(7.34)若样品中各组分的校正因子相近,可将校正因子消去,直接用峰面积归一化进行计算。
中国药典用不加校正因子的面积归一化法测定药物中各杂质及杂质的总量限度。
(7.35)归一化法的优点是:简便、准确、定量结果与进样量重复性无关(在色谱柱不超载的范围内)、操作条件略有变化时对结果影响较小。
缺点是:必须所有组分在一个分析周期内都流出色谱柱,而且检测器对它们都产生信号。
不适于微量杂质的含量测定。
二、外标法用待测组分的纯品作对照物质,以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。
此法可分为工作曲线法及外标一点法等。
工作曲线法是用对照物质配制一系列浓度的对照品溶液确定工作曲线,求出斜率、截距。
在完全相同的条件下,准确进样与对照品溶液相同体积的样品溶液,根据待测组分的信号,从标准曲线上查出其浓度,或用回归方程计算,工作曲线法也可以用外标二点法代替。
通常截距应为零,若不等于零说明存在系统误差。
工作曲线的截距为零时,可用外标一点法(直接比较法)定量。
外标一点法是用一种浓度的对照品溶液对比测定样品溶液中i组分的含量。
将对照品溶液与样品溶液在相同条件下多次进样,测得峰面积的平均值,用下式计算样品中i组分的量:W=A(W)/(A)(7.36)式中W与A分别代表在样品溶液进样体积中所含i 组分的重量及相应的峰面积。
(W)及(A)分别代表在对照品溶液进样体积中含纯品i组分的重量及相应峰面积。
外标法方法简便,不需用校正因子,不论样品中其他组分是否出峰,均可对待测组分定量。
但此法的准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。
此外,为了降低外标一点法的实验误差,应尽量使配制的对照品溶液的浓度与样品中组分的浓度相近。
三、内标法选择样品中不含有的纯物质作为对照物质加入待测样品溶液中,以待测组分和对照物质的响应信号对比,测定待测组分含量的方法称为内标法。
内标法与外标法
内标法与外标法一、内标法什么叫内标法?怎样选择内标物?内标法是一种间接或相对的校准方法。
在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。
内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。
使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分离,又不受试样中其它组分峰的干扰,只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值,即可求出待测组分在样品中的百分含量。
采用内标法定量时,内标物的选择是一项十分重要的工作。
理想地说,内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物,这样它能以准确、已知的量加到样品中去,它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征,最好是被分析物质的一个同系物。
当然,在色谱分析条什下,内标物必须能与样品中各组分充分分离。
需要指出的是,在少数情况下,分析人员可能比较关心化台物在一个复杂过程中所得到的回收率,此时,他可以使用一种在这种过程中很容易被完全回收的化台物作内标,来测定感兴趣化合物的百分回收率,而不必遵循以上所说的选择原则。
在使用内标法定量时,有哪些因素会影响内标和被测组分的峰高或峰面积的比值?影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。
由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。
化学方面的因素包括:1、内标物在样品里混合不好;2、内标物和样品组分之间发生反应,3、内标物纯度可变等。
对于一个比较成熟的方法来说,色谱方面的问题发生的可能性更大一些,色谱上常见的一些问题(如渗漏)对绝对面积的影响比较大,对面积比的影响则要小一些,但如果绝对面积的变化已大到足以使面积比发生显著变化的程度,那么一定有某个重要的色谱问题存在,比如进样量改变太大,样品组分浓度和内标浓度之间有很大的差别,检测器非线性等。
外标法和内标法的异同点
外标法和内标法的异同点
一、外标法与内标法的定义
外标法:是指在样本中放置一定数量的特殊标记,这些标记外部与样本无关,可以用来作为特征标记来识别样本,可以提高识别的精确度。
内标法:指样本本身制作成特定的标记,作为识别样本的特征,可以提高识别的精确度。
二、外标法与内标法的异同
1、不同点:
(1)外标法是指在样本外部放置的特殊标记,而内标法是指样本本身制作的特定标记。
(2)外标法可以选择不同形状的特殊标记,例如标签、条形码等,而内标法只能按照样本的特性来制作特定的标记。
(3)外标法制作方便,只需要将特殊标记置放在样本上就可以识别,而内标法需要样本本身有特殊性能的材料才可以制作出特定的标记。
2、相同点:
(1)外标法和内标法都可以提高识别精确度,两者的作用都是用来标记样本,确保样本的准确性。
(2)外标法和内标法都可以在样本中放置一定数量的特殊标记,作为特征标记来识别样本。
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归一化法外标法内标法的区别
色谱定量方法一、归一化法由于组分的量与其峰面积成正比,如果样品中所有组分都能产生信号,得到相应的色谱峰,那么可以用如下归一化公式计算各组分的含量。
若样品中各组分的校正因子相近,可将校正因子消去,直接用峰面积归一化进行计算。
中国药典用不加校正因子的面积归一化法测定药物中各杂质及杂质的总量限度。
归一化法的优点是:简便、准确、定量结果与进样量重复性无关(在色谱柱不超载的范围内)、操作条件略有变化时对结果影响较小。
