实验室菌种保存方法
菌种保藏方法
菌种保藏方法
菌种保藏方法，如下：
1、传代保藏，传代保藏菌种是微生物保存中最常用的方法之一。
很多微生物在低温或者干燥处理时，会很快死亡，为了保存菌种的活性，就要定期不断的进行菌种转接、培养后再保存。
2、斜面低温保藏，将待保藏的菌种接种在合适的斜面培养基上，在相应的条件下培养至得到充足的菌体或者孢子，随后密封试管置于4℃左右保存，具体保存温度按照保存菌种设定。
保藏时间依微生物的种类从1个月到4个月不等。
3、冷冻干燥保藏，冷冻干燥保藏法为菌种保藏方法中最有效的方法之一，对一般生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用，这种方法适用于菌种长期保存，一般可保存数年至十余年。
我国大多数生物制品菌种都是采用该法保藏。
4、半固体穿刺保藏，配制半固体培养基，高压湿热灭菌后倒于无菌试管中至约1/3，待培养基凝固，用接种环从平面培养基上挑取单菌落，穿入培养基若干次。
在合适的条件下进行培养至菌体旺盛生长，之后密封试管，根据菌种特点在4 ℃左右或者凉爽干燥处保存。
保存时间至少可以达到
1 年，对于有些菌种甚至能达到20 年之久。
5、液氮超低温保藏，液氮超低温保藏法是菌种长期保藏的最有效最可靠的方法。
液超低温保藏法是把菌种装在含有冷冻保护剂的安瓶瓶内，将该安瓶瓶放人液氮（-196℃）中保藏。
论述菌种的保藏方法
论述菌种的保藏方法菌种的保藏是指将某一种菌株保存在适宜的条件下，以确保其长期存活和保持其遗传特性的一种操作。
菌种的保藏对于科学研究和应用具有重要意义，因为菌株的失活或突变可能导致实验结果的不准确性或应用价值的丧失。
本文将介绍几种常见的菌种保藏方法。
一、冷冻保藏法冷冻保藏法是将菌株保存在低温条件下，以减缓菌株的代谢和生长速率，达到延长其存活时间的目的。
常见的冷冻保藏方法有两种：液氮冷冻和低温冷冻。
1. 液氮冷冻：将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的甘油或乙二醇等保护剂，然后分装至冷冻管中，迅速将冷冻管浸入液氮中进行冷冻保存。
液氮的温度极低，可以有效地抑制菌株的代谢活动，保证其长期存活。
2. 低温冷冻：将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的甘油或乙二醇等保护剂，然后分装至冷冻管中，置于-80℃的低温冰箱中保存。
相比于液氮冷冻，低温冷冻的操作更加简便，且可以在普通实验室条件下进行。
二、干燥保藏法干燥保藏法是将菌株保存在无水条件下，通过降低菌株周围环境的水分含量，抑制菌株的代谢活动，并防止细胞内酶的活性。
常见的干燥保藏方法有两种：冷冻干燥和真空干燥。
1. 冷冻干燥：将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的保护剂，然后在真空下进行冷冻干燥。
冷冻干燥的过程中，通过降低温度和压力，使水分直接从固态转变为气态，从而达到保护菌株的目的。
2. 真空干燥：将培养基中的菌株悬浮液均匀涂布在无菌的滤纸或硅胶膜上，然后将其置于真空干燥器中进行真空干燥。
真空干燥的过程中，通过降低压力，将水分从菌株周围环境中蒸发掉，使菌株处于无水状态。
三、液氮冷冻法液氮冷冻法是将菌株保存在液氮中的一种方法。
液氮的温度极低，可以有效地抑制菌株的代谢活动，保证其长期存活。
该方法适用于多种菌株的保藏，包括细菌、真菌和酵母等。
液氮冷冻法的操作步骤如下：1. 将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的甘油或乙二醇等保护剂，以增加菌株的抗冻性。
2. 将菌株悬浮液分装至冷冻管中，每支约0.5-1.0 mL，然后封闭冷冻管。
菌种保藏方法
菌种保藏方法菌种保藏方法菌种保藏是指将某一种菌株或菌种保存在一定的条件下，以便长期保存并用于研究或应用。
菌种保藏的目的是为了防止菌株的变异和降低其性状的丧失，以便在需要的时候能够重新培养出相同或相似的菌株。
下面将介绍几种常见的菌种保藏方法。
一、冷冻保藏法冷冻保藏法是将菌种保存在低温条件下，一般为-80℃或液氮温度。
这种方法比较简单，操作方便，且保存效果较好。
首先，将菌株从培养基上接种到含有10%-15%甘油的液体培养基中，然后用无菌冻存管将菌液分装好，经过冷冻机或液氮罐进行冷冻保存。
在需要使用菌株时，只需将冻存管快速解冻并转移到新的培养基上即可。
二、真菌分生孢子的枯燥保存法真菌的分生孢子经过枯燥保存后，能够在相对湿度较低的条件下长期保存。
这种保存方法主要适用于真菌，特别是产生分生孢子的真菌。
首先，从培养基上接种分生孢子，培养出菌丝后进行枯燥处理。
一般采用短暂的枯燥处理，依靠菌丝中的水分进行干燥。
然后将枯燥的菌丝放置在无菌瓶中密封保存，放在相对湿度低于30%、温度介于10℃和25℃之间的干燥环境中。
三、气干法气干法是将菌株保存在干燥剂中，以保持菌株的活力。
这种方法适用于较短时间的菌种保存。
首先，将菌株从培养基上接种到含有干燥剂的培养基中，待培养基中的水分被干燥剂吸收后，将菌株封存在密封袋或密封瓶中。
干燥剂一般选择无水硅胶或干燥剂片，确保环境的干燥程度。
四、冷藏法冷藏法是将菌株保存在低温条件下，一般为4℃至10℃之间。
这种方法适用于细菌、酵母和一些真菌的保存。
菌株保存在含有15%-30%甘油的稀释培养基中，然后在低温条件下保存。
需要使用时，只需从低温保存中取出，接种到新的培养基中即可。
总结起来，菌种保藏是一项重要的科研工作，不同的菌种可以采用不同的保藏方法。
冷冻保藏法适用于大部分微生物的保存，真菌的分生孢子的枯燥保存法适用于真菌的保存，气干法适用于较短时间的保存，冷藏法适用于细菌、酵母和一些真菌的保存。
关于菌种的保存方法
关于菌种的保存方法导言菌种的保存是保障微生物研究的重要环节。
微生物资源的丧失对生物科技研究以及工业发展都会带来严重的影响。
因此，科学有效地保存菌种对于保护和利用微生物资源至关重要。
