线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞模型的研究
改良线栓法大鼠大脑中动脉阻塞模型的建立
【 关键 词】 中动脉阻塞再灌注 ; 型 , 模 动物 【 中图分类号】R3 -3 【 文献标识码 】A 【 文章编号 】17.8620 )800.0 6 1 5 [0 80.0 8 3 7 0
A o i e i d e Ce e r lAr e y Oc l so e h d f r M d f d M d l r b a t r c u i n M t o o i
crba re c ls n ( AO)b iai f epe g p aieatr ( P eerlatr o cui y o MC yl tno tr o a t r y P A)a disro fstr-mb lsit tee tra g o h t y l n e n et no uuee ou o h xen n i n l
2 D p m n o L b r oyA i a Si c , h n h i i t gU i r t S h l f e i n ,S a g a 2 0 1 ,C i ) . e ̄ e t f ao t nm c n e S a g a J o n nvs y c o d i ar l e a o e i o M c e h n i 0 0 h a h 1 n
Esa l h e t o a n Re e f so o e n Ra s t b i m n f Br i p r u i n M d li t s
S UN Yu’ YAN Gu . e g , o f n 2 JAN n ’ HU Y — e I G Ho g ,Z e sn
dvd dit t ru :cnrl n d ic t ngo p ,6rt e c . h t o ot l ru eesbetdt mprr d l iie o wogo p o t dmo f ai ru s s a h T er s f nr o pw r ujce t oa mide n s oa i o a a c og oe y
MCAO模型的制备
实验前准备实验器材:干棉球、酒精棉球、75%酒精、生理盐水、注射器(1ml、2ml)、黑色记号笔、固定大鼠用粗线绳、大鼠板、染色小烧杯、标本瓶手术器械:备皮剪子1、眼科剪1、大直镊 1 只、小弯镊 1 对、(动脉夹2)、止血钳2-3、缝合线、缝合针、持针器麻醉剂:10%水合氯醛( 400mg/kg)保温:60W白炽灯,于37cm高处直接照射能使肛温保持在37C栓线:直径0.24mm,头端光滑圆钝;在栓线18mm的位置用黑色记号笔标记;75%酒精清洁后置1: 2500单位肝素化生理盐水中备用。
体重与栓线直径:直径0.24mm的栓线适用于体重220-280g的SD大鼠。
TTC的配制:用L磷酸缓冲液(PBS)配成2%TTC溶液(),避光保存。
药物配制:无论生理盐水还是受试药物标签均采用代号,给药及评分均采用单盲。
仪器激光多普勒血流仪(Laser Doppler Flowmetry, LDF)系统,包括:PeriFlux 5001 Ma in Unit,PF5010 LDPM Unit (激光多普勒微血流灌注量检测单元) ,LD Probe 407-1 ( Perimed Co., Jarfalla, Sweden ;大鼠脑立体定位仪(深圳市瑞沃德生命科技有限公司);牙科手钻(Stron g 90#, Korea);大鼠脑切片模具;荧光正置显微镜(NIKON ECLIPSE 80i, X400)及成像系统( ACT-2U NIKON Imaging System)。
大脑中动脉栓塞( MCAO )模型的制备参照Zea Lon ga等[2]建立的大鼠大脑中动脉内栓线阻断方法,作适当改进。
10 %水合氯醛溶液400mg/kg,腹腔注射麻醉动物。
大鼠仰卧位固定,颈部正中切开皮肤,钝性分离各层组织,暴露右侧颈总动脉(CCA) 。
分离至颈内动脉(internal carotid artery,ICA)、颈外动脉(external carotid artery,ECA)分叉后一段,仔细分离避免损伤迷走神经和气管,置线备用。
大鼠中风实验报告
一、实验背景脑中风是导致人类死亡和残疾的主要原因之一,严重威胁着人类的健康。
近年来,我国科研人员在脑中风治疗领域取得了显著进展,其中脑机接口技术在治疗脑中风方面具有广阔的应用前景。
本实验旨在通过大鼠中风模型,研究新型植入式水凝胶神经电极在脑中风治疗中的应用效果,为临床治疗提供理论依据。
二、实验材料与方法1. 实验动物:选取健康成年SD大鼠50只,体重200-250g,雌雄不限。
2. 实验分组:将大鼠随机分为5组,每组10只。
对照组、模型组、干预组1、干预组2和干预组3。
3. 模型制作:采用线栓法制备大鼠脑中模型。
将大鼠麻醉后,固定于手术台上,于颈动脉插入线栓,阻塞大脑中动脉,制作脑中模型。
4. 干预方法:(1)对照组:不进行任何干预;(2)模型组:仅给予线栓法制备脑中模型;(3)干预组1:在模型制作后,将新型植入式水凝胶神经电极植入大鼠大脑中动脉梗塞区域,进行脑神经信息监测和调控;(4)干预组2:在干预组1的基础上,联合应用光遗传神经调控技术;(5)干预组3:在干预组2的基础上,联合应用抗血小板聚集药物。
5. 观察指标:(1)脑组织梗死面积:采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑组织梗死面积;(2)神经功能评分:采用Longa评分法评估大鼠神经功能恢复情况;(3)脑神经信号监测:采用脑电图(EEG)和磁共振成像(MRI)技术监测大鼠脑神经信号变化。
三、实验结果1. 脑组织梗死面积:干预组1、2、3的脑组织梗死面积均明显小于模型组(P<0.05),且干预组3的梗死面积最小。
2. 神经功能评分:干预组1、2、3的神经功能评分均显著高于模型组(P<0.05),且干预组3的评分最高。
3. 脑神经信号监测:(1)EEG分析:干预组1、2、3的EEG波形较模型组更为稳定,表明脑神经活动得到改善;(2)MRI分析:干预组1、2、3的MRI图像显示,脑组织水肿程度减轻,神经纤维损伤减轻。
尼莫地平对MCAO/R模型大鼠不同时间点血流灌注量的影响
尼莫地平对MCAO/R模型大鼠不同时间点血流灌注量的影响目的:利用激光散斑血流成像技术观察尼莫地平对大鼠大脑中动脉栓塞模型脑血流灌注量的影响。
方法:成年雄性SD大鼠,采用改良线栓法制备大脑中动脉梗塞/再灌注模型。
利用激光散斑血流成像技术观测造模前,缺血再灌注05、1、2、24h后脑血流灌注量情况,并对选定区域血流进行分析,再灌注24h TTC染色观察脑梗死体积。
结果:造模成功后大鼠右侧脑血流明显减少,灌胃给4mg/kg 尼莫地平后,大鼠局部脑血流渐渐增加,脑梗死面积减少,脑组织含水量减少。
结论:尼莫地平能显著增加MCAO/R模型大鼠血流量。
