菌种培养与分离纯化实验报告
苹果霉菌培养实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 探究苹果表面霉菌的生长情况。
2. 学习霉菌的培养、分离和纯化方法。
3. 观察霉菌的形态特征,并进行初步鉴定。
二、实验材料与试剂1. 实验材料:- 新鲜苹果若干个- 无菌水- 无菌棉签- 灭菌的培养基(如沙堡琼脂培养基)- 灭菌的接种环- 灭菌的玻璃器皿(如培养皿、试管等)2. 实验试剂:- 酒精- 碘酒- 水合氯醛- 水解乳糖三、实验方法与步骤1. 样品处理:- 取新鲜苹果,用无菌水清洗表面,用无菌棉签擦拭表面,收集擦拭液。
- 将擦拭液进行梯度稀释,以便后续分离和纯化。
2. 霉菌分离:- 将稀释后的样品分别接种于沙堡琼脂培养基上。
- 将接种后的培养基置于恒温培养箱中,37℃培养2-3天。
3. 霉菌纯化:- 观察培养基上生长的菌落,选取单菌落进行纯化。
- 使用接种环挑取单菌落,接种于新的沙堡琼脂培养基上。
- 重复上述步骤,直至获得纯化的霉菌菌株。
4. 霉菌形态特征观察:- 将纯化的霉菌菌株接种于沙堡琼脂培养基上,37℃培养2-3天。
- 观察菌落形态,包括菌落大小、颜色、边缘、表面等特征。
5. 霉菌鉴定:- 对纯化的霉菌菌株进行形态学观察,包括菌丝形态、孢子形态等。
- 根据形态特征,对霉菌进行初步鉴定。
四、实验结果与分析1. 霉菌分离:- 在沙堡琼脂培养基上,观察到多种形态的菌落,表明苹果表面存在多种霉菌。
2. 霉菌纯化:- 通过纯化操作,获得纯化的霉菌菌株。
3. 霉菌形态特征观察:- 纯化的霉菌菌株在沙堡琼脂培养基上形成圆形、表面光滑、边缘整齐的菌落。
- 菌丝呈白色,有横隔,无色或略带黄色。
- 孢子呈椭圆形,无色。
4. 霉菌鉴定:- 根据形态特征,初步鉴定纯化的霉菌菌株为青霉属。
五、实验结论1. 苹果表面存在多种霉菌,其中青霉属较为常见。
2. 通过培养、分离和纯化操作,可以有效地从苹果表面分离出霉菌。
3. 霉菌的形态特征可以用于初步鉴定霉菌种类。
六、实验注意事项1. 实验过程中要注意无菌操作,避免污染。
细菌分离提纯实验报告
细菌分离提纯实验报告细菌分离提纯是一项常见的实验技术,通过这项技术可以从混合菌液中分离出单一的、纯净的细菌菌落。
这项技术在生物学、医学、环境科学等领域都有广泛的应用。
细菌分离提纯的实验步骤主要包括:取样、制备稀释液、涂布平板、培养菌落、筛选菌落、鉴定细菌。
首先,取样是细菌分离提纯的第一步。
当我们需要分离某种细菌时,我们需要从含有该种细菌的样品中取样。
比如,我们可以从水样、土壤样、食品样、人体样等中取样。
然后,制备稀释液。
我们对取样物进行稀释,使得其中的细菌数目降到一定范围内,以便于后续的细菌分离。
通常我们会选择使用生理盐水、缓冲液等来制备稀释液。
接下来,将稀释液涂布在平板上。
我们通常会使用琼脂平板来进行细菌分离提纯实验。
将稀释液均匀涂布在琼脂平板上,然后用培养皿盖好,放入恒温培养箱中进行培养,通常在适宜的温度下进行培养24-48小时。
培养过程中,我们可以观察到平板上出现的不同形态的菌落。
可以根据菌落的形态、颜色、大小等特征来进行筛选。
一般我们会选择孤立的、圆形的、透明或者白色的菌落作为目标菌落。
当我们筛选出目标菌落后,我们需要进行鉴定。
通常我们可以根据细菌的生理生化特性、抗生素敏感性、分子生物学特征等来鉴定细菌的种属。
可以使用生理生化试剂盒、PCR技术、16S rRNA测序等方法进行鉴定。
最终,根据鉴定结果,我们可以获得目标细菌的纯种菌株。
这些纯种菌株可以用于进一步的实验研究,如基因克隆、发酵生产等。
细菌分离提纯实验需要注意以下几点。
首先,取样要注意无菌操作,避免采样器具的污染。
其次,涂布平板时要注意均匀涂布,以避免菌落的融合。
另外,培养过程中要注意恒温,避免细菌在高温或低温下死亡。
总之,细菌分离提纯是一项重要的实验技术,在微生物学研究中起到了至关重要的作用。
通过细菌分离提纯技术,我们能够从混合菌液中得到纯净的细菌菌落,为后续的实验提供了可靠的菌种资源。
这项技术的应用涵盖了多个领域,对于推动生物科学的发展具有重要的意义。
实验六 土壤中真菌纯化、分离和培养
土壤稀释液的制备和稀释液的取样
2、分离方法 采用稀释平板分离法。又可分为两种 方法。
混菌法和涂抹法。
混 菌 法
涂 抹 法
3、培养
将上述接种土壤悬液的平板 倒置于28℃培养3-5d。
4、挑菌纯化 5、计数
6、菌种保存
将分离到的真菌转接到PDA斜面上培 养,待长好后,置于冰籍中保存,必要时 进行深入研究。
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实验六
土壤中真菌分离、纯化和培养
一、目的要求
掌握从土壤中初步分离培养真菌的方法, 从而获得真菌纯培养技能;了解基本接 种技术。
二、实验原理
土壤是微生物生活的大本营,是寻找和发 现有重要应用潜力的微生物的主要菌源。 不同土样中各类微生物数量不同,一般土 壤中细菌数量最多;其次为放线菌和霉菌。 本次实验从土壤中分离真菌。
三、仪器和材料
样品:新鲜土壤 培养基:加有2ml链霉素的PDA培养基。 无菌水:装有9mL无菌水的试管4支。 其它:无菌培养皿4皿、无菌吸管、酒精 灯、培养箱等 。
四、真菌纯种分离的操作方法
1、土壤稀释液的制备
用“稀释平板计数法”中的方法 进行,将土样稀释至10-5。
将1瓶土壤菌液(称取土样10g放入盛90 mL无菌水)和4管9mL的无菌水排列好, 按10-1、10-2、10-3、10-4及10-5依次编号。 在无菌操作条件下,用lmL无菌移液管吸 取lmL10-1浓度的菌液于一管9mL无菌水 中,将移液管吹洗三次,摇匀即为10-2浓 度菌液。同样方法,依次稀释到10-5。 注意:在土壤稀释过程中,吸取不同梯 度的菌液需换用不同的吸管。
细菌分离纯化实验报告
