试验二大葱花粉母细胞涂片及观察
大葱雄性不育系及保持系花药和花粉发育的细胞学比较研究
大葱雄性不育系及保持系花药和花粉发育的细胞学比较研究大葱(Allium fistulosum L.) 是我国栽培的重要葱蒜类蔬菜之一。
目前, 利用雄性不育系是生产大葱杂交种的唯一途径。
20 世纪70 年代张启沛等在大葱自然群体中发现了雄性不育株, 并认为在我国大葱地方品种中雄性不育广泛存在。
山东农业大学和山东省章丘市农业局以章丘大葱中发现的雄性不育株为不育源, 育成雄性不育系, 不育株率在95% 以上, 并利用雄性不育系配制了一些杂交组合。
有关细胞质雄性不育的细胞学机理研究在拟南芥、大豆、水稻、油菜等作物上已有报道[3- 6], 但国内外对大葱雄性不育研究较少, 对其不育机理尚不十分清楚, 本试验以1 份大葱雄性不育系及其保持系为试材, 采用石蜡切片技术, 观察雄性不育系和相应可育保持系小孢子的发育过程, 探索大葱雄性不育系花粉败育的时期和方式, 以了解大葱的雄性不育细胞学特征及雄性不育机理, 为大葱雄性不育系的研究和应用提供一定的理论依据。
1 材料与方法本试验以1 份大葱雄性不育系及其相应保持系( 从章丘大1/ 8葱中选育而成) 花蕾作为研究材料, 于2005 年7 月24 日取不同生长发育期的花蕾按大小分级后迅速用50% 的FAA 固定液固定24 h, 逐级酒精脱水, 石蜡包埋, 采用常规石蜡切片法制片, 切片厚度10 !m, 番红固绿染色法染色, 用加拿大树胶封片。
最后用Olympus BH- 2 型摄像生物显微镜和全色胶卷照相。
2 结果与分析2.1 大葱可育系花药和小孢子发育过程的细胞学观察正常可育大葱的花药有4 个花粉囊, 呈蝶形, 花蕾横切面呈三角形, 每一花蕾含有6 个花药, 每一花药4 室。
一般将花药发育过程分为造孢细胞期、小孢子母细胞期、四分体期、单核小孢子期、花粉粒成熟期。
观察表明, 大葱同一花内的不同花药或同一花药的不同药室, 小孢子母细胞减数分裂多不同步,可分别处于减数分裂各期或四分体期。
实验二.植物花蕾减数分裂制片及观察
实验材料
大葱花序 2n=16
实验方法
1、取材：采集刚现蕾的花序置于固定液内固定24 小时后。分别放入95%、80%的酒精中依次脱水， 于70%的酒精中保存。 2、水洗花药：分别取大葱花序的上、中、下三朵 小花，放在培养皿中水洗。
3、取花药：取出花药放在载玻片上，用滤纸吸取多 余水分，用镊子和解剖针取出花药，每朵小花中有6 个花药，弃去其余部分。每一部位小花分别制片一张。
4、染色：在花药上滴加一滴改良苯酚品红染液，边 用镊子夹碎边染色10分钟，弃去其余残渣，盖上盖 玻片（防止气泡产生） 5、压片：用滤纸包住盖玻片和载玻片，大拇指压片 或用镊子轻匀敲片； 6、镜检：先在低倍镜找到有分裂相的细胞，再用 高倍镜仔细观察染色体的形态特征
实验作业及思考题
1、制作大葱花序减数分裂玻片（上、中、下三个 部位）。 2、画出减数分裂中期Ⅰ、后期Ⅰ 、末期Ⅰ 、中期 Ⅱ、后期Ⅱ、末期Ⅱ六个时期染色体形态图。 思考题：减数分裂过程中染色体的动态变化与遗 传 学三大规律之间的联系。
实验二 植物花蕾减数分裂制片及观察Fra bibliotek实验目的
1 学习和掌握减数分裂玻片的制备方法和 技术； 2 观察高等植物花粉形成过程中减数分裂各 个时期的特征以及染色体的动态变化。
实验原理
减数分离是生物体在性母细胞成熟时， 配子形成过程中发生的一种特殊的细胞分 裂。 染色体复制一次，细胞连续分裂两次， 子细胞染色体数目是母细胞染色体数目的 一半。 偶线期：联会 粗线期：交换 双线期：交叉
花粉母细胞
