酶工程七到十章问答
酶工程课后题答案.doc
第一章1.简述酶与一般催化剂的共性以及作为生物催化剂的特点共同点:只能催化热力学所允许的的化学反应,缩短达到化学平衡的时间,而不改变平衡点:反应前后酶本身没有质和量的改变:很少量就能发挥较大的催化作用:其作用机理都在于降低了反应的活化能。
酶作为生物催化剂的特点:1.极高的催化率;2.高度专一性;3.酶活的可调节性;酶的不稳定性。
5.酶失活的因素和机理。
酶失活的因素主要包括物理因素,化学因素和生物因素物理因素1热失活:热失活是由于热伸展作用使酶的反应基团和疏水区域暴露,促使蛋白质聚合。
2冷冻和脱水:很多变构酶在温度降低是会产生构象变化。
在冷冻过程中,溶质(酶和盐)随着水分子的结晶而被浓缩,引起酶微环境中的pH和离子强度的剧烈改变,很容易引起蛋白质的酸变性。
3.辐射作用:电离辐射和非电离辐射都会导致多肽链的断裂和酶活性丧失。
4.机械力作用:化学因素1.极端pH:极端pH远离蛋白质的等电点,酶蛋白相同电荷间的静电斥力会导致蛋白肽链伸展,埋藏在酶蛋白内部非电离残基发生电离,启动改变。
交联或破坏氨基酸的化学反应,结果引起不可逆失活。
极端pH也容易导致蛋白质水解。
2.氧化作用:酶分子中所含的带芳香族侧链的氨基酸以及Met, Cys等,与活性氧有极高的反应性,极易受到氧化攻击。
3.聚合作用:加热或高浓度电介质课破坏蛋白质胶体溶液的稳定性,促使蛋白质结构发生改变,分子间聚合并沉淀。
4.表面活性剂和变性剂:表面活性剂主要改变酶分子正常的折叠,暴露酶分子疏水内核的疏水基团,使之变性;变性剂与酶分子结合,改变其稳定性,使之发生变性。
生物因素微生物或蛋白水解酶的作用使酶分子被水解。
6.简述酶活力测定方法的原理直接测定法:有些酶促反应进行一段时间后,酶底物或产物的变量可直接检测。
间接测定法:有些酶促反应的底物或产物不易直接检测,一次必须与特定的化学试剂反应,形成稳定的可检测物。
酶偶联测定法:与间接测定法相类似,只是使用一指示酶,使第一酶的产物在指示酶的作用下转变成可测定的新产物。
酶工程问答题
酶工程习题集第一章绪论1、发展史:1903年Henri中间络合物学说;1913年Leonor Michaelis和Maud Menten 米氏方程;Daniel E. Koshland提出了诱导契合学说。
1926年,萨母纳(Sumner)提出酶的本质是蛋白质的观点。
1960年.雅各(Jacob)和莫若德(Monod)提出操纵子学说,1982年,切克(Cech)等人发现四膜虫(Tetrahynena)细胞的26s rRNA前体具有自我剪接功能(self-splicing)。
核酶(Ribozyme,也称核糖核酸酶,以区别于蛋白质酶);1983年阿尔彻曼(Sidney. Altman)发现核糖核酸酶P (RNAase P)2、核酸类酶(ribozyme):具有生物催化剂所有特性,是一类由RNA组成的酶。
底物有哪些?3、酶的新概念?分类?4、人工酶、模拟酶、化学修饰酶、克隆酶、突变酶、新酶、抗体酶第二章酶学基础1、酶促反应的特点?优缺点?2、按酶促反应性质将生物体所有的酶分为哪六大类?如何编号?3、终止一个酶促反应的方法有哪些?4、全酶的组成?按酶蛋白结构不同分类?5、别构酶、别构效应、配体6、活性部位(结合部位与催化部位),必需基团,活性中心的亲核性基团:酸碱性基团:7、参与蛋白类酶活性中心频率最高的氨基酸7 种?8、酶活力单位(U);比活力;同族酶;丝氨酸蛋白酶与巯基蛋白酶各有哪些?9、酶活性中心基团的检测方法有哪三种?10、酶的pH稳定性与温度稳定性如何测定?第三章酶的催化机制1、酶高效率催化的五种机制2、何谓邻近与定向效应?何谓构象变化效应?何谓共价催化?何谓酸碱催化?何谓微环境效应?如何理解?第四章酶的催化动力学1、绘制底物浓度对酶促反应速度影响的双曲线(标明各参数),并简述其影响。
2、米-曼氏方程(Michaelis-Menten equation);中间产物学说3、稳态的含义,中心内容。
3、绘制酶反应过程中各物质浓度变化曲线图4、如何利用双倒数作图法(又称林-贝氏作图法)求K m值与V max值测定5、通过酶促动力学方法鉴别一个抑制剂对酶的抑制是可逆还是不可逆抑制作用?6、从线性动力学模型表示式、动力学方程、米氏方程图、双倒数方程作图区别竞争性抑制、非竞争性抑制作用和反竞争性抑制作用?7、竞争性抑制、非竞争性抑制作用和反竞争性抑制的特点是什么?8、各举一例说明何谓Ks型不可逆抑制剂和Kcat型不可逆抑制剂(自杀性底物)?9、酶活力、比活力、纯化倍数、得率概念,计算。
酶工程(山东联盟)知到章节答案智慧树2023年滨州医学院
酶工程(山东联盟)知到章节测试答案智慧树2023年最新滨州医学院第一章测试1.酶工程的研究内容主要包括()。
参考答案:酶的生产;酶的应用;酶的改造2.对于结合酶来说,与酶蛋白结合较为松散的是()。
参考答案:辅酶3.以下关于酶的可逆抑制剂说法正确的一项是参考答案:非竞争性抑制剂与酶作用时,通常会引起酶催化反应的最大反应速率减小4.酶活力单位1kat是指特定条件下参考答案:每秒催化1mol底物转化为产物的酶量5.下列关于酶活性部位的描述,()项是错误的。
参考答案:不同肽链上的有关基团不能构成该酶的活性部位6.对于结合酶来说,决定反应特异性的是参考答案:酶蛋白7.竞争性抑制的特点是酶催化反应的最大反应速度Vm不变,而米氏常数Km减小。
参考答案:错8.非竞争性抑制剂的特点是最大反应速度Vm减少,而米氏常数Km不变。
参考答案:对9.反竞争性抑制剂的特点是最大反应速度Vm和米氏常数Km同时减小。
参考答案:对10.酶的改性研究内容主要包括()。
参考答案:酶分子修饰;酶定向进化;酶的非水相催化;酶与细胞的固定化第二章测试1.培养基中常用的无机氮源主要有参考答案:硝酸铵2.酶生产中最理想的合成模式是参考答案:延续合成型3.下列不属于常用的物理诱变剂的是参考答案:8-AG4.属于微生物培养常用的微量元素是参考答案:铜5.细菌和放线菌生长的最适pH值为参考答案:pH 6.5~86.酶的合成与细胞生长同步进行,生长进入平衡期后,酶又延续合成一段时间,该产酶模式称为滞后合成型参考答案:错7.滞后合成型模式的特点是酶的合成不受分解代谢物或产物的阻遏;酶所对应的mRNA相当稳定。
参考答案:对8.表面活性剂可以与细胞膜相互作用,增加膜通透性,利于胞外酶分泌。
参考答案:对9.保藏的菌种用于发酵生产之前,需经过细胞活化,恢复生命活性。
参考答案:对10.影响酶生物合成模式的一般规律为参考答案:mRNA稳定性差,酶的合成随着细胞停止生长而终止;受某些物质阻遏的,需在细胞生长一段时间或在平衡期后(解除阻遏),开始合成酶。
酶工程习题(含参考答案)
酶工程习题(含参考答案)一、单选题(共47题,每题1分,共47分)1.酶的提取是()的技术过程。
A、从含酶物料中分离获得所需酶B、使胞内酶从含酶物料中充分溶解到溶剂或者溶液中C、从含酶溶液中分离获得所需酶D、使酶从含酶物料中充分溶解到溶剂或者溶液中正确答案:D2.有些酶在细胞进入平衡期以后还可以继续合成较长的一段时间,这是由于()。
A、该酶所对应的mRNA稳定性好B、该酶所对应的DNA稳定性好C、细胞自溶后使酶分泌出来D、培养基中还有充足的营养成分正确答案:A3.对酶的空间结构和催化机理有充分了解的基础上,对酶的结构进行精确的调控,从而获得具有所需催化活性的新酶的方法称为()。
A、酶的人工改造B、酶的理性设计C、酶的定向进化D、酶的理性进化正确答案:B4.DNA重排操作中,由亲本基因通过DNase I剪切获得的随机片段()。
A、具有同样长度、无序列倾向性B、具有同样长度、有序列倾向性C、具有不同长度、无序列倾向性D、具有不同长度、有序列倾向性正确答案:D5.天苯肽是由()缩合而成。
A、L-天冬氨酸的a-羧基与D-苯丙氨酸甲酯的a-羧基B、L-天冬氨酸的a-羧基与L-苯丙氨酸甲酯的氨基C、L-天冬氨酸的a-羧基与L-苯丙氨酸的氨基D、L-天冬氨酸的a-羧基与L-苯丙氨酸甲酯的a-羧基正确答案:B6.以下以代号表示的试剂中哪种能用于组氨酸咪唑基的化学修饰的()。
A、DNFBB、DNSC、DPCD、DTNB正确答案:C7.搅拌罐反应器中进行某酶催化反应,反应液体积为5立方米,反应液温度从20℃升至40℃,热利用率为80%,反应过程中实际所需热量为()kcal。
A、125000B、125C、80D、80000正确答案:A8.以下不是用于酶分子修饰的大分子修饰剂的是()。
A、戊二醛B、右旋糖苷C、肼D、聚乙二醇E、肝素正确答案:A9.动物细胞的营养要求较复杂,必须供给各种氨基酸、维生素、激素和生长因子等,一般加入()就可以满足要求。
