酶解法提取食用菌多糖
香菇多糖的提取方法及应用
香菇多糖的提取方法及应用香菇多糖是从香菇中提取的一种多糖类化合物,具有抗肿瘤、抗病毒、降血脂、降血糖等多种药理活性。
提取香菇多糖的方法主要包括水提法、酸提法、碱提法、酶解法等多种方法。
下面将对香菇多糖的提取方法及应用做详细介绍。
1. 水提法水提法是将香菇切碎后用水浸泡,通过水提取的方法获得香菇多糖的一种提取方法。
其优点是提取过程简单,设备要求低,且操作方便。
但缺点是提取率较低,且容易受到微生物污染。
2. 酸提法酸提法是将香菇切碎后用酸性溶液浸泡,通过酸的作用来提取多糖。
酸提取的优点是提取率高,但也会产生废液排放问题,同时酸性溶液容易对蛋白质产生影响。
3. 碱提法碱提法是将香菇切碎后用碱性溶液浸泡,通过碱的作用来提取多糖。
碱提取的优点是提取率高,同时对蛋白质影响较小。
但碱性溶液的使用需要注意对环境的影响,且碱性条件下易使多糖发生降解。
4. 酶解法酶解法是通过加入酶类来促进多糖的提取,能够有效地增加提取率。
但酶类的成本较高,同时酶解条件的控制较为严格。
提取得到的香菇多糖可以通过浓缩、絮凝、沉淀及净化等方法得到纯净的多糖产品。
香菇多糖的应用广泛,主要包括以下几个方面:1. 药品领域香菇多糖具有抗肿瘤、抗病毒的作用,被广泛应用于肿瘤治疗、免疫调节、抗病毒等方面。
临床研究表明,长期服用香菇多糖可以增强人体免疫力,减少感染病毒的风险。
2. 食品工业香菇多糖可作为功能性食品添加剂,提高食品的营养价值,增加食品的功能性。
例如可以将香菇多糖添加到饼干、饮料、果冻等食品中,以增强食品的健康功能。
3. 化妆品领域香菇多糖具有较好的保湿性,被应用于化妆品中具有很好的效果,如护肤乳液、面膜等产品中。
4. 其他领域香菇多糖还可以用于环保领域,例如用于废水处理,其能够起到絮凝剂的作用,帮助去除水中的杂质,达到净化水质的效果。
总而言之,香菇多糖的提取方法多样化,可以根据需要选择适合的提取方法,提取得到的多糖产品应用广泛,涉及药品、食品、化妆品等多个领域,具有很好的开发和利用前景。
真菌多糖的提取工艺
真菌多糖的提取工艺目前真菌多糖提取的方法通常采用热水浸提和酶法浸提。
其中热水浸提工艺简单,抽提的主要是胞外多糖,得率较低。
而酶法浸提常采用纤维素酶、果胶酶和蛋白酶以除去胞壁和膜上的果胶、纤维素及蛋白质等成分,有利于胞壁内多糖的溶出,且多糖提出率高。
研究发现各种食用菌多糖的提取过程基本相同:将材料粉碎,热水抽提3次,温度90~100℃不等;离心收集上清液,减压浓缩至适当体积,加3~5倍乙醇, 收集沉淀物,干燥得粗多糖。
下面以几种常见的山东野生食用菌多糖的提取为例作一下详细的介绍。
金顶侧耳多糖的提取:王晓洁等在金顶侧耳多糖体外抗肿瘤作用的研究中用水提法提取多糖:将烘干的菌丝体用植物粉碎机粉碎,过200目筛,按料水比1:20加入蒸馏水。
100℃恒温水浴提取2h,重复3次,过滤、合并提取液,浓缩至原体积的1/4。
全液用组织捣碎机将菌丝体打碎,同上方法提取,最终将提取液浓缩至原体积的1/4。
过滤液提取后也浓缩至原提及的1/4。
然后按乙醇和浓缩液4:1的比例加入乙醇,置于阴凉处沉淀24h。
将下部沉淀离心,用乙醇和丙酮各洗一次,挥干溶剂,冷冻干燥后得多糖固体粉末,全液、过滤液和菌丝体多糖的得率分别为0.16%、0.13%和8.96%。
姬松茸多糖的提取:辛晓林等在姬松茸发酵全液多糖提取及其抗肿瘤活性的研究中用组织捣碎机将发酵全液中的菌丝体破碎, 沸水煮2h 后进行过滤, 滤液加热浓缩至原体积1/4 ,加入4 倍体积乙醇, 醇沉24h,去上清液, 离心(4000r/min)0、5h , 冷冻干燥得姬松茸粗多糖,得率为1.78g/ 100mL。
而在姬松茸菌丝体多糖提取工艺最优化研究[11]中得到的最优化提取工艺为,在菌丝密度为100~250mg/mL(鲜重)的范围内,超声波的破壁时间12min、提取时间为4h、提取温度为70℃,此工艺多糖提取率可达到2.609%(鲜重)。
杏鲍菇多糖的提取:迟桂荣等在杏鲍菇多糖的纯化取杏鲍菇菌丝体烘干至恒重,粉碎机粉碎,氯仿和甲醇(2∶1)提取,95%乙醇沉淀,活性炭脱色,Sevage法[19]脱蛋白,冷冻干燥即为粗多糖A。
食用菌多糖提取工艺流程
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酶法提取真姬菇多糖的工艺研究
酶法提取真姬菇多糖的工艺研究
提取真姬菇多糖的工艺可以采用酶法,具体步骤如下:
1.真姬菇研磨。
将真姬菇干燥后研磨成粉末状;
2.制备酶液。
以淀粉酶和葡萄糖酸酶为主要酶种,配制酶液。
酶液浓度可以按照实际情况进行调节,一般为1%~5%;
3.水浸提。
将真姬菇粉末放入水中浸泡,可以在室温下或低温下进行。
浸泡时间一般为2~4小时,可促使多糖从真姬菇中溶解到水中;
