放线菌的形态观察

放线菌的形态观察

09级生物科学（3）班张刚刚200900140165

组员：岳永胜俞华军余振洋谢英健

2010/10/27

摘要：放线菌是原核生物的一个类群。大多数有发达的分枝菌丝。菌丝纤细，宽度近于杆状细菌，约0.5～1微米。可分为：营养菌丝，又称基质菌丝，主要功能是吸收营养物质，有的可产生不同的色素，是菌种鉴定的重要依据；气生菌丝，叠生于营养菌丝上，又称二级菌丝。本实验主要用插片法接种放线菌并观察其形态特征。

关键词：放线菌基质菌丝气生菌丝孢子丝

前言

（1）放线菌

放线菌菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和孢子丝组成，制片时不采取涂片法，以免破坏细胞及菌丝体形态。通常采用插片法或玻璃纸法并结合菌丝体简单染色进行观察。在插片法中，首先将灭菌盖玻片插入接种有放线菌的平板，使放线菌沿盖玻片和培养基交接处生长而附着在盖玻片上，取出盖玻片可直接在显微镜下观察放线菌在自然生长状态下的形态特征，而且有利于对不同生长期的放线菌进行观察。在玻璃纸法中，采用的玻璃纸是一种透明的半透膜，将放线菌菌种接种在覆盖在固体培养基表面的玻璃纸上，水分和小分子营养物质可透过玻璃纸被菌体吸收利用，而菌丝不能穿过玻璃纸而与培养基分离，观察是只要接下玻璃纸转移到载玻片上，即可镜检观察。由于孢子丝形态、孢子排列及形状是放线菌重要的分类指标，可用印片法将放线菌菌落或菌苔表面的孢子丝印在载玻片上，经简单染色后观察。

（2）目的与内容

掌握放线菌形态观察的基本方法；插片法观察放线菌的基本形态特征。1.1材料

1.1.1菌种

青色链霉菌；弗氏链霉菌。

1.1.2仪器和其他用品

载玻片；盖玻片；平皿；镊子；光学显微镜；接种环；记号笔；吸水纸；火柴；酒精灯。

1.2过程

1.配制200ml高氏(Gause)1号培养基。

2.将培养基、平皿（1包，10套）、盖玻片（3包，10片/包）、镊子（2把）放入灭菌锅中灭菌。

3.倒平板。

4.无菌操作分别由青色链霉菌和弗氏链霉菌培养基平板挑取菌种在高氏1号培养基平板上密集划线接种。

5.无菌操作用镊子取灭菌盖玻片以约45度角插入平板琼脂接种线上。

6.28℃倒置培养7天。

7.用镊子小心取出盖玻片，用纸擦去一面培养物，另一面朝下放在载玻片上，通过显微镜直接用低倍镜和高倍镜观察，也可用油镜。

1.3注意事项

在移动附着有菌体的盖玻片时，勿碰到菌丝体，以免破坏菌丝体形态。

2.1结果

青色链霉菌（10×100倍）弗氏链霉菌（10×100倍）

2.2讨论

盖玻片附着有菌体的一面应朝上，用被擦拭的一面与载玻片接触。本实验为了能用油镜更好地观察菌丝，将有菌丝的一面放在载玻片上。要轻轻放置，放置后勿再移动盖玻片，以免破坏菌丝体形态。

附：高氏1号培养基配方

可溶性淀粉 2Og

KNO

3

1g

NaCl 0.5g

K 2HPO

4

0.5g

MgSO

4

0.5g

FeSO

4

0.01g 琼脂 20g 水 1000mL pH 7.2～7.4