四国药典胰酶标准浅析

DOI：10. 3969/j. issn. 1005-1678. 2016. 10. 002

四国药典胰酶标准浅析

黄素娟12,刘莉莎\范慧红1A

(1.中国食品药品检定研究院，北京100050;2.中国药科大学，江苏南京211100)

[摘要]本文阐述了中国药典、美国药典、英国药典、日本药局方中胰酶标准的历史沿革，并对现行版四国药典胰酶标准进行比 较和讨论，发现各国药典胰酶标准各有异同，其中活力限度要求差异较大，应予以重视，就效价测定方法而言，美国药典、英国药典的 方法更为合理。

[关键词]胰酶；中国药典;美国药典;英国药典；日本药局方；效价测定

[中图分类号]R921 [文献标识码]A

Analysis on the pancreatin standards of four countries5pharmacopoeia

HUANG Su-juan1’2，LIU Li-sha1，FAN Hui-hong1A

(1. National Institutes for Food and Drug Control, Beijing 100050；2. China Pharmaceutical University,Nanjing 211100,China)

[Abstract ] The history about pancreatin standards in different pharmacopeia, i. e. the Chinese Pharmacopoeia ( C hP) , the United States Pharmacopoeia (USP) , the British Pharmacopoeia (B P)，and the Japanese Pharmacopoeia ( JP) were clarified in this paper. As well as the latest edition of pancreatin standards in different pharmacopeia were compared and discussed. There are many similarities and differences of the pancreatin standards between ChP and the three other pharmacopoeias. We should attach importance to the significant difference of the potency limitation in four countries, pharmacopoeia. Otherwise, the potency test method of pancreatin in USP and BP is more reasonable.

[Keywords ] pancreatin；Chinese Pharmacopoeia；the United States Pharmacopoeia；British Pharmacopoeia；Japanese Pharmacopoeia；potency determination

胰酶是从猪、羊或牛胰中提取的多种酶混合物，主要为胰 蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶。临床上广泛用于消化不良及肝、胰腺疾病引起的消化障碍，尤其是胆囊纤维变性疾病。胰 酶的使用有一定的历史，早在20世纪五六十年代已经被各国 药典收录，至今仍广泛使用。目前，国内现有胰酶药品共有批 准文号84个，其中有2个进口药品，制剂包括片剂、肠溶胶囊 以及复方制剂，相关生产单位53家。通过查阅中国药典、美国 药典、英国药典和日本药局方，发现各国药典胰酶的质量标准 各不相同，尤其是胰酶中胰蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶三酶 的限度、效价单位以及相应测定方法，应当引起重视。本文对 各国药典胰酶标准进行对比讨论，旨在发现异同并为胰酶的质 量研究提供参考。

资助项目：中国食品药品检定研究院2015年中青年发展研究基金(2015A02)

作者简介：黄素娟，女，硕士在读，研究方向：生化药物分析，E-m a il: susuhappyl38@163. com;范慧红，通信作者，女，博士，研究员，研究方向：生化药物分析，E-m a il:shenghuayaoshi@126. com。

1四国药典胰酶收载概况

1.1历史沿革第一版中国药典（1953年版）开始收载胰 酶，最初标准的检测项目仅包含性状、脂肪、酪蛋白转化量。直 至1977年版药典，标准中效价测定修订为采用半定量的比浊法 测定胰酶中胰蛋白酶的活力，方法误差较大;脂肪限度由原标准 不得超过30 mg提高到不得超过20 mg。随着药典不断更新修 订，胰酶的标准要求也有所变化。1985年版药典，胰酶标准增加 了干燥失重项目，开始规定胰酶中胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪 酶三酶活力限度，并建立起相应效价测定方法，一直沿用至今。2010年版药典新增微生物限度。

美国药典于1955年版（第15版）开始收载胰酶，标准要求 检查性状、脂肪、胰蛋白酶与胰淀粉酶活力，其酶活力测定方法 分别为简单的比浊法与比色法。在1970年版（第18版）建立了 新的胰蛋白酶测定方法，以胰酶标准品做标准曲线，采用紫外分 光光度法在280 mn下测定效价。此外，该版本首次要求限定微 生物不得检出沙门氏菌，直至2015年版（第38版）新增该项下 不得检出大肠杆菌。在1975年版(第19版）增加干燥失重测定 项以及胰脂肪酶效价限度。用胰酶标准品绘制标准曲线，并采

用pH指示连续滴定法测定胰脂肪酶活力。在1990年版（第22 版)胰淀粉酶效价测定方法由原比色法更新为使用标准品的相 对法。2000年版(第24版）开始使用胰淀粉酶胰蛋白酶混合标 准品测定胰淀粉酶和胰蛋白酶的效价，胰脂肪酶标准品测定胰 脂肪酶效价，方法至今未变。