本文将介绍常见的菌种保存方法和技术，旨在帮助科学家和研究人员更好地保存和利用菌种资源。
常见菌种保存方法常温冷冻保存法常温冷冻保存是一种方便简单、成本低廉的菌种保存方法。
常见的常温冷冻保存方法有以下几种：1. 菌种液体冷冻保存：将菌种培养物添加到一定浓度的甘油或乙二醇溶液中，并将其储存于-80的冷冻库中。
这种方法可使菌种长期保存，并保持较高的存活率。
2. 菌种冻干保存：将菌种培养物培养到稳定的菌落状态后，直接将其放入真空冷冻干燥机中，去除菌种中的水分，然后存放于常温下。
这种方法适用于一些耐冷冻干燥的菌种。
3. 菌种在琼脂平板上保存：将菌种制备成沉淀后，均匀涂布在琼脂平板上，经过一定的处理后存放于室温下。
这种方法适用于一些菌种，如革兰氏阳性菌。
低温冷冻保存法低温冷冻保存是较为常用的一种菌种保存方法。
常见的低温冷冻保存方法有以下几种：1. 液氮冷冻保存：将菌种培养物中的菌液通过快速冷冻的方法将其冻结成冷冻物，并储存在液氮罐中。
这种保存方式可以确保菌种较好地保存，并且存活率较高。
2. 低温保存箱保存：将菌种培养物制备成菌种沉淀后，将其存放于-20或-80的低温保存箱中。
这种方法适用于一些需要长期保存的菌种。
菌种保存技术无菌操作在菌种保存的过程中，无菌操作是非常重要的。
无菌操作可以有效避免细菌污染，确保保存的菌种的纯度和保存质量。
1. 工作台的消毒：在进行菌种保存操作之前，需要将工作台表面进行消毒处理，如用75%的酒精擦拭表面。
2. 实验器具的灭菌：将实验器具在高温或高压条件下进行灭菌处理，以确保无菌操作的进行。
3. 空气的灭菌：在无菌操作的环境下，可以通过紫外线灭菌等方法来净化空气，避免空气中的微生物污染。
菌种保存记录在菌种保存的过程中，正确记录菌种保存的相关信息非常重要。
菌种保藏方法
菌种保藏方法菌种保藏是微生物学中非常重要的一项工作，它涉及到菌种的保存、保存条件、保存方法等方面。
而实验室中的菌种保藏主要是为了能够长期保存菌种，并保持其完整性和活力，以便之后的研究和应用。
一、保藏条件菌种的保藏条件直接关系到其保存的效果。
一般来说，菌种的保藏条件包括温度、湿度、光照、气体环境等方面。
1. 温度：温度是影响菌种保藏效果最为重要的因素之一。
一般来说，低温可以有效地延缓菌种的新陈代谢和老化速度，使其保存时间更长。
常用的温度包括4℃、-20℃、-70℃等，根据具体的菌种特性和实验需求选择合适的温度进行保存。
2. 湿度：湿度也是影响菌种保藏效果的重要因素之一。
过高或过低的湿度都会影响菌种的活力和完整性。
一般来说，菌种的保藏湿度应控制在相对湿度60%~80%之间，以保持菌种的适宜生长环境。
3. 光照：大部分菌种对光照较为敏感，因此在保存菌种时应避免暴露在强光下。
通常使用阴暗保存的方法，或用遮光布、铝箔等材料进行遮挡，以防止光照导致菌种的损害。
4. 气体环境：有些菌种对氧气、二氧化碳等气体的需求较高，因此在保存时需要考虑这些气体的供应。
常见的方法是使用密闭容器进行保存，或者通过调节氧气和二氧化碳的浓度来维持菌种的生长环境。
二、保藏方法菌种的保藏方法有多种，常见的包括冻干法、冷冻法、液氮法等。
1. 冻干法：冻干法是一种将菌种经过预处理后进行冻干保存的方法。
首先，将菌种培养在适宜的培养基上，然后添加一定浓度的保护剂，如甘露醇、赖氨酸等，以增强菌种的抗冻性。
接着，将培养基中的菌液进行冷冻处理，使之形成冻干物，最后将冻干物存放在干燥、密封的容器中，通常保存在低温环境下。
2. 冷冻法：冷冻法是将菌种直接保存在低温环境下的一种方法。
通常将菌液经过培养和增殖后，使用特殊的冷冻液冷冻保存，如甘油、乳糖等。
冷冻保存时，要确保液氮罐的密封性和温度稳定性，以防止菌种失活。
3. 液氮法：液氮法是一种将菌种保存在液态氮中的方法。
保存菌种的方法
保存菌种的方法
保存菌种是微生物学研究中非常重要的一项工作。
菌种可以通过不同的方法进行保存，以保证其长期的存活和保持其特性。
以下是几种常见的保存菌种的方法：
1. 冷冻保存：将菌株培养在富含营养物的培养基上，然后将细菌悬液添加到含有冷冻保护剂的离心管中，将其置于-80℃的冰箱中冷冻保存。
这种方法可以长期保存菌株，但需要注意冻存液的配制以及冷冻和解冻的操作。
2. 干燥保存：将菌株在富含营养物的培养基上生长，将其转移到无菌纸片上，然后在室温下晾干并密封保存。
这种方法不需要低温保护，但需要在干燥的条件下保存，并且菌株的保存时间较短。
3. 防冻干保存：将菌株培养在富含营养物的培养基上，然后将其转移到无菌滤纸片上，在防冻干剂的条件下进行干燥处理，并在干燥后密封保存。
这种方法可以在室温下保存菌株，并且可以长期保存，但需要注意干燥和密封的条件。
4. 长期冷藏保存：将菌株培养在富含营养物的培养基上，然后在4℃的冰箱中长期保存。
这种方法简便易行，但保存时间较短，通常不超过6个月。
需要注意的是，保存菌株的方法应根据不同的菌株和实验需求来选择。
保存菌株时也需要注意无菌操作，选择适当的保存容器和保存条件，并及时更新保存记录，以保证菌株保存的质量和可靠性。
简述菌种保藏的几种方法及条件。
简述菌种保藏的几种方法及条件。
菌种保藏是重要的生物资源的保护和利用过程，其主要方法有：
一、冷冻法。
冰冻法是最常用的保藏菌株的方法，也是目前最理想的保藏方法之一，其主要原理是将活菌体放入冰冻室，温度由常温降至-80℃，使得菌种活动受到抑制，在-80℃的状态下可以长期保存。
二、液氮法。
液氮法是一种依靠低温和高压技术保存菌种的方法，主要是将活菌体置入液氮容器中，使其处于-195℃的极低温状态。
三、干燥法。
干燥法是将活菌体及高浓度营养培养基同时干燥，使其中的水份完全蒸发而获得半干燥的状态，这种状态下可以防止菌种的增殖。
四、水银法。
水银法是一种利用活菌体对水银的耐受性，将活的菌体悬浮在7%的水银中的保存方法。
保藏菌种的条件：
1、环境温度应该控制在0~4℃，并保持温度稳定。
2、控制保藏过程中的湿度，干燥法中的湿度应在10%～15%之间，而冷冻、液氮保藏则要求保证容器中有足够多的液氮，避免菌种因温度过高而复苏。
