肺结核诊断新技术
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
• 1.2 直接显微镜检技术 (MODS) • 工作原理依据于 MTB 在液体培养基中生长会出现特征性的索状结构，
该结构可以通过倒置显微镜观察到。 检测呼吸道标本中是否存在 MTB 的敏感度为 97.5%， 特异度为 94.4%， 出现阳性结果的中位 时间约为 8 d 该方法无需昂贵的设备，简单，相对快速。
结核病诊断新技术及其评价
内容
一、微生物学检测 二、生化检测 三、细胞免疫学检测 四、分子生物学检测
呼吸医生的尴尬？
• 先抗炎？？？
你懂的！
TB 的诊断有时有多难！病原学检测是诊断 TB 最重要的依据，
但据 2013 年 WHO 统计， 仅有 58% 的 TB 患者有病原学依据。
• 再抗痨？？？
• 实在不行，上化疗？？？？
二、生化检测
• TB 的生化检测主要包括腺苷脱氨酶 (ADA)、 乳酸脱氢酶 (LDH)、 血管紧张 素转化酶 (ACE) 等酶学检测。此类方法简单快速，适用于 TB 早期诊断及鉴 别诊断，但由于缺少结核特异性的酶标而无确诊价值。
• 2.1 ADA • ADA 是嘌呤核苷代谢中重要的来自百度文库。胸 (腹) 腔积液 ADA 检测对结核性胸 (腹)
二、生化检测
• 2.2 LDH • 是一种糖酵解酶，几乎存在于机体所有组织细胞的胞质内。对 TB 的
诊断来说， LDH 可用于区别渗出性积液与漏出性积液，胸 (腹) 腔积 液 LDH 与血清 LDH 比值 ≥0.6， LDH 浓度 >200U/L 倾向渗出液。 结核性胸 (腹) 腔积液的 LDH 浓度一般 >200U/L， 与癌性胸 (腹) 腔 积液 LDH 浓度变化无特征性差异。
膜炎鉴别诊断有重要意义，胸 (腹) 腔积液 ADA 浓度以 45U/L 为界，结核性 大多超过此值，特异度及敏感度超过 80%。 胸 (腹) 腔积液 ADA 与血清 ADA 比值 ≥1 更倾向结核性积液。而对于癌性及非特异性积液，其比值一般 <1。 • ADA 对于活动性 TB 的敏感度为 100%， 特异度为 97%。 脑脊液中 ADA 活 性检测对于 TB 的诊断也有一定价值，尤其应用于结核性脑膜炎与隐球菌脑 膜炎、病毒性脑膜炎的鉴别。结核性脑膜炎脑脊液中 ADA 活性增高，通常 >8U/L，而后两者一般正常， ADA 浓度 ≤8U/L。 结核性脑膜炎 表明，将 ADA 浓度 >8U/L 作为结核性脑膜炎诊断的阈值时，其诊断的总敏感度 <59%， 特异度 >96%。
• 2.3 ACE • 为二肽羧肽水解酶，又名激肽酶 I， 存在于肺、肾、脑、小肠、胎盘
等组织的血管内皮细胞或上皮细胞及血浆。对 TB 的诊断来说，血清 ACE 的检测主要用于 TB 与结节病的鉴别，后者血清 ACE 浓度升高 多见。结核性胸腔积液 ACE 浓度一般不升高，胸腔积液 ACE 与血 清 ACE 比值 ≥1 更倾向结核性积液，而恶性积液的比值多 <1。
• 3.1 TST • 即 PPD 皮试或皮内 Mantoux 试验。 TST 从 1890 年发明以来沿用至
今。由于 TST 存在假阳性结果和假阳性结果，影响了其使用价值。 假阳性结果大部分是由于结核菌素抗原与其他分枝杆菌有交叉抗原所 致。这种交叉抗原反应来自潜在的非 MTB 感染或接种卡介苗引起的 反应。假阴性结果有很多潜在的原因，迟发超敏反应低下常见于免疫 受损者，包括人免疫缺陷病毒 (HIV) 感染，长期使用激素等情况。阴 性结果不能排除 MTB 感染。由于不同地区的感染背景差异较大以及 没有潜伏性结核感染 (LTBI) 的检测金标准，导致 TST 的敏感度和特 异度不能准确评价。
14.12.2019
一 、微生物学检测
• 包括涂片染色镜检、结核分枝杆菌 (MTB) 分离培养、 MTB 药敏和菌 种鉴定等。
• 染色涂片法是临床上最便捷快速的诊断方法，但敏感度偏低，发达国 家可检出 50% 的活动性肺结核，我国检出率一般约为 30%， 且无法 区别非 MTB( Mycobacterium tuberculosis )。