标签:尼莫地平;脑缺血再灌注损伤;激光散斑血流成像;脑血流量Effect of Nimodipine on MCAO/R Rats Different Time Point Blood PerfusionZHANG Zhixue1,3HUANG Xi1,3LI Yue1,2,3YANG Zhibin1,2,3XIAO Huai1,2,3WU Xiumei1,2,3ZHANG Chenggui1,2,3*1.Yunnan Provincial Key Laboratory of Entomological Biopharmaceutical R&D,Institute of Entomoceutics Research,Dali University,Dali 671000,China;2.Yunnan Provincial 2011 Collaborative Innovation Center for Entomoceutics,Dali University,Dali 671000,China;3.National-Local Joint Engineering Research Center of Entomoceutics,Dali 671000,ChinaAbstract:Objective To study the effect of nimodipine on cerebral blood flow in MCAO/R rats by laser speckle imaging (LSI). Methods To establish the MCAO/R model in male SD rats by the modified intraluminal filament technique. Measuring the cerebral blood flow before modeling and after ischemia-reperfusion for 05 h,1 h,2 h,24 h by LSI,meanwhile analysing the selected area blood flow,and observing the infarct size after perfusion for 24 h with TTC. Results The cerebral blood flow was decreased in right hemisphere after the models established successfully,and after the intragastric administration of nimodipine with 4 mg/kg,the regional cerebral blood flow of rats gradually increased,the cerebral infarction area reduced,and the brain water content was decreases. Conslusions Nimodipine significantly improve the cerebral blood flow of MCAO/R rats.Keywords:Nimodipine;Cerebral Ischemia-Reperfusion Injury;Laser Speckle Imaging;Cerebral Blood Flow缺血性腦卒中(Ischemic Stroke,IS)指脑的供血主动脉发生狭窄或阻塞,脑的血液供应出现障碍,导致氧和营养物质的缺乏,从而引起脑的功能异常,脑局部组织坏死[1]。
线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验(MCAO模型)的经验
线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验(MCAO模型)的经验本人现在正在做线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验(MCAO模型),这方面的资料我查了一些,这个实验我也作了一段时间,不敢说很专业了,不过现在基本上我能在15min左右完成手术,而且手术过程中不出一滴血,造模后缺血程度基本一致。
虽然前面有很多前辈发了很多MCAO的很专业的贴子,不过我觉得比较凌乱,现在我把我的心得体会和以前的贴子的精华部分奉献给大家,希望这会对将要做这个实验的朋友有一丝的帮助。
虽然做实验总会有郁闷的时候,不过风雨之后总会见到彩虹的,这可以也是我的心得体会。
衷心祝福大家能把实验做的成功、完美!实验前准备麻醉剂:水合氯醛(应较好的控制大鼠体温)保温:60W白炙灯高度为37cm直接照射能使肛温保持在 37℃栓线的制备:1.取熔点为56℃的固体石蜡一块,在瓷杯中加热熔化。
直径为0.24mm、长5cm的鱼线一端5mm长的一段,垂直在熔化的石蜡中迅速浸入并提起,立即凝固的一薄层石蜡可牢固地粘附在鱼线一端的表面,其直径为0.26mm。
就这样,普通的鱼线即可变成规相一致头端光滑圆钝的栓线。
2.在鱼线18mm的位置用涂改液标记一个白色点。
TTC的配制:用0.2mol/L磷酸缓冲液(PBS)配成2%TTC溶液(pH7.5),避光保存体重与栓线直径:线栓直径0.24mm采用的SD大鼠,体重250-300g。
实验方法:动物用10%水合氯醛(35mg/kg)腹腔注射麻醉。
仰卧位固定,颈正中线切口,沿胸锁乳突肌内缘分离肌肉和筋膜,分离左侧颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA),在CCA远心端和近心端与ECA处挂线备用。
用微动脉夹暂时夹闭ICA,然后近心端结扎CCA、ECA。
然后在距CCA分叉部4mm处剪一小口,将拴线插入到ICA,这时用绕在CCA远心端的细线轻轻系牢拴线。
(不可过紧,否则进线困难,但松了又会出血。
)用眼科镊轻推拴线,从血管分叉处开始算距离,当插入深度在18 mm时(一定要将血管放松至原来状态, 且保证标记点在分叉处,由于标记的是白色的所以很容易看的),紧紧系牢CCA远心端的细线,此时的关键是动作轻柔,不要使ICA有任何的牵拉,否则栓线会脱出ACA,可能会造成缺血失败。
大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型改良的实验研究
C A .8 ; V =10 )再灌注 1mn和再灌 注 2h 大鼠进行神经功能缺失评分 , 0i 4对 B组评分均 高于 A组 ( 00 ) M A P< . ; C O 5
再灌注模 型大 鼠神经功能缺 失评分与脑梗死体积 比的大小成线性 相关关 系( = . 3 P<00 ) r 08 , 7 .1。结论 模方 法; 神经功能缺失评分能反映脑梗死 的严重程度 , 可用作评 价药物疗效的指标。 关键词 : 栓法 ; 线 大脑 中动 脉阻塞再 灌注模型 ; 鼠 大
中 图分 类 号 : R一32 3 文 献 标 识 码 : A
采用
改 良的“ 头线栓 ” 梭 制作 M A C O再灌注模 型 , 神经功 能缺失评分和脑梗死体积 比变异度小、 稳定性 高 , 是可靠的制
急性脑梗 死 (ct cr rlna tn A I 的发病 率 、 au e ba i ri , C ) e e f co 死 1 11 实验动物及 分组 ..
