实验三 卵磷脂的提取和鉴定
实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定
实验过程中，我们遇到了许多困难和挑战，如提取效率不高、鉴定结果不稳定等。通过不断尝试和改 进，我们逐渐找到了解决问题的方法，提高了实验技能和解决问题的能力。
实验不足与改进建议
实验不足
在实验过程中，我们发现提取卵磷脂的 效率不够高，且鉴定结果有时不够准确 。此外，实验过程中也存在一些操作不 规范的问题。
02
常用的提取溶剂有氯仿-甲醇混合 溶剂、石油醚等，通过反复提取 可提高卵磷脂的提取率。
卵磷脂的鉴定原理
通过红外光谱法、核磁共振法、质谱法等现代分析手段对提取的卵磷脂进行结构 分析，确定其化学组成和分子结构。
通过色谱法（如薄层色谱法、高效液相色谱法）对提取的卵磷脂进行纯度鉴定， 确定其中所含杂质和溶剂残留量。
讨论
根据分析结果，与前人研究进行比较， 提出可能的改进措施和未来研究方向。
结论总结
总结
对整个实验过程和结果进行总结，概述实验的主要发现和结论。
展望
提出实验的局限性和不足之处，以及对未来研究的建议和展获与体会
实验收获
通过本次实验，我们成功地从蛋黄中提取了卵磷脂，并对其进行了鉴定。实验过程中，我们掌握了卵 磷脂的提取和鉴定方法，加深了对卵磷脂性质和作用的理解。
展望
未来，卵磷脂的研究将继续深入开展，探索 其在生物体内的生理功能和作用机制。同时， 随着人们对健康饮食的关注度不断提高，卵 磷脂在食品、保健品等领域的应用也将得到 更广泛的发展。我们相信，随着研究的不断 深入和应用领域的拓展，卵磷脂将会为人类 健康事业做出更大的贡献。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
学习卵磷脂的鉴定技术
薄层色谱法
利用薄层色谱法分离和鉴定卵磷脂中 的主要成分，了解其组成和比例。
卵磷脂的提取和纯化-学长
卵磷脂的提取和纯化浙江工业大学药学院罗杨春宋建林杰摘要：本实验探索以油菜花油脚为原料，制备高纯度卵磷脂的最佳条件，选择树脂类型、反应温度、反应时间、萃取剂等因素进行单因素实验。
实验结果表明：关键词：卵磷脂提取纯化离子交换树脂正文：1. 前言卵磷脂是一类具有重要生理活性和表面活性的生命物质，在生物细胞膜的功能和代谢方面具有十分重要的调节作用。
药用卵磷脂是磷脂类产品中最具高附加值的产品形态。
它不仅要求纯度高，而且要求乳化能力强，并达到静脉注射用的相关要求，其提取工艺和技术比较复杂、难度较大。
其中分离脑磷脂与卵磷脂方面为提高卵磷脂产品纯度较为关键的步骤。
国内外学者利用溶剂萃取法、超临界流体分离法、高效液相色谱法和柱层析法等方法分离纯化磷脂酰胆碱的分离效果一般不理想并且适应面窄;柱层析法是目前主要的研究方法,多数采用Al2O3为分离介质,但分离过程中PC和PE分离的选择性仍不理想,分离后PC中溶血磷脂(LPC)的分离不彻底,使该方法在制备注射级卵磷脂时受到极大限制。
利用大孔型离子交换树脂对PC,PE,LPC吸附能力的不同，可进行分离。
离子交换树脂法具有吸附容量大、选择性好、易于解吸、机械强度高、再生处理简单、吸附速度快等特点，从而达到高效的分离效果。
2.材料和方法2.1 药品与试剂自备粗卵磷脂（PC含量约为47%）丙酮（分析级）、无水乙醇（分析级）、超纯水 ZnCl2、CuSO4·5H2O、CaCl2、MgCl22.2 实验步骤2.2.1离子交换：用0.1mol/L NaOH 10mL碱洗、0.1mol/L Hcl 10mL酸洗各种树脂（D113、116、001x7、001x10、201x4）最后再水洗。
取一定量的CuSO4·5H2O、CaCl2、MgCl2、Zn(Ac)2配成浓度为0.05mol/L的溶液。
活化后的树脂各取1g至50ml具塞锥形瓶中，分别加入0.03mol/L的各溶液，恒温水浴震荡24 小时，水浴温度为36℃。
鸡蛋黄中磷脂的提取及分析
三、仪器和药品 仪器：研钵 布氏漏斗 蒸发皿 棉花 药品：熟鸡蛋黄 20％NaOH 溶液 10％Pb(AC)2
丙酮 碘化铋钾溶液
1％CuSO4 溶液
硫酸 95％乙醇 氯仿
四、实验步骤 1．卵磷脂的提取 （1）取熟鸡蛋蛋黄一只，于研钵中研细，先加入 10ml 95％乙醇研磨，再加入 10ml 95％
乙醇充分研磨，减压过滤，布氏漏斗上的滤渣经充分挤压滤干后，移入研钵中，再加 10ml 95％ 乙醇研磨，减压过滤，滤干后，合并二次滤液，如浑浊可再过滤一次，将澄清滤液移入蒸发 皿内。
六．思考题： 1．蛋黄中分离卵磷脂根据什么原理？ 2．卵磷脂可以皂化，从结构分析应作何解释？ 3．卵磷脂可作乳化剂，这是为什么？ 4．为什么实验中要进行减压过滤？操作时应注意哪些地方？
脂肪酸的检查：取棉花上沉淀(滤饼)少许，加 1 滴 20％氢氧化钠溶液与 5ml 水，用玻棒搅 拌使其溶解，在玻璃漏斗中用棉花过滤得澄清液，以硝酸酸化后加入 10％醋酸铅 2 滴，观察 溶液的变化 甘油的检查：取试管一支，加入 1％硫酸铜溶液 1ml(二十滴)，2 滴 20％氢氧化钠溶液，振 摇，有氢氧化铜沉淀生成，再加入 1ml 水解液振摇，观察所得结果。 胆碱的检查：取水解液 1ml，滴加硫酸使其酸化（以 pH 试纸试之）加入 1 滴碘化铋钾溶液， 有砖红色沉淀生成。