英国药典1953年版到1968年版胰酶标准比较简单，规定检 测项目有性状、鉴别、酶活力，其中胰蛋白酶及胰淀粉酶活力测定 方法采用比色法，胰脂肪酶采用pH指示滴定法。1973年版，增加 微生物限度、干燥失重，并开始规定胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉 酶三酶效价，建立效价测定新方法。其中胰蛋白酶以胰酶标准品 做标准曲线，采用紫外分光光度法在280 mn下测定效价。胰脂肪 酶的效价测定以橄榄油为底物，牛胆盐溶液为激活剂，开始使用 标准品定量，胰淀粉酶仍采用比色法定量。1980年版，胰蛋白酶 效价测定法的检测波长由280 mn改为275 nm,胰脂肪酶效价测定 方法中激活剂由原标准牛胆盐溶液改用牛磺胆酸钠。1988年版，胰淀粉酶效价测定方法更新，开始使用标准品进行效价测定。

日本药局方从1986年版（第11版）到1991年版（第12 版），胰酶标准检查项目有性状、脂肪、酸败、干燥失重、炽灼残 渣，并要求对胰蛋白酶和胰脂肪酶活力进行测定，采用了半定量方法。1996年版(第13版）开始限定胰酶中三酶效价并相应建 立新的测定方法。

由四国药典胰酶标准的历史沿革可见，胰酶的标准在长时 间内检测项目的增补及提高较少。效价测定的方法由半定量到 定量，由绝对到相对，逐步提高方法的专属性和合理性。从标准 提高的进程来看，美国药典、英国药典发展要比我国稍快。美国 药典早在1955年版开始要求胰酶效价测定，英国药典于1973年 版增加胰酶中三酶效价测定，中国药典直到1985年版才新增三 酶效价测定项。

1.2现行版四国药典胰酶标准对比现行版四国药典对胰酶定义及性状的描述基本一致，均对胰酶中胰蛋白酶、胰淀粉 酶、胰脂肪酶三酶的效价进行了明确的限度规定，但是由于效价 的定义和测定方法均不相同（见下文），各国限度也均不一致。鉴别项仅有英国药典要求按照相应方法检测胰淀粉酶和胰脂肪 酶。对于脂肪的检测，中国药典和日本药局方要求较美国药典 和英国药典更为严格。此外，日本药局方没有对微生物限定，而 是通过检测酸败来进行安全性检查。各国药典对胰酶的标准中 均没有纯度、有关物质以及重金属等检查项目。胰酶药典中质 控项目规定见表1。

表1现行版四国药典胰酶标准

Tab. 1The latest edition of pancreatin standards in four countries,pharmacopeia

项目ChP2015USP38BP2015JP16鉴别——胰脂肪酶、胰淀粉酶—

脂肪105

°C 2 h,^20 mg105 °C 2 h,^30mg105 °C 2 h,^30mg105 °C 2 h,^20mg 酸败

微生物每g细菌在10 000个，霉菌+酵母菌

在100个，不得检出大肠埃希菌；每

10 g不得检出沙门菌

不得检出沙门氏菌和大肠杆菌

1g不得检出大肠杆菌1〇 g不得

含沙门氏菌

无臭或霉败气味，无味

干燥失重105 T： 4 h,在5.00/。60 T：减压 4 h，在5.0%60 T：减压4 h，在5.0%P205 减压 24 h，在4.0%炽灼残渣———备5%

胰蛋白酶為600单位/g為25 U SP单位/m g為1.4单位/m g為28 000单位/g 效价胰淀粉酶為7 000单位/g為2.0U SP单位/m g為24单位/m g為2 800单位/g 胰脂肪酶為4 000单位/g為25 U SP单位/m g為20单位/m g為960单位/g -表7K未规定，means not provided

2现行版四国药典胰酶效价测定方法比较

酶类药物以活力来确保其有效性，可见效价测定至关重要，但是各国胰酶效价测定法以及酶活力单位的定义都各有不同。胰酶主要含胰蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶，下面就现行版四国 药典分别对此三酶的效价测定方法进行阐述。

2.1胰蛋白酶目前中国、美国、英国药典中胰蛋白酶测 定原理均为:胰蛋白酶可催化酪蛋白水解生成不被三氯醋酸沉 淀的脉、肽、胨及氨基酸等，其中酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸在 275 ~280 mn波长下有较大吸收，可利用紫外分光光度法测定吸光度值以确定相应的胰蛋白酶活力单位[56]。但是三国测定方 法仍存在差异，中国药典是以酪氨酸作为对照进行定量测定，美 国药典、英国药典从开始建立方法时就均采用标准品绘制标准 曲线对胰蛋白酶活力进行定量。日本药局方所用胰蛋白酶效价 测定方法为福林酚法，原理是利用蛋白质或多肽分子中有带酚 基酪氨酸或色氨酸，在碱性条件下可使福林试剂中的磷钼酸化 合物还原成蓝色，用紫外-可见分光光度法在660 mn波长下测定 反应液的吸光度值，进而确定胰蛋白酶效价，该方法相对简便，但专属性差。