酶工程题
第一章绪论重点并提问的内容•1、解释酶工程、酶转换数、酶的改性?答:酶工程:酶的生产、改性与应用的技术过程。
•2、根据起催化作用的主要组分不同,酶的分类如何?•3、酶工程主要研究内容?酶工程的主要内容包括:微生物细胞发酵产酶,动植物细胞培养产酶,酶的提取与分离纯化,酶分子修饰,酶、细胞、原生质体固定化、酶的非水相催化、酶定向进化、酶反应器和酶的应用等。
•4、简述影响酶催化作用的主要因素?•5、酶催化作用的特点?6、酶的专一性包括哪些?1、酶活力、酶比活力、酶转换数是什么量度指标?2、可逆性抑制作用中动力学参数都如何变化?3、蛋白类酶和核酸类酶可继续如何分类?4、酶活力单位如何定义?5、试述酶活力测定的基本过程?6、试述木瓜蛋白酶的生产方法?答:木瓜蛋白酶可以采用提取分离法、基因工程菌发酵法、植物细胞培养法等多种方法进行生产。
(1)提取分离法:从木瓜的果皮中获得木瓜乳汁,通过各种分离纯化技术获得木瓜蛋白酶。
(2)发酵法:通过DNA重组技术将木瓜蛋白酶的基因克隆到大肠杆菌等微生物中,获得基因工程菌,在通过基因工程菌发酵获得木瓜蛋白酶。
(3)植物细胞培养法:通过愈伤组织诱导获得木瓜细胞,在通过植物细胞培养获得木瓜蛋白酶。
•答:1、提取分离法2、生物合成法:(1)微生物发酵产酶(2)植物细胞培养产酶(3)动物细胞培养产酶3、化学合成法第二章微生物发酵产酶1、解释酶的发酵生产、酶的诱导、酶的反馈阻遏(产物阻遏)、分解代谢物阻遏。
诱导物的种类?2、微生物产酶模式几种?特点?最理想的合成模式是什么?(1)同步合成型特点:1、发酵开始,细胞生长,酶也开始合成,说明不受分解代谢物和终产物阻遏。
2、生长至平衡期后,酶浓度不再增长,说明mRNA很不稳定。
(2)延续合成型特点:1、该类酶不受分解代谢产物阻遏和终产物阻遏。
2、该酶对应的mRNA是相当稳定的。
(3)中期合成型特点:1、该类酶的合成受分解代谢物阻遏和终产物阻遏。
酶工程课后问答题
酶⼯程课后问答题第⼀章绪论1.什么叫酶⼯程?酶⼯程的主要任务是什么?答:(1)酶的⽣产与应⽤技术过程称为酶⼯程。
(2)酶⼯程的主要任务是经过预先设计,通过⼈⼯操作,获得⼈们所需的酶,并通过各种⽅法使酶充分发挥其催化功能。
2.常⽤酶的活⼒单位及其定义是什么?答:常⽤酶的活⼒单位:IU和卡特(kat)IU:表⽰每分钟催化1umol的底物转化为产物的酶量为⼀个酶活⼒单位。
卡特(kat):表⽰每1s催化1mol底物转化为产物的酶量定义为 1卡特3.液体酶的酶活⼒测定⼀般要经历哪些步骤?举例说明。
答:㈠液体酶的酶活⼒测定⼀般哟啊经过四个步骤:①根据酶催化的专⼀性,选择适宜的底物,并配制成⼀定浓度的底物溶液。
②根据酶的动⼒学性质,确定催化反应的温度、PH值、底物浓度、激活剂浓度等反应条件。
③在⼀定的条件下,将⼀定量的酶液和底物溶液混合均匀,适时记下反应开始的时间。
④反应到⼀定的时间,取出适量的反应液,运⽤各种⽣化检测技术,测定产物的⽣成量或底物的减少量。
㈡举例说明:如测定蛋⽩酶的活⼒时,选择蛋⽩作为底物,并配制成⼀定浓度的溶液;根据蛋⽩酶的动⼒学性质,确定溶液的温度为28℃,PH值为8.5;将底物蛋⽩液蛋⽩酶混合均匀,取出适量的反应液,测出产物的⽣成量或底物的减少量。
4、酶的⽣产⽅法有⼏种?各有何优缺点?答:酶的⽣产⽅法有三种。
㈠提取分离法:采⽤各种提取、分离、纯化技术从动物和植物的组织、器官、细胞或微⽣物中将酶提取出来,再进⾏分离纯化的技术过程。
优点:设备较简单,操作⽅便。
缺点:受⽣物资源、地理环境、⽓候条件影响,或者使⼯艺路线变得繁杂。
㈡⽣物合成法:利⽤微⽣物细胞、植物细胞或动物细胞的⽣命活动⽽获得⼈们所需酶的技术过程。
优点:⽣产周期短,酶产率较⾼,不受⽣物资源、地理环境和⽓候条件影响。
缺点:对发酵设备和⼯艺条件要求⾼㈢化学合成法:采⽤化学技术合成⼈们所需酶的技术。
优点:对认识和阐明⽣物体的⾏为和规律、设计和合成⾼效率具有重要理论意义。
酶工程重点背!!!
1、问答:为什么说酶活性部位的柔性是其充分表现活性所必需的?答:1)、诱导契合:满足底物结合诱导的构象改变,以使酶活性部位的活性基团形成一定的空间取向,从而保持一个适应催化反应的空间微环境;2)、残基侧链活性基团的运动更加有利于酶催化的高效性;3)、很多酶的催化效率和底物专一性都受其他因素调节,这就要求酶的活性部位保持一定的柔性,使其局部环境受调节因素影响后能发生细微构象变化,从而调节酶的活性和底物专一性。
2、问答:辩证谈“酶的柔性和刚性是局部的,也是相对的”。
答:1)、对于局部柔性部位必须要由其刚性部分来支持;2)、酶分子既要有相对稳定的整体结构,又要有相对柔性的微环境状态。
正是这种刚柔相济的独特酶分子结构,构成了酶催化反应高效性和可调节性的结构基础。
3、问答:如何理解“Km可了解酶的底物在体内具有的浓度水平”?答:由Km的式子(列出),一般来说作为酶的最适底物,其在体内的浓度水平应接近于它的Km值。
1)、若体内[S0] « Km,则V « Vmax,说明大部分的酶在体内是不起作用的,处于一种浪费的状态;2)、若体内[S0] » Km,则V≈Vmax,这种底物浓度会失去生理意义,也不符合实际。
4、区别可逆抑制和不可逆抑制作用的动力学方法:1)、方案一:取一定量I+E,预保温一段时间——取不同量混合液,测在固定体积反应体系中的初V。
1-未加抑制剂2-加入不可逆抑制剂3-加入可逆抑制剂当混合液加入底物时,对3而言,相当于将酶和抑制剂均稀释了,取出的混合液体积越小其被稀释的倍数也就越大,体系中抑制剂的浓度也就越小,相应的抑制作用就越弱。
(2-不可逆抑制剂仅降低酶浓度)2)、方案二:固定反应体系体积,加入一定量抑制剂——加不同浓度的酶——测酶活。
1-未加抑制剂2-加入不可逆抑制剂3-加入可逆抑制剂初速度对酶浓度作图,对2而言,当加入的是一定量不可逆抑制剂,那么一定量酶失活,只有加入的酶量大于不可逆抑制剂的量时才能表现出酶活力;对3而言,加入可逆抑制剂只是降低了反应速率,得斜率降低的直线。
酶工程章节重点(含答案)
离子的亲和力不同而达到分离目的
凝胶层析,以各种多孔凝胶为固定相,利用流动相中所含各种组分的 相对分子质量不同而达到物质分离
层析柱中装有多孔凝胶,大分子物质分子直径大,不能进入凝胶的微
孔,以较快的速度流过凝胶柱。较小的分子能进入凝胶的微孔内,这 就使小分子物质向下移动的速度比大分子的速度慢,从而使混合溶液
盐溶液提取
ห้องสมุดไป่ตู้
0.02~0.5mol/L的盐溶 用于提取在低浓度盐溶液中溶解 液 度较大的酶 PH2~6的水溶液 用于提取在稀酸溶液中溶解度大, 且稳定性较好的酶
用于提取在稀碱溶液中溶解度大 且稳定性较好的酶
酸溶液提取
碱溶液提取
PH8~12的水溶液
有机溶剂提 取
可与水混溶的有机溶剂 用于提取那些与脂质结合牢固或 含有较多非极性基团的酶
添加表面活性剂 表面活性剂可以与细胞膜相互作用,增加细胞的透过性, 有利于胞外酶的分泌,从而提高酶的产量。 将适量的非离子型表面活性剂,如吐温(Tween)、特里顿 (Triton)等添加到培养基中,可以加速胞外酶的分泌,而使 酶的产量增加。 添加产酶促进剂 可以促进产酶、但是作用机理未阐明清楚的物质。 例如,添加一定量的植酸钙镁,可使霉菌蛋白酶或者桔青 霉磷酸二酯酶的产量提高1~20倍;添加聚乙烯醇 (Polyvinyl alcohol)可以提高糖化酶的产量。 产酶促进剂对不同细胞、不同酶的作用效果各不相同,现 在还没有规律可循,要通过试验确定所添加的产酶促进剂的 种类和浓度。
中各组分按照相对分子质量由大到小的顺序先后流出层析柱,而达到
分离的目的。
接上页:依操作形式(固定相基质的形式)分:纸层析、
薄层层析、柱层析。依流动相分:液相层析、气相层析。
《酶工程》考试问答题总结(含答案)
《酶工程》考试问答题总结(含答案)1、利用微生物生产酶制剂的优点是什么?对产酶菌种的要求是什么?答:优点:1)微生物种类多,酶种丰富,且菌株易诱变、可变。
2)微生物繁殖速度快,生产周期短,生产能力强,产酶量高。
3)易分离提取,特别是胞外酶。
4)原料来源广泛,价格便宜,生产成本低。
5)容易实现大规模机械化,自动化连续化工生产。
6)可利用生物工程新技术,选育新菌种,提高产酶量,增加酶种。
要求:1)不是致病菌,在系统发育上,最好与病原体无关。
在食品与医药方面注意安全性。
2)能够利用廉价原料,发酵周期短,产酶量子。
3)菌种遗传性要稳定,不易变异退化,不易感染噬菌体,保证生产的稳定重要性。