3、控制光照，避免菌株遭受接触紫外线的伤害、褪色、衰退和增强其致病性等。
4、控制空气中的致病因子；
5、定期检测样品的质量，确保其始终处于较好的保藏状态。
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实验室菌种保存常用方法
实验室菌种保存常用方法一、概述微生物具有容易变异的特性，因此，在保存过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态。
二、常用保存方法1.斜面低温保存法将分纯的待存菌接种于适宜的固体斜面培养基上，得到充分生长后，用封口膜封口，贴上标签，保存于4℃的冰箱中。
此法操作简单、使用方便、不需要特殊设备，是实验室菌种保存最常用的方法。
但保存时间短，一般每个月都要移种1次，而且菌种容易变异，所以此方法只适合实验室短期实验菌株的保存。
2.半固体琼脂法用接种针将以分纯的待存菌，穿刺接种于半固体中，放入培养箱培养后出，封上无菌的液体石蜡，贴上标签，放4℃冰箱保存。
此方法简便易操作，不需特殊设备、技术难度不大，但保存的时间不长，一般只能保存1年以内，而且对抵抗力弱以及一些特殊菌种大概只能存活3～6个月，需要频繁的传代，这样很容易使菌株受到污染、变异。
所以此方法不适用菌种的长期保存，只适合实验室一些要求不高的菌种的短期保存。
3.液体石蜡保存法将液体石蜡灭菌，放于37℃恒温箱中，使水汽蒸发掉备用。
再将已分纯的待存菌在最适宜的斜面培养基中培养，使得到健壮的菌体，用无菌吸管吸取已灭菌的液体石蜡，注入已长好的斜面培养基上，用量以高出斜面1cm为准，将试管直立，贴上标签，置4℃下保存。
此法制作简单，不需要特殊设备，菌种可以保存1年左右不需要经常移种，缺点是保存的时候需要直立放置。
此方法适合实验室短期保存，而且保存时需要一定的空间。
4.高层半固体琼脂石蜡保存法将待存菌经平板划线分离后，挑单个菌落用接种针反复穿刺接种到高固体琼脂培养基中，经培养箱培养后取出，用灭菌过的液体石蜡滴加到半固体琼菌种管表层约0.5cm高度，贴上标签，存放4℃冰箱。
此法操作简便，不需要特殊设备，效果好，可以保存菌株1～2年。
所以适合实验室菌株的较长期的保存。
5.纸片法将已分纯的待存菌用无菌镊子镊取纸片，在纸片上刮取4～5个菌落，入冻存管内，盖上盖子后用封口胶布封住边缘，贴上标签，放入冰箱冷冻保存(－20℃左右)。
菌种保藏的方法
菌种保藏的方法菌种保藏是一种重要的微生物资源保护方式，对于研究、应用和开发微生物具有重要意义。
以下是几种常见的菌种保藏方法及其操作步骤。
一、低温冷冻保藏法低温冷冻是一种常用的微生物保藏方法，适用于大多数真菌、细菌和酵母菌。
其主要原理是将菌株保存在低温下，使其生理活动缓慢，以延长菌种的保藏时间。
操作步骤：1. 选择菌株：选择生长良好、菌株特性完整的菌株进行保藏。
2. 菌株处理：将菌株经过预处理，如鉴定鉴别、菌落孤立等。
3. 制备保存液：根据不同菌株的需要，制备适宜的保存液，常用的保存液有甘油、甘露醇等。
4. 菌种保存：将菌株用保鲜膜包裹，放入保存管中，加入保存液，密封保存管。
5. 冷冻保存：将保存管放入低温冰箱或液氮罐中进行冷冻保存。
二、干燥保藏法干燥保藏法是一种简便、经济的保藏方法，适用于真菌、细菌、放线菌等微生物。
其基本原理是将菌种与干燥剂混合，使其水分含量降低，从而实现微生物的休眠状态。
操作步骤：1. 选择菌株：选择生长良好、菌株特性完整的菌株进行保藏。
2. 菌株处理：将菌株经过预处理，如鉴定鉴别、菌落孤立等。
3. 制备干燥剂：根据不同菌株的需要，选择合适的干燥剂，如硅胶、氧化钙等。
4. 菌种混合：将菌株与干燥剂按照一定比例混合均匀。
5. 干燥保存：将混合物均匀地散布在无菌培养基上，置于通风干燥的环境中进行保存。
三、冷冻冻干保存法冷冻冻干保存法是一种较为复杂的菌株保藏方法，适用于难保存的微生物，如厌氧菌、放线菌等。
其主要原理是将菌株在低温下冻结干燥，从而保护微生物的活力。
操作步骤：1. 选择菌株：选择生长良好、菌株特性完整的菌株进行保藏。
2. 菌株处理：将菌株经过预处理，如鉴定鉴别、菌落孤立等。
3. 制备保存液：根据不同菌株的需要，制备适宜的保存液，如甘油、甘露醇等。
4. 冷冻过程：将菌株加入保存液中，放入冷冻机冷冻至低温（通常为-80℃）。
5. 冻干过程：将冷冻的菌株经过真空排气、结冰降温等步骤进行冻干处理。
实验室菌种保存方法
实验室菌种保存方法1.冷冻保存：这是最常用的保存方法之一、将培养基中的菌种经过适当处理（例如，添加保护剂）后，以低温（通常为-80°C）冷冻保存。
冷冻保存可以有效地延长菌种的存活时间，并保持其遗传特性不变。
2.干燥保存：将菌种培养在特定培养基上，然后经过适当处理（例如，使用干燥剂）后，将菌落保持在干燥状态下保存。
干燥保存可以提高菌种的耐久性，适用于许多细菌和真菌。
3.液氮冷冻保存：将培养基中的菌种转移到液氮中进行保存。
液氮冷冻保存是一种非常安全和可靠的保存方法，可以保持菌种的完整性和活力，但液氮的使用需要特殊的仪器和技术。
4.明胶冻保存：将微生物培养在含有明胶的培养基上，形成含有菌种的明胶片。
这些明胶片可以长期保存，并且能够很方便地传递和存储。
5.长期培养保存：将菌种培养在含有特定营养物质（例如，富含碳源或氮源）的培养基上进行长期培养保存。
这种方法适用于需要长期保持菌种的实验室，但需要定期检查和维护菌种的生长状态。
6.冷冻干燥保存：将菌种培养在含有保护剂的培养基上，然后经过特殊处理（例如，低温干燥）使其形成冷冻干燥物。
这种保存方法可以在不需要特殊的冷藏设备的情况下进行，并可长期保持菌种的活力和遗传特性。
在进行实验室菌种保存时，还需要注意以下几点：1.选择合适的菌种保存方法：不同的菌种具有不同的保存要求，因此需要根据菌种的性质和保存的目的选择合适的保存方法。
2.使用无菌技术进行保存：保存菌种的培养基、试管和仪器都需要经过严格的无菌处理，以防止外界的污染。
