蛋白质结构与功能-3(临床3班)
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
8
★血红蛋白的别构效应
（四级结构改变）
血红蛋白和血红素辅基的结合
9
★血红蛋白的别构效应
血红蛋白和血红素辅基的结合
4个吡咯环由4个甲炔基连接成 一个平面，血红素的铁原子 共有6个配位键，其中4个与 血红素的吡咯环的N结合，一 个与珠蛋白亚基F螺旋区的第 8位组氨酸(F8)残基的咪唑基 的N相连接，空着的一个配位 键可与O2可逆地结合
为蛋白质淀粉样纤维沉淀的病理改变。
这类疾病包括：人纹状体脊髓变性病、老 年痴呆症、亨廷顿舞蹈病、疯牛病等。
23
Summary:
二、蛋白质的空间结构是其功能活性的基础
●变构效应说明了蛋白质空间结构与功能之间的关系。 ●一个寡聚体蛋白质的一个亚基与其配体结合后，能影
响此寡聚体中另一个亚基与配体结合能力的现象，称为
构象发生变化，其功能活性也随之改变，蛋白质多种 多样的功能与各种蛋白质特定的空间构象密切相关。
7
（二）通过构象改变（变构）可调节蛋白质活性
蛋白质的变构效应（allosteric effect) 变构效应亦称别构效应，是指一个蛋白质与其配体 (或其他蛋白质)结合后，蛋白质的空间结构发生改 变，并伴随其功能的变化。
（三）蛋白质构象改变可引起疾病
蛋白质构象改变导致疾病的机理：有些蛋
白质错误折叠后相互聚集，常形成抗蛋白水解
酶的淀粉样纤维沉淀，产生毒性而致病，表现
为蛋白质淀粉样纤维沉淀的病理改变。
这类疾病包括：人纹状体脊髓变性病、老 年痴呆症、亨廷顿舞蹈病、疯牛病等。
21
PrPc α-螺旋
朊蛋白
PrPsc β-折叠!!
Hb和Mb的氧解离曲线
12
★血红蛋白的别构效应
协同效应(cooperativity)
一个寡聚体蛋白质的一个亚基与其配体结合后，
能影响此寡聚体中另一个亚基与配体结合能力的现象，
称为协同效应。 如果是促进作用则称为正协同效应 (positive cooperativity) 如果是抑制作用则称为负协同效应 (negative cooperativity)
●具有别构效应的蛋白质成为别构蛋白 （allosteric protein) ● 能引起蛋白质发生别构效应的物质称为别构 剂或别构效应剂（allosteric effector) ● 别构效应充分说明了蛋白质空间结构与功能之 间的关系。 ★血红蛋白（hemoglobin, Hb)是最早发现具有别 构效应的蛋白质，O2为其重要的别构效应剂
第三节
蛋白质结构与功能的关系
The Relationship between Structure and Function of Proteins
生物化学与分子生物学教研室 江 渝
Tel:752942(O); E-mail: yujiang0207@163.com 2014-09-12
1
Review
• 变性的本质 —— 破坏非共价键，不改变多肽链的氨基 酸序列。 • 造成变性的因素 如加热、乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、 重金属离子及生物碱试剂等 。
31
（三）蛋白质空间结构破坏而引起变性
• 应用举例 临床医学上，变性因素常被应用来消毒 及灭菌。
此外, 防止蛋白质变性也是有效保存蛋白 质制剂（如疫苗等）的必要条件。
般 10 倍于蛋白质溶液体积。
P
NH3+ cation pH < pI + H+
P
NH3+ amphoteric pH = pI + H+
P
NH2 anion pH > pI
27
（二）蛋白质具有胶体性质
蛋白质属于生物大分子之一，分子量可自
1 万 至 100 万 之 巨 ， 其 分 子 的 直 径 可 达 1 ～
100nm，为胶粒范围之内。
* 蛋白质胶体稳定的因素
1.颗粒表面电荷
2.水化膜
28
水化膜
+ + + + + + +
带正电荷的蛋白质 脱水作用
酸 碱 在等电点的蛋白质 脱水作用 碱
碱 酸
－ －
－
－－
－ － －
带负电荷的蛋白质 脱水作用 酸
+ + + + + + + +
带正电荷的蛋白质
－ － － － － －－ －
带负电荷的蛋白质
Summary/Homework