4)最好选用产胞外酶的菌种,有利于酶的分离,回收率高。
2、酶分子修饰的原因、目的和基本原理是什么?主要的修饰方法是什么?答:原因:(1)活力问题:酶目前来源是生物材料,生物技术和产量有限,活力不高。
(2)稳定性问题:酶是蛋白质,一般不稳定,使酶制剂的生产,保存反应有很大不便和问题(3)具有抗原性:酶是高分子蛋白质,作为药物使用,在生物体中有抗原反应及被抗体代谢失效的危险。
(4)反应控制问题:实际反应中pH、温度等多种因素不易达到保持酶的最适合条件。
目的:提高酶活力;增强酶的稳定性;降低或是消除酶的抗原性,总之可以大大改善天然酶的不足之处,使其更适合于工业生产的应用要求。
3、酶活力测定需注意哪些问题?答:(1)测定的酶反应速度必须是初速度:一般指底物消耗量在5%以内或是食物形成占总产量的15%一下时的速度,只有初速度才与底物浓度成正比;(2)反应必定在酶最适合的反应条件下进行;(3)用反应速度对酶速度作图应将是一条通过原点的直线;(4)底物浓度,辅助因子浓度必定大于酶浓度;(5)测酶活力所用试剂中不应含有酶的抑制剂,激活剂。
4、简述酶提取的方法与过程。
答:1)方法:a 盐溶解提取 b 酸溶液提取 c 碱溶液提取 d 有机溶液提取。
酶工程各章试题
酶工程第一章测试试题卷一填空每空1分,共20分1.1878年,____首次将酵母中酒精发酵的物质称为酶.2.1913年,Michaelis 和Menten根据中间产物学说,推导出酶催化反应的基本动力学方程----米氏方程,可用公式表示为_______.3.1982年Thomas Cech等人发现四膜虫的rRNA可以在没有蛋白质存在的情况下自身催化切除内含子,完成加工过程.这一具有催化活性的RNA的发现改变了传统的酶的化学本质是____________的概念;4.对同一种酶可同时采用系统命名和_____命名两种方法.5.乳酸脱氢酶可标识为1.1.1,其中EC代表_________.6.催化L-谷氨酸 D—谷氨酸的酶属于________酶.7.核酸类酶的基本组成单位是_________.8.酶的有机辅助因子在催化过程中起_______________的作用.9.在酶的二级结构β—片状折叠中,________式结构更稳定.10.酶的绝对专一性又称为___________专一性.11.PH对酶的影响主要是影响到了氨基酸的________状态.12.在测酶活力时,为了使酶反应速度不受底物浓度底限制,反应系统应使用足够高的底物浓度,一般要求:__________.13.酶分离纯化整个工作包括三个基本环节:抽取纯化和________.14.工业应用的三大酶制剂是蛋白酶 ________和脂肪酶.15 核酸类酶催化反应的类型,可以将R-酶分为三类:剪切酶,剪接酶和________酶.16、具有不同分子形式但却催化相同反应的酶称为__________.17、每毫克蛋白或RNA中所具有的酶活力数称为酶的_______.用u/mg表示.18、酶制剂可分为液体酶制剂,固体酶制剂,纯酶制剂和_______酶制剂.二. 选择题每题2分,共10分1.谷氨酸脱氢酶可有以下四种底物,由Km推断它的最适底物是 .A. 谷氨酸Km=B. α-酮戊二酸Km=C. NAD氧化形 Km=D. NAD 还原形 Km=2. D EA B CF G图示抑制模式属于:A累积反馈抑制B无分支途径中酶活性反馈抑制C 顺序反馈抑制D 协调反馈抑制3.有两种蛋白酶样品,A样品32mg,酶活力单位数为样品52mg ,酶活力单位数为190U,则两样品纯度为:A A >B B. A < B C. A = B D. 不能断定.4.某酶四种底物的Km 如下,与酶亲和力最大的底物是:A ×10-2B × 10-1C ×10-2D ×10-65.从世界范围看,酶制剂在哪一行业中的应用占比例最高A 淀粉业B 乳制品C 洗涤剂业D 制酒业三. 名词解释每题3分,共12分1.调节酶2.别构效应3.固定化酶四. 判断题每题1分,共7分2.1/Km越大,酶与底物亲和力越大.3.酶的最适温度是一个固定不变的常数,其数值不受底物的种类.作用时间而改变.4.盐析法分离蛋白质时,应将溶液PH调至蛋白质等电点附近.5.酶浓度越高,酶结晶越大.6.调节酶就是别构酶.7.大肠杆菌丙酮酸脱氢酶是多酶复合体.五. 说明题共6分1.图示并说明竞争性抑制和非竞争性抑制的区别.6分六. 简答题共21分1.简介酶分子中氨基酸残基种类及作用.8分2请比较说明吸附层析、离子交换层析、凝胶层析、亲和层析的原理.8分3、固定化酶的制备原则是什么5分酶工程第一章测试参考答案一填空每空1分,共18分1.库尼 =vmaxS/Km+S 3.酶是具有生物催化功能的蛋白质.4.习惯5.国际酶学委员会6.异构酶7.核糖核苷酸8.传递电子原子和基团的作用.9.反平行10.立体异构11.解离 12.S>5Km 13.制剂. 14淀粉酶 15多功能酶16同工酶 17酶的比活力.18固定化酶制剂二. 选择题每题3分,共15分. 4D三. 名词解释每题5分,共15分1.调节酶: 在代谢途径和物质转化体系中起调节作用的关键酶.2.别构效应:一种化合物与酶的活性中心以外的部位结合,引起酶的构象发生变化的现象.3.固定化酶:在一定空间内呈闭锁状态存在的酶,能连续地进行反应,反应后酶可以回收重复使用.四. 判断题每题2分,共14分1.正确2.错误3. 正确4. 错误5. 错误6. 正确7. 正确五、图示说明题共12分2.图示并说明竞争性抑制和非竞争性抑制的区别.6分竞争性抑制剂结构往往与正常底物非常相似,从而与底物竞争酶分子上同一个结合部位活性中心,阻止底物和酶的结合.因而酶不能与抑制剂和底物同时结合.ESI复合物缺乏反应活性基团不能继续分解成产物,形成死端复合物.图4分,解释2分不论底物分子是否与酶结合, 非竞争性抑制剂都能与酶分子结合产生死端复合物. 非竞争性抑制剂与活性中心以外的基团结合,其结构肯与底物分子毫无相关之处,两者没有竞争作用,但ESI不能进一步分解成产物. 图4分,解释2分七. 简答题共26分1.请比较说明吸附层析、离子交换层析、凝胶层析、亲和层析分离酶的原理.16分1维持酶的催化活性和专一性.2应有利于生产自动化.连续化.3与载体牢固结合4载体不与底物.产物和反应物发生化学反应.5成本要低,利于工业使用.第二、三章酶的生物合成法生产测试题填空题1、SOD是_________酶,具有____________________的功效;2、依据在体外培养时对生长基质依赖性差异,动物细胞可分为两类:__________、______________;3、动物细胞培养的PH应控制在______________;温度控制在_______,允许波动_______;判断题谷草芽孢杆菌是应用最广泛的产酶微生物;√大多数产酶微生物采用淀粉或其水解产物为碳源,植物细胞一般以蔗糖为碳源;√植物细胞培养要求的氮源一般为有机氮源;×动物细胞培养主要用于各种功能蛋白质的生产;√动物细胞传代培养时可以用胃蛋白酶分散细胞;×简答题:1、固定化原生质体产酶有何特点2、植物细胞培养产酶的工艺流程3、酶的生物合成有哪几种模式各有何特点P36-384、影响酶生物合成的主要因素有哪些结合酶的生物合成模式,分析说明怎样提高产酶效率;P39答案:填空题1、抗辐射、抗氧化、抗衰老2、贴壁依赖型细胞,非贴壁依赖型细胞3、-微碱性,℃ ,允许波动范围在+-℃简答题1、1、变胞内产物为胞外产物固定化黑曲霉原生质体生产葡萄糖氧化酶,使细胞内葡萄糖氧化酶的90%以上分泌到细胞外;2、提高产酶率固定化枯草芽孢杆菌原生质体生产碱性磷酸酶,使原来存在于细胞间质中的碱性磷酸酶全部分泌到发酵液中,产酶率提高36%;3、稳定性好4、易于分离纯化2、外植体诱导愈伤组织细胞培养分离纯化酶第四章酶的提取与分离纯化测试题填空题1、酶在结晶之前,酶液必须经过纯化达到一定的纯度;通常酶的纯度应当在_______以上,方能进行结晶;2、酶结晶的主要方法有:________、________、________、________;3、酶的剂型有:_____、______、________和固定化酶制剂;通常用作分析试剂或用作医疗药物的酶制剂要求是___________ ;4、注射用的医用酶应设法除去____________;判断题1、一般采用稀盐溶液进行酶的提取,盐的浓度一般控制在~ mol/L ;√2、常用硫酸铵盐析沉淀酶蛋白;√3、盐析沉淀酶蛋白时,溶液的pH值应调节到远离酶的等电点;×4、等电点结晶是通过缓慢改变浓酶液的pH值,使之逐渐远离酶的等电点,而使酶析出结晶的过程;×名词解释:1、选择性变性沉淀法2、酶的提取3、亲和层析简答题:1、酶的分离纯化工作的基本原则2、举例说明细胞破碎的几种方法及原理;3、稳定酶的方法有哪些答案:填空题1、50%;2、盐析结晶法、有机溶剂结晶法、透析平衡结晶法、等电点结晶法;3、固体酶制剂、液体酶制剂、纯酶制剂、固定化酶制剂;纯酶制剂;4、热源物质名词解释1、选择性变性沉淀法:选择一定的条件使酶液中存在的某些杂蛋白等杂质变性沉淀,而不影响所需的酶,这种分离方法称为选择性变性沉淀法2、酶的提取是指在一定的条件下,用适当的溶剂处理含酶原料,使酶充分溶解到溶剂中的过程,也称为酶的抽提;3、亲和层析是利用生物分子与配基之间所具有的专一而又可逆的亲和力,使酶等生物分子分离纯化的技术;简答题1、1、防止酶变性失效凡用于预防蛋白质变性失效的方法与措施都应考虑用于酶的分离纯化;A、除少数例外外,所有操作都必须在低温条件下进行,特别是在有机溶剂存在的情况下更应小心;B、大多数酶在PH<4或PH>10的情况下稳定,应控制整个系统不要过酸、过碱,同时要避免在调整PH时局部过酸或过碱;C、重金属能使酶失效,有机溶剂能使酶变性,微生物污染以及蛋白酶的存在都能使酶分解破坏,所有这些都应周全考虑;可以加入蛋白酶抑止剂,杀菌剂,稳定蛋白质构象和酶活性的还原剂;2、酶活性测定贯串纯化过程的始终也就是说,从原理开始,整个过程的每一步都要进行比活力与总活力的检测与比较,以便知道每一步骤中可采用什么方法与什么条件,分别使酶的纯度提高了多少,回收了多少酶,从而决定其取舍;3、选择有效的纯化方法凡用于蛋白质纯化的一切方法同样适用于酶;应根据目的酶的物理、化学性质选取;4、原料来源要方便,成本要低1、添加底物、抑止剂和辅酶2、添加-SH保护剂如谷胱甘肽、二巯基乙醇3、低温0-4℃4、添加某些低分子无机离子 Ca2+保护淀粉酶,Mn2+能稳定溶菌酶,CL-能稳定透明质酸酶等5、固体酶制剂稳定性高可保存数月或几年以上;热敏性酶多用冷冻干燥法,例如注射用酶等;6、固定化酶也是提高酶的稳定性的好方法;第四章酶的提取与分离纯化测试题填空题1、酶在结晶之前,酶液必须经过纯化达到一定的纯度;通常酶的纯度应当在_______以上,方能进行结晶;2、酶结晶的主要方法有:________、________、________、________;3、酶的剂型有:_____、______、________和固定化酶制剂;通常用作分析试剂或用作医疗药物的酶制剂要求是___________ ;4、注射用的医用酶应设法除去____________;判断题1、一般采用稀盐溶液进行酶的提取,盐的浓度一般控制在~ mol/L ;√2、常用硫酸铵盐析沉淀酶蛋白;√3、盐析沉淀酶蛋白时,溶液的pH值应调节到远离酶的等电点;×4、等电点结晶是通过缓慢改变浓酶液的pH值,使之逐渐远离酶的等电点,而使酶析出结晶的过程;×名词解释:1、选择性变性沉淀法2、酶的提取3、亲和层析简答题:1、酶的分离纯化工作的基本原则2、举例说明细胞破碎的几种方法及原理;3、稳定酶的方法有哪些答案:填空题1、50%;2、盐析结晶法、有机溶剂结晶法、透析平衡结晶法、等电点结晶法;3、固体酶制剂、液体酶制剂、纯酶制剂、固定化酶制剂;纯酶制剂;4、热源物质名词解释1、选择性变性沉淀法:选择一定的条件使酶液中存在的某些杂蛋白等杂质变性沉淀,而不影响所需的酶,这种分离方法称为选择性变性沉淀法2、酶的提取是指在一定的条件下,用适当的溶剂处理含酶原料,使酶充分溶解到溶剂中的过程,也称为酶的抽提;3、亲和层析是利用生物分子与配基之间所具有的专一而又可逆的亲和力,使酶等生物分子分离纯化的技术;简答题1、1、防止酶变性失效凡用于预防蛋白质变性失效的方法与措施都应考虑用于酶的分离纯化;A、除少数例外外,所有操作都必须在低温条件下进行,特别是在有机溶剂存在的情况下更应小心;B、大多数酶在PH<4或PH>10的情况下稳定,应控制整个系统不要过酸、过碱,同时要避免在调整PH时局部过酸或过碱;C、重金属能使酶失效,有机溶剂能使酶变性,微生物污染以及蛋白酶的存在都能使酶分解破坏,所有这些都应周全考虑;可以加入蛋白酶抑止剂,杀菌剂,稳定蛋白质构象和酶活性的还原剂;2、酶活性测定贯串纯化过程的始终也就是说,从原理开始,整个过程的每一步都要进行比活力与总活力的检测与比较,以便知道每一步骤中可采用什么方法与什么条件,分别使酶的纯度提高了多少,回收了多少酶,从而决定其取舍;3、选择有效的纯化方法凡用于蛋白质纯化的一切方法同样适用于酶;应根据目的酶的物理、化学性质选取;4、原料来源要方便,成本要低1、添加底物、抑止剂和辅酶2、添加-SH保护剂如谷胱甘肽、二巯基乙醇3、低温0-4℃4、添加某些低分子无机离子 Ca2+保护淀粉酶,Mn2+能稳定溶菌酶,CL-能稳定透明质酸酶等5、固体酶制剂稳定性高可保存数月或几年以上;热敏性酶多用冷冻干燥法,例如注射用酶等;6、固定化酶也是提高酶的稳定性的好方法;第五章酶分子的修饰与应用测试题填空题1、酶分子修饰的意义是:_____________,______________,_________;名词解释1、酶分子修饰通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功能的过程称为酶分子修饰;2、金属离子置换修饰3、酶分子的物理修饰简答题:1、什么是酶分子的侧链修饰酶分子侧链修饰有何意义2、请举例说明酶分子修饰的应用答案填空题:1、提高酶的活力;增强酶的稳定性;降低或消除酶的抗原性;名词解释1、酶分子修饰:通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功能的过程称为酶分子修饰;2、把酶分子中的金属离子换成另一种金属离子,使酶的功能和特性发生改变的修饰方法称为金属离子置换修饰;3、通过各种物理方法使酶分子的空间构象发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功能的方法称为酶分子的物理修饰;简答题1、采用一定的方法一般为化学法使酶的侧链基团发生改变,从而酶分子的特性和功能的修饰方法称为侧链基团修饰;意义:1、通过酶分子侧链基团修饰,可以研究各种基团在酶分子中的作用及其对酶的结构、特性和功能的影响,并可以用于研究酶的活性中心的必须基团;如果某基团修饰后不引起酶活力的显着变化,则可以认为此基团属于非必须基团;2、通过酶分子侧链基团修饰,可以测定某一种基团在酶分子中的数量,例如,采用三硝基苯磺酸测定氨基的数量;用对汞苯甲酸测定巯基的数量;用碳二亚胺测定羧基的数量;用四唑重氮盐测定咪唑基的数量等;3、酶分子侧链基团修饰,在酶工程方面可以提高酶的活力、增加酶的稳定性、降低酶的抗原性,并且可以引起酶催化特性和催化功能的改变,以提高酶的使用价值;4、酶分子侧链基团修饰,还可以获得自然界原来不存在的新酶种,例如,某些抗体酶和人工改造的核酸类酶;第六章酶、细胞、原生质体固定化与应用测试题填空题1、固定化酶的制备方法主要有:______、_______、________、_________;2、交联法常用的双功能试剂是:_____________;判断题1、酶经固定化后,其作用的最适pH值往往会发生一些变化;√2、固定化酶的最适作用温度与游离酶相比没有变化;×3、一般来说,用带负电荷的载体制备的固定化酶,其最适pH值比游离酶的最适pH值为高即向碱性一侧移动;用带正电荷载体制备的固定化酶的最适pH值比游离酶的最适PH为低即向酸性一侧移动√4、一般说来,催化反应的产物为酸性时,固定化酶的最适pH值要比游高酶的最适PH低一些;产物为碱性时,固定化酶的最适pH值要比游离酶的最适pH值高一些;×5、固定化酶的底物特异性变化与底物分子量的大小有一定关系;√名词解释1、交联法2、载体活化3、固定化细胞;简答题1、什么是固定化酶有何显着优点2、请举例说明固定化酶、细胞、原生质体技术的应用答案填空题1、吸附法、包埋法、结合法、交联法和热处理法等;名词解释1、交联法:借助双功能试剂使酶分子之间发生交联作用,制成网状结构的固定化酶的方法称为交联法;2、载体活化:要使载体与酶形成共价键对酶进行固定化,必须首先使载体活化,即借助于某种方法,在载体上引进一活泼基团;然后此活泼基团再与酶分子上的某一基团反应,形成共价键;3、固定在载体上并在一定的空间范围内进行生命活动的细胞称为固定化细胞;简答题1、什么是固定化酶有何显着优点固定化酶是指固定在一定载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶;固定化酶既保持了酶的催化特性,又克服了游离酶的不足之处,具有增加稳定性、可反复或连续使用以及易于和反应产物分开等显着优点;2、略第七章酶非水相催化测试题判断题1、有机溶剂往往会使酶变性失活,因此只有在水溶液中酶才有催化活性;2、在有机介质中,由于酶分子活性中心的结合部位与底物之间的结合状态发生某些变化,致使酶的底物特异性发生改变;3、许多酶在有机介质中的热稳定性比在水溶液中的热稳定性更好;4、目前世界上化学合成药物中的40%左右属于手性药物;在这些手性药物中,大多数仍然以外消旋体形式使用;5、常用的消炎解热镇痛药萘普生Neproxen的两种对映体中,S +-萘普生的疗效是R---萘普生疗效的28倍;6、镇静剂反应停的S-构型有镇静作用,R-构型也有镇静作用,但疗效甚微;7、一些消旋体药物可以在有机介质体系中用酶法进行拆分,获得单一对映体;名词解释1、酶的对映体选择性2、手性化合物第八章酶定向进化复习题一、填空题:酶基因随机突变的方法有:________、____________、_________;二、名词解释:酶定向进化易错PCR技术三、简答题:1.