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减数分裂的第一次分裂减数分裂的第一次分裂可分为四个时期：前期经历时间很长，染色体变化复杂。前期 1又可进一步分为6个时期：
（1）前细线期核中染色体极细，在光学显微镜下，一般难以分辨，但染色体已开始凝缩，出现螺旋丝。（2） 细线期染色体螺旋卷曲，开始逐渐变成细丝，上面分布着许多大小不同的球状染色粒。
（3）偶线期细胞内的二同源染色体（即来自父本和母本的相似染色体）两两成对靠拢，这一现象称为二价 体，也称联会。如果原来细胞里有20个分散的染色体，这时候配成10对。
分裂过程
分裂过程
减数分裂也有间期，称为减数分裂前间期。高等植物减数分裂前间期所持续的时间比有丝分裂的要长得多， 绝大多数的DNA在此期中合成，还有少数的DNA( 0.4-1℅)在减数分裂中的偶线期和粗线期合成。细胞进入减数分 裂绪状态后，即开始减数分裂。减数分裂包括两次连续的分裂，现分述如下：
减数分裂的第一次分裂
其他信息
其他信息
有些植物二种类型都有。如芋各种植物花粉母细胞减数分裂的持续时间不同，如小麦约需24小时，洋葱约需 96小时。在此期间，植物对环境条件的变化非常敏感，若遇到干旱、低温、光照不足，或缺乏营养，或氮肥过多 等，都会影响花粉粒的正常形成，从而影响结实，降低产量。因此，在农业生产上十分重视植物减数分裂期间的 环境条件变化，从而采取相应的生产措施。
花ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ母细胞
生物用语
01 减数分裂
03 四分体
目录
02 分裂过程 04 其他信息
基本信息
指在种子植物的幼龄花药中分化，由造孢细胞有丝分裂或不分裂而形成的细胞。
减数分裂
减数分裂
第二个即为花粉母细胞在花粉囊壁发育的同时，花粉囊内的造孢细胞也进行分裂。大多数植物的初生造孢细 胞要进行几次分裂，然后形成花粉母细胞。如商陆（图商陆1）初期常为多边形，稍后渐近圆形，体积较大，细胞 核也较大，细胞质浓，没有明显液泡，与其四周的花药壁层细胞有明显的区别。极少数植物的造孢细胞可不再分 裂，直接发育为花粉母细胞，如小花山桃草。花粉母细胞不断积累营养物质，细胞内各种细胞器的量增多，RNA 和蛋白质也大量合成，随后进行减数分裂。减数分裂是植物生活周期中的一个重要阶段，它与被子植物的有性生 殖有密切的关系。它发生在被子植物花粉母细胞开始形成花粉粒和胚囊母细胞开始形成胚囊的时候。
实验二 植物减数分裂过程中染色体行为的观察
三、材料
大葱葱花（2n=16）：花外膜没打开，成黄绿色，处于减 数分裂阶段。
四、方法步骤
取花药于载玻片上； 用解剖针把花药剥开，将其中的花粉母细胞挤出； 挤出花粉母细胞后，再滴卡宝品红染色5－10min； 加上盖玻片，再放上滤纸，用拇指适当加压，并把周围 染液吸干； 显微镜下观察。
五、结果观察
绘制减数分裂前Ⅰ、中Ⅰ、中Ⅱ、后Ⅱ、末Ⅱ图任意两幅 图。
五、观察结果——大葱减数分裂
五、观察果——大葱减数分裂
五、观察结果——大葱减数分裂
实验二 植物减数分裂过程中染色体行为的观察
一、实验目的
掌握减数分裂的全过程，观察染色体形态特征，掌握花粉 减数分裂制片技术。
二、原理
减数分裂是一种特殊方式的细胞分裂，仅在配子形成过程中发生。 特点一：连续进行两次核分裂，而染色体只复制一次，结果形成4个 核，每个核只含有单倍数的染色体，即染色体数减少一半，所以称作 减数分裂。 特点二：前期特别长，而且变化复杂，包括同源染色体的配对、交换 与分离。 细线期: 染色质浓缩为几条细而长的细线; 偶线期: 同源染色体开始配对; 粗线期: 染色体继续缩短变粗,双价体形成; 双线期: 非姐妹染色单体开始分开; 浓缩期: 双价体开始向赤道面移动,纺锤体开始形成。
花粉的形态观察及生活力测定.
