冰冻切片检查注意事项

合集下载

冰冻切片实验方案和HE染色

2-3人一组，分为7组（上课时需携带实验步骤）冰冻切片操作方法及步骤：1取材：(昆明小鼠各个组织或器官)取材时不能太大太厚，厚者冰冻费时，大者难以切完整，最好为24×24×2mm。

2包埋：取出组织支承器，放平摆好组织，周边滴上包埋剂，速放于冷冻台上，冰冻。

小组织的应先取一支承器，滴上包埋剂让其冷冻，形成一个小台后，再放上细小组织，滴上包埋剂。

注意：大组织进行包埋时，只要使组织固定在支承器上即可，切勿浪费包埋剂。

3修平：将冷冻好的组织块，夹紧于切片机直承器上，启动粗进退键，转动旋钮，将组织修平。

注意：修平过程中，正确使用切片机，不要一次性大量切割组织块，以防损毁切片刀。

4切片：调好切片的厚度，根据不同的组织而定，原则上是细胞密集的薄切，纤维多细胞稀的可稍为厚切，一般在5～10um间。

5调防卷板：制作冰冻切片，关键在于防卷板的调节上，这就要求操作者要细心，准确地将其调较好，调校至适当的位置。

切片时，切出的切片能在第一时间顺利地通过刀防卷板间的通道，平整地躺在持刀器的铁板上。

这时便可掀起防卷板，取一载玻片，将其附贴上即可。

6切片工作完成后，将冷冻机内的所有废物清理干净，切勿乱扔。

冰冻切片时的注意事项：1 防卷板及切片刀和持刀架上的板块应保持干净，需经常用毛笔挑除切片残余和用柔软的纸张擦。

有时需要每切完一张切片后就用纸擦一次。

因为这个地方是切片通过和附贴的地方，如果有残余的包埋剂粘于刀或板上，将会破坏甚至撕裂切片，便切片不能完整切出。

2 多例多块组织同时需做冰冻且片时，可各自放于不同的支承器上，于冷冻台上冻起来，然后依据不同的编号，依序切片，这样做既不费时也不会乱。

3 放置组织冰冻前，应视组织的形状及走势来放置，如果胡乱放置，就不能收到很好的效果。

4 组织块不须经各种固定液固定，尤其是含水的固定液，在未达到固定前，更不能使用。

临床快速冰冻切片，不须要预先固定，一是为了争取时间，二是固定了的组织，反而增加了切片的难度。

小鼠脑冰冻切片的染色注意事项

小鼠脑冰冻切片的染色注意事项
对于小鼠脑冰冻切片的染色，需要注意以下几点：
1. 组织固定：在进行切片前，需要对小鼠脑组织进行固定，以保持其形态结构。

常用的方法包括冷冻、乙醛固定、福尔马林固定等。

2. 切片厚度：对于小鼠脑切片的染色，切片的厚度是非常重要的。

一般来说，切片的厚度应该在20-30μm之间，过厚或过薄都会影响染色效果。

3. 染色方法：小鼠脑冰冻切片的染色有许多方法，如免疫组化、荧光染色等。

需要根据实验的需要选择合适的染色方法。

4. 试剂的选择：选择合适的试剂可以提高染色效果。

例如，对于免疫组化染色，需要选择能够与目标蛋白特异结合的抗体。

5. 染色时间：染色时间也是影响染色效果的重要因素。

染色时间过短可能导致染色不充分，过长则可能影响细胞结构。

综上所述，小鼠脑冰冻切片的染色需要注意上述几点，以保证染色效果的准确性和可重复性。

检验科检查项目适应症及禁忌症

病理学检查适应症和禁忌症一、常规病理学检查：适应症：使用于通过手术切取、钳夹、穿刺等方法获取的人体组织；禁忌症：标本严重自溶、腐败、干枯的组织及标本过小，不能或难以制片的组织不宜进行常规病理学检查。

二、术中冰冻切片病理学检查：适应症： 1、需要确定病变性质（如肿瘤或非肿瘤、良性肿瘤或恶性肿瘤等），以决定手术方案的标本； 2、了解恶性肿瘤的扩散情况，包括肿瘤浸润范围，有无区域淋巴结转移等；3、确定肿瘤部位的手术切缘有无肿瘤组织残留；4、确认切除的组织、如甲状腺、输卵管及异位组织等。

慎用范围及禁忌症： 1、涉及截肢和其他严重致残的根治性手术切除的标本，其病变性质宜于手术前通过常规病理活检确定。

2、以下情形不宜做手术术中冰冻切片病理学检查（1）、疑为恶心淋巴瘤；（2）、标本过小（材料直径小于或等于0.2cm者）；（3）、术前易于进行常规活检者；（4）、脂肪组织、骨组织及钙化组织；（5）、需要依据核分裂相计数判断良、恶性的软组织肿瘤；（6）、主要依据肿瘤生物学行为特征而不能依据组织形态判断良、恶性肿瘤；（7）、已知具有传染性的标本，如结核病，病毒性肝炎、艾滋病等。