4.定期检查和维护保存菌种：保存菌种需要定期检查和维护，以确保菌种的生长状态和保存条件的稳定。
如发现菌种有异常生长或保存条件不合适时，应及时采取相应措施。
总之，实验室菌种保存是确保菌种长期保存和使用的重要环节。
通过选择合适的保存方法，使用无菌技术进行保存，并进行定期检查和维护，可以保持菌种的完整性和活力，从而为科学研究和实验提供可靠的菌种资源。
菌种保存方法
菌种保存方法菌种保存是微生物学研究中非常重要的一环，它可以保证菌种的长期保存和稳定性，为科研工作提供了可靠的保障。
下面将介绍几种常见的菌种保存方法。
首先，冷冻保存是最常见的菌种保存方法之一。
冷冻保存是指将培养好的菌种悬浮液或培养物在-80℃以下的低温条件下保存。
在保存前，需要将菌种悬浮液加入一定比例的保护剂，如甘油或DMSO，以增加菌种的冷冻耐受性。
冷冻保存不仅简单易行，而且保存时间长，可以保存数年甚至更长时间。
其次，干燥保存也是一种常用的菌种保存方法。
干燥保存是指将培养好的菌种用干燥剂或者真空干燥的方法将菌种完全脱水，然后保存在低温、低湿的条件下。
这种方法保存的菌种可以在常温条件下保存，并且保存时间也相对较长。
另外，液氮保存也是一种非常有效的菌种保存方法。
液氮保存是指将培养好的菌种悬浮液或培养物直接存放在液氮罐中保存。
由于液氮的温度极低，可以有效地阻止微生物的代谢和生长，因此保存效果非常好。
但是在使用液氮保存时需要注意安全问题，操作人员要具备相关的安全知识和技能。
最后，冷冻干燥保存也是一种常见的菌种保存方法。
冷冻干燥保存是将培养好的菌种在低温条件下冷冻，然后通过真空干燥的方法将菌种脱水保存。
这种方法既兼具冷冻保存和干燥保存的优点，保存效果非常好，被广泛应用于微生物学研究中。
综上所述，菌种保存方法有很多种，选择合适的保存方法需要根据具体的实验要求和条件来确定。
无论采用何种保存方法，都需要严格按照操作规程来进行，以确保菌种的保存质量和稳定性。
希望本文介绍的菌种保存方法对大家有所帮助。
实验室最常用的五种菌种保藏方法
在现代生物学研究和生物技术应用中，菌种保藏是至关重要的环节。
恰当的菌种保藏方法能够确保菌种的活性、遗传稳定性和可用性，为科学研究的持续开展以及相关产业的发展提供坚实的基础。
本文将重点介绍实验室中最常用的五种菌种保藏方法，深入探讨它们各自的特点、适用范围以及操作要点。
一、低温冷冻保藏法低温冷冻保藏法是目前最为广泛应用且效果较为可靠的菌种保藏方法之一。
其基本原理是将菌种置于超低温环境（通常为液氮温度，即-196℃）下，使菌种细胞处于极度冷冻的状态，从而抑制其代谢活动，达到长期保存的目的。
该方法具有诸多显著优点。
低温能够极大地减缓细胞的生理活动，几乎使其处于完全停滞状态，从而有效地延长菌种的存活时间。
低温冷冻保藏对菌种的遗传稳定性影响较小，经过长期保存后，菌种的特性通常能够较好地保持。
操作相对简单，只需将菌种制备成适宜的冷冻保存液，然后置于液氮罐中即可。
在具体操作时，首先要选择合适的冷冻保存液。
常用的冷冻保存液一般含有一定比例的保护剂，如甘油、二甲基亚砜等，它们能够降低细胞内冰晶的形成对细胞的损伤。
制备好冷冻保存液后，将菌种接种到冷冻保存液中，制成菌悬液。
将菌悬液分装到合适的冷冻管中，迅速放入液氮罐中进行保存。
在液氮罐中，要定期检查液氮的液位，确保菌种始终处于适宜的低温环境中。
低温冷冻保藏法适用于大多数微生物菌种的长期保存，尤其对于那些对温度敏感、容易变异的菌种，如细菌中的一些致病菌、真菌中的丝状真菌等，具有良好的保藏效果。
然而，该方法也存在一些不足之处，例如液氮的成本较高，液氮罐的储存空间有限，以及在取出菌种进行复苏时可能存在一定的风险等。
二、干燥保藏法干燥保藏法是利用菌种在干燥环境下代谢活动受到抑制的原理来实现保藏的方法。
常见的干燥保藏法包括沙土管保藏法、滤纸保藏法等。
沙土管保藏法是将菌种接种到无菌的沙土中，然后将沙土管置于干燥器中进行干燥保存。
该方法具有操作简便、成本低廉的特点。
在干燥过程中，菌种细胞内的水分逐渐散失，代谢活动减缓，从而达到保藏的目的。
菌种长期保存方法
菌种长期保存方法
菌种的长期保存方法有多种，常用的包括以下几种：
1. 冷冻保存：将菌株培养物添加适量的保护剂（如甘油、蔗糖等），将菌种冷冻在低温下保存。
通常在-70或更低的温度下保存，可以避免菌种的变异和死亡。
2. 真空冻干保存：将菌株培养物通过真空冷冻干燥技术，制备成干粉状，然后密封保存。
这种方法适用于某些脆弱的菌种，有助于保持菌株的原始特性。
3. 高温烘箱保存：将菌株培养物置于高温（通常为40-50）的烘箱中烘干，然后密封保存。
这种方法适用于耐热的菌株，可以较长时间地保持菌种的活性。
4. 冷冻干燥保存：将菌株培养物进行冷冻干燥处理，制备成干燥粉末，并密封保存。
这种方法可以长期保存菌种，且易于运输和储存。
5. 非洲紫外线灭菌保存：将菌株培养物置于紫外线照射仪中进行灭菌处理，然后密封保存。
这种方法适用于一些容易形成胞内孢子的菌株，可以有效地保持菌种的活性。
选择合适的保存方法应根据菌株的特性以及实验需求来确定，同时在保存过程中应注意使用无菌操作，确保保存的菌种不受外界污染。
保存菌种的方法
保存菌种的方法菌种保存是微生物学中非常重要的一环，因为合适的保存方法可以保证菌株的品质和稳定性，使其能够长期存储。
以下是关于保存菌种的10条方法以及详细描述。
1. 冷冻保存：将菌株生长到对数生长期，用稳定添加剂（例如甘油、二甲基亚砜等）制成含有冷冻保护剂的菌液或菌片，加入液态氮或-80℃冰箱中保存。
这种保存方法适用于细菌、真菌、酵母等样品，能够长期保存，但对于需要氧气或是不能耐受低温的菌株不适用。
2. 真空气体吸口保存：将菌株生长后制成含有添加剂的液态培养基，混合好后放入真空器中，排除气体后，用火焰消毒，制成真空条件下的口密封菌液或菌片，然后保存在4℃下。
这种方法不需要添加保护剂，保存时间较短，但适用于不能耐受低温和不适用于冷冻保存的菌株。
3. 干燥保存：将菌株生长到对数生长期，将细菌涂在玻璃片上，用烘箱干燥后保存在密封袋或密闭容器中。