酶定向进化的特点2.酶随机突变的三种方法是什么请解释并比较分析;3.举例说明酶定向进化技术的应用;第九章酶反应器复习题P240复习题1、2、5第十章 1 酶在医药方面的应用测试题一、填空题1、指示肝功能异常的常用酶有:____、______、_______;2、_________酶可以检测癌细胞;3、治疗消化不良、食欲不振的酶有:______、______、________;4、具有抗癌作用的酶有:______、______、_______、__________;5、_________酶可以治疗各种出血;6、_____________酶可以治疗龋齿;7、___________酶可以溶血栓;8、____________酶可以治疗白血病;9、____________酶用于制造抗肿瘤人参皂苷;10、___________酶可用于制造人胰岛素;二、判断题1、乳酸脱氢酶广泛存在于各种组织以及红细胞中,在正常情况下,血清中乳酸脱氢酶的含量很低,但是在肝癌、急性肝炎、心肌梗塞等疾病的患者血清中,该酶活力显着升高;√2、蛋白酶可用于治疗多种疾病,是在临床上使用最早、用途最广的药用酶之一,它可作为消化剂、消炎剂并可用于治疗高血压;√三、请写出以下药品的酶法生产反应式6-氨基青霉烷酸6-APA多巴四、分析说明题1、请分析说明尿糖试纸检测尿糖的原理2、绘图并说明血液透析装置及装置中酶法除去尿素的原理;3、举两例分析说明酶在药物制造方面的应用价值;4、请分析说明溶菌酶的应用价值5、请分析说明SOD的应用价值答案填空题1、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、胆碱酯酶2、端粒酶3、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶4、L-精氨酸酶、L-组氨酸酶、L-蛋氨酸酶、谷氨酰胺酶5、凝血酶6、右旋糖酐酶7、溶纤酶8、L- 天冬酰胺酶9、β-D-葡萄糖苷酶 10、无色杆菌蛋白酶请写出以下药品的酶法生产反应式1、6-氨基青霉烷酸6-APA青霉素青霉素酰化酶 6-氨基青霉烷酸6-APA2、多巴酪氨酸β-酪氨酸酶多巴邻苯二酚+丙酮酸+氨β-酪氨酸酶多巴分析说明题4、溶菌酶主要从蛋清、植物和微生物中分离得到;作用机理:溶菌酶作用于细菌的细胞壁,可使病原菌、腐败性细菌等溶解消灭,对抗生素有耐药性的细菌同样起溶菌作用,具有显着疗效而对人体的副作用很小,是一种较为理想的药用酶;应用价值:临床上主要用于治疗各种炎症,溶菌酶与抗生素联合使用,可显着提高抗生素的疗效,常用于难治的感染病症的治疗;还可用于食品保鲜;在护肤品中添加可以消除皮肤表面黏附的细菌,起到杀菌消炎的作用;5、SOD即超氧化物歧化酶,具有抗氧化、抗衰老、抗辐射的功效,添加到护肤品中可以有效防治紫外线对人体的伤害,消除自由基的影响,减少色素沉着;在医疗领域,用于预防辐射损伤,治疗红斑狼疮,皮肌炎,结肠炎,氧中毒;第十章2 酶在食品方面的应用测试题填空题1、_______酶和__________酶可用于食品保鲜;2、______________酶可将蔗糖原料中的棉子糖分解成蔗糖与半乳糖,提高蔗糖的收得率;3、果胶酶pectinase是催化果胶质分解的一类酶的总称,主要包括______和___________;4、_________酶可用于呈味核苷酸的酶法生产;判断题1、糊精是淀粉低程度水解的产物,广泛应用于食品增稠剂、填充剂和吸收剂;√2、写出以下产品酶法生产的反应式1、L-氨基酸的生产2、低乳糖奶的生产3、L-苹果酸的生产4、天苯肽的酶法生产写出以下工艺过程酶法处理的反应式1、柑橘制品脱苦处理2、果蔬制品的脱色简答题1、请分析说明果葡糖浆生产的工艺流程及条件控制2、请分析说明右旋糖酐酶的应用价值3、请分析说明酶在啤酒发酵生产中的应用答案填空题1、葡萄糖氧化酶,溶菌酶2、蜜二糖酶α-半乳糖苷酶3、果胶酯酶PE,聚半乳糖醛酸酶PG4、5,磷酸二酯酶写出以下产品酶法生产的反应式1、L-氨基酸的生产N-酰基DL-氨基酸氨基酰化酶 L-氨基酸蛋白质蛋白酶 L-氨基酸延胡索酸+氨天冬氨酸酶 L-天冬氨酸α-酮戊二酸+NH3+NADPH谷氨酸脱氢酶 L-谷氨酸+H2O+NADP+a-酮戊二酸+L-氨基酸转氨酶 L-谷氨酸+α-酮酸2、低乳糖奶的生产乳糖乳糖酶β半乳糖苷酶半乳糖+葡萄糖3、L-苹果酸的生产延胡索酸+水延胡索酸酶 L-苹果酸4、天苯肽的酶法生产L-Asp +L-Phe-Ome嗜热菌蛋白酶L-Asp-L-Phe-OmeL-天冬氨酸 L-苯丙氨酸甲酯天苯肽写出以下工艺过程酶法处理的反应式1、柑橘制品脱苦处理柚苷柚配质-7-芸香糖苷柚苷酶β-鼠李糖苷酶鼠李糖+无苦味的普鲁宁柚配质一7一葡萄糖苷2、果蔬制品的脱色花青素花青素酶β-葡萄糖和它的配基简答题1、请分析说明果葡糖浆生产的工艺流程及条件控制工艺流程:淀粉浆a-淀粉酶,Ca2+,80~90℃液化液糖化酶葡萄糖DE>96%层析去Ca2+,pH值为6.5~7.0,加入0.01 mol/L的硫酸镁,在60~70℃的温度条件下,葡萄糖异构酶果葡糖浆;控制条件:1、钙离子对a-淀粉酶有保护作用,在淀粉液化时需要添加,但它对葡萄糖异构酶却有抑制作用,所以葡萄糖溶液需用层析等方法精制;2、控制PH3、控制温度葡萄糖转化为果糖的异构化反应是吸热反应;随着反应温度的升高,反应平衡向有利于生成糖的方向变化,异构化反应的温度越高,平衡时混合糖液中果糖的含量也越高;但当温度超过70℃时,葡萄糖异构酶容易变性失活,所以异构化反应的温度以60~70℃为宜;2、请分析说明右旋糖酐酶的应用价值制糖设备中存在大分子黏性葡聚糖,堵塞管道,妨碍设备清洗及蔗糖的结晶;用右旋糖酐酶内切α-1,6-葡聚糖酶处理,可使右旋糖酐分解为异麦芽糖与异麦芽三糖,黏度迅速下降;右旋糖酐酶还可用于防龋;3、请分析说明酶在啤酒发酵生产中的应用在啤酒酿造过程中,制浆和调理两个阶段是要使用酶制剂的1、浸泡麦芽浆时,温度约65℃,有利于蛋白酶,β-葡聚糖酶,α-淀粉酶,发挥作用,使麦芽中的多糖及蛋百类物质降解为酵母可利用的合适的营养物质;2、加啤酒花前,煮沸麦芽汁使上述酶失活;在发酵完毕后,啤酒需要加一些酶处理,以使其口味和外观更易于为消费者接受;蛋白酶降解使啤酒混浊的蛋白质成分,防止啤酒的冷混浊,延长啤酒的储存期;糖化酶能够降解啤酒中的残留糊精,一方面保证了啤酒中最高的乙醇含量,另一方面不必添加浓糖液来增加啤酒的糖度;这种低糖度的啤酒糖尿病患者也可以饮用;第十章 3 酶在其他领域的应用测试题填空题1、造纸业的主要用酶有:___________和___________;2、________酶可以水解RNA,生产四种5,核苷酸;3、生丝脱胶和羊毛除垢可以用____________酶;4、利用__________酶检测有机磷农药污染5、利用_________酶的同工酶监测重金属污染6、通过___________监测大肠杆菌污染名词解释:酶标记免疫反应检测请分析说明蛋白酶在轻工、化工业中的应用;加酶洗涤剂应该满足什么条件加酶洗涤剂有何优势酶法检测必须具备什么条件答案填空题1、木质素酶,木聚糖酶2、5,-磷酸二酯酶3、蛋白酶4、胆碱酯酶5、乳酸脱氢酶6、β-葡聚糖苷酸酶名词解释:酶标记免疫反应检测是将酶的检测技术与免疫检测技术相结合,用于测定样品液中抗体。
《酶工程》复习大纲答案详解
《酶⼯程》复习⼤纲答案详解《酶⼯程》复习⼤纲试题题型:名词解释,判断题,选择题,简答题,论述题,实验设计题。
第⼀章酶⼯程基础⼀、名词解释:酶:指⽣物体产⽣的具有催化活性的⽣物⼤分⼦。