4.酶解。
将浸泡好的真姬菇粉末和酶液混合,根据实际情况,酶解温度可以控制在40℃~60℃之间,酶解时间一般为3~6小时。
酶解过程中,可以适当地调节pH值,使酶解条件最优化;
5.过滤。
将酶解后的混合物过滤,去除残余的真姬菇粉末,留下混合物;
6.浓缩。
将过滤后的混合物进行浓缩,可以采用真空浓缩或喷雾干燥等方法;
7.纯化。
对于需要高纯度真姬菇多糖的情况下,可以进行进一步纯化,例如离子交换色谱、凝胶过滤等方法。
最后,将制备好的真姬菇多糖进行干燥即可。
整个提取过程需要注意卫生和安全,以保证多糖的纯度和品质。
食用菌多糖提取技术简介
食用菌多糖提取技术简介食用菌多糖提取技术简介[ 修改时间:2011-8-20 下午 09:17:51 浏览次数:552]食用菌多糖提取技术简介2010年4月20日来源:中国食用菌商务网【按】食用菌多糖的生物活性、食药用价值及无毒副作用的特性已被认可,其研制成的药品及保健品已成为当前突破食用菌精深加工瓶颈的重大措施。
也是转变食用菌经济发展方式的重要门路,我县是中国食用菌之都。
品种多、产量高,采取提取食用菌多糖,再加工成终端产品有巨大的发展空间,今收集了六种提取多糖办法。
供大家参考:1、水提醇沉法提取食用菌多糖多糖溶于水而不溶于醇、醚、丙酮等有机溶剂。
用热水进行提取。
主要是借助于热力作用使食用菌细胞发生质壁分离,水作为溶剂渗人细胞壁和细胞质中。
溶解液泡中的物质。
使其穿过细胞壁,扩散到外部溶剂中。
刘祖同、罗信昌归纳了食用菌子实体多糖的提取工艺步骤:即食用菌子实体粉碎一脱脂肪一多糖的浸提一过滤(离心分离)一合并滤液一多糖沉淀一去蛋白质、脱色一多糖组分的分离纯化一多糖组成和结构的分析,其中,热水浸提的温度一般为90℃~100~C。
浸提时间为lh~3h,浸提次数为2次~3次。
说明此方法有较好的准确度。
水提醇沉法的优点为试验设备简单。
操作容易。
准确度高,成本低廉。
一次性投入较小。
适用于大规模的工业生产。
但提取效率低且费时,劳动强度大。
产品纯化困难且括性损失较大,随着工业技术的发展。
一些现代高新技术被应用于食用菌多糖的提取。
2,酸碱浸提法提取食用菌多糖原理是通过酸碱液的充分作用。
使食用菌细胞、细胞壁充分吸水胀膨而破裂,从而使食用菌多糖充分游离出来,提高得率。
田光辉等以灵芝为材料考察了酸碱盐介,酸碱介质能够明显提高多糖的提取率。
但以酸作为介质时对糖苷键具有一定的破坏作用,降低多糖的得率。
还会对容器造成腐蚀,除弱酸外一般不宜采用。
采用稀碱液浸提后既能节省时间,又能减少原材料及试剂的消耗。
且提取的多糖含量高。
但碱提后的溶液浓度增大。
食用菌多糖提取的原理和方法
食用菌多糖的来源与分布
来源
食用菌多糖主要来源于各种食用菌,如香菇、金针菇、黑木耳等,这些食用菌 在自然界中广泛分布,且具有丰富的多糖含量。
分布
食用菌多糖不仅分布于各种食用菌中,还可通过发酵工程等方法在微生物中获 得。
02
食用菌多糖提取的原理
物理原理
物理原理主要包括机械破碎、 超声波破碎、微波辅助等。这 些方法通过物理手段破坏食用 菌细胞壁,使细胞内的多糖成
特性
食用菌多糖具有较高的分子量、 复杂的分子链结构、良好的水溶 性和生物活性,通常具有抗氧化 、抗炎、抗肿瘤等作用。
食用菌多糖的生物活性与医疗价值
生物活性
食用菌多糖能够调节免疫系统、抗肿 瘤、降血糖、降血脂等多种生物活性 ,对预防和辅助治疗多种疾病具有潜 在的应用价值。
医疗价值
在医疗领域,食用菌多糖可用于开发 新型药物、功能性食品和保健品,为 人类健康提供更多选择。
分释放出来。
机械破碎是通过机械力量将食 用菌组织破碎,常用的设备有
破碎机、磨碎机等。
超声波破碎是利用超声波的振 动效应破碎细胞,具有高效、 低能耗的优点。
微波辅助是利用微波的加热效 应使细胞内的水分迅速升温产 生压力,从而使细胞壁破裂。
化学原理
化学原理主要是通过酸、碱、盐等化 学试剂的作用,使食用菌细胞壁溶解 或改变其结构,从而释放出多糖成分。
沉淀分离
利用多糖在水中的溶解度差异 ,通过加入沉淀剂使多糖沉淀 析出。
凝胶色谱分离
利用凝胶色谱技术根据多糖分 子量大小进行分离纯化。
干燥与保存
干燥方法
采用真空干燥、冷冻干燥等方法去除多糖中的水分,便于保存和运输。
保存条件
干燥后的多糖应存放在阴凉、干燥、避光的地方,避免受潮和污染。同时要关注 温度和湿度对多糖稳定性的影响。
一种黑木耳多糖的酶法提取方法
一种黑木耳多糖的酶法提取方法黑木耳是一种以其丰富的多糖成分而闻名的食用菌。
多糖具有多种保健和药理活性,因此,黑木耳多糖的提取方法备受关注。
下面将介绍一种常用的黑木耳多糖酶法提取方法。
提取原料准备:1.黑木耳:购买新鲜的黑木耳,清洗干净,并切碎成小块备用。
酶解步骤:1.预处理黑木耳:将切碎的黑木耳加入适量的温水中浸泡,经过洗涤、漂洗,去除杂质和其他非多糖成分。