这种方法适用于细菌，真菌和酵母，可以长期保存，但能否使用仍需进一步验证。
4. 固体培养基上保存：将菌株生长到对数生长期，在固体培养基上形成孢子或菌落，将所长好的固体培养基通过滴管法滴入稳定添加剂中，然后冷冻或冷冻干燥保存。
适用于真菌和酵母等难以保存的菌类。
5. 血清中保存：将菌株生长到对数生长期，加入相当于液态氧气的气体，保护期生产的抗凝血清中，保存在4℃下。
适用于不耐受低温和不能被冷冻保存的菌种。
6. 挤压保存：将菌株生长到对数生长期，用挤压材料制成粘稠的菌株，将其保存在温和的环境中，适用于不适用于氧气的微生物，例如厌氧菌等。
7. 转移保存：将菌株接种在体积较大的液态培养基中，生长到对数生长期，然后将一部分转移到其他培养基上进行保存。
这种方法适用于一些菌株对培养条件较为敏感的样品。
8. 摆动保存：将菌株生长到对数生长期，加入稳定添加剂后，用摆动培养箱或者下摆式培养箱保存。
这种方法可以长期保存，便于使用，适用于通气好的微生物。
9. 融合细胞保存：将两个不同的细胞系合并后保存，可以保持其品质和繁殖能力。
菌种保藏方法范文
菌种保藏方法范文菌种保藏是指将具有特定遗传性状的菌种保持在一定的条件下存活和保存，以便于后续的研究和利用。
菌种保藏的目的是保持菌种的稳定性、纯度和活力。
下面将对常见的菌种保藏方法进行详细介绍。
1.冷冻保藏法：冷冻保藏法是最常见和常用的菌种保存方法之一、该方法是将菌种在适宜的培养基上生长至适宜的阶段，然后通过添加甘油或其他保护剂来增加菌种的耐冻存活力，并放入低温环境下冷冻保存。
通常使用-20℃或更低的温度进行保存。
这种方法简单易行，成本较低，在短时间内能够保持菌株的复原性很好。
2.干燥保藏法：干燥保藏法又称为脱水保藏法，是将菌种长时间保存于干燥状态中。
先将菌种培养至适宜的生长阶段，然后用无菌方法将菌种制成干燥菌粉，放入干燥瓶中密封保存。
常见的干燥剂有二氧化硅凝胶、无水CaCl2等。
干燥保藏法保存的菌种潜伏期长，比较安全可靠，但复苏的条件较为苛刻。
3.液氮保藏法：液氮保藏法又称为低温保存方法，是将菌种保存在液态氮中。
通过将菌种培养至适宜生长阶段后，将其转接入试管中，用无菌方法加入等体积的冷冻保护剂（例如甘油），放入液氮中保存。
液氮的温度达到-196℃，在这种环境下菌种可以长时间保存，但需要特殊的设备和条件。
4.胶体保藏法：胶体保藏法是将菌种培养至适宜生长阶段，然后将其与无菌明胶混合均匀，制成菌胶球，通过培养基中的各种成分供应菌种的生长和维持菌株的复原性。
这种保藏方法具有较长的复苏潜伏期，并且易于携带和传递，是一种较为理想的保存方法。
5.冷冻干燥保藏法：冷冻干燥保藏法是将菌种通过冷冻干燥的方法进行保存。
首先将菌种培养至适宜生长阶段，然后用无菌方法将菌种在-40℃或更低温度下冷冻干燥，形成冷冻干燥粉末。
这种方法保存的菌种潜伏期长，但复苏条件较为苛刻。
除了以上的常见保存方法，还有一些新兴的菌种保藏方法，例如微柱保存法、冷冻解冻保存法等。
这些方法在不同的实验室和研究领域可能有着不同的适用性和优势。
综上所述，菌种保藏方法有多种多样，每一种方法都有其自身的特点和适用范围。
实验室最常用的五种菌种保藏方法
实验室最常用的五种菌种保藏方法一、冷冻保存在实验室中，冷冻保存是最常用的菌种保藏方法之一。
这种方法利用低温的环境，将菌种置于-70°C以下的冰柜或液氮罐中进行保存，以减缓菌种的新陈代谢过程，从而延长其保存时间。
冷冻保存不仅适用于常见的细菌菌种，对真菌、酵母菌等微生物也同样适用。
在冷冻保存的过程中，需要注意样品容器的密封性和防潮性，以避免保存过程中的交叉污染和冻结损伤。
二、干燥保存干燥保存是另一种常见的菌种保藏方法。
这种方法通过将菌种置于低温低湿环境中，使其水分蒸发，使菌种变得干燥并进入休眠状态，从而延长其保存时间。
常见的干燥保存方式包括真空冷冻干燥、干燥剂吸附法等。
干燥保存尤其适用于灵敏对湿度敏感的菌种，以及一些难以存活在液体培养基中的微生物。
三、低温保存除了冷冻保存外，低温保存也是常见的菌种保藏方式之一。
在这种方法中，菌种通常被保存在4°C左右的冰箱中，通过控制温度和湿度，延缓菌种的新陈代谢，并保持其生长状态。
这种保存方式不仅适用于微生物的短期保存，也可以用于长期保存对保存温度敏感的微生物。
四、液氮保存液氮保存是一种极低温的保存方式，通过将微生物样品浸没在液氮中进行保存。
这种方法不仅可以有效地防止菌种的新陈代谢和变异，还能够保持菌种的生物特性和遗传信息。
液氮保存适用于需要长期保存的珍贵菌株和难培养的微生物，如土壤中的特殊嗜冷菌和特殊嗜热菌等。
五、冻干保存冻干保存是将微生物样品在冷冻的条件下先冻结，然后通过真空干燥的方式将水分蒸发，最终将样品转变成固态的干燥状态。
这种方法既能保留微生物的生物特性，又能有效地延长样品的保存时间，适用于需要长时间运输和保存的微生物。
总结回顾通过冷冻保存、干燥保存、低温保存、液氮保存和冻干保存等五种菌种保藏方法，可以满足实验室对于微生物样品保存的不同需求。
不同的菌种和实验目的，需要选择合适的保存方式，以确保微生物的品质和可用性。
在进行菌种保存的过程中，需要注意样品的密封性、温度和湿度的控制，以及保存设备的维护和管理。
实验室菌种保存方法
实验室菌种保存方法菌种保存是实验室中常见的一项重要工作。
正确保存菌种不仅可以确保其活性和可持续使用，还可以减少实验室的成本和劳动力。
以下是一些常见的菌种保存方法。
1.常温保存常温保存是最简单和最不昂贵的保存方法之一、对于许多菌株而言，它们在常温下可以长时间存活。
通常，菌种可以直接在琼脂平板上保存。
首先，选取一个带有菌落的琼脂平板，并将其密封好，避免水分流失和污染。
然后，将琼脂平板保存在阴暗的地方，例如实验室的柜子里。
这种方法适用于一些相对稳定的微生物，例如常见的实验室菌株。
2.冷藏保存冷藏也是一种常见的菌种保存方法。
在这种方法中，菌落从琼脂平板或液体培养物中挑取，然后悬浮在无菌保护液中。
无菌保护液可以是无菌的生理盐水、甘油溶液或无菌冷冻保护剂。
然后，将菌悬液分装到无菌冷冻管中，并放置在冰箱中保存。
