6-磷酸果糖激酶-2果糖双磷酸酶-2同工酶3在胃癌中的表达和意义论文
糖代谢论文
糖代谢摘要：糖是一类化学本质为多羟醛或多羟酮及其衍生物的有机化合物.在人体内糖的主要形式是葡萄糖(glucose，Glc)及糖原(glycogen，Gn).葡萄糖是糖在血液中的运输形式,在机体糖代谢中占据主要地位；糖原是葡萄糖的多聚体,包括肝糖原、肌糖原和肾糖原等，是糖在体内的储存形式.葡萄糖与糖原都能在体内氧化提供能量.食物中的糖是机体中糖的主要来源，被人体摄入经消化成单糖吸收后，经血液运输到各组织细胞进行合成代谢和分解代谢.机体内糖的代谢途径主要有葡萄糖的无氧酵解、有氧氧化、磷酸戊糖途径、糖原合成与糖原分解、糖异生以及其他己糖代谢等.关键词:糖的消化和吸收血糖糖的无氧酵解糖的有氧氧化磷酸戊糖途径糖异生作用糖蛋白与蛋白聚糖糖的消化和吸收食物中的糖主要是淀粉，另外包括一些双糖及单糖。
多糖及双糖都必须经过酶的催化水解成单糖才能被吸收。
食物中的淀粉经唾液中的α淀粉酶作用，催化淀粉中α-1，4-糖苷键的水解，产物是葡萄糖、麦芽糖、麦芽寡糖及糊精。
由于食物在口腔中停留时间短，淀粉的主要消化部位在小肠。
小肠中含有胰腺分泌的α淀粉酶，催化淀粉水解成麦芽糖、麦芽三糖、α糊精和少量葡萄糖。
在小肠黏膜刷状缘上，含有α糊精酶，此酶催化α极限糊精的α-1，4-糖苷键及α-1，6-糖苷键水解，使α-糊精水解成葡萄糖；刷状缘上还有麦芽糖酶可将麦芽三糖及麦芽糖水解为葡萄糖。
小肠黏膜还有蔗糖酶和乳糖酶，前者将蔗糖分解成葡萄糖和果糖，后者将乳糖分解成葡萄糖和半乳糖。
糖被消化成单糖后的主要吸收部位是小肠上段，己糖尤其是葡萄糖被小肠上皮细胞摄取是一个依赖Na+的耗能的主动摄取过程，有特定的载体参与：在小肠上皮细胞刷状缘上，存在着与细胞膜结合的Na+-葡萄糖联合转运体，当Na+经转运体顺浓度梯度进入小肠上皮细胞时，葡萄糖随Na+一起被移入细胞内，这时对葡萄糖而言是逆浓度梯度转运。
这个过程的能量是由Na+的浓度梯度（化学势能）提供的，它足以将葡萄糖从低浓度转运到高浓度。
6_磷酸果糖激酶_2_果糖双磷酸酶_2是一种重要的代谢信号酶
— —— —— —— —— —— 收稿日期： ２００５－ １１－ ０１ 广西医科大学校内基金 作者简介： 陶 萍 （１９８０—），女，硕士生，Ｅ－ ｍａｉｌ：ｔａｏｐｉｎｇ－
８０２６＠ｓｏｈｕ．ｃｏｍ； 吴耀生 （１９５８—），女，硕士，教授，研究生导 师，联系作者，Ｅ－ ｍａｉｌ：ｗｕｙａｏｓｈｅｎｇ０３＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ
●Ｒｅ ｃｅ ｎｔ Ｐ ｒｏｇｒｅ ｓ ｓ ｅ ｓ
· １１０ · 文章编号：１０００－ １３３６（２００６）０２－ ０１１０－ ０４
《生命的化学》２００６ 年 ２６ 卷 ２ 期 ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ ＯＦ ＬＩＦＥ ２００６， ２６（２）
●Ｒｅ ｃｅ ｎｔ Ｐ ｒｏｇｒｅ ｓ ｓ ｅ ｓ
６－ 磷酸果糖激酶－ ２／果糖双磷Байду номын сангаас酶－ ２ 是一种重要的代谢信号酶
比（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ａｌｉｇｎｍｅｎｔ ）和模拟实验，通过定向诱变 研究大量的氨基酸残基发现，ＰＦＫ－ ２ 结构域与腺 苷激酶有相似性，而 ＦＢＰａｓｅ－ ２ 亚基的结构域所 包含的序列、力学和结构因素则与组氨酸磷酸酶 家族很相似。ＰＦＫ－ ２／ＦＢＰａｓｅ－ ２ 是一个二聚体，包 括两个结构域：主要的 α／β域和一小的结构域。 从小角度的 Ｘ 射线散射实验数据显示，与 ６－ 磷酸 葡萄糖结合可以使 ＰＦＫ－ ２／ＦＢＰａｓｅ－ ２ 产生一个更 为紧凑的结构；在变构位点接合 Ｍｇ ＡＴＰ 可以使 其转变为四聚体形式并引起三级结构的改变 。 ［１，２］ 在同型二聚体结构中，２ 个 ＰＦＫ－ ２ 结构域是以头 对头的形式连接在一块，而 ＦＢＰａｓｅ－ ２ 基本是独 立的，仅仅有一个盐桥相连。ＰＦＫ－ ２ 结构域由 ７ 个 α螺旋缠绕的 ６ 股 β折叠构成［３］。从一些细菌 中发现，焦磷酸依赖的 ＰＦＫ－ ２／ＦＢＰａｓｅ－ ２ 也是以 二聚体形式存在的［４，５］。
JAK-STAT信号通路和心肌葡萄糖代谢
JAK-STAT信号通路和心肌葡萄糖代谢王丽丽;张翠丽【摘要】葡萄糖是心肌的重要能源物质之一,葡萄糖转运及代谢是心脏进行各项生物学活动的基础.Janus激酶-信号转导和转录通路(JAK-STAT)是一条由多种细胞因子参与的信号转导通路,几乎存在于机体的所有组织中.该文总结关于心肌葡萄糖代谢与JAK-STAT信号通路关系的文献发现,JAK-STAT信号转导通路通过多种方式参与胰岛素诱导的心肌葡萄糖代谢.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2015(021)023【总页数】4页(P4263-4266)【关键词】心肌;葡萄糖代谢;Janus激酶;信号转导和转录;胰岛素【作者】王丽丽;张翠丽【作者单位】哈尔滨医科大学附属第一医院心内科,哈尔滨150001;哈尔滨医科大学附属第一医院心内科,哈尔滨150001【正文语种】中文【中图分类】R541.8Insulin细胞信号转导是细胞对胞外调节信号做出的特异性应答，目前已知大部分细胞中存在肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system，RAS)-丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)通路和Janus激酶(Janus kinase，JAK)-信号转导和转录活化因子(signal transducer and activator of transcription，STAT)通路两条基本通路。
JAK-STAT信号转导通路是近年来发现的一条由细胞因子刺激的信号转导通路，其参与了细胞的增殖、分化、凋亡及免疫调节等生物学过程，其在几乎所有细胞因子信号的传递中都发挥着重要作用。
目前JAK-STAT信号通路的调控及其与其他细胞因子信号转导通路的联系尚不清楚。
现对心肌葡萄糖代谢与JAK-STAT信号通路中关于葡萄糖代谢方面现有的研究结果予以综述。
心脏是耗氧率最高、对缺氧反应最强烈的有氧代谢器官。
磷酸果糖激酶研究进展
磷酸果糖激酶研究进展杨益坤生命科学学院SA16008074摘要：磷酸果糖激酶掌握着糖酵解开始的钥匙，是糖酵解中最重要的控制点。
糖酵解速度主要取决于磷酸果糖激酶，它是个限速酶，其受多个途径调控：受ADP别构激活、ATP别构抑制；受柠檬酸、脂肪酸别构抑制；受果糖-2,6-二磷酸的调控；受H+抑制。
生物体对磷酸果糖激酶的调控十分精细。
对于磷酸果糖激酶的研究和应用主要在于对于糖尿病的治疗，磷酸果糖激酶的变构效应的研究，磷酸果糖激酶在糖酵解中的地位等等。
本文就磷酸果糖激酶的研究进展进行综述。
关键词：磷酸果糖激酶别构激活别构抑制柠檬酸结合位点乳酸糖尿病地位一．磷酸果糖激酶简介名称：磷酸果糖激酶（fructose-1,6-bisphosphate）磷酸果糖激酶1（Phosphofructokinase-1；PFK-1）是一种糖酵解作用里一种重要的酶，是一种由4个次单位组成的异位（allosteric）酵素，可受多种活化剂与抑制剂调控。
糖酵解（glycolysis）是指在细胞质中将葡萄糖分解成为丙酮酸的过程，期间每分解一分子葡萄糖产生两分子丙酮酸以及两分子ATP。
属于呼吸作用的第一个阶段，随后根据有氧与否将丙酮酸进行柠檬酸循环或发酵。
在糖解作用里，PFK-1是负责将果糖-6-磷酸与ATP 转变成为果糖-1,6-双磷酸与ADP。
糖酵解过程中，6-磷酸果糖生成1，6-二磷酸果糖( Fructosel，6bisphosphate，F-1，6-BP)，催化此反应的酶是6-磷酸果糖激酶1(6-phosphofructokinase1，PFK1)，这是糖酵解途径的第二次磷酸化反应，需要ATP与Mg2+参与，ΔG"0=-14.2KJ/mol，反应不可逆。
6-磷酸果糖激酶1是糖酵解过程的主要限速酶，是糖酵解过程中的主要调节点。
至此，糖酵解完成了代谢的第一个阶段。
