浙江大学生物化学丙实验报告1
生物化学实验报告格式
生物化学实验报告格式第一篇：生物化学实验报告格式《生物化学实验》实验报告本专业班级姓名学号目录实验一基本操作实验二血糖测定实验三血清谷丙转氨酶的测定实验四血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验五凝胶层析（分子筛层析）实验六饱食和饥饿对白鼠肝糖原含量的比较实验七血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳实验八分离纯化基因组DNA（一）实验九分离纯化基因组DNA（二）实验十 PCR实验十一琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物实验题目1.实验目的2.实验原理3.实验步骤4.实验数据及处理（或实验现象及分析）5.结论6.讨论《生物化学实验》预习与原始记录本专业班级姓名学号目录实验一基本操作实验二血糖测定实验三血清谷丙转氨酶的测定实验四血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验五凝胶层析（分子筛层析）实验六饱食和饥饿对白鼠肝糖原含量的比较实验七血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳实验八分离纯化基因组DNA（一）实验九分离纯化基因组DNA（二）实验十 PCR实验十一琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物实验题目1.预习报告1.1实验目的1.2实验流程1.3 预计结果1.4注意事项2.实验原始数据记录（或实验现象）第二篇：彭文豪运动生物化学实验报告用pH试纸检测晨尿的酸碱度实验报告课程：运动生物化学实验名称：用pH试纸检测晨尿的酸碱度实验实验时间：2013年4月18日实验地点：长江大学新体育馆姓名：彭文豪班级：体教11001班学号：201000290得分：实验目的：学习并掌握如何用pH试纸检测晨尿的酸碱度，讨论尿液的成分以及24训小时练对尿液成分的影响。
实验原理： pH试纸是用来检测液体或气体酸碱度的工具,pH 英文全名hydrogen ion concentration，氢离子浓度指数。
这是一种现成的试纸，想要使用时，撕下一条，放在平整的玻璃器上。
然后用一支干燥的玻璃棒或滴管从玻璃容器中蘸取一滴溶液滴到pH试纸的中部,从它的颜色变化中可以知道溶液的酸碱度。
pH试纸遇酸变红，遇碱变蓝。
浙江大学氨基移换反应及其产物的鉴定实验报告
实验报告课程名称： 生物化学实验（丙） 指导老师： 成绩： 实验名称： 氨基移换反应及其产物的鉴定 实验类型： 定量实验 同组学生姓名： 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填） 三、主要仪器设备（必填） 四、操作方法和实验步骤 五、实验数据记录和处理 六、实验结果与分析（必填） 七、讨论、心得一、 实验目的和要求1、学习鉴定氨基移换反应的简便方法及其原理；2、学习纸层析的原理和操作技术；二、 实验内容和原理1、氨基移换反应：氨基移换反应是在氨基移换酶（转氨酶)的催化下，氨基酸的α-氨基和α-酮酸的α-酮基之间发生的互换反应。
任何一种氨基酸进行转氨作用时都由其专一的转氨酶催化，转氨酶的最适pH 接近7.4，在各种转氨酶中，谷丙转氨酶（glutamic pyruvic transaminase, GPT ）和谷草转氨酶（glutamic oxalacetic transaminase,GOT ）的活性最强。
转氨作用主要发生在肝脏中。
转氨酶广泛存在于机体的各种组织中。
在肝、心、肾等组织中谷丙转氨酶（GPT ）、谷草转氨酶（GOT ）活性较高。
2、GPT 催化下的转氨作用装订线L －谷氨酸脱氢酶在体内特别是在肝细胞内含量丰富，活性高，催化L －谷氨酸氧化脱－NH 2，加碘乙酸能抑制其活性，从而可以保护氨基移换反应的产物L －谷氨酸。
3、纸层析原理本实验用纸层析法，检查由丙氨酸和α—酮戊二酸在肝细胞谷丙转氨酶（GPT) 的作用下所生成的谷氨酸，证明组织内的氨基移换作用。
滤纸层析是以滤纸作为惰性支持物的分配层析，是利用不同物质在两个互不相溶的溶剂中分配情况（溶解度）的不同来分离混合物的一种技术。
层析溶剂是由有机溶剂和水组成。
由于滤纸纤维上羟基具有亲水性，因此吸附一层水作为固定相，而通常把有机溶剂作为流动相。
在进行分离时，由于被分离物质的组分在两相中的分布不同，随着流动相的移动，物质将在两相间进行连续的、动态的不断分配，从而造成不同组分移动的速度也不相同。
浙江大学生物化学丙实验报告3、4