通常，菌株可以在4℃下保存几个月，甚至一年。
这种方法适用于大多数微生物。
3.冷冻保存冷冻保存是一种可以长期保存菌株的方法。
在这种方法中，菌落从琼脂平板或液体培养物中挑取，然后悬浮在无菌保护液中。
然后，将菌悬液用干燥冰或液氮急冷，并将其转移到液氮罐中。
液氮罐的温度通常在-196℃左右。
这种方法可以长期保存微生物，通常可以保存数年到几十年。
当需要使用菌株时，可以从液氮罐中取出，并迅速解冻。
冷冻保存适用于需要长期保存或大量保存的菌株。
4.真空冷冻干燥保存真空冷冻干燥保存是一种更先进的菌株保存方法。
在这种方法中，菌桩从琼脂平板或液体培养物中挑取，然后转移到无菌试管中，并用无菌保护液悬浮。
然后，将试管放入真空冷冻干燥机中，通过控制温度和真空度，使菌株快速冷冻和干燥。
这种方法可以在保持菌株活性的同时，去除水分，从而阻止微生物的生长与繁殖。
真空冷冻干燥保存方法适用于对冷冻和干燥敏感的菌株。
综上所述，菌种保存方法的选择应根据菌株的特性、使用频率和所需保存时间等因素进行决定。
不同的方法有各自的优点和缺点，实验室可以根据自身需求来选择最适合的保存方法。
实验室菌种的保藏方法
实验室菌种的保藏方法一、甘油悬液保藏法此法是将菌种悬浮在甘油蒸馏水中，置于低温下保藏，本法较简便，但需置备低温冰箱。
保藏温度若采用-20℃，保藏期约为0.5～1年，而采用-70℃，保藏期可达10年。
将拟保藏菌种对数期的培养液直接与经121℃蒸汽灭菌20min的甘油混合，并使甘油的终浓度在10％～15％，再分装于小离心管中，置低温冰箱中保藏。
基因工程菌常采用本法保藏。
二、冷冻真空干燥保藏法冷冻真空干燥保藏法又称冷冻干燥保藏法，简称冻干法。
它通常是用保护剂制备拟保藏菌种的细胞悬液或孢子悬液于安瓿管中，再在低温下快速将含菌样冻结，并减压抽真空，使水升华将样品脱水干燥，形成完全干燥的固体菌块。
并在真空条件下立即融封，造成无氧真空环境，最后置于低温下，使微生物处于休眠状态，而得以长期保藏。
常用的保护剂有脱脂牛奶、血清、淀粉、葡聚糖等高分子物质。
由于此法同时具备低温、干燥、缺氧的菌种保藏条件，因此保藏期长，一般达5～15年，存活率高，变异率低，是目前被广泛采用的一种较理想的保藏方法。
除不产孢子的丝状真菌不宜用此法外，其他大多数微生物如病毒、细菌、放线菌、酵母菌、丝状真菌等均可采用这种保藏方法。
但该法操作比较烦琐，技术要求较高，且需要冻干机等设备。
保藏菌种需用时，可在无菌环境下开启安瓿管，将无菌的培养基注入安瓿管中，固体菌块溶解后，摇匀复水，然后将其接种于适宜该菌种生长的斜面上适温培养即可。
三、液氮超低温保藏法液氮超低温保藏法简称液氮保藏法或液氮法。
它是以甘油、二甲基亚砜等作为保护剂，在液氮超低温（-196℃）下保藏的方法。
其主要原理是菌种细胞从常温过渡到低温，并在降到低温之前，使细胞内的自由水通过细胞膜外渗出来，以免膜内因自由水凝结成冰晶而使细胞损伤。
美国ATCC菌种保藏中心采用该法时，把菌悬液或带菌丝的琼脂块经控制致冷速度，以每分钟下降1℃/min的速度从0℃直降到-35℃，然后保藏在-150℃～-196℃液氮冷箱中。
实验室菌种保存方法
实验室菌种保存方法1、传代保存法：有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理时，会很快死亡，因此在这种情况下，只能求助于传代培养保存法。
传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存，它是最基本的微生物保存法，例如酸奶等常用生产菌种的保存。
传代保存时，培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。
培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。
若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙。
一般地，大多数菌种的保藏温度以5C为好，像厌氧菌、霍乱弧菌及部分病原真菌等微生物菌种则可以使用37 C进行保存，而蕈类等大型食用菌的菌种则可以室温直接保存。
传代培养保存法虽然简便，但其缺点也很明显，如：①菌种管棉塞经常容易发霉；②菌株的遗传性状容易发生变异；③反复传代时，菌株的病原性、形成生理活性物质的能力以及形成抱子的能力等均有降低；④ 需要定期转种，工作量大；⑤杂菌的污染机会较多。
2、液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
此法可防止干燥，并通过限制氧的供给而达到削弱微生物代谢作用的目的。
其具有方法简便的优点，同时也适用于不宜冷冻干燥的微生物（如产孢能力低的丝状菌）的保存，而某些细菌如固氮菌、乳酸杆菌、明串珠菌、分枝杆菌、红螺菌及沙门氏菌等和一些真菌如卷霉菌、小克银汉霉、毛霉、根霉等不宜采用此法进行保存。
3、载体保存法：即将微生物吸附在适当载体上进行干燥保存的方法。
常用的有方法包括以下几种，如：①土壤保存法：主要用于能形成抱子或抱囊的微生物菌种的保藏。
方法是在灭菌的土壤中加入菌液，立即在室温下进行干燥或使菌体繁殖后再干燥，然后冷藏或在室温下密封保存。
保存用的土壤原则上以肥沃的耕土为宜，土壤需风干、粉碎、过筛和灭菌。
使微生物在土壤中繁殖后进行干燥保存的方法是：取适量土壤（5 克）置于塞有棉塞的试管中，加水或加入充分稀释的液体培养基（以含水量为土壤最大持水量的60%为宜），然后高压灭菌。
菌种保存方法
菌种保存方法菌种是微生物学研究、生物技术应用以及工业发酵等领域中不可或缺的重要资源。
为了确保菌种的活性、纯度和遗传稳定性，选择合适的保存方法至关重要。
以下将详细介绍几种常见的菌种保存方法。
一、斜面低温保存法这是一种简单且常用的保存方法。
首先，将需要保存的菌种接种在适宜的斜面培养基上，在适宜的温度下培养，待菌种生长良好后，将其放入 4℃左右的冰箱中保存。
一般来说，这种方法可以保存菌种 3 6 个月。
