基质效应

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2.色谱条件的优化
基质效应的产生，是由于内源性物质与待测物一同流 出色谱柱，从而产生竞争抑制引起的。优化色谱条件，改 变内源性物质与待测物在色谱柱上的保留时间，使其流出 的速度不同，从而进入质谱的时间不同，这样便可以去除 或降低基质效应的影响。
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3.质谱条件的选择
基质效应在液质检测中有所体现，但在液相-紫外检 测中却没有，这与其检测原理相关。在液质分析中，电喷 雾离子源（ESI）和大气压化学电离源（APCI）较常使用。 ESI源由于其电离原理是液相离子化，内源性物质与待测 物竞相竞争液滴表面，从而基质效应比较明显。故在实际 应用中，如果遇到使用ESI源基质效应较大，可以考虑换 用APCI源尝试一下，看看响应是否能够满足要求，基质效 应是否有所降低。同时，还可以考察一下正离子检测模式 和负离子检测模式下基质效应的大小，一般情况下，负离 子的背景噪音要低于正离子的背景噪音。
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二、FDA关于基质效应的规定
FDA在生物样品分析方法确证中对基质效应 的规定——凡是使用液质建立生物样品分析方法 时，必须考察基质效应对化合物测定的影响。当 基质的影响控制在LLOQ的20%以下，这个方法才 能被接受。
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三、基质效应的产生
以液-质联用为例，在生物样品中，引 起基质效应的内源性物质随同待测物从色谱 柱上一起被洗脱下来，经离子源气化，进入 质谱进行检测。在液滴气化、发生库伦爆炸 变成小液滴至产生气体离子的过程中，这些 内源性物质由于极性较大，会同待测物离子 竞争液滴表面，从而导致待测物的离子化效 率降低或增强，引起响应降低或增高，继而 产生基质抑制或基质增强效应。
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4.内标物的选择
内标的选择，首选同位素标记物和待测物的同系物。 实际上，同位素标记物是最为理想的内标物，它与待测物 的化学性质极为相似，基质效应、操作中的环境变化等对 它们的影响也一致，这样就可以去除基质效应的影响。但 由于同位素标记物价格昂贵，而且不易获得，使这种优越 性大打折扣，在不得已的条件下，还需要选择同系物来做 为内标，这就需要通过其他几个方面来尽量降低基质效应， 以满足测定灵敏度和专属性的要求。
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基质效应产生示意图
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源自文库
四、基质效应的评价方法
目前在生物样品分析领域中，主要有两 种方法用于对基质效应进行评价。一是柱后 流动注射法(Post-column infusion method)。 另一种是样品处理后加入法（Post-extraction spike method）。
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第一种：柱后流动注射法（不可定量）
基质效应
洪
倩
倩
2011.02.11
一、基质效应的概念
所谓基质（Matrix），指标本中除分 析物以外的一切组成。以测定血中红霉素 的浓度为例，除了红霉素之外的蛋白、磷 脂及其他内源性物质皆为基质。
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按美国临床实验室标准化委员会（NCCLS） 文件，基质效应的定义为： ① 标本中除分析物以外的其他成分对分析物 测定值的影响； ② 基质对分析方法准确测定分析物的能力的 干扰。广义说来，基质效应也应包括已知的 干扰物（如红霉素测定中磷脂、血红蛋白、 抗坏血酸等都是干扰物），但目前只将基质 效应限于生物材料中未知或未定性的物质或 因素（如粘度、pH等）的影响。
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第二种：样品处理后加入法（可以定量）
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五、基质效应的消除或降低
1.样品处理技术 2.色谱条件的优化
3.质谱条件的选择
4.内标物的选择
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1.样品处理技术
生物分析中主要用到沉淀蛋白法（PPT）、液-液萃取法 （LLE）和固相萃取法（SPE）。PPT适应于绝大多数化合物，对 蛋白结合率的高低没有要求，操作步骤相对简捷，缺点就是处 理后的样品不是很干净，内源性物质较多，从而产生较强的基 质效应；LLE适于极性相对小、蛋白结合率低的化合物，提取步 骤相对繁琐，但处理后的样品较为干净；而SPE根据填料的不同， 适于分析的化合物的种类也有所差别，该方法特点是样品处理 后干净，操作装臵简单，绝大多数的内源性物质可被去除，使 待测物浓缩，提高检测的灵敏度。
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