枸杞组织培养
枸杞组织培养工厂化育苗技术研究进展

枸杞组织培养工厂化育苗技术研究进展作者:廖思红来源:《安徽农业科学》2014年第23期摘要综述了枸杞组织培养技术的研究现状,并对枸杞组织培养技术应用到工厂化育苗的发展趋势进行了分析,在此基础上提出了发展对策。
关键词枸杞;组织培养;工厂化育苗中图分类号S188;Q943.1文献标识码A文章编号0517-6611(2014)23-0770-02Research Advances of Industrial Seed Culture Technology of Chinese Wolfberry Tissue Culture LIAO Sihong (Wuhan Wo Team Ecological Technology Co. Ltd., Wuhan, Hubei 430071)AbstractThe research situation of Chinese wolfberry tissue culture technology was reviewed,and application trends of the tissue culture technology on factory nursery were analyzed, on the basis of this, some useful measures were put forward.Key words Chinese wolfberry; Tissue culture; Industrial seed culture作者简介廖思红(1986- ),女,湖北武汉人,工程师,硕士,从事农业资源开发研究。
收稿日期20140708枸杞(Lycium barbarum, Chinese wolfberry)是一种补益类名贵中药,属茄科枸杞属,为多年生落叶灌木,全世界约有80种,主要分布在南北美洲及欧亚大陆。
枸杞富含多种营养及药用成分,如蛋白质、多糖、胡萝卜素、甜菜碱、硫胺素、生物碱、甙类等生物活性物质及钙、磷、铁、硒等营养成分,还有VE、黄酮类等抗氧化活性物质[1-2]。
植物组织培养技术在枸杞栽培中的应用研究

植物组织培养技术在枸杞栽培中的应用研究随着人们对健康意识不断增强,保健品行业也越来越火爆,其中枸杞成为名副其实的“健康之果”。
枸杞既是中草药又是食用植物,经常食用具有滋补健身的效果。
然而,传统的枸杞种植方式仍存在许多问题,例如收成周期长、产量低,而应用现代生物技术则可以解决这些问题。
植物组织培养技术作为现代生物技术的重要组成部分,可以大幅提高枸杞的育种效率和品质,因此日益受到人们的重视。
本文将介绍植物组织培养技术在枸杞栽培中的应用研究。
一、植物组织培养技术的原理和优点植物组织培养技术是通过利用细胞培养技术、组织培养技术、植物生长激素的作用,使植物体细胞和组织在营养培养基中不断分化和生长,从而实现对植物生长和发育的调控和掌控。
相比传统的育种方式,植物组织培养技术有以下优点:1. 提高育种效率。
植物组织培养技术可以利用细胞、组织和器官等不同等级的生物材料进行培养,育种过程中可以在不同时间段进行采样、分析和筛选,从而大幅缩短育种周期,加快育种进程。
2. 提高育种品质。
植物组织培养技术可以通过调节嫁接地上和地下部分、单个细胞、组织细胞等不同部位的比例来控制植物的生长和发育。
可以通过外源植物生长素和植物抗生素的添加,进而调节植物的性状、提高产量、培育抗病、抗虫等优质种质。
3. 拓宽育种手段和模式。
植物组织培养技术可以利用体细胞胚胎发生、人工授粉、转基因等新技术,来获得高产、丰产、抗病、抗灾害的新品种。
二、植物组织培养技术在枸杞栽培中的应用现状枸杞是一种常见的中草药,同时也是一种食用植物。
近年来,植物组织培养技术在枸杞育种中得到了广泛的应用。
目前的研究主要集中在以下几个方面:1. 枸杞芽、叶、茎的组织培养研究人员将枸杞的芽、叶、茎等不同部位的组织在培养基中进行诱导分化,观察不同外源植物生长素和植物抗生素对组织分化的影响。
结果显示,添加细胞分裂素和植物生长素的培养基中,枸杞芽、叶、茎等不同组织的生长情况和分化比例均得到了明显改善。
枸杞组织培养关键技术的研究

枸杞组织培养关键技术的研究枸杞(学名:Lycium barbarum L.),是一种传统的中药材,具有抗氧化、抗衰老、免疫调节、抗肿瘤等多种药理作用。
枸杞富含多种营养物质,如多糖、色氨酸、谷胱甘肽、维生素C等,被广泛应用于药品、保健品、食品等领域。
为了满足市场需求,保证枸杞的质量和数量,培养优质的枸杞组织成为一项重要的研究课题。
枸杞组织培养是通过外植体培养的方法,将枸杞的组织或细胞分离培养,进行无性繁殖和快速繁殖。
枸杞组织培养技术的研究,涉及外植体选择、培养基配方、生长调节物质的优化、愈伤组织诱导、植株再生等多个方面。
首先,在枸杞组织培养中,外植体的选择非常重要。
外植体可以选择不同部位的茎、叶、刺等组织,也可以选择不同年龄的植株。
通过对外植体的选择和处理,可以获得不同生长状态和生理活性的枸杞组织,为后续培养提供良好的材料基础。
其次,在枸杞的组织培养中,培养基配方是关键。
常用的培养基包括Murashige和Skoog培养基、B5培养基等。
培养基中添加适量的碳源、氮源、无机盐等,可以提供细胞分裂和生长所需的营养物质,促进外植体的增殖和愈伤组织的形成。
第三,在枸杞的组织培养中,生长调节物质的优化也是一个重要环节。
生长调节物质包括激素和维生素等。
激素的添加能够调控组织的分化和生长,如生长素能够促进愈伤组织的形成,细胞分裂素能够促进细胞的分裂和增殖。
维生素的添加对组织生长和发育也具有重要的作用。
最后,枸杞组织培养中的愈伤组织诱导和植株再生是关键的技术和步骤。
愈伤组织来源于外植体的组织分化,是细胞分裂和再生的基础。
通过在培养基中添加适量的激素和调节物质,能够有效地诱导愈伤组织的形成。
然后,通过调节培养基的成分和条件,将愈伤组织转化为植株,实现枸杞的快速繁殖和大规模生产。
枸杞组织培养关键技术的研究,在提高枸杞生产效率、保证品质和数量方面起到了重要的作用。
通过优化外植体选择、培养基配方、添加生长调节物质以及愈伤组织诱导和植株再生等关键技术,可以提高组织培养的成功率和效率,同时也为枸杞的遗传改良和功能基因研究提供了坚实的基础。
黑果枸杞组培快繁技术研究
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黑果枸杞组培快繁技术研究作者:刁玄章周玉丽来源:《安徽农业科学》2022年第07期摘要 [目的]優化黑果枸杞组培快繁条件。