2.增加酶解效果:为了增加酶解效果,可以在预处理的黑木耳中加入酶解助剂,如纤维素酶、淀粉酶等。
根据黑木耳的特性以及具体实验要求,选择合适的酶解助剂添加适量到黑木耳中。
3.酶解反应的控制参数:酶解反应中的温度、时间和酶解液的pH值是影响酶解效果的重要因素。
一般来说,合适的温度范围是40-60°C,酶解时间为1-4小时,pH值控制在酶解酶的最适工作pH范围内。
4.酶解反应过程的控制:可以将黑木耳和酶解液一起放入温度恒定的容器中,或使用搅拌罐对反应进行搅拌以提高反应效果。
5.终止酶解反应:一旦达到预设的酶解时间后,酶解反应应立即终止。
终止酶解反应的方法可以是将反应液加热至高温,或者加入酸等将反应液的酶活性彻底破坏。
过滤和浓缩:1.过滤:将酶解反应液进行滤除,去除固体残渣和其他杂质。
常见的过滤方法有纸浆过滤、滤膜过滤等。
2.浓缩:选择合适的浓缩方法,如真空浓缩、喷雾干燥等,将酶解液中的水分蒸发掉,使其成为相对浓缩的液体。
提取和纯化:1.醇沉淀:将浓缩液中加入适量的有机溶剂(如乙醇或异丙醇),使黑木耳多糖沉淀。
通过离心将沉淀与上清分离。
2.溶解和稀释:将沉淀溶解在适量的溶剂中(如水),可以使用热溶法、超声波法等。
稀释黑木耳多糖溶液以达到合适的浓度和纯度要求。
3.脱蛋白:使用酶解助剂(如蛋白酶)或特定的沉淀方法(如超滤法)去除多糖中的蛋白质成分。
4.酸性沉淀:通过调节pH值和温度使多糖在酸性条件下沉淀,从而进一步提高多糖纯度。
5.色谱分离:使用合适的色谱技术(如凝胶过滤、阴离子交换色谱和凝胶渗透色谱等)纯化黑木耳多糖。
白灵菇多糖酶解产物的分离与分析研究
白灵菇多糖酶解产物的分离与分析研究植物多糖是一类具有多种生物活性和药理学价值的天然产物,其广泛存在于各类植物中,并且被广泛应用于食品、医药和化妆品等领域。
其中,白灵菇(Tricholoma matsutake)是一种具有高营养和药用价值的食用菌,被认为是一种重要的植物多糖资源。
白灵菇多糖的酶解产物是研究其结构和功能的关键。
本文旨在研究白灵菇多糖的酶解产物的分离与分析方法,以期深入了解其结构和活性。
首先,为了获得足够量的白灵菇多糖,我们采用了水煮提取的方法。
将鲜白灵菇切碎后,添加适量的水进行煮沸,并连续搅拌。
然后将提取液离心,得到澄清的提取物,经过浓缩和乙醇沉淀后,获得白灵菇多糖的初步提取物。
接下来,我们使用离子交换层析技术对初步提取物进行分离。
选用合适的离子交换树脂,并优化其吸附、洗脱条件,以实现白灵菇多糖的高效分离。
通过逐步改变洗脱液的浓度和组成,我们可以依次获得不同种类和分子量的白灵菇多糖酶解产物。
在分离的基础上,我们采用一系列分析方法对白灵菇多糖酶解产物进行结构和活性的研究。
常用的分析方法包括红外光谱、核磁共振、高效液相色谱、凝胶渗透色谱等。
通过这些方法,我们可以了解白灵菇多糖的组成成分、分子量、空间构象等重要参数,进一步探索其药理学和生物活性。
此外,为了评估白灵菇多糖酶解产物的生物活性,我们可以采用一系列体外和体内实验。
体外实验包括抗氧化能力、免疫调节、抗肿瘤和抗炎等活性的评价,通过测定其对相关指标的影响,可以初步了解白灵菇多糖的生物功能。
而体内实验则可以通过动物模型进行,包括体内抗肿瘤、免疫增强和血糖调节等指标的测定,以深入研究白灵菇多糖酶解产物的药理学活性。
在研究过程中,我们还需要注意一些问题。
首先,分离与分析方法的优化是提高研究效率和准确性的关键,需考虑不同的样品和实验条件。
其次,合适的质量标准和控制方法是确保研究结果可靠的必要条件。
此外,我们还需要与其他研究者进行合作,利用他们的经验和设备,探索更多关于白灵菇多糖的分离、分析和应用。
酶法提取灵芝多糖的工艺研究
灵芝(Ganoderma lucidum)是我国医学宝库中的 一味珍贵中药,含有多种有效药用成分,其中灵 芝多糖是一种非特异性免疫刺激剂,具有强化人 体免疫功能、抗肿瘤、抗衰老及清除自由基等生 理功能[1-3]。灵芝多糖的提取方法有水提法[4]、碱提 法、醇提法和酶提法等[5-7],其中酶提法是利用酶 对细胞结构的破坏作用,使存在于细胞内部的多 糖释放出来,从而提高了多糖的得率。本文采用 纤维素酶、果胶酶和植物蛋白水解酶对灵芝进行 水解作用,研究灵芝多糖的最佳提取工艺,并探
2.2 酶法提取灵芝多糖的效应
2.2.1 酶浓度对多糖提取的影响 控制纤维素酶、
果胶酶和植物蛋白水解酶 pH 为 4.5、4.5 和 5.0,
酶 解 时 间 80 min, 温 度 50 ℃ , 酶 浓 度 分 别 为
0.1%、0.5%、1.0%、2.0%、4.0%。酶浓度对提取
多糖含量的影响结果见图 1。
200
180
160
140
120
100
80
纤维素酶
60
果胶酶
40
植物蛋白水解酶
20
0
