牛膝的药理作用研究进展

牛膝的药理作用研究进展

曹明俐1,　张小军2,　王振生3,　郑冬青4

(1.哈尔滨市药检所,黑龙江哈尔滨150001;2.哈尔滨工程大学医院,黑龙江

哈尔滨150001;3.哈尔滨求精生物工程有限公司,黑龙江哈尔滨150056; 4.佳木斯市中心医院,黑龙江佳木斯154000)

关键词　牛膝　药理作用　研究进展

牛膝(Achyranthes bidentata Blume )为苋科多年生草本植物牛膝的干燥根,性平,味甘苦酸,归肝肾经;其生用可散瘀血,消痈肿,破症结;熟用有补肝肾,强筋骨之功。能引血下行及引诸药下行。近年来对其药理作用的研究取得了新的进展,综述如下。

1　免疫调节作用

1.1　对正常小鼠的免疫调节作用

唐黎明等以碳粒廓清指数,血清溶血素水平,抗体形成细胞数量,二硝基氟苯(NDFB )诱导变态反应等免疫学指标观察,对小鼠免疫系统的影响研究结果,表明牛膝多糖能提高小鼠单核巨噬细胞吞噬功能,能明显增加小鼠血清溶血素水平和抗体形成细胞数量,但对DNFB 诱导的变态反应无明显影响。提示本品对小鼠免疫功能,主要是体液免疫和非特异性免疫有较明显的增强作用[1]。李祖伦等研究了川牛膝多糖对实验小鼠RES 吞噬功能、PFC 反应能力、淋巴细胞转化及N K 细胞杀伤活性的影响。结果表明,川牛膝多糖能增强小鼠REC 吞噬功能及PFC 反映能力,能提高N K 细胞杀伤活性,但对小鼠淋巴细胞转化率无显著影响[2]。

1.2　对老年鼠的免疫调节作用

李宗锴等报道了牛膝多糖(ABPS )对免疫系统的作用机制,采用体内、外的方法,对老年小鼠一些免疫功能进行了研究,结果表明,ABPS 在体外可以提高老年小鼠T 淋巴细胞的增殖能力和IL -2的分泌。体内能显著提高老年大鼠T 淋巴细胞和血清中TNF -β或TNF -α及NO 的产生和NOS 的活性,降低其sIL -2R 的产生,ABPS50-800mg ,L -1体外给药或100mg/kg/lip 可提高老年大鼠

PM

ΦTNF -α及NO 的产生和NOS 的活性,ABPS100mg/kg/lip 并能提高L PS 诱导的PM

Φ-α及NO 的产生和NOS 的活性。ABPS 对老年大鼠大脑皮层NO 的产生及

NOS 的活性无影响。提示ABPS 可以启动和活化M Φ,纠正老年鼠的免疫低下状态

[3]

。

1.3　对荷瘤小鼠的免疫调节作用

宋义平等从牛膝根中提取分子量为4.17K D 的多糖

(ABP 4170),对其影响小鼠细胞免疫功能的性质进行了

实验研究。结果显示,小鼠ip100、200mg/(kg ・d )×8d ,可以增强H -221腹水型肝癌小鼠的自然杀伤细胞(N K )和淋巴因子(IL -2)激活的杀伤细胞(LA K 细胞)的杀瘤活

性,并显著地提高小鼠的TNF -α与IL -2的产生水平,其效果与ip 猪苓多糖注射液40mg/(kg ・d )×8d 相当,这表明ABP4170具有成为一种新的抗肿瘤的免疫增强药物的潜力[4]。余上才等报道牛膝多糖(ABPS )50mg/kg/d 腹腔注射17天使S 180荷瘤小鼠血清IgG 由(19±5)mg/ml 显著升至(40±10)mg/ml ,血清抗体形成细胞由(290±67)×106显著升至(478±75)×106,Con A 5μg/ml 诱导的脾淋巴细胞增殖反应[3H]TdR 掺入值由(17.6±2.2)×

10-2dpm 显著升至(25.4±2.8)×10-2dmp [5]。田庚元等

报道牛膝多糖(ABPS )50mg/kg/d 腹腔注射7天使S 180荷瘤小鼠N K 细胞活性由22.5%±8.0%升至49.7%±

6.6%,L PSO.1mg/kg 诱生的血清TNF -α也显著增加;

ABPS 50～80

μg/ml 体外增强M Φ对S 180的杀伤作用[6]。2　抗肿瘤作用

田庚元等报道ABPS 25～100mg/d 连续使用7天对小鼠肉瘤S 180抑制率为31%～40%,环磷酰胺12.5mg/kg 单次抑瘤率为17%,与ABPS 100mg/d 合用的抑瘤率为