[方法]以黑果枸杞的种子为材料,在种子无菌萌发后,取带腋芽的嫩茎段作外植体,以不同基本培养基与不同种类的植物生长调节剂以及不同浓度配比,研究不同种类植物生长调节剂对黑果枸杞组培苗增殖和生根的影响。
[结果]以MS 为基本培养基,添加不同浓度的6-BA与IBA、IAA组合处理均能提高组培苗的增值倍数,其中0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA增殖效果明显,增殖倍数达到9.33;5种不同基本培养基中,MS对黑果枸杞组培苗的增殖效果最好,芽多,生长状况良好;生根培养中,添加生长素可抑制黑果枸杞组培苗生根,不添加任何生长素的WPM培养基的生根效果最好,生根率最高,达到97.5%。
[结论]该研究可为建立黑果枸杞快繁体系提供科学依据。
关键词黑果枸杞;组织培养;增殖;生根中图分类号 S567.1+9 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2022)07-0099-04doi:10.3969/j.issn.0517-6611.2022.07.023开放科学(资源服务)标识码(OSID):Study on Tissue Culture and Rapid Propagation of Lycium ruthenicumDIAO Xuan-zhang1,ZHOU Yu-li2(1.Agriculture and Rural Affairs Bureau of Liuhe District,Nanjing,Jiangsu 211599;2.College of Agronomy,Anhui University of Science and Technology,Fengyang,Anhui 233100)Abstract [Objective]To optimize the conditions of Lycium ruthenicum seed rapid propagation system.[Method]With Lycium ruthenicum seeds as the material,after the sterile seed germination,take tender stem segment with axillary bud as explant,with different basic culture medium with different kinds of plant growth regulator and concentration ratio,the effects of different kinds of plant growth regulator on Lycium ruthenicum somaclone proliferation and rooting werestudied.[Result]With MS as the basic culture medium,adding different concentrations of 6-BA and IBA,IAA combination treatment all can improve the value of the somaclone multiples,6-BA and IAA on proliferation effect was obvious,and proliferation ratio was 9.33;among the five different basic media, MS had the best proliferation effect on the tissue culture seedlings of Lycium ruthenicum, with many buds and good growth; in rooting culture, adding auxin can inhibit the rooting of tissue culture seedlings of Lycium ruthenicum. The rooting effect of WPM medium without auxin was the best, and the rooting rate was the highest, up to 97.5%. [Conclusion]This study can provide a scientific basis for establishing the rapid propagation system of Lycium ruthenicum.Key words Lycium ruthenicum;Tissue culture;Propagation;Rooting黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr.)为茄科(Solanceae)枸杞属(Lycium L.)多年生落叶灌木,主要分布于西北及内蒙古等地,在中亚、高加索和欧洲也有分布[1]。
黑果枸杞的组织培养快速繁殖技术
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黑果枸杞的组织培养快速繁殖技术李小艳;王梅;段鹏慧;侯艳霞【摘要】为黑果枸杞野生种质资源的保存和优良株系的快速繁殖提供技术支持,以黑果枸杞的带芽茎段为外植体,在MS、1/2 MS培养基中添加不同种类和浓度的激素,进行组织培养快速繁殖试验,研究黑果枸杞的组织培养快速繁殖技术.结果表明:MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L+0.7%琼脂+3%蔗糖为最佳诱导芽分化的培养基;最适继代增殖培养基为MS +0.7%琼脂+3%蔗糖;生根培养基选用1/2MS+IBA 0.3 mg/L+0.7%琼脂+3%蔗糖,移栽成活率为90%.