催化反应：果糖-6-磷酸+ATP→果糖-1,6-二磷酸+ADP辅助因子：Mg2+催化机制：镁离子将ATP外侧的两个磷酸基团作用，使磷原子更容易接受孤对电子的亲和进攻，使两个磷原子之间的氧桥所共用的电子对向氧原子一方转移，ATP的磷酸集团有利于氧桥断裂，并与果糖-6-磷酸分子结合，生成果糖-1,6-二磷酸。
果糖-1,6-二磷酸酶
果糖-1,6-二磷酸酶果糖-1,6-二磷酸酶（Fructose-1,6-bisphosphatase，简称为 FBPase）是一种参与葡萄糖代谢的酶，存在于几乎所有真核生物、许多原核生物以及一些病毒中。
它是Gluconeogenesis（糖异生）途径中的一个重要酶，负责将2分子果糖-1,6-二磷酸（FBP）水解为2分子磷酸果糖（F6P），从而使糖异生途径前进。
该酶是糖异生途径和糖原合成途径中的限速酶之一，在空腹时，肝脏中糖异生途径占主导地位，FBPase的活性是肝脏维持正常生理状态所必需的。
结构与功能FBPase 主要由 3 个结构域构成：N 端结构域、中间结构域和 C 端结构域，这些结构域在进化过程中具有高度的保守性。
N 端结构域含有磷酸化酶催化所需的脯氨酸残基，是酶催化和调节的关键区域。
中间结构域含有两个反向同构的催化中心，这些催化中心使 FBPase 能够高效地水解两个 FBP 分子，从而生成两个 F6P。
C 端结构域则对物质基础进行分类和整合，为 FBPase 酶学和生物学特性的整合提供基础。
FBPase 对许多环境因素，如 pH 值，离子强度和温度等，均表现出高度的敏感性。
稳定剂和抑制剂都能够显著地影响酶的活性。
对于细胞与机体内的 FBPase 来说，该酶的调节显得尤为重要。
急性调节通常由磷酸化和解磷酸化等化学修饰实现，而长期调节则主要由基因表达调控实现。
FBPase 的磷酸化和解磷酸化磷酸化和解磷酸化修饰对于 FBPase 的调节非常重要。
当细胞需要进入糖异生途径时，活性化的酶被磷酸化，并透过蛋白水解酶4的参与，磷酸化 FBPase 的活性在糖异生途径的起始阶段被激发，以产生更多的葡萄糖。
与此相反，当细胞需要停止进行糖异生途径时，F6P 是其调节的关键物质，彼时解磷酸化的 FBPase 更方便形成稳定的 F6P/FBP 催化活性平衡，从而使糖异生途径的前进效率下降。
改变 FBPase 的活性和构象调整代表了一种非常快速和可靠的方式，调整葡萄糖代谢产物的浓度，从而使细胞适应外界环境的需求。
MMP-2、MMP-14、TIMP-2在胃癌组织中的表达及意义
MMP-2、MMP-14、TIMP-2在胃癌组织中的表达及意义张金玲;费雁;陈伟;冯刚【摘要】Objective To examine the expression of MMP-2, MMP-14 and TIMP-2 in gastric cancer and its clinical significance. Methods The expression of MMP-2,MMP-14 and TIMP-2 was immunohistochemically detected in 80 samples of gastric cancer tissues and 30 adjacent normal gastric tissues. Results The positive expression rate of MMP-2 and MMP-14 was 75.00% and 82. 50% respectively,in gastric cancertissues,significantly higher than that in normal gastric tissues(36. 67% and 33. 33% ,respectively) (P<0. 01). The positive expression rate of TIMP-2 was 45. 00% and 40. 00% in gastric cancer tissues and normal gastric tissues with no significant difference being found. The expression of MMP-2 and MMP-14 in gastric cancer tissues was closely correlated to the cell differentiation,invasion,lymph node metastasis and TNM stages(P<0. 01). But the expression of TIMP-2 in gastric cancer tissues was only related to the lymph node metastasis (P<0. 05). The expression levels of MMP-2 and MMP-14 were significantly higher in survival time <2 years group than in survival time ≥2 years group(P<0. 01). Conclusion MMP-2 and MMP-14are over-expressed in gastric cancer. Combined detection for MMP-2/MMP-14 or MMP-2/MMP-14/TIMP-2 may help evaluate the malignancy of gastric cancer and predict the prognosis of patients with gastric cancer.%目的探讨基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、14及基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP-2)在胃癌中的表达及其意义.方法用免疫组织化学方法 (SP法)检测80例胃癌手术患者胃癌组织及30例同期癌旁≥5 cm正常组织中MMP-2、MMP-14及TIMP-2的表达.结果①在胃癌、正常胃组织中,MMP-2阳性表达率分别为75.00%和36.67%,MMP-14阳性表达率分别为82.50%和33.33%,差异有统计学意义(均P＜0.01);TIMP-2阳性表达率分别为45.00%和40.00%,差异无统计学意义.②癌组织中,MMP-2、MMP-14的表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结有无转移和TNM临床分期密切相关(均P＜0.01).TIMP-2的表达仅与淋巴结有无转移相关(P＜0.05).③生存期＜2年患者的MMP-2、MMP-14表达率明显高于生存期≥2年患者(均P＜0.01).结论胃癌组织中,MMP-2、MMP-14高表达,联合检测MMP-2、MMP-14或MMP-2、MMP-14、TIMP-2可作为胃癌恶性程度及预后判断的指标.【期刊名称】《华中科技大学学报（医学版）》【年(卷),期】2013(042)002【总页数】4页(P227-230)【关键词】胃癌;基质金属蛋白酶-2;基质金属蛋白酶-14;基质金属蛋白酶组织抑制因子-2【作者】张金玲;费雁;陈伟;冯刚【作者单位】华中科技大学同济医学院附属普爱医院肿瘤科,武汉,430033【正文语种】中文【中图分类】R735.2胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，年死亡率高，其确切病因尚未完全明了。
PFKFB3在结直肠腺癌中的表达及其临床意义