15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70
温度/℃ 图 3 酶解温度对灵芝多糖提取的影响
从图 3 可以看出,纤维素酶和植物蛋白水解 酶酶解温度为 55 ℃时,多糖含量最高,分别为 192.56 mg/100 mL 和 169.87 mg/100 mL,因此选择 纤维素酶和植物蛋白水解酶最适反应温度为 55 ℃; 果胶酶酶解温度为 40 ℃时,多糖含量最高,为 163.56 mg/100 mL,因此选择果胶酶最适反应温度 为 40 ℃。 2.2.4 pH 对多糖提取的影响 控制纤维素酶酶浓 度 0.5%,时间 80 min,温度 55 ℃时, pH 值选择 3.5、 4.0、 5.0、 6.0; 果 胶 酶 和 植 物 蛋 白 水 解 酶 酶 浓度分别为 0.5%、1.0%,时间分别为 80、60 min, 温 度 分 别 为 40、 55 ℃ 时 , pH 值 选 择 3.5、 4.5、 5.5、6.5。pH 对提取多糖含量的影响结果见图 4。
酶解法提取食用菌多糖
酶解法提取食用菌多糖食用菌多糖是由l0个以上的单糖以糖苷键连接而成的高分子多聚物,存在于食用菌的菌丝体、子实体和发酵液中。
食用菌多糖有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和抗感染活性【1,同时还有增强免疫、抗氧化、降低血糖、抗溃疡、抗衰老、抗辐射等方面的生物活性和生理功能食用菌组成复杂,除多糖外还含有蛋向质、纤维素、半纤维素和果胶等物质,这些物质的存在会影响多糖的浸L叶J.因此在多糖提取过程巾适当加人酶制剂如水解纤维素的纤维素酶、水解果胶质的果胶酶等有利于多糖的浸,在提高溶出效率的同时,为后续捉取液的精制创造有利条件{l0】。
酶解法的一般方法为按一定料液比加入样品干粉和生物酶、蒸馏水,在合适温度和pH值下酶解一定时间,然后升温灭酶,在合适的温度下提取一定时间,离心取上清液,即可测定多糖含量I⋯。
以下分别介绍单一酶法和复合酶法在食用菌多糖提取巾的应用。
1.1 单一酶法提取食用菌多糖单一酶法是指一种酶来辅助提取食用菌多糖,从而提高多糖提取率。
常用的酶有蛋白酶、纤维素酶和果胶酶等。
蛋白酶可破坏蛋白质的肽键,水解细胞中的游离蛋白质.破坏其空问结构,使其变得松散。
同时蛋白酶还可水解蛋白聚糖和糖蛋白中的蛋向质,降低其对多糖的结合率,使多糖更易浸}H。
刘青娥I⋯彳F推荐的最佳提取条件下分别考察了果胶酶、纤维素酶和木瓜蛋白酶对袖珍菇多糖提取效率的影响,以直接水提法为对照,结果显示木瓜蛋白酶酶解法有最佳提取效果,多糖提取率提高了95%,试验考察了酶解温度、酶用量、pH和酶解时问对木瓜蛋白酶法多糖得率的影响.得的结果是酶解温度为50℃左右时多糖提取率最高,随着温度的升高,多糖提取率下降;木瓜蛋白酶朋量为2.O%。
冈浓度增加到2.0%以后,再增加酶用量多糖提取率基本不再增加;最佳酶解pH 值为5.2,因酶对pH值较为敏感,适当的pH值可维持酶活性中心的最佳空问构象,促进酶与底物的结合,提高反应速率:多糖得率随着酶解时间的延长而增加,超过100 rain时有所下降,是由于酶解时间太长会引起糖结构变化甚至碳环裂解,致使多糖得率降低。
植物及食用菌多糖的提取、分离纯化及结构分析
食品科技植物及食用菌多糖的提取、分离纯化及结构分析白海娜(吉林化工学院生物与食品工程学院,吉林吉林 132022)摘 要:多糖是广泛存在于动植物、微生物中的一类大分子化合物,具有调节免疫力、抗癌、抗氧化、抗衰老等方面的功能作用,本文主要对植物及食用菌多糖的提取、分离纯化及结构分析进行阐述。
关键词:多糖;提取;分离纯化;结构分析多糖又称聚糖,是由分子质量从中等到高分子的聚合物,不同聚糖中单糖的同一性、链的长度、连接单糖的键类型以及链的分支程度等方面不同。
植物及食用菌多糖的结构特征以及生物活性等研究已成为食品和制药的热门研究。
与蛋白质的研究相比,多糖各方面研究还比较落后。
本文主要对植物及食用菌多糖的提取、分离纯化及结构分析进行阐述。
1 多糖的提取1.1 酶解提取该方法是由于酶具有专一性的特征,所以根据酶解反应将植物细胞壁分解成小分子物质,该小分子物质容易溶于提取溶剂,使植物细胞壁被破坏,从而使植物细胞中的有效成分溶出。
此方法的优点是不仅能使植物细胞壁中的有效成分发生降解,使其更容易被提取出来,从而达到使提取率提高或溶剂用量减少的目的;而且还可以对植物药中的部分杂质进行选择性降解,使多糖的提取分离更加容易,同时除了所需的有效成分之外其他的成分还可以收集利用[1]。
尽管该方法在多糖的提取率方面得到了提高,但是在操作过程中温度和pH的变化会严重影响所用酶的活性,且提取的成本相对较高。
1.2 微波提取微波提取多糖的方法又被称为微波萃取技术,该方法是通过微波辐射,使高频电磁波快速穿透被萃取的物质。