%To provide technical support for wild germplasm resources preservation and rapid fine strain propagation of L.ruthenicum,the authors chose stem with buds of L.ruthenicum as explants,and studied on tissue culture and rapid propagation in MS and 1/2MS medium supplemented with different kinds and concentrations of hormones.Results:Suitable medium for axillary bud sprouting was MS+6-BA 1.0mg/L+IBA 0.5mg/L+0.7% agar+3%sucrose;The optimum subculture medium was MS +0.7% agar+3%sucrose;The suitable medium for plantlet rooting was 1/2MS+IBA 0.3mg/L+0.7%agar +3% sucrose.The transplanting survival rate was 90%.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2017(045)006【总页数】3页(P12-14)【关键词】黑果枸杞;初代培养;增殖培养;生根培养【作者】李小艳;王梅;段鹏慧;侯艳霞【作者单位】山西林业职业技术学院园艺系,山西太原030009;山西林业职业技术学院园艺系,山西太原030009;山西林业职业技术学院园艺系,山西太原030009;山西林业职业技术学院园艺系,山西太原030009【正文语种】中文【中图分类】S567.1+9黑果枸杞(Lycium ruthenicum)属茄科枸杞属落叶灌木,广泛分布于宁夏、甘肃及青海等西北地区[1],在保持水土、防风固沙等方面具有重要的生态功能[2]。
枸杞组培快繁技术
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枸杞组培快繁技术枸杞组培快繁技术枸杞为茄科植物,是茄科多年生落叶灌木,全世界约有80种,我国有7种3变种,枸杞营养成分丰富,鲜果中可溶性固形无质量分数为15%~20%,总糖8%~12%,有机酸0.45%~0.55%,粗脂肪1.87%,粗蛋白3.13%,粗纤维1.62%,氨基酸0.30%~0.70%,灰分0.95%,VC为146.5~423.1mg/kg,在传统和现代医学领域应用前景广阔。
枸杞利用组织培养方法育苗,具有用材少、繁殖系数高、速度快等特点,且可扩大变异范围,或得有意的突变体,从中培育出新品种。
并可为枸杞工厂化育苗、规模化种植开辟新途径;通过组织培养可以繁育脱毒苗,有利于无公害栽培。
外植体的建立于8月份天气晴朗的下午到田间取长势较好、无病虫害的枸杞一年生嫩枝及顶芽,将叶片剥去,用流水洗净,纱布包好,移至超净工作台上,将材料放入75%酒精浸泡15秒后,再放入0.1%的氯化汞中消毒12分钟。
用无菌水冲洗4~5遍,将顶芽及以下1cm 左右的嫩茎切下,然后切成一芽一段接到配好的培养基上。
所用培养基为MS+6-BA 1.0(单位mg/L,下同)+NAA 0.1+琼脂0.65%+糖3%,PH5.8。
一周左右腋芽开始萌动,半个月左右可看到丛生芽,但芽只会抽长而叶不会展开,此时需转到继代培养基培养。
继代培养将丛生芽切成芽块,转到继代培养(MS+6-BA 0.5+IBA 1.0+琼脂0.65%+糖3%)中进行继代培养。
培养工程中,光强为1500~2000LX,每天光照10h小时左右。
一个月后,芽块上长出小植株,将小植株切成带1~2节的茎段,再次接到继代培养基中。
10天后从节上萌发出腋芽,30~35天腋芽又长成植株。
此后,不断将植株进行继代培养,让其不断分化出芽、长成小植株。
每次继代的时候不宜太长(30~40天为宜),否则叶子容易变白、脱落,且会长出根。
生根当植株长到4cm时,将其挑起,从其基部切断,接到1/2MS+IBA 0.1+糖3%+琼脂0.65%(1/2MS为MS的大量元素减半,其他成分不变)培养基上,经实验研究表明,在生根过程中,盐的浓度降低(即采用MS培养基大量元素减半)附加低浓度的生长素或不添加任何激素,都能粗促使植株生根。
枸杞组织培养的研究进展
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1.2.3
花药花粉培养& 单倍体植株在枸杞品种选育及遗
传分析中具有重要意义$ 单倍体植株在枸杞上的获得主 要通过花粉和花药培养[5]$ 樊映汉[5]采取含单核晚期花粉 的花药培养 ! 在 MS+KT0.2 mg/L+IAA2.0 mg/L! MS+KT
0 . 5 mg/L+2 ! 4- D 0.2 mg/L ! KT 1.0 mg/L+2 ! 4- D 0.5 mg/L 培养基上诱 导 形 成 较 多 胚 状 体 ! 不 经 转 培 即 能 发 育 形 成 绿 苗 $ 经 根 尖 染 色 体 检 查 2n=12 ! 证
15%# 糖约 30%# 还含有枸杞多糖 ’ 胡萝卜素 ’ 甜菜
碱’ 硫胺素’ 生物碱’ 甙类等生物活性物质及钙’ 磷’ 铁 ’ 硒等营养成分 # 还有 VE’ 黄酮类等抗氧化活 性物质
[2#18]
$ 枸杞果实是补益治 虚良药 # 在 % 本 草备
要 & 中指出 # 枸杞有 ( 润肺 ’ 清肝 ’ 滋肾 ’ 益气 ’ 生 精 ’ 助阳 ’ 补虚劳 ’ 强筋骨 ’ 祛风 ’ 明目 ) 等作用 $ 枸杞根皮 # 气味苦寒 # 有 ( 能泻肝肾虚热 # 能凉血而 补正气 # 治五内邪热 # 吐血尿血 # 咳嗽消渴 # 外治肌 热虚汗 # 上除头风痛 # 中平胸肋痛 # 下利大小肠 ) 等 作用 $ 枸杞叶有降压和保肝作用 # 叶的醇提取液有增 强巨噬细胞吞噬功能的作用 $ 近代医学表明 # 枸杞还 具有抗肿瘤 ’ 抗衰老 ’ 调节血脂和血糖 ’ 进行免疫调 节等作用$ 现代药理实验证明枸杞子还具有抗肿 瘤 ’ 抗衰老 ’ 调 节血脂和血 糖 ’ 进行免 疫调节等作 用
体培养来诱导三倍体植株! 以获得无籽) 大果枸杞新品 种* 目前! 已成功地获得了不同倍性的胚乳植株! 并培 育胚乳植株开花结果! 完成了生活周期* 王莉等用开花 后 20 d 左右的枸杞胚乳! 在附加 2! 4- D + 0.2 mg/L % 的
枸杞的组织培养技术
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农技推广
枸杞的组织培养技术
陈实验, 实验结果显示, 适 合 枸 杞 的 初 代 分 生 培 养 基 为 MS +6 -BA0.1 +IAA0.5 苗 的 质量最好;用 MS+6-BA0.1+NAA0.01+IAA0.2 继代效果最好; 生 根 培 养 基 1/2MS +NAA0.01 +IAA0.3 为 最 佳 , 生 根 率 达 到 90%以上。