细菌分离纯化实验报告本次实验的目的是通过细菌分离纯化的方法,从混合菌液中分离出目标菌株,并进行纯化,以获得纯净的目标菌株用于后续实验。
实验设备和试剂:1. 细菌培养平板:含有选择性抑制其他细菌生长的培养基。
2. 培养基:适用于目标菌株的培养基,如营养琼脂培养基。
3. 微量离心管:用于样品的处理和离心。
4. 恒温恒湿箱:调节实验环境的湿度和温度。
5. 显微镜:观察细菌形态和数量。
6. 干燥箱:用于处理培养平板和培养皿。
7. 试剂:如无菌生理盐水、酒精,用于消毒和处理细菌样品。
实验步骤:1. 预处理培养基和培养皿:将培养基热解,倒入无菌培养皿中,待凝固。
2. 提取目标菌株:取一定量的混合菌液,加入微量离心管中,并在1000rpm条件下离心10分钟。
3. 厌氧处理(如需要):若目标菌株是厌氧菌,则在无氧条件下进行操作。
4. 稀释样品:取离心后的上清液,逐渐进行稀释,直至可以观察到单个菌落形成的板。
5. 涂布培养:取少量稀释液,利用无菌培养棒均匀涂布在固体培养基上,避免菌落交叉生长。
6. 培养和筛选:将涂布好的培养皿面朝下放入恒温恒湿箱中,以适当的温度和时间进行培养。
根据菌落形态进行初步筛选,挑选出目标菌落。
7. 细菌分离:用无菌培养棒或酒精灯消过菌的鉴别针,在富含目标菌株的培养基上从相应菌落上轻轻刮取少量菌液,涂布于无菌培养基上。
8. 纯化:再次进行培养,重复步骤7直至获得明显的单菌落。
根据菌落形态和生理特性进行进一步鉴定,如果需要较纯净的目标菌株,可进行多次次传代。
9. 存储:将纯化的目标菌株进行保存,可在干燥箱中以适当的温度和湿度保存,或使用冰冻保存。
实验结果与讨论:通过上述实验步骤,我们成功地从混合菌液中分离出了目标菌株,并对其进行了纯化。
在筛选过程中,我们根据菌落形态和生理特性来初步判断目标菌株。
而通过细菌分离和纯化,我们能够获得更纯净的目标菌株。
然而,在实验中可能会遇到一些困难和问题。
例如,在筛选过程中,可能会出现非目标菌落过多的情况,导致目标菌株的分离速度较慢。
实验3:细菌的分离与纯化
实验 3 微生物的纯种分离培养微生物广泛地分布在自然界的土样、水体、空气、动植物体表及人体、动物体的排泄物中。
它们以单个的菌体、无性孢子和芽孢的形式存在。
由于单一的自然界环境并不能完全满足微生物对水、空气、营养物质、温度、pH的综合要求,它们往往以散居”的状态出现,而不能形成人们肉眼可直接观察到菌落。
不同的自然环境中,微生物的种类和数量差异很大。
肥沃的土壤,富养化的水体,是许多微生物麇集、孳生的场所,在这里存活着能分解淀粉、蛋白质、脂肪、纤维素、木质素、果胶、农药、含磷有机物(卵磷脂、肌醇、核酸等)、石油以及溶解铜矿的细菌、放线菌、真菌等多种类的微生物,如何根据微生物的生理要求,按照人类的需求,将它们从自然界中分离出来,获得纯种,发挥微生物的特长为人类的生产和生活服务,是微生物研究中最基础的实验技术。
一、实验目的:1.学会将混杂的各种微生物分离成纯种,统计分析样品中微生物的种类和数量的方法。
2.学会从菌落及培养特征区分细菌、酵母菌、放线菌和霉菌。
3.学会好氧微生物平板及斜面培养的方法。
二、实验原理:在自然界中,微生物的种类很多,数量很大,为了获得单个菌体,首先必须把要分离的材料进行适当的释放,按其生长所需要的条件,使其在平板上,由一个菌体繁殖成单个菌落,这样,就能从中挑选出所需要的纯种,由于细菌、放线菌和霉菌所要求的营养条件不同,利用不同的培养基制成平板进行分离,然后从菌落形态上的差异,可以把细菌、放线菌和霉菌三大类群区分并可计算出其数量,分别接种到试管斜面上,然后,在平板上反复进行分离培养,最后可获得纯种。
三、实验材料和用具:1.材料(1)土壤样品( 2 )培养基:①牛肉膏蛋白胨琼脂培养基牛肉膏蛋白胨培养基(% )牛肉膏0.3-0.5g 蛋白胨1.0g NaCl 0.5g 琼脂2.0g 蒸馏水100mL pH 7.2-7.4 ,0.1Mpa 压力,灭菌20-30分钟。
配制液体培养基时不加琼脂;半固体培养基加0.3-0.5%琼脂。
病菌纯化培养实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握病菌纯化培养的基本原理和方法。
2. 熟悉无菌操作技术,确保实验结果的准确性。
3. 通过实验,加深对病菌生长、繁殖特性的理解。
二、实验原理病菌纯化培养是微生物学实验中的重要环节,其目的是从混杂的微生物群体中分离出单一菌株。
通过选择合适的培养基和适当的培养条件,可以使目标病菌生长繁殖,同时抑制其他微生物的生长,从而获得纯培养。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 土壤样品- 病菌培养皿(平板)- 病菌接种环- 病菌培养箱- 显微镜- 病菌分离培养基- 生理盐水- 75%酒精- 灭菌棉签- 紫外线消毒灯2. 实验仪器:- 灭菌锅- 灭菌器- 高压蒸汽灭菌器- 电子天平- 移液器- 恒温水浴锅四、实验步骤1. 样品采集与处理:- 从土壤中采集适量样品,放入无菌容器中。
- 将样品用生理盐水稀释,制成10^-1、10^-2、10^-3等不同浓度的稀释液。
2. 平板划线法分离:- 将稀释液分别涂布在平板分离培养基上。
- 使用无菌接种环,按照平板划线法进行划线操作。
- 将划线后的平板倒置,放入培养箱中,在适宜的温度和湿度下培养。
3. 单菌落挑取:- 观察平板上的菌落,选择单个、形态一致、生长良好的菌落。
- 使用无菌接种环,将单个菌落挑取至新的平板分离培养基上。
- 重复上述操作,直至获得纯培养。
4. 纯培养鉴定:- 将纯培养的病菌进行显微观察,记录其形态、大小、颜色等特征。
- 对纯培养的病菌进行生化实验,鉴定其种类。
5. 结果记录与分析:- 将实验结果进行记录和分析,包括菌落特征、显微观察结果、生化实验结果等。
五、实验结果与分析1. 菌落特征:- 观察到纯培养的病菌菌落呈圆形、光滑、湿润、边缘整齐,菌落大小约为1-2mm。