实验报告课程名称： 生物化学实验（丙） 指导老师： 方祥年 成绩：__________________ 实验名称： 蔗糖酶蛋白含量的测定、蔗糖酶活力测定及其分离纯化效果的评价同组学生姓名： 金宇尊、鲍其琛、袁平、朱耀仁、蔡玉林 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填）三、实验材料与试剂（必填） 四、实验器材与仪器（必填） 五、操作方法和实验步骤（必填） 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析（必填） 八、讨论、心得一、实验目的和要求1、蔗糖酶蛋白含量的测定——Folin-酚法①学习Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法；②掌握分光光度法制作标准曲线，准确测定未知样品的蛋白质含量； ③掌握分光光度计的使用方法。
2、蔗糖酶活力测定——3.5－二硝基水杨酸法 ①掌握酶活力测定的基本原理和方法； ②学习酶的比活力的计算。
二、实验内容和原理1、Folin-酚测定法Folin-酚试剂是由甲、乙两种试剂组成的。
甲试剂由碳酸钠、氢氧化钠、硫酸铜和酒石酸钾钠组成，在碱性条件下蛋白质中的肽键与酒石酸钾钠铜盐起作用，生成紫红色络合物；乙试剂是由磷钼酸和磷钨酸、硫酸、溴等组成，在碱性条件下，铜-蛋白质络合物以及蛋白质中的酪氨酸残基（酚基）和色氨酸还原磷钼酸-磷钨酸试剂（乙试剂）产生深蓝色（钼蓝和钨蓝的混合物），其色泽深浅与蛋白质含量成正比。
可用500nm 波长比色测定，适于测定蛋白质含量0.05～0.5g/L 。
优点： 简单、迅速、灵敏度高；反应较稳定。
缺点： 该反应受多种因素的干扰。
2、蔗糖酶活力测定蔗糖酶（β-D-呋喃型果糖苷-果糖水解酶EC 3.2.1.26），是一种水解酶。
它能催化非还原性双糖（蔗糖）的1,2－糖苷键裂解，将蔗糖水解为等量的葡萄糖和果糖（还原糖）。
因此，每水解1mol 蔗糖，就能生成2mol 还原糖。
还原糖的测定有多种方法，例如：纳尔逊－索模吉试剂比色法，斐林试剂法等。
生化丙实验报告
实验名称：蔗糖酶蛋白含量的测定、蔗糖酶活力测定及其分离纯化效果的评价一、实验目的和要求1. 学习Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法；2. 掌握分光光度法制作标准曲线，准确测定未知样品的蛋白质含量；3. 掌握分光光度计的使用方法；4. 掌握酶活力测定的基本原理和方法；5. 学习酶的比活力计算；6. 了解蔗糖酶分离纯化的原理和操作方法。
二、实验内容和原理1. Folin-酚测定法Folin-酚试剂由甲、乙两种试剂组成。
甲试剂由碳酸钠、氢氧化钠、硫酸铜和酒石酸钾钠组成，在碱性条件下蛋白质中的肽键与酒石酸钾钠铜盐起作用，生成紫红色络合物；乙试剂由磷钼酸和磷钨酸、硫酸、溴等组成，在碱性条件下，铜-蛋白质络合物以及蛋白质中的酪氨酸残基（酚基）和色氨酸还原磷钼酸-磷钨酸试剂（乙试剂）产生深蓝色（钼蓝和钨蓝）。
2. 蔗糖酶活力测定3.5二硝基水杨酸法（DNS法）是测定酶活力的一种常用方法。
DNS试剂在碱性条件下与还原糖反应生成橙黄色物质，其颜色深浅与还原糖的浓度成正比。
通过测定DNS反应液的颜色深浅，可以计算出酶活力。
3. 蔗糖酶分离纯化蔗糖酶分离纯化常用的方法有：凝胶过滤、离子交换、亲和层析等。
本实验采用凝胶过滤法进行蔗糖酶的分离纯化。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：蔗糖酶、牛血清白蛋白、标准蛋白质溶液、蔗糖溶液、葡萄糖溶液、DNS试剂、Folin-酚试剂等。
2. 试剂：碳酸钠、氢氧化钠、硫酸铜、酒石酸钾钠、磷钼酸、磷钨酸、硫酸、溴、苯酚、浓盐酸、无水乙醇等。
四、实验器材与仪器1. 仪器：分光光度计、恒温水浴锅、离心机、电子天平、移液器、试管、试管架、烧杯、滴定管、比色皿等。
2. 器材：凝胶过滤柱、离子交换柱、亲和层析柱等。
五、操作方法和实验步骤1. 蔗糖酶蛋白含量的测定（1）制备标准曲线：将标准蛋白质溶液分别稀释成不同浓度，取一定量加入Folin-酚试剂，按照实验原理进行显色反应，在540 nm波长下测定吸光度，绘制标准曲线。
生物化学实践报告(2篇)
第1篇一、实验目的本次实验旨在通过生物化学实验，加深对生物大分子结构和功能的理解，掌握蛋白质、核酸等生物大分子的提取、分离和鉴定方法，并学会使用相应的实验技术和仪器。
二、实验原理1. 蛋白质的提取与鉴定：蛋白质是生命活动中的重要物质，其提取和鉴定是生物化学研究的重要内容。
本实验通过蛋白质的盐析、电泳等方法，实现对蛋白质的提取和鉴定。
2. 核酸的提取与鉴定：核酸是生物遗传信息的携带者，其提取和鉴定对于研究生物遗传具有重要意义。
本实验通过酚-氯仿法提取DNA，通过比色法测定DNA的浓度。
3. 酶的活性测定：酶是生物体内催化反应的催化剂，其活性测定是研究酶的重要方法。