PFKFB3在结直肠腺癌中的表达及其临床意义周延杰;李涛;丁延玲;张家慧;汤盛楠;孙晓春【摘要】目的:探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶同工酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatases 3 isozyme,PFKFB3)在结直肠腺癌中的表达及其意义.方法:选取31例结直肠腺癌患者手术切除的癌组织及其对应的癌旁组织标本,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测PFKFB3 mRNA表达,免疫组织化学法检测PFKFB3蛋白的表达,并探讨免疫组化阳性表达率与临床病理参数间的关系.结果:qRT-PCR结果显示,31例结直肠腺癌组织PFKFB3基因的相对表达量为1.93±1.73,明显高于其相对应的癌旁组织,差异有统计学意义(t=-2.985,P<0.01).免疫组织化学结果显示,结直肠腺癌组织及其对应的癌旁组织PFKFB3阳性表达率分别为61.3%(19/31)和3.2%(1/31),差异有统计学意义(P<0.01).PFKFB3的高表达与肿瘤直径、分化程度、侵袭、转移及治疗前癌胚抗原水平有关(均P<0.05).结论:PFKFB3对结直肠腺癌具有潜在的临床诊断价值,且与肿瘤的恶性程度存在一定的相关关系.【期刊名称】《江苏大学学报（医学版）》【年(卷),期】2017(027)001【总页数】3页(P82-84)【关键词】结直肠腺癌;6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶同工酶3;免疫组织化学【作者】周延杰;李涛;丁延玲;张家慧;汤盛楠;孙晓春【作者单位】江苏大学医学院,江苏镇江212013;江阴市人民医院检验科,江苏江阴214001;江苏大学医学院,江苏镇江212013;江苏大学医学院,江苏镇江212013;江苏大学医学院,江苏镇江212013;江苏大学医学院,江苏镇江212013;江苏大学医学院,江苏镇江212013【正文语种】中文【中图分类】R735.34结直肠癌是消化系统常见恶性肿瘤。
果糖-1,6-二磷酸酶在肝癌组织的表达及其对预后的影响解析
癌旁组织中ＦＢＰＩ表达。采用配对秩和检验比较肝癌组织与癌旁组织中ＦＢＰｌ的表达水平，应用，
检验分析ＦＢＰｌ表达与Ｉ临床病理特征的关系。应用Ｋａｐｌａｎ—Ｍｅｉｅｒ法和Ｌｏｇ．ｒａｎｋ检验分析ＦＢＰｌ表达 水平与患者生存期的关系。结果肝癌组织中ＦＢＰＩ的表达水平明显低于癌旁组织，差异有统计学 意义（Ｚ＝７．９５２，Ｐ＜０．０１），ＦＢＰｌ在＞３ ｃｍ的肝癌组织中表达显著低于≤３ ｃｍ的肝癌组织（Ｐ＜ ０．０１）。美国肿瘤联合会（ＡＪＣＣ）分期中，Ⅲ一Ⅳ期肝癌组织ＦＢＰｌ表达水平低于Ｉ～Ⅱ期（Ｐ＜ ０．０１），且ＦＢＰｌ低表达的肝癌患者平均生存期显著低于ＦＢＰｌ高表达组［１５．２９个月比５０．１７个月， ９５％可信区间（ｃ，）：１９．７１—３８．３０，Ｐ＜０．０５］。结论肝癌组织中ＦＢＰｌ表达水平显著下降，ＦＢＰｌ 低表达患者预后较差，ＦＢＰｌ与肝癌预后相关，可作为判断肝癌患者预后的参考指标。
Ｆｕｎｄｓ（ＢＬ２０１４０３４）；Ｊｉａｎｇ一
万方数据
主堡塞墅处登盘查垫！！生！旦蔓！！鲞苤兰塑垦！也』量婴坠！ｇ：垒ｅ趔！！！！：Ｙ！！：！！：塑！：！
Ｐｒｏｖｉｎｃｅ“３３３ Ｐｒｏｊｅｃｔ”Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｊｅｃｔｓ Ｆｕｎｄｅｄ
・１０８９・
ＳＵ
Ｐｒｏｊｅｃｔｓ（ＢＲＡ２０１３０５４，ＢＲＡ２０１４０６４）
注：ＡＪＣＣ：美国肿瘤联合会；ＦＢＰＩ：果糖．１，６一二磷酸酶；部分资料缺 失：包括肿瘤大小缺失ｌ例，ＡＪＣＣ分级缺失３例
３．ＦＢＰｌ表达与患者总生存期的关系：ＦＢＰｌ表达水
平与患者生存期（０Ｓ）密切相关，结果提示ＦＢＰｌ低表达 患者平均生存期为３４．８８个月，而ＦＢＰｌ高表达患者的 平均生存期为５０．１７个月［９５％可信区间（ｃ，）：１９．７１～ ３８．３０］，两组比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），ＦＢＰｌ 高表达患者累积生存率明显高于ＦＢＰｌ低表达患者（表
果糖1,6二磷酸酶与肿瘤代谢
【摘要】 代谢重编程已被定义为肿瘤细胞的标志性特征之一。
果糖-1，6-二磷酸酶1（fructose-1，6-bisphosphatase 1，FBP 1）是糖异生的限速酶，其在多种类型肿瘤组织中的表达均下调，可能的机制为DNA 甲基化，转录因子、微小RNA 及蛋白泛素化调控等。
FBP 1低表达与癌症低生存率和高复发率相关。
FBP 1抑制Warburg 效应以及Wnt/β-Catenin 、缺氧诱导因子（hypoxia-inducible factor ，HIF ）及RAS/MAK 等信号通路，从而抑制肿瘤进展。
同时，FBP 1在NK 细胞的免疫杀伤过程中也发挥作用。
但FBP 1在癌症进展中的作用仍有众多问题需要研究。
【关键词】 果糖-1，6-二磷酸酶；Warburg 效应；肿瘤代谢；肿瘤免疫Fructose 1, 6-bisphosptase and tumor metabolismLIAO Kun, YANG Shi-yu, WANG Jiang-huang, LI Bo (Department of Biochemistry and Molecular Biology, Zhongshan School of Medicine, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510080, China)Corresponding author: LI Bo, E-mail: libo 47@ 【Abstract 】 Metabolic reprogramming has been defined as a hallmark of cancer cells. Fructose-1,6-phosphatase 1 (FBP 1) is a rate-limiting enzyme for gluconeogenesis. FBP 1 is generally down-regulated in various types of tumor tissues. The down-regulation of FBP 1 is driven by multiple mechanisms, including DNA promoter methylation, transcription factor, microRNA and protein ubiquitination-mediated regulation. Low levels of FBP 1 are associated with short patient survival and high recurrence rates. FBP 1 inhibits the Warburg effect and multiple protumorigenic signaling pathways, including Wnt/β-Catenin, hypoxia-inducible factor (HIF), RAS/MAK, to inhibit tumor progression. Moreover, FBP 1 also plays a role in modulating tumor immunity mediated by NK cells. However, many remaining questions about the role of FBP 1 in cancer demand further efforts.【Key words 】 Fructose-1,6-phosphatase; Warburg effect; Tumor metabolism; Tumor immunity果糖-1，6-二磷酸酶与肿瘤代谢廖昆，杨时雨，王江煌，李博（中山大学中山医学院 生化教研室，广州 510080）基金项目：国家自然科学基金优秀青年科学基金（81622034）；国家自然科学基金面上项目（81572508）；广东省自然科学基金项目（2016A 030313260）通讯作者：李博 E-mail ：libo 47@肿瘤细胞在有氧状态下增加葡萄糖的摄取量，并且伴随乳糖的生成增多，这一现象称为Warburg 效应或有氧糖酵解。
生化填空
一1.人体蛋白质的基本组成单位为（氨基酸）一共有（20）种．2.根据理化性质，氨基酸可分成（极性）（非极性）（酸性）和（碱性）四种3.组成人体蛋白质的氨基酸均属于（L-a-氨基酸）除（甘氨酸）外．4.在（280）nm波长处有特征性吸收峰的氨基酸有（色氨酸）和（酪氨酸）。
5.许多氨基酸通过（肽）键，逐一连接而成（肽链）。
6.多肽链中氨基酸的（排列顺序），称为一级结构，主要化学键为（肽键）。