实验一花粉贮藏及花粉生活力的测定花期不遇给杂交工作造成困难，有的园林植物可通过调整花期来解决，有的则不得不进行花粉贮藏，或者从外地寄运花粉。
为了避免杂交工作失误，在使用外地寄来的花粉或经过一段时间贮藏的花粉之前，必须对花粉的生活力进行检测，以便对杂交结果进行分析与研究。
因此我们必须掌握花粉贮藏及花粉生活力测定的原理和技术一、实验目的掌握花粉贮藏及花粉生命力鉴定的方法和原理。
二、实验材料百合、金鱼草、菊花等花粉。
三、仪器及药品显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、吸水纸、TTC（2.3.5—氯化三苯基四唑）、KI-I2、蓝墨水。
四、实验原理花粉在低温（ 0 ～ 2 ℃）、干燥、黑暗等条件下代谢强度降低，花粉贮藏的原理就是要创造这样低代谢的环境条件，从而延长花粉的寿命。
花粉的形态、花粉中酶的活性以及积累淀粉的多少（淀粉质花粉）通常与其生活力密切相关，因此可以利用花粉的形态观察、过氧化物酶、脱氢酶的活性高低、淀粉的含量以及在人工培养基上花粉管萌发的情况作为鉴定花粉生活力高低的标准。
鉴定花粉生活力的方法很多，概括起来主要有如下几种：1 ．直接测定法将待测花粉直接授粉，然后统计结实情况。
此法最准确，但需时较长，且实验结果易受气候条件的影响。
也可在授粉后隔一定时间切下柱头，在显微镜下压片检查花粉的萌发情况，根据萌发率的高低来鉴定花粉的生活力。
2 ．形态观察法直接在显微镜下观察花粉的形态，根据品种花粉的典型性（如具有正常的大小、形状、色泽等）判断花粉的生活力，即形态正常的花粉有生活力，而一些小的、皱缩的、畸形的花粉不具有生活力。
此法简便易行但准确性差，一般只用于测定新鲜花粉的生活力。
3 ．染色观察法1 ）碘－碘化钾染色法：以碘－碘化钾溶液（ 0.3g 碘＋ 1.3g 碘化钾溶于 100ml 蒸馏水）染色后于显微镜下观察，花粉被染成蓝色者表示具有生活力，花粉呈黄褐色者不具有生活力。
2 ） TTC 染色法：使用TTC测定花粉生命力的原理，主要是无色药液进入花粉遇到活组织里的脱氢酶，接受氢离子，还原成红色三苯基甲腊TTF，还原结果使有生命力的花粉染上红色，死花粉不着色；花粉生活力强弱有异，染色深浅也有不同。
葱小孢子母细胞减数分裂观察
减数分裂和染色体行为观察是高中遗传学内容的 重点和难点,减数分裂不仅是高等动植物有性生殖方 式，还是遗传学三大规律及生物进化的细胞学基础 % 减数分裂实验在实际操作中，往往存在取材困难、染色 效果不佳、分辨率较低等问题％本文以常见的植 察方法，提高实验效率和保障教学效果％ 1材料和取材
采摘后的花序用卡诺固定液（3份酒精：1份冰醋 酸）固定。取花序浸入卡诺固定液中，固定18〜24 h 后，转入无水乙醇浸泡18〜24 h,转入70%乙醇保存备 用％固定的目的是迅速杀死活细胞,使染色体蛋白质 变性，保持其固有形状，并且经过固定处理的材料更易 于染色、分色和保存% 3制片与观察 3.1涂片挑取一个花蕾放到培养皿中，用蒸馏水浸 泡1 min后，用刀片切开花蕾，选取小花放在载玻片上% 用吸水纸吸去多余的保存液,用大头针在小花中挑取 花药，清除其他残余物。用大头针钝端捣碎花药,将挤 出花粉母细胞（呈半透明胶状）小范围内涂成薄层％ 3.2染色在涂好的载玻片上立即滴加一滴或半滴 改良苯酚品红染液（视滴管大小而定,由于花粉母细胞 在压片过程中特别容易随染液溢出,所以滴加染液宜 少不宜多），静置染色10〜15 min % 3. 3压片 覆盖盖玻片后,在盖玻片上加3-4层吸 水纸包覆,用拇指与食指紧压盖玻片的对角处,再用铅 笔的橡皮头垂直敲打，使细胞平整、染色体散开分布于 同一平面，便于观察和记数;同时吸水纸可吸去盖玻片 周围多余的染液％应注意勿使盖玻片发生搓动,以免
［基金项目：2018广东省高等教育教学改革项目 “中学生物学名师与生物科学（师范）专业的有机衔 接”，No. 389 ；广东省韩山师范学院2018年度校级基础 教育研究项目“院校新联合背景下中学生物探究式教 学与课程资源开发研究” ,No. ZD201805 +
花序大小 （纵径：mm）
实验一-减数分裂
玉米大喇叭口期
玉米雄花序
玉米小穗
玉米的雄花序及花药
三、实验用品
1. 试剂：卡宝品红染色剂 2. 仪器及器具：显微镜、镊子、解剖针、载
玻片、盖玻片等
四、实验方法与步骤
1. 取幼小花蕾置载玻片上，用解剖针剥取长大约12mm的花药2-3枚。
2. 加1滴卡宝品红染色剂后，用镊子充分挤压花药， 使其内的花粉母细胞释放出来。