2、不同激素组合对宁杞 1 号芽分化阶段的影响 将丛生芽在切割成小试材接种于下列几种培养基中, 试验
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一、试验材料及方法 1、试验试材 采用结实量大、色泽鲜红、果肉口感好的枸杞优株树上的嫩 茎尖作外植体。 2、配置培养基 试验采用改良的 MS 配方为基本培养基, 并附加植物激素 (8 种对比)配好后装瓶 121℃~126℃条件下灭菌 15㏕。 3、外植体灭菌与接种 将外植体浸入吐温浸泡 15~25min, 自来水冲洗至无泡,移 至超净台中切成 2~3㎝小段,浸入 75%酒精 3~5s,再用 0.1%Hg- cl2 液浸泡 4~10min,并不断搅动,无菌水清洗 4~5 次,最后将小 段两端各剪掉一部分,用无菌滤纸吸干表面水分接种,每瓶一块 外植体。 4、培养基和培养条件 采用改良的 MS﹙大量元素为原来的 3/4﹚,诱导丛生芽培养 基含蔗糖 2.8%,生根培养基含蔗糖 1.5%,所有培养基中均含琼 脂 0.5% PH6.4。 高压灭菌 30min,培养温度 25~28℃,光照周期 16/8h,光照强度 1500~1600lux,培养室湿度 55%~70%。 二、结果和分析 1、不同激素组合对芽诱导的影响 将试材接种于 3/4MS 培养基,附加蔗糖 28mg/L,如表 1 所 示激素配比,5d 左右分化愈伤,1 周后外植体开始分化。 表 1 不同浓度的 6-BA 与 NAA、IAA 对初代分生的影响
枸杞组织培养再生体系优化
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枸杞组织培养再生体系优化包振华;郭军战;周玮;张杨;何志美;胡丽娟【摘要】以"宁杞2号"初春茎段为外植体,研究了不同灭菌时间对枸杞茎段无茵外植体建立的影响及不同激素、不同浓度组合对枸杞茎段丛生芽的诱导、增殖和生根的影响.结果表明:外植体灭菌采用升汞消毒7 min效果最佳,其污染率和死亡率分别为9.2%和15%;丛生芽诱导的最适培养基为6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1,其侧芽萌发率可达90%;芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.6 mg·L-1+活性炭0.5 g·L-1,其增殖系数可达4.68;诱导生根的最佳培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg·L-1,芽苗的生根率和生长数分别为95.0%和11.6,且根的生长速度较好,根系粗壮、愈伤较少.【期刊名称】《西北林学院学报》【年(卷),期】2010(025)005【总页数】4页(P73-76)【关键词】枸杞;茎段;组织培养【作者】包振华;郭军战;周玮;张杨;何志美;胡丽娟【作者单位】西北农林科技大学林学院,陕西,杨陵,712100;西北农林科技大学林学院,陕西,杨陵,712100;西北农林科技大学林学院,陕西,杨陵,712100;西北农林科技大学林学院,陕西,杨陵,712100;西北农林科技大学林学院,陕西,杨陵,712100;西北农林科技大学林学院,陕西,杨陵,712100【正文语种】中文【中图分类】Q944.6枸杞(Lycium bararum)为茄科多年生落叶灌木,是重要的“药食同源”型植物资源之一,具有抗衰老、抗疲劳、抗肿瘤和降血糖、降血脂等重要功能[1-3]。
枸杞易于遗传操作,可长期栽培生长,遗传性状稳定,全国各地均有栽培,共有7个种和3个变种。
随着我国近年来枸杞药用保健价值进一步开发,栽培面积不断扩大,对枸杞育种工作提出更高的要求。
《宁夏枸杞松散型胚性愈伤组织诱导的研究》

《宁夏枸杞松散型胚性愈伤组织诱导的研究》一、引言宁夏枸杞作为一种重要的中药材,具有丰富的营养价值和药用价值。
近年来,随着生物技术的不断发展,利用组织培养技术对宁夏枸杞进行育种和品质改良成为研究的热点。
其中,胚性愈伤组织的诱导是组织培养技术的关键步骤之一。
本文旨在研究宁夏枸杞松散型胚性愈伤组织的诱导方法及影响其诱导效果的因素,为宁夏枸杞的优良品种培育和快速繁殖提供理论依据和技术支持。
二、材料与方法1. 材料本实验选用的材料为宁夏枸杞的幼嫩叶片。
2. 方法(1)愈伤组织诱导培养基的制备:根据不同配方的培养基组合,分别加入适量植物生长调节剂,如2,4-D、6-BA等。
(2)叶片处理:将宁夏枸杞的幼嫩叶片进行消毒处理后,用无菌水冲洗干净,然后剪成小块。
(3)愈伤组织诱导:将叶片小块接种到不同的培养基上,进行愈伤组织的诱导培养。
(4)观察记录:定期观察记录愈伤组织的生长情况,包括形态、大小、颜色等。
三、实验结果与分析1. 不同培养基对愈伤组织诱导的影响实验结果表明,在含有适当浓度2,4-D和6-BA的培养基上,愈伤组织的诱导率较高。
其中,以MS培养基为基础的培养基组合效果最佳,愈伤组织生长迅速,形态松散,颜色鲜亮。
2. 叶片部位对愈伤组织诱导的影响叶片的不同部位对愈伤组织的诱导效果也有影响。
实验发现,叶片的边缘部位愈伤组织诱导率较高,而叶片的中央部位则较低。
因此,在实验过程中应尽量选择叶片的边缘部位进行接种。
3. 激素浓度对愈伤组织诱导的影响激素浓度是影响愈伤组织诱导的重要因素之一。
实验发现,在一定范围内增加2,4-D和6-BA的浓度可以提高愈伤组织的诱导率。
但是,当激素浓度过高时,愈伤组织的生长会受到抑制,甚至出现畸形。
因此,在实验过程中需要合理控制激素浓度。
四、讨论与结论1. 讨论本实验研究了宁夏枸杞松散型胚性愈伤组织的诱导方法及影响其诱导效果的因素。
实验结果表明,适当浓度的2,4-D和6-BA、选择叶片的边缘部位接种以及合理控制激素浓度等因素对愈伤组织的诱导具有重要影响。
黑果枸杞的组织培养和快速繁殖