（2）将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇至干，得到黄色油状物。 （3）冷却后，加入 5ml 氯仿，搅拌使油状物完全溶解。 （4）在搅拌下慢慢加入 15ml 丙酮，即有卵磷脂析出，搅动使其尽量析出（溶液倒入回收瓶 内）。 2．卵磷脂的水解及其组成分析 （1）水解：取一支干燥大试管，加入提取的一半量的卵磷脂，并加入 5ml 20％氢氧化钠溶 液，放入沸水浴中加热 10 分钟，并用玻棒加以搅拌，使卵磷脂水解，冷却后，在玻璃漏斗中 用棉花过滤。滤液供下面检查用。 （2）检查
卵磷脂的提取与鉴定一试验目的了解用乙醇作为溶剂提取卵磷脂的
卵磷脂的提取与鉴定一试验目的了解用乙醇作为溶剂提取卵磷脂的卵磷脂的提取与鉴定一实验目的了解用乙醇作为溶剂提取卵磷脂的原理和方法。
二实验原理卵磷脂在脑神经细胞中含量很高，蛋黄中含有特别高。
根据卵磷脂溶于乙醇、乙醚等有机溶剂进行提取。
新提取的卵磷脂为白色蜡状物，与空气接触后被氧化为黄褐色。
利用卵磷脂的胆碱基在碱性溶液中可以分解为三甲胺(特殊的鱼腥臭味)进行鉴别。
三实验器材与试剂鸡蛋黄、乙醇(95,)、10,NaOH、烧杯、量筒等。
四实验步骤1 提取卵磷脂取2g蛋黄于15mL(95,)乙醇，过滤、蒸气浴蒸干，残留物为卵磷脂。
2 鉴别取少量的卵磷脂于试管中，加10,NaOH溶液2mL，水浴加热是否产生鱼腥臭味。
五注意事项滤液要清。
六作业完成实验报告，写出实验小结。
1粗脂肪的提取和定量测定——索氏提取法一实验目的1 学习和掌握用索氏提取器提取脂肪的原理和方法2 学习和掌握用重量分析法对粗脂肪进行定量测定。
二实验原理利用脂类物质溶于有机溶剂的特性，在索氏提取器中用有机溶剂对样品中的的脂类物质进行提取。
因提取的物质是脂类物质的混合物，故称其为粗脂肪。
三实验器材1索氏提取器 2 分析天平 3 烧杯 4 恒温水浴锅 5 脱脂棉和脱脂滤纸 6 镊子7 干燥器四实验试剂与材料1 样品2 石油醚五实验步骤1称量索氏提取瓶将索氏提取瓶洗净烘干至恒重，记录重量。
2提取样品粗脂肪将石油醚加到提取瓶内约为瓶容积1/2—2/3。
将样品包放入提取管内。
连接索氏提取器各个部分。
用70度,80度恒温水浴加热提取瓶，抽提进行2―3小时，直至提取管内的石油醚用滤纸检验无油迹为止，表示提取完全。
3 计算样品中粗脂肪的含量提取完毕，取出滤纸包，再回馏一次，倒出石油醚。
取下提取瓶，洗净瓶的外壁，烘干至恒重。
记录重量。
2按照下式计算样品中粗脂肪的百分含量。
粗脂肪(,),(提取后提取瓶的重量,提取前提取瓶的重量)/样品重量*100% 六作业计算样品中粗脂肪的含量，完成实验报告。
鸡蛋黄中的卵磷脂提取和分析
3 产品回收率
回收纯化产物，并计算产物回收率。
表1 蛋黄脂质提取率随乙醇用量的变化：
数量/g 生蛋黄 乙醇 n-己烷 提取脂 质 1000 1000 1500 300 数量/g 数量/g 数量/g 1000 750 1500 298 1000 500 1500 265 1000 250 1500 1.9
实验分析
1 冷冻与加盐
直接冷冻蛋黄可以使蛋白质变态，有利于解除 乳化，可提高提取卵磷脂的效率，但适宜地少量 (0.01% 0.3%) 加入一些食盐(0.01%～0.3%)可以减少蛋白质的 变性。
2 溶剂的用量
从食品和医用要求考虑溶液采用乙醇和n己烷，但乙醇的量以占蛋黄量的50%～ 100%为宜，n-己烷的量以占蛋黄量的 100%～200%为宜，且只出一种溶剂效果 不好，蛋黄脂质提取率随乙醇量的增加而 提高，见表1数据。
试实验仪器和试剂
1 . 仪器 : 冰箱、离心机、超滤膜。
2 . 试剂 : 蛋黄、乙醇、n-己烷、NaCl。
实验方法
• 1. 在1000g冷冻的蛋黄中加入1500ml n-己烷和 500mL乙醇的混合溶剂，用搅拌器搅拌5min后，离 心分离(3000r/min)，得到1958mL溶剂层。 •2. •2.在该溶剂层中加入200mL 3%食盐水，混合后 200mL 3% 静放，然后倾析，得到1630mL己烷层。己烷中 脂质含量为24.8%， 3.然后用日本产的超滤膜Mps-3400(划分子量为 30000～40000)用3000mL己烷对该脂质层进行定容 过滤，得到高纯度达的蛋黄卵磷脂。
实验注意事项
• 1 该法单纯使用非极性溶剂难以分离提取 • 2 使用前先对蛋黄冷冻处理。 • 3 乙醇和n-己烷以适当比例使用。
鸡蛋中卵磷脂提取鉴定
卵磷脂在药物研发中的应用
卵磷脂在药物生产中的应用
卵磷脂在药物质量控制中的应 用
在化妆品行业中的应用前景
卵磷脂在化妆品中的功效：保湿、抗氧化、抗衰老等
卵磷脂在化妆品中的安全性：无毒、无刺激、无过敏反应
卵磷脂在化妆品中的应用范围：护肤品、彩妆、洗发水、沐浴露等 卵磷脂在化妆品中的市场前景：随着消费者对健康和环保的关注度提高， 卵磷脂在化妆品中的应用前景广阔
,
汇报人：
目录
鸡蛋卵磷脂提取原理
卵磷脂的溶解性：卵磷脂在油脂中 的溶解度较高，因此可以利用这一 性质将其从鸡蛋中提取出来。