三、脱落细胞学检查适应症：1、各种体液（胸腔积液、腹腔积液、心包积液及脑及液）中的脱落细胞学检查； 2、各种黏膜表面如食道粘膜、泌尿道粘膜及宫颈脱落细胞学检查。

3、各种肿物的细针穿刺物、组织印片细胞学检查。

禁忌症：无。

检验科检查项目适应症与禁忌证一、生化全套检查检查项目：包括肝功能、肾功能、心肌酶谱、血脂、电解质等。

适应症：参照以下相关内容（一）肝功能检查：总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、白蛋白/球蛋白（A/G）、总胆红素（TBil）、直接胆红素（DBil）、间接胆红素（IBIL）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、AST/ALT、碱性磷酸酶（ALP）、γ -谷氨酰转肽酶(GGT) 、胆碱酯酶（CHE）。

适应症：体检、各种肝胆疾患、急慢性肝炎、肝硬化、脂肪肝、肝脏肿瘤、用药过程中监测肝脏功能、有机磷中毒以及相关疾病的治疗复查。

妇产科手术中的快速病理诊断

妇产科手术中的快速病理诊断陈乐真随着各种新技术在病理诊断上的应用，病理诊断水平已提高到一新阶段。

但是，常规冰冻切片对于临床医师在手术中明确诊断，决定治疗方案，仍是一个不可替代的重要手段。

一、冰冻切片的用途1.决定病变性质：女性生殖系统肿瘤，特别是卵巢肿瘤类型繁多，术前不易确诊，妇产科医生在手术中仅凭肉眼观察，难以确定肿瘤性质。

由于良性与恶性肿瘤手术切除范围不同，特别是对于生育期妇女要决定是否保留其生育能力，必须对送检组织作冰冻切片进行快速诊断，这将有助于手术中确定下一步处理方案。

据文献报告和我院资料统计，冰冻切片诊断卵巢恶性肿瘤的准确率为93.5%～97.0%。

因此，手术中冰冻切片是一个快速确定诊断和决定手术范围的一个重要手段。

2.鉴别卵巢恶性肿瘤是原发癌或是转移癌：对于卵巢癌，特别是卵巢早期转移癌，肉眼观察难以确定，冰冻切片确定诊断对于临床医师很有帮助。

3.鉴别一些腹膜表面的粟粒样病变：在输卵管、卵巢、阔韧带、大网膜表面常见一些粟粒大小结节，肉眼观察难以确定病变性质，可取小结节作冰冻切片。

有4种病变需要鉴别：(1) Walthards细胞巢，是一种胚胎残留组织，为实性细胞巢或有囊性变，具有移行细胞的形态特点，有的见有核沟，有的见鳞状细胞改变，如果病理医生不熟悉此病变，容易误诊为转移癌。

(2)粟粒性结核，可见到结核结节。

(3)转移癌，见到癌组织结构。

(4)子宫内膜异位症，见有子宫内膜组织结构。

4.确定盆腔炎性包块的性质：输卵管、卵巢的正常结构被破坏，粘连紧密形成一包块，是否为结核性病变，送冰冻切片检查可确定诊断。

5.辨认组织：由于恶性肿瘤浸润性生长，妇科肿瘤手术偶尔会损伤盆腔脏器，特别是输尿管，这时可作冰冻切片，确定组织结构。

6.确定盆腔内发育不良的性腺组织：行冰冻切片检查可确定是卵巢组织，还是睾丸组织。

二、手术中快速诊断方法简介1.冰冻切片诊断：是最常用的方法，开展冰冻切片诊断工作必须具备3个基本条件：(1)冰冻切片机。

病理快速冰冻技术

快速冰冻病理技术一、概述二、快速冰冻的目的三、准备工作四、快速冰冻切片制备五、快速冰冻的注意事项一、概述●冰冻病理是通过手术切取一小块活组织，通过特制的包埋剂，将组织冻结于-20度左右，切成薄片并染色，进行镜下观察、诊断，以帮助临床医生确定手术方案的一项技术。

●是临床手术科室与病理科的一种紧急会诊。

快速冰冻病理技术发展1.1818年由Pieter 首先创造发明的。

2.1891年Halsted和Accarty将冰冻切片技术列为正式诊断方法。

3.1960年Cryostat冰冻切片机正式应用于临床后，冰冻切片质量有了很大提高。

目前, 此项技术已普遍应用于临床，解决手术中的病理诊断问题。

随着冰冻切片技术和临床外科手术的发展，要求做冰冻的病例逐年增多。

如：乳腺、甲状腺、卵巢等等。

二、快速冰冻的目的主要：1.确定病变的性质（炎症、肿瘤及其良恶性）；2.确定切除肿瘤的边缘有无癌组织残留以明确手术范围。

3.确认切除的组织例如甲状旁腺、输卵管及异位组织等。

4.确定切除的淋巴结有无转移及转移程度。

乳腺纤维腺瘤乳腺浸润癌淋巴结转移癌（交界性）卵巢粘液性囊腺瘤三、准备工作1．快速活检患方知情同意书相关临床医师应向患者和（或）患者授权人说明快速活检的意义和局限性，取得患者和（或）患方的同意，并在《手术中快速活检患方知情同意书》上签字。

冰冻快速病理诊断知情同意书●术中冰冻快速病理学检查是实施手术过程中与手术方案相关的病理诊断手段，如确定病变的性质、病变扩散情况、确定边缘或切端有无病变残留等，但因技术方法的限制，如时间短促、取材有限等，存在一定的局限性和误诊的可能性（通常是5%的误诊率）。