缺点是:必须所有组分在一个分析周期内都流出色谱柱,而且检测器对它们都产生信号。
不适于微量杂质的含量测定。
二、外标法用待测组分的纯品作对照物质,以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。
此法可分为工作曲线法及外标一点法等。
工作曲线法是用对照物质配制一系列浓度的对照品溶液确定工作曲线,求出斜率、截距。
在完全相同的条件下,准确进样与对照品溶液相同体积的样品溶液,根据待测组分的信号,从标准曲线上查出其浓度,或用回归方程计算,工作曲线法也可以用外标二点法代替。
通常截距应为零,若不等于零说明存在系统误差。
工作曲线的截距为零时,可用外标一点法(直接比较法)定量。
外标一点法是用一种浓度的对照品溶液对比测定样品溶液中i组分的含量。
将对照品溶液与样品溶液在相同条件下多次进样,测得峰面积的平均值,用下式计算样品中i组分的量:W=A(W)/(A)式中W与A分别代表在样品溶液进样体积中所含i组分的重量及相应的峰面积。
(W)及(A)分别代表在对照品溶液进样体积中含纯品i组分的重量及相应峰面积。
外标法方法简便,不需用校正因子,不论样品中其他组分是否出峰,均可对待测组分定量。
但此法的准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。
此外,为了降低外标一点法的实验误差,应尽量使配制的对照品溶液的浓度与样品中组分的浓度相近。
三、内标法选择样品中不含有的纯物质作为对照物质加入待测样品溶液中,以待测组分和对照物质的响应信号对比,测定待测组分含量的方法称为内标法。
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内标法简介内标法 internal standard method 是色谱分析中一种比较准确的定量方法,尤其在没有标准物对照时,此方法更显其优越性。
内标法是将一定重量的纯物质作为内标物(参见内标物条)加到一定量的被分析样品混合物中,然后对含有内标物的样品进行色谱分析,分别测定内标物和待测组分的峰面积(或峰高)及相对校正因子,按下列公式和方法即可求出被测组分在样品中的百分含量:按各品种项下的规定,精密称(量)取对照品和内标物,分别配成溶液,精密量取各溶液,配成校正因子测定用的对照溶液。
取一定量进样,记录色谱图。
用含对照品和内标物的对照溶液所得色谱峰响应值,按下式算出校正因子(f):f= (As/ms)/(Ar/mr)其中As和Ar分别为内标物和对照品的峰面积或峰高,ms和mr分别为加入内标物和对照品的量。
再取各品种项下含有内标物的待测组分溶液进样,记录色谱图,再根据含内标物的待测组分溶液色谱峰响应值,计算含量(mi):m i=f×Ai/(As/ms)其中 Ai和As分别为供试品和内标物的峰面积或峰高,ms为加入内标物的量。
必要时,再根据稀释倍数、取样量和标示量折算成为标示量的百分含量,或根据稀释倍数和取样量折算成百分含量。
内标法是一种间接或相对的校准方法。
在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。
使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分离,又不受试样中其它组分峰的干扰,只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值,即可求出待测组分在样品中的百分含量。
采用内标法定量时,内标物的选择是一项十分重要的工作。
理想地说,内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物,这样它能以准确、已知的量加到样品中去,它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征,最好是被分析物质的一个同系物。
外标法与内标法的比较
外标法仪器分析常用的方法之一,是比较法的一种。
与内标法相比,外标法不是把标准物质加入到被测样品中,而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定,把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。
外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度,分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近,以利于定量分析的准确性。
外标法在操作和计算上可分为校正曲线法和用校正因子求算法。
校正曲线法是用已知不同含量的标样系列等量进样分析,然后做出响应信号与含量之间的关系曲线,也就是校正曲线。
定量分析样品时,在测校正曲线相同条件下进同等样量的等测样品,从色谱图上测出峰高或峰面积,在从校正曲线查出样品的含量。
校正因子求算法时将标样多次分析后得到的响应信号与其含量求出它的绝对校正因子,再根据公式求出待测样品中的含量。
内标法是将一定量的纯物质作内标物,加入到准确称量的试样中,根据被测试样和内标物的质量比及其相应的色谱峰面积之比,来计算被测组分的含量。
选择内标物有4个要求:1.内标物应是该试样中不存在的纯物质;2.它必须完全溶于试样中,并与试样中各组分的色谱峰能完全分离;3.加入内标物的量应接近于被测组分;4.色谱峰的位置应与被测组分的色谱峰的位置相近,或在几个被测组分色谱峰中间。
内标法的优点是测定的结果较为准确,由于通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的,因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。
内标法的缺点是操作程序较为麻烦,每次分析时内标物和试样都要准确称量,有时寻找合适的内标物也有困难。