7.谷胱甘肽的第一个肽键由（谷氨酸）羧基与半胱氨酸的氨基组成，其主要功能基团为（r-巯基）。
8.蛋白质二级结构是指（蛋白质分子中某一段的肽链）的相对空间位置，并（不涉及）氨基酸残基侧链的构象。
9.体内有生物活性的蛋白质至少具备（三级）结构，有的还有（四级）结构。
10.由于肽单元上（a碳）原子所连的两个单键的（自由旋转度），决定了两个相邻肽单元平面的相对空间位置。
11.a-螺旋的主链绕（中心轴）作有规律的螺旋式上升，走向为（顺时针）方向，即所谓的（右手）螺旋。
12.蛋白质变性主要是其（空间）结构遭到破坏，而其（一级）结构仍可完好无损．13.蛋白质空间构象的正确形成，除（一级结构）为决定因素外，还需一类称为（分子伴侣）的蛋白质参与。
14.血红蛋白是含有（血红素）辅基的蛋白质，其中的（二价铁）离子可结合1分子O2。
15.血红蛋白的氧解离曲线为（s型），说明第一个亚基与O2结合可（促进）第二个亚基O2结合，这被称为（正协同）效应。
16.蛋白质颗粒表面有许多（亲水基团）可吸收水分子，使颗粒表面形成一层（水化膜），可防止蛋白质从溶液中（析出）。
17.蛋白质为两性电解质，大多数在酸性溶液中带（正）电荷，在碱性溶液中带（负）电荷。
当蛋白质的净电荷为（0）时，此时溶液的ph值称为（等电点）。
18．蛋白质颗粒在电场中移动，移动的速率主要取决于（蛋白质的表面电荷量）和（分子量），这种分离蛋白质的方法称为（电泳）。
19.用凝胶过滤蛋白质，分子量较小的蛋白质在柱中滞留的时间较（长），因此最先流出凝胶柱的蛋白质，其分子量最（大）。
PFKFB3在结肠癌患者中的表达及其临床意义
PFKFB3在结肠癌患者中的表达及其临床意义章密密;何跃君【摘要】目的:检测6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)在大样本结肠癌患者中的表达情况及其临床意义.方法:用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化法分别检测156例结肠癌患者癌和癌旁组织中PFKFB3的mRNA和蛋白表达水平,分析其与结肠癌临床病理特征及预后的关系.结果:PFKFB3的mRNA 和蛋白表达在114例(73.1％)患者的结肠癌组织中高表达.结肠癌组织中PFKFB3的mRNA水平高表达与脉管内癌栓形成、淋巴结转移和TNM分期相关(P<0.05).PFKFB3 mRNA高表达患者的生存期短于低表达患者(P<0.05).结论:PFKFB3在结肠癌患者癌组织中高表达,PFKFB3的mRNA水平高表达与患者恶性表型及不良预后相关.%Objective:To investigate the expression of PFKFB3 in human colon cancer and its clinical significance.Methods:Reverse transcriptase polymerase chain reaction(RT-PCR)and immunohistochemistry were used to detect the mRNA and protein expression levels of PFKFB3 in cancer and adjacent tissues of 156 human colon cancer patients.The relationship of PFKFB3 expression with clinicopathological features and prognosis of colon cancer patients was analyzed by statistical analyses.Objective:PFKFB3 mRNA and protein levels were significantly increased in tumor tissues compared to adjacent non-malignant tissues.Furthermore,correlation analysis indicated that PFKFB3 mRNA high expression in colon cancer tissues was significantly associated with intravascular cancer embolus,lymph node metastasis,and TNM staging(P<0.05).Survival analysis showed a poor prognosis of patients withhigh expression of PFKFB3 mRNA level(P<0.05).Conclusions:PFKFB3 is highly expressed in colon cancer.The expression level of PFKFB3 is correlated with the malignant phenotype and poor prognosis of colon cancer.【期刊名称】《中国临床医学》【年(卷),期】2017(024)004【总页数】4页(P587-590)【关键词】结肠癌;PFKFB3;临床病理特征;预后【作者】章密密;何跃君【作者单位】徐州医学院第二附属医院普通外科,徐州 221006;徐州医学院第二附属医院普通外科,徐州 221006【正文语种】中文【中图分类】R365结肠癌发病率在我国逐年升高。
糖酵解诱导肿瘤靶向药物耐药的相关分子及机制研究进展
糖酵解诱导肿瘤靶向药物耐药的相关分子及机制研究进展赵亚，付靖，张钧硕，王韬，仝玉阳，仓顺东郑州大学人民医院河南省人民医院肿瘤科，郑州450000摘要：肿瘤耐药严重影响临床疗效和患者预后，是肿瘤靶向治疗失败的主要原因之一。
糖酵解在肿瘤的发生发展中起着至关重要的作用。
大量研究表明，糖酵解与肿瘤靶向药物耐药的产生密切相关。
肿瘤糖酵解活性增强可引起乳酸脱氢酶水平升高，导致抗肿瘤免疫抑制剂效果减弱。
糖酵解过程中的转运蛋白（葡萄糖转运蛋白）、关键限速酶（己糖激酶、磷酸果糖激酶1、丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶）及代谢产物（丙酮酸、乳酸及ATP等）可通过不同机制影响肿瘤进展及耐药的产生，主要机制包括抑制细胞凋亡、促进肿瘤细胞上皮—间质转化、诱导自噬等。
深入了解糖酵解过程中诱导肿瘤耐药的相关分子及机制，或可为肿瘤靶向药物的基础研究和临床治疗研究提供参考。
关键词：糖酵解；肿瘤；靶向治疗；耐药性；葡萄糖转运蛋白；细胞凋亡；上皮—间质转化；细胞自噬doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.08.028中图分类号：R730.5 文献标志码：A 文章编号：1002-266X（2023）08-0112-04数据显示，我国恶性肿瘤发病率及病死率仍持续上升［1］。
靶向治疗是多种肿瘤的主要治疗手段。
目前常用的靶向药物包括小分子靶向药（抗EGFR、ALK、MET等抑制剂）、多靶点的多激酶抑制剂、单克隆抗体（抗CD20的利妥昔单抗，抗HER2的曲妥珠单抗等）及免疫抑制剂［2］。
但大部分患者在治疗一段时间后会出现耐药，如何克服耐药性已成为当前抗肿瘤药物研究面临的主要问题。
肿瘤细胞特征性的糖酵解是影响靶向药物耐药的重要因素之一［3］。
正常情况下，机体摄入的葡萄糖经葡萄糖转运蛋白（GLUT）1进入细胞质后首先通过糖酵解途径产生丙酮酸，随后经过三羧酸循环最终产生大量ATP为机体供能，当机体供氧不足时，细胞则通过无氧糖酵解产生大量乳酸以维持能量供应。
酶水平的调节方式（范文8篇）
酶水平的调节方式（范文8篇）以下是网友分享的关于酶水平的调节方式的资料8篇，希望对您有所帮助，就爱阅读感谢您的支持。
酶水平的调节方式（一）第五节酶活性的调节和重要调节酶一．别构调节（allosteric regulation）和别构酶1．别构调节实例：例1：cAMP —依赖性蛋白激酶（R 2C 2）：例2：天冬氨酸转氨甲酰酶( ATCase 2C 3 + 3R2 = R6C 6) ：（1）催化的反应：（2）调节： A. ATP 是激活剂B. CTP 是抑制剂（反馈抑制）C. 天冬氨酸是激活剂D ．PALA 是双底物类似物，强抑制剂PALA 结合在ATCase 催化部位上的方式（3）ATCase 动力学曲线：2．基本概念：（1）调节酶：除底物外，活性可通过其他方式（如共价修饰等）或被其他生物分子调节的酶为调节酶。
