安捷伦液质联用系统介绍
安捷伦超高效液相色谱-三重四级杆质谱仪器讲解
液质联用仪本实验室使用的液质联用仪是安捷伦公司6400系列的一款产品，包括超高效液相色谱1290和质谱主机G6460，以及与其配套的计算机和打印机，他们之间通过网络协议通讯，并通过网络交换机连接在一起。
本仪器于2014年年初安装使用，价值两百多万元。
物质只要能溶于液体，均可以被检测。
本实验室主要用于农产品样品的农药残留定性检测，超高效液相色谱1290是整个系统的分离和进样装置，样品在色谱柱中经初步分离，通过接口进入质谱。
质谱以离子源、质量分析器和检测器为核心。
离子源是将分析物中的中性化合物离子化，并将产生的离子在电场的作用下进入离子传输毛细管。
离子传输毛细管是离子的导入通道，它将离子源产生的离子传输进入质谱，同时，隔绝了外部的常压与质谱内部的高真空。
离子通过毛细管后，进入离子光学组件，它包括skimmer1，八极杆以及lens1和lens2，进一步除去了溶剂以及中性分子，也是一个高效的离子传输组件，并聚焦随机运动的离子进入三重四极杆质量分析器。
G6460的质量分析器是三重四级杆，是由三组四极杆空间串联而成，一个质谱就是一个四级杆，所以三重四级杆质谱是空间串联的多级质谱分析，也叫做QQQ质谱。
第一个四级杆根据设定的质合比范围扫描和选择所需的离子。
第二个四级杆，也称碰撞池，用于聚集和传送离子。
在选择离子飞行的途中，引入碰撞气体氮气，第三个四级杆用于分析在碰撞池中产生的碎片离子。
实际上，碰撞池采用了六极杆的设计，拥有更好的聚焦及传输功能，四级杆就被淘汰了，但还沿用三重四级杆的名称。
G6460质谱的检测器包括高能打拿极和电子倍增器，此外，质谱需要在真空环境下工作，它的真空系统由前级真空泵和分子涡轮泵组成，前级真空一般在 1.8-2.5Torr之间，高真空在1.9-2.3*10-5Torr之间。
原理：它以液相色谱作为分离系统，质谱为检测系统。
样品在质谱部分和流动相分离，被离子化后，经质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器得到质谱图。
安捷伦1260 6120液质联用仪操作规程
Agilent 1260/6120液质联用-单四级杆质谱操作规程一、目的建立Agilent LCMS的标准操作规程，使分析人员的操作具有规范性和确保检测数据的准确可靠性。
二、应用范围所有参与Agilent LCMS操作的分析人员和操作人员。
三、使用标准Agilent LCMS 化学工作站标准操作培训中文版四、责任人分析部负责制作规程；分析部主管审核；研发部总监批准；研发部分析人员和操作人员负责执行五、概述：A、工作原理LCMS的工作原理是用高压输液泵，将具有不同特性的单一溶液或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相，用泵压入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入色谱柱内，在色谱柱内各成分被分离后，依次进入检测器，进入离子源后，试样被离子化，然后聚焦于质谱的质量分析器中，根据质荷比不同而被分离检测，获得各种色谱和质谱数据。
色谱信号由色谱工作站进行记录处理。
B、仪器的主要组成部分Agilent 1260 6120液质联用色谱仪主要由G1311B四元泵、G1329B自动控温自动进样器、G1316A柱温箱、G4212B二极管阵列检测器、6120单四极杆质谱检测器和Open LAB共12 页，第 2 页起草人：审核人：批准人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修订号批准日期执行日期六、操作规程：6.1. 开机6.1.1 打开载气钢瓶控制阀，设置分压阀压力为0.56-0.69Mpa。
6.1.2 准备LC流动相，泵柱塞冲洗溶剂，检查管线连接状态，确认粗真空泵和喷雾室的废气排到实验室外部。
6.1.3 打开计算机，并依次打开LC各模块电源及质谱电源，等待各模块自检完成(各模块右上角指示灯为黄色或者无色，质谱有“嘟”一声声音) 。
6.1.4双击桌面图标，进入化学工作站。
颜色位置无色黄色绿色红色蓝色灰色模块右上角状态灯未开电源或者模块准备就绪模块未准备就绪正在进样分析模块出错；所有模块红色，仪器有漏液——工作站图形颜色—模块未准备就绪模块准备就绪出错或者不能联机正在进样分析此模块没启用共12 页，第 3 页起草人：审核人：批准人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修订号批准日期执行日期6.2. 调谐开始抽真空之后至少要等4个小时或更长时间才能进行调谐或操作LC/MSD。
LCMSMS介绍
液相色谱—三重串联四级杆液质联用仪简介及使用情况安捷伦6460 LC/MS/MS配备安捷伦公司最新开发的喷射流离子聚焦离子源，将对复杂基质中痕量成分的质谱检测的灵敏度、提升到了业界同类仪器的最新高度。
三重串联四极杆质谱仪已广泛应用于食品安全、环境分析、药物代谢动力学研究、代谢物鉴定、杂质分析等多种领域；同时，在蛋白组学、代谢组学的研究中，也常用三重串联四极杆质谱仪进行方法和目标物的验证。