酶⼯程:由酶学与化学⼯程技术、基因⼯程技术、微⽣物学技术相结合⽽产⽣的⼀门新技术,是⼯业上有⽬的地设计⼀定的反应器和反应条件,利⽤酶的催化功能,在常温常压下催化化学反应,⽣产⼈类所需产品或服务于其它⽬的地⼀门应⽤技术。
转换数:酶使底物每分钟变化的分⼦数。
催化周期:单位时间内每个酶分⼦将底物分⼦转换成产物的最⼤值,即每摩尔酶单位时间催化底物转化为产物的摩尔数。
酶活⼒:也称为酶活性,是指酶催化某⼀化学反应的能⼒。
其⼤⼩可⽤在⼀定条件下,酶催化某⼀化学反应的速度来表⽰,酶催化反应速度愈⼤,酶活⼒愈⾼。
⽐活⼒:指在特定条件下,单位质量的蛋⽩质或RNA所拥有的酶活⼒单位数。
酶活国际单位IU: 1961年国际酶学会议规定:在特定条件(25℃,其它为最适条件)下,每分钟内能转化1µmol底物或催化1µmol产物形成所需要的酶量为1个酶活⼒单位,即为国际单位(IU)。
催量kat:每秒钟转化 1 摩尔底物(被反应物)所需的酶活⼒为1个katal ,简称 kat⼆、问答题1、酶催化的特点有哪些?⾼效性:酶的催化效率⽐⽆机催化剂更⾼,使得反应速率更快;专⼀性:⼀种酶只能催化⼀种或⼀类底物,如蛋⽩酶只能催化蛋⽩质⽔解成多肽、⼆肽酶可催化各种氨基酸脱⽔缩合形成的⼆肽;温和性:是指酶所催化的化学反应⼀般是在较温和的条件下进⾏的.活性可调节性:包括抑制剂和激活剂调节、反馈抑制调节、共价修饰调节和变构调节等. 有些酶的催化性与辅因⼦有关.易变性:由于⼤多数酶是蛋⽩质,因⽽会被⾼温、强酸、强碱等破坏2、影响酶催化作⽤的因素有哪些?◇1温度:酶促反应在⼀定温度范围内反应速度随温度的升⾼⽽加快;但当温度升⾼到⼀定限度时,酶促反应速度不仅不再加快反⽽随着温度的升⾼⽽下降。
酶工程
②降低阻遏物浓度:设法从培养基中除去其终产物,以消除反馈阻遏;向培养基中加入代谢途径的某个抑制因子,切断代谢途径通路,可限制细胞内末端产物的积累,便可达到缓解其反馈阻遏的目的;
③促进分泌;
④添加产酶促进剂。
2、酶反应器的类型:
①搅拌罐型:分批反应器和连续流搅拌罐反应器;②固定床型;③流化床型;④膜式反应器;⑤鼓泡塔型;⑥连续搅拌罐式超滤型;⑦循环床型;⑧其他酶反应器。喷射式反应器
3、酶反应器的选择:(底物或产物的理化性质)
①酶催化反应产物的相对分子质量较大时,由于产物难于透过超滤膜的膜孔,不能达到反应与分离同时进行的目的,所以一般不用膜反应器;
⑵遗传控制:①改良菌种:使诱导型变为组成型;使阻遏型变成去阻遏型;②基因工程育种。
5、用于产酶细胞需具备哪些条件:
①酶的产量高;②容易培养和管理;③产酶性能稳定;④利于酶产品的分离纯化;⑤安全可靠。
第四章 酶的分离和纯化
1、细胞破碎方法:
①机械法:机械捣碎法、研磨破碎法、匀浆破碎法、改进高压法(X-press法)、超声波破碎法;
①网格型包埋法:
②微囊型包埋法:
③脂质体包埋法:
4、酶的各种固定化方法的比较:
固定化方法 载体结合法 交联法 包埋法
物理吸附法 离子结合法 共价结合法
制备难易 易 易 难 较难 较难
结合程度 弱 中等 强 强 强
酶活回收率 高,但酶易流失 高 低 中等 高
对底物专一性 不变 不变 可变 可变 不变
⑵交联法:利用双功能或多功能试剂在酶分子间,酶分子与惰性蛋白间或酶分子与载体间进行交联反应,以共价键制备固定化酶的方法。优点:操作简便;缺点:交联反应的过程往往比较激烈,许多酶易在固定化过程中失效,酶回收率不高。
酶工程 1~10章题目及答案
第一章绪论试题精选一、名词解释1、酶2、酶工程3、核酸类酶4、蛋白类酶5、酶的生产6、酶的改性7、酶的应用8、酶的专一性9、酶的转换数二、填空题1、根据分子中起催化作用的主要组分的不同,酶可以分为_蛋白类酶_和核酸类酶_两大类。
2、核酸类酶分子中起催化作用的主要组分是_核糖核酸,蛋白类酶分子中起催化作用的主要组分是_蛋白质_。
3、进行分子内催化作用的核酸类酶可以分为_自我剪切酶_,_自我剪接酶_。
4、酶活力是_酶量_的量度指标,酶的比活力是_酶纯度_的量度指标,酶的转换数的主要组分是_酶催化效率_的度量指标。
5、非竞争性抑制的特点是最大反应速度Vm_减小_,米氏常数Km__不变_。
三、选择题1、酶工程是(C)的技术过程。
A、利用酶的催化作用将底物转化为产物B、通过发酵生产和分离纯化获得所需酶C、酶的生产与应用D、酶在工业上大规模应用2、核酸类酶是(D)。
A、催化RNA进行水解反应的一类酶B、催化RNA进行剪接反应的一类酶C、由RNA组成的一类酶D、分子中起催化作用的主要组分为RNA的一类酶3、RNA剪切酶是(B)。
A、催化其他RNA分子进行反应的酶B、催化其他RNA分子进行剪切反应的R酶C、催化本身RNA分子进行剪切反应的R酶D、催化本身RNA分子进行剪接反应的R酶4、酶的改性是指通过各种方法(A)的技术过程。
A、改进酶的催化特性B、改变酶的催化特性C、提高酶的催化效率D、提高酶的稳定性5、酶的转换数是指(C)。
A、酶催化底物转化成产物的数量B、每个酶分子催化底物转化为产物的分子数C、每个酶分子每分钟催化底物转化为产物的分子数D、每摩尔酶催化底物转化为产物的摩尔数四、判断题(V)1、相同的酶在不同的pH条件下进行测定时,酶活力不同。
(V)2、竞争性抑制的特点是最大反应速度Vm不变,米氏常数Km 增大。
(X)3、催化两个化合物缩成一个化合物的酶称为合成酶。
(X )4、RNA剪切酶是催化RNA分子进行剪切反应的核酸类酶。
酶工程问答题附答案
酶工程问答题1.为什么滞后合成型的酶要在细胞生长一段时间甚至进入平衡期以后才开始合成?滞后合成酶在细胞生长一段时间或者进入平衡期以后才开始其生物合成并大量积累,又称为非生长偶联型,许多水解酶的生物合成都属于这一类型。
主要原因是由于受到培养基中存在的阻遏物的阻遏作用。
只有随着细胞的生长,阻遏物几乎被细胞用完而使阻遏解除后,酶才开始大量合成。
若培养基中不存在阻遏物,该酶的合成可以转为延续合成型。
该类型酶所对应的mRNA稳定性很好,可以在细胞生长进入平衡期后的相当长的一段时间内,继续进行酶的生物合成。
2.酶的发酵生产过程中,要使酶的产率提高,可以采取哪些措施?①首先要使用优良的产酶细胞;②使用优良的发酵生产设备;③采用先进的分离纯化技术和设备;④控制好工艺条件;⑤采取某些有效的措施:增加诱导物、控制阻遏物浓度、增加表面活性剂、增加产酶促进剂。
3.酶发酵动力学研究的内容包括哪些?①细胞生长动力学主要研究细胞生长速度以及外界环境因素对细胞生长速度影响的规律。
②产酶动力学主要研究细胞产酶速率以及各种环境因素对产酶速率的影响规律。
③基质消耗动力学主要研究发酵过程中基质消耗速率以及各种环境因素对基质消耗速率的影响规律。
4.简述酶沉淀的主要方法及其原理。
沉淀分离是通过改变某些条件或添加某种物质,使酶或杂质的溶解度降低,而从溶液中沉淀析出,与其它溶质分离的技术过程。
在盐浓度达到某一界限后,酶的溶解度随盐浓度升高而降低,这称为盐析现象。
有机溶剂使溶液的介电常数降低,溶质分子间的静电引力增大,互相吸引而易于凝集。
有机溶剂与水互相作用还可破坏溶质分子表面的水膜,使其溶解度降低而沉淀析出。
5.简述凝胶层析的原理。
凝胶层析:以各种多孔凝胶为固定相,利用流动相中所含各种组分的相对分子质量不同而达到物质分离的一种层析技术。
原理:凝胶层析柱中装有多孔凝胶,当含有各种组分的混合溶液流经凝胶层析柱时,大分子物质由于分子直径大,不能进入凝胶的微孔,只能分布于凝胶颗粒的间隙中,以较快的速度流过凝胶柱。
酶工程思考题汇总
酶工程思考题第一章绪论1、酶工程的主要任务是什么?2、简述酶工程的主要内容。
3、简述影响酶催化作用的因素。
4、简述酶活力测定步骤。
5、为什么要对酶的特性进行改良?如何改良?6、两大类酶分类与命名的基础是什么?分类与命名的原则是否相同?7、酶的比活力、酶的转换数与催化周期、酶结合效率与活力回收率、相对酶活力这些概念分别有什么作用?第二章微生物发酵产酶1、简述用于酶的生产的细胞应具备的条件。
2、原核生物酶生物合成调节控制模式的实质分别是什么?在酶的发酵生产中如何运用?3、在DNA分子中,与酶的生物合成有密切关系的基因是什么?它们有什么特点和作用?4、在酶的发酵生产中,为什么应尽量控制溶氧速度等于或稍高于耗氧速度?5、在酶的发酵生产中,如何提高酶产量?6、在酶的发酵生产中,为什么延续合成型是最理想的合成模式?对于其它合成模式的酶,如何使它们接近延续合成型?7、什么是生长和产酶动力学?二者的基本动力学方程是什么?8、绘出微生物发酵产酶的一般工艺流程图。
9、在碳源的选择和使用上,如何注意酶生物合成的调节作用?第三章动植物细胞培养产酶1、简述植物细胞的特性。