本实验通过测定酶促反应速率，计算酶的活性。
三、实验材料与仪器1. 材料：新鲜动物组织、化学试剂、缓冲液、电泳凝胶等。
2. 仪器：高速离心机、电泳仪、分光光度计、显微镜等。
四、实验步骤1. 蛋白质的提取与鉴定（1）取一定量新鲜动物组织，加入适量缓冲液，研磨。
（2）将研磨液离心，取上清液即为蛋白质提取液。
（3）将蛋白质提取液加入等体积的95%乙醇，混匀，静置。
（4）取沉淀，用少量双蒸水洗涤，干燥，溶解于适量双蒸水中。
（5）将蛋白质溶液进行SDS-PAGE电泳，观察蛋白质条带。
2. 核酸的提取与鉴定（1）取一定量新鲜动物组织，加入适量缓冲液，研磨。
（2）将研磨液加入等体积的酚-氯仿，混匀，静置。
（3）取上清液，加入等体积的异丙醇，混匀，静置。
（4）取沉淀，用少量双蒸水洗涤，干燥，溶解于适量双蒸水中。
（5）用分光光度计测定DNA的浓度。
3. 酶的活性测定（1）配制底物溶液。
（2）将底物溶液加入酶溶液，记录反应速率。
（3）根据反应速率计算酶的活性。
五、实验结果与分析1. 蛋白质的提取与鉴定：通过SDS-PAGE电泳，成功分离出多条蛋白质条带，表明实验中成功提取了蛋白质。
2. 核酸的提取与鉴定：通过比色法测定，成功提取出DNA，浓度为0.5μg/μL。
生化实验科研型实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握生化实验的基本操作技能。
2. 学习蛋白质的提取、纯化和鉴定方法。
3. 了解生化实验在科学研究中的应用。
二、实验原理蛋白质是生命活动的重要物质基础，其结构和功能与生物体的各种生命活动密切相关。
蛋白质的提取、纯化和鉴定是研究蛋白质的重要手段。
本实验通过以下步骤实现蛋白质的提取、纯化和鉴定：1. 蛋白质提取：利用组织匀浆法将细胞中的蛋白质提取出来。
2. 蛋白质纯化：通过硫酸铵盐析、凝胶色谱等方法将蛋白质进行纯化。
3. 蛋白质鉴定：通过SDS-PAGE电泳、Western blot等方法对纯化的蛋白质进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 细胞样本- 生理盐水- 硫酸铵- 丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、十二烷基硫酸钠（SDS）- 氨水、盐酸- 考马斯亮蓝G-250- 牛血清白蛋白（BSA）- 兔抗人抗体- 辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗- X射线胶片- 紫外分光光度计- 电泳仪- 凝胶成像系统2. 实验仪器：- 组织匀浆器- 离心机- 低温冰箱- 紫外可见分光光度计- 凝胶电泳仪- 显微镜四、实验方法与步骤1. 蛋白质提取：- 将细胞样本用生理盐水洗涤，然后用组织匀浆器进行匀浆。
- 将匀浆液离心，取上清液即为粗提蛋白。
2. 蛋白质纯化：- 将粗提蛋白用硫酸铵盐析，得到盐析蛋白。
- 将盐析蛋白用凝胶色谱法进行纯化，得到纯化蛋白。
3. 蛋白质鉴定：- 将纯化蛋白进行SDS-PAGE电泳，观察蛋白质条带。
- 将电泳后的蛋白质转印到NC膜上，进行Western blot实验。
- 将Western blot结果进行显影，观察蛋白质条带。
五、实验结果与分析1. 蛋白质提取：- 匀浆液离心后，上清液呈淡黄色，说明蛋白质提取成功。
2. 蛋白质纯化：- 盐析实验后，观察到沉淀和上清液，说明蛋白质发生盐析。
- 凝胶色谱实验后，观察到单一的蛋白质条带，说明蛋白质得到纯化。
3. 蛋白质鉴定：- SDS-PAGE电泳结果显示，蛋白质分子量约为50kDa，与预期相符。
浙江大学生物化学实验甲SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量
SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法 测定蛋白质的分子量
• 这样的蛋白质- SDS复合物在凝胶中的迁移率，不 再受蛋白质原有电荷和形状的影响，而只是椭圆棒 的长度，也就是蛋白质分子量的函数。
• 当蛋白质的分子量在15000~200000D之间时，蛋白 质分子的电泳迁移率与分子量的对数呈线性关系， 符合下列方程式：
SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法 测定蛋白质的分子量
1.1、原理
• 电泳法分离、检测蛋白质混合样品，主要是根据各 蛋白质组分的分子大小和形状以及所带静电荷的多 少等因素所造成的电泳迁移率的差别。蛋白质分子 在外加电场下的泳动行为可用下列函数式表示：
EQ V=
6π rη
v：分子泳动速度
E：电场强度
η ：介质粘度
SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法 测定蛋白质的分子量