仪器主要特点：1. 灵敏度• 喷射流离子聚焦离子化技术，在提高雾化温度的同时，提高了电场密度，使离子化效率得以显著提升，并有效屏蔽基质干扰；此外，在高速鞘气流的作用下，离子云密度明显增加（离子聚焦），进而提高质谱取样效率；这些技术的进步，从离子生成和传输过程提高了质谱检测的灵敏度；同时，该离子源可在0.1-2.5mL/min的流速下操作，使其应用范围进一步扩大；• 芯片液相色谱技术，安捷伦独有的，业内最先进的纳流液相色谱。
将纳流分离与电喷雾离子化过程合二为一，完全消除管线连接等因素造成的柱外体积扩散；同时，在芯片上可以同时完成样品的富集、纯化和分离，从根本上有效解决了微量样品的进样以及痕量成分的高灵敏分离分析；• 经惰性处理的镀白金离子传输毛细管，消除电荷蓄积作用，同时保证在极性切换过程中不损失离子；安捷伦专利的RF离子透镜显著提高高质量端的离子传输；高效真空系统提高了离子平均自由程，将离子在传输过程中的损耗降低到最低；上述技术的综合运用，全面保证了离子传输效率的最大化，从而显著提高灵敏度；• 采用高频、小口径八极杆，更有效地聚焦离子成束，有助于MRM的高灵敏的采集；• 采用线性加速的高能碰撞六极杆反应池，有效消除背景噪音和“记忆效应”，从而保证了痕量样品快速、准确的分析结果；•6460 LC/MS/MS综合应用上述多种先进技术，从而达到了飞克（femtogram）级的检测限；线性范围达到106。
2. 准确度• 自动调谐：配合调谐溶液自动输送系统，软件控制的自动调谐，操作简便，无需其它装置或手工操作，最大限度提高用户的工作效率。
安捷伦液相色谱串联质谱仪技术参数
安捷伦液相色谱串联质谱仪技术参数摘要：一、安捷伦液相色谱串联质谱仪概述二、技术参数详解1.离子源2.质谱分析器3.液相色谱柱4.检测器5.数据处理系统三、应用领域四、安捷伦液相色谱串联质谱仪的优点正文：一、安捷伦液相色谱串联质谱仪概述安捷伦液相色谱串联质谱仪是一种高性能的分析仪器，它将液相色谱和质谱技术相结合，可以对复杂的样品进行快速、准确的分析。
这种仪器广泛应用于生物、化学、环境、食品等多个领域。
二、技术参数详解1.离子源：安捷伦液相色谱串联质谱仪采用电喷雾离子源，能够将样品充分离子化，提高分析的灵敏度和准确度。
2.质谱分析器：采用四级杆质谱分析器，可以对离子进行精确的质量分析，同时具有高信噪比和高分辨率的特点。
3.液相色谱柱：根据不同的应用需求，可以选择不同类型的液相色谱柱，例如反相柱、正相柱、离子交换柱等。
4.检测器：采用紫外检测器或者荧光检测器，可以对样品进行快速、准确的检测。
5.数据处理系统：安捷伦液相色谱串联质谱仪配有强大的数据处理系统，可以对数据进行实时处理和分析，提供清晰的数据报告。
三、应用领域安捷伦液相色谱串联质谱仪广泛应用于生物、化学、环境、食品等多个领域，例如蛋白质分析、药物研发、环境监测、食品安全等。
四、安捷伦液相色谱串联质谱仪的优点安捷伦液相色谱串联质谱仪具有以下优点：1.高灵敏度：采用电喷雾离子源，可以对样品进行充分离子化，提高分析的灵敏度。
2.高分辨率：采用四级杆质谱分析器，可以对离子进行精确的质量分析，同时具有高信噪比和高分辨率的特点。
3.灵活性：根据不同的应用需求，可以选择不同类型的液相色谱柱和检测器，提高分析的准确度和效率。
4.易于操作：安捷伦液相色谱串联质谱仪配有友好的用户界面，操作简便，容易上手。
安捷伦超高效液相色谱-三重四级杆质谱仪器讲解
液质联用仪本实验室使用的液质联用仪是安捷伦公司6400系列的一款产品，包括超高效液相色谱1290和质谱主机G6460，以及与其配套的计算机和打印机，他们之间通过网络协议通讯，并通过网络交换机连接在一起。
本仪器于2014年年初安装使用，价值两百多万元。
物质只要能溶于液体，均可以被检测。
本实验室主要用于农产品样品的农药残留定性检测，超高效液相色谱1290是整个系统的分离和进样装置，样品在色谱柱中经初步分离，通过接口进入质谱。
质谱以离子源、质量分析器和检测器为核心。
离子源是将分析物中的中性化合物离子化，并将产生的离子在电场的作用下进入离子传输毛细管。
离子传输毛细管是离子的导入通道，它将离子源产生的离子传输进入质谱，同时，隔绝了外部的常压与质谱内部的高真空。
离子通过毛细管后，进入离子光学组件，它包括skimmer1，八极杆以及lens1和lens2，进一步除去了溶剂以及中性分子，也是一个高效的离子传输组件，并聚焦随机运动的离子进入三重四极杆质量分析器。
G6460的质量分析器是三重四级杆，是由三组四极杆空间串联而成，一个质谱就是一个四级杆，所以三重四级杆质谱是空间串联的多级质谱分析，也叫做QQQ质谱。
第一个四级杆根据设定的质合比范围扫描和选择所需的离子。
第二个四级杆，也称碰撞池，用于聚集和传送离子。
在选择离子飞行的途中，引入碰撞气体氮气，第三个四级杆用于分析在碰撞池中产生的碎片离子。
实际上，碰撞池采用了六极杆的设计，拥有更好的聚焦及传输功能，四级杆就被淘汰了，但还沿用三重四级杆的名称。
G6460质谱的检测器包括高能打拿极和电子倍增器，此外，质谱需要在真空环境下工作，它的真空系统由前级真空泵和分子涡轮泵组成，前级真空一般在 1.8-2.5Torr之间，高真空在1.9-2.3*10-5Torr之间。