2. 显微观察结果:- 显微镜下观察到纯培养的病菌为革兰氏阴性菌,细胞呈杆状,长度约为1-2μm。
3. 生化实验结果:- 纯培养的病菌在葡萄糖、乳糖、麦芽糖等糖类培养基上生长良好,产酸产气。
细菌的纯化实验报告
一、实验目的1. 掌握细菌纯化的基本原理和方法。
2. 熟悉培养基的制备与灭菌技术。
3. 学习细菌的分离纯化过程,提高无菌操作技能。
二、实验原理细菌纯化是通过一系列的分离和纯化步骤,从混杂的微生物群体中分离出单一菌种的过程。
这个过程通常包括以下几个步骤:样品的采集、接种、培养、观察和鉴定。
三、实验材料1. 样品:土壤、水体、空气等。
2. 培养基:牛肉膏蛋白胨培养基、营养琼脂培养基等。
3. 仪器:高压灭菌锅、无菌操作台、接种环、试管、培养皿等。
4. 试剂:无菌水、生理盐水、酚红指示剂、无菌棉签等。
四、实验步骤1. 样品的采集:从土壤、水体、空气等样品中采集适量样品,并使用无菌棉签进行取样。
2. 样品的处理:将采集到的样品进行适当处理,如研磨、稀释等,以便于后续的接种。
3. 培养基的制备与灭菌:- 称取适量的牛肉膏、蛋白胨、氯化钠等原料,按照比例混合。
- 将混合物加入适量的无菌水,搅拌均匀,煮沸5-10分钟,去除杂质。
- 将煮沸后的培养基分装至试管或培养皿中,用高压灭菌锅进行灭菌,压力为1.05kg/cm²,时间为15分钟。
4. 接种:- 在无菌操作台上,用无菌接种环取适量样品,接种至牛肉膏蛋白胨培养基平板上。
- 将接种后的平板倒置放置,在恒温培养箱中培养24-48小时。
5. 分离纯化:- 观察平板上的菌落,挑选单菌落进行进一步的纯化。
- 将单菌落接种至牛肉膏蛋白胨培养基试管中,进行斜面培养。
6. 鉴定:- 观察菌落的特征,如颜色、形状、大小等。
- 对纯化的菌种进行生化实验,如糖发酵试验、抗生素敏感性试验等,以鉴定菌种。
五、实验结果1. 在牛肉膏蛋白胨培养基平板上,观察到不同形态的菌落。
2. 通过分离纯化,得到单一菌种。
3. 通过鉴定实验,确定菌种为金黄色葡萄球菌。
六、实验讨论1. 在实验过程中,无菌操作至关重要,要确保操作环境、工具和试剂的无菌。
2. 接种方法对菌落的生长和分离纯化有很大影响,要选择合适的接种方法。
细菌培养菌实验报告
一、实验目的1. 学习并掌握细菌分离培养的基本原理和操作步骤。
2. 熟悉培养基的制备、灭菌及接种方法。
3. 了解细菌菌落的特征及其观察方法。
4. 掌握细菌纯化技术。
二、实验原理细菌培养是研究细菌生理、生化特性及遗传变异的重要手段。
通过制备适宜的培养基、接种细菌、培养、观察菌落特征等步骤,可以分离纯化细菌,为后续研究提供基础。
三、实验材料与试剂1. 材料:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、无菌水、无菌棉签、无菌接种环、无菌试管、无菌培养皿、细菌菌种(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等)。
2. 试剂:氯化钠、氯化钾、硫酸镁、碳酸氢钠、氢氧化钠、琼脂、牛肉膏、蛋白胨等。
四、实验步骤1. 培养基制备- 称取牛肉膏10g、蛋白胨10g、氯化钠5g、氯化钾1g、硫酸镁0.5g、碳酸氢钠2g,加入适量无菌水溶解。
- 加入琼脂20g,加热溶解。
- 调整pH至7.2-7.4。
- 分装至无菌培养皿,封口,高压灭菌(121℃,15min)。
2. 接种- 将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌分别接种于三个无菌平板上。
- 使用无菌棉签,分别蘸取三种菌液,均匀涂布于平板表面。
- 倒置平板,置于37℃恒温培养箱中培养24h。
3. 观察菌落特征- 观察菌落大小、形状、颜色、边缘、表面等特征。
- 记录不同菌种的菌落特征。
4. 纯化细菌- 在平板上挑取单个菌落,接种于新的平板上。
- 重复以上步骤,直至获得纯化细菌。
5. 结果记录与分析- 记录不同菌种的菌落特征,包括大小、形状、颜色、边缘、表面等。
- 分析不同菌种之间的差异。
五、实验结果与分析1. 金黄色葡萄球菌菌落特征:圆形、隆起、金黄色、边缘整齐、表面光滑。
2. 大肠杆菌菌落特征:圆形、扁平、白色、边缘整齐、表面光滑。
3. 枯草芽孢杆菌菌落特征:圆形、扁平、白色、边缘整齐、表面粗糙。
六、实验结论1. 成功分离培养出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌三种细菌。
2. 通过观察菌落特征,初步判断分离培养的细菌种类。
分离细菌的实验报告
一、实验目的1. 学习细菌分离和纯化的基本方法。
2. 掌握平板划线法和稀释涂布平板法分离纯化细菌。
3. 了解细菌纯化过程中的注意事项。
二、实验原理细菌分离和纯化是微生物学实验中的重要技术,通过将混合菌液中的细菌分离出来,得到单个菌落,从而研究细菌的生物学特性。
本实验采用平板划线法和稀释涂布平板法进行细菌分离。
1. 平板划线法:将菌液滴在琼脂平板上,用无菌接种针划线,使菌液在平板上逐渐稀释,最终形成单个菌落。
2. 稀释涂布平板法:将菌液进行一系列稀释,将适量稀释液涂布在琼脂平板上,使菌液在平板上稀释至形成单个菌落。
三、实验材料1. 实验试剂:牛肉膏蛋白胨培养基、无菌水、生理盐水、无菌棉签、无菌接种针、酒精灯、无菌培养皿、移液器、显微镜等。
2. 实验菌种:待分离的细菌菌液。
四、实验步骤1. 制备牛肉膏蛋白胨培养基:按照实验要求,将牛肉膏蛋白胨培养基溶解于蒸馏水中,调整pH至7.0-7.2,分装于无菌培养皿中,高压灭菌。
2. 菌液制备:将待分离的细菌菌液用无菌生理盐水进行适当稀释。
3. 平板划线法分离:(1)将牛肉膏蛋白胨培养基冷却至50℃左右,倒入无菌培养皿中,待凝固。
(2)用无菌棉签蘸取适量菌液,在平板上划线。
(3)将平板倒置,放入37℃恒温培养箱中培养24小时。
4. 稀释涂布平板法分离:(1)将牛肉膏蛋白胨培养基冷却至50℃左右,倒入无菌培养皿中,待凝固。