• 自由基引发的方式有化学法和光化学法两种，前者 的引发剂是过硫酸胺（AP），后者的引发剂是核 黄素（VitB2）。两种方法的催化剂都是四甲基乙 二胺（TEMED）。
• 在一定浓度范围内，改变聚合体系中Acr和Bis的比 例，可得到不同网眼大小的凝胶，由于凝胶的三维 网状结构，对在凝胶中泳动的不同分子量的质点有 着选择和阻碍，因此使凝胶本身又具有分子筛效应。
称取去脉叶片0.5g，加入0.05mol/L pH7.8的磷酸缓 冲液2ml，加石英砂少许研磨成匀浆，10000r/min 离心10min，上清备用。 ⑵、样品的处理 • 取30ul待测样品的上清于离心管中，加入30ul浓样 品溶解液，混匀，置于100℃水浴中保温3~5min， 取出冷却备用。
SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法 测定蛋白质的分子量
SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法 测定蛋白质的分子量
• 如将已知分子量的几种标准蛋白质的相对迁移率对 分子量作图，可获得一条标准曲线。未知蛋白质在 相同条件下进行电泳，根据它的电泳迁移率即可在 标准曲线上求得该蛋白质的分子量。
浙江大学生物化学丙实验报告
. .. . 实验报告课程名称： 生物化学实验（丙） 指导老师： 方祥年 实验名称： 离子交换柱层析分离纯化蔗糖酶 同组学生： 金宇尊、鲍其琛 一、实验目的和要求（必填） 二、实验容和原理（必填） 三、实验材料与试剂（必填） 四、实验器材与仪器（必填） 五、操作方法和实验步骤（必填） 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析（必填） 八、讨论、心得一、实验目的和要求1、学习离子交换层析的基本原理；2、学习离子交换层析分离蛋白质的基本方法和技术；3、学习蔗糖酶活性检测的基本原理和方法。
二、实验容和原理（1）实验原理 1、离子交换层析：以离子交换剂为固定相，液体为流动相进行。
离子交换剂与水溶液中离子或离子化合物的反应主要以离子交换方式进行，或者借助离子交换剂上电荷基团对溶液中离子或离子化合物的吸附作用进行。
这些过程都是可逆的。
在某一pH 值的溶液中，不同的蛋白质所带的电荷存在差异，因而与离子交换剂的亲和力就有区别。
当洗脱液的pH 改变或者盐的离子强度逐渐提高时，使某一种蛋白质的电荷被中和，与离子交换剂的亲和力降低，不同的蛋白质按所带电荷的强弱逐一被洗脱下来，达到分离的目的。
离子交换剂是由基质、电荷基团（或功能基团）和反离子构成。
基质 电荷基团 反离子 电荷基团反离子电荷基团反离子基质基质—＋—＋＋可逆交换可逆交换＋＋溶液中的离子（交联纤维素、交联葡聚糖、交联琼脂糖)— ——阳离阴离子交专业： 农业资源与环境姓名： 李佳怡学号： 3130100246 日期： 2015.5.19地点： 生物实验中心310 装订线由于蔗糖酶的pI偏酸性,所以在pH7.3 缓冲液的环境中，粗分离纯化样品蔗糖酶带负电荷，因此我们用阴离子交换剂达到分离蔗糖酶的目的。
2、酶活力检测(定性检测）蔗糖酶（β-D-呋喃型果糖苷-果糖水解酶EC 3.2.1.26），能催化非还原性双糖（蔗糖）裂解，将蔗糖水解为等量的葡萄糖和果糖。
本实验采用3.5－二硝基水酸法，其原理是3.5－二硝基水酸与还原糖共热（100℃）被还原成棕红色的氨基化合物，在一定围还原糖的量和反应液的颜色深度成正比，由此来确定并收集蔗糖酶纯化样品。
最新生物化学设计性实验报告
最新生物化学设计性实验报告实验目的：本实验旨在通过设计性实验，探究特定生物化学过程的机制和特点，验证理论假设，并培养学生的科研能力和实验技能。
实验背景：生物化学是研究生物体化学组成、化学变化及这些变化与生物体功能之间关系的科学。
设计性实验是生物化学教学和研究中的重要组成部分，它能够帮助学生更好地理解生物化学的基本概念，并通过实践活动加深对知识的掌握。
实验材料：1. 酶类样品2. 底物溶液3. 缓冲液4. 酶活性测定试剂盒5. 分光光度计6. 离心机7. 微量移液器8. 试管和比色皿9. 冰浴和恒温水浴实验方法：1. 预实验：首先对酶样品进行纯化，并通过酶活性测定初步了解其活性范围。
2. 实验设计：根据预实验结果，设计一系列实验，包括不同pH值、温度、底物浓度对酶活性的影响。
3. 实验操作：a. 准备一系列不同pH值的缓冲液，并调整酶样品和底物溶液至相应pH值。
b. 在不同温度下（如25℃、37℃、50℃）测定酶活性，记录数据。
c. 改变底物浓度，观察米氏常数（Km）和最大速率（Vmax）的变化。
4. 数据分析：利用图表和统计学方法分析实验数据，得出酶活性与实验条件之间的关系。