酶的调节方式主要有别构调节和共价调节。
（2）别构调节：当一些小分子物质与酶的某一特定部位可逆的、非共价结合后，引起酶的构象变化，从而导致酶活性的变化，这种调节方式称为别构调节。
这些小分子物质称为调节剂（效应剂、别构剂），别构剂与酶结合的部位称别构中心或调节部位。
（3）别构酶：能进行别构调节的酶为别构酶，别构酶除活性中心外还有别构中心。
别构酶一般为寡聚体，含2个或多个亚基。
活性中心和别构中心可能存在于同一亚基的不同部位上或存在于不同亚基上。
存在别构中心的亚基称调节亚基，别构中心负责调节酶促反应速度。
别构酶的活性中心负责对底物的结合与催化，存在活性中心的亚基称催化亚基。
（4）别构激活剂（正效应物）：效应物与酶的结合使酶活性升高者，称为别构激活剂或正效应物。
（5）别构抑制剂（负效应物）：效应物与酶的结合使酶活性降低者，称为别构抑制剂或负效应物。
（6）别构效应（allosteric effect ）:效应分子与别构酶的别构中心或调节亚基结合后，诱导或稳定了酶分子的某种构象，使酶活性中心或催化亚基与底物的结合和催化活性受到影响，从而调节酶的反应速度，此效应称为别构效应。
糖代谢中关键酶果糖双磷酸酶-1与卵巢癌化疗敏感性关系的研究
《中国癌症杂志》2017年第27卷第5期CHINA ONCOLOGY 2017 Vol.27 No.5 340糖代谢中关键酶果糖双磷酸酶-1与卵巢癌化疗敏感性关系的研究李浩然1，李梦娇1，刘 霏1，王子良2，程 玺11.复旦大学附属肿瘤医院妇瘤科，复旦大学上海医学院肿瘤学系，上海 200032；2.复旦大学附属肿瘤医院肿瘤研究所，复旦大学上海医学院肿瘤学系，上海 200032 ［摘要］ 背景与目的：上皮性卵巢癌是女性生殖系统恶性肿瘤中死亡率最高的肿瘤。
化疗期间耐药的产生是卵巢癌死亡率高的主要原因。
果糖双磷酸酶-1(fructose-1, 6-bisphosphatase，FBP1)是糖代谢过程中的关键酶。
FBP1用于催化1,6 -二磷酸果糖水解为6-磷酸果糖和磷酸盐，从而抑制细胞的糖酵解。
该研究旨在探讨FBP1与卵巢癌化疗敏感性关系。
方法：采用免疫组织化学方法检测209例卵巢癌患者标本中FBP1蛋白的表达水平及其与卵巢癌患者化疗敏感性的关系。
结果：在209例卵巢癌组织中，FBP1的阳性表达率为49.3%(103/209)，FBP1表达阳性组患者生存期长于阴性组，二者之间差异有统计学意义(42.6个月 vs 62.1个月，P=0.003)，并且FBP1表达与化疗敏感性相关(P=0.007)。
结论：糖代谢中关键酶基因FBP1的表达可能与卵巢癌对化疗的敏感性有关，可作为化疗敏感性及预后判断的重要指标。
［关键词］ 果糖双磷酸酶-1；卵巢癌；顺铂；化疗敏感性 DOI: 10.19401/ki.1007-3639.2017.05.004 中图分类号：R737.31 文献标志码：A 文章编号：1007-3639(2017)05-0340-05Research on the relationship between fructose-1, 6-bisphosphatase and chemosensitivity of ovarian carcinoma LI Haoran1, LI Mengjiao1, LIU Fei1, WANG Ziliang2, CHENG Xi1 (1.Department of Gynecological Oncology, Fudan University Shanghai Cancer Center, Department of Oncology, Shanghai Medical College, Fudan University, Shanghai 200032, China; 2. Department of Cancer Institute, Fudan University Shanghai Cancer Center, Department of Oncology, Shanghai Medical College, Fudan University, Shanghai 200032, China)Correspondence to: CHENG Xi E-mail: cheng_xi1@ ［Abstract］ Background and purpose: Epithelial ovarian carcinoma is the most malignant tumor in female reproductive system because of its resistance to chemotherapy. Fructose-1, 6-bisphosphatase (FBP1) is a rate-limiting enzyme in gluconeogenesis used to catalyze the hydrolysis of fructose-1, 6-bisphosphate to fructose-6-phosphate and inorganic phosphate, thereby inhibiting the effect of glycolysis in tumor cells. This study aimed to investigate the association between the expression of FBP1 and chemosensitivity.Methods: The expression level of FBP1 in ovarian cancer patients was measured by immunohistochemistry.Results: According to the results of immunohistochemistry in 209 ovarian carcinoma specimens, the percentage of positive FBP1 expression was about 49.3% (103/209). Loss of FBP1 was a negative factor of survival (42.6 months vs 62.1 months, P=0.003). Besides, patients who were sensitive to chemotherapy displayed significantly higher scores of FBP1 expression than patients who were resistant to therapy (P=0.007).Conclusion: The rate-limiting enzyme FBP1 in gluconeogenesis can be used as a biomarker for predicting the chemoresistance and prognosis of ovarian cancer patients. ［Key words］ Fructose-1, 6-bisphosphatase; Ovarian neoplasms; Cisplatin; Chemosensitivity基金项目：国家自然科学基金青年科学基金项目(NSFC1212)。
西安大学生物工程学院2020级《生物化学》考试试卷(2547)
西安大学生物工程学院2020级《生物化学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（50分，每题5分）1. b折叠是主肽链相当伸展的结构，因此它仅存在于某些纤维状蛋白质中。
（）[暨南大学2019研]答案：错误解析：b折叠除存在于某些纤维状蛋白质中外，也存在于球状蛋白质中。
在球状蛋白质中β折叠片主要是反平行式的，而球状蛋白质中反平行同样平行两种方式几乎和广泛地存在；在球状蛋白质中，β折叠片的氢键主要是在演化成不同肽链之同形成，而球状蛋白质中既可以在不同肽链或不同蛋白质分子之间，也可以在同一肽链的不同肽段之间形成。
2. DNA是遗传物质，而RNA则不是。
（）答案：错误解析：3. 在生理条件下，氧和二氧化碳均与血红蛋白血红素中的二价铁结合。