卵磷脂的纯化：提取出的卵磷脂往 往含有一定的杂质，需要进行纯化 处理，常用的纯化方法包括重结晶、 柱层析等。
添加标题
添加标题
添加标题
添加标题
卵磷脂的提取方法：通常采用有机 溶剂萃取法，将鸡蛋中的油脂溶解 后，再利用不同溶剂对卵磷脂和油 脂的选择性不同，将卵磷脂从油脂 中分离出来。
观察溶解性：卵磷脂难溶于水，易 溶于有机溶剂
化学性质鉴定
溶解性：卵磷脂溶于氯仿等有 机溶剂
皂化值：卵磷脂具有皂化特性
酸碱度：卵磷脂在酸性条件下 稳定，在碱性条件下易水解
红外光谱：卵磷脂具有特征红 外光谱峰
仪器鉴定
气相色谱-质谱联用法：鉴定 卵磷脂中脂肪酸组成的有效 方法
红外光谱法：鉴定卵磷脂中 官能团的有效方法
提取步骤
萃取：使用有机溶剂提取卵 磷脂
分离：通过离心、过滤等方 法分离出卵磷脂
预处理：去除蛋壳，收集蛋 黄
鉴定：通过色谱、质谱等方 法鉴定卵磷脂的出卵磷脂
鉴定步骤
卵磷脂鉴定：通过光谱、色谱等技 术，对卵磷脂进行鉴定
添加标题
卵磷脂的提取鉴定
卵磷脂的提取及鉴定作者：未知来源：郑州轻工业学院时间：2006-9-23一、实验目的1.加深了解磷脂类物质的结构和性质。
2.掌握卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。
二、实验原理磷脂是生物体组织细胞的重要成分，主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中，尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。
卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性质可将其与中性脂肪分离开；此外，卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶，利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。
新提取的卵磷脂为白色，当与空气接触后，其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。
卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。
甘油与硫酸氢钾共热，可生成具有特殊臭味的丙烯醛；磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用，生成黄色的磷钼酸沉淀；胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。
这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。
三、仪器和试剂仪器小烧杯、试管。
试剂1. 鸡蛋黄2. 红色石蕊试纸3. 95%乙醇4. 10%氢氧化钠溶液5. 钼酸铵试剂将6g 钼酸铵溶于15mL 蒸馏水中，加入5mL 浓氨水，另外将24mL 浓硝酸溶于46mL的蒸馏水中，两者混合静置一天后再用。
6. 丙酮7. 乙醚8. 3%溴的四氯化碳溶液9. 硫酸氢钾四、操作步骤(一)卵磷脂的提取称取约10g 蛋黄于小烧杯中，加入温热的95%乙醇30mL，边加边搅拌均匀，冷却后过滤。
如滤液仍然混浊，可重新过滤直至完全透明。
将滤液置于蒸发皿内，水浴锅中蒸干，所得干物即为卵磷脂。
(二)卵磷脂的溶解性取干燥试管，加入少许卵磷脂，再加入5mL 乙醚，用玻棒搅动使卵磷脂溶解，逐滴加入丙酮3～5mL，观察实验现象。
(三)卵磷脂的鉴定1.三甲胺的检验取干燥试管一支，加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL 氢氧化钠溶液，放入水浴中加热15min，在管口放一片红色石蕊试纸，观察颜色有无变化，并嗅其气味。
将加热过的溶液过滤，滤液供下面检验。
实验三卵磷脂的提取和鉴定
实验器材
鸡蛋黄，95%乙醇，乙醚，丙酮，10% NaOH， 鉬酸铵试剂； 50 mL、500 mL烧杯，电炉，蒸发皿，药勺， 玻璃棒，玻璃漏斗，试管，吸管，石蕊试纸， 试管夹，洗瓶
实验操作步骤与现象观察记录 (一)卵磷脂的提取 取约10g （两吸管）蛋黄于50 ml小烧杯中
搅拌加入95%乙醇30mL
卵磷脂的化学结构
1 R1-COO-CH2 2* R2-COO-C—H O 3 CH2 —O—P—O—R OH
R1 常为饱和脂肪 酸如C16，C18 R2 常为不饱和脂 肪酸如花生四烯 酸
+ R= —CH2CH2-N(CH3)3 OH 卵磷脂 卵磷脂彻底水解的产物是什么？
极性端 疏油端，亲水端
CO2-CH2 CO2-CH 非极性端 疏水端，亲油端
实验三 卵磷脂的提取和鉴定
实验目的 了解磷脂类物质的结构和性质
学习卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。
实验原理
磷脂是生物体组织细胞的重要成分，在脑、 神经组织、肾上腺和红细胞中含量较高，在 蛋黄中含量特别丰富(10%左右)。卵磷脂能溶 于乙醇而脑磷脂、蛋白质及糖类等不溶，利 用此性质可将卵磷脂和其它成分分离。卵磷 脂溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性质可将 其与醇溶性的中性脂肪分离开，达到纯化卵 磷脂的目的。