实验结果：1. pH值对酶活性的影响图显示，酶活性在特定pH值下达到最大，而在过高或过低的pH值下活性显著降低。
2. 温度对酶活性的影响图表明，酶活性随温度升高而增加，但在接近50℃时急剧下降，表明酶可能发生变性。
3. 底物浓度实验结果显示，当底物浓度增加到一定程度后，酶活性趋于平稳，计算得到的Km值与文献值相近。
讨论与结论：通过本实验，我们验证了酶活性受pH值、温度和底物浓度的影响。
实验结果与理论预期相符，表明设计性实验是理解和掌握生物化学原理的有效手段。
同时，实验过程中可能出现的误差和问题也为我们提供了宝贵的学习和改进机会。
浙江大学生物化学实验甲 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量 共18页
SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法 测定蛋白质的分子量
• 聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺（单体，Acr）和甲 叉双丙烯酰胺（双体，Bis）在催化剂（TEMED） 和引发剂（AP或VitB2）作用下聚合而成的三维网 状结构的凝胶。
• 单体和双体单独存在或混合在一起都是相对稳定的， 若有自由基存在则可引发二者的聚合。
相对迁移率mR = 样品迁移距离（cm） 染料迁移距离（cm）
分离胶
SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法 测定蛋白质的分子量
• 以标准蛋白质分子量的对数对相对迁移率作图， 绘制标准曲线。并根据待测样品的相对迁移率，从 标准曲线上查出其分子量。
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10%SDS
75 ul
TEMED（原液）
4 ul
H2O
3.5 ml
10%过硫酸铵（AP） 60 ul
4%浓缩胶 0.35ml
0.3 ml 25ul 5 ul 2.3 ml 25 ul
SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法 测定蛋白质的分子量
2、样品的提取及处理 ⑴、样品的提取 • 取新鲜叶片，冲洗干净，吸干表面水分，去掉叶脉，
SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法 测定蛋白质的分子量
• 聚丙烯酰胺凝胶电泳可分为连续和不连续系统两种， 不连续电泳系统是采用两种不同的缓冲液配制两种 不同浓度的凝胶，它可使样品在两层胶的界面处浓 缩，从而大达提高了电泳的分辨率，使之特别适用 于稀样品的分离。
• 聚丙烯酰胺凝胶电泳法的特点：简便、快速、重复 性好，只需几微克的样品即可进行测定。当分子量 范围在15000~200000D时，所测得的结果与用其它 方法测得的结果相比，误差一般不超过10%。
浙江大学生物化学丙实验报告5资料
实验报告课程名称： 生物化学实验（丙） 指导老师： 方祥年 成绩：__________________实验名称：蔗糖酶分离纯化产物的SDS －PAGE 检测分析及蛋白质相对分子质量测定 同组学生姓名： 金宇尊、鲍其琛 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填） 三、实验材料与试剂（必填） 四、实验器材与仪器（必填） 五、操作方法和实验步骤（必填） 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析（必填） 八、讨论、心得一、实验目的和要求1、学习SDS －聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE)的基本原理和操作方法2、蔗糖酶分离纯化产物的SDS －PAGE 检测分析3、学习测定蛋白质相对分子质量(Mr)的方法二、实验内容和原理（1）实验内容1、SDS －PAGE 凝胶制作；2、蔗糖酶分离纯化产物的SDS －PAGE 电泳分离；3、洗脱测定并计算相对分子质量。
（2）实验原理 1、电泳是带电颗粒在电场作用下，作定向运动即向着与其电荷相反的电极移动的现象。
2、电泳法分离、检测蛋白质混合样品主要是根据各蛋白质组分的分子大小和形状以及所带净电荷多少等因素所产生的电泳迁移率的差别。
3、区带电泳是样品物质在一惰性支持物上进行电泳,因电泳后，样品不同组分形成带状区间，故称区带电泳。
4、聚丙烯酰胺凝胶（PAG)由丙烯酰胺和交联试剂N,N ’-甲叉双丙烯酰胺(Bis)在有催化剂（如过硫酸铵或核黄素）和增速剂（如N,N,N ’,N ’-四甲基乙二胺，TEMED ）的情况下聚合而成的。