某些病例难以快速做出明确诊断，需待常规石蜡切片进一步完成诊断，故向病人及家属说明。

2.向病理科递交快速活检申请单临床手术医师应提前向病理科递交快速活检申请单（须手术前一天完成）申请单需填写：患者的病史；重要的影像学；实验室检查结果和提请病理医师特别关注的问题等。

石蜡切片、冰冻切片实验技术服务

石蜡切片、冰冻切片实验技术服务
石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。

冰冻切片是一种在低温条件下使组织快速冷冻到一定的硬度，然后进行切片的一种方法。

制作过程较石蜡切片快捷、简便，因而多应用于手术中的快速病理诊断。

【技术原理】
组织经固定后，含有大量水分，使用乙醇从低浓度到高浓度将组织内的水分逐渐置换出来，以利于透明剂和石蜡的进入，这个过程称为脱水。

组织脱水后，必须经过一种既能与乙醇相结合，又能溶解石蜡的溶剂，通过这种溶剂的媒介作用使石蜡浸入组织，这种溶剂使组织呈现出不同程度的透明状态，这个过程称为透明。

组织经过脱水、透明后用石蜡作为支持剂浸入组织内，使组织变硬并将组织包裹在内，有利于切片，这个过程称为浸蜡。

浸蜡后的组织块用石蜡包成块，使组织达到一定的硬度和韧度有利于切片。

【实验流程】
案例展示
技术总结
【常见问题】
1、切片上卷或皱起
切片刀角度过大或过小，调整角度以5°为宜。

2、切片有空洞及破碎不齐
切片时慢一点，轻削组织。

3、切片有褶皱
切片时对准蜡块表面轻轻哈气。

【注意事项】
1、组织硬度较大，容易发生切片碎裂，需经软化或脱钙；
2、摊片时间过长，组织中心易开裂；
3、摊片时间过短，组织有褶皱，影响后续染色拍照；
4、特殊组织的切片，在后续染色过程中容易出现掉片的情况，比如皮肤、脑组织；
5、切片太厚，容易导致染色程度过深。

冰冻切片

冷冻切片一、恒温冷冻切片将组织在恒温冷冻切片机里切片。

冷冻腔内的温度一般设置为-18至-25℃，根据不同组织调节不同的腔温，平时应将冷冻头放置于冷冻台上。

冷冻切片机应长期处于恒温冷冻状态。

(1)、当冰冻组织取好后，有速冻开关的机器可先将开关打开，再在冷冻头上放少量的OCT或羧甲基纤维素(可用普通胶水代替)，放上组织，速冻。

(2)、待组织冻结后，将冷冻头装到切片机上(3)、粗切，修出切面细切几张，用毛笔刷去刀上组织片(4)、放下抗卷板，开始切片，切片厚度一般为5～6微米，切出的片子用载玻片贴附后立即放入甲醇中固定，固定时间为10～20秒(5)、水洗(6)、苏木素1分钟(7)、水洗(8)、盐酸酒精分化1秒钟(9)、水洗(10)、温水蓝化(11)、伊红2～5秒钟(12)、梯度酒精快速脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

冰冻切片的注意事项:(1) 速冻：是冰冻切片的关键，因为只有速冻才能减少组织内的冰晶，最好的办法是将速冻头迅速压在组织上，冻好后就可切片。

特别适用于较脆的组织。

而含有脂肪较多的组织，最好放在液氮里处理。

在液氮里冷冻要注意不要冻过头，2～3秒钟就要拿出来看一下，只要有4/5的组织已经冻住就可以了，待冷冻头拿出后刚好全部冻住，否则就会引起组织发脆，或冷冻头与组织分离。