• MTB 分离培养是确诊 TB 最重要的依据，不仅能取得病原学结果， 还能进一步进行药敏检测，指导治疗。
• 目前常用的细菌培养基包括 Lowenstein-Jensen 固相培养基 (L-J 法) 和 Middlebrook 7H9 7H11 液体培养基。固相培养基价格低，但耗时 长，需要 4~8 周取得结果，加上菌种鉴定的时间耗时更长。基于 BACTEC MGIT 960、 BacT/Alert 3D 系统的液体培养基检测速度有 明显提高 (1~4 周)， 但费用较高。
前言
• 早期准确诊断是结核病 (TB) 患者得以及时治疗的 关键。
• 目前的 TB 诊断水平仍然薄弱。据世界卫生组织 (WHO) 估算， 2012 年的 860 万新发 TB 患者中， 仅登记了 570 万，还有 217.5 万 (25.3%) 未被发 现 (漏诊)。
• 提高诊断技术则是发现患者，减少误诊、漏诊的 核心。
三、细胞免疫学检测
• MTB 为胞内致病菌，因此普遍认为 TB 的发病过程中细胞免疫占主导 地位。细胞免疫学诊断主要包括结核菌素皮肤试验 (tuberculin skin test， TST) 和 γ- 干扰素释放试验 (interferon gamma releaseassay， IGRA)， 而结合上述两种方法优点的改良结核菌素皮肤试验近年来发 展很快。
一 、微生物学检测
• 1.1 MTB 快速培养法 • BACTEC MGIT 960 系统采用荧光增强原理，在培养管底部包埋对氧
气浓度高度敏感的指示剂，通过检测氧气浓度变化以监测培养管内 MTB 的生长状态。阳性标本检出时间相对较短，平均为 9 d， 后续 菌种鉴定及药敏试验时间平均为 4 d。 BACTEC MGIT 960 系统为目 前国际通行培养标准，培养阳性率较固体培养法高出 10% 左右，检 测界限 <10 个菌落形成单位 (CFU)/mL。 BacT/Alert 3D 系统采用比 色法原理，通过监测预处理标本中产生 CO2 与标本瓶中初始的 CO2 相比较，判断是否存在 MTB 生长。同时可以进行药敏检测。理论上 培养速度较 L-J 法和 BACTEC MGIT 960 系统更快 (6~22 d)。
该结构可以通过倒置显微镜观察到。 检测呼吸道标本中是否存在 MTB 的敏感度为 97.5%， 特异度为 94.4%， 出现阳性结果的中位 时间约为 8 d 该方法无需昂贵的设备，简单，相对快速。
结核病诊断新技术及其评价
内容
一、微生物学检测 二、生化检测 三、细胞免疫学检测 四、分子生物学检测
呼吸医生的尴尬？
• 先抗炎？？？
你懂的！
TB 的诊断有时有多难！病原学检测是诊断 TB 最重要的依据，
但据 2013 年 WHO 统计， 仅有 58% 的 TB 患者有病原学依据。
• 再抗痨？？？
• 实在不行，上化疗？？？？
二、生化检测
• TB 的生化检测主要包括腺苷脱氨酶 (ADA)、 乳酸脱氢酶 (LDH)、 血管紧张 素转化酶 (ACE) 等酶学检测。此类方法简单快速，适用于 TB 早期诊断及鉴 别诊断，但由于缺少结核特异性的酶标而无确诊价值。
• 2.1 ADA • ADA 是嘌呤核苷代谢中重要的来自百度文库。胸 (腹) 腔积液 ADA 检测对结核性胸 (腹)
二、生化检测
• 2.2 LDH • 是一种糖酵解酶，几乎存在于机体所有组织细胞的胞质内。对 TB 的
诊断来说， LDH 可用于区别渗出性积液与漏出性积液，胸 (腹) 腔积 液 LDH 与血清 LDH 比值 ≥0.6， LDH 浓度 >200U/L 倾向渗出液。 结核性胸 (腹) 腔积液的 LDH 浓度一般 >200U/L， 与癌性胸 (腹) 腔 积液 LDH 浓度变化无特征性差异。
膜炎鉴别诊断有重要意义，胸 (腹) 腔积液 ADA 浓度以 45U/L 为界，结核性 大多超过此值，特异度及敏感度超过 80%。 胸 (腹) 腔积液 ADA 与血清 ADA 比值 ≥1 更倾向结核性积液。而对于癌性及非特异性积液，其比值一般 <1。 • ADA 对于活动性 TB 的敏感度为 100%， 特异度为 97%。 脑脊液中 ADA 活 性检测对于 TB 的诊断也有一定价值，尤其应用于结核性脑膜炎与隐球菌脑 膜炎、病毒性脑膜炎的鉴别。结核性脑膜炎脑脊液中 ADA 活性增高，通常 >8U/L，而后两者一般正常， ADA 浓度 ≤8U/L。 结核性脑膜炎 表明，将 ADA 浓度 >8U/L 作为结核性脑膜炎诊断的阈值时，其诊断的总敏感度 <59%， 特异度 >96%。