Terms:
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Motif Domain Subunit Chaperon Tertiary structure of protein Quaternary structure of protein Proteome Proteomics
36
（五）蛋白质的呈色反应 ⒈茚三酮反应(ninhydrin reaction)
蛋白质经水解后产生的氨基酸也可发生茚
三酮反应。
⒉双缩脲反应(biuret reaction)
蛋白质和多肽分子中肽键在稀碱溶液中与 硫酸铜共热，呈现紫色或红色，此反应称为双 缩脲反应，双缩脲反应可用来检测蛋白质水解 程度。
协同效应。 ●若蛋白质的折叠发生错误，尽管其一级结构不变，但 蛋白质的构象发生改变，仍可影响其功能，严重时可导 致疾病发生。
24
第四节
蛋白质的理化性质
The Physical and Chemical Characters of Proteins
25
一、理化性质
（一）蛋白质具有两性电离性质
蛋白质分子除两端的氨基和羧基可解离外， 氨基酸残基侧链中某些基团，在一定的溶液pH条
39
一、透析及超滤法可去除蛋白质溶液中的小 分子化合物
* 透析(dialysis)
利用透析袋把大分子蛋白质与小分 子化合物分开的方法。
* 超滤法
应用正压或离心力使蛋白质溶液透 过有一定截留分子量的超滤膜，达 到浓缩蛋白质溶液的目的。
40
二、丙酮沉淀、盐析及免疫沉淀是常用的 蛋白质沉淀方法
* 使用丙酮沉淀时，必须在 0 ～ 4℃低温下进行，丙酮用量一
维系二级结构主要的化学作用: 氢键 （hydrogen bonds）
4
Review 蛋白质一级结构是高级结构与功 能的基础
（一）一级结构是空间构象的基础 （二）一级结构相似的蛋白质空间构象
及功能也相似
（三）一级结构中关键氨基酸残基的改 变会影响蛋白质的功能
5
本次课应掌握的内容
Terms: 变构效应(allosteric effect) 协同效应(cooperativity)
32
（三）蛋白质空间结构破坏而引起变性
若蛋白质变性程度较轻，去除变性因素 后，蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构 象和功能，称为复性(renaturation) 。
去除尿素、 β-巯基乙醇 尿素、 β-巯基乙醇
天然状态，有催 化活性
可逆变性
非折叠状态，无活性 33
三、蛋白质空间结构破坏而引起变性
13
紧张态（tense state, T态）
松弛态（relaxed state, R态）
O2 与 Hb 结 合 的 正 协 同 效 应 理 论
血红蛋白亚基间及亚基内的盐键
未结合氧时,α1/β1 和α2/β2之间呈对角排列, Hb亚基之间通过8个盐键, 使4个亚基紧密结合（T态）。当氧与亚基结合后使肽段间的盐键断 裂，改变了亚基间的相互关系，使α1/β1和α2/β2之间形成15°夹角， 使得其他亚基与氧的结合更加容易（R态） 。 14
Questions: 1. 蛋白质的空间结构与功能的关系。 2. 用蛋白质结构与功能关系的知识解释蛋白质 构象病发生机制。 3. 以血红蛋白为例，弄清多亚基蛋白质的变构 效应与协同效应。 4. 蛋白质的主要理化性质
6
二、蛋白质的功能依赖特定空间结构 （空间结构与功能的关系）
蛋白质的空间结构是其功能活性的基础。
淀粉样纤维沉淀
慢性进行性致死性神经变性 朊蛋白病（疯牛病）
认真处理血制品 预防医源性传染（医疗器械） 脑、脊髓、眼组织、扁桃体 等是高危险组织
白细胞是致病因子的载体
疯牛病
22
（一）蛋白质构象改变可引起疾病
蛋白质构象改变导致疾病的机理：有些蛋
白质错误折叠后相互聚集，常形成抗蛋白水解
酶的淀粉样纤维沉淀，产生毒性而致病，表现
10
★血红蛋白的别构效应
Hb 能可逆地与 O2 结合， Hb与O2结合后称为氧合Hb。 氧合Hb占总Hb的百分数（称 百分饱和度）随 O2 浓度变化 而改变。
肌红蛋白(myoblobin, Mb) 单链球状蛋白质，含血红素辅基
Hb和Mb的氧解离曲线
11ห้องสมุดไป่ตู้