(2)将菌液进行一系列稀释,取适量稀释液涂布在平板上。
(3)将平板倒置,放入37℃恒温培养箱中培养24小时。
5. 观察结果:观察平板上的菌落生长情况,记录菌落特征。
五、实验结果与分析1. 平板划线法:在平板上观察到多个菌落,其中有些菌落可能为单个菌落,但有些菌落可能为多个细菌聚集而成。
2. 稀释涂布平板法:在平板上观察到单个菌落,说明菌液已成功分离。
六、实验讨论1. 平板划线法分离细菌时,划线次数和划线速度对分离效果有较大影响。
划线次数过多或过少、划线速度过快或过慢,均可能导致分离效果不佳。
土壤菌株筛选实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握土壤中微生物的分离与纯化方法。
2. 了解不同微生物的形态特征和生理特性。
3. 筛选具有特定生理功能的菌株。
二、实验原理土壤中存在着大量的微生物,包括细菌、真菌、放线菌等。
通过选择合适的培养基和分离方法,可以从土壤中分离出具有特定生理功能的菌株。
本实验采用平板划线法、涂布分离法等方法,对土壤样品进行分离纯化,并对筛选出的菌株进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 材料:土壤样品、牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂糖、无菌水、无菌平板、无菌试管、接种环、显微镜等。
2. 仪器:恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅、电子天平、显微镜等。
四、实验步骤1. 样品处理:取一定量的土壤样品,用无菌水进行稀释,制成10^-3、10^-5、10^-7等不同浓度的土壤悬液。
2. 分离纯化:(1)平板划线法:将不同浓度的土壤悬液涂布于牛肉膏蛋白胨琼脂平板上,用接种环进行划线分离,培养24小时后观察菌落形态。
(2)涂布分离法:将不同浓度的土壤悬液涂布于牛肉膏蛋白胨琼脂平板上,用无菌玻璃棒轻轻涂布,培养24小时后观察菌落形态。
3. 菌落鉴定:(1)形态特征观察:观察菌落的大小、形状、颜色、边缘、表面等特征,记录下来。
(2)生理生化试验:对筛选出的疑似菌株进行生理生化试验,如革兰氏染色、氧化酶试验、过氧化氢酶试验等,以确定菌株的属种。
4. 结果分析:根据形态特征和生理生化试验结果,对筛选出的菌株进行鉴定,并统计不同生理功能菌株的筛选数量。
五、实验结果与分析1. 菌落形态特征观察:在牛肉膏蛋白胨琼脂平板上,观察到不同形态的菌落,如圆形、卵圆形、长条形等,颜色有白色、黄色、红色等。
2. 生理生化试验结果:(1)革兰氏染色:部分菌株为革兰氏阳性菌,部分菌株为革兰氏阴性菌。
(2)氧化酶试验:部分菌株产生氧化酶,部分菌株不产生氧化酶。
(3)过氧化氢酶试验:部分菌株产生过氧化氢酶,部分菌株不产生过氧化氢酶。
3. 结果分析:根据形态特征和生理生化试验结果,筛选出以下具有特定生理功能的菌株:(1)革兰氏阳性菌:可能为葡萄球菌、链球菌等。
微生物的分离与纯化实验报告结果
微生物的分离与纯化实验报告结果
实验报告标题:微生物的分离与纯化实验结果
摘要:
1.引言
微生物是指在肉眼无法直接观察到的生物体,生活在各种环境中,包括土壤、水体、空气和动植物的体内等。
微生物在环境中起着重要的生态功能和生物转化作用,对维持生态平衡和生物圈的稳定具有重要作用。
研究微生物的分离与纯化方法对于了解微生物的生物学特性和应用价值具有重要意义。
2.材料与方法
2.1实验材料
(列举实验所需的材料,如培养基、培养皿等)
2.2实验方法
(详细描述实验的步骤,如样品处理、分离过程、纯化步骤等)
3.实验结果与讨论
3.1样品处理结果
(描述肠道样品处理过程中的观察结果,如样品的外观、颜色、气味等)
3.2微生物分离结果
(描述微生物分离过程中的观察结果,如培养基上的菌落形态、颜色、大小等)
3.3微生物纯化结果
(描述微生物纯化过程中的观察结果,如通过重复接种获得纯化培养
物的观察结果)
3.4微生物形态特征与生理特性分析
(对纯化的微生物培养物进行形态特征与生理特性的观察与分析)
4.结论
通过本实验的分离与纯化方法,我们成功获得一株纯化的微生物培养物。
对该培养物进行形态特征与生理特性的观察与分析表明,该微生物呈
现出特定的形态特征,并具有一定的生理特性。
这证明了本实验所采用的
分离与纯化方法的有效性,为后续的微生物研究奠定了基础。
注:此为辅助写作结果,实际的实验报告应根据实际实验结果进行详
细描述与分析。
细菌分离培养实训报告
一、实验目的1. 掌握细菌分离培养的基本原理和操作方法。
2. 了解不同细菌的生长特性和菌落形态。
3. 培养实际操作能力,为后续的微生物学学习和研究打下基础。
二、实验原理细菌分离培养是微生物学实验中的一项基本操作,通过将混合菌液中的细菌进行分离、纯化,得到单一菌种。
常用的分离方法有平板划线法和稀释涂布平板法。
本实验采用平板划线法进行细菌分离培养。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:大肠杆菌菌种、牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、接种环、酒精灯、无菌水、试管、试管架、培养皿等。
2. 仪器:恒温培养箱、电子天平、生物安全柜、无菌操作台等。
四、实验步骤1. 培养基制备:称取牛肉膏蛋白胨琼脂干粉,加入适量无菌水,混匀后煮沸溶解,待冷却至50℃左右,倒入培养皿中,待凝固。
2. 接种:将大肠杆菌菌种接种于牛肉膏蛋白胨琼脂平板培养基上,用接种环在平板表面进行划线。
3. 恒温培养:将划线平板倒置放入恒温培养箱中,培养24小时。
4. 观察菌落:观察菌落形态,记录菌落特征,如大小、形状、颜色、边缘等。
5. 纯化菌种:根据菌落特征,挑选单个菌落进行纯化。