58%,有明显的协同作用[6]。余上才等报道ABPS 1～

2

μg/ml 对小鼠S 180细胞和人白血病K 562细胞的增殖均有明显的抑制作用[5]。向道斌等对S 180细胞膜成分的研究表明:ABPS 与细胞接触24h ,引起细胞膜唾液酸含量由

(69.63±1.87)μg/mg 蛋白显著升高到(76.31±5.81)

μg/mg 蛋白,膜磷脂含量由(291.31±14.17)nmol/mg 蛋白显著降低至(242.22±9.04)nmol/mg 蛋白,但对细胞膜胆固醇含量,膜流动性无影响[7]。唐黎明等报道ABPS 50及100mg/kg 腹腔注射能显著提高S 180荷瘤小鼠LA K 细胞活性。ABPS 50～800

μg/ml 体外对S 180细胞无直接细胞毒作用,但能增强巨噬细胞(M

Φ)对S 180的杀伤作用[1]。王一飞等从牛膝根中分离得到总皂甙,采用体内外实验对牛膝总皂甙(ABS )的抗肿瘤作用进行了研究。结果显示,随着药物浓度的升高,牛膝总皂甙体外对艾氏腹水癌细胞的细胞毒作用逐渐增强,体内对小鼠肉瘤180腹水型及肝癌实体瘤的抑制率分别为56%和46.2%(P <0.01)。提示,牛膝总皂甙对肿瘤细胞具有抑制作用[8]。综上,ABPS 的抗肿瘤作用与其宿主免疫功能及改变细胞膜的生化特性有关。

3　抗病毒作用

田庚元等从牛膝中提取得到一种新多糖化合物———

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02・ ITCM.May 2001,Vol.18,No.3

牛膝多糖,用不同的硫酸化试剂合成牛膝多糖硫酸酯。研究了最佳反应条件,其产物水溶性好,呈中性,最高产率达82.11,取代度(DS)达到三以上,含硫量达21以上。根据牛膝多糖的分子结构,多糖分子中的羟基已最大限度地被酯化。体外抗病毒实验初步表明牛膝多糖硫酸酯有很强的抑制乙型肝炎病毒HBsAg和HBeAg的活性,对单纯性疱疹病毒也有明显的抑制力[9]。郑民实等以细胞培养技术对牛膝多糖(ABPS)硫酸酯抗Ⅰ型单纯疱疹病毒药效的实验进行研究。受试药物ABPS硫酸酯(A-5、A-6、B-3、B-4、B-5、C-6、C-7、C-8)和对照药物环胞苷(CC),亚膦酰乙酸(PAA)按照综合药效质数评价时,排列顺序为A-6(2.17)>CC(2.11)>PAA(2.04)>B-3(2.

02)>B-5(1.90)>A-5(1.60)>C-8(1.38)>C-7(1.

32)>B-4(0.84)>C-6(0.80)。由此可见,8种化学合成药牛膝多糖硫酸酯中A-6为抗Ⅰ型单纯疱疹病毒效果较佳新药,优于环胞苷和亚膦酰乙酸[10]。

4　抗衰老作用

马爱莲等以牛膝煎液灌服小鼠30天,可显著提高衰老模型小鼠SOD活力,降低血浆L PO水平[11]。牛膝煎液灌服小鼠7天,可明显改善戊巴比妥钠所致的记忆障碍,使跳台法首次跳下的潜伏期明显延长,5分钟内错误次数明显减少,使型臂法第三天正确反应率明显提高,且可明显延长小鼠负荷游泳时间[12]。袁秀荣等从细胞分子水平探讨牛膝药物血清抗衰老作用及作用机理。运用血清药理学方法,以体外培养的人胚肺二倍体成纤维细胞为材料,分为牛膝药物血清组、大鼠血清组和正常对照组,相同条件下传代培养,以生长曲线法、掺入法观察细胞增殖变化及合成情况。结果显示,同一代龄,药物组细胞繁殖总数、值、掺入量等均明显高于对照组。证明牛膝药物血清有显著的促细胞增殖能力[13]。

5　镇痛抗炎作用

陆免林等采用小鼠扭体法、热板法对牛膝不同炮制品进行了镇痛作用比较,牛膝不同炮制品都有一定程度的镇痛作用,其中以酒炙牛膝镇痛作用强而持久。以小鼠由巴豆油所致的耳肿进行抗炎作用比较,结果显示,酒炙牛膝抗炎作用最显著[14]。李小川等采用小鼠扭体法、热板法对牛膝总皂甙(ABS)分成大、中、小(120mg/kg、60mg/kg、30mg/kg)3个剂量进行了镇痛作用研究,结果表明,ABS 具有明显的镇痛作用,且作用强度与剂量呈现一定的量效关系[15]。