原理：它以液相色谱作为分离系统，质谱为检测系统。
样品在质谱部分和流动相分离，被离子化后，经质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器得到质谱图。
安捷伦-液质联用技术(LCMS)及其应用 (2)
+
溶剂蒸发
分析物离子
溶剂离子束
盐/离子对 中性化和物
+
Rayleigh Limit
Reached
++
++
+-+--+-- +++
+
++--++ ++-- ++
+
+
库仑爆炸 （Coulomb Explosions）
by Li Ping
+ 溶剂离子束 + 分析物离子
7
液质联用的电喷雾(ESI)接口
液相的入口 雾化气入口
m/z-->
350
400
450
500
550
600
650
700
by Li Ping
16
安捷伦液-质联用仪介绍
by Li Ping
17
液质(LC/MS)联用系统的示意图
离子源
离子束 聚焦
M/Z 分析器
检测器
LC 接口
HPLC
by Li Ping
数据 处理
Abund. 100 80 60 40 20 0 100
10
液质联用的大气压化学电离源(APCI)接口
锥孔
透镜
高能打拿极/ 电子倍增器
毛细管 八极杆 四极杆
+
+ +
+
++
+ + + + + + + ++
+
安捷伦 6475 三重四极杆液质联用系统说明书
IntroductionThe Agilent 6475 triple quadrupole LC/MS system delivers superior robustness, versatility, and sensitivity for targeted and routine trace-level applications. Built on a trusted ion optics platform, it contains a multitude of technological advantages, such as VacShield ion injection, an octupole ion guide, heated hyperbolic quadrupoles, a curved and tapered collision cell, and an advanced 20 kV detector assembly. This hardware is augmented by powerful and sophisticated onboard instrument intelligence, such as early maintenance feedback, intelligent reflex (iReflex) automated secondary injection, scheduled SWARM autotune/checktune, and a fully automated method optimizer. The combination of powerful hardware with sophisticated instrument intelligence will help you achieve peak analytical performance, high sample throughput, and confidence in your results.Agilent 6475 Triple QuadrupoleLC/MS SystemInstrument performance specifications2/chem/6475DE40499498This information is subject to change without notice.© Agilent Technologies, Inc. 2022Printed in the USA, May 23, 20225994-4930EN Ordering informationThe G6475AA must be ordered in conjunction with M5930AA or M5940AA depending on the need to operate on a local workstation configuration or networked workstation configuration.–Agilent 6475 triple quadrupole LC/MS system with AJS ion source and PC workstation (G6475AA)–Agilent MassHunter Workstation software for LC/TQ (M5930AA)–Agilent MassHunter Networked Workstation software for LC/TQ (M5940AA)DisclaimerPerformance and checkout at installation uses instrument detection limit (IDL), which is a meaningful and