外标法简便,但进样量要求十分准确,要严格控制在与标准物相同的操作条件下进行,否则造成分析误差,得不到准确的测量结果。
内标与外标都是定量的一种方法而已,至于哪一种方法好与不好不能一概而论,做不同的分析,面对着不同的要求,再加上分析成本分析效率等等问题,我想简单而有效进行定量分析来满足要求才是最重要的。
1、以前做过很多医药、农药中间体的芳香族卤代化合物的常量定量分析,没有自动进样器,用外标法定量,确实重现性与稳定性非常差,结果经常受到搞合成同事的质疑。
内标法和外标法的优缺点
内标法和外标法的优缺点一、内标法什么叫内标法?怎样选择内标物?内标法是一种间接或相对的校准方法。
在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。
二、内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。
使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分离,又不受试样中其它组分峰的干扰,只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值,即可求出待测组分在样品中的百分含量。
采用内标法定量时,内标物的选择是一项十分重要的工作。
理想地说,内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物,这样它能以准确、已知的量加到样品中去,它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征,最好是被分析物质的一个同系物。
当然,在色谱分析条什下,内标物必须能与样品中各组分充分分离。
需要指出的是,在少数情况下,分析人员可能比较关心化台物在一个复杂过程中所得到的回收率,此时,他可以使用一种在这种过程中很容易被完全回收的化台物作内标,来测定感兴趣化合物的百分回收率,而不必遵循以上所说的选择原则。
在使用内标法定量时,有哪些因素会影响内标和被测组分的峰高或峰面积的比值?影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。
由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。
化学方面的因素包括:1、内标物在样品里混合不好;2、内标物和样品组分之间发生反应,3、内标物纯度可变等。
对于一个比较成熟的方法来说,色谱方面的问题发生的可能性更大一些,色谱上常见的一些问题(如渗漏)对绝对面积的影响比较大,对面积比的影响则要小一些,但如果绝对面积的变化已大到足以使面积比发生显著变化的程度,那么一定有某个重要的色谱问题存在,比如进样量改变太大,样品组分浓度和内标浓度之间有很大的差别,检测器非线性等。
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1.内标法:是一种间接或相对的校准方法。
在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。
内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。
使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分离,又不受试样中其它组分峰的干扰,只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值,即可求出待测组分在样品中的百分含量。
2.外标法:用待测组分的纯品作对照物质,以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。
此法可分为工作曲线法及外标一点法等。
工作曲线法是用对照物质配制一系列浓度的对照品溶液确定工作曲线,求出斜率、截距。
在完全相同的条件下,准确进样与对照品溶液相同体积的样品溶液,根据待测组分的信号,从标准曲线上查出其浓度,或用回归方程计算,工作曲线法也可以用外标二点法代替。
通常截距应为零,若不等于零说明存在系统误差。
工作曲线的截距为零时,可用外标一点法(直接比较法)定量。
外标一点法是用一种浓度的对照品溶液对比测定样品溶液中i组分的含量。
将对照品溶液与样品溶液在相同条件下多次进样,测得峰面积的平均值,用下式计算样品中i组分的量:W=A(W)/(A) 式中W与A分别代表在样品溶液进样体积中所含i组分的重量及相应的峰面积。
(W)及(A)分别代表在对照品溶液进样体积中含纯品i组分的重量及相应峰面积。
外标法方法简便,不需用校正因子,不论样品中其他组分是否出峰,均可对待测组分定量。
但此法的准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。
此外,为了降低外标一点法的实验误差,应尽量使配制的对照品溶液的浓度与样品中组分的浓度相近。
外标法 external standard method 色谱分析中的一种定量方法,它不是把标准物质加入到被测样品中,而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定,把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。
外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度,分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近,以利于定量分析的准确性。
简单的说:内标法就是用在样品中定量加入你要分析的物质,通过测得的实际样品量和加入样品量的比值来定量所要分析的样品含量。
内标法主要优点是简单,快速。
缺点是没有标准曲线法定量精确。