3. 将大片的残渣去掉后。 4. 染色约5-10分钟，加盖玻片。 5. 用吸水纸包住载玻片，用大拇指垂直向下压片。 6. 显微镜下观察，先在10×物镜下观察概况，找到
合适的目标后再换40×物镜观察并绘图。（注意区 分体细胞、花粉母细胞、幼小花粉粒及成熟花粉粒 个时期的细胞学特征。 实验报告要求绘（至少6个）不同减数分裂
普通遗传学实验一
玉米花粉母细胞减数分裂制片与观察
一、实验目的
1. 了解植物花粉母细胞减数分裂全过程及各个 时期染色体的行为变化特征。
2. 从遗传学角度，熟悉减数分裂各个时期的细 胞学特点，加深对减数分裂的认识。
3. 掌握植物花粉母细胞减数分裂的取材、固定 染色及制片方法
二、实验材料
1. 实验材料:玉米的雄花序（玉米2n=20）
的盖玻片丢弃。 使用过的纱布、滤纸、盖玻片放到废品杯或垃圾
桶，不得直接冲入水池。
值日生打扫卫生、检查仪器及门窗。
附：显微镜操作和使用
开关显微镜，移动显微镜。 调节目镜间距和目镜微调，使两个眼睛视野相同和
清晰，防止眼睛疲劳。 先低倍镜，后高倍镜观察，高倍镜下不准用粗调。 高倍镜下不得取放载玻片。 使用结束：电压或光亮度调至最小，关闭并拔下
电源，降低载物台，最低倍物镜或无目镜的镜筒居 中，防尘罩，填写使用记录，请老师验收方可离开。
遗传学（Ⅱ）实验部分
遗传学（Ⅱ）实验部分一、实验课的目的、意义通过遗传学实验课的多媒体教学片、示范标本片、照片和玉米果穗等材料材验证课堂讲授的遗传学规律和理论；通过实验课实际操作和观察，训练遗传学的实验技能，培养学生的动手能力。
二、实验课主要目标通过实验使学生学会生物显微镜的正确使用方法，掌握常用的植物染色体制片技术，能独立进行从取材、样本处理到制片和观察的全过程操作，对实验结果进行记录、统计、分析和归纳，写出完整的实验报告，为学习后续课程和以后从事本专业科研工作打下基础。
三、主要实验内容实验一 植物花粉母细胞减数分裂涂抹制片（2学时）通过用涂抹法制作黑麦花粉母细胞减数分裂临时片，并对其进行观察，学习花粉母细胞减数分裂涂抹制片技术，进一步了花粉母细胞减数分裂全过程及各个时期染色体的变化特征。
实验二 植物根尖有丝分裂压片法（2学时）通过学习根尖压片技术，进一步观察有丝分裂染色体的变化特征。
实验三 玉米籽粒性状基因间关系的分析（2学时）通过观察玉米的几种一对、二对独立性状杂交的F2果穗及连锁性状的测交及F2果穗的性状分离，进行数据统计，并作X2检验，验证独立分配规律和连锁规律，理解基因互作的表现特征和遗传性质。
实验四 染色体结构变异的观察与鉴定（2学时）通过制作玉米花粉母细胞减数分裂涂抹片，观察玉米易位杂合体减数分裂终变期分裂相及花粉半不育现象，观察玉米易位杂合体自交果穗结实情况，掌握染色体结构变异的细胞学特征和遗传效应，并进一步熟悉花粉母细胞涂片技术。
实验五 多倍体的诱发与鉴定（2学时）通过制作黑麦加倍根尖材料的临时压片，掌握染色体加倍和鉴定方法，并进一步熟悉根尖压片技术。
四、实验成绩考核办法实验成绩占总成绩的10%。
考核办法：每个实验20分（其中实验操作10分，实验报告10分），5个实验总计100，再除以10。
五、实验教材、参考资料[1] 《普通遗传学实验指导》，（自编教材），侯秀英等，沈阳农业大学，2007[2] 《遗传学》（第三版）朱军主编， 中国农业出版社，2002六、实验项目汇总表序号 实验项目名称 学时 实验类别 实验要求 每组学生数1 植物花粉母细胞减数分裂涂抹制片2 验证性 必修 12 植物根尖有丝分裂压片法 2 验证性 必修 13 玉米籽粒性状基因间关系的分析2创新性 必修 114 染色体结构变异的观察与鉴定 2 综合性 必修 15 多倍体的诱发与鉴定 2 综合性 必修 1 合计 10要求学生在实验课前预习，实验中做好绘图或数值的原始记录。
植物花粉母细胞减数分裂及花粉发育显微摄影图片异常
植物花粉母细胞减数分裂及花粉发育显微摄影图片(异常
)
减数分裂前期Ⅰ—细或偶线期减数分裂前期Ⅰ—粗线期减数分裂前期Ⅰ—双线期
减数分裂前期Ⅰ—终变线期
减数分裂前期Ⅰ—中期
（示滞后或滞留染色体）
减数分裂前期Ⅰ—后期
（示滞后或滞留染色体）
减数分裂前期Ⅰ—后期
（示滞后或滞留染色体）
减数分裂前期Ⅰ—后期
（示滞后或滞留染色体）
减数分裂前期Ⅰ—末期
（示染色体单桥和染色体片断）
减数分裂前期Ⅰ—末期
减数分裂前期Ⅱ—后期
（示染色体多桥和染色体片断）
减数分裂前期Ⅱ—末期
（示染色体片断或微核）
四分体时期异常—二核花粉粒