statistically relevant measurement of instrument sensitivity. The signal-to-noise (S/N) ratio specification does not predict the limit of detection (LOD) or limit of quantitation (LOQ) for the system of user application. S/N applies only to the conditions or concentrations specified and cannot be extrapolated to any other conditions or concentrations. On-site demonstration of S/N must be purchased as an add-on, and will only be carried out on newly purchased standard Agilent 1260 Infinity II Prime or 1290 Infinity II LC systems with an Ultra Clean tubing kit.Accessories and other featuresPhysical instrument specifications。
超高分辨率 Q-TOF 液 质联用系统和精 确质量数用于环境 …
超高分辨率Q-TOF 液-质联用系统和精确质量数用于环境样品的分析：怎样的分辨率能够满足要求？作者Imma Ferrer and E. Michael Thurman 环境质谱中心环境工程系美国科罗拉多大学科罗拉多州博尔德市80309Jerry Zweigenbaum安捷伦科技公司威尔明顿，DE 19808应用简报食品安全和环境分析摘要本研究利用安捷伦1290 Infinity 液相色谱/6540 精确质量数Q-TOF 液质联用系统测定分析水样中磺胺类抗生素和合成代谢类固醇的高分辨率和高质量精度。
首次在四极杆-飞行时间质谱仪上，用高分辨（> 20000 FWHM）进行了符合欧盟关于禁用药物的鉴定点要求的分析。
前言欧盟对于高分辨质谱分析食品和食物产品中禁用兽药的要求是，在10% 峰谷的分辨率大于10000。
这相当于使用半峰宽（FWHM）时的分辨率是20000[1]。
对于精确质量数，每个离子的鉴定点是2 或是2.5，如二级质谱分析，其总鉴定点是4，因此可以对化合物进行确认定性分析[1]。
已经利用系统被用于环境水样中的鉴定点概念发表了几篇用Q-TOF 分析水样的文章[2]。
然而，在所有发表的TOF 应用中，10% 峰谷的分辨率都没有满足大于10000（20000 FWHM）的最低要求条件。
其原因是，飞行时间质谱在分辨率为20000（FWHM）时无法分开小分子的碎片离子（m/z小于150 的离子）。
本应用简报介绍了使用超高分辨率的安捷伦6540 精确质量数Q-TOF 液-质联用系统用于分析液体样品中的抗生素、合成代谢类固醇和其它药物，其在10% 峰谷的分辨率轻松超过大于10000（20000 FWHM）的要求。
安捷伦喷射流离子聚焦串联四极杆质谱的条件：鞘流气温度是375 ºC ，鞘流气流速11 L/min ，干燥气温度250 ºC ，干燥气流速10 L/min ，雾化器压力45 psi ，毛细管电压4000 V （正离子模式），喷嘴电压0 V 。
安捷伦1260infinity ii液质原理
安捷伦1260infinity ii液质原理
安捷伦1260 infinity II液质联用仪的原理是结合了液相色谱的高分离性能和质谱的高灵敏度检测能力，实现对复杂样品的高效分析。
其核心部件包括高压输液泵、进样阀、色谱柱、质谱检测器等。
具体来说，安捷伦1260 infinity II液质联用仪的工作流程如下：
流动相储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样阀进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内。
流动相带着样品在色谱柱中分离成单个组分，依次从柱内流出。
分离后的组分进入质谱检测器，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
通过这种方式，安捷伦1260 infinity II液质联用仪能够实现对复杂样品的高效分析，为科学研究、药物研发等领域提供了有力的分析手段。
安捷伦-液质联用技术(LCMS)及其应用
) y c n e u q e r f oi d a r a f o e d u til p m a k a e p ( V ) e g atl o v C D ( U
elopatcO
s e g atl o v c d d n a c a
reilpitluM nortcelE
rettuhS
d ei r a v e r a V d n a U : e g n a r g ni r u s a e m f o g ni n n a c S t f π � soc V + U
?