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黑果枸杞的组织培养和快速繁殖杨宁;李宜珅;陈霞;石建业【摘要】本研究以黑果枸杞(L ycium ruthenicum )为对象,对其愈伤组织诱导、不定芽分化、诱导生根的培养条件进行筛选,并探究了黑果枸杞实验室试管苗的大田移栽.结果表明,诱导愈伤组织最适培养基为:MS+0.5 mg·L -16‐BA+0.1 mg·L -12,4‐D+10 g·L -1蔗糖,出愈率达88%,愈伤组织生长状态良好;不定芽分化增殖的最适培养基为:MS+0.2 mg·L -16‐BA+10 g·L -1蔗糖,不定芽增殖倍数达5.05倍;诱导生根最适培养基为:MS+0.1 mg·L -1 IBA+5 g·L -1蔗糖,生根率为95%.逐级炼苗后的试管苗大田移栽成活率达90%.%Tissue culture of L ycium ruthenicum is studied to select the best culture condition including callus inducing , redifferentiation of adventitious buds , rooting . And then , the field transplanting of Lycium ruthenicum tube seedlings preliminary explored . The result shows that the best medium of callus inducing is MS supplemented with 0.5 mg·L -1 6‐BA ,0.1 mg·L -1 2 ,4‐D and 10 g·L -1 sucrose , the callus inducing rates is 88% . The best medium of differentiation of adventitious buds is MS supplemented with 0.2 mg·L -1 6‐BA and 10 g·L -1 sucrose , the proliferation times can be 5.05 . The best medium of rooting is MS supplemented with 0.1 mg·L -1 IBA and 5 g·L -1 sucrose , the rooting rates is 95% . The survive rate of field transplanting is 90% .【期刊名称】《西北师范大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2016(052)002【总页数】5页(P84-88)【关键词】黑果枸杞;愈伤组织;诱导;分化;再生植株【作者】杨宁;李宜珅;陈霞;石建业【作者单位】西北师范大学生命科学学院,甘肃兰州 730070;西北师范大学生命科学学院,甘肃兰州 730070;西北师范大学生命科学学院,甘肃兰州 730070;定西市农业科学研究院,甘肃定西 743000【正文语种】中文【中图分类】Q945.51黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr)为茄科枸杞属多年生小灌木,分布于我国陕西北部黄土高原、甘肃、青海、内蒙古、新疆和西藏等地区,中亚、高加索和欧洲等地区均有分布[1].叶肉质、无柄簇生于短枝上.浆果球形,成熟后紫黑色,有甜味,种子褐色肾形,是一种重要的中药材[2],其含油量为5.54%,含有三种脂肪酸,主要以不饱和脂肪酸为主,其中亚油酸含量最高,达71.48%,并富含有17种氨基酸[3].黑果枸杞能益精明目、滋补肝肾,适用于头晕目眩、腰膝酸软、两眼昏花等症状.现代科学研究不仅证实了上述说法,并且认为黑果枸杞可以兴奋大脑神经,降低胆固醇,增强免疫功能,防治癌症,抗衰老和美容,对人体健康非常有益.黑果枸杞提取物可促进细胞免疫功能、增强淋巴细胞的增殖能力、促进肿瘤坏死因子的生成,对白细胞介素Ⅱ有双向调解作用[4].黑果枸杞多糖、黄酮和多酚具有抗氧化活性、对线粒体有保护作用[5].其果实中含有丰富的紫红色素,是珍稀的天然花色苷类色素资源.黑果枸杞是迄今为止发现的原花青素含量最高的天然野生植物,远超蓝莓等植物,而原花青素是最有效的天然水溶性自由基清除剂,其功效是VE的50倍、Vc的20倍[6-7].黑果枸杞在盐渍化和次生盐渍化土壤上大量分布,常构成盐爪爪(Kalidium foliatum)-黑果枸杞盐生植物群落[8].野生黑果枸杞适应性很强,能忍耐38.5 ℃高温,且在-25.6 ℃下无冻害[9];为较耐旱树种,土壤水合补偿点为3.81%[10];是一种典型的储盐植物,也是荒漠化地区特别是盐碱化土地恢复植被的备选植物之一[11].黑果枸杞常规繁殖方法为播种育苗再到扦插育苗,过程繁琐,繁殖速度较慢,而且在雨季容易发生黑果病,影响植株生长,甚至导致其退化[12],因此难以适应市场商品化生产的需求.植物组织培养起源于20世纪初,为植物学的发展起到了十分重要的作用[13].采用植物组织离体培养与快速繁殖方法对黑果枸杞进行研究,建立较为系统的无性快速繁殖体系,以满足中药现代化产业对种苗的大量需求,有望改变传统的生态破坏型育苗模式,保障黑果枸杞苗的品质,但目前有关黑果枸杞组织培养的报道较少,局限于比较简单的培养条件探索,缺乏适用于大规模田间生产的试验依据.本研究以黑果枸杞种子为材料,以Murashige and Skoog(MS)培养基为基本培养基,用组织培养技术培育黑果枸杞试管苗,以无菌苗外植体诱导愈伤组织,在分化培养基上培养不定芽,筛选其最适不定芽增殖培养基,诱导生根并移栽,为黑果枸杞试管苗工厂化生产、幼苗的培育、抗盐碱化机制研究和育种研究奠定基础.在甘肃省民勤县黑果枸杞集中生长的地段,选择生长健壮的黑果枸杞植株20株,采集发育正常、无病虫害、果实饱满的黑果枸杞果实若干,阴干后用无菌水浸泡,去除果皮以及种子外附着的紫黑色素,自然风干后得到黑果枸杞种子,备用.种子萌发率=发芽种子数/接种种子的总数×100%;芽的增殖倍数=芽的增殖总数/接种单茎芽的总数;出愈率=产生的愈伤组织数/接种外植体总数×100%;生根率=生长出根系的植株数/移栽的不定芽数×100%;移栽成活率=移栽成活植株数/移栽总植株数×100%.每组实验均设置3次独立重复实验.黑果枸杞种子经消毒栽入培养基后,约15~20 d种子萌发,生长出第一对真叶.本实验中选取200枚种子分别栽入10个培养基中,计算发芽率.在使用1/2MS+5 g·L-1蔗糖琼脂培养基中,种子萌发187枚,萌发率达93.5%(图1:A).将黑果枸杞叶片剪短移栽至愈伤诱导培养基中,约10 d后叶片变黄,逐渐脱分化形成愈伤组织.实验结果表明,不同激素浓度配比的培养基对黑果枸杞愈伤组织的诱导率有一定程度的影响.由表1可知,当培养基中不存在激素时,出愈率很低;6-BA和2,4-D两种激素适当浓度共同作用可以提高愈伤组织诱导率;而当6-BA和2,4-D浓度高时,愈伤组织受到明显的抑制,未见明显生长变化,且浓度较高的2,4-D会使愈伤组织出现褐化的现象.本研究中以培养基MS+0.1 mg·L-12.4-D+0.5 mg·L-16-BA诱导的愈伤组织出愈率高达88%,愈伤组织生长较好(图1:B). 