异常—二细胞花粉粒（“营养细胞”中具二个小核）。
“温度对酶促反应的影响”实验的改进
放 回原处 。④ 放 置 １ｒ ｎ后取 出 ， ０ｉ ａ 分别 向各管 加入稀 碘液 １ ， 滴 观察并 分析每管的颜色变化 。 （） ３ 分析 与思考 本 实验在原 教材的基础 上设计 了第 ４管 ， 比较本实验 中第 １ 请 管与第 ４管 的结果 ， 它 们在本质上有何 区别 ？你 的依据是什么 ？为什 么淀粉
—
１ ７
期。准确取材可达到事半功倍 的效果。由于同一花苞内 小花大小 的差异非常明显 ， 以小花大小与花药大小 比 所
［］ ３ 李雅轩 ， 赵
～
听． ０ ６ ２ ０ ．遗传学综合 实验． 北京 ： 学出版 社 ，Ｉ 科 １
１ ２ ～３ ５． ９ ２
花苞大小对观察结果 的影 响更大。尤 其应关注花药 大
・
４０ ０ 第３ 卷 第１
综上所述 ， 大葱花粉母 细胞 减数分 裂与 其他 植物
相 比具有不 同步性 、 而且与 花药大小 相关度 最高 等特 点， 据此 ， 以在一次制 片时 同时选取不 同长度 的花药 可 （ 花药长 度在 １０～１ ２ ｍ之间 ） ． ．ｍ 进行 压 片， 这样 就 可
减数分裂各时期分 布图
分裂过程 的实验材料 。
（ 资助项 目： 首都师 范大学遗传 学实验精 品课程 建
设 ； 通讯作者 ）
主 要 参 考 文 献
大葱花粉母 细胞 减数分裂各时期进程具 有不同步 性， 而且这种不 同步性 表现在不 同的植 株问、 同一花序
的不同小花、 同一小花的不同花药之 间 ， 至同一花药 甚
主 要 参 考 文 献
煮沸 唾液 的制备 ： 取上 述稀释 唾液 ｌ ｍ ， 试管放 入 Ｏ ｌ将 沸水浴 １ｒｎ 取 出备用 。 ０ ｉ， ａ
实验二植物减数分裂及玉米花母细胞涂片、观察
2． 小麦幼穗
在小麦抽穗前10-15 天，当旗叶与下一叶片的 叶枕相距1—4cm、幼穗 长约4cm时，各不同部位 小穗第1-2朵小花的花药 表现为黄绿色时，一般正 是处于减数分裂时期。采 集的小穗按上述玉米雄穗 的固定方法进行固定处理。
3． 蚕豆花蕾
在早春（3-4月）蚕 豆现蕾后，于上午8-10 时，摘取长约lmm左右 的花蕾，固定、保存。
中期I I 染色体排列在赤道板，每条染色体由两个 染色单体，共用一个着丝点。（14）
后期I I 每个染色体从着丝点处分裂为二，分别移 向两极。（15）
末期I I 移到两级的染色体解螺旋，再次出现核仁、核膜，形成单 倍的子核，此时减数分裂I形成的两个单倍核形成4个单倍 核，最后形成4个子细胞，叫四分体。（16）
减数分裂在遗传上具有两个重要的 生物学意义：
1、性母细胞（2n）经过 减数分裂形成染色体数减 半的配子（n），经过受 精作用雌雄配子结合形成 合子，染色体数恢复 （2n），这样在物种延续 的过程中确保了染色体数 目的恒定，从而使物种在 遗传上具有相对的稳定性。
2、在减数分裂过程中包 含有同源染色体的配对、 交换、分离和非同源染色 体的自由组合，这些都是 遗传学分离、自由组合和 连锁互换规律的细胞学基 础，同源染色体的交换和 非同源染色体的自由组合 所产生的遗传重组，又是 生物变异和进化的重要遗 传基础。
植物花粉形成过程
在植物花粉形成过程中， 花药内的一些细胞分化成 小孢子母细胞（2n），每 个小孢子母细胞进行2次 连续的细胞分裂（第一次 减数分裂和第二次减数分 裂）。每一个小孢子母细 胞产生4个子细胞，每个 子细胞就是1个小孢子。 小孢子内的染色体数目是 体细胞的一半（图2-1）。
实验一、植物花粉母细胞减数分裂观察及其制片一、实验目的
三、实验材料、器具和药品
1.材料：玉米(Zea mays)花粉母细胞减数分裂永久制片、玉米雄花序； 2.器具：镊子、解剖针、载片、盖片、酒精灯、吸水纸、显微镜等； 3.药品：Carnoy固定液、1％醋酸洋红、45％醋酸。
四、实验内容与操作步骤
1.花粉母细胞减数分裂永久制片观察 认识细胞减数分裂各个时期的细胞形态和染色体的变化规律
2.玉米花粉母细胞制片
取材 → 固定→制片（取雄小穗一粒于载玻片上，取出花药，加一滴 染液，挤出花粉母细胞，除去杂质，加盖玻片） 看到的显微镜下玉米花粉母细胞减数分裂 终变期、中期Ⅰ、 后期Ⅰ、中期Ⅱ、四分子期 的实物图像，并简要说明其染色体的变化特征。
实验一、植物花粉母细胞减数分裂观察及其制片
一、实验目的
了解高等植物小孢子母细胞减数分裂的过程，观察减数分裂中染色体 的动态变化；学习并掌握植物细胞减数分裂染色体标本的制作方法。