5、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是在恒定的、非解离的缓冲系统中来分离蛋白质，这主要是由蛋白质样品所带的电荷和分子质量的差异性进行分离；在电泳过程中仍保持蛋白质的天然构象、亚基之间的相互作用及其生物活性。
6、聚丙烯酰胺凝胶电泳可分为⑴连续系统凝胶缓冲液的pH值及凝胶浓度不变。
该电泳系统具有电荷效应、分子筛效应；⑵不连续系统凝胶缓冲离子成分、pH值、凝胶浓度、电位梯度不连续，由浓缩胶和分离胶组成。
（大学）生物化学实验报告
班级: 姓名：座号:实验一生物化学实验基本知识与操作一、课堂目标1．简述生化实验的五点基本知识2．动手练习三种吸量管的使用，培养严谨的科学态度3．选择弹动混匀法做操作练习，使试管内溶液混匀4．仔细观察老师使用离心机的示教过程，并练习使用。
二、生物化学实验基本知识1．实验前做好预习每次实验课前应首先复习与实验有关的理论知识，然后认真阅读实验指导，明确课时目标，了解实验原理、操作程序及实验中应注意的事项。
2．实验中要认真操作、仔细观察实验时要求学生严格按照实验指导和教师的要求，一丝不苟地进行操作，仔细观察和分析实验中出现的各种现象，如实地将实验结果、数据填写在记录本内。
3．正确使用和爱护仪器实验时须遵照教师要求，严格按操作规程正确使用每种仪器。
贵重仪器未经允许不得随意搬动，如不慎损坏，应及时报告指导老师。
4．保持实验室的整洁和秩序遵守实验室规则，实验时保持室内安静。
实验仪器及用具必须洁净，实验试剂的排列应整齐有序。
勿将试剂药品洒于桌面、地上或它处。
废物及强酸、强碱溶液应适当处理，以防堵塞和腐蚀水管。
实验结束，做好清洁工作，注意关断水，电源，关闭好门窗。
5．认真填写实验报告三、生物化学实验几项基本操作1．吸量管的选择和使用(1)刻度吸管常见容量有l0ml、5ml、2m1、1ml、0.5ml等数种。
通常将管身标明的总容量分刻度为100等分。
常选用与移取非整数量的试液，因厂家不同，有分刻度到尖端和刻度不到尖端的两种。
如刻度到管尖的，通常在管壁上标有“吹”字，放液时必须在容液流完后吹出残留于吸管尖端的试液。
使用前先认明。
(2)移液管吸管中间膨大，管壁只有一条总量标线，准确度较高，常用作移取整数量的试液。
常见规格有50ml、25m1、l0ml、5ml、2ml和lml等容量。
操作时在放出试液后，吸管尖端在容器内壁上仍要停留10~15秒钟。
以上两种吸管使用方法如下：用右手拇指和中指靠住吸管标线以上部分，将管尖插入所要移取的试液液面下约lcm处。
浙江大学生化实验报告
浙江大学生化实验报告1.引言1.1 概述概述部分：本实验旨在对浙江大学生化实验进行系统的记录与分析，通过实验结果展现实验的过程和成果，并对实验的意义和未来的发展进行展望。
该实验采用了一系列生化实验方法，旨在研究生物体内生化反应的机制和规律，为生物医学领域的研究和发展提供有力支持。
通过对实验背景、方法和结果的详细描述，本报告旨在为读者提供全面的实验信息，让读者更加深入地了解实验的过程和意义。
1.2 文章结构文章结构部分的内容应该包括对整篇文章的章节安排和内容概要的介绍。
可以简要描述每个章节的主题和重点，以便读者可以更好地理解整篇文章的结构和内容安排。
例如："文章结构部分将主要介绍本篇文章的整体结构和各个章节的主要内容，以便读者可以更好地理解全文的脉络。
引言部分将从概述、文章结构和目的三个方面介绍本篇文章的主题和写作目的。
正文部分将包括实验背景、实验方法和实验结果三个部分，分别介绍了实验的背景知识、实验的具体操作步骤以及实验结果的分析和讨论。
结论部分将对实验结果进行深入分析和总结，并展望未来可能的研究方向和发展趋势。
通过整体的文章结构，读者将更清晰地了解本篇文章的内容安排和逻辑脉络。
"1.3 目的：本次实验旨在探究特定生化反应的机理和影响因素，通过实验的进行，旨在深入了解该生化反应的特性和规律，从而为相关领域的研究和应用提供理论和实验基础。
同时，通过实验的设计和操作，培养学生的实验操作能力和科学思维，提高他们的实践能力和动手能力。
通过实验结果的分析和总结，使学生们对生化实验有一个更深入的理解和认识，为未来的学习和研究打下坚实的基础。
2.正文2.1 实验背景本次实验旨在探究生化领域相关的实验内容，通过对生物组织、酶活性、代谢途径等方面进行深入研究，加深对生化学原理的理解和掌握。
生化实验既是理论知识的延伸，也是对知识的实践检验，对于培养学生的实验操作能力和科学研究能力具有重要意义。
实验背景包括对常见的生化实验技术和实验原理的介绍，例如酶活性检测方法、代谢途径的测定方法等。
蛋白质化学2 浙江大学生物化学及实验(丙)课件
1.同源蛋白质：在进化上关联的蛋白质，它们在不同的物种 中行使
相似的功能。
Mar-HSC70 C. virginica HSC70 D.meldziogagter HSC70
M.sexta HSC70 M.mutfculud HSC70
HSC70
MA KA?
