氯霉素

氯霉素合成论文

分子印迹技术（molecularly imprinting technique）是对目标化合物具有特定识别能力的一种聚合物制备技术。分子印迹聚合物（molecularly imprinted polymers，MIPs）是一种具有较强分子识别能力的新型高分子仿生材料，其具有类抗体的特异性、高选择性、高强度等优点，另外还具有制备简单、成本低、模板分子可回收重复利用等特点，使其在色谱分离、传感器、模拟酶催化、膜分离及固相萃取等许多领域得到了广泛的应用。氯霉素（Chloramphenicol，CAP）是一种杀菌力极强的广谱抗生素，由于其优良的抗菌性、稳定的药性、低廉的价格，而广泛作为饲料添加剂，用于治疗细菌性疾病。但研究发现CAP对骨髓和新生儿有较大的毒性，易引起人体血中毒，导致不可逆的再生障碍性贫血等严重的毒副作用，对人类的健康构成巨大的潜在威胁。因此，欧盟、美国均在法规中规定CAP的残留限量标准为“零容许量”。我国农业部规定CAP及其盐、脂等在食品动物的所有可食组织中不得检出。CAP的检测方法主要有微生物法、免疫分析法、气相色谱法、色谱质谱联用法、超临界流体色谱法以及免疫荧光毛细管电泳技术等等。由于样品中的CAP残留浓度低，基体成分复杂，且常规样品前处理方法步骤繁琐，严重限制了常规快速检测方法和仪器分析方法对样品中CAP残留的有效检测。样品的提取、富集和净化是残留物分析的关键步骤，固相萃取（solid-phase extraction，SPE）、基质固相分散（matrixsolid-phase dispersion，MSPD）等样品预处理技术近年来得到了越来越广泛的应用。SPE是兽药残留分析常用的样品处理与富集方法之一。常规的基于反相或离子交换作用的固相萃取材料在兽药残留检测应用中往往选择性较差，给后面的仪器分析造成困难。利用MIP的分子识别能力，将其作为固相萃取材料，可望实现有选择的固相萃取，克服生物样品体系复杂、预处理手续繁琐等因素，在富集待分析物的同时，除去大部分干扰组分，从而方便仪器分析，是发展痕量分析方法的重要途径。MSPD是一种新的样品处理技术，其基本操作是将样品（固态或液态）直接与固相萃取材料一起混合研磨，使样品均匀分散于固定相颗粒的表面，形成独特的色谱固定相装柱，然后依靠所选定的溶剂洗脱样品。它浓缩了传统样品的均化、组织细胞裂解、提取、过滤、净化等过程，使样品的预处理变得简单快捷，不仅测试样品和溶剂用量减少，而且也避免了目标物的损失。本研究以氯霉素（CAP）为模板分子，甲基丙烯酸二乙氨基乙酯（DEAEM）为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯（EDMA）为交联剂，偶氮二乙丁腈（AIBN）为引发剂，四氢呋喃为溶剂，采用本体聚合的方法制备氯霉素分子印迹聚合物（CAP-MIP），通过吸附动力学曲线等优化了聚合物的合成条件，由此制备的MIP对CAP有很好的吸附能力，通过将MIP对CAP、甲砜霉素（thiamphenicol，TAP）和氟甲砜霉素（florfenicol，FF）的吸附性进行比较研究，显示由此方法制备的CAP-MIP对CAP有较好的特异性吸附能力。将上述方法制备的CAP-MIP 作为填料建立了CAP的分子印迹固相萃取方法，结果表明：CAP-MIP对CAP的吸附率高于94.7％，CAP-MIP的最大吸附量达4670μg/g。同时，本研究首次将CAP-MIP作为基体固相扩散吸附剂（MIP-MSPD）分离富集牛奶中的氯霉素残留，使用MIP-MSPD和HLB固相萃取柱共同处理样品以及仅用MJP-MSPD两种方法处理样品。最终用HPLC进行检测。在优化条件下，不使用固相萃取柱净化的方法的检出限为0.15ng/mL，定量限为0.5ng/mL。不同氯霉素添加量的平均回收率高于89.7％，相对标准偏差小于10.1％。该方法操作简单快速，准确度好，精密度高且无需大量有机溶剂。在本体聚合方法合成CAP-MIP的基础上，利用沉淀聚合法合成了CAP分子印迹聚合物微球（（molecularly imprinted polymeric microspheres，MIPM）。由于本体聚合法得到的大块聚合物需要研磨粉碎，费时费力，且最终得到聚合物的大小不均匀；悬浮聚合、分散聚合需要特殊的分散剂；两步溶胀法操作繁琐；而沉淀聚合法无需特殊分散剂，能够一步制备聚合物微球，用途非常广泛。在本研究以甲基丙烯酸（MAA）为功能单

体采用沉淀聚合合成CAP-MIP，并通过扫描电镜照片对聚合产物形态进行分析。研究结果表明：此方法合成的聚合物大小均匀，粒径较小，比表面较大，理论上比本体聚合法合成的聚合物对模板分子的吸附性好且其固相萃取柱的装填性能也要优于本体聚合法合成的聚合物