2、简述植物细胞培养的特点。
3、简述动物细胞的特性。
4、简述动物细胞培养的特点。
第四章酶的提取与分离纯化1、为什么要对细胞进行破碎?如何破碎?2、简述影响酶提的主要因素。
3、简述沉淀分离的主要方法和原理。
4、简述影响离心分离的主要因素。
5、简述层析分离的主要方法和原理。
6、在离子交换层析中,为什么要对离子交换剂进行处理?如何处理?7、在电泳分离中,颗粒的泳动速度受到哪些因素的影响?第五章酶分子修饰1、在限定位点进行修饰的方法有()。
2、能探酶活性中心位置的方法有()。
3、既是修饰方法,又是固定化方法有()。
4、不改变酶的组成单位及其基团的修饰方法有()。
5、采用定点突变技术的修饰方法有()。
6、只适用于酶分子中含有金属离子的修饰方法有()。
7、目前应用最广泛的修饰方法有()。
酶工程 试题及答案
共三套《酶工程》试题一:一、是非题(每题1 分,共10 分)1 、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。
( )2 、酶的分类与命名的基础是酶的专一性. ( )3 、酶活力是指在一定条件下酶所催化的反应速度,反应速度越大,意味着酶活力越高。
( )4 、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。
( )5 、培养基中的碳源,其惟一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。
( )6 、膜分离过程中,膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成份或者份子通过,而把大于其孔径的颗粒截留。
( )7 、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的份子对,在酶的亲和层析分离中,可把份子对中的任何一方作为固定相。
( )8 、角叉菜胶也是一种凝胶,在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。
( )9 、α-淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化,但不称为糊精化酶。
( )10、酶法产生饴糖使用α-淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用. ( )二、填空题(每空1 分,共28 分)1 、日本称为“酵素”的东西,中文称为__________,英文则为__________,是库尼 (Kuhne) 于1878 年首先使用的。
其实它存在于生物体的__________与__________。
2 、1926 年,萨姆纳(Sumner)首先制得__________酶结晶,并指出__________是蛋白质。
他因这一杰出贡献,获1947 年度诺贝尔化学奖.3 、目前我国广泛使用的高产糖比酶优良菌株菌号为__________,高产液化酶优良菌株菌号为___________。
在微生物分类上,前者属于__________菌,后者属于__________菌。
4 、1960 年,查柯柏(Jacob)和莫洛德(Monod)提出了控制子学说,认为DNA 份子中,与酶生物合成有关的基因有四种,即控制基因、调节基因、__________基因和__________基因。
酶工程智慧树知到答案章节测试2023年聊城大学
第一章测试1.根据酶分子中起催化作用的主要组分不同,自然界中的天然酶可以分为()和()两大类别。
A: 核酸类酶B: 蛋白类酶C: 水解酶D: 合成酶答案:AB2.酶工程的主要研究任务包括()A: 酶的生产B: 酶的销售C: 酶的改性D: 酶的应用答案:ACD3.酶在体外应用时表现出的特点,描述正确的是()A: 可重复使用B: 和产物容易分离C: 稳定性强D: 对酸、碱敏感答案:D4.酶只能在水溶液中发挥作用。
A:错B:对答案:A5.早期,人们利用分子修饰方法确定酶的活性中心基团。
A:对B:错答案:A第二章测试1. D-乳酸脱氢酶[EC 1.1.1.28]只能催化丙酮酸加氢生成D-乳酸,而不能生成L-乳酸。
说明D-乳酸脱氢酶具有()A: 绝对专一性B: 相对专一性C:键专一性D: 基团专一性答案:A2.下列关于酶作用特点的描述,不正确的是()A: 酶催化作用的效率高B: 酶和一般的催化剂一样,具有降低反应活化能的作用C: 酶催化作用的专一性强D: 酶催化作用对环境没有要求答案:D3.当酶促反应速率V达到最大反应速率Vmax的80%时,底物浓度是Km的()倍A:2B:1C:4D:8答案:D4.酯酶可催化所有含酯键的脂类物质生成醇和酸,制酶具有()A: 立体结构专一性B: 键专一性C: 绝对专一性D: 基团专一性答案:B5.如果一个酶,对A、B、C三种底物的米氏常数分别为Ka、Kb、Kc,而且Ka>Kb>Kc,那么这个酶的最适底物是()A: CB: AC: A、B、CD: B答案:A第三章测试1.在酶的发酵生产中,为了提高产酶率和缩短发酵周期,最理想的合成模式是()A: 滞后合成型B: 同步合成型C: 中期合成型D: 延续合成型答案:D2.米曲霉在含有单宁的培养基中生长,单宁酶的生物合成与细胞生长同步进行,这种酶的生物合成模式属于()A: 中期合成型B:滞后合成型C: 延续合成型D: 同步合成型答案:D3.延续合成型的酶其生物合成可以受到诱导物的诱导,一般不受分解代谢物阻遏。
酶工程智慧树知到课后章节答案2023年下华南理工大学、暨南大学、华南农业大学
酶工程智慧树知到课后章节答案2023年下华南理工大学、暨南大学、华南农业大学华南理工大学、暨南大学、华南农业大学第一章测试1.酶的国际命名采用四码编号法,如葡萄糖氧化酶的系统编号为[EC1.1.3.4],下列说法正确的是()。
A:第三个号码表示属于亚类中的某一小类 B:第四个号码表示这一具体的酶在该小类中的序号 C:第一个号码表示该酶属于6大类酶中的某一大类 D:第二个号码表示该酶属于该大类中的某一亚类答案:第三个号码表示属于亚类中的某一小类;第四个号码表示这一具体的酶在该小类中的序号;第一个号码表示该酶属于6大类酶中的某一大类;第二个号码表示该酶属于该大类中的某一亚类2.催化反应通式A+B+ATP == AB+ADP+Pi(或AB+AMP+PPi)的酶属于()。
A:合成酶 B:异构酶 C:氧化还原酶 D:裂合酶答案:合成酶3.核酸类酶是()。
A:催化RNA进行剪接反应的一类酶 B:催化RNA进行水解反应的一类酶 C:催化DNA进行水解反应的一类酶 D:由RNA组成的一类酶答案:由RNA组成的一类酶4.RNA剪切酶是()。
A:催化其他RNA分子进行反应的酶 B:催化本身RNA分子进行剪切反应的R酶 C:催化其他RNA分子进行剪切反应的R酶 D:催化本身RNA分子进行剪接反应的R酶答案:催化其他RNA分子进行剪切反应的R酶5.酶的转换数是指()。
A:每个酶分子每分钟催化底物转化为产物的分子数 B:每个酶分子催化底物转化为产物的分子数 C:酶催化底物转化成产物的数量 D:每摩尔酶催化底物转化为产物的摩尔数答案:每个酶分子每分钟催化底物转化为产物的分子数6.催化两个化合物缩合成一个化合物的酶称为合成酶。
()A:对 B:错答案:错7.多糖剪接酶是催化多糖分子进行剪切和连接反应的核酸类酶。
()A:对 B:错答案:对8.酶活力的大小可以用一定条件下酶所催化的反应初速率表示。
()A:错 B:对答案:对9.酶的比活力是酶纯度的量度指标,是指在特定条件下,单位体积蛋白质或RNA所具有的酶活力单位数。
酶工程——分章问答题
酶工程——分章问答题第一章绪论1酶工程的概念?其主要研究内容和任务有哪些?概念:酶的生产与应用的技术过程称为酶工程。
由酶学与化学工程技术、基因工程技术、微生物学技术相结合而产生的一门新的技术科学。
它从应用目的出发,研究酶的产生、酶的制备与改造、酶反应器以及酶的各方面应用。
(酶的生产与应用的技术过程称为酶工程)分为:化学酶工程与生物酶工程。
内容:微生物细胞发酵产酶、动植物细胞培养产酶、酶的提取与分离纯化、酶分子的修饰、酶,细胞和原生质体固定化、酶的非水相催化、酶反应器和酶的应用。
任务:经过预先设计,通过人工操作,获得人们所需的酶,并通过各种方法使酶充分发挥其催化功能2.什么是核酸酶类?其发现有何重要意义?定义:主要由核糖核酸组成——核酸类酶(R酶)意义:它的发现,改变了有关酶的概念,被认为是最近20年来生物科学领域最令人鼓舞的发现之一。