因为植物细胞在微波辐射能的作用下吸收了微波能,使植物细胞的内部温度升高,从而导致了组织内部的压力变大,细胞发生破裂,需要被提取的成分在能量的作用下从内部溶出。
该方法在提取多糖时的优势是操作简单、溶剂的使用量消耗少、在操作过程中不会造成污染、多糖提取率高等。
1.3 热回流提取法该方法是在多糖提取方法中最为传统、也是一种操作简单的方法,此方法是根据相似相溶的原理来提取多糖,提取溶剂一般是选择用热水、酸、碱;但是该方法由于在提取过程中温度高、时间长、能量消耗高,容易引起多糖结构以及生物活性发生变化,因此若利用此方法提取多糖,会限制天然多糖产业在市场上的发展。
食用菌多糖酶法提取工艺研究进展
食用菌多糖酶法提取工艺研究进展摘要阐述食用菌多糖的生物活性,基于单一酶法与复合酶法介绍食用菌多糖酶法提取工艺的研究概况,以期为食用菌多糖酶法提取的开发应用提供参考。
关键词食用菌多糖;酶法;提取工艺食用菌富含多糖物质,如杂多糖、甘露聚糖、葡聚糖、糖蛋白和多糖肽,具有极大的应用价值。
现介绍食用菌多糖的生物活性及提取工艺,以供参考。
1 食用菌多糖的生物活性研究表明,食用菌多糖被称为“生物应答效应物”,是一种能增强人体免疫功能的生物活性物质[1],其主要作用于机体的免疫系统,具有增强免疫力、抗氧化、抗病毒、降血压、降血脂等功效,在食品及保健品行业中有着广阔的应用前景。
食用菌多糖生物活性与其结构有密切联系。
主要体现在以下5个方面:一是连接在β-D-葡聚糖骨架上的一些基团如聚羟基、聚醛基、羧甲基、乙酰基、硫酸基等对食用菌多糖的生物活性有显著作用。
二是食用菌活性多糖具有共同的结构,主要由几丁质和β-(1,3)-D-葡聚糖构成,具有抗肿瘤的作用,如香菇多糖、灵芝多糖等。
三是食用菌多糖的活性取决于分支度、分子量的大小,影响其生物活性。
四是食用菌多糖的缔合、胶束结构、憎水键以及多糖分子的绕曲度等高级结构都对其活性产生影响。
五是食用菌多糖的活性与其溶解度也有重要关系。
2 食用菌多糖的酶解提取工艺研究食用菌组成结构多样,除多糖外还含有蛋白质、纤维素、半纤维素和果胶等物质,这些物质的存在会影响多糖的浸出。
因此,在多糖提取过程中适当加入酶,利用酶对细胞结构的破坏作用,使存在于细胞内部的多糖得到充分的释放,不仅提高了溶出率,也为后续的精制创造了有利条件。
酶是一种普通蛋白质分子,其在生物反应过程中扮演着高效催化剂的角色,能够帮助一个化学反应过程快速有效地发生,同时本身又是可降解的,如:果胶酶(Pectinase)、纤维素酶(Cellulase)、枯草芽孢杆菌中性蛋白酶、木瓜蛋白酶(Papain)、菠萝蛋白酶(Bromelain)、胃蛋白酶(Pepsin)等。
酶法提取银耳多糖的研究 -回复
酶法提取银耳多糖的研究-回复1.酶法提取银耳多糖的意义银耳多糖是从银耳中提取的一种天然多糖,具有多种生物活性和药用价值。
它具有抗氧化、抗炎、免疫调节、抗肿瘤和降血糖等多种功能。
因此,研究酶法提取银耳多糖有助于提高其产量和纯度,并且可以进一步开发银耳多糖的应用领域。
2.酶法提取银耳多糖的方法首先,要选择合适的酶来降解银耳细胞壁,使多糖释放出来。
常用的酶包括纤维素酶、蛋白酶和淀粉酶等。
然后,需要将银耳进行切碎并进行预处理,以提高酶解效果。
预处理可以包括超声波处理、蒸煮等。
接下来,将预处理后的银耳样品与选定的酶溶液进行混合,设定适当的温度和时间进行酶解反应。
酶解完成后,通过离心或滤过等方法分离悬浮液和残渣。
最后,将得到的多糖悬浮液进行沉淀、洗涤和干燥,得到纯化的银耳多糖产物。
3.影响酶法提取银耳多糖的因素酶法提取银耳多糖的效果受多种因素的影响。
首先,酶的种类和浓度会影响酶解效果。
酶浓度过高或过低都可能导致多糖的析出率下降。
其次,酶解条件,包括温度、酶解时间和酶解pH值等,也会对提取效果产生影响。
高温和长时间的酶解反应可能导致多糖的降解,而过低的温度和短时间则可能导致多糖的析出率较低。
此外,原料的预处理方法和酶解后的分离方法也会对提取效果产生影响。
4.优化酶法提取银耳多糖的方法为了提高银耳多糖的提取效果,可以通过优化酶解条件来实现。
首先,可以通过控制酶的浓度和酶解时间来调整多糖的析出率。
实验结果表明,适当增加酶浓度和酶解时间可以提高多糖的析出率。
其次,可以对酶解温度和pH值进行优化。
由于银耳细胞壁的组分不同,温度和pH值的最佳条件可能有所不同。
因此,通过一系列实验来确定最佳的酶解温度和pH值,并在此条件下进行工艺优化。
5.应用酶法提取的银耳多糖通过酶法提取的银耳多糖可以应用于食品、保健品和药物等领域。
在食品领域,银耳多糖可以用作增稠剂、凝胶剂和稳定剂等。
在保健品领域,银耳多糖具有抗氧化和免疫调节等功能,可以用作补充剂。
酶解法提高黑木耳多糖提取效率
酶解法提高黑木耳多糖提取效率酶解法提高黑木耳多糖提取效率一、黑木耳多糖概述黑木耳是一种常见且营养丰富的食用菌,在众多营养成分中,黑木耳多糖具有极高的研究价值。