★血红蛋白的别构效应
Mb为直角双曲线，表明易 与O2结合，在O2分压低时 易结合O2。 Hb为S状曲线，表明在O2 分压低时易释放O2；提示 Hb 四个亚基与4个O2结合 时有不同的平衡常数。第4 个亚基结合最快（ S曲线后 半部呈直线上升） 据S曲线可知，第一个亚基 与O2结合后促进了第二、 三亚基与O2的结合，当前 三个亚基与O2的结合后， 大大促进了第四个亚基与 O2的结合。这种效应称为 正协同效应。
* 蛋白质沉淀 在一定条件下，蛋白疏水侧链暴露在外，肽链融会 相互缠绕继而聚集，因而从溶液中析出。 变性的蛋白质易于沉淀，有时蛋白质发生沉淀，但 并不变性。
* 蛋白质的凝固作用 蛋白质变性后的絮状物加热 可变成比较坚固的凝块，此 凝块不易再溶于强酸和强碱 中。
34
（三）蛋白质空间结构破坏而引起变性
件下都可解离成带负电荷或正电荷的基团。
* 蛋白质的等电点( isoelectric point, pI) 当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成 正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电 荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。
26
一、理化性质
（一）蛋白质具有两性电离性质
COOH + OHCOO+ OHCOO-
Questions:
1. 2. 3. 维系蛋白质各结构层次稳定性的化学作用分别是什么? 一级结构的改变对蛋白质功能有何影响? 试述镰刀型红细胞贫血病发生的生化机制。 2
蛋白质的分子结构小结:
空间结构
一级结构
（氨基酸的排列顺序） （肽键） 二级结构 （肽链主链骨架原子 的局部空间结构） （氢键）
三级结构
15
★血红蛋白的别构效应
O2与Hb结合的 正协同效应理论 O2
血红素（铁）与氧 结合后，铁原子半径变小， 就能进入卟啉环的小孔中， 继而引起肽链位臵的变动。 16
★血红蛋白的别构效应
O2与Hb结合的正协同效应理论
血红素（铁）与氧结合后，铁原子半径变小，就能进入卟啉环的小 孔中，使铁卟啉平面发生改变，继而引起肽链位置的变动。 17
（一条多肽链的所 有原子排布位置） （次级键）
四级结构
（亚基的空间排布） 3 （次级键）
蛋白质的二级结构(secondary structure)
-螺旋 ( -helix )
-片层 ( -pleated sheet )
-转角 ( -turn )
无规卷曲（random coil ）
O2 与 Hb 结 合 的 正 协 同 效 应 理 论
18
19
（三）蛋白质构象改变可引起疾病
蛋白质构象疾病：若蛋白质的折叠发生 错误，尽管其一级结构不变，但蛋白质的构 象发生改变，仍可影响其功能，严重时可导
致疾病发生。
蛋白质“折叠病” 或“构象病”
蛋白质分子的氨基酸序列没有改变，只是其结构或者说构象有 所改变也能引起疾病，这就是所谓“构象病”，或称“折叠 病”。 20
37
Summary:
蛋白质的重要理化性质：
1. 两性电离——名词：蛋白质等电点
2. 胶体性质——稳定蛋白质溶液的因素
3. 空间结构破坏会导致变性——名词：蛋白质的 变性 4. 紫外吸收——蛋白质的定量测定 5. 呈色反应——蛋白质的定性定量测定
38
第五节
蛋白质的分离、纯化与结构分析
Seperation, purification and structure analysis of proteins
变性、沉淀和凝固的关系
变性蛋白质不一定沉淀 沉淀蛋白质不一定变性 沉淀蛋白质也不一定凝固 但凝固的蛋白质一定已变性，且为不可逆变性
35
（四）蛋白质有紫外吸收的特性
由于蛋白质分子中含 有共轭双键的酪氨酸、色
氨酸和苯丙氨酸，因此在
280nm 波长处有特征性吸
收峰。蛋白质的OD280与其
浓度呈正比关系，因此可 作蛋白质定量测定。
不稳定的蛋白质颗粒
溶液中蛋白质的聚沉
29
（三）蛋白质空间结构破坏而引起变性
* 蛋白质的变性(denaturation) 在某些物理和化学因素作用下，其特定的 空间构象被破坏，也即有序的空间结构变成无 序的空间结构，从而导致其理化性质改变和生 物活性的丧失。