nonpolar side chain
polar side chain
1.肽键的结构: (1)部分双键性质，反式构象
(2)刚性平面，肽平面
事实上，肽键的构象是受限制的
+180
air 120
60
s①
浇
<D
0
-60
-120
-180
0
Ramchandran 图 6 i degrees)
-180
+180
Mar-HSP70 C.vlrqlnica HSP70
HSP70 M.sexta HSP70 M.musculud HSP70 H.sapiens HSP7O
MASKGP
EiiDAAKNQVM
“IDAAKNQVAN EL.GDAAKNQVAN
IfWAAKNQVAN KlpDAAKNQVAN RL GDAAKNQVAN
hydrogen
4.多肽链主链上的每个肽键中的 羰
基氧原子都与其后的第四个氨 基酸
trogen
残基上的酰胺基形成氢键。 氢键的 方向与螺旋轴平行。
(2) 0-折登(0-sheet)：是另种常见的二级结构。
反向平行
view
平行
view
(3)3-转角(p-turn):—种回转式的二级结构。
常见的生化实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 熟悉常见生化实验的操作步骤和原理。
2. 掌握实验数据的记录和分析方法。
3. 提高实验技能，培养严谨的科学态度。
二、实验原理生化实验是研究生物体内化学反应和代谢过程的重要手段。
本实验主要涉及以下常见生化实验：1. 蛋白质定量实验2. 酶活性测定实验3. 糖类鉴定实验4. 氨基酸分析实验三、实验材料与试剂1. 蛋白质定量实验- 蛋白质样品- 碘量法试剂（硫酸铜、碘化钾、淀粉溶液）- 0.1mol/L NaOH溶液2. 酶活性测定实验- 酶样品- 底物（如葡萄糖、尿素）- 酶活性测定试剂盒3. 糖类鉴定实验- 糖类样品- 糖类鉴定试剂（如斐林试剂、班氏试剂）- 0.1mol/L NaOH溶液4. 氨基酸分析实验- 氨基酸样品- 氨基酸分析试剂盒四、实验器材与仪器1. 电子天平2. 移液器3. 恒温水浴锅4. 紫外可见分光光度计5. 离心机6. 水浴锅五、实验步骤1. 蛋白质定量实验1.1 准备标准曲线：配制一系列已知浓度的蛋白质标准溶液，在特定波长下测定吸光度，绘制标准曲线。
1.2 测定样品蛋白质浓度：取一定量的蛋白质样品，按照标准曲线计算其浓度。
2. 酶活性测定实验2.1 酶样品制备：将酶样品与底物混合，在一定条件下反应，测定反应产物的生成量或消耗量。
2.2 酶活性计算：根据酶活性测定试剂盒提供的公式，计算酶活性。
3. 糖类鉴定实验3.1 准备样品：将糖类样品溶解在水中，制备成适当浓度的溶液。
3.2 糖类鉴定：取一定量的样品溶液，按照糖类鉴定试剂的操作步骤进行鉴定。
4. 氨基酸分析实验4.1 氨基酸样品制备：将氨基酸样品溶解在水中，制备成适当浓度的溶液。
4.2 氨基酸分析：按照氨基酸分析试剂盒的操作步骤进行分析。
六、实验数据记录和处理1. 记录实验数据：包括样品浓度、吸光度、反应时间、温度等。
2. 数据处理：将实验数据输入计算机，进行统计分析，得出结论。
七、实验结果与分析1. 蛋白质定量实验：根据标准曲线，计算出样品蛋白质的浓度。
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实验报告
课程名称： 生物化学实验（丙） 指导老师： 方祥年 成绩：__________________
实验名称： 蔗糖酶的提取 同组学生姓名： 金宇尊、鲍其琛
一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填）
三、实验材料与试剂（必填） 四、实验器材与仪器（必填）
五、操作方法和实验步骤（必填） 六、实验数据记录和处理
七、实验结果与分析（必填） 八、讨论、心得
一、实验目的和要求
1、学习掌握蔗糖酶的提取、分离纯化的基本原理和方法；
2、巩固理论知识，学会学以致用并发现新问题。
二、实验内容和原理 1、实验内容： 蔗糖酶的提取、分离纯化
2、实验原理：
①酵母细胞破碎
细胞破碎的常用方法非机械法液体剪切法固体剪切法压力和研磨物理法、化学渗透法、酶溶
本实验采用研磨的方法。
通过固体剪切法（研磨）将酵母细胞破碎，把蔗糖酶从酵母细胞中提取出来。
②蔗糖酶的初步分离纯化
蛋白酶常用的初步分离纯化方法有：盐析、选择性变性、有机溶剂沉淀等。
本实验采用选择性变性（加热）、有机溶剂（乙醇）沉淀等方法对蔗糖酶进行初步的提纯以及收集样品。
由于一般酶蛋白在常温下分离纯化过程中易变性失活，为了能获得尽可能高的产率和纯度，在提纯
操作中要始终保持酶的活性，如在低温下操作等，这样才能得到较好地分离提纯效果。
三、实验材料与试剂 专业： 农业资源与环境
姓名： 李佳怡
学号： 46
日期： 地点： 生物实验中心310 装
订
线
1、实验材料
市售干酵母粉 10g/组(3～4人）
2、实验试剂
石英砂，95%乙醇(-20℃），20mmol/L Tris-HCl 缓冲液。
四、实验器材与仪器