（）答案：错误解析：氧与血红蛋白相配合血红素中的二价铁结合，而二氧化碳与血红蛋白4个亚基的N端氨基结合。
4. 有n个不对称C原子单糖的旋光异构体为2n－1。
（）[四川大学2017研]答案：错误解析：糖分子的旋光绝不异构体数目取决于其所含不对称碳原子数目，用n说不对称碳原子数目，C表示不对称双键。
含n个C的单糖有2n 个旋光异构体，组成2n－1对不同的对映体。
5. 雌激素和雄激素虽然都是胆固醇的衍生物，但在机体内不能互相转变。
（）答案：错误解析：6. 疏水作用是使蛋白质空间结构稳定的一种非常重要的次级键。
（）答案：正确解析：7. 血红蛋白和细胞色素C的辅基相同，前者运输氧，后者用于组成呼吸链。
它们的生物学功能本质是相同的。
（）答案：错误解析：血红蛋白与细胞色素C都含有血红素辅基，前者是运输氧，后者血红素是用于传递电子，因此生理学本质截然不同。
8. 脑磷脂与血液凝固有关，是仅分布于高等动物脑部组织中的甘油磷脂。
6-磷酸果糖激酶-2果糖-2,6-二磷酸酶3对人脐静脉内皮细胞管腔形成的影响
6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2，6-二磷酸酶3对人脐静脉内皮细胞 管腔形成的影响
·研究原著·
曹 阳1，胡 萍1，田 敏1，韦 芳2，顾 青2，吕红彬1 (1西南医科大学附属医院眼科，四川省泸州市
曹阳，男，1988 年生，四 川省仁寿县人，汉族，西 南医科大学在读硕士，主 要从事眼底病方向的研 究。
通讯作者：吕红彬，博士， 主任医师，西南医科大学 附属医院眼科，四川省泸 州市 646000
文献标识码:B 投稿日期：2019-09-21 送审日期：2019-09-24 采用日期：2019-11-14 在线日期：2019-12-30
Cao Yang, Master candidate, Department of Ophthalmology, Affiliated Hospital of Southwest Medical University, Luzhou 646000, Sichuan Province, China
Corresponding author: LüHongbin, MD, Chief physician, Department of Ophthalmology, Affiliated Hospital of Southwest Medical University, Luzhou 646000, Sichuan Province, China
2217
曹阳，胡萍，田敏，韦芳，顾青，吕红彬. 6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2，6-二磷酸酶 3 对人脐静脉内皮细胞管腔形成的影响[J]. 中国组织工程研究，2020，24(14):2217-2222. DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2599
生物化学填空题
生物化学填空题⏹人体蛋白质的基本组成单位为氨基酸，共有20种。
（P8）⏹组成人体蛋白质的氨基酸均属于L-α-氨基酸，除甘氨酸外。
（P8）⏹体内有三种含硫氨基酸，它们是甲硫氨酸、半胱氨酸和胱氨酸。
（P9）⏹谷胱甘肽的第一个肽键由γ羧基与半胱氨酸的氨基组成，其主要功能基团为半胱氨酸的巯基。
（P12）⏹体内有生物活性的蛋白质至少具备三级结构，有的还具有四级结构。
（P13）⏹蛋白质二级结构是指蛋白质的分子中某一段肽链的相对空间位置，并不涉及氨基酸残基侧链的构象（P14）⏹α-螺旋的主链绕中心轴作有规律的螺旋式上升，走向为顺时针方向，即所谓的右手螺旋。
（P15）⏹血红蛋白是含有血红素辅基的蛋白质，其中的二价铁离子可结合1分子 O2。
（P26）⏹蛋白质为两性电解质，大多数在酸性溶液中带正电荷，在碱性溶液中带负电荷。
当蛋白质的净电荷为零时，此时溶液的pH值称为等电点。
（P30 P10）⏹蛋白质变性主要是其空间结构遭到破坏，而其一级结构仍可完好无损。
（P31）⏹蛋白质可与某些试剂作用产生颜色反应，可用作蛋白质的定性和定量分析。
常用的颜色反应有茚三酮反应和双缩脲反应。
（P31）⏹蛋白质颗粒在电场中移动，移动的速率主要取决于蛋白质的表面电荷量和分子量，这种分离蛋白质的方法称为电泳。
（P33）⏹用凝胶过滤分离蛋白质，分子量较小的蛋白质在柱子中滞留的时间较长，因此最先流出凝胶柱的蛋白质，其分子量最大。
（P34）⏹嘌呤和嘧啶环中均含有共轭双键，因此对 260nm的紫外线有较强吸收。
（P40）⏹碱基和核糖或脱氧核糖通过糖苷键形成核苷。
（P41）⏹脱氧核苷酸或核苷酸连接时总是由前一个核苷酸的3′-羟基与下一位核苷酸的5′-磷酸形成3′，5′-磷酸二脂键。
（P41）⏹体内常见的两种环核苷酸是环腺苷酸cAMP和环鸟苷酸cGMP。
（P42）⏹在典型的DNA双螺旋结构中，由磷酸戊糖构成的主链位于双螺旋的外侧，碱基位于内侧。
（P45）⏹DNA分子的两条链呈反平行走向是由于核苷酸连接的方向性和碱基间氢键形成的限制。
西安大学生物工程学院2020级《生物化学》考试试卷(423)
西安大学生物工程学院2020级《生物化学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（50分，每题5分）1. 寡聚蛋白质中亚基与亚基的相互作用的主要作用力是氢键和离子键，因此增加离子强度可以使寡聚蛋白解聚为单体。
（）答案：正确解析：2. DNA的两条链互补，所以两条链的（G＋C）含量是相同的。
（）答案：正确解析：3. 测定酶活力时，底物浓度不必大于酶浓度。
（）答案：错误解析：4. 脑磷脂与血液凝固有关，是仅分布于高等动物脑部组织中的甘油磷脂。
（）答案：错误解析：5. 葡萄糖分子中有醛基，它和一般的醛类一样，能和希夫（Schiff）试剂反应。
（）答案：错误解析：葡萄糖分子中的醛基在环状结构中变成了科泡缩醛基，所以其醛基不如一般醛类的醛基活泼，不能和Schiff试剂反应。
6. 抑制剂对酶的抑制作用是酶变性失活的结果。
（）。
答案：错误解析：7. CNBr能裂解GlyMetPro三肽。
（）答案：正确解析：Pro并不影响CNBr的裂解反应。
8. 构型的改变必须有旧的共价键的破坏和新的共价键的形成，而构象的改变则不发生这类变化。
（）答案：正确解析：9. 水溶性激素的受体一定在细胞膜上，而脂溶性激素的受体则一定在细胞内。
（）答案：错误解析：爪蟾孕激素的受体就在细胞膜上。
10. 起始氨酰tRNA结合在大亚基的A部位（氨酰tRNA结合部位）上。
（）答案：错误解析：2、名词解释题（25分，每题5分）1. 异促效应答案：异促效应是指非底物分子的调节物对别构酶的。
若一分子效应物和酶结合之后，影响到另一不同的效应物与核酸的另部位结合则称为异促效应。
解析：空2. 同源蛋白质答案：同源蛋白质是指长期存在于不同物种、起源相同、序列和功能类似的蛋白质，例如人与鸡的血红蛋白。
糖酵解与线粒体功能障碍的关系及其在肝脏疾病中的潜在价值
!L"!糖酵解与线粒体功能障碍的关系及其在肝脏疾病中的潜在价值颜耿杰１，林 镛１，苏会吉１，陈含笑１，班少群１，韦艾凌１，２，毛德文２，龙富立２１广西中医药大学研究生院，南宁５３０２００；２广西中医药大学第一附属医院肝病二区，南宁５３００２３摘要：糖酵解在肝脏疾病的发生发展中发挥着重要作用。
在不同肝脏疾病中，糖酵解活性显示出不同程度的增强，并与线粒体功能障碍（氧化磷酸化功能缺陷和活性氧产生）密切相关，这有助于填补由氧化磷酸化受损而导致的能量产生缺陷。
因此，或可通过靶向调节有氧糖酵解中的关键因素，例如抑制酶己糖激酶２、Ｍ２型丙酮酸激酶或其他调节途径，寻求肝脏疾病的潜在治疗新方法。
本文从糖酵解与肝脏疾病的相互关系出发，阐述糖酵解在肝脏疾病中的治疗意义和潜在价值，以期为肝脏疾病治疗提供新思路。