O + CH2O-P-O-CH - 2CH2-N(CH3)3 O
H-OH
磷脂分子中同时具有疏水基和亲水基。正是由于 这种特点，使得磷脂类化合物在细胞中起着重要 的生理作用。
卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、 胆碱和磷酸盐，可分别进行化学鉴定。胆碱在 碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气 味的三甲胺；磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作 用，生成黄色的磷钼酸沉淀。通过对分解产物 的检验可以对提取的卵磷脂粗品于蒸发皿内，水浴锅中 蒸干，所得干物即为卵磷脂粗品。
鸡蛋中卵磷脂的提取鉴定
整理课件
12
8、消除青春痘、雀斑并滋润皮肤
• 正常人体内含有许多毒素，特别是在肠道内，当这些毒素含量 过高时，便会随着血液循环沉积在皮肤上，从而形成色斑或青 春痘。卵磷脂正好是一种天然的解毒剂，它能分解体内过多的 毒素，并经肝脏和肾脏的处理排出体外，当体内的毒素降低到 一定的浓度时，脸上的斑点和青春痘就会慢慢消失。卵磷脂还 具有一定的亲水性，并有增加血红素的功能，如果每天服用一 定量的卵磷脂，就能为皮肤提供充分的水分和氧气，使皮肤变 得光滑柔润。
整理课件
14
10、良好的心理调和剂
• 社会竞争日趋激烈，人们长期处在紧张的环境和种种压力下， 常患有焦虑、急躁、易怒、失眠、耳鸣等症，即植物神经紊 乱，通常被称为神经衰弱。经常补充卵磷脂，可使大脑神经 及时得到营养补充，保持健康的工作状态，利于消除疲劳， 激化脑细胞，改善因神经紧张而引起的急躁、易怒、失眠等 症。
整理课件
13
9、预防老年痴呆症的发生
• 人随着年龄增长，记忆力会减退，其原因与乙酰胆碱含量 不足有一定关系。脑部的神经传导物质（乙酰胆碱）减少 是引起老年痴呆的主要原因，乙酰胆碱是神经系统信息传 递时必需的化合物。而且“胆碱”是卵磷脂的基本成分， 卵磷脂的充分供应将保证机体内有足够的胆碱与人体内的 乙酰结合为“乙酰胆碱”，从而成为大脑提供充分的信息 传导物质，大脑能直接从血液中摄取卵磷脂及胆碱，并很 快转化为乙酰胆碱。长期补充卵磷脂可以减缓记忆力衰退 的进程，预防或推迟老年痴呆的发生。
整理课件
17
以蛋黄为原料的制备工艺
(一)卵磷脂粗品的提取 取约10 g （两吸管）蛋黄于50 mL小烧杯中
搅拌加入95%乙醇30 mL
滤纸过滤
将滤液置于蒸发皿内，水浴 锅中蒸干，所得干物即为卵 磷脂粗品。
卵磷脂的提取与鉴定
二、实验原理 卵磷脂是甘油磷脂的一种，由磷酸、脂肪酸、甘油和胆 碱组成。卵磷脂广泛存在于动植物中，在植物种子和动物的 脑、神经组织、肝脏、肾上腺以及红细胞中含量最多；其中 蛋黄中含量最丰富，高达8～10%，因而得名。 卵磷脂可溶于乙醚、乙醇等溶剂，因而可以利用这些溶 剂进行提取。本实验以乙醚作为溶剂提取生蛋黄中的卵磷脂。 通常粗提取液中含有中性脂肪和卵磷脂，两者浓缩后通过离 心进行分离，下层为卵磷脂。新提取的卵磷脂为白色蜡准状 物，遇空气可氧化成为黄褐色，这是由于其中不饱和脂肪酸 被氧化所致。卵磷脂的胆碱基在碱性条件下可以分解为三甲 胺，三甲胺有特殊的鱼腥味，可以此鉴别之。 卵磷脂在食品工业中广泛应用作乳化剂，抗氧化剂，营 养添加剂。
三、实验材料、试剂和仪器 材料：鸡蛋、花生油。 试剂：乙醚、10%NaOH。 仪器：磁力搅拌器，离心机。
四、实验步骤 1、卵磷脂的提取 取15g生鸡蛋黄于250mL三角锥瓶中，加入40mL乙醚， 室温下磁力搅拌提取15min。然后静置30min，上层液用带 棉花塞的漏斗过滤，往残渣中再加入15mL乙醚，搅拌提 取5min。第二次提取液通过过滤后，与第一次提取液合并， 于60℃热水浴中蒸去乙醚，将残留物质倒入烧杯中，再于 真空干燥器中进行减压干燥30min，以除尽乙醚，约可得 5g粗提取物。粗提取物进行离心10min后，下层为卵磷脂， 约得2.5-2.8g。卵磷脂可以通过冷冻干燥得到无水的产物。 2、卵磷脂的鉴定 取以上提取物约0.1g，于试管内加入10%NaOH溶液 2mL，水浴加热数分钟，嗅之是否有鱼腥味，以确定是否 卵磷脂。
Байду номын сангаас
五.结果记录与分析：
实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定
氯仿
丙酮
油状物
氯仿溶液
卵磷脂
脂肪
Байду номын сангаас
脂肪 卵磷脂
【实验步骤】
1．卵磷脂的提取
〔1〕取1个熟的鸡蛋黄，置于研钵中研细， 加 入15mL 95％乙醇溶液，研磨，搅拌 均匀。减压过滤，收集滤液。将漏斗的 残渣移入研钵内，加15mL 95％乙醇溶液， 研磨，过滤(滤液应完全透明)，将两次 滤液合并于蒸发皿内。
〔2〕脂肪酸的检查
取棉花上沉淀少许，加5mL水，搅 拌，有无泡沫生成？过滤，得滤液，以 浓硝酸酸化后参加数滴10％醋酸铅溶液， 观察有何现象?