将生长状态良好的愈伤组织转接至不定芽分化诱导培养基中,愈伤组织逐渐重新分化成不定芽.将长势良好的不定芽植株切成单茎芽继续培养.由表2可知,不同浓度的6-BA对不定芽分化有明显的影响.当6-BA浓度为0.2(mg·L-1)时,黑果枸杞不定芽的增殖状态最好,分化较好的不定芽继续生长成丛生芽,在芽基部形成愈伤组织,愈伤组织继续在此增殖培养基中培养,不断增殖并长出不定芽.将丛生芽切开接入增殖培养基中,已抽出的真叶会再分化出不定芽.增殖获得大量的不定芽可以进一步进行规模化组织培养和工厂化育苗.而高浓度的6-BA会抑制不定芽的生长,甚至导致植物体死亡(图1:C,D).本实验中采用IBA作为植物生根的诱导激素,将生长健壮的不定芽移栽至诱导生根培养基中,不定芽植株开始长高,从植株底部生出具有明显根毛的根,每个植株生出约4~6个.由表3可知,较低浓度IBA对植株有一定的诱导作用.当IBA浓度达到0.2 mg·L-1时,生根率达到95%;而高浓度IBA对植株的生根有明显抑制作用.选取生长良好的具根试管苗,逐步炼苗移栽至实验室沙床,试管苗移栽成活率达95%,之后转移幼苗栽入田间沙质土,成活率达90%,后期田间大规模移栽时,成活率达98%(图1:E,F).黑果枸杞是藏药中的一味常见药材,名曰“旁玛”,而维吾尔族医生常用黑果枸杞的果实及根皮治疗牙龈出血、结石等疾病,食药兼得[15].坊间用作滋补强壮、明目及降压[16].因具有出色的耐旱耐盐耐碱能力,已被用于改善荒漠化,在甘肃沙漠地区广泛种植.黑果枸杞果实中含有大量对人体有益的物质,尤其是原花青素含量巨大,可以作为今后研究原花青素的提取来源.果实中所含色素无毒性,着色能力强,可以替代人工色素.因此,黑果枸杞有巨大的生态价值、经济价值与医药价值.但是,由于黑果枸杞成果时间长,主要来源于野生,产量低、采摘不易,导致黑果枸杞成品价格偏高、工业应用量小、无后续的生产研发,使得这一十分宝贵的自然资源未能完全开发与利用[17].在组织培养中,植物激素是影响组培快繁的重要因素,激素的成份、配比和浓度会对试验结果产生很大的影响,各因素之间最适宜搭配效果是组织培养研究者所关注的问题[18].本实验结果表明,筛选获得黑果枸杞愈伤组织最适诱导培养基为MS+0.5 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-12,4-D+10 g·L-1蔗糖琼脂培养基,在该配比与浓度下诱导出的愈伤组织饱满,生长状态良好.将长势良好的黑果枸杞愈伤组织转移至不定芽分化培养基,在MS+0.2 mg·L-16-BA+10 g·L-1蔗糖琼脂培养基上,不定芽分化速度快,长势良好,有利于扩大培养.黑果枸杞最适宜的生根培养基为MS+0.1 mg·L-1IBA+5 g·L-1蔗糖琼脂培养基,在生根培养基中将蔗糖减半可以使植株适应外源能量供给减少的条件,从而促进试管苗在培养后期利用光能合成其生长所需物质,为植株移栽做准备.由于黑果枸杞植株在生根过程中迅速拔高,致使在移栽中茎过于细弱而折断,实际操作中建议沙床搭建起固定移栽苗作用的小支架.移栽至大田中的黑果枸杞植株生长状态良好,并在大棚中可顺利越冬.本实验研究了黑果枸杞在实验室条件下的组织培养和快速繁育,在短时间内能得到大量黑果枸杞试管苗移栽植株、从实验室走向大棚的过程,为广泛栽培与后期育种等工作的开展提供了实验依据.。
枸杞的繁殖方法
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枸杞的繁殖方法枸杞是多年生茄科药食兼用植物,其主要功效是提高人体免疫力、抗癌益智、延缓衰老,给人类带来美丽和健康,枸杞要怎么繁殖?下面店铺就带大家一起来详细了解下吧。
枸杞的繁殖方法枸杞的繁殖方法有种子繁殖、扦插繁殖、分株繁殖、压条繁殖和组织培养繁殖,其中种子繁殖和扦插繁殖法具有速度快、成活率高的优点,在生产上具有较强的实用性。
1、种子繁殖将种子浸泡后与湿细砂拌匀,保湿催芽,发现有半数种子露白后即可播种。
播种时间以3一4月为宜,保护地可提前至2月份播种。
播种前,深翻苗床并施足基肥,筑畦后按行距40cm左右开浅沟条播。
播种时,将拌匀的种子与细砂均匀撒入沟中,覆土踩实,浇水后用薄膜保湿。
播种后1周左右,枸杞小苗就陆续长出,出苗后应揭去薄膜,喷水保湿,当苗高5cm左右,即可按3一6cm株距进行间苗,间苗过程中应注意拔去劣质苗,并及时拔除杂草,浇水施肥。
2、扦插繁殖在春、秋季节,选取优良单株上1一2年生已木质化的粗壮枝条,剪成长10cm左右、留有2一3个芽的插穗,将其末端浸于300mg/L 的IBA溶液20min(分钟)后即可扦插,扦插深度为插条的1/3一1/2左右,扦插基质为2:1的菜园土和蛙石。
扦插前最好先将基质消毒,不论容器育苗还是苗床育苗,基质厚度要在10cm以上,以利于插穗的生根和长芽。
扦插后浇足水,用尼龙薄膜覆盖密闭,2周后插穗即开始发根长芽。
试验发现,经生根剂处理的插条,生根率可达100%。
扦插后3周左右,枸杞的根和新梢均已生长良好,即可移栽。
枸杞的种植管理技术1、定植一般情况下,枸杞的实生苗和扦插苗均可当年育苗当年定植。
实生苗育苗时间稍长,前期生长比扦插苗慢,生产上也可将实生苗于第2年春季进行定植。
菜用枸杞适宜用宽行密植方式在春季或秋季进行定植,行距30cm,株距10一15cm。
移栽前应施好肥,去除老叶枯枝。
移栽时,尽可能带土移栽,少伤根,以利于种苗成活。
一般情况下,根系发育良好的枸杞幼苗,移栽成活率可达100%。
枸杞组织培养快速繁殖技术
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表 3 壮 苗 培 养 基 外 源 激 素 配 比
Tab. Pr po ton o x ge ss ho m o n sur y 3 o r i fe o ne i r ne i t d
表 4 生 根 培 养 基 外 源 激 素 配 比
4 0% , 4 4 % rs e tv l. 1e p oie ain t s wee 4. 3, e p ciey. e d i g g o h o h e p ce r e p ciey 11 rlfr t i o me r 5, 3 r s e tv l S e ln rwt ft re s e is we e
14 2 继代培 养 ..
继代 培养 以 M S为基本 培养 基 , 加不 同种类 和体 积质 量 的植 物 生长 调节 物 质 ( 表 2 . 常观 察并 添 见 )经 记 录诱导 幼苗分 化 的时 间和芽苗 数量 .