・
论著 ・
大 鼠大脑 中动脉 阻塞再 灌 注模 型 改 良的 实验 研 究
牛 建 国 , 文 玉军 , 张莲香 , 王效 军 , 何仲 义
( 宁夏 医学 院基础学 院人体解 剖学 教研室 , 银川 70 0 ) 5 04
摘要 : 目的
通过对大鼠大脑 中动脉阻塞( i l crba ae cl i , C O 再灌注模型神经功能缺失评分的 md e e r r r oc s nM A ) d e l ty uo
法制成可实现再 灌注 的大脑 中动 脉阻塞模 型 , 因其勿 需开 12 方 法 . 颅、 创伤小 、 可实现再灌注 和更 接近人类 急性 脑梗死 经药物 12 1 “ .. 线栓 ” 的制备 1 普 通“ ) 圆头 线栓 ” 的制备 将 直 溶栓后血管再通 的病变过程 , 引起 学者们 的关 注。L na J 径为 0 2 m渔线 切成 5m长 的线 段 , og [ .m c 加热 拉直 , 端烧 烤 一
线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的研究及体会
Re s e a r c h a n d Ex p e r i e n c e o n Ma k i n g Ra t Mo d e l o f Mi d d l e Ce r e br a l Ar t e r y Oc c l u s i o n / Re p e r f u s i o n b y t h e Th r e a d Oc c l u s i o n Me t h o d Zh a n g
( 5) : 1 2—1 4 ( 收稿 日期 : 2 0 1 3— 0 8—2 0 ) ( 修 回 日期 : 2 0 1 3— 0 9—0 3 )
9
冯 天艳 ,方 荣 , 邓 改 改 ,等 .根 皮 苷 对 小 鼠 C C 1 急 性 肝 损 伤 的保 护作 用 [ J ] .中 药药 理 临床 , 2 0 1 0 , 2 6 ( 5 ) : 4 7— 4 9
鼠随机分为两组 , 组1 体重控 制为 2 3 0~ 2 4 9 g ; 组2 体 重控制为 2 5 0一 , 2 6 9 g , 每组 1 0只 。 以 改 良的 L o n g a 法 使 用 特 定 型 号 栓 线 制 作
大 鼠大 脑 中动 脉 闭 塞 模 型 , 缺血 2 h后 拔 出线 栓 实 现 再 灌 注 , 并 评 估 两组 大 鼠 的 神 经 功 能 缺 损 情 况 , 再 灌注 2 4 h时取 脑行 2 , 3 , 5一 氯 化 三 苯 基 四氮 唑 染 色 , 计 算 并 比较 两 组 大 鼠的 死 亡 率 , 神经功能评分和相对脑梗 死体积。结果 两 组 大 鼠的 死 亡 率 均 为 1 0 %,
5 9 7
1 1 曹 丹 ,薛 冰 洁 ,黄 文 峰 ,等 .湖北 海 棠 总 黄 酮 对 去 势 大 鼠骨 质 疏 松的影响 [ J ] .中药 药 理 与 临 床 , 2 0 1 1 , 2 7 ( 5 ) : 5 6—5 北 海 棠 总 黄 酮 对 成 骨 细 胞 增 殖 分
两种线栓制备法制作大鼠大脑中动脉阻塞再灌注损伤模型的研究
i n r a t s . T l A N Y i n gl , L I U i 2 , Y UHu a — h R 2 . D e p a r t m e n t o f Nu r s i n gl , t h e S e c o n dD e p a t r m e n t fn o e u r o s u r g e r y 2 ,t h eF i r s t
A f i f l i a t e d H o s p i t a l o f K u n m i n g M e d i a l U n i v e r s i t y , K u n m i n g 6 5 0 0 3 2 , Y u n n a n , C H I N A 【 Ab s t r a c t 】 Ob j e c i f v e T o e v a l u a t e t h e e f e c t o f t w o me ho t d s o f ma k i n g s u t u r e — e mb o l u s , a n d t o p r o v i d e
g r o u p o n e we r e s u b j e c t e d t o t e m p o r a r y MC AO / R b y u s i n g he t me t h d o o f Z e a L o n g a( h t e i t p o f s u t u r e - e mb o l u s b e h e a t -
海 南医学 2 0 1 4 年2 月第 2 5 卷第 3 期
H a i n a n Me d J , F e b . 2 0 1 4 , V o i . 2 5 , N o . 3
大鼠脑缺血模型制作
脑缺血模型分类及制备1.全脑缺血模型一般采用四血管闭塞法制作大鼠全脑缺血模型。
也有人通过结扎双侧颈动脉闭塞配合低氧或放血降压使全脑缺血。
但是全脑缺血模型与人类通常的脑梗死(多为单一血管闭塞)情形不一致, 且不能进行健患侧自身对照所以全脑缺血的动物模型在脑缺血研究中用的较少。
2. 局灶性脑缺血模型2.1.线栓法:大脑中动脉阻塞 (middle cerebral artery occlusion,MCAO) 是目前最常用的局灶性脑缺血模型,MCAO 模型先阻断颈外动脉(ECA)及其分支,且阻断翼腭动脉(PPA),以切断颅外来源的侧副循环血流。
从ECA插入尼龙线,经颈内动脉(ICA)到大脑前动脉(ACA),机械性阻断大脑中动脉(MCA)发出处的血供来建立大脑中动脉缺血模型。
此模型可在无麻醉状态下拔出尼龙线,恢复血流,实现再灌注。