二、实验原理
在植物的花粉形成过程中，花药内的一些细胞分化为小孢子母细胞 （2n），每个小孢子母细胞经减数分裂产生4个小孢子（n）。 在适当的时期 采集植物的花药，经固定、染色、压片等操作程序后，就可以在显微镜下看 到细胞减数分裂过程中染色体的动态变化。
大葱的人工授粉与改良繁殖方法
大葱的人工授粉与改良繁殖方法人工授粉是一种常见的大葱繁殖方法，通过人工干预，可以提高大葱的繁殖效果和产量。
本文将介绍大葱人工授粉的方法以及改良繁殖技术，希望对大葱生产者有所帮助。
首先，我们来了解一下大葱的繁殖方式。
大葱是一种二年生草本植物，其传统的繁殖方式是通过种子繁殖。
大葱种子的自然授粉并不理想，容易受到环境因素的干扰，导致种子数量和品质不稳定。
因此，人工授粉成为一种有效的替代方案。
大葱的人工授粉可以使用花粉筛选和人工授粉两个步骤进行。
首先，选择具有较高品质和丰富花粉的大葱植株作为花粉供体。
这些植株通常应具备以下特点：生长健壮、花粉丰富、无显著疾病或虫害。
花粉供体可以通过观察花序的形态和健康状况进行初步筛选，然后在花开后观察其花粉产量和质量。
在花粉供体的选择完成后，接下来是进行人工授粉的步骤。
首先要等到大葱的花蕾开放，将花粉供体的花蕾从葱植株上剪下。
然后用细刷子将其花粉撤下，可以将花粉码在玻片上，稍作干燥。
接下来，选择大葱的花蕾，敲打花蕾，让其花粉散落。
将前面收集的花粉轻轻涂抹在花蕾的雌蕊上。
这样，就完成了一次人工授粉过程。
除了一般的人工授粉方法外，还有一些改良繁殖方法可以提高大葱的繁殖效果。
一种常用的方法是利用两行交错栽植的方式，增加授粉效率。
这种方法可以通过增加不同花序和花期的大葱植株，提高授粉成功率。
另外一种改良方法是利用保护授粉袋。
将保护授粉袋套在大葱的花蕾上，防止不必要的外来花粉污染。
这种方法可以减少异交的可能性，提高授粉的精确性和成功率。
此外，合理的施肥和灌溉也是改良大葱繁殖的关键因素之一。
充足的营养供应和适宜的水分管理，能够为大葱提供良好的生长环境，促进花芽的形成和授粉过程。
最后，对于大葱的人工授粉和改良繁殖方法的研究和应用，还需要进一步的实践和探索。
通过对不同地区和不同品种的大葱进行试验和比较，可以找到最适合的人工授粉方法和改良技术，以提高大葱的产量和质量。
总之，大葱的人工授粉与改良繁殖方法是一项重要的农业技术，可以有效提高大葱的繁殖效果和产量。
试验二大葱花粉母细胞涂片及观察
前期Ⅰ 双线期
前期Ⅰ浓缩期
又叫终 变期，交 叉向染色 体端部移 动，交叉 数减少， 染色体变 得更粗。 浓缩期核 膜消失。
中期Ⅰ
各双价 体排列在 赤道板上， 纺锤体形 成,染色体 上着丝粒 开始逐渐 远离.双价 体开始分 离,染色体 数仍为2n, 但每一染 色体含有 两个染色 单体
后期Ⅰ
两条同 源染色体 分开，分 别移向两 极，每一 染色体有 一着丝粒 带着两个 染色单体， 每一极得 到n个染 色体，染 色体数减 半
遗传学实验
实验二 大葱花粉母细胞涂片及观察 （３学时）
一、教学基本要求
1、 掌握植物染色体涂片法。 2、 掌握减数分裂过程中各时 期染色体的基本特物花粉母细胞的 制片，了解小孢子形成过程及减数 分裂中染色体的变化情况，并进一 步掌握植物细胞染色体的制片方法， 掌握减数分裂过程中各时期染色体 的基本特征。
压片
染色 体逐渐 解旋， 呈丝状， 核膜重 建，核 仁重新 形成， 胞质分 裂,各成 为两个 子细胞
大葱花蕾
春季在 花序比较 饱满的时 候采集大 葱花蕾固 定后并保 存在70% 的酒精中， 放入冰箱 中冷藏供 实验用。
染色液
改 良 苯 酚 品 红 或 醋 酸 洋 红
用滤纸 条在盖玻 片处绕载 玻片紧紧 缠绕起来， 大拇指轻 按，再用 铅笔的橡 皮头适当 用力敲打 盖玻片， 使染色体 渐渐分散。
前期Ⅰ 偶线期
前期Ⅰ 粗线期
同源染 色体配对 完毕，这 种配对的 染色体叫 做双价体， 每个双价 体含四个 染色单体， 但仅含两 个着丝粒 。 染色体继 续缩短。
染色体 进一步缩 短变粗， 同源染色 体开始分 离，因交 叉使单体 上的若干 点仍连在 一起，出 现X形，U 形，8形， 0形等形状。
花粉涂片和染色方法
欧阳昱晖 范尔钟 李颖
北京市耳鼻咽喉研究所 首都医科大学耳鼻咽喉头颈科学教育部重点实验室
花粉症
荷兰7%的儿童过敏性疾病患者存在花粉过敏。
----Baatenburg de Jong, A. ,ed al. Allergy Immunol. 2009.