黑木耳多糖属于大分子化合物,其结构复杂多样,包含多种单糖组成成分,如葡萄糖、甘露糖、木糖等,并且这些单糖通过不同的糖苷键连接形成复杂的多糖链。
这种独特的结构赋予了黑木耳多糖诸多优异的生理活性。
1.1 黑木耳多糖的生理活性黑木耳多糖具有多种显著的生理活性。
在免疫调节方面,它能够刺激机体的免疫系统,增强免疫细胞的活性,提高机体的抵抗力,有助于预防和对抗各类疾病。
抗氧化活性也是其重要特性之一,它可以有效清除体内过多的自由基,减轻自由基对细胞和组织的氧化损伤,从而延缓衰老过程,预防多种慢性疾病的发生。
此外,黑木耳多糖还具有降血脂、降血糖的作用,对于调节人体的血脂和血糖水平,预防心血管疾病和糖尿病等代谢性疾病具有重要意义。
它还在抗肿瘤、抗凝血、抗血栓以及保护肝脏等方面展现出潜在的药用价值,为开发新型药物和功能性食品提供了广阔的前景。
1.2 传统提取方法及其局限性传统的黑木耳多糖提取方法主要有水提法、碱提法等。
水提法是较为常用的方法之一,其原理是利用水作为溶剂,在一定温度和时间条件下,将黑木耳中的多糖溶解出来。
然而,水提法存在提取率相对较低的问题,往往需要较长的提取时间和较高的提取温度,这不仅消耗大量的能源,还可能导致多糖的部分降解,影响其活性。
碱提法虽然在一定程度上能够提高提取率,但碱性条件容易对多糖的结构造成破坏,改变其化学性质,进而影响其生理活性。
而且,碱提法后还需要进行复杂的中和处理步骤,增加了工艺的复杂性和成本。
这些传统提取方法的局限性促使人们寻求更高效、温和且能保持多糖活性的提取方法,酶解法应运而生。
二、酶解法的原理与优势酶解法是一种基于生物酶催化作用的提取技术,在黑木耳多糖提取中具有独特的原理和显著的优势。
2.1 酶的种类及作用机制用于黑木耳多糖提取的酶主要有纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶等。
香菇多糖的复合酶法提取
环保性
复合酶法提取过程不需要使用强酸、强碱或 有机溶剂,对环境友好。
可重复性
复合酶法提取工艺稳定,可重复性强,适合 大规模生产。
复合酶法提取的局限性
成本高
对某些物质提取效果不佳
复合酶的生产成本较高,导致整个提 取过程的成本增加。
对于某些结构特殊的物质,复合酶法 提取效果可能不佳。
酶的来源有限
用于提取香菇多糖的酶主要来源于微 生物发酵,来源有限制。
参考文献
参考文献1
香菇多糖的复合酶法提取工艺研究,探讨了不同酶种类和浓度 对提取效果的影响,为优化提取工艺提供了理论依据。
参考文献2
香菇多糖的生物活性研究,分析了香菇多糖在免疫调节、抗肿 瘤、降血糖等方面的生物活性,为多糖的应用提供了科学依据
。
参考文献3
香菇多糖的化学结构与功能关系,探讨了多糖的分子量、单糖 组成等因素与其生物活性的关系,为多糖的结构改造和功能优
抗肿瘤
香菇多糖对多种肿瘤细胞具有 抑制作用,能够诱导肿瘤细胞 凋亡,抑制肿瘤生长和扩散。
降血糖
香菇多糖能够降低血糖水平, 对糖尿病具有一定的辅助治疗 作用。
抗氧化
香菇多糖具有抗氧化活性,能 够清除自由基,延缓衰老。
香菇多糖的来源和分布
来源
香菇多糖主要来源于香菇的子实体和菌丝体。
分布
香菇多糖主要分布于香菇的细胞壁中,其中子实体和菌丝体中含量较高。
香菇多糖的提取方法
传统提取方法
包括热水提取、酸碱提取等,但提取 效率较低,且容易造成环境污染。
复合酶法提取
利用多种酶分解香菇细胞壁,释放出 香菇多糖,具有提取效率高、环保等 优点。
02 复合酶法提取原理
酶法提取的原理
香菇多糖的复合酶法提取
香菇的复合酶法提取
主要实验试剂及仪器 真空干燥箱,离心机,恒温振 荡器,紫外可见分光光度计,傅里 叶变换红外光谱仪,纤维素酶,木 瓜蛋白酶
香菇的复合酶法提取
1 2 3 4 5
称取80目的香菇粉2g,放入到250mL的三角瓶中, 加蒸馏水35mL混合均匀后置于40℃水浴锅中,水浴 30min,调节pH值。 称取木瓜蛋白酶和纤维素酶按一定比例混 合,加入5mL蒸馏水溶解。 香菇溶液放在水浴中预热至酶解温度,将酶液加入 到香菇溶液中,在恒温振荡器上提取。 反应结束,将三角瓶放到沸水锅中, 10min沸水浴灭酶。 灭酶结束,冷却至室温,将酶提取液放入到离心 管中,调至4000 r/min离心,取上清液,即得到 酶提取多糖清液。
复合酶提取香菇多糖:
复合酶 纤维素酶+木 纤维素酶+中 木瓜蛋白酶+ 中性蛋白酶+
瓜蛋白酶
多糖得率(%)12.90
性蛋白酶
7.02
纤维素酶
9.46
纤维素酶
6.34
香菇多糖的制备工艺
一.原料准备 二.提取 三.分离纯化
香菇的复合酶法提取
原料的准备和处理 香菇→烘干( 50℃) →粉碎→过筛→多 糖提取原材料。
实 验 方 法 与 步 骤