线栓法具有不开颅、效果肯定、可准确控制缺血及再灌注时间的优点,用于研究神经元对缺血的敏感性、耐受性,药物疗效观察以及再灌注损害和治疗时间窗较为理想,同时也具有对全身影响小、动物存活时间长的特点,适于慢性脑损伤的研究。
控制好易变因素,可避免实验结果的不稳定性。
1.0实验动物1.2 SPF级SD大鼠,健康,雄性,体重为250g-300g1.3.建模方法1.4 颈部正中切口,暴露右侧颈总动脉,颈内动脉和颈外动脉。
使用6-0丝线在距离颈总动脉分叉4mm处结扎颈外动脉远心端,在颈外动脉穿入另一根6-0丝线,在靠近颈总动脉分叉处打一个活结。
3.使用动脉夹夹闭颈总动脉。
在距离颈总动脉分叉处3mm处的颈外动脉上剪一个小口,将一根头端处理过的0.33mm直径的尼龙线从小口中插入,进入颈内动脉,并向内插入大脑中动脉,尼龙线的插入深度距离颈总动脉分叉处约16±1mm。
4.缺血后90min拔掉线栓,用6-0丝线结扎外动脉近心端,用3-0丝线缝合颈部伤口,活力碘消毒伤口,将大鼠放在加热垫上,待清醒后放入恒温抚养箱饲养。
光化学法与线栓法制作局灶性脑梗死大鼠模型的比较研究
光化学法与线栓法制作局灶性脑梗死大鼠模型的比较研究娄惠娟;张红石;王宇峰;贾萌;丛德毓【期刊名称】《实验动物与比较医学》【年(卷),期】2022(42)1【摘要】目的本研究探讨光化学法和线栓法两种不同的局灶性脑梗死动物模型制作方法,通过调控不同实验参数,分析不同造模方法所致实验动物梗死体积与行为学之间的相关性。
方法将64只300~330 g雄性SD大鼠随机分为假手术组、光化学组及线栓法致大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)组,术后24h对大鼠进行神经功能评分及行为学测试,然后麻醉处死取脑组织,进行2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazole chloride,TTC)染色,评估大鼠脑梗死体积。
结果光化学组和MCAO组SD大鼠脑组织均有体积不等的梗死灶。
MCAO 模型缺血部位涉及半脑大部分皮质、纹状体、丘脑、海马和脑室下带;神经功能评分及平衡木实验评分与梗死体积有良好的相关性。
光化学法模型梗死灶在大脑皮层;神经行为异常与皮层梗死位置具有良好的相关性,与梗死体积之间的相关性相对较差。
结论线栓法建立MCAO模型后可观察到动物行为学评分与脑梗死体积密切相关;光化学法造模产生特定部位的病变和特定的行为变化,其行为学结果与梗死体积的相关性差。
【总页数】6页(P48-53)【作者】娄惠娟;张红石;王宇峰;贾萌;丛德毓【作者单位】长春中医药大学针灸推拿学院;长春中医药大学护理学院;长春中医药大学附属医院推拿科;长春新产业光电技术有限公司【正文语种】中文【中图分类】R-332;R743.3【相关文献】1.线栓法大鼠局灶性脑缺血模型制作方法的改进及评价2.基于线栓法大鼠大脑中动脉闭塞的局灶性脑缺血模型的比较研究3.栓线长度、直径及大鼠体重与栓线法大鼠局灶性脑缺血模型关系的研究4.线栓法大鼠局灶性脑缺血模型制作要点及进展5.线栓法致大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型的制作及思考因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
线栓法制作大鼠大脑中动脉梗死模型的体会与造模失败原因分析
线栓法制作大鼠大脑中动脉梗死模型的体会与造模失败原因分析胡华;刘杰;张燕辉;刘晶;杨元元;葛金文【摘要】线栓法制备大脑中动脉梗死(MCAO)模型是目前制备脑梗死模型最常用的方法,但目前仍存在诸多制约因素,譬如造模技术要求高、模型死亡率高、存活率和成功率较低、术后个体差异性大等许多亟待解决的问题.从实验动物的选择、麻醉剂的选择、线栓制备选择及插入深度、手术操作 4个方面对模型制备进行探讨,并从术中出血过多,术前、术后干预不足及其他可能导致造模失败的原因进行分析.【期刊名称】《中西医结合心脑血管病杂志》【年(卷),期】2018(016)010【总页数】3页(P1359-1361)【关键词】大脑中动脉梗死;线栓法;造模;失败;体会;原因【作者】胡华;刘杰;张燕辉;刘晶;杨元元;葛金文【作者单位】湖南中医药大学第一附属医院长沙 410007;湖南中医药大学第一附属医院长沙 410007;湖南中医药大学第一附属医院长沙 410007;湖南中医药大学第一附属医院长沙 410007;湖南中医药大学第一附属医院长沙 410007;湖南中医药大学第一附属医院长沙 410007【正文语种】中文【中图分类】R743.1;R255.2大鼠因其成本低、脑内血管解剖特性与人类相似等诸多特点,至今仍是研究脑缺血疾病最常用的动物。
制作动物脑梗死模型的方法有很多种,其中大脑中动脉梗死(MCAO)线栓法模型因不开颅、易于操作而被广泛应用。
大鼠MCAO模型是目前公认的研究脑梗死、脑缺血的经典模型,为研究脑缺血再灌注的机制及评估其治疗方案的疗效提供了可靠验证平台[1]。
近年研究发现,短暂性脑缺血对神经细胞起保护作用,可抵御其后发生的严重脑缺血,减轻缺血组织的病变程度,即诱发了脑缺血耐受(IT)[2]。
脑缺血耐受是指给予短暂的亚致死性缺血后诱导的脑内源性保护机制,从而对后续长时间缺血损伤产生耐受及自身保护作用。
建立脑缺血耐受的模型为进一步研究脑缺血对脑梗死神经保护作用的机制有重要意义。
大鼠的中风动物实验报告
本研究旨在通过建立大鼠中风动物模型,观察和分析中风对大鼠神经系统的影响,探讨中风的治疗方法和机制。
通过实验,为临床中风疾病的治疗提供理论依据。
二、实验材料1. 实验动物:清洁级SD大鼠,体重180-220g,雌雄各半。
2. 实验试剂:肝素钠、生理盐水、抗凝剂、注射用阿托品、注射用利多卡因等。
3. 实验器材:手术显微镜、手术刀、手术剪、镊子、缝合针、注射器、注射针、实验动物笼、电子天平等。
三、实验方法1. 动物分组:将大鼠随机分为对照组和实验组,每组10只。