(2)固定：切片后应立即放入甲醇中固定，不能等切片干后再固定，后者容易造成细胞退变。

固定液有很多种，根据我们的实践，认为甲醇作用快，收缩小，染色较清晰，是冰冻切片最理想的固定液。

如加5%冰醋酸较果更好。

(3)包埋剂：可用普通胶水代替，但要加入适量的水（胶水与水的比例大约在2：1左右）。

太稀了，容易损伤切片刀；太稠了，粘在切片上不容易洗掉,影响切片的质量。

(4)冰冻用切片刀不仅要磨的快，而且要磨的直，否则切出的片子就不会平整,不能进入抗卷板。

最好能使用一次性刀片。

(5)如组织发脆，可等几分钟后再切，也可用手在组织上稍稍加温；如果用手去摸组织块，最好戴手套，或用玻片间的纸夹在手与组织之间，以防感染。

冰冻切片机使用规程

冰冻切片机使用规程一、操作前的准备1.检查设备是否处于良好的工作状态，包括电源、切片刀具等是否安装正确并紧固。

2.确认冷冻切片机内部是否有残留的食材或污垢，如有应及时清理。

3.确保冷冻切片机附近的工作区域整洁有序，并保持通风良好。

二、操作过程1.冷冻切片机的使用应由专业操作人员进行，确保具备相关知识和技能，并佩戴必要的个人防护设备，如手套和护目镜。

2.打开冷冻切片机的电源开关，并调整温度和切片厚度到所需设置。

3.将待切食材放置于切片机的切片台上，并确保食材的位置正确和稳定。

4.通过手动或自动控制切片机进行切片。

在手动操作中，要保持手指或其他物品远离切片刀具，避免意外伤害。

5.切片过程中，要时刻观察切片情况，并根据需要进行调整和修正，确保切片质量和效率。

6.切片完成后，关闭切片机的电源，并等待切片刀具停止旋转后再清理和维护。

三、安全措施1.禁止在切片机运行时手指或其他物品接触刀具。

2.禁止在刀具运转时进入刀具周围的工作区域。

3.禁止将手指或其他物品插入切片台的进料口和刀具的出料口。

4.禁止用湿手触摸切片机的电源开关、温度和厚度调节旋钮等部分。

5.切片机在工作中产生的噪音和震动较大，操作人员需保持平稳站立，以免发生摔倒或其他意外。

6.切片机在使用后要及时关机，并断开电源，以免发生意外事故。

四、日常维护1.每日使用结束后，应对切片机进行清洁。

首先关闭电源，然后用湿布擦拭切片台和其他表面，以去除食材残留和污垢。

切勿将水直接浇在切片机上，以免损坏电路和机械部件。

2.定期对切片刀具进行检查和维护，包括清理刀具表面的食材残留和磨损情况。

如有需要，及时更换刀具。

3.保持切片机周围环境的清洁和通风，确保设备的正常工作和寿命。

4.定期进行设备检修和维护，如三个月或一年一次，以保持设备的良好运行状态。

五、事故应急处理1.如在操作过程中发生意外事故，应立即停止切片机的运行，并关闭电源，以防止进一步的伤害。

2.对于操作人员的受伤情况，应第一时间进行救助，并及时将伤者送往医疗机构进行进一步处理。

冰冻切片机的使用指南及注意事项

冰冻切片机的使用指南及注意事项一、使用指南：1.准备工作：(1)将冰冻切片机放置在平稳的台面上，并确保周围没有任何阻碍物。

(2)清洗工作区域，确保卫生。

(3)检查刀片的状态，确保刀片完整且锋利。

(4)准备切片食材，尽量选择新鲜、质量好的食材。

2.开机操作：(1)将电源插头插入电源插座，并打开电源开关。

(2)打开切片机的开关，待机器预热。

(3)调节切片机的切片厚度，根据需要选择合适的厚度。

(4)将食材放置在切片机的进料口，并用手按压住食材，确保稳定。

3.运行操作：(1)用手轻轻推动食材，让其进入切片区域。

(2)注意手指的安全，禁止将手指放置在切片区域内。

(3)让切片机自动完成切片过程，不要用力过猛推动食材，以免损坏切片机。

(4)切片完成后，及时关闭切片机的开关，避免长时间运行。

4.清洁和维护：(1)切片机使用完毕后，需要对其进行清洁和保养。

(2)断开电源，拆卸下部导向罩，清除残渣和食物碎片。

(3)使用软布或刷子清洁切片机的表面和切片区域。

(4)定期对冰冻切片机的各零部件进行检查和保养。

二、注意事项：1.安全第一：(1)使用冰冻切片机时，要注意保护好手部，切不可将手指放置在切片区域内。

(2)在清洁和维护切片机时，需先断开电源，避免触电危险。

2.食材选择：(1)尽量选择新鲜、质量好的食材进行切片。

(2)对于肉类食材，要确保其质量安全，避免切片时产生细菌污染。

3.切片厚度控制：(1)根据需要和食材特性，选择合适的切片厚度。

(2)对于易碎的食材，切片厚度要适当控制，避免切片时出现断裂现象。

4.刀片状态检查：(1)在使用前，要检查刀片的状态，确保刀片完整且锋利。

(2)如发现刀片有损坏或变钝的情况，需及时更换或修复刀片。

5.注意清洁：(1)使用完毕后，要及时对冰冻切片机进行清洁和保养。

(2)清洗时要谨慎操作，以免切片机受损或刀片变钝。

以上是冰冻切片机的使用指南及注意事项。

使用者在使用冰冻切片机时，要严格按照操作指南进行操作，注意安全，保持切片机的清洁和维护，以提高工作效率和食品质量。

冰冻切片制作注意

冰冻切片时的注意事项1、防卷板及切片刀和持刀架上的板块应保持干净，需经常用毛笔挑除切片残余和用柔软的纸张擦。

有时需要每切完一张切片后就用纸擦一次。

因为这个地方是切片通过和附贴的地方，如果有残余的包埋剂粘于刀或板上，将会破坏甚至撕裂切片，便切片不能完整切出。

2、多例多块组织同时需做冰冻切片时，可各自放于不同的支承器上，于冷冻台上冻起来，然后依据不同的编号，依序切片，这样做既不费时也不会乱。

3、放置组织冰冻前，应视组织的形状及走势来放置，所谓“砍柴看柴势”，切片也是如此，如果胡乱放置，就不能收到很好的效果。

4、组织块不须经各种固定液固定，尤其是含水的固定液，在未达到固定前，更不能使用。

临床快速冰冻切片，不须要预先固定，一是为了争取时间，二是固定了的组织，反而增加了切片的难度。

如果使用未完全固定的组织做冰冻切片，就会出现冰晶。

这是因为含水的固定液在组织未经固定前，其中的水份也渗入组织中去，当冰冻发生时，这些水份就存留于组织中，形成了冰晶。

5、当切片时，如果发现冰冻过度时，可将冰冻的组织连同支承器取出来，在室温停留片刻，再行切片，或者用口中哈气，或者用大拇指按压组织块，以此来软化组织，再行切片。

另者，调高冰冻点。

6、用于附贴切片的载玻片，不能存放于冷冻处，于室温存放即可。

因为当附贴切片时，从室温中取出的载玻片与冷冻箱中的切片有一种温度差，当温度较高的载玻片附贴上温度较低的切片时，由于两种物质间温度的差别，当它们碰撞在一起时，分子彼此间发生转移而产生了一种吸附力，使切片与载玻片牢固地附贴在一起。

