植物组织培养技术考试要点

名词解释

植物组织培养：是指植物的任何器官、组织或细胞，在人工预知的控制条件下，放在含有营养物质和植物生长调节物质等的培养基中，使其生长、分化，形成完整植株的过程。

培养基：是离体植物（外植体）赖以生长、分化的基础，是根据植物的需求，人工配制的含有各种营养成分的营养液。

污染：在组织培养过程中培养基和培养材料滋生杂菌，导致培养失败的现象。

褐变：在组培过程中，由培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢而死亡的现象。

玻璃化：当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。

脱分化：已有特定结构与功能的植物组织，在一定的条件下，细胞改变原来的分化状态，失去原来的结构和功能，转变为具有分生能力的细胞，这个过程称为脱分化。

再分化：在愈伤组织生长到一定阶段后即可通过更换培养基或改变培养条件，诱导促使其中的“芽点”或“原始胚状体”逐渐发育成一个幼小的植物体，这一过程就叫做再分化。

愈伤组织：植物各种器官的外植体在离体的条件下，细胞经脱分化等一系列过程，转变为分化细胞，继而转变形成一种能迅速增殖的无特定结构和功能的细胞团，称为愈伤组织。

驯化：开始继代培养要加入生长调节物质，其后加入少量或不加入生长调节物质就可以生长，这种现象称为“驯化”。

种质：亲代通过生殖细胞或体细胞传递给子代的遗传物质。

植物种质保存：利用天然或人工创造的适宜环境，使个体中含有的遗传物质保持其遗传完整性，有高的活力，能通过繁殖将其遗传特性传递下去。

常温保存：在常温（20±5）O C条件下，通过改变培养基中某些营养物质的浓度，改变培养的环境条件，可达到种质保存的目的。

低温保存：低温保存也称为缓慢生长保存，是通过改变培养基和环境条件使培养基的生长降到最低限度，又不致死亡，以达到延长保存时间的目的。

超低温保存：也称为冷冻保存，主要是指在液氮的超低温下使细胞代谢和生长处于基本停止的状态，在适宜的条件下细胞可迅速繁殖，再生出新的植株，并保持原来的遗传特性。

1、简述植物组织培养技术的主要特点。

（1）基础理论植物组培的基础理论是植物细胞全能性的理论，即每个细胞都拥有该物种的所有遗传信息，并在条件适合的情况下能够发挥该物种的各种功能和具有发育成为一个正常和完整的独立个体的能力。

（2）技术特点无菌培养和外植体培养

（3）生产特点①不占用耕地，生产不受季节控制②周年连续生产，不受灾害天气和病虫害限制③生长环境可人工控制并人为创造

2、植物组培的意义和作用主要有哪些？

（1）培育新品种的有效手段

（2）种质资源保存的有效方法

（3）去除病毒、真菌和细菌等病害和无性系的快速繁殖

（4）促进有机物的生产和生理学的研究

3、简述通用实验室的构成和用途。

此区包括药品储存室、洗涤室、培养基配制室和灭菌室等。

（一）药品储存室药品储存室主要存放组织培养常用的各种化学试剂，如无机盐、有机物、生长调节剂、消毒剂及各种生化试剂等。

（二）洗涤室洗涤室用于清洗各种培养器皿、用具及培养材料等。

（三）培养基配制室培养基配制室用于培养基的配制、分装、封口，以及培养基灭菌前暂时存放。

（四）灭菌室灭菌室用于培养基、器皿、工具的灭菌消毒工作。

4、接种室包括哪些设备和用具？

接种室又称无菌室，是进行菌种分离和接种的专用房间，室内安装一空调，使室温可控，接种室外面设缓冲间门不宜对开，最好安装滑动门窗，接种室内的地面和墙壁要求光滑洁净，室内根据要求配置一定数量的超净工作台、接种用的小推车以及接种工具和消毒用的乙醇、酒精灯等，室内和缓冲间装紫外线灯和日光灯。

5、培养设备是什么，主要包括哪些？

培养设备是指专为培养物创造适宜的光、温、水、气等条件的设备，包括：空调器、定时器、恒温器、增湿机或去湿机、培养架、摇床或旋转床、光照培养箱、照度计及温、湿度计。6、简述一个标准组培实验室应具备设施。

（1）玻璃器皿和其他实验器皿的清洗和储存（2）培养基的制备、灭菌和存放（3）植物材料的无菌操作（4）将接种材料培养在适宜的温度、湿度和光照条件下（5）培养材料的细胞学及解剖学观察、实体照相、切片观察

7、玻璃器皿的清洗的总体要求、标准和不同玻璃器皿的清洗方法。

(1)总体要求：有机物、油脂等污物去掉（2）标准：瓶壁透明发亮，内外碧水膜均一，不形成水珠（3）不同器皿的清洗①新器皿1%稀HCl浸泡12h，再用肥皂水洗净，清水冲洗，最后用蒸馏水冲洗1遍，晾干后备用②用过器皿先将器皿中的残渣除去，用清水洗净，再用温肥皂水或洗洁精洗净，清水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗1次，晾干后备用③污染器皿在121O C高温蒸汽灭菌30min后，倒去残渣，用清水冲洗，蒸馏水，晒干，有菌斑用毛刷刷净，再用清水冲洗干净，，浸泡于浓的重铬酸钾洗涤液中，浸泡2小时，清水冲洗后用蒸馏水洗，晾干

8、组织培养工厂有哪些厂房和场地组成？各自的功能和作用是什么？

组培育苗工厂一般划分为以下几个生产车间：培养瓶清洗车间、培养基母液调配车间、培养基制备车间、无菌操作车间、培养车间、炼苗温室和苗圃。

（1）培养瓶清洗车间可承担大量的培养器皿如三角瓶、试管、培养皿等的洗涤与试管苗出瓶工作。

（2）培养基母液调配车间已知的培养基组成成分不下10种，为了减少工作量，提高工作效率，在配制培养基时，一般先配成比所需浓度高10~100倍的母液，配制使用时可按比例稀释。

（3）培养基制备车间完成培养基配制、分装、包扎和高压灭菌等工作。

（4）无菌操作车间也称接种车间，是组培工厂最核心和关键部分。

（5）培养车间将接种的材料在人为控制温度、湿度和光照等条件下进行培养生长的场所。（6）炼苗温室和苗圃①炼苗温室创造适宜温度条件②苗圃直接向社会提供各种良种壮苗，可根据市场信息、林业生产等需要灵活安排各种林业苗木、观赏花卉等的育苗计划。

9、组织培养工厂有哪些主要设备？这些设备各有什么作用？

（1）超净工作台是一种提供局部无尘无菌工作环境的单向流型空气净化设备。

（2）高压蒸汽灭菌锅最基本的灭菌装备，用于培养基的灭菌。

（3）培养架摆放大量培养物，以利于大量生产的需要。

（4）照明光源补充植物光合作用的需要。