C6 流式细胞仪使用说明
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C6简易使用
开机请遵循开机程序,开机后,请按如下简要操作:
首先开机后,如有需要,请做质控(QC)详情请见C6操作手册。
开机程序后,通过File——NewWorkplace,新建1个workplace后直接进行实验。
从A1到H12都是样本数据的存储空间,可以再上面label的地方注明样品信息。
上样:每个样品上样之前必须将细胞悬起,如有需要,需要过金属网,将细胞过滤分开,以防止堵塞管路。
每个样品收完数据后,在一个非数据存储位置内收集,用18.2的超纯水,Fast run 30s,防止样品之间的污染。洗管路收集到的数据,直接删除即可。
删除数据:在点击想删除的数据孔后,单击即可删除数据。
C6收集的数据范围非常广,其中重要的一个功能就是放大关注的区间,使用放大镜的按钮;与其相反的缩小功能按钮是
关于流速:分为,可根据需要选择。
关于Threshold:一般不进行调整,采用系统默认。
新建一种类型的图:单击软件右侧区域(直方图)(散点图)(密度图)
圈门:这三个是圈门工具,圈完门后,若在其他图中想只显示gate中的events,需要点击该图左上角的(Gate),在弹出的对话框中,选择需要的gate:
(从左往右:gate中,gate 外,两个gate交叠),单击apply即可。
收取数据:一般根据需要确定收取数量,常规收取10000个events:
设置补偿:实验中涉及多色,需要调整补偿时,需要在实验前设置好单独染一种颜色的实验管,收取数据,收取完数据后,点击,根据需要点击相应被调
整的补偿通道,更改被剪去的%,直至“横平竖直”达到补偿要求,选择Apply to 1个或者All samples后,点击Apply & close即可。
分析比较数据:点击屏幕上方红色区域中的,添加一个新的分析面板,一般常用,点击后,在左侧样本区域中,勾选需要分析的样本即可。同样,若需要gate,请参照上文。
打印分析结果:将想要打印的部分画上对号,然后在File——Print selected Items
即可打印出相关数据。
数据保存:所有的数据都存储在“桌面——Lab data——LiuWL——自己名称的文件夹中”。
数据导出:在保存完C6格式的数据后,可以导出用FlowJo分析,“File——export all samples to Third part y…”,系统默认保存到桌面,务必将桌面上的文件拷贝完毕后删除。