美国1-3岁过敏性哮喘儿童中花粉过敏原阳性反应患儿占40%。
正常涂片
凡士林过厚涂片
花粉曝片和制片要点（二）
染色剂勿过量 过量后会出现染色过重或染色剂外溢，花粉也一同溢出。
花粉曝片和制片要点（三）
气泡过多
• 盖玻片放置不当，未将气泡推出。
• 载玻片加热过甚，凡士林沸腾产生大量气泡。
花粉的镜检计数（一）
• 24x50mm的盖玻片，划分十个区域 • 10x镜下计数
柏科
• 花期3月~4月。 • 花粉球形。无萌发孔。 外壁薄，易皱摺或破 裂，表面具稀疏的颗 粒状纹饰，中间有一 星状或不规则内容物。
圆柏
松科
• 花期4月~5月 （雪松属9~10月）。 • 花粉粒近圆形 或椭圆形。具 明显的气囊， 分别在花粉体 的两侧。气囊 表面纹饰明显。
华山松
豆科
• 花期4月~5月。 • 花粉粒球形或 近球形，极面 观三裂圆形。 具 3 沟。表面 具模糊的细网 状纹饰。
洋槐
木犀科
• 花期：丁香属4月~6月； 女贞属6月~8月。 • 花粉粒近球形，极面观 三裂圆形。具3孔沟。 表面具明显的网状纹饰。
迎春花
菊科蒿属
• 花期7月~9月。 • 花粉粒球形或 近球形，极面 观三裂圆形。 具2 ~3孔沟。 表面具模糊的 颗粒状纹饰。
大子蒿
菊科
• 花期5月~10月。 • 花粉粒球形。 具3孔沟。表面 具刺状纹饰。
[新版]花粉母细胞涂抹制片技巧
![[新版]花粉母细胞涂抹制片技巧](https://img.taocdn.com/s3/m/316eddf7534de518964bcf84b9d528ea81c72f9b.png)
实验四花粉母细胞涂抹制片技术一、实验目的：掌握植物花粉母细胞减数分裂过程观察的取材、固定、染色和制片方法；熟练掌握植物花粉母细胞涂抹片制作；进一步熟悉减数分裂的基本知识。
二、实验原理：减数分裂是生物在性母性母细胞成熟时配子形成过程中发生的一种特殊的有丝分裂。
包括连续的两次细胞分裂阶段：第一次分裂为染色体数目减半，第二次分裂为染色体数目等数分裂。
最终形成四个子细胞，并发育成雌性或雄性配子，雌雄配子受精结合成为合子，发育成为新的个体。
这样新个体又恢复到原有的染色体数目，保证遗传物质的稳定性，对于物种的延续有重要意义，同时同源染色体配对后，非姊妹染色单体片段的交换、不同基因型的雌雄配子结合等基因重组，为生物变异提供了重要的物质基础，为生物的多样性即适应及进化和人工选择提供了丰富的材料，奠定了基础。
减数分裂第一次分裂，可分为前间期，前期Ⅰ、中期Ⅰ、后期Ⅰ和末期Ⅰ。
第一次分裂，可分为中间期，前期Ⅱ、中期Ⅱ、后期Ⅱ和末期Ⅱ前期Ⅰ又分为5个时期：细线期（两条染色单体），偶线期（配对-二价体）粗线期（交换-重组）双线期（交叉）终变期（交叉端化）。
高等植物减数分裂主要发生在花药和胚囊中的孢原细胞，由于花药取材容易，操作和鉴定方便，因此用植物花药为为减数分裂的观察材料。
三、实验材料洋葱花序、大葱花序等。
四、实验用具及药品培养皿、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、解剖针、木夹、吸水纸、滤纸、铅笔、显微镜、电脑等。
无水酒精及梯度酒精、1mol/L盐酸、1%乙酸洋红、卡诺氏固定液、苏木精、铁矾、水合氯醛五、步骤（1）取材制片：取花序1个，放在载玻片上，用解剖针取上中下不同部位小花各1个，分别取花药2枚，用镊子固定花药一端，用刀片将另一端切去部分，再用解剖针从镊子一端向另一端涂抹成一薄层，涂抹后马上加染料；或者取花药后，加染料，用镊子将花药捣碎，将可见残渣去掉2-5分钟后，盖片，轻压或轻敲。
（2）观察：制好的玻片，先用低倍镜下观察，再用高倍镜（40倍），找到减数分裂的各分裂相。
大葱(Allium fistulosum L.)小孢子的形成
大葱(Allium fistulosum L.)小孢子的形成胡雪华;刘宁【期刊名称】《贵州师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2007(025)001【摘要】报道了贵州引种栽培大葱小孢子的形成过程.结果:大葱花粉母细胞减数分裂的第I次和第Ⅱ次核分裂之间没有一个短暂的间期阶段;胞质分裂属连续型;四分孢子有3种构型;减数分裂不同步现象明显,其分裂过程与原产地基本一致.不同的是,在分裂中期I,Ⅱ阶段的染色体常出现胶合.