82
gniP iL yb
子离组 / 子离 个 03 � 组 05 集 采
子离负正集采时同
:
92
gniP iL yb
息 信片碎些一和量子 分得获时同是好最 . 物知未选筛常经我
:
DIC
图谱的下件条压 电撞碰同不在得获能 次一望希我 压电撞 碰的优最道知不我但 , 物知未选筛在正我
03
gniP iL yb
) S M( 仪 析 分 谱 质t
体 气 量 大 生 产 后 发 挥 相 动 流y 物 合 混 离 分 效 高y
)SM(
)CLPH(
) C L P H( 相 液t
4
gniP iL yb
)IcPA( 源离电学化压气大 · )ISE( 雾喷电 ·
法 方的用常最前目 :)IPA( 源离电压气大 Ë )IBP( 束子粒 Ë 用使少 很经已 : 口接 SM-CL )PST( 雾喷热 Ë 用停经已前目 :SM-CL 的式 )tleb gnivom( 带送传 Ë
样合混示演物药胺磺
nacS/MIS :
43
gniP iL yb
安捷伦-液质联用技术(LCMS)及其应用
含有气溶胶的分析物
[溶剂+H]++M--------->溶剂 +[M]+
溶剂在蒸发 器中蒸发
+
++ ++
+
+
+
+
+ +
+
+ +
++
++
+ +
++
+
电荷转移至 分 析物分子
蒸汽
通过电晕针放电形 成带电荷的反应剂 离子
流动相
分析物
++ + ++
分析物离子
by Li Ping
High fragmentor: 130 V
1
2
3
4
5
6
7 min
by Li Ping
108.1 218.1
245.1 311.1
156.1
100
200
300
m/z
31
312.1
可同时采集多种质谱信号: SIM/Scan
SIM 来定量所选的目 标化合物离子
对未知的化合物 SCAN
by Li Ping
40000
20000
100
200
300
m/z
1
2
3
4
5
min
by Li Ping
33
可同时采集多种质谱信号: 时间编程信号
Improve data quality and manage data file size:
液质联用仪原理与操作注意事项安捷伦6410
3
和键合相的坍塌。（特殊柱子除外，如T3柱， 因具有三相键合相，所以高耐水性，用于分
析丙酸、EDTA、三聚氰胺等）
三、液质操作系统的注意事项
紫外检测器 UV
检
测
质谱检测器 MS
器
的
选
择
二极管阵列 检测器DAD
示差检测器 RID
荧光检测器 FLD
蒸发光散色 检测器ELSD
三、液质操作系统的注意事项
不能使用的溶
剂添加剂
3
4 溶剂截止波长
三、液质操作系统的注意事项
反
1
色谱柱根据键合相的不同可分为氨基柱、C8、 C18、C30柱等等
相
色
谱 柱
色谱柱使用完要冲洗，特别是使用缓冲盐分
2
析样品时，原则上用于冲洗的流动相中水的 比例应该等于或高于分析时所用流动相中水
的比例。
严禁用纯水冲洗柱子，易造成固定相的流失
库伦爆炸
原理：带有被测物质离子的流动相在雾化针尖端发生雾化， 液滴表面富集带同种电荷的离子，内部带相反电荷聚集， 形成带电液滴细的喷雾，在电场的作用下，飞向毛细管。 加热的氮气干燥气体反向流动，带走液滴中的中性溶剂分 子，从而收缩液滴，直至排斥的静电力超过液滴表面张力， 引起库伦爆炸，过程不断重复，待分析物离子最终变成气 态进入毛细管。
动 相
过膜处理
1
2 缓冲盐的使用
•LC/MS中不能使用磷酸盐、 硼酸盐、硫酸盐、三氟乙 酸、三乙胺，易残留，会 形成强离子对，产生离子
抑制，降低灵敏度
•溶剂的截止波长：乙腈 /190nm,甲醇/210nm, 水/190nm.一般分析时样 品检测波长应至少大于所 用溶剂的截止波长20nm 以上，否则背景较高。
安捷伦液质联用