加热
30
（三）蛋白质空间结构破坏而引起变性
★血红蛋白的别构效应
（四级结构改变）
血红蛋白和血红素辅基的结合
9
★血红蛋白的别构效应
血红蛋白和血红素辅基的结合
4个吡咯环由4个甲炔基连接成 一个平面，血红素的铁原子 共有6个配位键，其中4个与 血红素的吡咯环的N结合，一 个与珠蛋白亚基F螺旋区的第 8位组氨酸(F8)残基的咪唑基 的N相连接，空着的一个配位 键可与O2可逆地结合
为蛋白质淀粉样纤维沉淀的病理改变。
这类疾病包括：人纹状体脊髓变性病、老 年痴呆症、亨廷顿舞蹈病、疯牛病等。
23
Summary:
二、蛋白质的空间结构是其功能活性的基础
●变构效应说明了蛋白质空间结构与功能之间的关系。 ●一个寡聚体蛋白质的一个亚基与其配体结合后，能影
响此寡聚体中另一个亚基与配体结合能力的现象，称为
构象发生变化，其功能活性也随之改变，蛋白质多种 多样的功能与各种蛋白质特定的空间构象密切相关。
7
（二）通过构象改变（变构）可调节蛋白质活性
蛋白质的变构效应（allosteric effect) 变构效应亦称别构效应，是指一个蛋白质与其配体 (或其他蛋白质)结合后，蛋白质的空间结构发生改 变，并伴随其功能的变化。
（三）蛋白质构象改变可引起疾病
蛋白质构象改变导致疾病的机理：有些蛋
白质错误折叠后相互聚集，常形成抗蛋白水解
酶的淀粉样纤维沉淀，产生毒性而致病，表现
为蛋白质淀粉样纤维沉淀的病理改变。
这类疾病包括：人纹状体脊髓变性病、老 年痴呆症、亨廷顿舞蹈病、疯牛病等。
21
PrPc α-螺旋
朊蛋白
PrPsc β-折叠!!
Hb和Mb的氧解离曲线
12
★血红蛋白的别构效应
协同效应(cooperativity)
一个寡聚体蛋白质的一个亚基与其配体结合后，
能影响此寡聚体中另一个亚基与配体结合能力的现象，
称为协同效应。 如果是促进作用则称为正协同效应 (positive cooperativity) 如果是抑制作用则称为负协同效应 (negative cooperativity)
●具有别构效应的蛋白质成为别构蛋白 （allosteric protein) ● 能引起蛋白质发生别构效应的物质称为别构 剂或别构效应剂（allosteric effector) ● 别构效应充分说明了蛋白质空间结构与功能之 间的关系。 ★血红蛋白（hemoglobin, Hb)是最早发现具有别 构效应的蛋白质，O2为其重要的别构效应剂
第三节
蛋白质结构与功能的关系
The Relationship between Structure and Function of Proteins
生物化学与分子生物学教研室 江 渝
Tel:752942(O); E-mail: yujiang0207@163.com 2014-09-12
1
Review
• 变性的本质 —— 破坏非共价键，不改变多肽链的氨基 酸序列。 • 造成变性的因素 如加热、乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、 重金属离子及生物碱试剂等 。
31
（三）蛋白质空间结构破坏而引起变性
• 应用举例 临床医学上，变性因素常被应用来消毒 及灭菌。
此外, 防止蛋白质变性也是有效保存蛋白 质制剂（如疫苗等）的必要条件。
般 10 倍于蛋白质溶液体积。
P
NH3+ cation pH < pI + H+
P
NH3+ amphoteric pH = pI + H+
P
NH2 anion pH > pI
27
（二）蛋白质具有胶体性质
蛋白质属于生物大分子之一，分子量可自
1 万 至 100 万 之 巨 ， 其 分 子 的 直 径 可 达 1 ～
100nm，为胶粒范围之内。
* 蛋白质胶体稳定的因素
1.颗粒表面电荷
2.水化膜
28
水化膜
+ + + + + + +
带正电荷的蛋白质 脱水作用
酸 碱 在等电点的蛋白质 脱水作用 碱
碱 酸
－ －
－
－－
－ － －
带负电荷的蛋白质 脱水作用 酸
+ + + + + + + +
带正电荷的蛋白质
－ － － － － －－ －
带负电荷的蛋白质
Summary/Homework
Terms:
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Motif Domain Subunit Chaperon Tertiary structure of protein Quaternary structure of protein Proteome Proteomics
36
（五）蛋白质的呈色反应 ⒈茚三酮反应(ninhydrin reaction)
蛋白质经水解后产生的氨基酸也可发生茚
三酮反应。
⒉双缩脲反应(biuret reaction)
蛋白质和多肽分子中肽键在稀碱溶液中与 硫酸铜共热，呈现紫色或红色，此反应称为双 缩脲反应，双缩脲反应可用来检测蛋白质水解 程度。
协同效应。 ●若蛋白质的折叠发生错误，尽管其一级结构不变，但 蛋白质的构象发生改变，仍可影响其功能，严重时可导 致疾病发生。
24
第四节
蛋白质的理化性质
The Physical and Chemical Characters of Proteins
25
一、理化性质
（一）蛋白质具有两性电离性质
蛋白质分子除两端的氨基和羧基可解离外， 氨基酸残基侧链中某些基团，在一定的溶液pH条
39
一、透析及超滤法可去除蛋白质溶液中的小 分子化合物
* 透析(dialysis)
利用透析袋把大分子蛋白质与小分 子化合物分开的方法。
* 超滤法
应用正压或离心力使蛋白质溶液透 过有一定截留分子量的超滤膜，达 到浓缩蛋白质溶液的目的。
40
二、丙酮沉淀、盐析及免疫沉淀是常用的 蛋白质沉淀方法
* 使用丙酮沉淀时，必须在 0 ～ 4℃低温下进行，丙酮用量一
维系二级结构主要的化学作用: 氢键 （hydrogen bonds）
4
Review 蛋白质一级结构是高级结构与功 能的基础
（一）一级结构是空间构象的基础 （二）一级结构相似的蛋白质空间构象
及功能也相似
（三）一级结构中关键氨基酸残基的改 变会影响蛋白质的功能
5
本次课应掌握的内容
Terms: 变构效应(allosteric effect) 协同效应(cooperativity)
32
（三）蛋白质空间结构破坏而引起变性
若蛋白质变性程度较轻，去除变性因素 后，蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构 象和功能，称为复性(renaturation) 。
去除尿素、 β-巯基乙醇 尿素、 β-巯基乙醇
天然状态，有催 化活性
可逆变性
非折叠状态，无活性 33
三、蛋白质空间结构破坏而引起变性
13
紧张态（tense state, T态）
松弛态（relaxed state, R态）
O2 与 Hb 结 合 的 正 协 同 效 应 理 论
血红蛋白亚基间及亚基内的盐键
未结合氧时,α1/β1 和α2/β2之间呈对角排列, Hb亚基之间通过8个盐键, 使4个亚基紧密结合（T态）。当氧与亚基结合后使肽段间的盐键断 裂，改变了亚基间的相互关系，使α1/β1和α2/β2之间形成15°夹角， 使得其他亚基与氧的结合更加容易（R态） 。 14
Questions: 1. 蛋白质的空间结构与功能的关系。 2. 用蛋白质结构与功能关系的知识解释蛋白质 构象病发生机制。 3. 以血红蛋白为例，弄清多亚基蛋白质的变构 效应与协同效应。 4. 蛋白质的主要理化性质
6
二、蛋白质的功能依赖特定空间结构 （空间结构与功能的关系）
蛋白质的空间结构是其功能活性的基础。
淀粉样纤维沉淀
慢性进行性致死性神经变性 朊蛋白病（疯牛病）
认真处理血制品 预防医源性传染（医疗器械） 脑、脊髓、眼组织、扁桃体 等是高危险组织
白细胞是致病因子的载体
疯牛病
22
（一）蛋白质构象改变可引起疾病
蛋白质构象改变导致疾病的机理：有些蛋
白质错误折叠后相互聚集，常形成抗蛋白水解
酶的淀粉样纤维沉淀，产生毒性而致病，表现
10
★血红蛋白的别构效应
Hb 能可逆地与 O2 结合， Hb与O2结合后称为氧合Hb。 氧合Hb占总Hb的百分数（称 百分饱和度）随 O2 浓度变化 而改变。
肌红蛋白(myoblobin, Mb) 单链球状蛋白质，含血红素辅基
Hb和Mb的氧解离曲线
11ห้องสมุดไป่ตู้
★血红蛋白的别构效应