2. 模型建立:采用线栓法建立大鼠中风动物模型。
实验组大鼠进行线栓法操作,对照组大鼠进行假手术操作。
(1)麻醉:将大鼠进行全身麻醉,麻醉药物为2%戊巴比妥钠,剂量为50mg/kg。
(2)线栓法操作:在麻醉状态下,将大鼠固定于手术台,剪开颈部皮肤,暴露出颈动脉。
用线栓通过颈动脉插入大脑中动脉,直至阻塞大脑中动脉。
(3)缝合:缝合颈部皮肤,放置引流管,进行抗感染治疗。
3. 观察指标:(1)神经功能缺损评分:采用神经功能缺损评分量表对大鼠进行评分,包括运动功能、感觉功能、平衡功能等。
(2)脑组织病理学观察:取大鼠脑组织,进行苏木精-伊红染色,观察脑组织形态学变化。
(3)脑组织神经递质检测:采用酶联免疫吸附法检测大鼠脑组织中神经递质水平。
4. 实验分组:(1)实验组:采用不同药物干预,观察对大鼠中风的影响。
(2)对照组:给予生理盐水处理,作为空白对照。
1. 神经功能缺损评分:实验组大鼠神经功能缺损评分显著低于对照组,说明药物干预对大鼠中风具有一定的治疗作用。
2. 脑组织病理学观察:实验组大鼠脑组织病理学变化较对照组轻,说明药物干预对大鼠脑组织具有一定的保护作用。
3. 脑组织神经递质检测:实验组大鼠脑组织中神经递质水平显著高于对照组,说明药物干预对大鼠神经递质具有一定的调节作用。
五、讨论本研究通过线栓法建立大鼠中风动物模型,观察和分析中风对大鼠神经系统的影响,探讨中风的治疗方法和机制。
线栓法制备大鼠中动脉缺血闭塞模型研究进展
颅、 效果肯定 、 可准 确控制 缺血 及再 灌注 时间等 方 面的优
点, 对研究神经 元对 缺血 的敏感 性与 耐受 性 、 药物疗 效观 察 以及再灌注损害和治疗时 间窗等方面较 为理想 , 目前 是
应用最 广 泛 的脑 缺 血 动 物 模 型 方法 。笔 者 拟 从线 栓 法
MC O模型影响 因素 以及近年来所做改 良进行探讨 。 A
脑缺血疾 病严重威胁 着患者健 康 , 立一种 生理指标 建 控制严格 、 操作简便 、 定可靠且 重复性好 、 稳 与人 类脑缺 血 病理过程相似的理想脑缺血动 物模型 , 对脑 缺血病理机 制 和药物
脉闭塞 ( A 引起者 占绝大多数 , MC O) 与此相适应 , 大脑 中动 脉 闭塞所致局灶 性脑 缺血模 型 的研究 也是 学者 们研 究 的 重点 。 目前 , 制备 MC O模 型的方 法有很 多种 , A 包括 光化
1 实 验 动 物 的 选 择
13 大 鼠性别的选择 : . 多数学 者认为 , 雌激 素对脑损 伤有 保护作用 , 不主张雌雄混用 , 多选 用雄 性动物
学 者 在 选 择 大 鼠时 不 限 雌 雄 J 。
。但也有
尽量选择 同亚种 , 同性别 , 同年龄组 , 体重基本 趋于一
致 的动 物 。
Wia 大鼠 M A sr t C O平均脑梗 死体 积最小 , 梗死灶 变异最大 ; Fshr 3 4大 鼠梗死灶最大 , i e2 3 c 变异最小 ; S 而 D大 鼠介于两
学法 、 三氯化铁 法 、 线栓法 、 自体血栓 法 、 流损 伤法 及 自 电
发性 MC O法 等… 。由于 Z aLna线 栓 法 具 有 不开 A e o g
功能衰竭 6 例 [ ] 陕西中医,04 2 ( 2 : 0 5— 7 . 5 J. 20 , 1 ) 1 7 1 6 5 0 [ ] 吴锡信 , 9 刘志龙 , 张曦 , 中草药液体型 药贴研制及 其治疗 等.
大鼠大脑中动脉线栓法制备局灶性脑缺血模型的研究现状
收 稿 日期 :0 7 6 1 2 0 —0 — 5 作 者单位 :100陕 西延 安 , 760 。 延安 大学 医学 院生 理教研 室
・
前 不作 为线栓 法制 备 MC AO 模 型 的麻 醉选 择 。但 乙醚可作 为补 吸麻醉剂 , 需要 时进 行追加麻 醉 。
物可 以降低 脑温 , 其程度 和持续 时间 不同 , 以水合氯
醛最 为显著 ] 。研究还 发现 一些麻 醉药物 对脑 缺血
由于该模 型通过 尼 龙 线插 入 血 管 而造 成 MC A
阻塞, 因此大 鼠颅 内血 管 直径 大 小 对实 验 结果 的影 响很大 。然而 不同 品系 、 别 、 龄和体重 的大 鼠颅 性 年 内动脉直 径 、 颈静脉孔 的大小 是有 差异 的 , 以实验 所
见 问题 , 合氯醛 和戊 巴 比妥 钠 可使 呼 吸频 率 降低 水
一
有异 , 模型 效果最 理想这 个角度 考虑 , 从 主张 多选用
Fsh r 4 i e一 4大 鼠进 行 模 型制 备 , 因 鼠源 问题 , c 3 但 目 前 以选用 S D大 鼠进行研 究者 较多 。
半, 势必造 成二 氧 化碳 潴 留和 低 氧血 症 。麻 醉药
国内学 者大 部 分用 1 水合 氯 醛 0 3 / O g 0 . m!lO
体重 或 3 戊 巴 比妥 钠 0 1 / O g体重 , 大 鼠腹 . mll O 给 腔 内注射 。但 在制 作短 暂 性脑 缺 血 发作 模 型 时 , 因
动 物麻醉 后不能及 时苏 醒 , 者 观察 不 到其 转 圈表 术 现, 故无法 判断是 否符合 实验 标准 , 而使该 模型 的 从 应用 受到 一定 限制 。麻 醉剂对 呼吸 中枢 的抑 制是 常
线栓法制备大鼠中动脉缺血闭塞模型研究进展
7 ・ 7
JANG OUR I XIJ NAL OF T ADII R TONA HI L C NES ME C NE E DI I
开颅 、 效果 肯定 、 可准 确控制 缺血及 再灌 注 时间等 方
一
致 的缺 血灶 , 宜选 择体 重差 异 小 的大 鼠为 宜 。辛
防 医 学 杂 志 ,0 3 1 ( )4 2 0 ,5 1 :8—4 . 9
[ 5 陈秀华 , 1] 陈润东 , 奎瑜.腹针疗法对睡眠障碍为主的亚健康状 态
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31 4—1 31 5.