〔3〕甘油的检查
取小试管一支，参加1滴5％硫酸铜溶液， 2滴10％氢氧化钠溶液，振摇，有氢氧化铜沉 淀生成。参加水解液，沉淀溶解后，得深蓝色 甘油铜溶液。
〔4〕胆碱的检查
取1mL滤液，滴加浓硫酸中和(以蓝色石蕊 试纸检查)，加克劳特试剂1滴，有砖红色沉淀 生成。
〔5〕磷酸的检查
取一支干净试管，参加10滴滤液和5 滴95%乙醇溶液，用硝酸酸化，加1mL 钼酸铵试剂，观察有何现象产生？最后 直接用火加热5min～10min，观察有无 黄色磷钼酸铵沉淀生成？
实验五 蛋黄中卵磷脂的提 取及鉴定
【实验目的】
1．掌握从动物中提取有效成分的一般原 理和方法。
2．熟悉从蛋黄中提取卵磷脂的操作。 3．了解卵磷脂水解后的产物，稳固对卵
磷脂组成构造的认识。
【实验原理】
残渣（蛋白质、脑磷
脂） 乙醇提取
蛋黄 过滤
蛋白质 脂肪 卵磷脂 脑磷脂
蒸去乙醇
乙醇溶液
油状物
脂肪
卵磷脂
本卷须知
乙醇、氯仿、丙酮用量一定要控制好
卵黄卵磷脂提取纯化及纯度鉴定实验设计
评价。实验中综合了萃取技术 、 分离技术、 柱层析技术 、 薄层层析技术、 紫外分光光度法等 内 容 。 目的在 于通过本 实验使 学生 掌握生 物活性 分子 分离 提 取 的策 略及 一般 方 法 ， 对 使 用 的 并 技 术路 线或提 取工艺 进行合 理性 的评 价 。
１ 实验原理
２５ ／ ｉ。根 据 色谱工 作站 的 曲线 和 定 性 检 测 结果 ， 定 目标试 管 ， 集 洗 脱 液 ， 缩 、 ．ｍＬ ｍｎ 确 收 浓 干 燥 ， 到纯化 卵磷 脂 引。 得
２ ３ 薄 层层 析法 鉴定 ．
将 硅胶 Ｇ与 ０２ ％ 的羧 甲基 纤 维 素 钠水 溶 液按 １３比例 调 成 糊 状 ， ．５ ： 然后 涂 布 于 ９ｍ × ｃ ２ｅ 的玻 璃板 上 ， 度 ０ ２ｒ， ０ｍ 厚 ．ｅ 自然 阴干 。使用 前置 于 １０Ｃ烘箱 中活化 １ ｈ ａ ２￣ ～２ 。用 微 量取样 器 取 １ｕ 品液 ， ０ Ｌ样 点样 ， 自然 干燥 后 置 于 层 析 缸 中 ， 开 剂 为氯 仿 ． 待 展 甲醇 ． （０ ２ ：） 。 水 ８ ：５ ３ ］ 待展 开剂 距顶部 ２ｍ 时 ， 析完成 ， 出硅胶 板 ， ｃ 层 取 吹干 ， 用碘水 喷洒 显色 。结果 见 图 １ 。图 １ 表 明卵磷脂 粗 品经 硅胶 Ｇ柱层 析后 得 以纯化 ， 且纯 化效果 明显 。
按 一般方 法 ， 如对 ４个 因 素 ３个水 平 的各 种组 合都 要考虑 ， 需做 ３ ８ 次试 验 ， 共 ＝ １ 而用 正 交表安 排 只需做 ９次试 验 。实验安 排详 见表 ２ 。
表 ２ 根据 正 交表 设计 的 实 验 安 排表
序 号 提 取 温 度／ ℃ 提 取 时 间／ ｎ ｍｉ 醇醚 比 料 液 比 试 验 结果 （ 磷 脂 重／ ） 卵 ｇ
实验二、卵磷脂提取、鉴定及乳化特性试验
实验二、卵磷脂提取、鉴定及乳化特性试验一、目的要求 学习提取卵磷脂的方法，了解卵磷脂的乳化特性性质。
二、实验原理磷脂是分子中含磷酸的复合脂，分为磷酸甘油脂和鞘氨醇磷脂类，其醇类物质分别为甘 油和鞘氨醇。
磷脂酰胆碱属磷酸甘油脂，俗名为卵磷脂，在生物体内以及食品工业应用中起着重要的作用。
卵磷脂是一种在动、植物中分布及广的磷脂，如植物的种子、动物的卵、脑及神经组织 均含有之，其中大豆中含量约为2.0%、卵黄中含量高达8%—10%、。
卵磷脂在细胞中以游离态或与蛋白质结合成不稳定的化合物存在，易溶于乙醇、乙醚、氯仿等有机溶剂，不溶于丙酮。
本实验采用乙醇提取蛋黄中的卵磷脂。
纯卵磷脂为白色的蜡状物，与空气接触后，因结构含不饱和脂肪酸被氧化后而呈黄色至黄棕色，粗制品中色素的存在可使之呈淡黄色。
卵磷脂中的胆碱基在碱性条件下可分解成三甲胺，三甲胺有特异的鱼腥味，利用此性质可鉴别卵磷脂。
在生物体中的作用是保持细胞膜的通透性，控制动物体内脂肝代谢，防止脂肪肝的形成。
在食品工业中广泛充当乳化剂、抗氧化剂和营养添加剂。
使互不相溶的两种液体中的一种呈微滴状分散在另一种液体中的作用称为乳化剂。
这两种不同的液体称为“相”，在体系中量大的称为连续相，量小的为分散相，能使互不相溶的两相中的一相分散在另一相中的物质称为乳化剂。
由卵磷脂的分子结构可知：CH 2O C OR 1CH O C OR 2CH 2O PO OH O CH 2CH 2N OH CH 33卵磷脂分子中的R 1脂肪酸为硬脂酸或软脂酸，R 2脂肪酸为油酸、亚油酸、亚麻酸及花生四烯酸等不饱和脂肪酸。
脂肪酸残基端具有憎水性，其胆碱残基端具亲水性，因此是一种天然的乳化剂。
在乳化过程中，当少量的油与乳化剂一起在大量水中用高速搅拌混合机混合，油滴将以微滴状分散在水相中，在细滴的表面上乳化剂以亲油的非极性端相对，而以其亲水的极性端伸向水中。
由于极性相斥，体系中微滴之间的斥力比相互间的引力要大，因而形成稳定的乳浊液。
实验三卵磷脂的提取和鉴定
目 录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 结论与展望
01 实验目的
掌握卵磷脂的提取和鉴定方法
卵磷脂的提取
利用有机溶剂从动植物组织中提 取卵磷脂，可以采用低温、高压 、超声波等辅助手段提高提取效 率。
卵磷脂的鉴定
通过观察卵磷脂的外观、溶解性 、颜色反应等特征，结合薄层色 谱法、气相色谱法等方法对卵磷 脂进行定性鉴定。
了解卵磷脂的生理功能和用途
生理功能
卵磷脂是细胞膜的重要成分，具有保 护细胞、维持细胞正常功能的作用； 同时，卵磷脂还具有降低血脂、预防 心血管疾病等功效。
用途
卵磷脂在食品、药品、化妆品等领域 广泛应用，可作为添加剂、药物成分 或保湿剂等。
探究不同提取条件对卵磷脂提取率的影响
提取条件
研究不同有机溶剂、温度、时间、料 液比等因素对卵磷脂提取率的影响， 通过单因素和正交试验等方法优化提 取工艺。
结果分析
通过对比不同提取条件下卵磷脂的提 取率，分析提取条件对卵磷脂提取效 果的影响，为实际生产提供理论依据。
02 实验原理
卵磷脂的化学组成和性质
卵磷脂是磷脂类的一种，由甘 油、脂肪酸、磷酸和胆碱组成。
卵磷脂具有亲水性和亲油性， 是细胞膜的重要成分，对维持 细胞结构和功能具有重要作用。
卵磷脂在自然界中广泛存在于 动植物组织中，尤其是脑、肝、 卵黄等组织中含量较高。
实验结果的分析与讨论
总结词
实际应用取方法和鉴定手段具有实 际应用价值，能够为卵磷脂的生产和开发提 供技术支持。同时，本实验结果可为相关领 域的研究提供参考和借鉴。
05 结论与展望
实验结论
卵磷脂提取成功
卵磷脂的提取与鉴定
五、注意事项 1、过滤时不要用水打湿滤纸。 2、所用容器（漏斗、试管）要干燥，避免
脂类与水接触生成乳浊液，而使滤液不清。
应用
去两只试管各加入5ml水。一只试管加入少 量卵磷脂和5滴花生油，另一只试管加入5 滴花生油。震荡观察2支试管。
Байду номын сангаас
实验二 卵磷脂的提取和鉴定
一、实验目的
通过本实验学习卵磷脂的提取与鉴定方法。
二、实验原理
1、存在 卵磷脂在脑、神经组织、肝脏、肾上腺和 红细胞中含量较高，蛋黄中含量特别高。
2、可溶性 卵磷脂易溶于乙醇、乙醚等脂溶性溶剂， 可利用此类溶剂进行提取。
3、颜色 新提取的卵磷脂为白色蜡状物，与空气接 触后因所含不饱和脂肪酸被氧化而成褐色。
4、鉴别依据 卵磷脂中的胆碱基在碱性溶液中可分 解成三甲胺，三甲胺优特异的鱼腥臭味，可依此 鉴别。
三、试剂和器材
1、试剂 无水乙醇（CP）；10%氢氧化钠溶液。 2、材料 鸡蛋 3、器材 试管（1.5㎝×10㎝）1支； 2ml移液管1支；酒精
灯；蒸发皿；烧杯；天平等。
四、操作步骤
（一）提取
1、将鸡蛋煮熟，去壳，去除蛋白，留下蛋 黄。
2、用小烧杯称取蛋黄2克，加入热的95% 的乙醇15ml，边加边搅拌，冷却，过滤 （若滤液不清，需重滤，直至透明为止）， 将滤液置于蒸发皿内，蒸汽浴上蒸干，残 留物即为卵磷脂。
四、操作步骤 2、鉴定 取卵磷脂少许，置于试管内。加氢氧
卵磷脂的提纯的实验报告
一、实验目的1. 掌握卵磷脂的提取方法；2. 学习卵磷脂的提纯技术；3. 了解卵磷脂在生物体内的作用和应用。
二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质，广泛存在于动植物细胞膜、脑、神经组织等部位。
其化学结构为甘油、胆碱、磷酸和脂肪酸组成的磷脂类物质。
卵磷脂具有多种生物活性，如延缓衰老、促进神经传导、提高大脑活动、增强记忆力、促进脂肪代谢、防止脂肪肝、降低血清胆固醇等。
本实验采用乙醇提取卵磷脂，利用乙醚进行提纯。
实验过程中，通过离心分离、沉淀、洗涤等步骤，使卵磷脂与其他杂质分离，提高卵磷脂的纯度。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蛋黄、95%乙醇、乙醚、蒸馏水、氯化钠、无水硫酸钠、石油醚、硫酸铜、硫酸钠、盐酸等。
2. 实验仪器：离心机、恒温水浴锅、磁力搅拌器、锥形瓶、漏斗、烧杯、试管、滴定管、移液管等。