将纯化后的菌落接种于新的牛肉膏蛋白胨琼脂平板培养基上,培养24小时,再次观察菌落形态,确认纯化成功。
五、实验结果与分析1. 菌落形态:大肠杆菌菌落呈圆形、光滑、湿润、边缘整齐,直径约为2-3mm,白色。
2. 纯化菌种:通过观察菌落特征,挑选出单个菌落进行纯化,成功得到纯化的大肠杆菌。
六、实验总结本次细菌分离培养实训,使我掌握了细菌分离培养的基本原理和操作方法。
通过实验,我了解到不同细菌的生长特性和菌落形态,提高了实际操作能力。
在实验过程中,我学会了无菌操作、接种、观察和记录等技能,为后续的微生物学学习和研究打下了基础。
七、注意事项1. 操作过程中要严格遵循无菌操作原则,避免污染。
2. 接种环要灼烧灭菌,待冷却后再进行划线操作。
3. 观察菌落时,要仔细观察菌落形态,准确记录。
4. 培养过程中,要注意培养箱温度和湿度,保证菌落正常生长。
微生物细菌分离培养实验报告
微生物细菌分离培养实验报告土壤微生物的分离培养技术实验报告重庆大学研究生专业实验教学实验报告书实验课程名称:实验指导教师:学院: 专业及类别: 学号: 姓名: 实验日期: 成绩:重庆大学研究生院制一、实验目的1、了解分离与纯化微生物的基本原理及方法;2、了解倒平板配制土豆培养基的方法与平板划线分离的基本操作技术;;3、学习平板菌落计数的基本原理和方法,并掌握其基本技能;4、初步观察来自土壤中的几类微生物的菌落形态特征,并能判断菌的类型。
二、实验原理1、培养基的种类培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质,用以培养、分离、鉴别、保存各种微生物或积累代谢产物。
一般的培养基应包含适合微生物生长的6大营养素即水分、碳源、氮源、能源、无机盐和生长因子。
培养基的种类很多,根据培养成分的不同可分为天然培养基、合成培养基与半合成培养基;根据物理状态的不同又可分为液体培养基和固体培养基。
微生物的分离、纯化、记数等方面的研究常常使用的就是固体培养基。
本实验就是使用的固体培养基。
已配制好的培养基必须立即灭菌,如来不及灭菌,应暂存冰箱,以防止其中微生物生长繁殖而消耗养分和改变培养基酸碱度所带来不利影响。
培养基的原材料来源十分广泛,本实验采用的原材料为土豆。
2、接种方法与无菌接种将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术称之为接种。
接种是微生物实验及科学研究中的一项最基本的操作技术。
接种的关键是要严格的进行无菌操作。
微生物的接种方法很多,划线接种、三点接种、穿刺接种、混浇接种与涂布接种是几种常用的接种方法。
划线接种是最常用的接种方法,即在固体培养基表面作来回直线形的移动,就可以达到接种的目的。
常用的接种工具为接种环、针等。
在斜面接种和平板划线中就常用此法。
三点接种是把少量的微生物接种在平板表面,成等边三角形的三点,让它各自独立形成菌落后,来观察研究它们的形态。
研究霉菌形态时就常用此法。
菌种的制备实验报告
菌种的制备实验报告本实验的目的是制备一种菌种,用于后续的微生物实验或应用。
实验原理:菌种的制备可以通过无菌培养的方法进行。
一般分为四个步骤:接种、分离纯化、培养和保存。
首先,需要选择目标菌种并进行接种。
接种时,必须保持无菌操作,以避免其他菌种的污染。
然后,通过分离纯化的方法将目标菌种与其他菌种进行分离。
分离纯化的方法常见的有均匀涂布法、垫洗法等。
分离纯化后,选择经过分离纯化的菌落,进行培养。
培养时,需要选择适宜的培养基,控制适宜的培养条件,以保证菌种的繁殖。
最后,需要制备适当的保存条件,以保存制备好的菌种,以备后续的使用。
实验材料:1. 目标菌种2. 培养基及培养基成分3. 灭菌器材(如培养皿、试管、移液器、无菌棉签等)4. 培养箱5. 培养基制备器材(如天平、游标瓶、分注器等)实验步骤:1. 准备培养基:根据目标菌种的需求,选择适宜的培养基。
准备培养基的原材料,并按照预定比例称量和配制。
将培养基倒入培养皿或试管中,用高压蒸汽灭菌器对培养基进行灭菌处理。
2. 环境无菌准备:在实验台面上放置无菌工作台或将实验台用火酒擦拭消毒。
同时,准备所需的无菌操作器具,如试管、培养皿、无菌吸管等。
3. 目标菌种接种:通过无菌技术,将目标菌种接种到培养基上。
一般情况下,可以用火酒灯对吸管、移液器等工具进行高温灭菌处理。
然后,取少量的目标菌种,将其接种到培养基上。
使用无菌吸管或无菌棉签等工具,将菌种均匀涂布到培养基上。
4. 培养:将涂抹好菌种的培养皿放入培养箱中,控制适宜的培养条件,如温度、湿度、光照等。
根据目标菌种的需要,培养时间一般在24-48小时内。
5. 分离纯化:根据培养结果,选择纯净的菌落进行分离。
使用无菌吸管或无菌棉签将菌落分离到其他培养皿中,最后进行单菌落的纯化培养。
6. 保存:将分离纯化后的菌种保存在适宜的保存条件下。
常见的保存方法有冷冻保存和冷冻干燥保存。
在保存前,可以使用无菌琼脂地洞验证保存的菌种是否纯净。
分离观察酵母菌实验报告
1. 学习微生物分离纯化的基本原理和方法。
2. 掌握酵母菌的分离纯化技术。
3. 观察酵母菌的形态和培养特征。
二、实验原理酵母菌是一种单细胞真菌,广泛存在于自然界中。
本实验通过平板划线法将混合菌液中的酵母菌分离纯化,并在适宜的培养基上培养,观察其形态和特征。
三、实验材料1. 菌种:啤酒酵母菌2. 培养基:酵母膏葡萄糖琼脂培养基(YGA)3. 工具:接种环、酒精灯、无菌试管、无菌棉签、培养皿、显微镜等四、实验方法1. 菌种活化:将啤酒酵母菌菌种接种于YGA培养基中,在28℃恒温培养箱中培养24小时。
2. 分离纯化:取活化后的酵母菌菌液,用无菌棉签涂布于YGA平板上,用接种环进行平板划线,划线时注意不要划破菌落。
将平板倒置于28℃恒温培养箱中培养24小时。
3. 观察与计数:观察平板上的菌落,记录菌落形态、大小、颜色等特征。
用无菌棉签挑取单个菌落,接种于新的YGA平板上,重复上述操作,直至获得纯化的酵母菌。