电子天平（称量干酵母粉）；研砵（每组一套）；50ml高速离心管（4支/组、4孔50ml离心管架一个/组）；托盘天平（离心管平衡用）；高速冷冻离心机；恒温水浴箱（50℃）；量筒（50ml）、微量移液枪（1000ul)及枪头或移液管（1ml)、玻棒、滴管等;离心管（留样品Ⅰ、Ⅱ用）及离心管架；制冰机；－20℃冰箱。
五、操作方法和实验步骤
1、酵母细胞破粹（干磨法）
①称量：称取市售干酵母粉10g+约3-5 g石英砂放入研钵
②研磨(干磨)：至尽可能成细粉末状（约15min）
③加液+研磨：量取总体积40 ml的20mmol/L Tris-HCl 缓冲液，分2次加研磨10min，
使呈糊状液体；
④离心：将糊状液体转移到2支50ml离心管中，两支离心管平衡后(托盘天平上)，离心10min
（条件：4℃、12000r/min）
⑤收集+测量：收集上清液并量出体积V1（样品I），另留1ml上清液（样品I ）放置－20℃冰箱保存用于蔗糖酶蛋白含量测定、蔗糖酶活力测定和SDS-PAGE分析
2、热处理
①水浴热处理：将上步抽提液（样品I），迅速放入50℃恒温水浴，保温30min，
并每隔5min用玻璃棒温和搅拌提取液。
②冰浴冷却：保温后迅速用冰浴冷却5min
③离心：将热处理后的样品I转移至两支50ml离心管中，平衡后，离心10min。
（条件：4℃，12000r/min）
④收集+测量：收集上清液并量出体积V2（样品Ⅱ），另留1ml上清液（样品Ⅱ）放置－20℃冰箱保存（用于蔗糖酶蛋白含量测定、测定蔗糖酶活力和SDS-PAGE分析。
3、有机溶剂（乙醇）沉淀
①冰浴：将热处理后的上清液加入相同体积的－20℃的95%乙醇，冰浴中温和搅动混匀，
放置约20min；
②离心：转移至两支50 ml离心管中，平衡后，离心10min；
（条件：4℃，12000r/min）
③收集保存：弃去上清液，用7 mL的20mmol/L Tris-HCl 缓冲液溶解沉淀
留出1mL溶液，并将余下溶液转移入7 mL塑料离心管，－20℃冰箱保存。
（用于实验2离子交换柱层析分离纯化蔗糖酶）
六、实验数据记录和处理
1、实验数据记录
石英砂：；
干酵母粉：；
Tris-HCl提取离心后上清液体积（样品Ⅰ）V1：；
样品Ⅰ热处理离心后上层清液体积（样品Ⅱ）V2：。
2、实验现象：
研磨过程：干酵母颜色变浅，散发出一股难闻的气味；
第一次离心后：上清液澄清颜色土黄色；下部沉淀分层，上层酵母细胞碎片等呈棕褐色，下层石英砂呈白色；
第二次离心后：上清液更加澄清橙黄色；沉淀为米白色，较第一次变浅；
第三次离心前：上清液柠檬黄，沉淀为米白色。
七、实验结果分析讨论
1、实验结果：
①经过研磨破碎的酵母提取液样品Ⅰ（1mL）；
②将样品Ⅰ经过热处理的样品Ⅱ（1mL）；
③经过选择性变形和有机溶剂沉淀处理过的样品Ⅱ，用 Tris-HCl 缓冲液溶解保存在一只7mL和一只1mL的离心管中（样品Ⅲ、Ⅳ）。
注意：所有收集样品均需在管壁外用油性记号笔做好标记，先放在一次性PE手套中，并放入-20 ℃冰箱中保存，用于后续实验。
2、结果分析：
①最后得到的两管沉淀，其中一管为米白色沉淀，另一管夹杂部分黄色沉淀，疑为杂质蛋白,或是由于在加入乙醇时体积比例没有调整好而造成，具体结果有待进一步检测。
②误差分析：
a：称量天平精确度不高，可能会对石英砂和干酵母的称量结果造成误差；
b:在研磨过程中，有少部分粉末洒出，存在操作误差；
c：在平衡过程中，为了保持平衡用胶头滴管在两支离心管之间进行调节，有部分溶液残留在胶头滴管里。
可以将所有的材料放进一支离心管，另外一支离心管加入水，通过改变水的含量达到平衡的效果，以此来减少误差。
八、讨论、心得
1、实验原理探析
①石英砂的作用：加入石英砂是为了在研磨过程中增大摩擦力，将酵母细胞充分研磨破裂，提取蔗糖酶；
②高温水浴：利用了蔗糖酶的耐热性（最受温度为45-50℃），可以在50℃的水浴热处理下将不耐热的杂蛋白去除；
③有机沉淀：乙醇提供疏水的环境，破除蛋白质外层的水膜，从而使提取的蔗糖酶聚集在一起沉淀分离；
④冰浴作用：使分子运动速度下降，再加以搅拌使之快速沉降。
⑤低温操作：防止操作过程温度升高引起有效成分变性。
2、思考题：本实验在从干酵母中提取和分离纯化蔗糖酶的过程中具体运用了哪些方法你认为还有哪些方法可以运用说说你的设想。
答：①在本次试验中采用机械法中固体剪切法的研磨法；分离纯化过程用了选择性变性（加热）、有机溶剂（乙醇）沉淀的方法，后通过离心达到真正分离纯化的目的。
②其他常用细胞破碎方法：液体剪切法中的超声波法、机械搅拌法、高压匀浆法以及固体剪切法中的压力法和非机械法中的溶胀和自溶、化学渗透和生物酶降解等。
由于蔗糖酶存在于细胞内部，所以需要将细胞破碎以获取蔗糖酶。
另外，浓缩方法有沉淀法、吸附法、超过滤法、透析法、减压蒸馏法、冰冻干燥法等。
不同的方法都各有优势和缺点，我们要根据不同的实验条件和要求、目的来选择较为适宜的方法。
（《生物化学技术原理及应用》赵永芳第四版）
3、实验感想
第一次做生化实验，感觉还是很新鲜。
在实验开始研磨的过程中，就有点被一股难闻的味道恶心到了。
之后在实验具体操作过程中，发现实验本身比较简单，所以即使第一次实验没有预习，还是能够很快的理解实验的内容。
但是之后的实验应该还是比较复杂的，所以需要我们好好预习，并进行一定的思考，以便在下次实验课上能充分的将理论课上所学知识应用到实验中去。