四、实验步骤1. 提取卵磷脂（1）取一定量的蛋黄，加入适量的95%乙醇，充分搅拌，使蛋黄溶解；（2）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的氯化钠，充分搅拌，使蛋白质沉淀；（3）将溶液静置一段时间，待蛋白质沉淀后，取上层清液；（4）将上层清液转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（5）将洗涤后的沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（6）将溶液过滤，收集滤液。
2. 卵磷脂的提纯（1）将收集到的滤液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（2）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（3）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的石油醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（4）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（5）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（6）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（7）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（8）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（9）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（10）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（11）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（12）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（13）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（14）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（15）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（16）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（17）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（18）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（19）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（20）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（21）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（22）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（23）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（24）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（25）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（26）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（27）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（28）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（29）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（30）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（31）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（32）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（33）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（34）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（35）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（36）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（37）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（38）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（39）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（40）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（41）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（42）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（43）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（44）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（45）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（46）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（47）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（48）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（49）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（50）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（51）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（52）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（53）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（54）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（55）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（56）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（57）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（58）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（59）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（60）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（61）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（62）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（63）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（64）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（65）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（66）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（67）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（68）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（69）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（70）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（71）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（72）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（73）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（74）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（75）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（76）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（77）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（78）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（79）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（80）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（81）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（82）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（83）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（84）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（85）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（86）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（87）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（88）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（89）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（90）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（91）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（92）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（93）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（94）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（95）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（96）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（97）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（98）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（99）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（100）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（101）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（102）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（103）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（104）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（105）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（106）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（107）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（108）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（109）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（110）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（111）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（112）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（113）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（114）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（115）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（116）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（117）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（118）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（119）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（120）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（121）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（122）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（123）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（124）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（125）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（126）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（127）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（128）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（129）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（130）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（131）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（132）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（133）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（134）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（135）