6　子宫兴奋及抗生育作用

郭胜民等用消炎痛和氯丙嗪作阻断剂,以子宫收缩曲线下面积(UCA)为指标,分析牛膝皂甙A对大鼠离体子宫兴奋作用的机理。结果表明,实验前给大鼠用消炎痛(75mg/kg)灌胃或浴槽内加消炎痛(20mg/L),均可明显减弱牛膝皂甙A对大鼠离体子宫的兴奋作用。氯丙嗪(0.5mg/L)也可明显减弱牛膝皂甙A对未孕、已孕大鼠离体子宫的兴奋作用。提示牛膝皂甙A的子宫兴奋作用可能与5-HT及PG的合成与释放有关[16]。王世祥等实验中给小鼠灌服牛膝总皂甙(ABS)75mg/kg,150mg/kg, 300mg/kg,表明ABS具有明显的抗着床、抗早孕作用,且呈计量依赖关系,其ED50分别为(96±27)mg/kg和(145±51)mg/kg。ABS的抗早孕作用,可被外源性黄体酮、人年绒毛膜促性腺激素和泰必利部分拮抗。ABS300mg/kg 可显著抑制假孕小鼠和去卵巢小鼠的子宫蜕膜细胞反应,但无雌激素样作用和抗雌激素样作用[17]。

7　小　结

牛膝药用历史久远,药源广泛,对其药理作用的深入研究有利于发展其新的药用用途,进一步阐明其药理机制,对合理开发利用有效中医药资源意义重大。近年来对ABPS的研究较系统全面,ABPS分子量小、毒性低、水溶性好,实验证明其可以增强荷瘤鼠的宿主免疫功能而发挥抗肿瘤作用,可以增强正常和老年小鼠的体液免疫及细胞免疫功能,发挥免疫调节作用,因此有较好的药用前景,而成为新的免疫调节药物。

8　参考文献

1　唐黎明,吕志钧,张小萍,等.牛膝多糖药效学研究.中成药, 1996,18(5):31-33.

2　李祖伦,石圣洪,陈红,等.川牛膝多糖的免疫活性研究.中药材,1998,21(2):90-92.

3　李宗铠,李电东.牛膝多糖的免疫调节作用.药学学报,1997, 32(12):881-887.

4　宋义平,刘彩玉,周刚,等.牛膝多糖对小鼠细胞免疫功能的影响.中药新药与临床药理,1998,9(3):158-160.

5　余上才,章玉正.牛膝多糖抗肿瘤作用及免疫机制实验研究.

中华肿瘤杂志,1995,17(4):275-278.

6　田庚元,孙孝先,李寿桐,等.发明专利申请公开书.

CN1037714,1989.

7　向道斌,李晓玉.牛膝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞产生的白细胞介素-1和肿瘤坏死因子的影响.中国药理学报,1993,14(4): 332-335.

8　王一飞,王庆端,刘晨江.怀牛膝总皂甙对肿瘤细胞的抑制作用.河南医科大学学报,1997,32(4):4-6.

9　田庚元,李寿桐,宋麦丽.牛膝多糖硫酸酯的合成及其抗病毒活性.药学学报,1995,30(5):107-111.

10　郑民实,江淮苏,李文.牛膝多糖硫酸酯抗Ⅰ型单纯疱疹病毒的实验研究.中国医院药学杂志,1996,16(11):483-486.

11　马爱莲,郭焕.怀牛膝抗衰老作用研究.中药材,1998,21(7): 360-362.

12　马爱莲,郭焕.怀牛膝对记忆力和耐力的影响.中药材,1998, 21(12):624-626.

13　袁秀荣,颜正华,侯士良,等.怀牛膝药物血清对人胚肺二倍体细胞增殖的影响.中国中医药信息杂志,2000,7(6):22-23.

14　陆兔林,毛春芹,张丽.牛膝不同炮制品镇痛抗炎作用研究.

中药材,1997,20(10):507-509.

15　李小川,郭胜民,孙海燕,等.怀牛膝总皂甙镇痛作用研究.陕西医学杂志,1999,28(12):735-736.

16　郭胜民,车锡平,范晓雯.怀牛膝皂甙A对离体大鼠子宫兴奋作用机理的研究.西安医科大学学报,1997,18(4):473-475,491.

17　王世祥,井文寅,车锡平.怀牛膝总皂甙抗生育作用及其机理.西北药学杂志,1997,12(5):209-211.

收稿日期:2001-02-20

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中医药信息2001年第18卷第3期