血培养01

血培养接收标准
• 实验室收到血培养后，应按以下步骤操作: • l.检查培养瓶确保它们被安全地放置。 • 2.用肉眼观查微生物生长的情况，注意血液层上面是否有
絮状沉淀、均匀的或表面下ห้องสมุดไป่ตู้混浊、溶血、液体培养基凝 固、有一层表面薄膜、产生气体、血层表面或深层有白色 颗粒等，如有上述情况产生提示有微生物生长。 • 3.检查瓶子上的标签，确认资料是否齐全，与申请单上的 患者资料是否一致。 • 4.保证获得适量的血液。 • 5.检查血液是否超过要求的基线。
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三、公司的血培养系统
• 公司的血培养系统是属于采用光电原理监
测的血培养系统。由血培养瓶及血培养仪 联合才能使用。 • 原理：本培养瓶含适合微生物生长的营养 物质和传感器，当培养瓶内有微生物生长 时，产生代谢气体CO2，作用于传感器，全 自动血培养系统通过检测传感器并根据比 色法制定培养瓶的阴阳性结果。
血培养
一、什么是血培养 二、血培养发展及方法 三、公司的血培养瓶 四、血培养的影响因素
一、什么是血培养
• 血培养是把穿刺获得的血液接种到一个或
多个培养瓶或培养管中，用来发现、识别 细菌或其它可培养分离的微生物（如大肠 杆菌、念珠菌属、霉菌属等），这些微生 物存在于血液中形成菌血症或真菌菌血症。 正常人的血液中是不存在以上微生物；
二血培养的发展
• 2、半自动放射性系统：半自动化血培养系统，由于是半
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自动而且带放射性所以它不再广泛用于常规血培养，但它 仍然普遍用于分枝杆菌的培养和监测 3、自动化血培养系统：70年代开始美、法等国就应用了 自动化培养系统，全自动血培养系统发展到现在也分三种： 1）检测培养基导电性和电压为基础的血培养系统；2）应 用感压原理的血培养系统；3）采用光电原理监测的血培 养系统； 自动化血培养系统与传统的方法相比大大提高了血培养中 的关键指标1）操作简单，减少污染；2）结果报告时间缩 短; 3)提高阳性检出率。
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二血培养的发展
• 1、手工血培养系统：近几十年来国内外都在不断优化手工培养，但
并没有太大的改变，除8O年代应用的溶解一离心系统、肉汤增菌瓶后 发展到双相培养瓶等以外近年未见更新系统的应用，仅见在脑心浸液 双相培养基基础上应用溶血剂的研究 。加入溶血剂皂素后．不仅分离 率有所提高．且避免了操作复杂、易污染的不足。 • 传统肉汤结果观察以混合物的浊度、微菌落的生长、溶血、颜色的改 变及气体的产生。在孵育12-24h后进行初步观察,头两天每天观察两 次,第3-7天则每天观察一次,传统血培养中为了尽早测得细菌的生长, 在初步检查时,进行接种培养,同时对肉汤培养物进行革兰染色。操作 烦琐出现结果慢为期缺点。 • 双相血培养基：设计了一种同时含有琼脂和肉汤的血培养瓶，相比传 统的手工血培养瓶，双相血培养瓶可以更好的培养需氧菌、兼性厌氧 菌和真菌；双相瓶使检测时间更加短，并且可以获得分离细菌的菌落， 但是商业双相系统会产生较高的污染率，而且不能很好的获得厌氧菌。 与传统肉汤血培养瓶相似，双相培养基应目测监测7天，
公司血培养的特点
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物质及生长因子非常丰富，达20多种从而适合各 种苛养菌的生长； 2、假阴性低，据大部分文献报道现有的血培养瓶 假阴性率在0.5~0.9%，其中60%以上都集中在真 菌和非发酵菌属，而我们公司对非发酵菌属及真 菌方面做了大量的工作； 3、阳性率高，我们公司的血培养瓶不仅营养非常 丰富，而且还对干扰阳性率的中和剂做了大量的 工作，采用联合中和的方法中和各种抗生素的干 扰从而提高了标本的阳性检出率； 4、阳性报告结果快，就目前的实验结果显示比梅 里埃相对的还快一些。
血培养仪报警后的处理
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表3.血培养阳性后根据革兰染色特点应传种培养基种类的建议 5~10%CO2孵育 厌氧气体孵育a 染色特点 血琼脂 巧克力琼脂 麦康凯或EMB 血琼脂 PEA或CAN 革兰阳性 球菌 X X X 杆菌 X X X 革兰阴性 球菌 X X X X 杆菌 X X X X X 真菌b X X 持续监测阳性， 革兰染色阴性c X X X a所有培养至少至48 h;EMB-伊红美蓝琼脂;PEA:苯乙基醇琼脂;CAN多粘菌素奈啶酮酸琼脂。 • b增加真菌培养基(如:沙保弱葡葡糖琼脂)和30°C培养，C接种硫羟乙酸盐肉 汤中.