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（136）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（137）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（138）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（139）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（140）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（141）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（142）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（143）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（144）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（145）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（146）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（147）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（148）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（149）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（150）。
蛋黄中卵磷脂的提取与 TLC 检测 实验报告
实验申请实验项目：蛋黄中卵磷脂的提取与 TLC 检测实验原料：鲜鸡蛋、 纯化卵磷脂实验试剂： 200ml 丙酮、 150ml 乙醇 、50ml 石油醚、 氯仿、 乙酸乙酯、 甲醇，均为分析纯试剂.实验仪器： 旋转蒸发仪、 真空泵、 布氏漏斗、 抽滤瓶、 吹风机、 层析缸、 玻璃板、电子天平。
辅助器材：毛细管（两支）、玻璃棒、滤纸、100ml 量筒（2个）、烧杯、纱布、镊子、 胶头滴管圆底烧瓶等。
实验目的：1. 掌握从动物中提取有效成分的一般原理和方法。
2. 学习从蛋黄中提取卵磷脂的实验方法。
3. 巩固抽滤等基本操作。
4. 了解薄层层析色谱法的原理及操作。
实验原理：卵磷脂存在于动物的各种组织细胞中，蛋黄中含量较高，约10％。
可根据它溶于乙醇、氯仿而不溶于丙酮的性质，从蛋黄中分离得到。
吸附薄层主要是利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同，及展开剂对它们的解吸附能力的不同，使各成分达到分离。
在硅胶薄层板上，样品中的两成分是两种结构近似的染料，在展开剂四氯化碳的作用下。
在展开剂和薄层板之间不断地产生吸附、解吸，再吸附，再解吸，由于极性不同从而分离，展开结束以后，会在薄层板上形成斑点，混合物中的成分得以分离。
参考文献： 刘宝全，所给实验资料.tpml-1实验操作实验操作步骤实验一卵磷脂的制备与提取1.取四个煮熟的鸡蛋，分别将其刨壳，把四个鸡蛋的总的蛋壳，蛋白和蛋黄分别称重并记录数据。
2.将所得蛋黄全部放入烧杯中，用筷子捣碎，取100ml丙酮倒入其中，搅拌30min成糊状后用6层厚纱布过滤，收集滤渣。
3.将滤渣再次放入烧杯，取100ml丙酮倒入杯中，重复上步操作，收集滤渣。
4.制备乙醇-石油醚混合溶剂。
用量筒分别量取50ml石油醚和150ml乙醇，放入烧杯中混合均匀。
5.取100ml混合液放入盛有滤渣的烧杯中，搅拌30min后用布氏漏斗抽滤，收集滤液。
6.将抽滤后的滤渣重新放入烧瓶中，再取100ml混合液浸泡搅拌30min，然后抽滤，将所有滤液收集，倒入圆底烧瓶中进行旋转蒸发，旋转蒸发仪温度设为40摄氏度。
蛋黄中卵磷脂的提取
卵磷脂是磷脂的一种，又名磷脂酰胆碱，简称PC。磷脂 酰胆碱由甘油基，脂肪酸基和胆碱构成。
卵磷脂的功效
肝脏的保护神 卵磷脂不但可预防脂肪 肝，还能促进肝细胞再 生，防止肝硬化并有助 于肝功能的恢复。
卵磷脂被英美科学家喻之为“健脑的黄金，养心的极 品”，被日本营养学家称为“本世纪最伟大的保健品”。 确切的卵磷脂是磷脂酰胆碱Pc，但商业“卵磷脂”是一 类含磷酸根脂质的总和，包括磷脂酸PA、磷脂酰胆胺(脑 磷脂)PE、磷脂酰胆碱(卵磷脂)PC、磷脂酰丝胺酸PS 、磷 脂酰甘油PG和磷脂酰肌醇PI 6种。
2001,17(2):144-149 [6]常皓,王二雷,宫新统,刘静波. 蛋黄卵磷脂研究概况[J]. 食品工业科技,2010,05:414-416+420. [7]吴晓英,林影,叶倩君,李晶晶. 蛋黄卵磷脂的制备研究[J]. 食品科学,2004,05:115-119. [8]迟玉杰,林淑英. 卵黄卵磷脂提取与应用的研究进展[J]. 食品与发酵工业,2002,05:50-53. [9]李涛,王天志. 卵磷脂的研究进展[J]. 中药材,2002,10:752-756. [10]马双雁. 大豆卵磷脂的制备方法及其应用前景[J]. 现代农业科技,2009,01:225-227. [11]黄素芬. 鸭蛋黄卵磷脂提取技术研究[D].浙江大学,2004. [12]常皓. 蛋黄卵磷脂的提取、分析及氧化稳定性研究[D].吉林大学,2012. [13]袁江兰,康旭,黄红霞. 鸡蛋黄卵磷脂提取方法的比较研究[J]. 食品科学,2009,02:25-28. [14]刘文倩,廖泉,赵玲艳,邓放明. 卵磷脂提取与纯化技术研究进展[J]. 食品与机械,2014,01:267-271. [15]肖虹,周裔彬,尚岩岩,邵磊,胡经纬,毛晓文. 超声辅助提取鸡蛋卵磷脂的工艺研究[J]. 食品工业科
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
卵磷脂的化学结构 1 R1-COO-CH2 2* R2-COO-C—H O 3 CH2 —O—P—O—R OH
R1 常为饱和脂肪 酸如C16，C18 R2 常为不饱和脂 肪-N(CH3)3 OH 卵磷脂 卵磷脂彻底水解的产物是什么？ 卵磷脂
极性端 疏油端，亲水端
CO2-CH2 CO2-CH 非极性端 疏水端，亲油端 O + CH2O-P-O-CH2CH2-N(CH3)3 O H-OH 磷脂分子中同时具有疏水基 亲水基 疏水基和亲水基 疏水基 亲水基。正是由于 这种特点，使得磷脂类化合物在细胞中起着重要 的生理作用。
卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、 胆碱和磷酸盐，可分别进行化学鉴定。胆碱在 碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气 味的三甲胺；磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作 用，生成黄色的磷钼酸沉淀。通过对分解产物 的检验可以对提取的卵磷脂粗品进行鉴定。
实验三 卵磷脂的提取和鉴定 实验三
实验目的 了解磷脂类物质的结构和性质 学习卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。
实验原理 磷脂是生物体组织细胞的重要成分，在脑、 神经组织、肾上腺和红细胞中含量较高，在 蛋黄中含量特别丰富(10%左右)。卵磷脂能溶 于乙醇而脑磷脂、蛋白质及糖类等不溶，利 用此性质可将卵磷脂和其它成分分离。卵磷 脂溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性质可将 其与醇溶性的中性脂肪分离开，达到纯化卵 磷脂的目的。
现象：
滤纸过滤
滤液性状：
将滤液置于蒸发皿内，水浴锅中 蒸干，所得干物即为卵磷脂粗品。
粗提物性状：
(二)卵磷脂的溶解性观察 二 卵磷脂的溶解性观察 药勺刮取取粗提物少许，置干燥试管底部，
加入1mL 乙醚，用玻棒搅动
现象？
加入2mL丙酮
现象？
(三)卵磷脂的水解与鉴定 三 卵磷脂的水解与鉴定
1.三甲胺的检验 取干燥试管一支，加入少量提取物和3mL 10% NaOH溶液，水浴加热15min，在管口放一片蒸馏水 润湿过的红色石蕊试纸，观察颜色有无变化，并嗅其 气味，记录。 将上述加热过的溶液过滤。滤液性状： 2.磷酸的检验 取干净试管一支，加入10滴上述滤液，加入10滴 95%乙醇，摇匀，再加入10滴钼酸铵试剂，观察现 象；最后将试管放入热水浴中加热5～10min，观察 有何变化。
实验器材
鸡蛋黄，95%乙醇，乙醚，丙酮，10% NaOH， 鉬酸铵试剂； 50 mL、500 mL烧杯，电炉，蒸发皿，药勺， 玻璃棒，玻璃漏斗，试管，吸管，石蕊试纸， 试管夹，洗瓶
实验操作步骤与现象观察记录 (一)卵磷脂的提取 取约10g （两吸管）蛋黄于50 ml小烧杯中
搅拌加入95%乙醇30mL