4. 酵母菌形态观察:将纯化的酵母菌接种于YGA培养基中,在28℃恒温培养箱中培养24小时,用无菌吸管吸取少量菌液,滴加于载玻片上,用无菌盖玻片覆盖,在显微镜下观察酵母菌的形态。
五、实验结果1. 菌落特征:酵母菌菌落呈圆形,表面光滑,湿润,边缘整齐,颜色为乳白色。
2. 酵母菌形态:酵母菌为单细胞,呈椭圆形或卵圆形,细胞核明显,细胞壁较厚。
1. 通过平板划线法,成功分离纯化了酵母菌,表明该方法适用于微生物的分离纯化。
2. 酵母菌在YGA培养基上生长良好,菌落特征明显,便于观察和识别。
3. 显微镜下观察酵母菌的形态,有助于了解其生物学特性。
七、实验结论1. 本实验成功分离纯化了酵母菌,掌握了酵母菌的分离纯化技术。
2. 通过观察酵母菌的形态和培养特征,了解了酵母菌的基本生物学特性。
3. 平板划线法是一种简单、有效的微生物分离纯化方法,适用于实验室研究。
八、实验注意事项1. 实验过程中要注意无菌操作,防止杂菌污染。
微生物的分离和纯化实验报告
微生物的分离和纯化实验报告实验目的:本实验旨在探究微生物分离和纯化的方法,经过分离和纯化后,得到单一纯种菌液。
同时,也能够使学生了解微生物分离和纯化的基本原理,并掌握常见的微生物分离和纯化方法。
实验原理:微生物的分离和纯化是一项非常重要的工作。
在微生物的研究和生产中,首先需要得到单一纯种菌液,因为纯种菌液才能进行严格的实验控制和可靠的测定。
微生物分离的方法一般包括增殖法、培养法、过滤法、离心法等。
而纯化的方法则一般有染色法、板块法、过筛法等多种方法。
本实验中的分离和纯化工作采用了增殖法和染色法。
增殖法是指利用菌落增殖的现象来分离单一纯种菌,而染色法则是指通过不同的着色方法,将微生物区分为不同的种类,从而进行微生物分离和纯化的方法。
常用的染色方法有革兰染色、抗酸染色等。
在本实验中,我们采用了革兰染色这一经典的染色方法。
实验步骤:1、制备分离培养基配制分离液,以波尔多液、胰蛋白胨、葡萄糖制成培养基,并加入20ug/ml氯霉素。
2、分离样品取所需数量样品,经过适当的处理,比如切碎、摇匀等,制备样板。
3、制备菌液将样品加入分离培养基中,然后在恒温摇床上震荡培养24小时,形成单一菌种的细菌培养液。
4、革兰染色将接种在玻璃片上的菌液进行革兰染色。
a、在玻璃片上制作菌液薄膜。
b、将薄膜上的细菌经过固定,用碘液水洗,以去色。
c、淋加革兰染色溶液,使之染色。
d、过水洗、双氧水漂洗,洗去多余革兰染色剂和已触及的碘素。
e、使用显微镜观察。
5、单一菌种分离通过以上实验过程,我们可已得到单一纯种菌液,而且还可以将它们放入固体培养基中培养,以便于观察和下一步实验。
实验结果:在本次实验中,我们使用了增殖法和染色法对样品菌液进行分离和纯化。
在增殖法中,我们使用的是增殖液,经过24小时的培养,得到了单一的菌种培养液。
而在染色法中,我们使用的是革兰染色法,可以准确地将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌。
在实验过程中,我们发现革兰染色能够很好地区分出不同种类的细菌,同时,在细菌分离和纯化过程中,采用增殖法和染色法的方法,能够快速地得到单一纯种菌液,为微生物的研究和鉴定提供了很大的帮助。
(完整word版)微生物菌种的分离纯化、培养、鉴定及保藏实验
实验微生物菌种的分离纯化、培养、鉴定及保藏一、实验目的和要求1。
了解微生物的分离纯化方法。
2.学习检测水中大肠菌群的方法。
3。
学习微生物的保藏及鉴定方法。
4。
熟悉革兰氏染二、实验原理多管发酵法多管发酵法包括初发酵试验、平板分离和复发酵试验三个部分。
发酵管内装有乳糖蛋白胨液体培养基,并倒置一德汉氏小套管.乳糖能起选择作用,因为很多细菌不能发酵乳糖,而大肠菌群能发酵乳糖而产酸产气.1.初发酵试验水样接种于发酵管内,37℃下培养,24小时内小套管中有气体形成,并且培养基混浊,颜色改变,说明水中存在大肠菌群,为阳性结果。
48小时后仍不产气的为阴性结果。
2。
平板分离初发酵管24至48小时内产酸产气的均需在复红亚硫酸钠琼脂(远藤氏培养基)或伊红美蓝琼脂,平板上划线分离菌落。
3.复发酵试验以上大肠菌群阳性菌落,经涂片染色为革兰氏阴性无芽孢杆菌者,通过此试验再进一步证实。
原理与初发酵试验相同,经24小时培养产酸产气的,最后确定为大肠菌群阳性结果。
三、实验器材及试剂1。
水样污水样本2、培养基及试剂:二甲苯、苯酚、琼脂粉、香柏油、乳糖胆盐液体培养基、伊红美蓝琼脂(EMB)、营养琼脂培养基、革兰氏一液、革兰氏二液、革兰氏三液、革兰氏四液。
3、器材及耗材:双目显微镜、恒温培养箱、恒温干燥箱、洁净工作台、紫外线灯管、紫外线灭菌手推车、接种环、试管、酒精灯、滤纸、擦镜纸、载玻片、打火机、棉花、滴瓶、长塑料篓、纱布、吸耳球、产气管、培养皿、移液管等四、实验方法及步骤1。
第一天实验前的准备1)配制3支乳糖胆盐液体培养基,每支10mL,并加入产气管.配置营养琼脂培养基,灌装进2支试管中,配置200mL伊红美兰培养基150mL,于121℃高温高压灭菌20分钟,后放进恒温干燥箱。
2)包扎5套培养皿,包扎6根1mL、1根10mL移液管和3支滴管。
于121℃高压灭菌锅中灭菌20分钟。
3)称取一定量的液体石蜡,约为锥形瓶的三分之一。
于121℃高温高压灭菌20分钟。
微生物的分离与纯化实验报告
微生物的分离与纯化实验报告实验目的:
通过实验了解微生物分离的基本原理和方法;掌握微生物纯化方法,了解常用的分离培养基和微生物培养条件。
实验原理:
微生物的分离和纯化是微生物学中的基本实验技术之一。
微生物分离的基本原理是把混合菌落使之分离成单一菌落,并将分离出的单一菌落进行种类鉴定。
微生物纯化是指从混合菌落中将目标微生物菌种分离出来并纯化到原核培养物中。
实验步骤:
1. 原始样品的处理
将样品取一定量于无菌 Erlenmeyer瓶内,加入相应容积的生理盐水,均匀搅拌,并制成1:10、1:100、1:1000等稀释液。
2. 稀释液接种分离培养基