香菇的复合酶法提取
分离纯化 1.分离提取
用0.5%NaOH初步提取,之后取清液,用透析袋透去 除杂离子,透析后去除杂蛋白,用活性炭脱色1 h,加 入95%乙醇,使溶液中乙醇的浓度达到75%进行醇沉.醇 沉过程中要将其保存在4℃冰箱中,保持24 h,离心15 min,取沉淀,置于真空干燥箱中干燥,即可得到香菇 粗多糖。
香菇多糖的提取方法:
热水浸提法
稀酸(碱)浸提法 微波法提取香菇多糖
食用菌多糖的提取检测及应用研究进展
食用菌多糖的提取检测及应用研究进展食用菌是一种富含营养价值且被广泛食用的菌类食品。
近年来,食用菌多糖的研究引起了人们的广泛关注。
食用菌多糖指的是从食用菌中提取得到的多糖类化合物,具有丰富的生物活性和药用价值。
本文将就食用菌多糖的提取、检测及应用进行综述。
一、食用菌多糖的提取1.物理法:物理法主要是通过水浸提、热水浸提、酸碱浸提等方式提取食用菌多糖。
物理法提取的多糖含量较低,但是对菌体损伤小,适用于大规模生产。
2.化学法:化学法主要是通过酸碱法、酶解法、醇沉法等方式提取食用菌多糖。
化学法提取的多糖含量较高,但是有可能破坏多糖的生物活性。
3.生物法:生物法主要是通过微生物法和酵素法提取食用菌多糖。
生物法提取的多糖含量较高,并且对多糖的生物活性影响较小。
二、食用菌多糖的检测1.物理检测:物理检测主要是通过红外光谱、核磁共振、质谱等技术对食用菌多糖进行分析。
2.化学检测:化学检测主要是通过酸碱滴定、硫酸热解等方法对食用菌多糖进行分析。
3.生物检测:生物检测主要是通过生物传感技术对食用菌多糖进行检测,如免疫检测、酶反应等。
三、食用菌多糖的应用1.医药应用:食用菌多糖具有抗肿瘤、抗氧化、降血脂、调节免疫功能等多种生物活性,被广泛应用于药物研发、肿瘤治疗、心血管疾病防治等领域。
2.食品应用:食用菌多糖具有增加食品的营养价值、改善食品口感的作用,可用于制备功能性保健食品、调味料等。
3.化妆品应用:食用菌多糖具有保湿、美白、抗衰老等功能,可应用于化妆品的研制及生产。
总之,食用菌多糖的提取、检测及应用研究进展已经取得了一定的成果。
随着人们对食用菌多糖的认识不断深入,食用菌多糖的研究将会得到更加广泛的关注,并有望在医药、食品、化妆品等领域得到更多的应用。
食用菌多糖提取的原理和方法
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5
香菇多糖提取的方法
方法2:香菇发酵液经离心(3000r/min,
10~15min钟),弃上清夜得菌丝体。
取菌丝体2Kg(湿重),用沸水
(90~100℃)浸提3次,合并3次的热
水提取液,加入3倍体积的96%酒精,
充分混合,置于4℃下静置沉淀,弃
上清夜,沉淀晾干后为棕色无定形粉
末,即KS-2粗品。
四节 食用菌多糖提取的原理和方法
多糖提取的原理 香菇多糖提取的方法
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1
食用菌多糖提取的原理
利用深层液体发酵培养香菇菌丝体后,从 发酵液中提取菌丝体,从而得到胞内香菇菌 丝体,再从菌丝体中,利用它在酒精和水, 及酶液的不同溶解度来提取胞内多糖。将菌 丝体抽提、浓缩、离心,取上清液脱色透析, 透析液再浓缩、离心,最后用溶液沉淀、洗 涤干燥而成。
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4
香菇多糖提取的方法
沉淀物加水600mL,于96~100℃再次
水浴浸提2.5H,离心收集上清夜,合
并2次的离心上清夜,真空浓缩至
4~5mL,加20mL无水酒精混匀,静置
过夜,弃上清夜后,用85%酒精洗涤2
次,再弃上清夜,晾干沉淀物即为香
菇多糖。30g菌丝体经该工艺提取,
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可得480mg香菇多糖,收率为1.6%。
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2
食用菌速冻工艺
工艺流程 离心得菌丝体
沸水浸提
沸水浸提
醇提
得粗多糖
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3
香菇多糖提取的方法
方法1:将香菇发酵液过滤,洗涤滤渣(菌 丝体),再将香菇菌丝体于95~100℃下烘 干,然后粉碎成小块。称取菌丝体(干) 30g,加600mL水,于96~100℃水浴2.5H, 离心(4000r/min,10min钟),收集上清 夜;
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酶解法提取食用菌多糖
食用菌多糖是由l0个以上的单糖以糖苷键连接而成的高分子多聚物,存在于食用菌的菌丝体、子实体和发酵液中。