• 2.3 ACE • 为二肽羧肽水解酶，又名激肽酶 I， 存在于肺、肾、脑、小肠、胎盘
等组织的血管内皮细胞或上皮细胞及血浆。对 TB 的诊断来说，血清 ACE 的检测主要用于 TB 与结节病的鉴别，后者血清 ACE 浓度升高 多见。结核性胸腔积液 ACE 浓度一般不升高，胸腔积液 ACE 与血 清 ACE 比值 ≥1 更倾向结核性积液，而恶性积液的比值多 <1。
• 3.1 TST • 即 PPD 皮试或皮内 Mantoux 试验。 TST 从 1890 年发明以来沿用至
今。由于 TST 存在假阳性结果和假阳性结果，影响了其使用价值。 假阳性结果大部分是由于结核菌素抗原与其他分枝杆菌有交叉抗原所 致。这种交叉抗原反应来自潜在的非 MTB 感染或接种卡介苗引起的 反应。假阴性结果有很多潜在的原因，迟发超敏反应低下常见于免疫 受损者，包括人免疫缺陷病毒 (HIV) 感染，长期使用激素等情况。阴 性结果不能排除 MTB 感染。由于不同地区的感染背景差异较大以及 没有潜伏性结核感染 (LTBI) 的检测金标准，导致 TST 的敏感度和特 异度不能准确评价。
14.12.2019
一 、微生物学检测
• 包括涂片染色镜检、结核分枝杆菌 (MTB) 分离培养、 MTB 药敏和菌 种鉴定等。
• 染色涂片法是临床上最便捷快速的诊断方法，但敏感度偏低，发达国 家可检出 50% 的活动性肺结核，我国检出率一般约为 30%， 且无法 区别非 MTB( Mycobacterium tuberculosis )。
• MTB 分离培养是确诊 TB 最重要的依据，不仅能取得病原学结果， 还能进一步进行药敏检测，指导治疗。
• 目前常用的细菌培养基包括 Lowenstein-Jensen 固相培养基 (L-J 法) 和 Middlebrook 7H9 7H11 液体培养基。固相培养基价格低，但耗时 长，需要 4~8 周取得结果，加上菌种鉴定的时间耗时更长。基于 BACTEC MGIT 960、 BacT/Alert 3D 系统的液体培养基检测速度有 明显提高 (1~4 周)， 但费用较高。
前言
• 早期准确诊断是结核病 (TB) 患者得以及时治疗的 关键。
• 目前的 TB 诊断水平仍然薄弱。据世界卫生组织 (WHO) 估算， 2012 年的 860 万新发 TB 患者中， 仅登记了 570 万，还有 217.5 万 (25.3%) 未被发 现 (漏诊)。
• 提高诊断技术则是发现患者，减少误诊、漏诊的 核心。
三、细胞免疫学检测
• MTB 为胞内致病菌，因此普遍认为 TB 的发病过程中细胞免疫占主导 地位。细胞免疫学诊断主要包括结核菌素皮肤试验 (tuberculin skin test， TST) 和 γ- 干扰素释放试验 (interferon gamma releaseassay， IGRA)， 而结合上述两种方法优点的改良结核菌素皮肤试验近年来发 展很快。
一 、微生物学检测
• 1.1 MTB 快速培养法 • BACTEC MGIT 960 系统采用荧光增强原理，在培养管底部包埋对氧
气浓度高度敏感的指示剂，通过检测氧气浓度变化以监测培养管内 MTB 的生长状态。阳性标本检出时间相对较短，平均为 9 d， 后续 菌种鉴定及药敏试验时间平均为 4 d。 BACTEC MGIT 960 系统为目 前国际通行培养标准，培养阳性率较固体培养法高出 10% 左右，检 测界限 <10 个菌落形成单位 (CFU)/mL。 BacT/Alert 3D 系统采用比 色法原理，通过监测预处理标本中产生 CO2 与标本瓶中初始的 CO2 相比较，判断是否存在 MTB 生长。同时可以进行药敏检测。理论上 培养速度较 L-J 法和 BACTEC MGIT 960 系统更快 (6~22 d)。