如果使用冷藏的载玻片来附贴切片，由于温度相同，没有发生上述的现象。

7、冰冻切片的快速染色法冰冻切片附贴于载玻片后，立即放入恒冷箱中的固定液固定1分钟后即可染色。

以往，为了防止切片脱落，当切片附贴于载玻片后，即用电吹风吹干后再固定。

根据实验对比认为这种做法欠妥未经固定的切片，强热作用后，蛋白发生变性，核内含有的物质由于热的作用融合在一起，染色后镜下分辨不出核内的各种物质。

冰冻切片免疫荧光染色及HE染色标准流程

冰冻切片免疫荧光染色流程(表面分子，以CD4为例)（1）冰冻切片室温晾干15分钟；（2）用组化油笔将待染组织圈好，置PBS中浸泡10分钟，以清除OCT；（3）用含10％正常山羊血清旳PBS室温封闭切片1 小时（此步可以不洗涤，把封闭液吸干即可）；（4）加入CD4单抗(1:100; SeroTec, Inc, Raleigh, NC, USA)，4℃孵育过夜；（5） PBS洗3次，每次10分钟；（6）加入罗丹明标记旳羊抗小鼠旳IgG二抗(1:50; Sigma 公司)，37℃孵育1小时；（7） PBS洗3次，每次15分钟；（8）封片后，荧光显微镜观测成果并拍照；（9）在每切片中随机选择5个视野计数阳性细胞数。

`注意事项：（1）整个实验过程中勿使表面干燥（2）稀释、加二抗（荧光抗体）及此后旳洗涤过程中注意避光附注1：如目旳分子为胞内分子，多种液体中需要加透膜剂0.3%TrixtonX100。

附注2：所用液体（表面分子染色不用0.3%TrixtonX100）：（1）pH7.4 0.01MPBS：配方为：0.1MPBS 100ml+ddH2O 900ml+NaCl 7.65g0.1MPBS 配方为：Na2HPO4 23g+NaH2PO4﹒2H2O5.9g+NaCl 17g 定容至ml, 高压，pH7.2-7.4（2）洗涤液：0.3%TrixtonX100－pH7.4 0.01MPBS，分装15ml/支－20℃保存（3）封闭液：10％NGS－0.3% TrixtonX100－pH7.4 0.01MPBS，分装1.2ml/支－20℃保存（4）抗体稀释液：1％BSA－0.3% TrixtonX100－pH7.4 0.01MPBS，分装1ml/支－20℃保存一、操作措施及环节：①取材，未能固定旳组织取材，不能太大太厚，厚者冰冻费时，大者难以切完整，最佳为24×24×2mm。

②取出组织支承器，放平摆好组织，周边滴上包埋剂，速放于冷冻台上，冰冻。

冰冻切片HE染色顺序

冰冻切片H E染色顺序 SANY GROUP system office room 【SANYUA16H-冰冻切片H E染色步骤一、操作方法及步骤：①取材，未能固定的组织取材，不能太大太厚，厚者冰冻费时，大者难以切完整，最好为24×24×2mm。