将稀释液通过平板涂布法、斜面培养法或混悬液播种法接种于相应的分离培养基中。
3. 观察菌落生长情况
分别观察不同菌液在不同培养基中生长情况,并根据菌落特征确定是否为单一菌种。
4. 分离纯化单一菌落
通过稀释、涂片和感染小白鼠等方法,将菌落分离纯化并制备鉴定鉴定纯菌株。
实验结果:
通过实验,我们成功地从样品中分离出多种微生物,并用分离纯化方法分离出了单一的微生物菌种。
结论:
通过微生物的分离和纯化实验,我们掌握了微生物分离的基本原理和方法,成功分离出单一菌种并加以鉴定。
这对于微生物学基础研究和其它相关领域具有重要的意义。
土壤中放线菌的分离和纯化实验(精选5篇)精选全文完整版
可编辑修改精选全文完整版土壤中放线菌的分离和纯化实验(精选5篇)第一篇:土壤中放线菌的分离和纯化实验土壤中放线菌的分离和纯化实验一、实验目的1、制作MS培养基的方法,掌握母液的保存方法。
2、掌握培养基的灭菌方法。
掌握外植体的消毒和超净工作台的使用。
4、掌握放线菌的分离纯化及染色的基本流程;5、掌握高氏一号培养基的配制方法;6、复习分离纯化放线菌的基本操作技术、培养方学会使用高压蒸汽灭菌锅。
7、培养微生物实验的设计思路和动手能力。
二、实验材料高压蒸汽锅、培养瓶、石斛的愈伤组织、超净工作台,酒精灯、酒精棉球、镊子、电子天平、称量纸、烧杯、量筒、显微镜、三角锥形瓶、无菌培养皿、接种环、酒精灯、分析天平;接种环、载玻片、盖玻片、玻璃珠、移液枪、剪刀三、实验原理植物组织培养即植物无菌培养技术,又称离体培养,是根据植物细胞具有全能性的理论,利用植物体离体的器官(如根、茎、叶、茎尖、花、果实等)、组织(如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等)第 1 页或细胞(如大孢子、小孢子、体细胞等)以及原生质体,在无菌和适宜的人工培养基及温度等人工条件下,能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根,最后形成完整的植株的学科。
四、实验步骤1、配制MS培养基8L,称取马铃薯1600g、香蕉400g、蔗糖240g、活性炭8半勺、琼脂80g、配制母液。
2、配制培养液时应注意:①在使用提前配制的母液时,应在量取各种母液之前,轻轻摇动盛放母液的瓶子,如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染,应立即淘汰这种母液,重新进行配制;为防止母液被微生物污染,有机母液放在冰箱里4℃保存;②用量筒或移液管量取培养基母液之前,必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次;③量取母液时,最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上,量取1种,划掉1种,以免出错。
溶化琼脂用粗天平分别称取琼脂9 g、蔗糖30 g,放入1 000 mL的搪瓷量杯中,再加入蒸馏水750 mL,用电炉加热,边加热边用玻璃棒搅拌,直到液体呈半透明状。
细菌培养细菌实验报告
一、实验目的1. 掌握细菌培养的基本原理和方法。
2. 学习细菌接种和纯化技术。
3. 了解细菌在不同培养基上的生长情况。
二、实验原理细菌培养是微生物学的基本实验技术之一,通过在人工配制的培养基上培养细菌,可以观察细菌的生长和代谢特征,进而对细菌进行鉴定和分类。
实验中,我们采用平板划线法将细菌接种到琼脂平板上,通过观察菌落的特征,对细菌进行分离和纯化。
三、实验材料与试剂1. 菌种:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌2. 培养基:牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基3. 试剂:无菌生理盐水、无菌水、无菌滤纸、无菌接种环、无菌培养皿、酒精灯、火焰灯4. 仪器:恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、无菌操作台四、实验步骤1. 准备工作:将菌种从冰箱取出,恢复至室温。
将无菌生理盐水、无菌水、无菌滤纸、无菌接种环、无菌培养皿、酒精灯、火焰灯等实验器材准备好。
2. 培养基制备:按照培养基配方,将牛肉膏蛋白胨培养基和营养肉汤培养基分别称量,加入适量蒸馏水,搅拌均匀,分装到无菌培养皿中。
3. 灭菌:将培养皿放入高压蒸汽灭菌器中,121℃灭菌15分钟,取出待冷却。
4. 接种:将菌种从冰箱取出,恢复至室温。
用无菌接种环挑取少量菌种,分别接种到牛肉膏蛋白胨培养基和营养肉汤培养基中。
5. 培养:将接种后的培养皿放入恒温培养箱中,37℃培养24小时。
6. 观察与记录:观察菌落的特征,包括菌落的大小、形状、颜色、边缘、表面等。
记录菌落的特征,并对菌种进行鉴定。
五、实验结果与分析1. 大肠杆菌在牛肉膏蛋白胨培养基上生长良好,菌落呈圆形、光滑、湿润、白色、边缘整齐。
2. 金黄色葡萄球菌在牛肉膏蛋白胨培养基上生长良好,菌落呈圆形、凸起、光滑、金黄色、边缘整齐。
3. 枯草芽孢杆菌在牛肉膏蛋白胨培养基上生长良好,菌落呈圆形、粗糙、干燥、灰白色、边缘不规则。
六、实验总结通过本次实验,我们掌握了细菌培养的基本原理和方法,学会了细菌接种和纯化技术。
同时,通过观察不同菌种在不同培养基上的生长情况,加深了对细菌生长特征的认识。
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四、实验步骤——无菌水的制备
1.用量筒量取90ml水于带玻璃珠三角瓶中, 塞上棉塞,包扎牛皮纸。
2.用10ml吸管取9ml水于试管中,塞上棉塞, 包扎牛皮纸。
四、实验步骤——器皿的准备
1.培养皿的包装:每10套一包,用旧报纸或 牛皮纸包扎(或放在特制铁皮圆筒里,加 盖扣严)。
2.吸管的包装:首先在吸管的上端塞上一小 段棉花,用长纸条包扎、打结。