液相色谱-质谱联用仪的使用（Agilent LC-QQQ6490）文件编号：版次/修订次：编写：日期：审核：批准：批准日期：文件修订记录表修改序号修改章节号修改内容修改申请人批准人批准日期1 初稿作成初版制作。
年xx月xx日主要内容：仪器型号Agilent LC-QQQ6490硬件组成色谱系统、质谱系统软件组成数据采集系统、定性软件、定量软件方法建立材料的准备、初步方法的建立、方法的优化关机三大步一、仪器硬件组成1.色谱系统1.1流动相A.水溶剂：A1：纯水（避光，常更换，防止细菌滋生）A2：甲酸水、氨水等B.有机溶剂B1：纯乙腈、纯甲醇、纯异丙醇B2：含0.1%的甲酸乙腈溶液注：流动相越简单越好，避免加入无机盐（如H2SO4）甲醇与乙腈的比较：甲醇：与水相溶会发热；延滞性大，便宜；乙腈：溶解性不佳，乙腈会结晶；极性、溶解性和延滞性极性：水> 甲醇> 乙腈；延滞性（表面张力）：水> 甲醇> 乙腈；洗脱能力：甲醇、乙腈> 水流动相的配置：水相流动相通过0.22μm的膜以达到去除颗粒的目的。
超声（10 ~ 20min）以去除气泡；滤头应定期更换1.2色谱柱保护套（滤头、套管）注：进口：用扳手拧，出口管路应多留出一段），安装柱子时应避免这段管路。
色谱柱的冲洗：先用一定比例的流动相冲洗，再用纯有机溶剂进行冲洗；不用时，一般保存在规定的有机溶剂中。
C18柱（农药、兽药）：吸附中弱极性的物质；亲水性柱：三聚氰胺、PSP柱规格：10 cm × 2.4~3.0 μm，0.2 ~0.3 mL/min ；5 cm × 1.8μ m 0.2 mL/min ，其中柱压一般不超过350 bar.一旦出现：柱压高：堵塞（系统+柱子）；柱压低：漏气（系统+柱子）1.3六通阀1.4梯度洗脱注：从低比例有机溶剂的流动相开始，更改比例，但不要改变流速。
阶段A ：现将柱子里、管路中极性杂质先冲出，如水中的极性物质；阶段B:有机溶剂比例的提升阶段，分离被测液中的各组分，加强被分离组分与流动相的作 用力；对于多组分的分离，更改梯度的斜率，但都是使有机溶剂的比例； 阶段C ：稳定阶段：要有足够的时间使众多的弱极性杂质； 阶段D ：为下一针做着准备。
液质联用仪基本介绍与应用技术【参考仅供】
不加热ESI的最佳流速是1—50ul／min，目前多用l—2.1mm微柱； TIS源最高允许lml／min，建议使用200—400ul／min； APCI的最佳流速～lml／min，常规的直径4.6mm柱最合适。 为了提高分析效率，常采用＜ 100 mm 的短柱。
4.辅助气体流量和温度的选择
操作中温度一般选择高于分析物的沸点 20℃ 左右即可。对 热不稳定性化合物，要选用更低的温度以避免显著的分解。
医学参考A
25
五、质谱仪基本操作
以安捷伦6400系列质谱仪为例：
• 1. 分别打开计算机、网络交换机（LAN Switch）电源、液相电源
• 2. 打开质谱前面左下角的电源开关，等待大约两分钟，听到第
大气压化学电离离子源技术20医学参考a毛细管碎片碰撞电压cidcoronaneedle锥孔透镜四极杆八极杆热氮气液质联用的大气压化学电离源apci接口高能打拿极电子倍增器21医学参考a?离子化方式不同?esi在溶液中进行离子化?apci在气相中进行离子化?分析样品类型不同?esi极性化合物和生物大分子?apci弱极性化合物小分子化合物相对于esi方式而言并有一定的挥发性?要求的流动相流速不同?esi0001to03mlmin?apci02to2mlminesi和apci的区别22医学参考a其他事项?1
开
二声溶剂阀切换的声音(表明质谱自检完成)后，可以联机。
机
步
• 3.质谱一接通电源，前级真空规就开始工作，监视前级真空值。
骤
• 4. 在计算机桌面上双击MassHunter
采集软件图标，进入
MassHunter工作站。
• 5.确认氮气气源输出已经打开，气体输出压力为90 psi。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