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—
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C O、 A 自体血 栓法 MC O、 A 电流损 伤法 MC O、 A 自发
MA C O法等 。由于 ZaLna e og 线栓法 具有不
痧 驴 驴 痧 痧 痧 痧 驴 驴 移 《 痧 痧 驴 、≯ —
2 马华 , ] 顾群 , 周冰.养心 汤治疗驻健康状态心肾亏虚型失 眠的短 期疗效观察 [ ] 中西 医结合 心脑血管病 杂志 ,0 9, 7) 79 J. 20 7( :7
[ ] 中医杂志 ,09,0 1 :1. J. 20 5 (0)9 2 [9 李丽 , 1] 陈海明 , 白杰.足穴治疗对亚健康 人群 15例睡眠干预的 0
线栓法大鼠大脑中动脉闭塞模型的制备
“ 冬眠” 状态 的心肌得 以逆转、 复苏。 通过以上临床观察 , 以得出这样的结论 : 可 欣维宁能有效
地抑制血小板聚集 , P I 在 C 时可 起到确切的抗栓作用 , 能溶 并 解 已形成 的血栓 , 减少 P I C 时栓塞事件 的发生率 , 改善 P I C 预 后; 在联合其他抗凝剂时 , 出血并发症有增加趋势 , 选择适当病
现 的时 间早 , 对 照组 更 卑 , 持续 时 间较 正 常 演 变 时为 短 , 较 而 较
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C m ai n f h TMI I ad A TC - I I 8 r l o pr o o te I I s 6 n T C IS T M,04,2 19 :7 — 8 . i l o 20 3 (O )84 8 0 c tn
对照组更短。 提示欣维宁及联合尿激酶治疗均能成功地溶解 已
( 收稿 日期 :0 0 0 - 0 21—63 )
( )3 0 3 3 3 :3 — 3 .
1 7 例 5岁女性患者 , 联合治疗 ( 减量尿激酶 ) 3d出现烦躁 , 后
进 而 出现 嗜 睡 、 尿失 禁 等 症状 , 头颅 C 经 T证 实 为 右 颞 叶 大量 出
血, 抢救无效死亡。可见 , 在本研究 中, 单独使用欣维宁总体上
尚待 进 一 步 研究 、 证 。 验
参 考 文 献
[] T l sn R, e h L H t g n A,t 1.rq e c o tn 1 o e o T N w v K, a n' R e l i t o a F e u n y f se t trmb s f r c t c rn r y d o s f . m J C ril2 0 , 2 h o oi a e ue o aysn rme J A ado ,0 3 9 s t a o 】
线栓法大鼠MCAO模型制作的要点及经验总结
线栓法大鼠MCAO模型制作的要点及经验总结林军;李艳芳;李冲;蒙兰青【摘要】大鼠大脑中动脉闭塞模型接近于人体活体局灶脑缺血的动物模型而被广泛用于局灶性脑缺血的科学研究,线栓法具有不开颅、易操作、创伤小、重复性好、可准确控制缺血及再灌注时间等优点,是广大研究者制作大鼠局灶性脑缺血模型首选的方法,线栓法大鼠大脑中动脉闭塞模型是目前研究局灶性脑缺血的理想模型.但其成功率仍受很多要素的影响,如大鼠的选择、麻醉剂的选用、线栓的制备、术前准备、手术流程及术后护理等要素均可影响造模成功.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2018(024)017【总页数】6页(P3398-3402,3408)【关键词】大脑中动脉闭塞模型;线栓法;经验总结【作者】林军;李艳芳;李冲;蒙兰青【作者单位】右江民族医学院,广西百色533000;右江民族医学院,广西百色533000;右江民族医学院,广西百色533000;右江民族医学院,广西百色533000【正文语种】中文【中图分类】R743.32脑卒中是一种急性脑血管病,具有高发病率、高病残率及高病死率的特点,严重危害患者身心健康,同时给社会造成巨大的负担,临床上分为缺血性和出血性,其中缺血性脑血管病占80%[1]。
因此,建立一种理想的脑缺血动物模型对脑缺血的发病机制、治疗途径等研究具有重要意义。
大鼠因具有与人类相近似的脑血管解剖结构、功能等特点,常被用于复制脑缺血的实验动物模型[2],由于大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)为缺血性脑血管病的易患部位,故MCA 闭塞(MCA occlusion,MCAO)模型被广泛用于大鼠局灶性脑缺血的研究[3-5]。
线栓法具有不开颅、损伤小、易操作、可重复、可准确控制缺血及再灌注时间等优点,是制作大鼠脑缺血模型首选的方法[5-6]。
线栓法MCAO模型是目前研究局灶性脑缺血的理想模型[7]。
影响线栓法MCAO模型成功率的要素很多,但制模各要素目前尚未能达到统一标准,现就线栓法造模的制作要素予以综述和探讨。
龙生蛭胶囊保护脑缺血再灌注损伤大鼠的作用及机制研究
龙生蛭胶囊保护脑缺血再灌注损伤大鼠的作用及机制研究Δ方欢乐 1*,李晓明 1,周亚明 1,张鑫 2,刘小溪 2,陈衍斌 2, 3 #(1.西安培华学院医学院,西安 710125;2.陕西步长制药有限公司科研部,西安 710075;3.西安交通大学医学部,西安 710061)中图分类号 R 965 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2024)07-0813-06DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2024.07.08摘要 目的 探讨龙生蛭胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用及机制。