【总页数】4页(P19-22)【作者】胡雪华;刘宁【作者单位】贵州师范大学,地理与生物科学学院,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,地理与生物科学学院,贵州,贵阳,550001【正文语种】中文【中图分类】Q94【相关文献】1.山楂(Crataegus L.)饮料及大蒜(Allium sativum L.)防腐效果研究 [J], 田学军;郭亚力;杨金;闵勇2.大葱(Allium fistulosumL.)胞质雄性不育基因的RAPD标记 [J], 盖树鹏;孟祥栋3.大葱（Allium fistulosum L.）花蕾培养再生植株的研究 [J], 张松;张启沛4.Application of Molecular Markers Linking to Cytoplasmic Male Sterile Loci to Assist Maintainer Line Selection and Their Selection Efficiency inWelsh Onion （Allium fistulosum L.） [J], GAI Shu-peng;MENG Xiang-dong5.Application of Molecular Markers Linking to Cytoplasmic Male Sterile Loci to Assist Maintainer Line Selection and Their Selection Efficiency in Welsh Onion (Allium fistulosum L.) [J], GAI Shu-peng; MENG Xiang-dong因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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压片
三、实验 原理 细 胞 减 数 分 裂 模 式 图
四、实验仪器
本 实 验 所 用 仪 器
染 色 质 不 分 裂 时 的 形 状
间期
前期Ⅰ 细线期
染色质 浓缩为几 条细而长 的细线， 每一染色 体已复制 为两个单 体，但在 显微镜下 看不出染 色体的双 重性
染色体 形态与细线 期没有太大 的变化,同 源染色体开 始配对同源 染色体两两 靠拢，出现 联会现象， 但染色体松 散，增粗
末期Ⅰ
染色 体解旋, 又呈丝 状，核 膜形成， 胞质分 裂 ,成 为两个 子细胞
前期Ⅱ
染色体变 短变粗，开 始清晰起来。 每个染色体 含有一个着 丝粒和纵向 排列的两条 染色单体。 前期快结束 时染色体更 短粗，核膜 消失。
Hale Waihona Puke 后期Ⅱ两条 染色单 体分离 移向两 极，每 极含n 条染色 体
末期Ⅱ
前期Ⅰ 双线期
前期Ⅰ浓缩期
又叫终 变期，交 叉向染色 体端部移 动，交叉 数减少， 染色体变 得更粗。 浓缩期核 膜消失。
中期Ⅰ
各双价 体排列在 赤道板上， 纺锤体形 成,染色体 上着丝粒 开始逐渐 远离.双价 体开始分 离,染色体 数仍为2n, 但每一染 色体含有 两个染色 单体
后期Ⅰ
两条同 源染色体 分开，分 别移向两 极，每一 染色体有 一着丝粒 带着两个 染色单体， 每一极得 到n个染 色体，染 色体数减 半
染色 体逐渐 解旋， 呈丝状， 核膜重 建，核 仁重新 形成， 胞质分 裂,各成 为两个 子细胞
大葱花蕾
春季在 花序比较 饱满的时 候采集大 葱花蕾固 定后并保 存在70% 的酒精中， 放入冰箱 中冷藏供 实验用。
染色液
改 良 苯 酚 品 红 或 醋 酸 洋 红
用滤纸 条在盖玻 片处绕载 玻片紧紧 缠绕起来， 大拇指轻 按，再用 铅笔的橡 皮头适当 用力敲打 盖玻片， 使染色体 渐渐分散。
遗传学实验
实验二 大葱花粉母细胞涂片及观察 （３学时）
一、教学基本要求
1、 掌握植物染色体涂片法。 2、 掌握减数分裂过程中各时 期染色体的基本特征。
二、教学内容
〖目的和要求〗 本次实验通过对植物花粉母细胞的 制片，了解小孢子形成过程及减数 分裂中染色体的变化情况，并进一 步掌握植物细胞染色体的制片方法， 掌握减数分裂过程中各时期染色体 的基本特征。
前期Ⅰ 偶线期
前期Ⅰ 粗线期
同源染 色体配对 完毕，这 种配对的 染色体叫 做双价体， 每个双价 体含四个 染色单体， 但仅含两 个着丝粒 。 染色体继 续缩短。
染色体 进一步缩 短变粗， 同源染色 体开始分 离，因交 叉使单体 上的若干 点仍连在 一起，出 现X形，U 形，8形， 0形等形状。