②取出组织支承器，放平摆好组织，周边滴上包埋剂，速放于冷冻台上，冰冻。

小组织的应先取一支承器，滴上包埋剂让其冷冻，形成一个小台后，再放上细小组织，滴上包埋剂。

③将冷冻好的组织块，夹紧于切片机持承器上，启动粗进退键，转动旋钮，将组织修平。

④调好欲切的厚度，根据不同的组织而定，原则上是细胞密集的薄切，纤维多细胞稀的可稍为厚切，一般在5～10u m间。

二、冰冻切片时的注意事项：①防卷板及切片刀和持刀架上的板块应保持干净，需经常用毛笔挑除切片残余和用柔软的纸张擦。

有时需要每切完一张切片后就用纸擦一次。

因为这个地方是切片通过和附贴的地方，如果有残余的包埋剂粘于刀或板上，将会破坏甚至撕裂切片，便切片不能完整切出。

②多例多块组织同时需做冰冻切片时，可各自放于不同的支承器上，于冷冻台上冻起来，然后依据不同的编号，依序切片，这样做既不费时也不会乱。

③放置组织冰冻前，应视组织的形状及走势来放置，所谓“砍柴看柴势”，切片也是如此，如果胡乱放置，就不能收到很好的效果。

④组织块不须经各种固定液固定，尤其是含水的固定液，在未达到固定前，更不能使用。

临床快速冰冻切片，不须要预先固定，一是为了争取时间，二是固定了的组织，反而增加了切片的难度。

如果使用未完全固定的组织做冰冻切片，就会出现冰晶。

这是因为含水的固定液在组织未经固定前，其中的水份也可渗入到组织中去，当冰冻发生时，这些水份就存留于组织中，形成了冰晶。

⑤当切片时，如果发现冰冻过度时，可将冰冻的组织连同支承器取出来，在室温停留片刻，再行切片，或者用口中哈气，或者用大拇指按压组织块，以此来软化组织，再行切片。

另者，调高冰冻点。

冰冻切片注意事项

冰冻切片注意事项冰冻切片是一种常用的实验技术，在科学研究、医学诊断和药物开发中起着关键作用。

这种技术可以将组织样本以无损坏的方式保存，并用于后续的显微镜观察和分析。

然而，要获得高质量的冰冻切片需要注意一些重要的事项。

以下是一些关键的注意事项。

1.选择合适的切片仪器和材料：要获得最佳的切片效果，应选择高质量的切片仪器和材料。

切片仪器应具备高速度和高精度的切割能力，并且能够保持适宜的温度和湿度。

切片材料应选择具有较好的冷冻保护性能和切割性能的材料。

2.适当的标本处理：在进行冰冻切片前，标本应进行适当的处理。

首先，标本应被固定以保持其形态和结构的稳定性。

常用的固定方法包括冷冻固定、化学固定和生理盐水固定等。

其次，在进行冷冻切片前，标本应进行充分的去水处理，以使切片的质量更好。

3.适宜的切片温度：切片温度是决定切片质量的重要因素。

一般情况下，切片温度应尽量低，以减小标本的结构变形和切割的损伤。

通常，切片温度应控制在-20℃至-30℃之间。

4.适当的切片速度：切片速度是决定切片厚度和切片质量的关键因素。

切片速度过快会导致切片厚度不均匀，切片速度过慢则容易引起标本的变形和损伤。

一般情况下，切片速度应适中，并且应根据不同的标本类型进行调整。

5.切片后的处理：切片后，切片应立即进行处理，以防止切片的结构变形和氧化。

处理方法包括立即放入冷冻保存或石蜡包埋等。

6.切片的储存和保存：冰冻切片在使用前需要进行储存和保存。

一般情况下，切片应保存在低温环境中，以保持其形态和结构的稳定性。

冷冻切片的保存时间一般较短，通常为几天至几周。

7.切片质量的评估：为了确保冰冻切片的质量，应对切片进行适当的评估。

评估的方法包括显微镜观察和组织学染色等。

通过评估，可以发现切片中存在的问题，并采取相应的措施进行改进。

总之，冰冻切片技术在科学研究和医学诊断中具有重要的应用价值。

遵循上述的注意事项，可以获得高质量的冰冻切片，从而提高实验和诊断的准确性和可靠性。

冰冻切片机的使用指南及注意事项

冰冻切片机的使用指南及注意事项引言：冰冻切片机是一种常见的食品处理设备，广泛应用于餐饮业、食品加工厂和家庭厨房等场所。

它能够快速将食材切成均匀的薄片，提高烹饪效率和食品的美观度。

然而，使用冰冻切片机时需谨慎操作，以确保安全和提高工作效率。

本文将为您介绍冰冻切片机的使用指南及注意事项，以帮助您正确使用和保养该设备。

一、冰冻切片机的使用指南1. 准备工作在使用冰冻切片机之前，需要做好以下准备工作：- 清洁切片机：确保切片机表面和刀片都是干净的。

使用温水和少量洗洁精清洗，然后彻底冲洗干净，并用干净的布擦干。

- 准备食材：根据需要，选择合适的食材进行切割。

确保食材新鲜、干燥且无破损。

- 调整切片机设置：根据需要调整切片机的厚度和速度设置。

注意在操作过程中，确保切片厚度合适，以免造成浪费或食材过于薄片，影响食品质量。

2. 正确使用冰冻切片机下面是使用冰冻切片机的正确步骤：- 将食材放置在切片机上的进料口位置，并通过压力杆将其固定。

- 开启切片机的电源开关，并设置合适的切片机厚度和速度。

- 将手握在固定手柄上，并将切片机的刀片沿着食材轻轻移动，实现切片的过程。

- 使用完成后，关闭切片机电源开关，并等待刀片停止旋转后再进行下一步操作。

3. 清洁与维护冰冻切片机使用后需要进行清洁和维护，以延长其使用寿命和确保卫生。

- 关闭冰冻切片机电源，并拔掉电源插头，确保刀片停止旋转。

- 使用温水和少量洗洁精清洗切片机的外部表面和刀片。

避免使用金属刷或刮板，以免损坏切片机表面。

- 清洁完成后，用干净的布擦拭干燥。

- 定期检查和保养冰冻切片机的各个零部件，确保其正常运行。

如发现有磨损或松动的部件，及时修复或更换。

二、冰冻切片机的注意事项1. 注意安全使用冰冻切片机时，务必注意安全，避免发生意外伤害。

- 确保刀片停止旋转后再进行任何操作，以免被刀片切伤。

- 使用切片机时，避免将手指或其他物体靠近刀片，以免发生意外。

- 在清洁和维护切片机时，务必切断电源并拔掉电源插头。

冰冻切片制作方法与注意事项固定：固定即借助化学试剂是组织和

冰冻切片制作方法与注意事项一、固定：固定即借助化学试剂是组织和细胞中的有机和无机成分凝固或沉淀，停止发生死后组织变化，尽量保持其活体状态的过程。

固定的方法有浸泡固定法，注射、灌注固定法，蒸汽固定法，本实验用的是注射、关注固定法：某些组织块由于体积过大或固定液极难流入内部或需要对整个脏器或整个动物进行固定，就可采用灌注或灌流固定法。