方法 通过改良线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO )模型。
实验分为假手术组(仅分离血管不插线栓,予同体积生理盐水)、模型组(造模,予同体积生理盐水)、尼莫地平组(阳性对照,造模,给药剂量为20 mg/kg )和龙生蛭胶囊低、中、高剂量组(造模,给药剂量依次为0.72、1.44、2.88 g/kg ),每组10只。
各组大鼠灌胃相应药液/生理盐水,每天1次,连续7 d 。
末次给药1 h 后,采用Zea Longa 评分法对各组大鼠的神经功能缺失情况进行评分;ABC-酶联免疫吸附试验法检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平;TTC 染色观察大鼠脑梗死体积并计算脑梗死体积比;苏木精-伊红染色观察大鼠脑组织病理形态的变化;免疫组化法检测大鼠脑组织NLRP 3蛋白阳性表达情况;实时荧光定量PCR 法检测大鼠脑组织Toll 样受体4(TLR 4)、核因子κB (NF-κB )mRNA 表达;Western blot 法检测大鼠脑组织TLR 4、NLRP 3、磷酸化NF-κB (p-NF-κB )及细胞核内NF-κB 蛋白表达情况。
结果 与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺失评分,血清TNF-α和IL-6水平,脑梗死体积比,脑组织NF-κB 和TLR 4 mRNA 的相对表达水平,以及脑组织TLR 4、NLRP 3、 p-NF-κB 蛋白的相对表达水平及其细胞核内NF-κB 蛋白的相对表达水平均显著升高(P <0.01);大鼠脑组织皮层神经细胞间隙增大、水肿明显,可见大量炎性细胞浸润;大鼠脑组织中NLRP 3蛋白阳性表达明显增多。
线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验(MCAO模型)的经验
线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验(MCAO模型)的经验大脑中动脉阻断(MCAO)模型是神经科学领域中常用的大鼠模型。
其通过阻塞大脑中动脉,模拟人类中风事件,研究其神经生理学和病理学特征。
其中线栓法(MCAO)是最常用的方法之一。
在此分享我们实验室的线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验的经验。
器材和试剂•线栓:0.25 mm 在线自收缩线(ETHICON)•麻醉药品:氯丙嗪(SP),异丙酚,芬太尼,低温麻醉药戊巴比妥(CooperSurgical)•体外保温罩•50mL离心管,注射器•玫瑰灌注液(Rose Bengal)•激光•带有选定项的二氧化碳激光打印机•小鼠充氧仪实验步骤1. 麻醉和体外保温在实验前,给大鼠注射氯丙嗪50mg / kg和芬太尼0.05mg / kg进行麻醉。
然后将其放在温控加热膜上,在37°C的环境中保持温暖,避免体温下降,影响实验结果。
2. 大脑中动脉的阻断通过颅骨开窗术来暴露左大脑前动脉(MCA)和大脑中动脉(CCA)。
然后将一根0.25mm的ETHICON线栓通过MCA插入CA1段,并通过其向上提拉,直到线栓嵌塞MCA,被阻断的程度可通过检查大鼠是否出现神经功能损伤来估计。
3. 脑卒中检测通过检查神经功能损伤来确定阻断是否成功。
此外,在大脑中动脉阻断模型中,使用玫瑰灌注液作为标记物,使脑组织变为黄色,并用二氧化碳激光打印机将其扫描并记录,以测量阻塞后卒中区域的大小。
4. 恢复当所有实验数据都被记录下来时,位置应该被清理干净,手术区域应该被缝合。
大鼠应该被放回到保暖的笼子中,直到醒来。
在恢复期间,鼠标应以其正常饮食的50%的速度进食。
针头和注射器使用过后应正确处理。
线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验是一个耗时、复杂的实验,但它是研究脑卒中和其他神经疾病的有效模型。
正确执行实验步骤和仔细注意实验细节是保证实验安全和有效的关键。
我们希望通过分享这些实验经验,能够为闵行科学家提供一些有价值的参考建议。
大鼠栓线法MCAO模型中栓线插入深度的研究
中图分类号GXYOZEE 文献标识码GJ 文章编号G*))"ZS""SD!))!F)"Z)!)YZ)"
自 *YSQ年 和 *YSY年 b$]cdR]与 e=\Zf$gZ h\i*j分 别 制 成 不 用 开 颅 的 血 管 内 栓 线 法 可 逆 性 阻 断大鼠大脑中动脉DHIJF的脑缺血k再灌注 损 伤 模 型 后’国 内 有 关 大 鼠 脑 缺 血 实 验 研 究 纷 纷采用LHIJ 距颈内动脉DKIJF起始部的距离 究 竟 是 多 少 ’未 见 报 道 ’这 就 造 成 栓 线 的 插 线 深 度 各 家 报 道 不 一’也 给 后 来 应 用 者 带 来 困 惑L HIJ 的 深 度 是 栓 线 插 入 长 度 的 依 据’直 接 关 系 到 造 模 是 否 成 功’本 实 验 测 量 了 大 鼠 HIJ 起 始 部 距 KIJ 起 始 部 的 距 离l插 线 深 度 与 HIJ 起 始 部 关 系’插 线 深 度 与 脑 梗 塞 体 积 的 关系L
未出现梗塞灶 无神经病学评分
合计
-
.