表 1 初 代培 养基 外 源 激 素 配 比
Ta 1 Pr pori n fe g ne i r o n i a y b. o to o xo e ssho m ne i prm r
c lu e a d r pd p o a ain i u e e r s lswee a olws: u t r n a i r p g t n t b . o e ut r sflo MS+ 6BA . 1 5mg ・L +I BA0. 2 mg・L wa s b te rmay c l r d u frL cu c i e s . d MS+ 6BA . etrp i r ut e me i m o y i m h n n e An u 2 5 mg ・L +I BA 2 mg ・L一 0. wa et r sb t e
枸杞新品系0502组织培养快繁技术研究
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宁夏农林科技
2 1 年第 3期 00
枸杞新 品 系 0 0 5 2组织 养快繁技 术研 究 培
吴 建 华 , 锦 秀 王
( 种苗生物工程 国家重点实验室, 宁夏 银川 7 00 ) 5 0 4
摘 要: 试验以枸杞优 良株 系 0 0 5 2的幼嫩 茎段 为外植体材料 , MS培养基 为基本 培养基 , 以 通过不 同激素水平组合 进行 外植体接 种、继代培养 、生根培养等培养基及试管苗移栽基质的筛选,结果表 明:①外植体接种培养基采用 MS 6 B 08 I A1 ; 继代培养基采 用 MS 6 B 0 +AA .; + ~ A .+A . ② 0 + 一 A . I 1 ③复壮培养基采 用 MS 6 B 03 I A .; 生根 5 0 + 一 A .+A 06④
1 . 培 养基 配 方组 合 .2 2
22 继 代培 养 .
将 诱导 出来 的小苗选取 2 0 接种在加有 不同浓度 6 B 、 0株 一 A
IA的培养基上 ,0 A 2 d后观察其生长及分化情况 , 见表 2 。
继代培养中主要 影响指标为分化系数和 芽生长情况。 生长素 10 gL细胞分裂素 05 gL 比例为 2 分化苗生长旺盛 , .m / , .m /, , 少数 发 生玻璃化现 象 , 丛生芽分化 生长状态正常 , 使用浓度和 比例同 比 降低会造成 生长 势弱 , 分化 系数降低 , 用浓度同比增高或 比例 使 加大会造成试管苗 出现不同程度 的玻璃化现象 , 且丛 生芽密集生 长, 有效芽减少。 由表 2可知 , 比为 M + - A .+A 10的培养 配 S 6 B05 IA . 基上苗分化系数较 高 , 且生长情况 最好 。
2 结果与分析
21 外 植体 诱导 .
《宁夏枸杞松散型胚性愈伤组织诱导的研究》

《宁夏枸杞松散型胚性愈伤组织诱导的研究》一、引言宁夏枸杞作为一种重要的中药材,因其富含多种营养成分和药用价值,受到国内外广泛关注。
近年来,随着生物技术的不断发展,植物组织培养技术在宁夏枸杞的种植、育种及药物生产中发挥着越来越重要的作用。
其中,胚性愈伤组织的诱导作为植物组织培养的重要环节,对后续的细胞繁殖、基因编辑及育种等方面具有重大意义。
本研究以宁夏枸杞为研究对象,探讨松散型胚性愈伤组织的诱导方法及条件,旨在为宁夏枸杞的优质高效种植和深加工提供理论依据和技术支持。
二、材料与方法1. 材料准备本实验选用的宁夏枸杞品种为优质高产的“宁杞一号”。
实验所需材料包括种子、培养基等。
其中,种子经过预处理后进行播种。
2. 实验方法(1)外植体的准备与消毒:选用健康的宁夏枸杞叶片为外植体,经过清洗、消毒等处理后备用。
(2)愈伤组织的诱导:将消毒后的外植体接种于不同的培养基上,设置不同的光照条件、温度条件及营养供给方式,观察愈伤组织的形成及生长情况。
(3)胚性愈伤组织的筛选与鉴定:对形成的愈伤组织进行观察、分析,筛选出具有胚性特性的愈伤组织,并进行形态学、生理学及分子生物学等方面的鉴定。
(4)影响因素分析:对影响胚性愈伤组织诱导的因素进行统计分析,包括培养基类型、光照条件、温度条件等。
三、结果与分析1. 愈伤组织的形成与生长通过实验观察发现,不同培养基、光照条件和温度条件下,愈伤组织的形成及生长情况存在显著差异。
在适宜的条件下,愈伤组织生长迅速,形态饱满。
2. 胚性愈伤组织的筛选与鉴定经过筛选和鉴定,成功获得了具有胚性特性的愈伤组织。
这些愈伤组织在形态上表现为细胞紧密排列,具有较高的再生能力。
通过生理学和分子生物学方法进一步证实了其胚性特性。
3. 影响因素分析统计结果显示,培养基类型、光照条件和温度条件对胚性愈伤组织的诱导具有显著影响。
其中,适宜的氮源、磷源及激素配比的培养基对愈伤组织的形成及生长具有重要作用;适宜的光照强度和光照周期有助于提高愈伤组织的生长速度和品质;适宜的温度范围对维持愈伤组织的生长活力具有重要意义。
枸杞组培苗快速繁殖技术
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枸杞组培苗快速繁殖技术郭建蒲【摘要】Plant tissue culture technology is one of effective methods of plant seedling rapid propagation.The rapid propagation technology and its points of Lycium barbarum L. tissue culture were summarized.The hormone free solid culture medium was modified MS culture medium.The composition was MS+acid hydrolyzed casein(300 mg/L)+citric acid(10g/L).The nutrition substrate for transplanting was the mixture of humus,fine sand,decomposed sheep manure and soil,the ratio was1.0:1.0:0.5:0.5 respectively.The survival rate of transplanting could exceed 90% under that condition.%植物组织培养是进行植物苗木快速繁殖的有效方法之一。
对枸杞组培苗的实验室快速繁殖技术及其要点进行了总结。
所用固体培养基是由MS基本培养基经增删有关成分后得到的无激素培养基,其组成:MS+酸水解酪蛋白(300 mg/L)+柠檬酸(10早/L)。
移栽营养基质采用腐殖质、细沙、腐熟羊粪和土混合,其比例为1.0:1.0:0.5:0.5。
组培苗移栽成活率90%以上。
【期刊名称】《现代农业科技》【年(卷),期】2015(000)009【总页数】3页(P108-109,111)【关键词】枸杞;组培苗;快速繁殖技术;营养基质【作者】郭建蒲【作者单位】青海省海西蒙古族藏族自治州种子站,青海德令哈 817099【正文语种】中文【中图分类】Q949.777.7;Q943.1自2008 年开始,海西州委、州人民政府对枸杞产业发展高度重视,截至2014 年底,海西州枸杞种植面积已经达到2.09 万hm2。