3.P酶和R酶的分类和命名有何异同?主要由蛋白质组成——蛋白类酶(P酶);主要由核糖核酸组成——核酸类酶(R酶)P酶的分类原则:a按照酶催化作用的类型,将蛋白质酶类分为六大类b每个大类中,按照酶的作用底物、化学键或基团的不同,分为若干亚类c每一亚类中再分为若干小类d每一小类中包含若干具体的酶命名:根据系统命名法,每一种具体的酶,除了有一个系统名称以外,还有一个系统编号。
系统编号采用四码编码方法。
第一个号码表示该酶属于6大类酶中的某一类,第二个号码表示该酶属于该大类某一亚类,第三个号码表示亚类中的某一个小类,第四个号码表示这一具体的酶在该小类中的序号。
R酶的分类原则:a根据酶作用的底物是其本身RNA分子还是其他分子,可以将R酶分为内催化和分子间催化两大类。
b在每个大类中,根据酶的催化类型不同,将R酶分为若干亚类c在每个亚类中,根据酶的结构特点和催化特性的不同,分为若干小类d在每一小类中包含若干具体的酶4.简述酶活力单位的概念和酶活力的测定方法?概念:在最适条件(温度25℃)下,每分钟内催化1微摩尔(μmol)底物转化为产物所需的酶量为1个酶活力单位,即IU=1μmol /min。
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1简述酶非水相催化的概念与特点 酶在非水介质中的催化作用称为酶的非水相催化。它是通过改变反应介 质,影响酶的表面结构和活性中心,从而改进酶的催化特性。主要内容 包括有机介质中的酶催化,气象介质中的酶催化,超临界流体介质中的 酶催化和离子液介质中的酶催化等。由于在非水相介质中酶分子受到非 水介质的影响,起催化特性与在水相中的有较大的不同。酶在有机溶液 中的热稳定性比在水溶液中有显著地提高,而且催化时,酶的底物特异 性、立体选择性、区域选择性、健的选择性和热稳定性都有所改变,同 时酶在离子液中的催化作用具有良好的稳定性和区域选择性、立体选择 性健的选择性等特点。 2酶在有机介质中与在水溶液中的特点有何改变? 底物专一性:酶在水溶液中进行催化反应时,具有高度的专一性或底物 特异性。在有机介质中,由于酶分子活性中心的结合部位与底物之间的 结合状态发生了变化,使酶的底物特异性发生改变。(2)对映体选择 性:酶在有机介质中催化,由于介质的特异性改变引起酶的对映体选择 性发生改变,酶在水溶液中催化的立体选择性强,而在疏水性强的有机 介质中,酶的立体选择性差。(3)区域选择性:酶能够选择底物分子 中某一区域的基因优先进行反应。(4)健的选择性:在有机介质中, 当同一底物分子中有两种以上的化学键都可以与酶反应时,酶对其中一 种化学键优先进行反应。(5)热稳定性:在有机介质中热稳定性比在 水溶液中好,因为含水量低的有机介质缺少引起酶分子。(6)PH特性 在水溶液中,缓冲液的PH决定了酶分子活性中心基因和底物的解离状 态,从而影响反应。在有机介质中,酶所处的PH环境与酶在冻干或吸附 到载体上之前所使用的缓冲液PH相同。 3什么是必须水?水对非水相中酶的特性有何影响? (1水对酶的空间构象的影响:酶分子只有在空间构想完整的状态下才 具有催化功能,在无水的条件下,酶的空间构象被破坏,酶将变性,所 以酶分子需要一层水化层来维持空间构象。(2)水对酶催化反应的速 度的影响:有机介质中水的含量对此有显著影响,在催化反应速度达到 最大是的含水量称为最适含水量,有些酶在水含量较低的条件下,没的 催化速度水水含量升高而升高。(3)在有机介质体系中,酶的催化活 性随着结合水量的增加而提高,在结合水不变时,体系中含水量的变化 对酶的催化活性影响大。 4有机溶剂对酶催化有何影响? 1、对酶结构和功能的影响:酶分子表面结构发生变化,对酶活性中心结 合位点也有影响。主要是通过有机溶剂与底物竞争活性中心的结合位点 或降低活性中心的的极性来影响与底物结合能力。2、对酶活性的影
5如何控制有机介质中酶催化反应的条件? 1、对酶的选择不仅要看催化反应速度大小,还要注意没的稳定性,底 物专一性,对映体选择性,区域选择性,键选择性等。2、对底物的选 择和浓度控制:必须考虑底物在有机溶剂和必须水层中的分配情况。 3、选择适宜的有机溶剂:它的极性不能过强或过弱。4、控制好水的含 量:使反应体系保持在最适水含量。5、温度的选择最好在最适温度。 6、PH:保持在最适PH,通过调节缓冲液的PH和离子强度来实现对有 机介质中的酶催化的PH和离子强度的调节。 6举例说明酶非水相催化的应用? 1手性药物的拆分2手性高分子聚合物的制备3酚树脂的合成4导电有机聚 合物的合成5发光有机聚合物的合成6食品添加剂的生产7生物柴油的生 产8多肽的合成9甾体转化 1何谓酶定向进化?有何特点? 酶分子定向进化简称酶定向进化,是模拟自然界进化过程(随即突变和 自然选择),在体得到具有优良催化特性的酶的 突变体的技术过程。 特点:(1).适应面广:可广泛应用各种蛋白质酶和核算类酶的改性, 因为不需要事先了解酶的结构,催化作用机制等。(2).目的性强:因 为进化方向明确。3.效果显著:可以在几年几个月完成几万年几十万年 完成的进化历程。 2简述易错PCR技术进行体外突变的主要过程? (1)双链DNA的变性:将待扩增的模板DNA升温至85-95度,使DNA 双链之间氢键断开,解离为单链RNA。(2)引物与单链RNA退火结 合,单练RNA在温度逐步降低至50-70度时,会与其碱基互补的引物结 合生成双链。(3)引物延伸:引物结合后,将温度升至70-75度,在 DNA聚合酶作用下,以引物为起点,以四种脱氧核苷三磷酸为底物,以
密度大,可以提高酶催化反应的 速度。在工业生产中普遍使用。
流化床反应器具有混合均匀,传 质和传热效果好,温度和pH值 的调节控制比较容易,不易堵 塞,对粘度较大反应液也可进行 催化反应。
鼓泡式反应器的结构简单,操作 容易,剪切力小,混合效果好, 传质、传热效率高,适合于有气 体参与的反应。
清洗比较困难
反应器类型 搅拌罐式反应器
填充床式反应器
适用的操作方式
分批式, 流加分批式 连续式,
连续式
流化床反应器
鼓泡式反应器
膜反应器 喷射式反应器 适用的酶 游离酶 固定化酶 固定化酶 固定化酶
游离酶 固定化酶
游离酶 固定化酶 游离酶
分批式 流加分批式 连续式
分批式 流加分批式比较完全,反应条件容易调 节控制。
响:极性较强的有机溶剂会影响酶分子微环境的水化层从而降低催化活 性,甚至引起变性失活。3、对底物和产物分配有影响:有机溶剂极性 过大或多小都会影响底物的浓度从而影响酶的催化速度。 1举例说明酶在疾病诊断、治疗和药物制造方面的应用 诊断方面:淀粉酶在胰脏疾病、肾脏疾病时活性升高,在肝脏疾病时活 性下降,葡萄糖氧化酶测定血糖含量,诊断糖尿病;在疾病治疗方面: 胰脏、麦芽和微生物中的麦芽酶治疗消化不良、食欲不振,蛋清、细菌 中的溶菌酶治疗各种细菌性和病毒性疾病;在药物制造方面:青霉素酰 化酶制造半合成青霉素和头孢菌素
4举例说明酶在环保方面的应用:利用胆碱酯酶检测有机农药,乳酸脱 氢酶的同工酶检测重金属污染,用固定化硝酸还原酶处理含硝酸盐亚硝 酸盐的废水……意义:保护环境 5酶在生物技术领域的用途:用酶除去细胞壁,如用溶菌酶除去细菌细 胞壁;酶在大分子切割方面应用,如限制性内切核酸酶、DNA外切核酸 酶;酶在分子拼接方面的应用,如DNA连接酶、DNA聚合酶 1常见反应器的类型和特点
目标DNA为模板,按碱基配对原则,由5‘到3‘端方向延伸,而进行DNA 复制。 以上3个步骤,经30 次循环,即可使目的基因扩增几百万倍。在以上 PCR技术的基础上,通过改变反应条件,例如提高镁离子浓度,添加一 定浓度的猛离子,改变四种底物浓度比等反应条件,增加碱基配对错误 的出现频率,就成为易错PCR技术。 2选择反应器的依据:酶的形式(游离/固定化..)、固定化酶的形状、底物 的物理性质、酶反应动力学性质、酶的稳定性、操作要求、反应器制 造、控制成本 3酶反应器设计的主要内容:确定酶反应器的类型、确定反应器的制造 材料、进行热量衡算、进行物料衡算 4酶反应器使用中应注意的问题:控制好温度、PH、底物浓度、酶浓 度、拌速率率, 搅保持酶反应器的稳定性,防止酶的变性失活,防止微生物污染 2酶在食品保鲜和食品生产方面的应用:葡萄糖氧化酶用于食品除氧保 鲜和蛋类制品脱糖保鲜,溶菌酶可以对食品灭菌保鲜,蛋白酶、乳糖酶 用于蛋白质类食品生产方面应用,柚柑酶、果胶酶应用果蔬类食品生产 方面 3酶在轻工、化工方面的应用:在原料处理,如蛋白酶对皮革的脱毛处 理,在轻工、化工产品方面,腈水和酶催化腈类化合物与水合成丙烯酰 胺等,加酶增强产品的使用效果,如护肤品中加超氧化物岐化酶