关键词：肝疾病；糖酵解；线粒体基金项目：国家自然科学基金（８１９６０８４１）；国家科技重大专项（２０１８ＺＸ１０７２５５０５－００１－０１１）；广西科技计划项目（２０２０ＧＸＮＳＦＡＡ２９７０９８）；广西中医药大学校级硕士研究生创新项目（ＹＣＸＪ２０２１０３４）ＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｇｌｙｃｏｌｙｓｉｓａｎｄｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎａｎｄｉｔｓｐｏｔｅｎｔｉａｌｖａｌｕｅｉｎｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓＹＡＮＧｅｎｇｊｉｅ１，ＬＩＮＹｏｎｇ１，ＳＵＨｕｉｊｉ１，ＣＨＥＮＨａｎｘｉａｏ１，ＢＡＮＳｈａｏｑｕｎ１，ＷＥＩＡｉｌｉｎｇ１，２，ＭＡＯＤｅｗｅｎ２，ＬＯＮＧＦｕｌｉ２．（１．ＧｒａｄｕａｔｅＳｃｈｏｏｌｏｆＧｕａｎｇｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎａｎｎｉｎｇ５３０２００，Ｃｈｉｎａ；２．ＳｅｃｏｎｄＷａｒｄｏｆＨｅｐａｔｏｌｏｇｙ，ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＧｕａｎｇｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎａｎｎｉｎｇ５３００２３，Ｃｈｉｎａ）Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＬＯＮＧＦｕｌｉ，ｌｏｎｇｆｕｌｉ００５＠１６３．ｃｏｍ（ＯＲＣＩＤ：００００－０００３－１１９６－２６９７）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｇｌｙｃｏｌｙｓｉｓｐｌａｙｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓａｎｄｓｈｏｗｓｖａｒｙｉｎｇｄｅｇｒｅｅｓｏｆｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓ，ａｎｄｉｔｉｓｃｌｏｓｅｌｙａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ（ｏｘｉｄａｔｉｖｅｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙａｎｄｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙ ｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ），ｗｈｉｃｈｈｅｌｐｓｔｏｆｉｌｌｅｎｅｒｇｙｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｃａｕｓｅｄｂｙｉｍｐａｉｒｅｄｏｘｉｄａｔｉｖｅｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｉｔｍｉｇｈｔｂｅｐｏｓｓｉｂｌｅｔｏｓｅａｒｃｈｆｏｒｐｏｔｅｎｔｉａｌｎｅｗｔｈｅｒａｐｉｅｓｆｏｒｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓｔｈｒｏｕｇｈｔａｒｇｅｔｅｄｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｋｅｙｆａｃｔｏｒｓｉｎａｅｒｏｂｉｃｇｌｙｃｏｌｙｓｉｓ，ｓｕｃｈａｓｈｅｘｏｋｉｎａｓｅ２，ｐｙｒｕｖａｔｅｋｉｎａｓｅＭ２，ａｎｄｏｔｈｅｒｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｐａｔｈｗａｙｓ．Ｆｒｏｍｔｈｅｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｏｆｔｈｅａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｇｌｙｃｏｌｙｓｉｓａｎｄｌｉｖｅｒｄｉｓｅａ ｓｅｓ，ｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｅｌａｂｏｒａｔｅｓｏｎｔｈｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅａｎｄｐｏｔｅｎｔｉａｌｖａｌｕｅｏｆｇｌｙｃｏｌｙｓｉｓｉｎｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓ，ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｐｒｏｖｉｄｅｎｅｗｉｄｅａｓｆｏｒｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＬｉｖｅｒＤｉｓｅａｓｅｓ；Ｇｌｙｃｏｌｙｓｉｓ；ＭｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａＲｅｓｅａｒｃｈｆｕｎｄｉｎｇ：ＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ（８１９６０８４１）；ＮａｔｉｏｎａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＭａｊｏｒＰｒｏｊｅｃｔ（２０１８ＺＸ１０７２５５０５－００１－０１１）；ＧｕａｎｇｘｉＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＰｒｏｊｅｃｔ（２０２０ＧＸＮＳＦＡＡ２９７０９８）；ＧｕａｎｇｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＧｒａｄｕａｔｅＩｎｎｏｖａｔｉｏｎＰｒｏｊｅｃｔ（ＹＣＸＪ２０２１０３４）ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－５２５６．２０２２．０８．０４２收稿日期：２０２２－０４－１８；录用日期：２０２２－０５－２９通信作者：龙富立，ｌｏｎｇｆｕｌｉ００５＠１６３．ｃｏｍ 肝脏是控制全身能量代谢的主要器官，包括葡萄糖、脂肪酸和氨基酸代谢，在体内营养平衡中承担核心作用。
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ｓｉＲＮＡ来干扰ＰＦＫＦＢ３在ＭＧＣ８０３细胞中的表达，结果
荧光定量ＰＣＲ系统上进行，反应条件：预变性９５℃
１
ｍｉｎ，变性９５℃５ Ｓ，退火和延伸６０℃３０ Ｓ，共进行４０
个循环。ＰＦＫＦＢ３基因在癌组织和癌旁组织中的 ｍＲＮＡ表达水平差异采用相对定量法即用２。△觚‘法表
示。
４．ＭＴＦ实验：（１）按步骤４的方法转染ＭＧＣ８０３
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－９０３０．２０１６．１１．０３７
【摘要】
目的检测６．磷酸果糖激酶一２／果糖双磷酸酶－２同工酶３（ＰＦＫＦＢ３）在胃癌组织中的
表达，分析ＰＦＫＦＢ３对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法用实时定量反转录聚合酶链反应 （ＲＴ—ｑＰＣＲ）方法检测８７例胃癌患者癌和癌旁组织中ＰＦＫＦＢ３ ｍＲＮＡ表达水平，并用统计学方法分 析ＰＦＫＦＢ３ ｍＲＮＡ表达水平与Ｉ临床病理特征的相关性。用小干扰ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）干扰胃癌细胞 ＭＧＣ８０３中ＰＦＫＦＢ３的表达，并用噻唑蓝（Ｍ，ＩＴＩ’）法比较干扰后胃癌细胞增殖能力的改变，Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ 法比较干扰后胃癌细胞迁移能力的改变。结果８７例胃癌患者癌组织中ＰＦＫＦＢ３的ｍＲＮＡ水平平 均是癌旁组织的２．１倍。胃癌组织中ＰＦＫＦＢ３的高表达与脉管内癌栓形成、淋巴结转移和ＴＮＭ分 期明显相关。ｓｉＲＮＡ干扰胃癌细胞中ＰＦＫＦＢ３的表达后，胃癌细胞的增殖能力和迁移能力的明显下 降。结论ＰＦＫＦＢ３在胃癌癌发生发展过程中发挥重要作用。
细胞４８ ｈ后，以每孔５ ０００个细胞接种于９６孑Ｌ板中。
ＭＧＣ８０３细胞４８ ｈ后，将细胞密度调整至１
Ｘ
１０６／ｍｌ，
向Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室中加人１００ Ｉｘｌ细胞悬液。（２）将
Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室置人２４孔板，在小室下层加入６００斗ｌ含 １０％胎牛血清的完全培养基，培养２４ ｈ。（３）取出小 室，用无菌棉签擦去上室面细胞，用４％多聚甲醛固定
１５
ｏＣ、５％ＣＯ：条件下常规培养和传代。主要试剂与 仪器：ＲＰＭＩ １６４０细胞培养基及胎牛血清购自美国 Ｇｉｂｃｏ公司；２条ＰＦＫＦＢ３小干扰ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）和
ｔｉｓｓｕｅｓ ｗａｓ ｅｘａｍｉｎｅｄ ｂｙ ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ
ｒｅｖｅｒｓｅ
ａｎｄ ｉｔｓ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ
ａｓ
ｗｅｌｌ
ａｓ
ｉｔｓ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
ｏｆ ＰＦＫＦＢ３ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ
ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ—ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ（ＲＴ—ｑＰＣＲ）ａｎａｌｙ．
探讨ＰＦＫＦＢ３在胃癌组织中表达及意义。
资料与方法
１．一般资料：８７例胃癌患者为２０１３年１月至 ２０１５年１２月在南京医科大学第二附属医院普外科住 院接受手术治疗的胃癌患者，术前均未接受放化疗以
万方数据
・２５６４・
主堡塞验生Ｅ型盘查！Ｑ！！生！！旦箜塑鲞筮！！翅垦丛！』垦翌！！垡：盟！！！些竺！！！鱼：！尘：塑：盟！：！！
ｏｆ肌彬ｎｇ
Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｓｕｒｇｅｒｙ，ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ ２ＪＤＤＪＪ，吼ｉｎａ（Ｈｕａｎｇ ｒＱ，Ｗａｎｇ Ｊ） Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ
Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００１１，Ｃｈｉｎａ（ｙｎ昭Ｐ）； Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｎ８喀ｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎ锄ｉ堍
ｓｉቤተ መጻሕፍቲ ባይዱＮＡｓ和Ｃｏｎｔｒｏｌ ＲＮＡ，轻轻混匀并室温孵育５
ｐｍｏｌ ｍｉｎ；
两组之间的临床病理特征的比较采用ｒ检验，以Ｐ＜
０．０５为差异有统计学意义。
结 果
（３）用５０斗ｌ的Ｏｐｔｉ－ＭＥＭ稀释１斗ｌ的Ｌｉｐｏｆｅｅｔａｍｉｎｅ
ＲＮＡｉＭＡＸ，轻轻混匀并室温孵育５ ｍｉｎ；（４）将（２）与 （３）的混合液轻轻混匀，室温孵育２０ｍｉｎ；（５）将（４）的 混合液加入含有细胞的５００斗１无血清培养基中，轻轻 混匀后培养６ ｈ后，将无血清培养基移去，更换完全培 养基后继续培养４８ ｈ。按照如下的实时定量反转录聚 合酶链反应（ＲＴ．ｑＰＣＲ）方法检测干扰效率。 ３．ＲＴ—ｑＰＣＲ：将组织标本以及细胞总ＲＮＡ按照 Ｔｒｉｚｏｌ试剂说明书进行提取，并按ｃＤＮＡ反转录试剂盒 说明合成ｃＤＮＡ。目的基因ＰＦＫＦＢ３的引物序列为：正
Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ
ｒａｉｎ，结晶紫染色２０ ｍｉｎ。（３）揭下滤膜，晾干后用
ＲＮＡｉＭＡＸ以及Ｔｒｉｚｏｌ（总ＲＮＡ提取试
中性树胶固定封片。显微镜下观察计数穿膜的细胞 数。 ６．统计学方法：应用ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５．Ｏ进行统 计分析。计量资料用均数±标准差（面±ｓ）表示，实验 组和对照组的两两比较均采用Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｔ检验，我们按 照ＰＦＫＦＢ３在癌组织中的ｍＲＮＡ表达水平倍数高低将 ８７例患者分为高表达组（４４例）和低表达组（４３例），
及肿瘤靶向治疗。本研究得到南京医科大学第二附属 医院伦理委员会的批准。胃癌细胞株ＢＧＣ８２３、 ＳＧＣ７９０１、ＭＧＣ８０３的培养：胃癌细胞株均购自中国科 学院上海生命科学研究所细胞资源中心，按照其推荐 用含１０％胎牛血清的ＲＰＭＩ １６４０培养液培养，并在
３７
测量各孔的吸光度（Ａ）值，绘制细胞生长曲线。 ５．Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ实验：（１）按步骤４的方法转染
组织中ＰＦＫＦＢ３ ｍＲＮＡ水平平均是癌旁组织的２．１倍 （Ｐ＜０．０５）。
２．胃癌组织中ＰＦＫＦＢ３ ｍＲＮＡ的表达水平与临床 病理特征的相关性：为了分析ＰＦＫＦＢ３ ｍＲＮＡ表达水 平与临床病理特征的相关性，按照８７例胃癌患者
ＰＦＫＦＢ３
ＣＡＧｌＴＣＣＴＡＣＴＣＡＡ，ＩＴＩ’ＣＣＡＡ一３’。内参基因Ｂ－肌动蛋 白（Ｂ．ａｃｔｉｎ）引物序列为：正义链：５’一ＣＡＣＧＡＴＧ—
虫堡塞坠处登盘查！Ｑ！！生！！旦筮！！鲞筮！！翅堡！ｉ！』垦翌！！婆：盟！！！坐！竺！Ｑ！！：！！！：ｊｊ：№：！１
・２５６３・
・临床研究・
６一磷酸果糖激酶一２／果糖双磷酸酶一２
同工酶３在胃癌中的表达和意义
杨鹏黄义勤王杰
作者单位：２１００１１南京医科大学第二临床医学院（杨鹏）；２１００１１南京医科大学第二 附属医院普通外科（黄义勤、王杰） 通信作者：王杰，Ｅｍａｉｌ：ｗａｎｇｊｉｅ３３０１＠１６３．ｃｏｍ
【关键词】
移
胃癌；
有氧糖酵解；
６－磷酸果糖激酶一２／果糖双磷酸酶一２；
细胞增殖；
细胞迁
Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ６一ｐｈｏｓｐｈｏｆｒｕｃｔｏ一２一ｋｉｎａｓｅ／ｆｒｕｃｔｏｓｅ－２。６一ｂｉｓｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ一 ３ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ№ｎｇ Ｐｅｎｇ，Ｈｕａｎｇ Ｙｉｑｉｎ，Ｗａｎｇ Ｊｉｅ Ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ Ｇｅｎｅｒａｌ
义链：５’一ＣＣＴＣＡＣＴＣＧＣＡＧＣＣＡＣ ｒＩ－Ｉ＇ＣＴ一３’；反义链：５’－
１．ＰＦＫＦＢ３在胃癌患者的癌组织中高表达：我们 用ＲＴ—ｑＰＣＲ法比较了８７例胃癌患者癌组织和癌旁组 织中ＰＦＫＦＢ３ ｍＲＮＡ表达水平差异。结果发现７８例 （８９．６％）患者癌组织中ＰＦＫＦＢ３的表达水平高于癌旁 组织，其中有４５例患者（５１．７％）癌组织中ＰＦＫＦＢ３的 表达水平高于癌旁组织２倍以上。８７例胃癌患者癌
ｃａｎｃｅｒ．
【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】
６一ｂｉｓｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ一３；
Ａｅｒｏｂｉｃ ｇｌｙｃｏｌｙｓｉｓ；６一ｐｈｏｓｐｈｏｆｒｕｃｔｏ一２一ｋｉｎａｓｅ／ｆｒｕｅｔｏｓｅ一２， Ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ： Ｃｅｌｌ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ
６．磷酸果糖激酶．１（ＰＦＫ一１）是糖酵解途径的一个 关键酶，其最重要的变构激活剂是２，６．双磷酸果糖 （１７２，６Ｐ２），而６一磷酸果糖激酶一２／果糖双磷酸酶－２同 工酶３（ＰＦＫＦＢ３）是促进Ｆ２，６Ｐ２合成最重要的酶，因 此具有协同促进调节肿瘤细胞糖酵解的作用，ＰＦＫＦＢ３ 已被发现在多种肿瘤组织中高表达¨ｏ。本研究旨在