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),
-
)-
造 模 成 功 率 %#
-0*./ 02*22
!*! 栓线插入长度与造模成功率的关系 栓线插入长度小于等于)*+,&’ 的 造 模 成
功 率 为 -0*./#3出 现 在 -..4和 -.-4体 重 的 大 鼠3神 经 病 学 评 分 均 为 )分5栓 线 插 入 长 度 大 于)*+,&’ 的造模成功率为02*22#5而 未 出 现 脑梗塞灶的大鼠体重为 -6-4和 -//43神 经 病 学评分为,5两种插入长度造模成功率比较 78 ,*,."9-检 验 3确 切 概 率 法 $"表 -$5 !*: 栓 线 插 入 长 度 1 ;*<=>? 的 不 同 体 重 大
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AB S T RACT:Ob j e c t i v e To e x p l o r e t h e s i mp l e a p p r o a c h t o ma k e t h e s t e a d y mi d d l e c e r e b r a l a r t e r y
t h e ECA( P= 0 . 6 9 4) . Co n c l u s i o n Ap p l y i n g t h e f i s h i n g t h r e a d wi t h i t s t e r mi n a t i o t r e a t e d wi t h v a r n i s h, l i g a t i n g t h e ECA a n d i n s e r t i n g f r o m t h e CCA c o u l d b u i l d s t e a d y u n i l a t e r a l M CAO mo d e l
。
1 2・
扛西蜃 学院学报 2 0 0 9年第 4 9卷第 8期 Ac t aA c a d e mi a e Me d i c i n a e J i a n g x i 2 0 0 9 , V o l 4 9 , N o 8
no s i g ni f i c a nt d i f f e r e n c e ( P= 0 . 6 94 ) a nd a l s o t he r a t e s b e t we e n l i g a t i n g t he ECA a n d no n— l i ga t i ng
c a n t di f f e r e nc e ( P= 0 .6 2 6) . Th e t i me o f i n s e r t i on f r o m CCA i s o b v i ou s l y s ho r t e r t ha n t h a t f o r m I CA ( P 一 0.0 02);An d t h e s u c c e s s r a t e s b e t we e n t h e t wo ha d no s i gn i ic f a n t d i f f e r e n c e(P一 0. 4 4 1 ); The s uc c e s s r a t e s o f t h e mo d e l bu i l di n g b e t we e n t he t wo d i f f e r e n t i n s e r t i ng po s i t i o ns ha d
收 稿 日期 :2 0 0 9 —0 6 —2 6
作 者 简 介 :陈卫 松 ( 1 9 8 2 -) , 男, 硕士研究生 , 主要 从 事 神 经 病 学 研 究 。 通信作者 : 朱 晓钢 , 女, 主任医师 , E - m a i l : z x g s y p s j @y a h o o . c o n. r c a 。
t h e s p e c i a l l y ma d e n y l o n s u t u r e ’ s ( P= = = 0 . 0 0 1 ) , a n d t h e r a t e s b e t we e n t h e l a t t e r t wo h a d n o s i g n i f i —
的鱼 线 和 特 制 的 尼 龙线 栓 ( P=0 . 0 0 1 ) , 而后 2 种 线 栓 的 建 模 成 功 率 比较 差 异 无 统 计 学 意 义 ( P一0 .6 2 6 ) ; 经C C A 插线时间明显低于经 I C A插线时间( P一 0 . 0 0 2 ) ; 两 者 的 建模 成 功 率 比较 , 差异无统计 学意 义( P一 0 . 4 4 1 ) ; 2种 不 同部 位 插 线 的 建 模 成 功 率 比 较 及 结 扎 E C A和 未结 扎 E C A 的 建模成 功 率 比较, 差异 均无 统计 学意 义 ( 均 P一
t he mod e l bu i l d i n g wa s l owe r t h a n t he f i s hi n g t h r e a d S wi t h i t s t e r mi na t i o t r e a t e d wi t h v a r n i s h a nd
t i me o f i n s e r t i o n a n d t h e s u c c e s s r a t e o f t h e mo d e l b u i l d i n g : We o b s e r v e d t h e e f f e c t o f t h e t wo d i f —
陈 卫松 , 朱晓钢
( 1 . 南昌大 学研 究生院 2 0 0 7级 ;2 . 江西省人 民医院干部 病房神 经 内科 , 南昌 3 3 0 0 0 6 )
摘 要 :目的
探索一种用线栓法制作稳定的大 鼠单侧大脑 中动脉阻塞( MC A O ) 模型 的简易方法。方法 不 分离
结扎翼腭动脉( P P A) , 用 3 种 不 同 的 线 栓 即 头 端 未 处理 的鱼 线 、 指 甲油 处 理 的 鱼 线 和 特 制 的尼 龙 线 栓 , 分 别 经 大 鼠 的颈 总 动 脉 ( C C A) 和颈内动脉( I C A) 插线 , 分 析 不 同 种 类线 栓 和插 线 部 位 对 大 鼠单 侧 MC A O 手 术 的 插 线 时 间 及 建
立 MC AO 模 型成 功 率 的 影 响 ; 观察 2种 不 同 插 线 部 位 和 结扎 颈外 动脉 ( E C A) 与 否 对 大 鼠 MC A O 建 模 成 功率 的 影 响 。结 果 3种线 栓 的插 线 时 间 比较 差 异 无 统计 学 意义 ( P一0 . 3 9 7 ) ; 未 处 理 的 鱼 线 的建 模 成 功 率 低 于 指 甲 油 处 理
n y l o n s u t u r e , i n s e r t i n g f r o m t h e c o mm o n c a r o t i d a r t e r y( C CA ) a n d t h e i n t e r n a l c a r o t i d a r t e r y
( I CA)r e s p e c t i v e l y, t o a n a l y z e t he e f f e c t of di f f e r e nt ki nd s o f s u t ur e s a n d i ns e r t i ng p os i t i on s t o t he
s u t u r e s h a v e n o s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e ( P一 0 . 3 9 7 ) . Th e u n t r e a t e d f i s h i n g t h r e a d S s u c c e s s r a t e o f
o c c l us i o n( M CAO) mo d e l i n r a t s by u s i n g s u t ur e e mbo l i z a t i on me t h od . Me t h o d s I n t h i s s t u dy, we di dn ' t i s ol a t e a nd l i g a t e t he p t e r y g op a l a t i ne a r t e r y, a n d us e d t h r e e k i nd s of s ut u r e — t h e u n t r e a t e d f i s hi ng t hr e a d, t h e f i s hi n g t hr e a d wi t h i t s t e r mi n a t i o t r e a t e d wi t h v a r ni s h a n d t he s p e c i a l l y ma de
文献标 识码 : A
文章 编号 : 1 0 0 o 一2 2 9 4 ( 2 O o 9 ) o 8 一o o 1 l -0 4
Re s e a r c h o n M a k i n g M i d d l e Ce r e b r a l Ar t e r y Oc c l u s i o n Mo d e l i n Ra t s b y Us i n g Su t u r e Em b o l i z a t i o n Me t h o d
江 西 医学 院 学 报 2 0 0 9年 第 4 9卷 第 8期 A c t a A c a d e mi a e Me d i c i n a e J i a n g x i 2 0 0 9 , V o l 4 9 ,
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1 1 ・
Байду номын сангаас
线 栓 法 制 作 大 鼠 大 脑 中 动 脉 阻塞 模 型 的 研 究
0 . 6 9 4 ) 。 结论
模 型。
采 用 指 甲油 处 理 头 端 的 鱼线 , 结扎 E CA经 C C A 插 线 可 以 简单 快 捷 地 建 立 稳 定 的 大 鼠 单侧 MC A0
关 键词 : 线栓法 ; 大脑 中动脉 阻塞 ; 模型 ; 勃物 , 实验 ; 大鼠
中图分 类号 :R 一3 3 2
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