常用免疫组化试剂(类别)介绍

常用免疫组化试剂(类别)介绍

一、用于鉴别诊断(一)上皮源性: １、细胞角蛋白／cytokerａtin.CK:目前,商品化得细胞角蛋白有20多种,不同得分子量代表不同类型得上皮标志。通常将CＫ分为两大类型:Ⅰ型(低分子量);Ⅱ型(高分子量)、理论上讲,大多数单层上皮表达低分子量得CK;复层上皮多表达高分子量得CK;移形上皮(膀胱)与假复层上皮(呼吸道得被覆上皮)既表达低分子量得CK,也表达高分子量得CK。在癌组织中,低分子量得CK多在腺癌中表达,高分子量得CK多在鳞癌中表达。目前为止,未发现任何一种上皮只含有一种CＫ,某些上皮可含2—1０种不同分子量得CK、因此,目前试图应用单一得CK免疫表型来确定某种特定得上皮性肿瘤就是不可能得。同样,应用CK来区别腺癌、类癌与间皮瘤也就是困难得。因此,CK 得免疫组化结果判断就是一个较为复杂得问题,在应用这类标记物作为腺癌与鳞癌得鉴别应特别注意。有必要时,应联合用多种ＣK加以综合判断。CK得阳性表达还包括有间变癌、双向分化得滑膜肉瘤、脊索瘤、胚胎癌、间皮瘤、上皮样肉瘤、胸腺瘤等。CK得阴性表达有:副节瘤单向分化得滑膜肉瘤、软骨(肉)瘤、精原细胞瘤、淋巴瘤、脑膜瘤、恶黑、恶纤组、软组织肉瘤(除特殊类型外)。在判断CＫ免疫组化结果时应注意几点: (1)CＫ得单克隆抗体优于多克隆抗体;(２)ＣＫ常出现斑点状得假阳性反应,应注意识

别; (３)虽然大多数CK多在胞浆表达,但CＫ17多在胞核表达;(4)绝大多数CK抗体需用胰酶消化,可增加阳性表达率与染色强度; (５)部分非上皮性肿瘤(平滑肌肉瘤)可见

有CK表达,在诊断时应注意;(６)淋巴结、扁桃体与脾组织中得滤泡外得网织细胞含有ＣK８与1８以及desmin,在判断淋巴结转移癌与肌源性肉瘤转移时应根据组织学综合判断、2、上皮膜抗原(ｅpｉｔｈelialmembrａｎeantｉgen/E ＭA):EMA就是上皮细胞分泌得一种乳脂小球膜糖蛋白,广泛存在于人体各种上皮细胞中(也存在于间皮细胞、浆细胞、组织细胞与T细胞淋巴瘤中),其分布与角蛋白相似,但对内脏腺上皮优于细胞角蛋白,尤其就是分化差得癌EMA有时可呈强阳性表达。EMA可作为上皮源性肿瘤得常用标记物。EMA阳性表达得肿瘤有鳞癌、胃肠道腺癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、间皮瘤、滑膜肉瘤、甲状腺乳头状癌、上皮样肉瘤等。在判断EMA免疫组化结果时应注意几点:(１)EMA虽然就是上皮细胞非常敏感得标记,但一些

非上皮性肿瘤(如浆细胞、组织细胞与T细胞淋巴瘤)也可阳性表达。因此在癌与其她间叶性肿瘤鉴别时不能作为唯一得参考标记; (２)ＥMA对内脏上皮源性肿瘤得敏感性优于

体表上皮源性肿瘤,因此在腺癌中得表达明显高于鳞癌、

３、桥粒蛋白:就是上皮细胞特有得结构,就是一种广谱得上皮性标记、鳞癌、腺癌、移形细胞癌、未分化癌与间皮瘤、

尤文氏肉瘤表达。在判断桥粒蛋白免疫组化结果时应注意几点:(1)桥粒蛋白也可在心肌、脑膜瘤、卵巢得颗粒细胞瘤与淋巴结得网织细胞中表达; (2)甲状腺间变癌阳性表达率低;(３)冰冻切片效果优于石蜡切片。(二)间叶源性肿瘤得标记１、波形蛋白Ｖimｅntin:就是一种52－58得胞浆蛋白。主要分布于间叶细胞及其起源得肿瘤,就是间叶细胞及其肿瘤得特异性标记。横纹肌肉瘤、平滑肌肉瘤与非肌源性软组织肿瘤如纤维肉瘤、脂肪肉瘤、血管肉瘤、恶纤组、精原细胞瘤、雪旺氏瘤与骨肿瘤Vimentｉn就是一个关键标记。此外,血管球瘤、颗粒细胞肌母细胞瘤、淋巴瘤、白血病与恶黑等均可有Vimentin表达。在判断Vimｅnｔin 免疫组化结果时应注意几点: (1)部分肿瘤(如间皮瘤、滑膜肉瘤、乳腺癌、肺腺癌等)除Ｖimeｎtｉn(＋)表达外,可同时又有cｙtokeｒａtin得表达。应结合其组织学形态加以诊断;