Agilent 1100 Series LC/MSD 系统操作规程
部门：药学院仪器测试中心
实施日期：2012年12月25日
Agilent 1100 Series LC/MSD系统操作规程
1. 基本操作
1.1 色谱柱的选择和安装：根据色谱条件选择合适的色谱柱，根据需要确定是否安装预柱或保护柱，阅读说明书后，与色谱柱一起安装入色谱系统中。
1.2 开机准备：使用前把各流动相加入相应的试剂瓶中。
仪器使用间隔两天以上，实验前须用有机溶剂冲洗泵，冲洗方法为：打开系统全部电源，启动色谱工作站，打开排气阀，以5mL/min流速冲洗泵约5min，溶剂用量相当于2倍泵的容积。
1.3 设置流动相试剂容积；根据所用的色谱条件设置流动相组成、流速；设置柱温，一般不得超过40℃。
1.4 柱平衡：调整流速后，关闭排气阀，让流动相进入色谱柱，经一段时间（约相当于三倍的柱体积）后达到平衡，一般需30min 以上，或根据检测器的基线变化调整平衡时间。
1.5 质谱检测器的设置：根据预期的分子量范围选择扫描范围，根据官能团结构和性质选择扫描模式（正离子或负离子）。
根据扫描所得的结果确定SIM方式。
1.6 进样：柱平衡后，经处理后的样品，设置自动进样。
1.7 检测数据处理：数据采集完毕后，进入Data Analysis 即可进行数据分析。
设置色谱峰处理的积分条件，设置数据报告的输出样式。
1.8 以保留时间和分子量作为定性依据，峰面积或峰高作为定量依据。
1.9 每次进样须经一定时间间隔后，确定系统没有杂质保留，基线走稳后方可进行下个样品的进样。
1.10 检测方法的编辑：对于已建立检测方法的药品，以上条件和设置经编辑后作为该药品的检测方法保存。
以后只要调用该方法即可，不用再重复设置。
1.11 检测结束后，调用Wash方法冲洗系统。
2. 色谱工作站（CHEMSTATION）的使用
2.1 安装
色谱工作站软件已经安装，可正常使用。
如遇到损坏不能正常使用时，应及时报告管理人员，由管理人员重新进行安装。
2.2 使用
工作站正常运行后会生成两个快捷方式，分别为Online（在线）和Offline（离线），在线用
于操作HPLC，离线用于在不连接HPLC设备的情况下读取和处理色谱数据。
2.3 开机和结束实验
开机：打开设备电源和计算机→ 输入Pass word：3000hanover→ 待屏幕下方GAG Bootp Server出现→ 等待5分钟→ 双击instrument online→ 等待仪器所有在线图标出现→ 编辑或调用方法→ 按Start运行所编辑的方法。
结束实验：实验完毕时按图标上off按钮，使泵和检测器关闭，质谱检测器处于standby状态即可。
2.4 关机
冲洗色谱柱，排出流路中可能有的缓冲液→ 在View栏中进入Diagnosis界面→ 点Maintenance进入MSD V ent→ 将rough pump顺时针关闭→ 点击Start放真空→ 真空度放空后按Close→ 回到Methord and Run control界面→ 退出工作站，关闭整个系统。
3. 注意事项
3.1 所有的溶剂均选用HPLC级试剂。
3.2 禁止使用含不挥发性缓冲盐的流动相。
如含有挥发性缓冲盐，必须用5%甲醇或5%乙腈过渡冲洗，且缓冲液浓度一般不高于20mmol。
水相流动相需经常更换，防止长菌变质。
3.3 样品均用0.45μm的滤膜过滤后才可进样。
3.4 质谱的真空度一般要大于10-6PSI，才可正常工作。
3.5 关闭质谱检测器必须按一定的程序进行，此项操作由管理人员执行，仪器使用者不得随意关闭质谱检测器电源。
3.6 若需运行sequence程序，按sequence table 进行编辑，运行前务必确认sequence parameter下的subdirectory，以免覆盖其他文件。