食用菌多糖有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和抗感染活性【1,同时还有增强免疫、抗氧化、降低血糖、抗溃疡、抗衰老、抗辐射等方面的生物活性和生理功能
食用菌组成复杂,除多糖外还含有蛋向质、纤维素、半纤维素和果胶等物质,这些物质的存在会影响多糖的浸L叶J.因此在多糖提取过程巾适当加人酶制剂如水解纤维素的纤维素酶、水解果胶质的果胶酶等有利于多糖的浸,在提高溶出效率的同时,为后续捉取液的精制创造有利条件{l0】。
酶解法的一般方法为按一定料液比加入样品干粉和生物酶、蒸馏水,在合适温度和pH值下酶解一定时间,然后升温灭酶,在合适的温度下提取一定时间,离心取上清液,即可测定多糖含量I⋯。
以下分别介绍单一酶法和复合酶法在食用菌多糖提取巾的应用。
1.1 单一酶法提取食用菌多糖单一酶法是指一种酶来辅助提取食用菌多糖,从而提高多糖提取率。
常用的酶有蛋白酶、纤维素酶和果胶酶等。
蛋白酶可破坏蛋白质的肽键,水解细胞中的游离蛋白质.破坏其空问结构,使其变得松散。
同时蛋白酶还可水解蛋白聚糖和糖蛋白中的蛋向质,降低其对多糖的结合率,使多糖更易浸}H。
刘青娥I⋯彳F推荐的最佳提取条件下分别考察了果胶酶、纤维素酶和木瓜蛋白酶对袖珍菇多糖提取效率的影响,以直接水提法为对照,结果显示木瓜蛋白酶酶解法有最佳提取效果,多糖提取率提高了95%,试验考察了酶解温度、酶用量、pH和酶解时问对木瓜蛋白酶法多糖得率的影响.得的结果是酶解温度为50℃左右时多糖提取率最高,随着温度的升高,多糖提取率下降;木瓜蛋白酶朋量为2.O%。
冈浓度增加到2.0%以后,再增加酶用量多糖提取率基本不再增加;最佳酶解pH 值为5.2,因酶对pH值较为敏感,适当的pH值可维持酶活性中心的最佳空问构象,促进酶与底物的结合,提高反应速率:多糖得率随着酶解时间的延长而增加,超过100 rain时有所下降,是由于酶解时间太长会引起糖结构变化甚至碳环裂解,致使多糖得率降低。
纤维素酶可使纤维素、半纤维素等物质降解,从而使细胞内的成分更易向提取介质扩散,食用菌多糖存在于子实体的细胞壁内,细胞壁的结构由纤维素维持,使用纤维素酶可水解细胞壁,提高多糖的浸率。
刘晓鹏等I l利用纤维素酶辅助提取茶树菇多糖,比较了酶解法和水提法2种方法,水提法提取茶树菇多糖料液比为1:60,提取时间120 rain.温度为6O℃时提取效果最佳,其多糖平均提取率为1.40%。
纤维素酶酶解辅助提取茶树菇多糖的平均提取率为2.38%,比水提法提高了70.47%。
纤维素酶酶解辅助提取茶树菇子实体多糖的料液比为1:80,酶浓度1.5%,浸提液DH值为6.0,提取温度为50℃,提取时间为60rain.可以发现纤维素酶解法节省原料,缩短了提取时间,反应条件更为温和.提取率更高。
而刘青娥⋯的酶法提取袖珍菇多糖试验中,纤维素酶酶解法较之水提法多糖提取率提高了42%。
李清等llU 以羊肚菌为实验材料研究了酶法提取的T 艺条件.其中纤维素酶加量为15%,温度为
45℃.提取时间为1 h时,其多糖浸提率为2.063%,优于水浸提法,同样条件的热水浸提法羊肚菌多糖得率仅为0.56%。
使用纤维素酶提取食朋菌多糖优于水提法,其条件温和.提取率高且不影响后续提取。
1.2 复合酶法提取食用菌多糖
复合酶法即使用2种以上的酶对多糖进行提取,多采用一定比例的蛋白酶、纤维素酶和果胶酶进行酶解。
复合酶法的提取条件温和,提取率通常比单一酶法高,且杂质较易除去,能源消耗低。
邹东恢等I 】利用木瓜蛋白酶、纤维素酶复合提取香菇多糖,其最佳一[艺条件是:木瓜蛋白酶与纤维素酶质量比为2:1,复合酶质簧分数为0.4%,料液比为】:20,酶解反应的温度55℃,pH值6.5,反应时问3 h.提取率可达16.1%。
马淑凤等l】4j利用二次回归正交旋转组合设计法.探寻复合酶法提取门灵菇菌丝体多糖的最
佳T艺,复合酶系组成为纤维索酶、蜗牛酶、溶壁酶、中性蛋白酶.质量比为3:2:0,5:5。
试验结果表明当酶用量为2.53%、酶解温度39.6 、酶解时问3.2 h、pH值7.2时,多糖得率最高可达8.23%,而水提法多糖得率为6.36%(由该实验室测得),高出i.87%。
梁敏采,[}j木瓜蛋白酶、纤维素酶提取香菇多糖,加酶比例为2:l(木瓜蛋白酶:纤维素酶),酶解反应温度55℃,pH 值6.5,反应时间3h,多糖的提取率为16.1%,与传统水提法相比较,提取率提高了8.6%。
可见.复合酶法处理可明显提高糖的提取率。
酶法提取食用菌多糖经大量实验证明,可提高多糖的得率,且反应温度较低,提取时间较短;不足之处是酶的价格较高,又容易失活,实验过程中温度控制要求严格(因酶的最佳温度在很小的范罔内,条件的改变可能导致酶的失活).且多糖的高级结构可能因酶的作用而改变_】61。