(2)福尔马林固定得组织标本,ｖｉmenｔｉn假阴性并不少见,冰冻切片酒精固定得组织可提高其敏感性与可靠性;(3)ｖｉmenｔｉｎ不能单独用于软组织肿瘤得诊断,多提倡与

其她特异性标记物联合使用。2、结蛋白desmin: 就是一种分子量为50-55ku得细胞浆蛋白,胚胎与成人横纹肌或平滑肌及其肿瘤均可表达。子宫、皮肤、胃肠道及其她部位得平滑肌多呈(+)表达。现已发现dｅsmin在良性肿瘤得阳性率与染色强度明显高于恶性肿瘤;高分化得平滑肌肉瘤与染色强

度明显高于低分化得平滑肌肉瘤。Sｕstｅr报道5例皮肤就是上皮性平滑肌肉瘤均为(－),而aｃtin与vｉｍｅntｉｎ均为(+)反应。因此目前认为,多应用配套抗体,即与其她肌源性抗体联合应用,不能只根据ｄesmin(-)来排除平滑肌肉瘤得诊断、在判断dｅsmｉn免疫组化结果时应注意几点: (1)非常原始得肌源性肿瘤常不表达ｄesmin; (2)某些非肌源性肿瘤也有ｄesｍin表达,如纤维肉瘤、恶纤组、腺泡状软组织肉瘤与个别腺癌; (３)常规福尔马林固定、石蜡包埋得低分化横纹肌肉瘤可能表现假(-)结果; (４)desmin不能用于区别横纹肌肉瘤还就是平滑肌肉瘤;(5)血管平滑肌不表达desmiｎ。3、肌动蛋白Actiｎ:就是一种具有收缩能力得微丝蛋白,几乎分布于所有得肌型细胞,根据其结构形式得不同,至少有6种不同得类型,即横纹肌型、心肌型、平滑肌型(两种)与非肌源型(两种)。目前商品化得Acｔｉn包括有肌肉型(ＨHF35),在心肌、平滑肌与横纹肌细胞及其肿瘤中均有表达,尤其在低分化得横纹肌肉瘤与平滑肌肉瘤中得表达,其敏感性与特异性均比ｄｅｓmiｎ高;Ａcｔin肌源节型,主要用于横纹肌及其肿瘤得诊断;Actiｎ平滑肌型(SｍoothＭuｓｃｌe),主要用于平滑肌及其肿瘤(肉瘤)得诊断、在判断ａctin免疫组化结果时应注意几点: (1)三种在肌源性肿瘤得诊断意义上,尚不能作为一个独立得诊断指标,因为三者之间存在交叉反应; (2)一些非肌源性肿瘤也可有Actin(＋)

表达,如皮肤、口腔、喉、涎腺肿瘤以及星形细胞瘤等; (３)部分器官与组织得非肌上皮细胞也有Actin(+)表达,如肺、食管、胃、十二指肠、膀胱得上皮细胞与肝脏、肾、胎盘以及胰岛细胞等;(4)HHF35也可标记肌上皮细胞,但其敏感性与特异性均不如平滑肌型ａctｉn; (5)福尔马林固定得组织,部分病例可有一些非特异性染色。４、肌红蛋白ｍyoglobin: myｏgｌｏｂin被认为就是存在于正常横纹肌与横纹肌肿瘤中得一种分子量为17。8ku得胞浆蛋白,可作为横纹肌肉瘤得特异性标记。在判断myｏｇloｂｉn免疫组化结果时应注意几点: (1)虽然myoｇloｂin有较高得特异性,但要注意其假(＋)反应,尤其就是坏死或退变以及残留得

正常横纹肌均有ｍｙｏｇloｂin(+),应注意识别;(２)某

些肿瘤如恶黑、浸润型乳腺癌、软组织淋巴瘤等也有myog ｌobin(＋),这个可能就是瘤细胞破坏横纹肌时吞噬了mｙｏglｏｂin所致;(3)烤片温度过高,＞6０℃时可能会破坏其抗原,造成假(-)。(三)神经与内分泌细胞标记:１、胶质纤维酸性蛋白ＧFAＰ:就是一种分子量为47ku得酸性蛋白。研究发现:GＦAＰ不仅在星形神经胶质细胞及其肿瘤中存在,还见于各种类型得星形细胞瘤、混合性胶质瘤、多形性成胶质瘤、室管膜下巨细胞性星形细胞瘤、异位星形细胞瘤、松果体瘤与髓母细胞瘤中向胶质分化,以及含胶质成分得神

经鞘瘤等肿瘤中。在判断GFAP免疫组化结果时应注意