固定时将固定液直接注入动物的血管，经血管分支到达整个组织或全身，从二十只得到充分固定。

固定液分为单纯固定液和混合固定液。

单纯固定液有甲醛、乙醇、氯化汞、醋酸、苦味酸等，混合固定液包括Bouin液、Zenker液、Carnoy液、中性甲醛液等。

本实验用的固定液为4%甲醛（10%福尔马林）。

固定后的处理：用水配制的固定液固定后应用流水冲洗，可是组织中的固定液随时溢出和随时洗去。

对小动物和脑组织等，应以浸泡为主，即能达到冲洗的目的，又不损害组织。

【注意事项】1.固定要及时。

2.组织块的大小要合适。

3.应有足够的固定液，一般与组织块的比例为20:1，容器勿过小，组织勿过多。

4.固定时间要合适，甲醛固定液一般固定两天左右，第一天要更换一次固定液。

5.要进行促使固定，在固定期间轻轻地搅动组织或摇动容器使组织移动有利于固定液的渗透，适当提高温度也可缩短固定时间。

6.选择合适的固定液。

7.一次取材数量过多时，应对取材部位和顺序进行编号，并及时做好记录。

二、脱水脱水就是用某些溶剂逐步将组织块内的水分置换出来的过程，使用的试剂称为脱水剂。

脱水剂有非石蜡溶剂的脱水剂如乙醇、丙酮等，和脱水兼石蜡的脱水剂如正丁醇等。

本实验所用的是乙醇脱水。

乙醇是最常用的脱水剂，其优点是脱水能力强，即能与水相混合，又能与透明剂相混，并可使组织硬化，便于切片。

缺点是穿透组织的速度快，且容易使组织收缩、变脆。

为克服这一缺点，在一般脱水中，应采用循序渐进的方法，逐步升级，经一系列不同浓度的乙醇，使组织中的水分逐渐被乙醇代替。

冰冻切片机使用规程

冰冻切片机使用规程1.安全操作规范1.1操作人员必须穿戴好安全防护用具，如手套、护目镜和防滑鞋。

1.2在操作之前，必须检查切片机的电源插头及线路是否完好无损。

1.3操作人员必须确保切片机的工作环境干燥，且没有明火存在。

1.4操作人员在操作切片机时，不得喧哗、奔跑或进行其他不相关的操作。

1.5操作人员必须经过专门培训，了解切片机的使用方法和安全规定。

2.设备准备2.1将切片机置于平稳的工作台上，并使用扣紧螺丝将其固定。

2.2检查切片机的刀片是否锋利，并及时更换已经磨损的刀片。

2.3检查冷冻室的温度是否保持在-18℃以下。

2.4检查冷冻室的密封性是否良好，避免冷气泄漏。

3.操作流程3.1打开冷冻室门，将待切片的食材放入冷冻室中，确保食材在切片前已经充分冷冻。

3.2打开切片机的电源开关，调整切片机的厚度和速度，根据需要进行个性化设置。

3.3轻轻按下食材推杆，将冷冻食材放入切片机，确保手指与刀片保持安全距离。

注意不要用手直接接触刀片，以免刀伤。

3.4慢慢推动杆，使食材通过切片机的刀片进行切割，切片完成后，及时拉回杆。

3.5当切片机使用完毕时，及时关闭电源开关，并关掉冷冻室门。

4.日常维护4.1使用完毕后，应将切片机清洁干净，并保持干燥。

4.2定期对刀片进行检查，确定是否需要磨刀或更换刀片。

4.3定期检查电源线路是否磨损，如有问题及时更换。

4.4定期清理冷冻室，避免冷冻时间过长导致冰层过厚。

4.5定期对切片机进行润滑，以确保切割的顺畅。

5.故障处理5.1若切片机出现异常噪音、震动或其他异常情况，应立即停止使用。

5.2关闭电源开关，并确保切片机完全停止运转后，检查是否有无法自行排除的故障。

6.注意事项6.1在操作切片机时，要保持专注，切勿分心或玩闹。

6.2操作人员切勿将手指或其他身体部位靠近刀片，在切片机运行期间更应小心谨慎。

6.3在操作切片机前，要确保周围没有人员或其他障碍物，以免发生意外。

6.4切片机使用完毕后，应及时关闭电源开关，避免出现不必要的安全隐患。

冰冻切片机的使用指南及注意事项

冰冻切片机的使用指南及注意事项
冰冻切片机的使用指南及注意事项
一、简介
冰冻切片机是一种常用于食品加工行业的设备，用于将食材进
行冷冻并切片。

本文档将详细介绍冰冻切片机的使用指南及注意事项，以便用户正确操作并确保安全。

二、操作前准备
1、确保冰冻切片机周围环境清洁整洁，无杂物堆积。

2、检查冰冻切片机的电源线是否符合要求，确保电源接地良好。

3、检查刀片的锋利度，如发现刀片需要更换，请及时更换。

4、准备冷冻食材，并将其放入冰箱内冷冻。

三、操作步骤
1、打开冰冻切片机的电源开关，并确认设备正常运行。

2、将冷冻食材放入设备的冰冻仓内，注意不要过量以免影响切
片效果。

3、调节切片机的切片厚度，根据需要选择合适的厚度。

4、按下启动按钮，开始切片操作。