在操作过程中，要注意培养基的质量和无菌操作。
培养基应新鲜制备，成分均匀，且灭菌彻底。
接种时，要在无菌环境下进行，避免杂菌污染。
二、液体石蜡保存法对于一些难以在斜面培养基上长期保存的菌种，可以采用液体石蜡保存法。
在无菌条件下，向培养好的菌种斜面上注入一层无菌的液体石蜡，使其覆盖住斜面培养基表面，然后将其放入 4℃冰箱中保存。
液体石蜡的作用是隔绝空气，防止菌种因氧化而失活。
但需要注意的是，液体石蜡的质量要纯净，且在注入前要经过灭菌处理。
三、冷冻干燥保存法冷冻干燥保存法是一种较为长期且有效的保存方法。
其原理是将含有菌种的溶液在低温下迅速冷冻，然后在真空条件下使水分升华干燥，从而使菌种处于休眠状态。
操作时，先将菌种培养至对数生长期，然后与保护剂混合，放入冷冻干燥机中进行处理。
处理后的菌种可以在常温下保存数年甚至更长时间。
但这种方法需要专门的设备，操作相对复杂。
四、液氮超低温保存法液氮超低温保存法是目前保存菌种最有效的方法之一。
液氮的温度极低（－196℃），可以使菌种的代谢活动几乎完全停止，从而有效地保持菌种的活性和遗传稳定性。
将菌种放入特制的冻存管中，加入适量的保护剂，然后迅速投入液氮中保存。
使用时，从液氮中取出冻存管，在 37 40℃的水浴中快速解冻。
这种方法虽然效果好，但液氮的储存和使用需要严格的安全措施，且成本较高。
五、甘油保存法甘油具有保护细胞免受冰晶损伤的作用，因此常用于菌种的保存。
将培养好的菌种与一定比例的无菌甘油溶液混合，然后放入－20℃或－80℃的冰箱中保存。
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实验室菌种保存方法1、传代保存法：有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理时，会很快死亡，因此在这种情况下，只能求助于传代培养保存法。
传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存，它是最基本的微生物保存法，例如酸奶等常用生产菌种的保存。
传代保存时，培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。
培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。
若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙。
一般地，大多数菌种的保藏温度以5℃为好，像厌氧菌、霍乱弧菌及部分病原真菌等微生物菌种则可以使用37℃进行保存，而蕈类等大型食用菌的菌种则可以室温直接保存。
传代培养保存法虽然简便，但其缺点也很明显，如：①菌种管棉塞经常容易发霉；②菌株的遗传性状容易发生变异；③反复传代时，菌株的病原性、形成生理活性物质的能力以及形成孢子的能力等均有降低；④需要定期转种，工作量大；⑤杂菌的污染机会较多。
2、液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
此法可防止干燥，并通过限制氧的供给而达到削弱微生物代谢作用的目的。
其具有方法简便的优点，同时也适用于不宜冷冻干燥的微生物（如产孢能力低的丝状菌）的保存，而某些细菌如固氮菌、乳酸杆菌、明串珠菌、分枝杆菌、红螺菌及沙门氏菌等和一些真菌如卷霉菌、小克银汉霉、毛霉、根霉等不宜采用此法进行保存。
3、载体保存法：即将微生物吸附在适当载体上进行干燥保存的方法。
常用的有方法包括以下几种，如：①土壤保存法：主要用于能形成孢子或孢囊的微生物菌种的保藏。
方法是在灭菌的土壤中加入菌液，立即在室温下进行干燥或使菌体繁殖后再干燥，然后冷藏或在室温下密封保存。
保存用的土壤原则上以肥沃的耕土为宜，土壤需风干、粉碎、过筛和灭菌。
使微生物在土壤中繁殖后进行干燥保存的方法是：取适量土壤（5克）置于塞有棉塞的试管中，加水或加入充分稀释的液体培养基（以含水量为土壤最大持水量的60%为宜），然后高压灭菌。
再将需保存的微生物进行大量接种，培养至菌丝能用肉眼确认的程度为止，移入干燥器中经短时间干燥或风干后密封，冷藏或室温保存。
②砂土保存法：取清洁的砂，过60目筛去掉大砂粒，并用磁铁吸去砂中铁屑，再用naoh溶液、10%hcl溶液和水交替清洗数次，干燥后，置于试管或安瓶管中保持2～3cm深，再经干热灭菌后，加入1ml菌种培养液，经充分混匀后，放入真空干燥器中，完全干燥后熔封保存。
也可用二份洗净的砂（经hcl预处理）和一份贫瘠、过筛的黄土搀和后灭菌，再进行菌种保藏。
③硅胶保存法：以6～16目的无色硅胶代替砂子，干热灭菌后，加入菌液。
加菌液时，由于硅胶的吸附热常使温度升高，因而需设法加以冷却。
④磁珠保存法：将菌液浸入素烧磁珠（或多孔玻璃珠）后再进行干燥保存的一种方法。
在螺旋口试管中装入1/2管高的硅胶（或无水caso4），上铺玻璃棉，再放上10～20粒磁珠，经干热灭菌后，接入菌悬液，最后冷藏、室温保藏或减压干燥后密封保藏。
本法对酵母菌很有效，特别适用于根瘤菌，可保存长达两年半时间。
⑤麸皮保存法：在麸皮内加入60%的水，经灭菌后接种培养，最后干燥保藏。
⑥纸片（滤纸）保存法：将灭菌纸片浸入培养液或菌悬液中，常压或减压干燥后，置于装有干燥剂的容器内进行保存。
4、悬液保存法：即使微生物混悬于适当溶液中进行保存的方法。
常用的有，①蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。
本法应注意避免水分的蒸发。
②糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。
除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
5、寄主保存法：即令微生物侵入其寄主后加以保存的方法。
6、冷冻保存法：适用于抗冻力强的微生物。