Mb为直角双曲线，表明易 与O2结合，在O2分压低时 易结合O2。 Hb为S状曲线，表明在O2 分压低时易释放O2；提示 Hb 四个亚基与4个O2结合 时有不同的平衡常数。第4 个亚基结合最快（ S曲线后 半部呈直线上升） 据S曲线可知，第一个亚基 与O2结合后促进了第二、 三亚基与O2的结合，当前 三个亚基与O2的结合后， 大大促进了第四个亚基与 O2的结合。这种效应称为 正协同效应。
* 蛋白质沉淀 在一定条件下，蛋白疏水侧链暴露在外，肽链融会 相互缠绕继而聚集，因而从溶液中析出。 变性的蛋白质易于沉淀，有时蛋白质发生沉淀，但 并不变性。
* 蛋白质的凝固作用 蛋白质变性后的絮状物加热 可变成比较坚固的凝块，此 凝块不易再溶于强酸和强碱 中。
34
（三）蛋白质空间结构破坏而引起变性
件下都可解离成带负电荷或正电荷的基团。
* 蛋白质的等电点( isoelectric point, pI) 当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成 正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电 荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。
26
一、理化性质
（一）蛋白质具有两性电离性质
COOH + OHCOO+ OHCOO-
Questions:
1. 2. 3. 维系蛋白质各结构层次稳定性的化学作用分别是什么? 一级结构的改变对蛋白质功能有何影响? 试述镰刀型红细胞贫血病发生的生化机制。 2
蛋白质的分子结构小结:
空间结构
一级结构
（氨基酸的排列顺序） （肽键） 二级结构 （肽链主链骨架原子 的局部空间结构） （氢键）
三级结构
15
★血红蛋白的别构效应
O2与Hb结合的 正协同效应理论 O2
血红素（铁）与氧 结合后，铁原子半径变小， 就能进入卟啉环的小孔中， 继而引起肽链位臵的变动。 16
★血红蛋白的别构效应
O2与Hb结合的正协同效应理论
血红素（铁）与氧结合后，铁原子半径变小，就能进入卟啉环的小 孔中，使铁卟啉平面发生改变，继而引起肽链位置的变动。 17
（一条多肽链的所 有原子排布位置） （次级键）
四级结构
（亚基的空间排布） 3 （次级键）
蛋白质的二级结构(secondary structure)
-螺旋 ( -helix )
-片层 ( -pleated sheet )
-转角 ( -turn )
无规卷曲（random coil ）
O2 与 Hb 结 合 的 正 协 同 效 应 理 论
18
19
（三）蛋白质构象改变可引起疾病
蛋白质构象疾病：若蛋白质的折叠发生 错误，尽管其一级结构不变，但蛋白质的构 象发生改变，仍可影响其功能，严重时可导
致疾病发生。
蛋白质“折叠病” 或“构象病”
蛋白质分子的氨基酸序列没有改变，只是其结构或者说构象有 所改变也能引起疾病，这就是所谓“构象病”，或称“折叠 病”。 20
37
Summary:
蛋白质的重要理化性质：
1. 两性电离——名词：蛋白质等电点
2. 胶体性质——稳定蛋白质溶液的因素
3. 空间结构破坏会导致变性——名词：蛋白质的 变性 4. 紫外吸收——蛋白质的定量测定 5. 呈色反应——蛋白质的定性定量测定
38
第五节
蛋白质的分离、纯化与结构分析
Seperation, purification and structure analysis of proteins
变性、沉淀和凝固的关系
变性蛋白质不一定沉淀 沉淀蛋白质不一定变性 沉淀蛋白质也不一定凝固 但凝固的蛋白质一定已变性，且为不可逆变性
35
（四）蛋白质有紫外吸收的特性
由于蛋白质分子中含 有共轭双键的酪氨酸、色
氨酸和苯丙氨酸，因此在
280nm 波长处有特征性吸
收峰。蛋白质的OD280与其
浓度呈正比关系，因此可 作蛋白质定量测定。
不稳定的蛋白质颗粒
溶液中蛋白质的聚沉
29
（三）蛋白质空间结构破坏而引起变性
* 蛋白质的变性(denaturation) 在某些物理和化学因素作用下，其特定的 空间构象被破坏，也即有序的空间结构变成无 序的空间结构，从而导致其理化性质改变和生 物活性的丧失。
加热
30
（三）蛋白质空间结构破坏而引起变性