5、切片完成后，关闭电源开关，等待设备停止运行。

四、注意事项
1、在操作过程中，禁止将手或其他物体伸入冰冻切片机内，以
免发生意外伤害。

2、切片机仅用于食品加工，禁止将其他非食品物品放入设备内。

3、使用过程中如遇异常情况，应立即停止使用，并通知维修人
员进行处理。

4、使用完毕后，及时清洁设备，并将刀片置于安全位置，以免
造成伤害。

5、定期对设备进行维护保养，确保设备的正常运行。

附件：本文档无附件。

法律名词及注释：
1：《食品卫生法》：中华人民共和国食品安全与卫生方面的法
律法规。

2、《产品使用说明》：制造商所提供的关于产品使用的详细指导。

3、《设备维护手册》：制造商所提供的设备维护保养的指南手册。

冷冻切片方法及注意事项

一、试验前预备清理试验台及仪器。

开启冷冻切片机并将冷冻切片机预降至所需温度〔- 15~-20 ℃*〕。

预备好处理好的载玻片、刀片、胶水以及药品。

二、取材解剖之后快速取出所需的颖组织，用干纱布或滤纸擦干后不需固定直接取材〔24×24×2mm*〕,以防形成冰晶造成切片中形成外形不一的空泡,使细胞内构造移位。

〔注：取材中目的标本既要明确也要确保其构造的完整性，应避开不必要的脂肪及坏死组织附着;要尽量剔除毛发、硬骨或钙化物;保乳手术切缘由于脂肪组织较多,取材厚度最好不要超过3mm，厚者冰冻费时，大者难以切完整。

甲状腺及淋巴结组织要带全组织被膜并除去多余的脂肪组织。

〕三、冷冻切片1、取出组织支承器，放平摆好组织，周边滴上包埋剂，速放于冷冻台上冰冻，用吸热器压住组织，至包埋剂与组织冻结成白色冰体即可切片〔1~3 分种〕。

2、将冷冻好的组织块，夹紧于切片机持承器上，启动粗进退键，转动旋钮，将组织修平。

3、调好欲切的厚度，依据不同的组织而定，原则上是细胞密集的薄切，纤维多细胞稀的可稍为厚切，一般在5～10μm 间。

4、调好防卷板。

制作冰冻切片，关键在于防卷板的调整上，这就要求操作者要细心，准确地将其调较好，调校至适当的位置。

切片时，以切出完整、平滑的切片为准。

切好的组织在干净的玻片上黏附时顺着一个方向略微用力轻轻一带,可避开组织摊片过程中皱折,保证组织构造的完整及切片的美观。

注：①包埋剂的选用：包埋剂是对冷冻切片质量一重要影响因素，包埋剂用量要适宜，过多或过少都会影响标本冷冻质量。

常用的有三种包埋剂OCT 剂、B 超藕合剂以及一般胶水。

B 超藕合剂适用于细胞丰富质地较嫩的组织,一般胶水或OCT 剂适用于纤维丰富质地偏硬组织。

〔OCT 包埋剂骤冷时固化，其冷冻速度和软硬韧度与组织相近，其还具有水溶性，不影响染色等优点。

〕②组织块过小：先将少量胶挤在托架上预先放在冰冻机中冷冻,约30 秒钟左右待胶凝固时将小组织放上, 组织四周再加一些胶,再次置于冷冻机中冷冻,这样组织被垫高,就能快速切出高质量的切片。

冰冻切片的步骤及注意事项

冰冻切片的步骤及注意事项嘿，友友们！今天咱来唠唠这冰冻切片的那些事儿，可别小看它哟，这里头的步骤和注意事项那可不少呢！
先说这第一步，取材那可是相当关键呐！就好比你要做一道超级美味的菜，原料得新鲜吧！取材的时候就得眼疾手快，别磨蹭，不然那材料都不新鲜啦！而且取的位置也得准，不然切出来的片子可就不地道喽。

然后就是速冻啦，这就像是给材料来个急速冰镇。

嘿，可别慢悠悠的，得赶紧把它冻得邦邦硬，不然切片的时候可就不好玩啦。

想象一下你切个软不拉几的玩意儿，那能成啥样！
接着就是切片啦，这可是个技术活。

就跟咱削苹果似的，你得手法稳，不然切出来那一片片厚的厚，薄的薄，那可不行！我跟你说，这时候就得开启“大师模式”，每一刀都得恰到好处，别整那些歪七扭八的片子出来。

哎呀，这过程中可得注意好多事儿呢。

比如说温度得控制好，太高了不行，太低了也不行。

温度不对，那切出来的片子不是皱皱巴巴就是碎成渣，这可不是咱想要的结果嘛。

还有呢，切片机也得爱护好，就跟咱的宝贝似的，不然它捣乱起来，你可就有的愁喽。

有时候啊，这冰冻切片就跟一场战斗似的，你得和各种因素斗智斗勇。

一不小心哪里出点差错，那片子可不就给你颜色看啦！但咱也不能怕呀，就得勇敢面对，慢慢摸索，找到最佳的方法。

我还记得刚开始接触冰冻切片的时候，那真叫一个手忙脚乱啊。

不是这儿出问题就是那儿不行，简直让我哭笑不得。

不过呢，随着经验的积累，现在咱也能轻松应对啦。

总之呢，冰冻切片虽然有些麻烦，但只要咱掌握了步骤和注意事项，加上那么一点点的耐心和细心，就一定能把它搞定！友友们，加油干吧，让我们在冰冻切片的世界里闯出一片天！。