三ห้องสมุดไป่ตู้实验器材
1.药品及试剂:根据所要制备的培养基准 备所需试剂。
2.仪器及其它:试管、三角瓶、烧杯、量 筒、玻棒、天平、药匙、高压蒸汽灭菌锅、 pH试纸(5.5-9.0) 、棉花、牛皮纸、记号 笔、麻绳、纱布、干燥箱、培养皿、涂布 棒、吸管(1ml)、玻璃珠、pH试纸等
四、实验步骤——培养基的制备与分装
3.进一步熟练掌握高压蒸汽灭菌锅的使用 方法。
二、实验原理(1)
培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基 质,用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。在 自然界中,微生物种类繁多,营养类型多样,加之实验和研究的目 的不同,所以培养基的种类很多。但是,不同种类的培养基中,一 般应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素等。不同微 生物对 pH 要求不一样,霉菌和酵母的培养基的 pH 一般是偏酸性的, 而细菌和放线菌的培养基的 pH 一般为中性或微碱性的 ( 嗜碱细菌和 嗜酸细菌例外 ) 。所以配制培养基时,都要根据不同微生物的要求将 培养基的 pH 调到合适的范围。
四、操作步骤(6)
斜面接种时的无菌操作 (1)接种灭菌 (2)开启棉塞 (3)管口灭菌 (4)挑起菌苔 (5)接种 (6)塞好棉塞
四、操作步骤(7)平板划线法
四 操作步骤(2)
1制备土壤稀释液
四、操作步骤(3)
挑菌落
接种和分离工具 1.接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀
四、操作步骤(4)
四、操作步骤(4)
四、操作步骤(5)
常用的接种方法: 划线接种 点接种 穿刺接种 涂布接种 液体接种 注射接种
第二部分
微生物的分离与纯化
一、目的要求
1.通过从土壤中分离纯化细菌,掌握微生 物的分离纯化方法和无菌操作技术。
2.初步掌握微生物的菌种保藏技术。
二、实验原理(1)
1. 自然界中各种微生物混杂生活在一起, 要研究某种微生物的特性,首先须使该 微生物处于纯培养状态。从混杂的微生 物群体中获得只含有某一株微生物的过 程称为微生物的分离与纯化。
此外,由于配制培养的各类营养物质和容器等含有各种微生物,因 此,已配制好的培养基必须立即灭菌,如果来不及灭菌,应暂存冰 箱内,以防止其中的微生物生长繁殖而消耗养分和改变培养的酸碱 度所带来不利的影响。
二、实验原理(2)
根据微生物的种类和实验目的不同,培养 基的类别如下:
按成分的不同:天然培养基 、合成培养 基和半合成培养基 。
1.称量:按培养基配方比例依次准确地称取药品。 2.熔化:在沸水浴锅中或电炉上加热熔化。 3.调pH :用1mol/LNaOH或1mol/LHCl调pH至培养基所需pH。 4.过滤:趁热用多层纱布过滤(根据实际情况确定是否过滤) 5.分装:将溶化的固体培养基趁热加至漏斗上,装试管时,注 意管口不要沾上培养基。液体分装装量不超过试管的1/4,固 体分装装量不超过试管的1/5,分装三角瓶的量不超过三角瓶 容积的一半,半固体分装装量为试管的1/3,灭菌后垂直待凝。 6.加棉塞:培养基分装完毕后,在试管口或三角瓶口塞上棉 塞,以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染,并保证有良 好的通气性能,然后包扎一层牛皮纸。试管应先捆成一捆后再 于棉塞外包扎牛皮纸,贴上标签,注明培养基名称、日期、组别。
3.玻璃涂布棒的包装:方法同吸管的包装。 4.枪尖的包装:放入枪尖盒,牛皮纸包装。
四、实验步骤——高压灭菌
1.将所要灭菌物品放入高压蒸汽灭菌锅内,根据需要设定 灭菌温度和时间(一般121℃,20min灭菌,若培养基 中含有葡萄糖等成分时,113 ℃,30min灭菌)。如因 特殊情况不能及时灭菌,则应放入冰箱内暂存。
按培养基的物理状态分:固体培养基、半 固体培养基和液体培养基。
按培养基的用途分:基础培养基 、营养 培养基(加富培养基)、鉴别培养基和选 择培养基 。
二、实验原理(3)
目前已有各种商品化的“干燥培养基”成品出 售。这种培养基是将新鲜配制的液体培养基用 喷雾干燥法、真空干燥法、低温干燥法或蒸发 干燥法等将培养基内所含的水分去掉;或将培 养基内的各种固形成分,经适当处理、充分混 匀,便成干燥粉末而成。使用时只要按比例加 入一定量的水,经溶解、分装,高压蒸气灭菌, 即可使用。这种培养基的优点是配制省时,携 带方便,使用简易,质量稳定。
实验二
土壤微生物的分离纯化与鉴定
一 、目的要求
1.通过从土壤中分离纯化细菌,掌握培 养基的制备与灭菌技术、微生物的分 离纯化方法和无菌操作技术。
2.掌握微生物的鉴定技术
第一部分
培养基的配制与灭菌
一、实验目的
1.学习配制培养基的原理,并掌握配制培 养基的一般方法和步骤。
2.学习几种常用培养基的配制、分装和灭 菌的操作方法.
2.灭菌完毕,将试管培养基搁成斜面,搁置的斜面长度以 不超过试管总长度的一半为宜。培养基冷至50℃左右, 倒平板。
3.将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24~48h,以检 查灭菌是否彻底。
五、思考题
1.培养基配好后,为什么必须立即灭菌? 如何检查灭菌后的培养菌是无菌的?
2.加压蒸汽灭菌的原理是什么?是否只要 压力表上的指针指到所需的压力时就能达 到所需灭菌温度?为什么?
2. 土壤是微生物生活的大本营,可以从中 分离到很多有价值的菌株。本实验将采 用平板划线分离法。
三、实验器材
1. 土样 2. 培养基 3. 无菌的培养皿、三角瓶、水、玻璃珠、
玻璃刮刀、吸管、枪尖等
四、操作步骤(1)
1. 制备土壤稀释液 2. 涂布平板 3. 培养 4. 挑菌落 5. 平板划线分离 6. 菌种保藏(留作鉴定)