血培养阳性结果的报告程序
• 血培养阳性结果十分重要，应立即口头报告给患
者的主治医生，报告的日期和时间以及接受报告 人的姓名应记录在患者的报告单上。应向临床医 师提供重要的信息，包括革兰染色的形态，血培 养阳性的数量和其它的鉴定资料，如革兰阳性球 菌疑为葡萄球菌。处埋报告之前，应回顾一下患 者近期标本的培养情况，这些结果有助于解释感 染微生物来源。口头报告后应立即进行书面初步 报告。除非初步报告有错误或新发现可改变患者 的治疗方案，否则不应更改初步报告的结果。
消毒
• 皮肤消毒严格按以下三步法进行: • 1、70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒钟以上。 • 2、用一根碘酊或碘伏棉签消毒皮肤(l%~2%碘酊30秒或10%碘伏消
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毒60秒),从穿刺点向外以1.5cm~2cm直径画圈进行消毒。 3、70%酒精脱碘。 严格执行三步消毒后，可行静脉穿刺采血。注意对碘过敏的患者，只 能用 70%酒精消毒，消毒60秒钟，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺 采血。 培养瓶消毒程序：培养瓶消毒程序严格按以下三步法进行: 1、用70%酒精或碘溶液 (不要使用碘)消毒血培养瓶橡皮塞子。 2、酒精作用待60秒。 3、在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面 剩余的酒精，然后注入血液。
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血培养标本的运送
• 要求： • 1. 采集后的血培养瓶应在1小时之内送往实验室。 • 2. 血培养瓶在接种前和接种后均不得冷藏或冷冻。
延迟血培养瓶放入全自动培养检测系统可延迟或 妨碍细菌生长的检测。不建议将血培养瓶放置于 室温超过几个小时。血培养标本冷藏或冷冻会将 一些微生物杀灭。溶解离心的血培养标本也不该 放置超过八小时；超过这个时间会使特殊病原菌 降低分离率或生长延缓。
为什么要做血培养
• 在病人的血液中检测出微生物对感染性疾病的诊 •
断、治疗和预后有重要的临床意义。 1、机体组织发炎如脑膜炎、肺炎、化脓性关节炎、 骨髓炎、腹膜炎、心内膜炎、感染性动脉瘤、血 栓性静脉炎和其他血管内膜感染等等，微生物会 破坏正常组织中的保护屏障进入血液。 2、各类的手术，手术环境及手术器材如有微生物 存在时可能直接进入到血液。 3、当细菌或真菌在血液中迅速繁殖超出单核吞噬 细胞系统清除这些微生物的能力时，即产生持续 的菌血症，并且可感染血管外组织交叉感染 。对 生命构成威胁。
血培养瓶的组成及型号
• 血培养瓶的构成：传感器（透气膜）、培
养基、添加剂。 • 血培养瓶现有的型号：需氧瓶（含中和剂） 及厌氧瓶（含中和剂）两种，但可以扩标 准瓶，儿童瓶。 • 标准瓶与现有瓶的区别在于现有的瓶中多 了中和剂。标准瓶与儿童瓶的区别在于儿 童瓶就是减少瓶中培养基的量。
• 1、苛养菌的检出率较好。由于瓶子中含有的营养 •
采血量
• 1、血培养操作规程对采血量的陈述：对从菌血症或真菌
菌血症患者血培养中获得微生物，每个培养瓶抽取 的血 量是唯一重要的变量。当培养的血量从2ml增加到20ml时， 血培养的阳性 率增加30%~50%，因为培养的血液量增加 1ml，阳性率增加3%-5%。 2、CLSI中的M47中有陈述： 在2004年Cockerill作了一个 研究报道，对163例患者使用连续监测血培养系统的结果 显示，每次取20ml血标本（心内膜炎除外）共3次。3次的 血培养的病原菌阳性率为：1次为65%，2次80%，3次为 96%。心内膜炎第1次阳性结果为90%。 3、推荐每次采血最少20ml。如果不足20ml时应该先满足 需氧瓶后再到厌氧瓶的原则，例如一次采血量为15ml应该 往需氧瓶中打10ml血，剩余的5ml注入厌氧瓶。
四、血培养的影响因素
• 1、采血时间； • 2、消毒； • 3、采血量； • 4、血培养标本的运送 ； • 5、试剂瓶的保存。
采血时间
• 对入院的危重病人未进行系统性抗生素治疗前，应及时进行血液培养，
病人出现以下临床表现时可作为采集血培养的重要指征。 1.发热（》38℃）或低温（《36℃） 2.寒战 3.白细胞增多（>10×10^9/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的 白细胞增多） 4.粒细胞减少（成熟的多核白细胞<1×10^9/L） 5.血小板减少 6.皮肤、粘膜出血 7.昏迷 8.多器官衰竭 9.血压降低 10.呼吸加快 或同时具备上述几种临床表现时应采集血培养。在评估可疑新生儿败 血症时，除发热或低温外，很少培养出细菌，应该增加尿液和脑脊液 培养。肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症患儿（特别是2岁或2岁以下 的幼儿）一般在门诊就诊，常伴有明显发热（》38.5℃）和白细胞增 多（》20×10^9/L）。老年菌血症病人可能不发热或不低温，如伴有 身体不适、肌痛或中风，可能是感染性心内膜炎的重要指征。
血培养仪报警后的处理
• 如果血培养阳性，应立即进行革兰染色，以无菌手续从培
养瓶中取肉汤2-3滴涂片，自然干燥，加热固定并染色。 染色结果应尽快报告，如革兰阳性球菌为成对或葡萄状或 链状; 革兰阴性杆菌为小杆菌或球杆菌等。革兰染色结果 可指导医生为患者经验选择抗生素治疗，并作为实验室进 行细菌鉴定补充试验的参考依据，它对于鉴别葡萄球菌和 链球菌非常有用。如果血培养阳性革兰染色未发现细菌， 应做吖啶橙染色进行二次镜检，这对检测弯曲菌菌血症和 布鲁氏菌菌血症很有帮助，而革兰染色很少发现这些细菌。 依据细菌革兰染色形态特点，选择适当的培养基传种，见 表3.