这些微生物可在其菌体细胞外遭受冻结的情况下而不受损伤，而对其它大多数微生物而言，无论在细胞外冻结还是在细胞内冻结，都会对菌体造成损伤，因此当采用这种保藏方法时，应注意以下几点，①要选择适于冷冻干燥的菌龄细胞；②要选择适宜的培养基，因为某些微生物对冷冻的抵抗力，常随培养基成分的变化而显示出巨大差异；③要选择合适的菌液浓度，通常菌液浓度越高，生存率越高，保存期也越长；④最好在菌液内不添加电解质（如食盐等）；⑤可在菌液内添加甘油等保护剂，以防止在冷冻过程中出现菌体大量死亡的现象。
同样，也可添加各种糖类、去纤维血液和脱脂牛乳等具有良好保护效果的溶剂，但对有些微生物而言，不加保护剂时更有效。
⑥原则上应尽快进行冷冻处理，但当加入保护剂时，可静置一段时间后再进行处理。
⑦就动物细胞而言，应在－20℃范围内以1℃/min左右的速度缓慢降温，此后必须尽快降到贮藏温度；而对绝大多数微生物而言，则不必如此，如结构较为复杂的原虫则可在－35℃范围内进行缓慢降温，而噬菌体则必需采用上述的二阶段法进行冷冻；⑧若进行长期保存，则贮藏温度越低越好；⑨取用冷冻保存的菌种时，应采取速融措施，即在35～40℃温水中轻轻振荡使之迅速融解。
而就厌氧菌来说，则应选择静置融化的措施。
当冷冻菌融化后，应尽量避免再次冷冻，否则菌体的存活率将显著下降。
常用的冷冻保存法包括：①低温冰箱保存法（－20℃、－50℃或－85℃）：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。
保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。
此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。
②干冰保存法（－70℃左右）：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。
③液氮保存法（－196℃）：是适用范围最广的微生物保存法。
其操作步骤如下，a、装安瓶管：使用尽量浓厚的菌体悬浮于含有适当防冻剂（保存霉菌不用防冻剂）的灭菌溶液中，将～1ml 的这种溶液分装于安瓶中，或在装有分散剂的安瓶中直接接种，或将菌丝体琼脂块直接悬浮于分散剂中。
b、熔封安瓶管：若直接贮存于气相液氮中（－150℃～－170℃）时，则不需熔封。
c、检查安瓶管是否熔封良好：即在4℃下，将熔封安瓶管在适当的色素溶液中浸泡2～30分钟后，观察有无色素进入安瓶。
d、缓慢冷却：将熔封安瓶管置于小罐中，然后用液氮气以约1℃/min的速度冷却至－25℃左右，也可在－20℃～－25℃的冰箱内缓慢冷却30～60min。
e、速冷：最后浸入液氮中快速冷却至－196℃。
7、冷冻干燥保存法：其原理是首先将微生物冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分。
事实上，从菌体中除去大部分水分后，细胞的生理活动就会停止，因此可以达到长期维持生命状态的目的。
该方法适用于绝大多数微生物菌种（包括噬菌体和立克次氏体等）的保存。
在进行冷冻干燥时，需注意以下几个问题：a、冷冻干燥前的培养条件：首先检验菌种纯度。
一般地说，将待保存的微生物在营养丰富且容易增菌的培养基上进行培养为宜；菌龄以达到对数生长期为好；若为有芽孢或孢子的微生物，则以芽孢和孢子形成以后进行保存为好；菌液浓度以高为好，如细菌应达到109～1010/ml。
b、菌株号码等的标记：可在安瓶外侧标记或在安瓶内封入标签。
c、安瓶的准备：将安瓶在2%hcl中浸泡过夜，自来水冲洗3次后，蒸馏水刷净，干燥，塞棉塞，贴标签，干热灭菌或温热灭菌后，60℃恒温干燥。
d、添加保护剂：常用的保护剂有脱脂乳、12%蔗糖、加%葡萄糖的普通肉汤以及加%葡萄糖的血清等等。
8、bordelli氏法：取干净的小试管（8×60mm）塞上棉塞，灭菌。
用灭菌的脱脂牛乳洗脱试管斜面上的菌苔，制成浓厚菌悬液。
然后用无菌吸管将菌悬液滴入小试管底部。
每管一滴，然后转动小试管使菌液分散在试管底部的壁上。
标记菌名。
将小试管装在15×150mm的试管中，在大试管底部事先装上1.5cm高的(p2o5或koh)，管口用带玻璃管的橡皮塞塞紧，蜡封。
将大试管与真空泵连通，抽真空至～0.2mm汞柱时，将玻璃管熔封，置室温暗处或冰箱保存。
仪器与材料1、斜面菌种：丝状真菌、酵母菌、芽孢杆菌和无芽孢杆菌各一支。
2、接种用具一套。
3、灭菌物品：1ml、5ml吸管，长滴管，安瓶管，9ml无菌水试管，砂土管，液体石蜡，脱脂牛乳。
其中，液体石蜡的处理为1.5kg/cm2压力灭菌1小时或1kg/cm2压力灭菌3次，每次30分钟。
接着检查是否彻底无菌，即接入肉汤中检查有无杂菌生长。
最后放在60～80℃轰烤以去除水分。
脱脂牛乳的处理为2000rpm 离心10分钟脱脂，然后0.5kg/cm2压力灭菌20分钟，或间歇灭菌3次，经检查无菌后备用。
4、p2o5，无水cacl2各一瓶。
5、真空干燥器，真空泵。
方法1、液体石蜡覆盖法：取待保存的菌种斜面，用5ml无菌吸管向内加入灭菌石蜡，要求液体石蜡高出菌斜面1cm左右，若不够此高度，则常会引起斜面抽干现象。
2、砂土管法：用1ml无菌吸管吸取～菌悬液，滴入砂土管中，充分混匀后，将砂土管放入真空干燥器内，抽干，真空干燥器内需放置无水cacl2。
最后，将干燥好的砂土管取出，迅速于火焰上蜡封管口，并在室温下或冰箱中进行保存。
3、冷冻干燥保藏法：①用灭菌长滴管取出2滴（约）无菌脱脂牛乳，置于无菌安瓶管中，然后用另一支无菌滴管取出等体积的浓菌液，同样置于此安瓶管中，充分混匀。
②集中安瓶管，置于100ml烧杯中，将烧杯装进真空冷冻干燥器的钟罩内，开机并开冷却水后，使菌液在－20℃温度下迅速冻结成固体，然后抽真空使水分升华，2小时后，可以停止冷冻并在稍高的温度下进行干燥，直至全干为止。
③最后取出安瓶管，并将其与真空泵连接，再抽真空后，迅速将安瓶管熔封，最后冰箱保存。
4、甘油管保藏法：在5ml菌种保藏管中，将等体积的菌悬液和40%的甘油充分混匀后，于－20℃冰箱中保存（最好加终浓度20mmol/L氯化镁）。