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枸杞树形婀娜,叶翠绿,花淡紫,果实鲜 红,是很好的盆景观赏植物,现已有部分枸杞 观赏栽培,但由于其耐寒耐旱不耐涝,所以在 江南多雨多涝地区很难种植宁夏枸杞。
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4
枸杞具有补肾养肝的功效,多吃枸杞还可延年益 寿,缓解长期的腰痛。
嫩叶可作蔬菜。枸杞子被卫生部列为“药食两用”
食 品种,枸杞子可以加工成各种食品、饮料、保健酒、 保健品等等。在煲汤或者煮粥的时候也经常加入枸杞。
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8
初代培养
初代培养时,在MS培养基中加入不同种类的 体积质量的植物生长调节物质(最适的培养基: MS+6-BA 1.5mg/L+IBA 0.2mg/L),外植体接种 后每天观察,并记录愈伤组织和不定芽分化状况。
继代培养
继代培养时,在MS培养基中加入不同种类的 体积质量的植物生长调节物质(最适的培养基: MS+6-BA 0.5mg/L+IBA 1.0mg/L),经常观察并 记录诱导幼苗分化的时间和芽苗数量。
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6
外
胚芽
植
腋芽
体
叶片
的 选
茎段 取
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7
外植体的培养
➢水培法:将灭菌后的种子置于培养皿中,在 23℃条件下进行催芽处理,带种子萌发,苗高约 2~3㎝时取出,剪去下胚轴,胚芽部分作为外植体 备用。
➢组培法:将灭菌后的种子接种到MS培养基上, 在23℃条件下进行处理,带种子萌发,苗高约2~3 ㎝时取出,剪去下胚轴,胚芽部分作为外植体备 用。
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价 “润枸肺杞、枸子生杞甘精色平、而益素润气,,性此滋乃补平…补…之能补肾、 值 药很。多”研究已经证明枸杞籽色素具有提高人体免疫功能、
—预 素—是防《枸和杞抑本色制草素肿纲的瘤主及目要预》活防性动成脉分粥,样具硬有化抗等氧作化用和。作胡为萝维卜
生素A的合成前体等重要的生理功能。
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3
林业价值
由于耐干旱,可生长在沙地,因此可作为水 土保持的灌木,而且由于其耐盐碱,成为盐碱地 开树先锋。
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11
不同外植体使用不同的配置比例
外 植 初代培养 体
继代培养
壮苗培养
生根培养 炼苗培养
腋 芽
MS 6-BA1.0mg/L IBA0.2mg/L
AC0.5g/L
MS 6-BA1.0mg/L IBA1.0mg/L
1/2MS 6-BA0.5mg/L
KT0.5g/L
1/2MS IBA0.1mg/L NAA0.1g/L
用 种子油可制润滑油或食用油,还有加工成保健品, 枸杞子油。
价
值
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5Leabharlann 组培的意义➢采用传统的扦插育苗,因生产周期长、苗木 质量参差不齐等原因,已经不能适应枸杞大生 产的需要。
➢植物组织培养技术来培育、生产枸杞苗,不 仅克服了传统枸杞苗的不足,还具备遗传性状 与母株高度一致、抗逆能力增强、生产能力提 高的特性。
枸杞的植物组织培养
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1
→枸杞的价值
→枸杞组织培养的意义
→枸杞的组织培养
→研究进展
→参考文献
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2
枸杞多糖
“以枸枸杞杞多久糖服的能免疫坚调筋节骨和抗、肿耐瘤寒作用暑的,研轻究最身多不。
药 老,乃中药中之上品。”
甜菜碱
用 —枸—杞《对神脂质农代本谢草或抗经脂》肪肝的作用主要是由于所含的 甜菜碱引起的,它在体内起甲基供应体的作用。
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13
参考文献
➢《枸杞组织培养快速繁殖技术》 2011年 唐晓杰 孙萍 马德宝 ➢《枸杞组培苗快速繁殖技术》 2015年 郭建蒲 ➢《枸杞组织培养关键技术的研究》 2005年 马和平 ➢《中华枸杞叶片离体再生技术初探》 2014年 侯典云 胥华伟等 ➢《枸杞组织培养再生体系优化》 2010年 包振华 郭军战等
腐质土:蛭 石:河沙
=1:1:1
叶
MS
MS
片 6-BA1.0mg/L 6-BA1.0mg/L
2,4-D0.2mg/L NAA0.1mg/L
MS IAA0.2mg/L NAA0.6mg/L
茎 段
MS 6-BA0.5mg/L 2,4-D0.5mg/L
MS 6-BA1.5mg/L NAA0.6mg/L 活性炭0.5g/L
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9
壮苗培养
壮苗培养时,在MS培养基中加入不同种类的 体积质量的植物生长调节物质(最适的培养基: MS+6-BA 0.5mg/L+IBA 0.1mg/L),每3d观察1次, 并记录芽苗生长状况。
生根培养
生根培养时,在1/2MS培养基中加入不同种 类的体积质量的植物生长调节物质(最适的培养 基:1/2MS+IBA 0.1mg/L),经常观察并记录产 生不定根的时间和不定根的数量。
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炼苗移栽
选用移栽基质:腐质土+蛭石+河沙(体积比 为1:1:1),用0.1%高锰酸钾溶液对基质进行消毒 处理。生根组培苗先在室温内出去三角瓶棉塞, 敞口炼苗3d,然后取出组培苗洗净根部黏附的培 养基,将根部浸入800倍液的多菌灵溶液中药浴3 分钟,栽入基质中。
将接种后的培养材料放在培养室内进行培养。 培养条件:温度22~28℃,光照10~12h/d,光照强 度2000~3000lx。
1/2MS IBA0.5mg/L
0.6mg/L
蛭石:珍珠 岩:泥炭
=5:3:2
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研究进展
不同激素对外植体愈伤组织诱导和生长的影响 ——《不同激素对青杞1号枸杞叶片愈伤组织
诱导和生长的影响》
工业化培养 ——《枸杞组织培养工厂化育苗技术研究进展》
新品系研究 ——《枸杞新品系0502组织培养快繁技术研究》